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QUÍMICA ANALÍTICA

Trabajo Práctico de Laboratorio Nº 5

ESPECTROSCOPIA UV-VIS 1- Introducción Los métodos espectroscópicos de análisis se basan en la medición de la radiación electromagnética emitida o absorbida por los analitos. Los métodos espectroscópicos también se clasifican de acuerdo con la región del espectro electromagnético que se utiliza. Estas regiones incluyen los rayos X, ultravioleta, visible, infrarrojo, microondas y radiofrecuencias. Todo analito molecular es capaz de absorber ciertas longitudes de onda características de la radiación electromagnética. En este proceso, la energía de la radiación es transferida temporalmente a la molécula y, como consecuencia, disminuye la intensidad de la radiación. La absorbancia de una solución aumenta conforme disminuye la transmitancia. De acuerdo con la ley de Beer, la absorbancia está relacionada linealmente con la concentración de la especie y con la longitud de la trayectoria de la radiación en el medio absorbente, esta linealidad puede presentar desviaciones lo que representa limitaciones de la ley. La ley de Beer sólo describe adecuadamente el comportamiento de la absorción en soluciones diluidas. Las mediciones de absorción en las regiones visible y ultravioleta del espectro proporcionan información cualitativa y cuantitativa sobre moléculas orgánicas, inorgánicas y bioquímicas. La espectroscopia de absorción molecular ultravioleta/visible se emplea principalmente para el análisis cuantitativo y es uno de los métodos más comunes usados en laboratorios químicos. Los instrumentos que se utilizan para las mediciones con radiación ultravioleta, visible o infrarroja se denominan espectrofotómetros, éstos emplean una rejilla o un prisma monocromador para proporcionar una banda angosta de radiación para las mediciones y como ventaja, la longitud de onda que se usa se puede variar continuamente. Algunos están diseñados sólo para la región visible, otros tienen rangos que van desde 180 a 200nm en el ultravioleta a través de toda la región visible de 750 a 800nm. Unos pocos cubren la región ultravioleta/visible así como la cercana al infrarrojo, aproximadamente a 3000nm. Los equipos actuales pueden determinar los espectros de absorción en forma automática. Se debe indicar tipo de lectura (A o %T), rango de longitudes de onda donde se desea el equipo realice el barrido y solicitar una corrección de base con la solución blanco en el compartimiento de la muestra. En caso de utilizar un equipo de doble haz, la corrección de la línea de base se realiza conjuntamente con las lecturas de absorbancia de las muestras. La determinación espectrofotométrica de compuestos orgánicos que contienen uno o más grupos cromofóricos es potencialmente factible. Varias especies inorgánicas también absorben, iones de los metales de transición y sus complejos son coloridos en solución, por lo que pueden ser determinados por medición espectrofotométrica. Muchos analitos no absorbentes, inorgánicos y orgánicos, se pueden determinar fotométricamente
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2. Probeta de 250ml. La pendiente de la curva de calibración o de la ecuación de regresión es igual al producto de la absortividad y la longitud de la trayectoria de la radiación. Elaborar una curva de calibración por el método de los estándares externos. Solución de dicromato de potasio 0. Agua destilada.8. ƒ ƒ 3.1. Vaso de precipitado. 4. 4.9.Material 4. Papel absorbente. 2 de 6 . 2. En la mayoría de los métodos espectrofotométricos se hace una calibración con el método de los estándares externos.5. 4. Solución de ácido sulfúrico al 15% v/v. un procedimiento para obtener el factor de proporcionalidad entre absorbancia y concentración en las mismas condiciones y con los mismos instrumentos empleados en las muestras. 4.2. para ello se prepara una serie de soluciones patrón del analito.7.3. El método de los estándares externos es.10-4 M 3.6. Matraz de 50ml. 4. 10-3 M y 1. las formas de operación práctica de los equipos.hÇ|äxÜá|wtw atv|ÉÇtÄ wx _t ctàtzÉÇ|t ftÇ ]âtÇ UÉávÉ QUÍMICA ANALÍTICA Trabajo Práctico de Laboratorio Nº 5 haciéndolos reaccionar con reactivos cromofóricos para producir productos que absorben fuertemente en las regiones ultravioleta y visibles. las características de absorción de la luz por las soluciones y sus aplicaciones cuantitativas.4.Reactivos 3.01 M y 6.3. Solución de permanganato de potasio 3. Matraz de 1000ml 4.10.1. se mide su absorbancia y se construye una curva de calibración de absorbancia frente a concentración.10-4 M 3.8. Matraz de 100ml. por consiguiente. 4. Par de celdas para muestras de 10ml. Es posible determinar las concentraciones de dos componentes individuales en una mezcla en forma simultánea realizando mediciones espectrofotométricas a dos longitudes de onda. 4. 3.Objetivos ƒ Ilustrar sobre los principios de la espectrofotometría. o se determina la ecuación de regresión lineal. 4. Embudo. Realizar un análisis de mezclas para la determinación de la concentración de cada componente de una mezcla. 4.4. Varilla de vidrio. Espectrofotómetro DR/2010 (intervalo de longitud de onda 400-900nm).

