MICROBIOLOGA II TEMA 1: MORFOLOGA, BACTERIANA GIANFRANCO CORBASCIO 1. BACTERIAS.

GENERALIDADES:

FISIOLOGA

GENTICA

Microorganismos unicelulares. Tamao microscpico de micrmetros (0,2 y 5 m). Diversas formas incluyen: esferas (cocos), barras (bacilos) y hlices (espirilos). Las bacterias son procariotas y, por lo tanto, a diferencia de las clulas eucariotas, no tienen el ncleo definido ni presentan, en general, orgnulos membranosos internos. En su lugar, presentan un nucleoide con material gentico. Poseen una pared celular (no presente en clulas eucariotas) compuesta de Peptidoglicano. Algunas bacterias disponen de flagelo u otros sistemas de desplazamiento, que en ciertos casos les confieren mayor capacidad patognica. Son los organismos ms abundantes del ecosistema. Son ubicuas, se encuentran en todos los hbitats terrestres y acuticos Tienen una distribucin geogrfica mundial. Permanecen en el ambiente en un estado de latencia hasta que llegan a un sustrato, donde se van a encontrar disponibles todos los componentes nutricionales bsicos para iniciar su ciclo de replicacin. No todas las bacterias tienen efectos nocivos, el 90% de las bacterias del ambiente son benficas. A nivel del cuerpo existe una microbiota normal necesaria para la metabolizacin e incorporacin de sustancias que son fundamentales para la maquinaria celular. Las bacterias son imprescindibles para el reciclaje de los elementos, pues muchos pasos importantes de los ciclos biogeoqumicos dependen de stas.

2. MORFOLOGA BACTERIANA: Amplia variedad de tamaos y formas. Tamao 10 veces menor que el de clulas eucariotas (0,5 5 m). Existe el pleomorfismo (una misma cepa bacteriana adaptando distintas formas). La morfologa constituye un aspecto fundamental en la taxonoma bacteriana.

Formas: Cocos (del griego kkkos, grano): de forma esfrica. Segn los planos en los que se produzca la divisin y la incapacidad de las clulas para separarse completamente pueden originarse:

Coco o monococo: forma esfrica. Diplococo: cocos en grupos de dos. Cuando la divisin se produce en un solo plano y quedan dos elementos. Por ejemplo, Neumococos.

Estreptococo: cocos en cadenas (en nmero de seis segn el profesor). Si la divisin tiene lugar en un plano pero en forma sucesiva se originan cadenetas. Ttrada: cocos en grupos de cuatro. Si la divisin se produce en dos planos. Sarcina: agregacin de cocos con morfologa cuboidea. Si la divisin afecta los tres planos. Estafilococo: cocos en agrupaciones irregulares o en racimo.

Bacilo (del latn baculus, varilla): en forma de bastoncillo. Los bacilos tambin pueden quedar agrupados en forma caracterstica: Diplobacilos: agrupaciones en pareja. Estreptobacilos: agrupaciones en cadena. En empalizada: cuando los bacilos se presentan unidos uno al lado del otro segn su eje mayor. Cocobacilos: microorganismos de apariencia intermedia por su tamao y morfologa.

Formas helicoidales: Vibrio: ligeramente curvados y en forma de coma, juda o cacahuete. Espirilo: en forma helicoidal rgida o en forma de tirabuzn. Espiroqueta: en forma de tirabuzn (helicoidal flexible).

NOTA: La morfologa slo permite identificar el grupo no el agente etiolgico (p. ej. Estafilococo aureus); permitiendo la aplicacin de tratamiento emprico. 3. ESTRUCTURA BACTERIANA Las bacterias constituyen un grupo heterogneo, estn rodeadas por una serie de envolturas y apndices; y las estructuras (orgnulos) pueden ser externas o internas.

3.1 CPSULA BACTERIANA Estructura ms externa, presente en algunas bacterias. Es una capa gelatinosa que recubre la bacteria. Es un polmero constituido principalmente de glicoprotenas, polialcoholes y aminoazcares, polisacridos.

