different species; Radwan and Mangold (1976) indicated that culture conditions such as media composition, aeration, and

temperature can drastically alter lipid content and composition. It is thus very important to understand the effects of various environment conditions on the lipid production by tissue or cell cultures before exploring the possibility of producing seed lipid using tissue culture methods. BIOSYNTHESIS OF LIPIDS IN PLANT TISSUE CULTURE Plant tissue cultures are a useful model system for studying plant lipid biosynthesis (Stearns and Morton, 1975a; Stumpf and Weber, 1977; Bligny et al., 1979; Kates et al., 1979; MacCarthy and Stumpf, 1980). Cell growth is fast, uniform, and reproducible. The lipid composition of plant tissue cultures is sometimes similar to that of the organs of the plant from which they were derived (Ezzat and Pearce, 1980). Another advantage is that their metabolism is very easy to manipulate for biochemical studies. Previous reviews (Kates et al., 1979; Radwan and Mangold, 1980) will be updated in this section, with an emphasis on fatty and triacylglycettol biosynthesis. Fatty acid biosynthesis in cell culture has been studied using radioactive acetate or fatty acid precursors. The species studied include Malva sp. (Yano et al., 19?2b), soybean (Stearns and Morton, 1975a; Stumpf and Weber, 1977; Nothelfer et aI.. 1977; Wilson et al., 1978; weber et al., l879; MacCarthy and Stumpf, 1980), Acer pseudoplotanus (Bligny et al., 1979), and cacao (Tsai and Kinsella,1982a;b). Acetate is rapidly incorporated into a range of fatty acids, such as palmitic, stearic, oleic, linoleic, and linolenic acids. Data for soybean (Stearns and Morton, 1.975a; Wilson et al. , 1978; MacCarthy and Stumpf, 1980), tobacco (MacCarthy and Stumpf, l980), and cacao (Tsai and Kinsella, 1982a) showed rapid desaturation of stearic to oleic, Iinoleic, and linolenic acids similar to the desaturation system in the intact plant. The desaturation pattern was not very clear in the cell culture of Catharanthus roseus (MacCarthy and Stumpf. 1980). The desaturation system was futher demonstrated using oleic and linoleic acids in soybean (Stumpf and Weber, l977) and cacao (Tsai and Kinsella, 1982t) cell culture. The incorporation of exogenous fatty acids or fatty acids synthesized from exogenous acetate has also been studied. Fatty acids were rapidly incorporated into phospholipids of soybean (stearns and morton, 1975a; Stumpf and Weblr, 1977; Wilson et al., l9?7) and cacao cell cultures (Tsai and Kinsella, 1982b; Tsai et al., 1982). It seems that the synthesis or polar lipids is the major event in the cell culture and only small amounts of triacylgrycerols. Are produced. This clearly indicates that suspension cultures actively synthesize membrane lipid instead of storage lipid. Thus cell suspension cultures seem a good system for the study of membrane rather than storage lipid biosynthesis. An embryo culture system is needed to study the storage lipid metabolism. Currently there is one system which has been developed: oil palm (Jones, l974; Turnharn and Northcote, 1984). In Jonesr study higher amounts, that is, 17% of acetate, was incorporated into triacylglycercls of oil palm somatic embryos, when compared with 12% into those of undifferentiated cell culture. In a later study Turnharn and Northcote (1984) also found that as the somatic embryos developed to larger size in culture, the proportions of triacylglycerols in the total lipids increased drastically, possibly indicating a gradual deposition of storage lipid in the somatic embryo cells. FACTORS AFFECTING LIPID PRODUCTION IN PLANT TISSUE AND CELL CULTURE Growth Stage

