BIOMETRIA HEMATICA SERIE ROJA

INTRODUCCION En el examen de citometria hematica se identificaran los distintos valores de una biometra hematica de serie roja como son: Hemoglobina (Hb) Hematocrito(Hto) Concentracin media de hemoglobina (CMHb) Velocidad de sedimentacin globular (V.S.G.) Velocidad globular media (V.G.M.) Conteo de eritrocitos Conteo de leucocitos Conteo de plaquetas Conteo de reticulositos

OBJETIVO: El objetivo de esta serie de estudios es conocer el estado del paciente mediante la utilizacin de la biometra hematica completa sin cometer ningn error al realizarlas. HEMOGLOBINA (Hb) La hemoglobina es la sustancia de la sangre contenida en el interior de los eritrocitos y es la que se encarga de transportar el oxigeno.

MATERIAL Cubetas para espectrofotmetro Pipeta de shaly Tubos de ensayo Espectrofotmetro Gradilla Boquilla

REACTIVOS Liquido de cianometahemoglobina

TECNICA Colocar en un tubo de ensayo 5 ml de cianometahemoglobina

Con ayuda de una boquilla se aspira sangre fresca con una pipeta de shaly hasta la marca de 20. Se vierte las sangre de la pipeta de shaly en el tubo de ensayo, se mezcla y se deja reposar durante 5 minutos

Esta se va a colocar en una cubeta para espectrofotmetro se mide la observancia de la muestra ajustando a cero con el blanco (reactivo de cian metahemoglobina o agua destilada) y se mide a 540 nm.

El resultdo se multiplica por 33, las unidades se miden en gr/dl

HEMATOCRITO (Hto) Es el tanto % total de la sangre que se encuentra en el paquete globular el cual se forma al centrifugar eritrocitos y plaquetas.

MATERIAL Tubos de wintrobe Pipeta Pasteur Centrifugadora MATERIAL BIOLOGICO Sangre con EDTA TECNICA Con la pipeta Pasteur se pone sangre en un tubo de wintrobe, hasta la marca de 10 empezando de abajo hacia arriba.

Despus de centrifugar la muestra a 3500 revoluciones por 15 min. Ya centrifugada la muestra se leen los resultados de abajo hacia arriba.

VELOCIDAD DE CEDIMENTACION GLOBULAR Se utiliza para ver la cantidad de defensas que tiene un individuo, nos sirve para constatar si se esta formando bien su sistema inmunolgico. VARONES <10mm/hr Rango MUJERES<15mm/hr MATERIAL Tubos wintrobe Pipetas Pasteur MATERIAL BIOLOGICO Sangre con EDTA

TECNICA Se llena un tubo de wintrobe hasta la marca de de 10, con la ayuda de la pipeta Pasteur

 Se tapa la boca del tubo ( se loco el tubo en la pared y se deja reposar con por un hora ). Se leen los resultados de arriba hacia abajo y as se obtiene la velocidad de sedimentacin globular.

CONSENTRACION MEDIA DE HEMOGLOBINA (C.M.H.b) La concentracin media de hemoglobina es un volumen determinado de eritrocitos. El resultado se obtiene de manera aritmtica, dividiendo la hemoglobina entre el hematocrito y multiplicando por 100. Hb/Hto x 100 VOLUMEN GLOBULAR MEDIO (V.G.M) Es el tamao de los eritrocitos. Se saca aritmticamente dividiendo el hematocrito entre hematocrito mas 4 y se multiplica por 100 (Hto/Hto + 4) x 100

CUENTA DE LEUCOSITOS Los leucositos son las clulas blancas de la sangre y son las encargadas de la respuesta imunitaria de nuestro hacia agentes extraos. Rango de 5 a 10 mil/UL MATERIAL Pipeta de toma para glbulos blancos Microscopio compuesto Cambara de newbawer REACTIVOS Liquido de leucocitos: este liquido de disolver los hemates para que se oscurezcan los leucocitos. El mas sencillo es una solucin de Acido Actico al 2%, el ms satisfactorio es, Acido Actico glacial 2 ml, solucin acuosa de violeta de gimsiana 1 ml y 100 ml de agua destilada. TECNICA Con la pipeta se aspira hasta la marca de 0.5 con sangre. Ahora con el liquido para leucocitos se llena hasta la marca de 11

Se tapan los extremos de la pipeta con los dedos y se agita durante 30 segundos y se deja reposar por 5 minutos.

 Se desechan las 3 primera gotas y se coloca una gota en cada extremo de la cambara de newbawer.

El recuento se realiza en los cuadrantes para leucocitos, y se suman los 4 cuadrantes de leucocitos y el resultado se multiplica por 50.

CUENTA DE ERITROCITOS Los eritrocitos son las clulas de la sangre que poseen el pigmento llamado hemoglobina. Rango 4.2 a 5.6 millones /UL MATERIAL Pipeta de globulas rojos Microscopio compuesto Cambara de newbawer Boquilla

REACTIVO: LIQUIDO PARA ERITROCITOS: el liquido de dilucin debe ser isotnico para evitar la lisis y estructura dentada de los eritrocitos. Debe contener un fijador para preservar la forma de las clulas y prevenir la aglutinacin y la autolisis.

TECNICA Se llena las pipeta de glbulos rojos hasta la marca de 0.5 Ahora para el liquido para eritrocitos se llena hasta la marca de 101

Se tapan los extremos de la pipeta con los dedos y se agita durante 30 segundos y se deja reposar durante 5 minutos.

Se tiran las 3 primeras gotas y se coloca una gota en cada extremo de la cambara newbawer. El recuento se realizara en los cuadrantes de eritrocitos y el resultado se multiplicara por 1, 000,000.

CONTEO DE PLAQUETAS Las plaquetas son el elemento de la sangre que intervienen en el proceso de coagulacin de la sangre.

RANGO 150 a 450 mil/UL ALARMA <25 mil/UL MATERIAL Pipeta de glbulos rojos Microscopio compuesto Cambara de newbawer Boquilla

REACTIVO Liquido plaquetaro: solucin de oxalato amoniaco al 1% con agua destilada 100 ml. Los frascos almacenadores de mantendrn en refrigerador. TECNICA Se llena las pipeta de glbulos rojos hasta la marca de 0.5. Ahora para el lquido para eritrocitos se llena hasta la marca de 101. Se tapan los extremos de la pipeta con los dedos y se agita durante 30 segundos

 Se deja reposar durante 5 minutos Y se tiran las 3 primeras gotas. Se coloca una gota en cada extremo de la cambara newbawer.

El recuento se realizara en los cuadrantes para plaquetas y el resultado se multiplicara por mil.

RETICULOSITOS La reticulacion es una caracterstica de los eritrocitos jvenes y el mismo numero de reticulositos en la sangre circularmente es probablemente el ndice mayor y mas fcilmente disponible de la efectividad de la eritropoyetina. MATERIAL Pipeta Pasteur Microscopio Portaobjetos Tubo de ensayo

REACTIVO: Azul de cresil brillante, 1 gr se disuelve en 100 ml de solucin salina citratada. TECNICA Colocar 3 gotas de colorante en un tubo de ensayo, aadir 3 gotas de sangre y mezclar e incubar durante 15 minutos de 20-37C, mezclar bien la suspensin, efectuar 2 extenciones y secar al aire libre.

Se observa a 100x. El RNA precipitado es reticular o granuloso y se tie de un color intensamente azul, los eritrocitos los eritrositos ya tienen de por si un color azul palido o verdoso.