5.1. 5. 5. modo lectura de ABSORBANCIA. Llevar a matraz de 100ml y enrazar. 5.10-3M de permanganato de potasio: pesar 0.1. llevar a matraz de 1000ml y enrazar con agua destilada.6. Colocar la celda en el portacelda. Con papel absorbente limpiar y secar la superficie externa de la celda. Para cada nuevo valor de longitud de onda se debe ajustar el 0 de Absorbancia según lo indicado anteriormente. en este caso agua destilada.01M de dicromato de potasio: pesar 0. Preparación de la solución 3. tapar con el capuchón y leer en el equipo (apretando la tecla read).1. 5. Usar la perilla situada en el costado del equipo.2. 5.2.hÇ|äxÜá|wtw atv|ÉÇtÄ wx _t ctàtzÉÇ|t ftÇ ]âtÇ UÉávÉ QUÍMICA ANALÍTICA Trabajo Práctico de Laboratorio Nº 5 5. hasta la marca correspondiente a 10ml.5. Determinación de espectros de absorción. Colocar la solución de K2Cr2O7 6.2. Preparación de la solución 0.2. 5.4. 5.2.2. Colocar la solución blanco o cero en una celda.2. * Repetir el mismo procedimiento para una solución de KMnO4 1. Ajustar el aparato a cero (apretando la tecla zero). 5. Ajustar la longitud de onda a 340nm. Registrar el valor de absorbancia indicado en el visor una vez que la lectura se ha estabilizado. Preparación de soluciones.2.2942g de la droga y disolver con agua destilada.2. Llevar a matraz de 100ml y enrazar. El quipo pide que se ingrese el número de programa (apretar la tecla 0 y luego enter) 5. Encender el espectrofotómetro.10-4 M en otra celda hasta la marca correspondiente a 10ml. 5. Longitudes de onda: 340 – 350 – 370 – 380 – 390 – 400 – 410 – 420 – 425 – 430 –435 – 440 – 445 – 450 – 455 – 460 – 465 – 470 – 475 – 480 – 490 – 500 – 510 – 520 – 525 – 530 – 535 – 540 – 545 – 550 – 555 – 560 – 570 – 580 – 590 – 600 – 610 – 620 – 630nm.1. Preparación de la solución de ácido sulfúrico al 15%: medir 150ml del ácido.2. El equipo mostrará en la pantalla una lectura de 0 de absorbancia.3. 5.2. 3 de 6 .0474g de la droga y disolver con agua destilada. Es importante aguardar el tiempo necesario para permitir la estabilización de la fuente de luz.2.9. siempre se debe usar la misma cubeta y en la misma posición.8. 5.10-4 M.7. Seleccionar las siguientes longitudes de onda y determinar los valores de Absorbancia.1.10 Finalmente retirar la celda y apagar el equipo.3.Procedimiento 5.2.8. Con papel absorbente limpiar y secar la superficie externa de la celda.1. Seleccionar el programa 0 (cero). automáticamente el equipo realizará una serie de controles o chequeos de inicialización. 5. Colocar la celda en el portacelda del equipo y tapar con el capuchón de protección de la luz.