Song and Tattrie (1973) found that the total lipid content of morning glory (Ipomoea sp.) cell culture peaked after 4 days of growth and then leveled off at 5% until 8 days after growth. However, triacylglycerol content increased from 2 uM (first day) to 12 uM (second day), decreased to 7 uM (third and fourth day), again increased to 11.5 uM (fifth day), and then rapidly decreased to the original value. Significant changes in fatty acids were also observed; oleic acids content remained constant (less than 5%) for 2 days and then increased to 40% in the next 4 days. In contrast, the total linolenic acids content gradually decreased from 47% (third day) to 28% (sixth day). Significant changes in the triacylglycerols-to-phospholipid ratio in cultured rapecells (.B. nopus) were observed by Radwan et al. (1978). They found that this ratio remained constant (2:1) for the first 2 weeks in culture and then decreased to 1:2 during the third week. However, no change was observed in the fatty acid composition of triacylglycerols during this period. MacCarthy and Stumpf (1980) studied the change of fatty acid composition of G. max, C. roseus, and N. tabacum during growth at room temperature. They reported that the linoleic acid content of C. Foseus and G. Max decreased with time and that of N.tabacum increased with time. Nevertheless, the total fatty acid contents of tobacco and soybean decreased and that of C. roseus increased during culturing. In cacao cell cultures no change was observed in the total lipid content and fatty acid composition during growth of callus and suspension culture (Tsai, 1981; Tsai et al., 1982). However, Tsai (1981) found that the triacylglycerol content decreased from 26.7$ (fifth week) to 13,9% of total lipid (seventh week). From the above studies it seems that rnetabolic changes during growth among different species are variable and might be determined by the specific genotype of the cell (MacCarthy and Stumpf, 1980). Nutrients Addition of coeonut water into the culture medium increased the total lipid content of soybean callus and cell suspension cultures and decreased that of wormwood callus cultures (Shin et al. , 1971). Coconut water treatment also changed the fatty acid composition of triacylglycenols of soybean callus cultures (Shin et al., 1971). The palmitic acid content increased about threefold and linolenic acid content decreased from 518 to trace amounts under the same treatment. A totat of 10% of coconut water increased the triacylglycerol content from 11 to 19% for cacao cell culture (Tsai et al., 1982). A concurrent decrease in the linoleic acid content from 37 to 19% and an increase in the oleic acid content from 10 to 33% were also observed. Radwan and Mangold (1976) found 35 mg of lipid in 100 ml of coconut water, but it did not contribute a significant amount of fatty acid (only 33.4 ug fatty acids/100 ml of coconut water) to the cultures (Wen et a1., 1984). Organic nitrogen such as casein hydrolysate decreased the total lipid contents of callus and suspension culture (Radwan et al., 1974). Sucrose is the major carbon source in cell culture media. A combination of coconut water and sucrose added 8 days after culture enhanced the lipid content of cocoa bean cells (Tsai et aI., 1982). Increasing sucrose in the culture media from 3 to 27% increased the proportions of stearic acid and oleie acid and decreased those of linoleic and linolenic acids in somatic cacao embryos, which were thus similar to those of the zygotic embryos (Pence et al., 1981). Oleopalmitostearin, the major triacylglycerol in cocoa butter, was also identified in the somatic embryos (Janick et al., 1982). Sucrose treatment did not increase the total lipid content significantly but increased the total fatty acid content of somatic embryos from 1.2% (3% sucrose) to 3.1% (27% sucrose) on a dry weight basis (Pence et al., 1981). Plant Growth Hormones