Propiedades: Adhesin a clulas hermanas. Adhesin a sustratos inertes o vivos. Interviene en la adherencia de las bacterias a los tejidos humanos, paso inicial muy importante para causar una infeccin. Proteccin contra agentes antibacterianos. Se relaciona con la capacidad de virulencia de algunos microorganismos (grado de causar enfermedad), ya que limita la capacidad de los fagocitos para englobar la

bacteria. Las variantes de las bacterias capsuladas que han perdido la capacidad para sintetizar la cpsula no son patognicas. Se relaciona con el proceso de fagocitosis, al participar en la sealizacin hacia el interior de la clula cuando sta intenta ser fagocitada. Se emplea para la clasificacin taxonmica bsica del agente etiolgico. Por ejemplo, la visualizacin microscpica del neumococo se reporta como diplococos encapsulados. Antigenicidad: el material capsular estimula la formacin de anticuerpos.

3.2 PARED CELULAR Es el componente externo ms comn de las bacterias. Algunas bacterias tienen otros componentes caractersticos ms externos a la pared celular, como la cpsula, los flagelos y los pili; estos componentes son menos comunes. Es una estructura multicapa situada por fuera de la membrana citoplsmica. Est formada por una capa interna de pptidoglicano y por una capa externa que puede variar en grosor y en composicin qumica segn el tipo de bacteria. Su principal constituyente es el peptidoglicano o murena el cual es un copolmero formado por una secuencia alternante de N-acetil-glucosamina y el cido N-acetilmurmico unidos mediante enlaces -1,4. La cadena es recta y no ramificada, brindando gran resistencia a la pared celular. A diferencia de las paredes celulares de las plantas y hongos que estn formadas por celulosa y quitina, respectivamente. El peptidoglicano proporciona soporte estructural y contribuye al mantenimiento de la forma caracterstica de la clula. Funcin de proteccin.

DIFERENCIAS DE LA PARED CELULAR DE BACTERIAS GRAMPOSITIVAS Y GRAMNEGATIVAS Identificacin preliminar que orienta la morfologa de la clula bacteriana. Bacterias grampositivas: son predominantes en el ambiente Bacterias gramnegativas: microbiota establecida en el hombre. Su principal clasificacin est orientada hacia la composicin de la pared celular. En las bacterias grampositivas se encuentra una gran pared celular que abarca el 90%. Algunas bacterias grampositivas tienen fibras y cido teicoicos (fibras de glicerolfosfato o ribitol fosfato relacionadas a la induccin de shock sptico) que sobresalen de la pared celular, mientras que las bacterias gramnegativas no las tienen. Las bacterias gramnegativas tiene una capa externa compleja que contiene lipolisacridos, lipoprotenas y fosfolpidos. Entre la capa de membrana externa y la membrana citoplsmica se encuentra el espacio periplsmico, en el que, en ciertas especies bacterianas, se encuentran las -lactamasas que degradan la penicilina y otros antibiticos -lactmicos.

En las bacterias gramnegativas, la pared celular contiene un lipolisacrido denominado endotoxina (Lipopolisacrido LPS). En las bacterias gramnegativas se encuentra una delgada pared celular, seguida de una membrana externa con porinas, las cuales son protenas, que juegan un papel muy importante en la regulacin del trnsito de molculas hidrfilas pequeas al interior de la clula y que hacen a las bacterias sensibles al calor.}

3.3 MEMBRANA CITOPLASMTICA En el interior de la capa de peptidoglicano de la pared celular se encuentra la membrana citoplsmica, compuesta por una bicapa lpidica de fosfolpidos de apariencia microscpica similar a la membrana celular de las clulas eucariotas. Funcin de selectividad de los componentes nutricionales (a diferencia de la funcin de proteccin de la membrana de las clulas eucariotas). Rodea el citoplasma de la clula Bicapa fosfolipdica 50-70% Protenas 20-35% Lpidos

Funciones: Barrera de semipermeabilidad (Selectividad) Transporte activo de molculas al interior de la clula Enzimas respiratorias Remocin de desechos Biosntesis (sntesis de precursores de la pared celular) Sntesis de DNA Sntesis quimiotctico Sitio de accin de agentes antimicrobianos Secrecin de enzimas y toxinas