000 0.016 0.030 0.664 0.730 0.149 0.252 0.177 0.022 0.573 0.149 0.019 0.016 0.117 1.500 0.017 0.hÇ|äxÜá|wtw atv|ÉÇtÄ wx _t ctàtzÉÇ|t ftÇ ]âtÇ UÉávÉ QUÍMICA ANALÍTICA Trabajo Práctico de Laboratorio Nº 5 Tabla 1: Absorbancias para las soluciones de KMNO4 y K2Cr2O7 a distintas longitudes de onda Long onda 400 410 420 425 430 435 440 445 450 455 460 465 470 475 480 490 500 K2Cr2O7 0.336 0.064 1.683 0.900 0.709 0.210 0.609 0.400 0.182 0.100 1.215 0.025 0.610 0.132 0.037 0.016 0.164 1.847 0.017 0.016 0.132 0.432 0.706 0.000 400 425 450 475 500 525 550 575 600 625 K2Cr2O7 KMnO4 Long de onda (nm) 4 de 6 .012 0.200 1.165 1.742 Long onda 510 520 525 530 535 540 545 550 555 560 570 580 590 600 610 620 630 K2Cr2O7 0.151 1.523 0.129 0.370 0.227 0.094 5.165 0.100 0.060 0.300 0.188 0.014 KMnO4 0.014 0.407 0. de absorbancia vs.478 0.642 0.133 0.058 1. longitud de onda para las soluciones de KMnO4 y K2Cr2O7. Representación. en un mismo gráfico.102 0.299 0.690 0.3.153 KMnO4 0.098 0.800 0.581 0.113 0.046 0.14 0.200 0.324 0.700 Abs 0. Gráfico 1: Espectros de absorción para las soluciones de KMNO4 y K2Cr2O7 a distintas longitudes de onda.033 0.352 0.92 1. 1.129 0.600 0.873 0.

comenzando por la de menor concentración.4.5. 5. 6. 5.4. 5. 3 y 4ml de solución de permanganato de potasio 3.4.+ εMnO4.01M y llevar a 50.) para la segunda longitud de onda seleccionada (410nm).+ εMnO4.λ1 x b x CMnO4A λ2 = εCr2O72-λ2 x b x CCr2O72 .5. Obtener las representaciones de Beer para ambas series de soluciones y para las dos longitudes de onda anteriormente seleccionadas.5 Determinar la concentración de cada componente en la solución incógnita según la siguiente ecuación: A λ1 = εCr2O72-λ1 x b x CCr2O72. 5.5. Del gráfico de absorbancia vs concentración.5.3. 5. Medir la absorbancia de las soluciones correspondientes. 5. Calcular la concentración final de permanganato y dicromato para todas las diluciones.4. calcular los valores de absortividad molar (ε) de cada una de las especies a ambas longitudes de onda.7. Si es necesario. 4 y 6ml de solución de dicromato de potasio 0. 5. 6.4 y 5.1. Seleccionar la primera longitud de onda elegida (520nm).5.2. 10-3 M y llevar a 50. Estimar la mejor recta de acuerdo a los valores medidos.λ2 x b x CMnO4- 5 de 6 . descartar aquellos puntos que se alejen de la linealidad ocasionando desviaciones a la ley de Lambert – Beer. Registrar los valores obtenidos.5.4.6.1.hÇ|äxÜá|wtw atv|ÉÇtÄ wx _t ctàtzÉÇ|t ftÇ ]âtÇ UÉávÉ QUÍMICA ANALÍTICA Trabajo Práctico de Laboratorio Nº 5 5. 6.5. 5.0ml con ácido sulfúrico al 15 % en un matraz aforado.5. 6.5.2.Tratamiento de los resultados 6. Repetir el procedimiento (puntos 5. 5.0ml con ácido sulfúrico al 15 % en un matraz aforado.3 Observar el intervalo dinámico lineal de trabajo. Selección de las longitudes de onda de trabajo. Observar ambos espectros de absorción y seleccionar dos longitudes de onda con valores de absorbancia elevados para el permanganato o para el dicromato y con mínimas interferencias del otro compuesto. 6. Determinación de las concentraciones de dicromato y permanganato en una mezcla. Preparación de diluciones: a) Tomar respectivamente 3.5.1. Ajustar el 0 de absorbancia utilizando la solución de H2SO4 15% como blanco.5. b) Tomar respectivamente 2. Representar gráficamente absorbancia (en ordenadas) vs concentración.

Realice las 4 representaciones de Beer e indique los coeficientes de extinción para cada compuesto a cada longitud de onda.2. detector. rango útil de longitudes de onda. ancho de banda. Indique si descartó alguna lectura.3. etc.Redacción del informe 7. 7. 6 de 6 . Indique las características técnicas del equipo utilizado como tipo de lámpara. 7.hÇ|äxÜá|wtw atv|ÉÇtÄ wx _t ctàtzÉÇ|t ftÇ ]âtÇ UÉávÉ QUÍMICA ANALÍTICA Trabajo Práctico de Laboratorio Nº 5 7. Calcule las concentraciones de cada compuesto en su muestra.1. tipo de selector de longitudes de onda.