Stearns end Morton (1975b) first investigated the effect of 1 ppm levels of indole-3 butyric acid, kinetin, and gibberellin (GA) individually or in several possible combinations on the fatty acid composition c soybean suspension cultures. Cells from indole-3-butyric acid (IBA) or IBA and GA treatment exhibited a higher palmitic acid content and a lower linolenic acid content than cells from other treatment groups. Combinations of kinetin and GA induced the highest amount of linolenic acid among all treatments. pandey and gadgil (1984) tested the effects of four combinations of growth factors on the fatty acid compositions of total lipids in Cucumis melo and Cucumis sativus callus cultures: naphthalene acetic acid (NAA) plus coconut weter (CW), NAA plus kinetin, NAA plus 6-benzylarninopurine (BAP), and BAP plus lBA. A combination of IBA and BAp induced the highest myristic acid content and lowest linolenic acid content in these two species. Different combinations of 2,4-D and kinetin were tested with cacao cell culture (Tsai, 1981). Although the response of total lipids or triaeylglycerols to 2,4-D or kinetin at a level of p=.05 was not significant, there was a significant interaction between 2,4-D and kinetin. The optimum concentrations of 2,4-D and kinetin were found to be 2.26 and 0,465 uM, respectively. A combination of 2.26 UM 2,4-D,5.0 uM gibberellic acid (GA3, and 5.0 uM zeatin further reduced the linoleic acid and palmitic acid contents and increased the oleic acid content in the suapension culture (Wen et al.,1984). Although the oleic acid level was increased, the stearic acid level remained low. However, complete elimination of all hormones normally used in the cell culture systems had an apparently beneficial effect on the fatty acid pattern. More studies are needed to elucidate the effects of hormones. Temperature Radwan et aI. (1978) first studied the effect of low temperature on the lipids of rape (B. napus) and nasturtium (trpaeolum majus) callus cultures. Their results showed that low temperature increased the lipid content of rapeseed cells. Similar results were also observed from sycamore cell cultures (Gawer et al, 1980), which showed a three fold increase of total lipid content by 12oc treatment when compared with the 25oc control. similar observations were reported by Wright et al. (1983) for somatic embryos cultured under different temperatures ranging from 10 to 35oC. In the latter system embryos cultured at 17oC showed the highest total lipid content. The total fatty acid content was also influenced by temperature: It was highest at 20oC for tobacco cell culture (Gawer et aI, 1983) and at 26oC for cacao embryo cultures (Wright et al. 1983). At low temperature oleic acid content was higher in C. Roseus culture (Maccarthy and stumpf, 1980) and lower in rape and nasturtium cultures (Radwan et al, 1978). In cacao embryo cultures, however, oleic acid content was highest at 26oC (wright et al. , 1983). Linoleic acid content was enhanced by low temperature for G. max (MacCarthy and Stumpf, 1980), tobacco (Gawer et al, 1983), and nasturtium (Radwan et al.,1978) cell cultures. It is also interesting to note that the proportion of linoleic acid peaked at 17oc and was lowest at 26oC for cacao embryo cultures (wright et al,1983). Higher proportions of linolenic acid was found at low-temperature treatment for rape (Radwan et al., 1978) and tobacco (MacCarthy and Stumpf, 1980; Gawer et al, 1933). The relative portion. of lonolenic acid was highest at 10oC and Iowest at 26oC for cacao embryo culture (wright et al., 1983). POTENTIAL OF PLANT CELL CULTURE FOR SEED OIL PRODUCTION Breeding of Seed Oil Plants Plant tissue culture offers the advantage of producing large quantities of plantlets in a shorter time when compared with other conventional propagational methods. This is very helpful for those plants for which the success of a breeding program takes a long time to