Mesosoma: Es una invaginacin de la membrana citoplsmica importante durante la divisin celular, ya que funciona como origen del septo transversal que divide la clula por la mitad y tambin porque une el DNA que ser el material gentico de cada una de las clulas hijas. 3.4 CITOPLASMA BACTERIANO El citoplasma bacteriano es la masa de materia viva delimitada por la membrana citoplsmica. En su interior se albergan: Cuerpos nucleares (nucleoide) Plsmidos (no en todas las cepas bacterianas) Ribosomas Inclusiones (no en todas) Orgnulos (no en todas)

Al igual que en los dems seres vivos, el citoplasma es un sistema coloidal cuya fase dispersante es agua junto con diversas sustancias en solucin (citosol), y cuya fase dispersa est constituida por macromolculas y conjuntos supramoleculares (partculas submicroscpicas). La viscosidad es mayor que la del citoplasma eucaritico, estando desprovisto de corrientes citoplsmicas. 3.5 MATERIAL GENTICO: NUCLEOIDE Es el rea del citoplasma en la que se sita el ADN. El nucleoide contiene el cromosoma junto con las protenas asociadas y ARN. El ADN procariota es una nica molcula circular que contiene alrededor de 2000 genes. El nucleoide con ADN y ARN, no contiene ni membrana nuclear, ni nuclolos, ni haz mittico, ni histonas y el material gentico se encuentra desorganizado, superenrollado, dispuesto de manera circular y en contacto directo con el citoplasma. El ADN es el material gentico de los procariotas, al igual que del resto de seres vivos (celulares). Dicho ADN est contenido en una regin concreta del citoplasma, denominada nucleoide, en la mayora de los casos sin estar separado por membrana. El genoma es el conjunto de genes y secuencias de ADN de un organismo. En el caso de bacterias, el elemento obligatorio del genoma es el cromosoma, aunque es frecuente encontrar unidades de replicacin autnomas llamadas plsmidos, que son dispensables (si se pierden, la bacteria sigue siendo viable). Las bacterias son organismos haploides: poseen un solo cromosoma. Sin embargo, cuando las clulas bacterianas se encuentran en crecimiento activo, y debido al desfase de la divisin celular respecto de la replicacin, cada individuo puede albergar varias copias de ese cromosoma.

3.6 PLSMIDOS

Elementos genticos extracromosomales con capacidad de replicacin autnoma Son molculas de ADN de cadena doble y circulares. En todos los casos son ADN circular, superenrollado y covalentemente cerrado. Algunos plsmidos poseen, adems, la capacidad de integrarse reversiblemente en el cromosoma bacteriano: en esta situacin se replican junto con el cromosoma (bajo el control de ste), y reciben el nombre de episomas. Se encuentran plsmidos tanto en bacterias grampositivas como gramnegativas y en una misma clula pueden coexistir distintos tipos de plsmidos: Conjugativos (autotransmisibles): Participan en proceso de conjugacin bacteriana, ya que contienen gran cantidad de genes responsables de la sntesis del pili sexual y de las enzimas necesarias para su transferencia. Estn presentes en pocas copias por clulas (de una a tres). Plsmidos no conjugativos o no transmisibles, ya que no contienen los genes de transferencia, suelen estar presentes en muchas copias por clula. Dentro de esta categora existe un subgrupo, el de los plsmidos movilizables: son aquellos no autotransmisibles que pueden ser transferidos por la accin de un plsmido conjugativo coexistente en la misma bacteria.

Los plsmidos contienen genes para las funciones y estructuras siguientes, todas ellas con importancia mdica: a) b) c) d) e) Resistencia a antibiticos. Resistencia a metales pesados. Resistencia a la radiacin ultravioleta. Fimbrias que median la adherencia a las clulas epiteliales. Exotoxinas, incluyendo algunas enterotoxinas.

Le otorgan a la bacteria una capacidad de resistencia frente a factores lesivos fsicoqumicos, biolgicos, cambios de pH, antibiticos, antimicrobianos. 3.7 RIBOSOMAS Complejos supramoleculares cuya funcin consiste en la sntesis de protenas. Los ribosomas bacterianos tienen un tamao de 70S, con las subunidades 50S y 30S, en cambio los ribosomas eucariotas tienen un tamao de 80S, con las subunidades 60S y 40S.

