Tincin de Giemsa

La tincin de Giemsa es un mtodo habitual para el examen de frotis sanguneos, cortes histolgicos y otro tipo de muestras biolgicas. Este mtodo tiene utilidad sobre todo para poner de manifiesto las ricketsias localizadas dentro de la clula huspedes. La coloracin de giemsa se emplea tambin para teir frotis de sangre en el examen para protozoos. Se puede emplear, como variaciones, otras coloraciones como es la tcnica de citoconcentracin para parsitos sanguneos, la cual tiene un bajo coste y ofrece la posibilidad de aislar e identificar en el mismo sedimento el parsito principal, con excepcin de los trofozoitos jvenes y el plasmodium falciparum. Tambin se emplea la modificacin de Wright. Este mtodo de tincin permite tambin la tincin diferencial de zonas con un alto contenido de ADN, y concretamente de uniones A-T. Esto permite distinguir perfectamente en microscopio ptico el ncleo celular, los cromosomas durante la mitosis, y en algunos casos, incluso el ADN mitocondrial (kinetoplasto de algunos protozoos, como Trypanosoma). Los cromosomas pueden ser tratados con varios compuestos qumicos que producen la alternancia de bandas claras y oscuras a lo largo de los cromosomas. Cada cromosoma tiene un patrn de bandas caracterstico, permitiendo que aberraciones estructurales como borrados, duplicaciones o sutiles translocaciones sean detectadas, al igual que permite la identificacin de cromosomas marcadores.

Contenido
1 Fundamento 2 Preparacin de la muestra 3 Procedimiento 4 Resultados 5 Variantes 6 Bibliografa 7 Enlaces externos

Fundamento

Estos organismos adquieren una coloracin diferencial y se ven dentro del citoplasma de la clula husped. La tcnica de Giemsa est formada por varios colorantes: los tintes neutros utilizados combinan el azul de metileno como tinte bsico y la eosina como tinte cido, lo que da una amplia gama de colores. El azul de metileno es un colorante metacromtico, de ah que muchas estructuras se tian de prpura y no de azul. El pH de la solucin de coloracin es crtico y se debe ajustar idealmente segn diversos fijadores. La gama del pH debe estar entre 6.4 y 6.9.

Preparacin de la muestra

Para muestras histolgicas, los mejores resultados se obtienen en muestras fijadas con formol, incluidas en parafina y cortadas entre 3 y 6 micras.

Procedimiento
1.Desparafinar e hidratar. 2.Aplicar solucin de trabajo de Giemsa durante 10 minutos. 3.Deshidratar con alcohol absoluto, 3 cambios. 4.Aclarar con xilol, 3 cambios.

Resultados
1.Citoplasma: rosa 2.Ncleos: azul 3.Eritrocitos: rosa - naranja 4.Grnulos de las clulas cebadas: prpura 5.Bacterias: azul 6.Parsitos: azul

Variantes

Esta tcnica presenta multitud de variantes, pero las diferencias se basan en el empleo o no de diferenciador, el tiempo de permanencia del colorante, el uso de alcoholes en diferente graduacin, etc.