determine because the propagation is very slow. These plant tissue techniques used for propagation include somatic organogenesis and embryogenesis. Each of these processes can be either direct or calus-mediated plant regeneration (Evans et al., 1981). The advantage of the direct process is that the plantlets regenerated are uniform in their characteristics (clones). However, callus-mediated regeneration often contributes variability to the regenerated plantlets. This variation results from somaclonal variation and is very helpful in generating variability in the breeding program. The best example using plant tissue culture for plant breeding is the oil palm (Eloeis guineensis), which is the second largest edible oil crop in the world (Jones, 1984). This crop cannot be propagated in large quantities because each tree has only a single terminal meristem (Turnham and Northcote, 1982). Successful cloning of this crop in now possible (Jones, 1974). Selection of crop with high oil yield and quality followed by clonal propagation is currently actively pusued by the industry (Jones, 1984). Direct Production of Seed Oils Jones (1974) was the first to discuss the possibility of producing seed oils using plant tissue culture. His conclusion was not optimistic owing to the fact that cultured cells or somatic embryos are low in fat, especially the types of triacylglycerols occurring in the seed oils. Radwan and Mangold (1976) suggested that plant tissue culture is expected to be a source of valuable specialty fats such as steryl glycosides and steryl glyctolipids instead of lower-priced triacylglycerols. However, in view of the very high price of cocoa butter (the 1984 U.S. import price was $4.52 per kilogram), which is 3.3 times higher than the second most expensive edible oil , olive oil, and 6.2 times higher than soybean oil (Food and Agriculture Organization, 1985), there is potential for the development of cell culture technology for the production of cocoa butter. Much research has been done on the culture of cacao cells (Tsai and Kinsella, 1981; 1982a,b; Tsai et al., 1982; Wen et al., 1984) and somatic embryos (Esan, 1977; 1980; Pence et al., 1979; 1980; 1981; Janick et al., 1982; Wen et al. , 1984). The cultured cells are totipotent (Schwann, 1839) and contain all the genes for the expression of any anabolism occurring in the parent plant. However, to date, lipid metabolism in the cultured cells or embryos can be manipulated to a very limited degree. Perhaps if the cells or embryos could be transformed to produce mature zygotic cells or embryos, it may become possible to produce cocoa butter using tissue culture techniques. Economics The economic potential of producing seed lipids using plant tissue and cell cultures was first discussed by Jones (1974). From his calculations, it is estimated that in order to produce 52.5 kg of extracted product (35 batch cultures per year) 2000 kg of sucrose are needed as the carbon source. Goldstein et al. (1980) carried out an extensive product cost analysis on plant tissue culture as a source of biochemicals. They found that the manufacturing cost was approximately $17/kg and the capital cost was $25/kg for a production scale of 106 kg/year. thus it seems it is still too early for the commercialization of plant cell culture for seed oil production, even for the most expensive edible oil, cocoa butter. Since approximately 80% of the raw material cost comes from the carbon source (sucrose), it might be possible to lower this cost by switching to some other carbon source, such as molasses, whose price is about one-ninth that of sucrose (Sahai and Knuth, 1985). Another way to reduce the cost is to scale up production, which is more practical for oils of higher market volume and value (Goldstein et al., 1980; Sahai and Knuth, 1985).