3.8 INCLUSIONES Y ORGNULOS PROCARIOTAS Acmulos de sustancias orgnicas o inorgnicas Rodeadas o no de una envoltura protenica Reserva de fuentes de carbono y nitrgeno (inclusiones orgnicas) o, azufre, fsforo (inclusiones inorgnicas). La bacteria obtiene los componentes nutricionales de estas estructuras que le permiten mantenerse viables durante la fase de latencia.

3.9 PILI O FIMBRIAS Los pili son estructuras pequeas filamentosas que se extienden por la superficie de la clula. Son ms cortos y rectos que los flagelos y estn compuestos por subunidades de protena, la pilina, que se organiza formando cadenas en forma de hlice. Corresponden a evaginaciones de la membrana citoplasmtica, a travs de los poros de la pared celular y la cpsula que asoman al exterior. Presentes en algunas bacterias provistas de elementos extracromosomales. Los pili se relacionan con el plsmido, adems de la capacidad de adherencia de la bacteria. Visibles al microscopio electrnico. Presentes en clulas mviles y no mviles. Se encuentran mayoritariamente en las bacterias gramnegativas. Los pili tienen dos funciones importantes: a) Intervienen en la unin de la bacteria a receptores especficos de la superficie de las clulas humanas. Este paso es necesario en ciertos microorganismos para que se inicie la infeccin. b) El pili sexual, es un tipo especializado de pili que permite la transferencia horizontal de genes de una bacteria donadora a una bacteria receptora, en un proceso conocido como CONJUGACIN BACTERIANA. La conjugacin consiste en el apareamiento de dos clulas bacterianas durante el cual se produce una transferencia de DNA de la clula donadora a la clula receptora. La clula donadora comparte fragmentos de material gentico por el puente de pilina, transfiriendo el plsmido para otorgar resistencia a la clula receptora. El proceso de apareamiento est controlado por el plsmido F (plsmido de fertilidad o factor F), que contiene los genes de las protenas necesarias para la conjugacin. Una de las protenas ms importantes es la pilina, que constituye el pili sexual (pelo de conjugacin). El apareamiento empieza cuando el pili de la bacteria donadora que contiene el factor F (Bacteria F+) se une a la superficie de la bacteria receptora que no contiene el factor F (Bacteria F-). Las clulas se ponen en contacto directo a travs de una retraccin del pili. Despus de la digestin enzimtica del DNA del factor F, una cadena es transferida a la clula receptora a travs del puente de conjugacin. El proceso se completa con la sntesis de la cadena complementaria para formar el plsmido F de doble cadena tanto en la clula donadora como en la receptora. La clula receptora F- es ahora una clula donadora F+ que es capaz de transmitir el plsmido F. En otros casos, hay bacterias que transfieren no slo el plsmido sino el cromosoma bacteriano completo, debido a que tiene el plsmido F integrado a su DNA. Por ejemplo, la bacteria receptora expresa sensibilidad a la penicilina, mientras que la bacteria donadora muestra resistencia. Cuando se establece este canal entre una clula y otra, se transfiere el material gentico convirtiendo a la clula receptora en resistente a la penicilina.

DIFERENCIAS ENTRE PILI Y FLAGELO PILI Presente en bacterias mviles y no mviles. Ms cortos y delgados. Funcin de transferencia de genes o incorporacin de material extracromosomal. Compuesta de subunidades proteicas, Pilina. 3.10 FLAGELOS rganos de locomocin de los microorganismos, permitiendo la migracin desde focos de infeccin. Delgados, filamentosos, compuestos de una protena elstica (Flagelina). No estn presentes en todas las clulas bacterianas. Unido a la pared bacteriana y a la membrana plasmtica. Cuerpo basal consta de varios anillos. En el interior se encuentra un canal donde se aloja la flagelina, la cual recibe una seal indicadora del sentido de desplazamiento de la bacteria. Las bacterias Gram-negativas tienen cuatro de estos anillos: el anillo L que se asocia con la membrana externa (lipopolisacridos), el anillo P que se asocia con la pared celular (capa de peptidoglicano), el anillo MS que se inserta directamente en la membrana plasmtica, y el anillo C que se une a la membrana plasmtica. Las bacterias Gram-positivas slo tienen dos anillos: MS y C. El filamento termina en una punta de protenas La importancia de los anillos es mantener la unin de la clula bacteriana con el flagelo. En los casos donde el flagelo se pierde por una agitacin mecnica, la bacteria puede cambiar su capacidad de motilidad por contraccin. Los anillos SM tienen funcin de rotor El anillo se considera una llave reguladora para el desplazamiento de la flagelina dentro del canal interno y su funcin es desconocida. No son necesarios para la viabilidad bacteriana. Si se eliminan por agitacin mecnica la bacteria se mantiene viable, por lo que la creacin de frmacos dirigidos a la destruccin del flagelo seran intiles en la eliminacin de la bacteria. Se puede observar a travs de campo oscuro, contraste de fase y tinciones especiales. FLAGELO Presente en bacterias mviles. Mayor longitud. Funcin de motilidad. Compuestos de una protena elstica, Flagelina.

