BACTERIAS

Eubacterias Arqueobacterias

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MORFOLOGA MICROSCOPICA

Nanobios

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FLAGELOS
Apndices capilares de 10-20 nm de largo, le confieren movilidad a las clulas. Composicin qumica: protena Flagelina Localizacin: anclado (s) en la membrana basal: segn su distribucin pueden ser: peritricos monotricos lofotricos polares Tincin: con cido tnico y fucsina fenicada para microscopa visible, con sales de oro para microscopa electrnica. Ejemplos: Salmonella sp., Proteus sp. Escherichia coli
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Flagelo

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FIMBRIAS
Descripcin Apndices mas cortos que los flagelos, 5 nm de dimetro, ms numerosos. Presentes solo en bacterias Gram (-) Funcin: sirven para adherirse a superficies y para el reconocimiento molecular de ligandos en superficies y tejidos, a travs de molculas de tipo proteico, lectinas (conjugados azcar-protena), adhesinas (protenas). Ejemplo: Es un factor de virulencia en el reconocimiento y adhesin de Escherichia coli enterotoxignica que produce diarrea en humanos y en cerditos.
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FIMBRIAS

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FIMBRIAS

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PILI

Descripcin Estructuras generalmente ms largas que las fimbrias Composicin qumica: protena Pilina
Funcin: Adhesin a superficies con reconocimiento molecular especfico de residuos de heptosas en el centro del lipopolisacrido (LPS) y de ligandos en la clula receptora para realizar la conjugacin exitosa Ejemplos: Pili F de Escherichia coli.
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CPSULA
Esta estructura es delgada, observable, con cierta rigidez, sin partculas visibles, homognea. Composicin qumica: Es un polmero constitudo principalmente de glicoprotenas, polialcoholes y aminoazcares, polisacridos. Funcin: posiblemente material de reserva, de proteccin contra la desecacin y fagocitosis, o de desecho. Tincin : negativa con tinta china, o con colorante de India. Ejemplos: Leuconostoc mesenteroides dextranas glucosa Acetobacter xylimnum celulosa glucosa Xanthomonas sp xantana xilosa Bacillus megaterium polipptido ac. glutmico Streptococus pneumoniae polis. tipo II glu-ram-ac. glucnico

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GLICOCALIX = SLIME LAYER

Es una estructura fcilmente deformable, puede poseer material particulado, y no es fcilmente observable. Presente en casi todas las bacterias.

Composicin qumica: semejante a la cpsula.

Funcin: adhesin y barrera de proteccin contra la fagocitosis y la difusin de los antibiticos, biopelculas. Tincin: Con rojo de rutecio para microscopa electrnica

Ejemplos:Staphylococcus aureus, Bacterias sulfatoreductoras.

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PARED CELULAR
FUNCIN. Da la forma y rigidez , soporta una presin interna de 2 atm aproximadamente.
COMPOSICIN QUMICA: En Gram (+).-90 % de peptidoglicanos + polisacridos (ac. teicoicos o ac teicurnicos). En Gram (-).- 10 % de peptidoglicanos + Complejo Lipopolisacrido (LPS). Al peptidoglicano tambin se le conoce como Mucopptido, Murena.

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PEPTIDOGLICANA

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enlaces -1-4

PEPTIDOGLICANO O MURENA
Composicin qumica: N- acetilglucosamina + Ac. N-acetilmurmico unidos por enlaces -1-4 + un tetrapptidoglicano: L-alanina-Dglutmico-L-lisina o ac.Diamino pimlico (DAP)-D-alanina, unidos por enlaces covalentes Los aminocidos implicados varan de una especie a otra. La constitucin del esqueleto es caracterstica de la especie y constituye un parmetro taxonmico

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Sitio de accin de la Penicilina y Lisozima

PARED CELULAR DE GRAM (+)

AC. TEICOICOS.- Son polmeros de poliolfosfato unidos por enlaces fosfodister: glicerolfosfato o ribitolfosfato. AC. TEICURNICOS.- son polisacridos conteniendo ac. urnicos. Estos polisacridos son responsables de : La clasificacin serolgica de Antgeno-tipo especfico y grupo especfico. La asimilacin selectiva de cationes Reserva de fosfatos Adhesin de bacterifagos Del control de la actividad autocataltica.