spesies yang berbeda, Radwan dan Mangold (1976) menunjukkan bahwa kondisi budaya seperti komposisi media, aerasi, dan suhu secara drastis dapat mengubah kadar lemak dan komposisi. Dengan demikian, sangatlah penting untuk memahami dampak dari berbagai kondisi lingkungan pada produksi lipid dengan kultur jaringan atau sel sebelum menjelajahi kemungkinan memproduksi benih lipid menggunakan metode kultur jaringan. BIOSINTESIS lipid dalam KULTUR JARINGAN TANAMAN Kultur jaringan tanaman adalah sistem model yang berguna untuk mempelajari tanaman biosintesis lipid (Stearns dan Morton, 1975a, Stumpf dan Weber, 1977; Bligny et al, 1979;. Kates et al, 1979;. MacCarthy dan Stumpf, 1980). Pertumbuhan sel yang cepat, seragam, dan direproduksi. Komposisi lipid kultur jaringan tanaman kadang-kadang mirip dengan organ tanaman dari mana mereka berasal (Ezzat dan Pearce, 1980). Keuntungan lain adalah bahwa metabolisme mereka sangat mudah untuk memanipulasi untuk studi biokimia. Tinjauan sebelumnya (Kates et al, 1979;. Radwan dan Mangold, 1980) akan diperbarui dalam bagian ini, dengan penekanan pada biosintesis lemak dan triacylglycettol. Biosintesis asam lemak dalam kultur sel telah dipelajari menggunakan asetat radioaktif atau prekursor asam lemak. Spesies yang dipelajari meliputi Malva sp. (Yano et al, 19 2b.?), Kedelai (Stearns dan Morton, 1975a, Stumpf dan Weber, 1977; Nothelfer et al .. 1977; Wilson et al, 1978;. Weber et al, l879,. MacCarthy dan Stumpf, 1980), Acer pseudoplotanus (Bligny et al, 1979), dan kakao (Tsai dan Kinsella, 1982a,. b). Asetat dengan cepat dimasukkan ke dalam berbagai asam lemak, seperti palmitat, stearat, oleat, linoleat, asam linolenat dan. Data untuk kedelai (Stearns dan Morton, 1.975a, Wilson et al, 1978;. MacCarthy dan Stumpf, 1980), tembakau (MacCarthy dan Stumpf, l980), dan kakao (Tsai dan Kinsella, 1982a) menunjukkan desaturasi cepat stearat ke oleat, Iinoleic, dan asam linolenat mirip dengan sistem desaturasi di pabrik utuh. Pola desaturasi tidak sangat jelas dalam kultur sel Catharanthus roseus (MacCarthy dan Stumpf. 1980). Sistem desaturasi itu lanjut ditunjukkan dengan menggunakan asam oleat dan linoleat dalam kedelai (Stumpf dan Weber, l977) dan kakao (Tsai dan Kinsella, 1982t) kultur sel. Penggabungan asam lemak eksogen atau asam lemak disintesis dari eksogen asetat juga telah diteliti. Asam lemak dengan cepat dimasukkan ke dalam fosfolipid kedelai (stearns dan morton, 1975a, Stumpf dan Weblr, 1977;.? Wilson et al, l9 7) dan kultur sel kakao (Tsai dan Kinsella, 1982b, Tsai et al, 1982.). Tampaknya bahwa sintesis atau lipid polar adalah peristiwa besar dalam kultur sel dan hanya sejumlah kecil triacylgrycerols. Diproduksi. Ini jelas menunjukkan bahwa kultur suspensi aktif mensintesis lipid membran bukan lipid penyimpanan. Jadi kultur suspensi sel tampaknya sistem yang baik untuk studi membran daripada penyimpanan biosintesis lipid. Sebuah sistem kultur embrio diperlukan untuk mempelajari metabolisme lipid penyimpanan. Saat ini ada satu sistem yang telah dikembangkan: kelapa sawit (Jones, l974, Turnharn dan Northcote, 1984). Dalam studi Jonesr jumlah yang lebih tinggi, yaitu, 17% dari asetat, telah dimasukkan ke triacylglycercls embrio somatik kelapa sawit, bila dibandingkan dengan 12% ke orang-orang dari kultur sel terdiferensiasi. Dalam studi kemudian Turnharn dan Northcote (1984) juga menemukan bahwa sebagai embrio somatik dikembangkan untuk ukuran yang lebih besar dalam budaya, proporsi trigliserida di total lipid meningkat secara drastis, mungkin menunjukkan bahwa deposisi bertahap lipid penyimpanan di sel embrio somatik. FAKTOR YANG MEMPENGARUHI PRODUKSI LEMAK DI JARINGAN TANAMAN DAN KULTUR SEL