Tipos de Flagelos Monotrico: Parte de un solo punto. Permite el desplazamiento de la clula bacteriana en contraposicin a la ubicacin del flagelo.

 Anfitrico: En cada uno de los 2 extremos. Desplazamiento en 2 direcciones Lofotrico: 4 o 6 flagelos que parten de un mismo punto Peritrico: Flagelos en toda la superficie bacteriana, permitiendo mayor capacidad de desplazamiento en todas las direcciones.

4. CICLO DE CRECIMIENTO BACTERIANO Si se inocula un medio de cultivo adecuado con bacterias y se toman muestras pequeas a intervalos regulares de tiempo, la representacin grfica de los datos dar una curva de crecimiento caracterstica. La curva de crecimiento bacteriano puede dividirse en cuatro fases fundamentales:

Las bacterias en el ambiente se encuentran en un estado de latencia, inactivadas metablicamente, utilizando los componentes nutricionales presentes en inclusiones pero en cantidades muy escasas, por falta de un sustrato que le permita iniciar un ciclo de replicacin. Fase lag (de latencia): Durante la cual hay una gran actividad metablica pero las clulas no se dividen. Despus de la inoculacin, hay un aumento de tamao celular en un momento en el cual la divisin celular es escasa o nula. Es un

perodo de ajuste necesario para el reabastecimiento de los metabolitos celulares hasta un nivel compatible con la sntesis celular. Fase log (logartimica): las clulas se encuentran dividiendo rpidamente, la masa y el nmero de clulas se incrementan en forma logartmica, con un tiempo de generacin constante. Es una fase de crecimiento equilibrado durante la cual, todos los componentes celulares aumentan en proporcin constante. Es la fase ideal para medir la sensibilidad de las bacterias a los agentes antimicrobianos. Fase estacionaria: El crecimiento logartmico finalmente se desacelera debido a la acumulacin de productos de desecho, agotamiento de los nutrientes, cambios de pH y disminucin de la concentracin de oxgeno. La poblacin bacteriana pasa a una fase de crecimiento estacionario, en la cual el nmero de clulas viables permanece ms o menos constante. Por lo general, algunas clulas se dividen, mientras otras mueren. Fase de muerte: En ella la velocidad a la cual mueren las bacterias es mayor a la velocidad de reproduccin; por ello, el nmero de clulas viables disminuye al paso del tiempo. 5. METABOLISMO Y FISIOLOGA BACTERIANA El metabolismo es el conjunto de reacciones bioqumicas que permiten el crecimiento de un organismo (por lo tanto, en bacterias, que conduce a la creacin de nuevas clulas). El metabolismo de la clula comprende dos grandes tipos de reacciones: 1. Reacciones de mantenimiento, que suministran: a) energa b) poder reductor c) precursores metablicos 2. Reacciones del anabolismo (biosntesis), que usan energa y poder reductor procedente de las reacciones de mantenimiento. Las bacterias requieren aporte continuo y de acceso inmediato de energa, que es usada en procesos de: Biosntesis (anabolismo) Transporte activo Translocacin de protenas a travs de la membrana citoplsmica Movimiento flagelar Bioluminiscencia