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ACIDOS TEICOICOS

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PARED CELULAR DE GRAM(+)

OTROS COMPONENTES DE LA POLISACRIDOS NEUTROS Estos polisacridos son importantes para la clasificacin de estreptococos y lactobacilos, en la divisin de grupos serolgicos.
ACIDOS LIPOTEICOICOS (LTA) En Gram (+), es un polmero linear de glicerol fosfato unido por enlaces fosfodister a un lpido. La porcin lipdica est enlazada hidrofbicamente a la membrana y la porcin del glicerol fosfato a la pared celular. Su funcin ms probable es de adhesina. GLICOLPIDOS Presentes en Micrococcus, Streptococcus, Propionibacterium, Actinomyces. Adhesina. ACIDO MICLICO- Es una estructura formada por lpidos cerosos, presente en el gnero Mycobacterium.
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PARED CELULAR EN ARQUEOBACTERIAS

Est constituda por pseudopeptidoglicano(PPG) es un polmero de : -N-acetilglucosamina+ N-acetil talosa minurnico unidos por enlaces -1-3-glucosa-ac. glucurnico-galactosamina-acetato. Por ejemplo: Halococcus y Methanosarcina contienen adems abundantes residuos de sulfatos

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Si comparamos con la Pared celular de Gram positivas: Por qu las Arquebacterias son resistentes a la lizozima y a la penicilina?

PARED CELULAR EN ARQUEOBACTERIAS

En la mayora de las Arqueobacterias existe la capa S, formando parte de la pared celular. Su funcin probable es como una barrera selectiva de permeabilidad para partculas de bajo peso molecular. EJEMPLOS Methanobacterium Methanococcus Methanospirillum pseudomurena glicoprotena protena

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PARED CELULAR DE GRAM NEGATIVAS (MEMBRANA EXTERNA)

LIPOPOLISACRIDO(LPS) Es un complejo polimrico de polisacrido y lpido. Est compuesto de tres regiones: Lpido A Est compuesto de un esqueleto de dos residuos de glucosaminas, con enlace 1,6 y esterificado va grupos hidroxilos a cidos grasos. Regin central de polisacridos Se une al Lpido A a travs del 3-desoxi-D-manosa-octulosonato (KDO)-heptosa- etanolamina-fosfato + hexosas. Oligosacrido= Antgeno O= Antgeno somtico (Endotoxina) Son unidades repetidas de 4-6 azcares, pueden existir hasta 30 repetidos y los azcares son diferentes para cada especie

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Porque formamos anticuerpos contra las bacterias y que importancia tiene determinar la composicin del Lipopolisacrido (LPS) en las bacterias patgenas?

PARED CELULAR DE GRAM (-) (Membrana interna)

FOSFOLIPIDOS.-Subyacente a la capa de LPS, se encuentra una capa de fosfolpidos. LIPOPROTENAS.- Tambin denominada muren lipoprotena, une a la capa de fosfolpidos con los pptidoglicanos. PORINAS.- Son protenas que forman pequeos canales especficos, que permiten la difusin de solutos neutros y cargados con pesos moleculares menores a 600D. OTRAS PROTENAS.- Facilitan el transporte de molculas mayores a 600D, a travs de la membrana externa. FUNCIN: Proporciona el reconocimiento antignico especfico y es una barrera semipermeable para compuestos hidrofbicos Y para solutos de diferentes pesos moleculares.