Pertumbuhan Tahap Lagu dan Tattrie (1973) menemukan bahwa kandungan lipid total morning glory (Ipomoea sp.) Kultur sel memuncak setelah 4 hari pertumbuhan dan kemudian mendatar sebesar 5% sampai 8 hari setelah pertumbuhan. Namun, konten triasilgliserol meningkat dari 2 uM (hari pertama) sampai 12 uM (hari kedua), turun menjadi 7 uM (hari ketiga dan keempat), kembali meningkat menjadi 11,5 uM (hari kelima), dan kemudian dengan cepat menurun ke nilai asli. Perubahan yang signifikan dalam asam lemak juga diamati; oleat isi asam tetap konstan (kurang dari 5%) selama 2 hari dan kemudian meningkat menjadi 40% dalam 4 hari ke depan. Sebaliknya, asam linolenat kandungan total secara bertahap menurun dari 47% (hari ketiga) menjadi 28% (hari keenam). Perubahan yang signifikan dalam rasio trigliserida-to-fosfolipid di rapecells berbudaya (B. nopus.) Yang diamati oleh Radwan et al. (1978). Mereka menemukan bahwa rasio ini tetap konstan (2:1) untuk 2 minggu pertama dalam budaya dan kemudian menurun menjadi 1:2 pada minggu ketiga. Namun, tidak ada perubahan yang diamati dalam komposisi asam lemak dari trigliserida selama periode ini. MacCarthy dan Stumpf (1980) mempelajari perubahan komposisi asam lemak dari G. max, C. roseus, dan N. tabacum selama pertumbuhan pada suhu kamar. Mereka melaporkan bahwa kandungan asam linoleat C. Foseus dan G. Max menurun dengan waktu dan bahwa N.tabacum meningkat dengan waktu. Namun demikian, total kadar asam lemak tembakau dan kedelai menurun dan bahwa dari C. roseus meningkat selama kultur. Dalam kultur sel kakao tidak ada perubahan diamati dalam kadar lemak total dan komposisi asam lemak selama pertumbuhan kalus dan kultur suspensi (Tsai, 1981;. Tsai et al, 1982). Namun, Tsai (1981) menemukan bahwa kandungan triasilgliserol menurun dari 26,7 $ (minggu kelima) ke 13,9% dari total lipid (minggu ketujuh). Dari studi di atas tampak bahwa perubahan rnetabolic selama pertumbuhan antara spesies yang berbeda adalah variabel dan dapat ditentukan oleh spesifik genotipe sel (MacCarthy dan Stumpf, 1980). Nutrisi Penambahan air coeonut ke dalam media kultur meningkatkan kadar lemak total kalus kedelai dan kultur suspensi sel dan penurunan yang apsintus kalus budaya (Shin et al., 1971). Pengolahan air kelapa juga mengubah komposisi asam lemak dari triacylglycenols kultur kalus kedelai (Shin et al., 1971). Kandungan asam palmitat meningkat sekitar tiga kali lipat kandungan asam linolenat dan menurun dari 518 untuk melacak jumlah di bawah perlakuan yang sama. Sebuah totat dari 10% air kelapa meningkatkan kandungan triasilgliserol 11-19% untuk kultur sel kakao (Tsai et al., 1982). Penurunan bersamaan dalam kandungan asam linoleat 37-19% dan peningkatan kandungan asam oleat 10-33% juga diamati. Radwan dan Mangold (1976) menemukan 35 mg lipid dalam 100 ml air kelapa, tapi itu tidak memberikan kontribusi sejumlah besar asam lemak (hanya 33,4 ug lemak ml acids/100 air kelapa) dengan budaya (Wen et a1. , 1984). Nitrogen organik seperti kasein hidrolisat menurun isi total lipid kalus dan kultur suspensi (Radwan et al., 1974). Sukrosa adalah sumber karbon utama dalam media kultur sel. Kombinasi air kelapa dan sukrosa ditambahkan 8 hari setelah kultur meningkatkan kadar lemak sel biji kakao (Tsai et al., 1982). Meningkatkan sukrosa dalam media budaya 3-27% peningkatan proporsi asam stearat dan asam oleie dan penurunan mereka dari asam linoleat dan linolenat di somatik embrio kakao, yang dengan demikian mirip dengan embrio zigotik (Pence et al., 1981 ). Oleopalmitostearin, yang triasilgliserol utama dalam cocoa butter, juga diidentifikasi dalam embrio somatik (Janick et al., 1982). Pengobatan Sukrosa tidak meningkatkan kadar lemak total secara signifikan tetapi meningkatkan jumlah kandungan asam lemak embrio somatik dari