5.1 Mtodos usados por las bacterias para generar ATP: 1) Si la energa procede de radiaciones (en los cuantos de una determinada longitud de onda de la luz visible): bacterias fototrofas, que a su vez pueden ser:

a)

fotolitotrofas: captan energa lumnica en presencia de sustancias inorgnicas;

b) fotoorganotrofas: captan energa lumnica con requerimiento de sustancias orgnicas. 2) Si la energa se desprende a partir de molculas qumicas en reacciones biolgicas de xido-reduccin: bacterias quimiotrofas, que a su vez pueden ser: a) b) quimiolitotrofas: captacin de energa qumica a partir de sustancias inorgnicas; quimiorganotrofas: captacin de energa qumica a partir de sustancias orgnicas.

5.2 Relacin de los procariotas con el O2: Dependen en buena medida de la disponibilidad de las enzimas eliminadoras de perxidos y superxidos. Tipos de procariotas segn sus relaciones con el oxgeno: Aerobios: Necesitan O2 para crecer, ya que lo usan (al menos en algunas ocasiones) como aceptor final de electrones para la captacin de energa qumica. Como el oxgeno tiene poca solubilidad en el agua, cuando queremos cultivar un aerobio en medios lquidos, hay que forzar la aireacin, bien sea por agitacin de los matraces o tubos de ensayo, o insuflando aire u oxgeno estriles. Algunos aerobios requieren para crecer tensiones de oxgeno inferiores a la atmosfrica (del 2 al 10% de O2, en lugar del 20%). A estas bacterias se las califica como microaerfilas. Algunos microaerfilos lo son permanentemente (microaerfilos estrictos). Otros se comportan como microaerfilos slo cuando crecen usando determinadas fuentes de energa qumica o de nitrgeno (microaerfilos condicionales). Anaerobios: Son aquellos que pueden crecer en ausencia de oxgeno, debido a que pueden usar aceptores finales distintos del oxgeno, o porque poseen metabolismo estrictamente fermentativo. Anaerobios estrictos: El oxgeno les resulta txico ya que carecen de catalasa, peroxidasa y SOD, y por lo tanto, no pueden eliminar los productos nocivos resultantes del oxgeno. (Por ejemplo, las especies de Clostridium, y las arqueas metanognicas). Anaerobios aerotolerantes (= aerodricos): Al igual que los anteriores, presentan un metabolismo energtico anaerobio, pero soportan el oxgeno debido a que poseen enzimas detoxificadores. Ejemplos tpicos son las bacterias del cido lctico, como Streptococcus, Leuconostoc, Lactobacillus). Tambin se les llama anaerobios indiferentes. Anaerobios facultativos: Pueden realizar metabolismo energtico aerobio o anaerobio, dependiendo del ambiente y la disponibilidad de aceptores finales de electrones. Ejemplos son las enterobacterias como E. coli.

6. GNETICA BACTERIANA Toda la informacin gentica esencial para la vida de la clula bacteriana, est contenida en una nica molcula de ADN de doble cadena, circular y covalentemente cerrado, a la que podemos referirnos como cromosoma bacteriano. Muchas bacterias, poseen adems ADN extra cromosmico, tambin circular cerrado, denominado ADN plasmdico, por estar contenido en estructuras llamadas plsmidos, que portan informacin gnica para una variedad de funciones no esenciales para la clula en condiciones normales de crecimiento. Las bacterias poseen enzimas capaces de alterar la estructura del ADN modificando su superenrrollamiento. Estas enzimas que se denominan genricamente "topoisomerasas", actan introduciendo o eliminando vueltas superhelicoidales, cumpliendo un importante rol en los procesos de replicacin y transcripcin del ADN. Topoisomerasa I: Rompe la cadena y permite que el ADN rote alrededor de ese enlace fosfodister. Topoisomerasa II: Permite que se haga un corte en las hebras de DNA y va a pasar a travs de un agujero. El proceso de reproduccin bacteriana es a travs de FISIN BINARIA, es decir, una clula original da lugar a dos clulas con la misma informacin gentica. 6.1 Significado gentico de la replicacin El significado gentico de la replicacin es el de conservar la informacin informacin gentica, de manera que cuando una bacteria se divide, de lugar a una bacteria hija que contenga la misma informacin gentica. En organismos eucariontes el significado de la divisin celular es el mismo, una clula cuando se divide origina dos clulas hijas idnticas con la misma informacin gentica. 6.2 Modelos de replicacin propuestos: Semiconservativo, Conservativo y Dispersivo Modelo Semiconservativo: El modelo de replicacin propuesto por Watson y Crick supona que el ADN doble hlice separa sus dos hebras y cada una sirve de molde para sintetizar una nueva hebra siguiendo las reglas de complementariedad de las bases nitrogenadas. Dicho modelo recibi el nombre de Semiconservativo, ya que las dos dobles hlices recin sintetizadas poseen una hebra vieja (una mitad vieja) y otra hebra nueva (mitad nueva). Modelo Conservativo: cuando el ADN doble hlice se replica se producen dos dobles hlices, una de ellas tienen las dos hebras viejas (est intacta, se conserva) y la otra doble hlice posee ambas hebras de nueva sntesis.