1,2% (3% sukrosa) menjadi 3,1% (27% sukrosa) atas dasar berat kering (Pence et al., 1981). Pertumbuhan Tanaman Hormon Stearns akhir Morton (1975b) pertama meneliti efek dari 1 tingkat ppm asam indole-3-butirat, kinetin, dan giberelin (GA) secara individual atau dalam beberapa kombinasi yang mungkin pada komposisi c kultur suspensi kedelai asam lemak. Sel dari asam indole-3-butirat (IBA) atau IBA dan GA pengobatan dipamerkan kandungan asam palmitat yang lebih tinggi dan kandungan asam linolenat lebih rendah dari sel-sel dari kelompok perlakuan lainnya. Kombinasi kinetin dan GA diinduksi jumlah tertinggi asam linolenat pada semua perlakuan. pandey dan Gadgil (1984) menguji efek dari empat kombinasi faktor pertumbuhan pada komposisi asam lemak total lipid dalam Cucumis melo dan Cucumis sativus kultur kalus: naftalen asetat (NAA) ditambah kelapa weter (CW), NAA ditambah kinetin, NAA ditambah 6-benzylarninopurine (BAP), dan BAP ditambah LBA. Kombinasi IBA dan BAP diinduksi kandungan asam miristat tertinggi dan kandungan asam linolenat terendah dalam dua spesies. Kombinasi yang berbeda dari 2,4-D dan kinetin diuji dengan kultur sel kakao (Tsai, 1981). Meskipun respon total lipid atau triaeylglycerols untuk 2,4-D atau kinetin pada tingkat p = .05 tidak signifikan, ada interaksi yang signifikan antara 2,4-D dan kinetin. Konsentrasi optimum 2,4-D dan kinetin yang ditemukan 2.26 dan 0465 uM, masing-masing. Kombinasi 2,26 UM 2,4-D, 5.0 asam giberelat uM (GA3, dan 5,0 uM zeatin lebih lanjut mengurangi asam linoleat dan isinya asam palmitat dan meningkatkan kandungan asam oleat dalam budaya suapension (Wen dkk., 1984). Meskipun tingkat asam oleat meningkat, tingkat asam stearat tetap rendah. Namun, penghapusan lengkap semua hormon biasanya digunakan dalam sistem kultur sel memiliki efek tampaknya menguntungkan pada pola asam lemak. Studi lebih lanjut diperlukan untuk menjelaskan efek dari hormon . Suhu Radwan et al. (1978) lebih dulu mempelajari pengaruh suhu rendah pada lipid perkosaan (B. napus) dan nasturtium (trpaeolum Majus) kultur kalus. Hasil penelitian mereka menunjukkan bahwa suhu rendah meningkatkan kandungan lipid sel lobak. Hasil yang sama juga diamati dari kultur sel sycamore (Gawer et al, 1980), yang menunjukkan peningkatan tiga kali lipat kadar lemak total dengan pengobatan 12oc bila dibandingkan dengan kontrol 25oC. pengamatan serupa dilaporkan oleh Wright dkk. (1983) untuk embrio somatik dibudidayakan di bawah temperatur yang berbeda mulai dari 10 sampai 35oC. Dalam embrio sistem kedua dibudidayakan di 17oC menunjukkan kadar lemak total tertinggi. Total kandungan asam lemak juga dipengaruhi oleh suhu: Itu tertinggi pada 20oC untuk kultur sel tembakau (Gawer et al, 1983) dan pada 26oC untuk kultur embrio kakao (Wright et al 1983.). Pada kandungan asam oleat suhu rendah lebih tinggi pada kultur C. roseus (MacCarthy dan Stumpf, 1980) dan lebih rendah dalam budaya perkosaan dan nasturtium (Radwan et al, 1978). Dalam kultur embrio kakao, namun kandungan asam oleat tertinggi pada 26oC (wright dkk., 1983). Kandungan asam linoleat ditingkatkan dengan suhu rendah untuk G. max (MacCarthy dan Stumpf, 1980), tembakau (Gawer et al, 1983), dan nasturtium (Radwan et al., 1978) kultur sel. Hal ini juga menarik untuk dicatat bahwa proporsi asam linoleat memuncak pada 17oc dan terendah di 26oC untuk kultur embrio kakao (wright et al, 1983). Proporsi yang lebih tinggi dari asam linolenat ditemukan pada perlakuan suhu rendah untuk perkosaan (Radwan et al, 1978.) Dan tembakau (MacCarthy dan Stumpf, 1980; Gawer et al, 1933). Relatif porsi. asam lonolenic tertinggi pada suhu 10oC dan 26oC untuk Iowest pada kultur embrio kakao (wright dkk., 1983). POTENSI TANAMAN KULTUR SEL UNTUK MINYAK BIJI PRODUKSI

Pembibitan Benih Tanaman Minyak Kultur jaringan tanaman menawarkan keuntungan dari memproduksi sejumlah besar planlet dalam waktu yang lebih singkat bila dibandingkan dengan metode konvensional propagational lainnya. Hal ini sangat membantu bagi mereka tanaman yang keberhasilan program pemuliaan memakan waktu lama untuk menentukan karena propagasi ini sangat lambat. Teknik jaringan tanaman ini digunakan untuk perbanyakan meliputi organogenesis somatik embriogenesis dan. Masing-masing proses ini dapat berupa regenerasi tanaman langsung maupun kalus-dimediasi (Evans et al., 1981). Keuntungan dari proses langsung adalah bahwa planlet regenerasi seragam dalam karakteristik mereka (klon). Namun, regenerasi kalus-dimediasi sering berkontribusi variabilitas ke planlet regenerasi. Variasi ini hasil dari variasi somaklonal dan sangat membantu dalam menghasilkan variabilitas dalam program pemuliaan. Contoh terbaik menggunakan kultur jaringan tanaman untuk pemuliaan tanaman adalah kelapa sawit (Eloeis guineensis), yang merupakan terbesar tanaman minyak nabati kedua di dunia (Jones, 1984). Tanaman ini tidak dapat diperbanyak dalam jumlah besar karena setiap pohon hanya memiliki meristem terminal tunggal (Turnham dan Northcote, 1982). Kloning sukses tanaman ini sekarang mungkin (Jones, 1974). Pemilihan tanaman dengan hasil minyak yang tinggi dan kualitas diikuti dengan perbanyakan klonal saat ini aktif pusued oleh industri (Jones, 1984). Produksi Langsung Seed Oils Jones (1974) adalah orang pertama yang membahas kemungkinan memproduksi minyak biji menggunakan kultur jaringan tanaman. Kesimpulannya adalah tidak optimis karena fakta bahwa sel-sel budidaya atau embrio somatik yang rendah lemak, terutama jenis trigliserida terjadi pada minyak biji. Radwan dan Mangold (1976) mengemukakan bahwa kultur jaringan tanaman ini diharapkan menjadi sumber lemak khusus berharga seperti glikosida steryl dan glyctolipids steryl harga yang lebih rendah trigliserida bukan. Namun, mengingat harga yang sangat tinggi cocoa butter (1984 harga impor AS $ 4,52 per kilogram), yaitu 3,3 kali lebih tinggi dari minyak kedua paling mahal dimakan, minyak zaitun, dan 6,2 kali lebih tinggi dari minyak kedelai (Food and Agriculture Organization, 1985), ada potensi untuk pengembangan teknologi kultur sel untuk produksi cocoa butter. Banyak penelitian telah dilakukan pada kultur sel-sel kakao (Tsai dan Kinsella, 1981; 1982a, b; Tsai et al, 1982;.. Wen et al, 1984) dan embrio somatik (Esan, 1977; 1980; Pence et al. , 1979; 1980; 1981; Janick et al, 1982;.. Wen et al, 1984). Sel-sel berbudaya adalah totipoten (Schwann, 1839) dan mengandung semua gen untuk ekspresi apapun anabolisme terjadi dalam tanaman induk. Namun, sampai saat ini, metabolisme lipid dalam sel kultur atau embrio dapat dimanipulasi untuk tingkat yang sangat terbatas. Mungkin jika sel-sel atau embrio dapat diubah untuk menghasilkan sel zigotik dewasa atau embrio, mungkin menjadi mungkin untuk memproduksi cocoa butter dengan menggunakan teknik kultur jaringan. Ekonomi Potensi ekonomi memproduksi lipid benih menggunakan jaringan tanaman dan kultur sel pertama kali dibahas oleh Jones (1974). Dari perhitungannya, diperkirakan bahwa untuk menghasilkan 52,5 kg produk diekstraksi (35 budaya bets per tahun) 2000 kg sukrosa diperlukan sebagai sumber karbon. Goldstein et al. (1980) melakukan analisis biaya produk yang luas pada kultur jaringan tanaman sebagai sumber biokimia. Mereka menemukan bahwa biaya produksi adalah sekitar $ 17/kg dan biaya modal adalah $ 25/kg untuk skala produksi 106 kg / tahun. sehingga tampaknya masih terlalu dini untuk komersialisasi kultur sel tanaman untuk produksi minyak biji, bahkan untuk minyak nabati yang paling mahal, cocoa butter. Sejak sekitar 80% dari biaya bahan baku berasal dari sumber karbon (sukrosa), ada kemungkinan untuk menurunkan biaya ini dengan beralih ke sumber lain karbon, seperti

molase, yang harganya sekitar satu-sembilan yang sukrosa (Sahai dan Knuth, 1985). Cara lain untuk mengurangi biaya adalah untuk meningkatkan produksi, yang lebih praktis untuk minyak volume pasar yang lebih tinggi dan nilai (Goldstein et al, 1980;. Sahai dan Knuth, 1985).