Modelo Dispersivo: Cuando el ADN doble hlice se replica se originan dos dobles hlices, cada una de ellas con hebras que poseen tramos viejos y tramos de nueva sntesis en diferentes proporciones. Los siguientes esquemas representan los tres Modelos de Replicacin: Semiconservativo Conservativo Dispersivo

La replicacin del ADN Bacteriano se ajusta al modelo Semiconservativo: Experimentos De Meselson y Stahl (1958) El ADN circular bacteriano para replicarse requiere de un punto de origen para que pueda ser abierto, una vez que se abre llega una enzima para liberar la tensin y permitir la accin de otra enzima, y vaya formando cada aminocido y forma hebras nuevas en contraposicin a la hebra original. Ocurre una sola vez en cada generacin celular. Necesita de muchos ladrillos, enzimas y una gran cantidad de ATP. Velocidad de replicacin de 500 nuclotidos por segundo (en el humano la velocidad es de 50 nucletidos por segundo). Lapso de incubacin de 24, 28 o 72 horas. La topoisomerasa se encarga de hacer la apertura de las hebras una vez que se da el origen de replicacin. La ADN polimerasa toma la hebra original para formar una hebra nueva. Plsmidos Resistencia codificada por plsmidos bacterianos Replicacin autnoma Fertilidad (autotransferenci) Movilizacin Recombinacin, transposicin de genes.

Proceso de replicacin: Las enzimas encargadas de catalizar el proceso de replicacin, se denominan polimerasas. ADN

Tambin participan otras enzimas, como son las llamadas helicasas, responsables de desenrollar el ADN en el origen o cerca de l, paso que resulta indispensable para iniciar la replicacin. Esquemticamente, podemos decir que la replicacin consta de 3 fases: iniciacin, elongacin y terminacin. La iniciacin, se da a partir del origen del replicn (unidad de replicacin del ADN) donde se forma la o las horquillas de replicacin, por la accin de helicasas que desenrollan la estructura del ADN, formndose as una porcin monocatenaria que estar en condiciones de formar un complejo con ciertas protenas de unin al ADN encargadas de estabilizar la cadena sencilla, evitando la formacin de puentes de hidrgeno. Se sintetiza un corto oligonucletido de ARN con un grupo 3 oxidrilo libre, que actuar como cebador o primer, sobre el que la ADN polimerasa agrega los nucletidos. La elongacin, consiste en el avance de la horquilla de replicacin, conforme se van agregando nucletidos a la cadena neosintetizada, en un orden establecido por las reglas de complementariedad de bases (A con T y C con G) entre la cadena molde y la nueva cadena en sntesis. En esta etapa participa fundamentalmente la ADN polimerasa III. Todas las polimerasas conocidas, agregan nucletidos en direccin 5- 3 para el crecimiento de la cadena, y requieren de una cadena de ADN molde, un cebador y por supuesto los nucletidos. La terminacin se da luego de que ambas horquillas de replicacin han atravesado la mitad del cromosoma en direcciones opuestas, y se encuentran en la regin terminal del genoma. En esta regin hay secuencias de ADN que actan como bloqueadores para el avance de las horquillas, por lo que se asegura que toda replicacin termine en esa pequea porcin del genoma.