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PARED CELULAR DE GRAM (-)

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PERIPLASMA
FUNCIN. Aqu se llevan a cabo reacciones de xidoreduccin(citocromos), regulacin osmtica, transporte de solutos, secrecin de protenas y actividades hidrolticas (fosfatasas, amilasas, beta lactamasas). Es un compartimento que poseen las bacterias Gram (-), entre la membrana externa y la membrana citoplsmica, constituda principalmente por protenas, oligosacridos, sales y peptidohglicanas en forma de gel.
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DIFERENCIAS ENTRE LA PARED CELULAR DE GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS

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MEMBRANA CITOPLSMICA
COMPOSICIN QUMICA: Es una bicapa fosfolipdica y protenas establecida en una estructura de mosaico fludo. Las protenas pueden ser integrales o perifricas. Es hidroflica en la parte externa por la presencia de glicerolfosfato e hidrofbica en la parte media por la presencia de los cidos grasos. Su estabilidad qumica es a travs de iones de Mg y Ca. Los hopanoides como el diplopleno, forman parte integral.

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Membrana Citoplsmica

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FUNCIONES DE LA MEMBRANA CITOPLSMICA

Transporte: de solutos, de electrones. Produccin de gradiente de protones Movilidad (Motor flagelar) Sntesis de ATP (ATPasa) Biosntesis de lpidos Biosntesis de polmeros para la pared celular Secrecin de protenas Sealizacin intracelular Respuesta a seales del medio ambiente.
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OTROS ORGANELOS
VESCULAS DE GAS Presentes en bacterias de hbitats marinos: Halobacterium Trichodesmium Cianobacterias

CARBOXISOMAS Se localizan principalmente en auttrofos, almacenan ribulosa bifosfato carboxilasa que se utiliza en el ciclo de Calvin para la incorporacin del CO2 Atmosfrico . CLOROSOMAS Estas estructuras estan rodeadas por una membrana de galactolpidos, y contienen los pigmentos captadores de la energa luminosa, se han encontrado en bacterias verdes fotosintticas del azufre- Chlorobium bacterias verdes deslizantes.- Chloroflexus

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OTROS ORGANELOS
GRNULOS Y GLBULOS Polihidroxibutirato, polihidroxialcanoatos Glucgeno Polifosfato Azufre elemental Funcin .- fuente de energa y carbono RIBOSOMAS Contienen tres tipos de RNA: 23 S, 16S y 5S. y protenas.Poseen una constante de sedimentacin de 70S. Funcin .- Sntesis de protenas. MESOSOMAS Son invaginaciones membranales, e incrementan el rea funcional de la membrana citoplsmica. FUNCIONES: Intervienen en los procesos de divisin celular Secrecin de enzimas obtencin de energa
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Diferencias entre Eucariotes y Procariotes

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ALGUNAS CARACTERSTICAS GENTICAS

GENOMA BACTERIANO
Es una molcula de doble hlice de DNA de aproximadamente 100 000 pb. Funcin.- Determina las propiedades y caractersticas estructurales de la clula

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RIBOSOMAS (70S)

Estn constitudos por cido ribonucleico ribosomal y protenas formando dos subunidades, de 50S y 30S.
La subunidad 50 S contiene 34 protenas y una unidad de rRNA 23S.

La subunidad 30S, contiene 21 protenas y un rRNA 16S.

Funcin: Son los sitios en donde se lleva a cabo la sntesis de protenas y existen aproximadamente 100 000/ clula bacteriana.

Definir unidades Sverdberg

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RECOMBINACIN GENTICA
La recombinacin gentica puede ser
Homloga Heterloga

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RECOMBINACIN HOMLOGA

Se lleva a cabo intraespecies y consiste en el intercambio de grandes segmentos de ADN

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 RECOMBINACIN HETERLOGA:
ILEGTIMA SITIO ESPECFICA

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RECOMBINACIN ILEGTIMA
Se refiere a cualquier rearreglo en el DNA que conduce a la unin
de segmentos lineales de DNA HETERLOGO. ejemplos: inversiones intramoleculares integracin del fago lambda en el cromosoma de E. coli. recombinacin de DNA in vitro a travs de vectores de clonacin.

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RECOMBINACIN SITIO ESPECFICA

Esta recombinacin se lleva a cabo principalmente por reconocimiento de una secuencia especfica sobre la doble cadena de DNA DEL HUSPED a travs de: Transposones Virus como el fago Mu Secuencias de insercin

Cortes con enzimas de restriccin de clase II.

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LA TRANSPOSICIN
Es el proceso por el cual los genes de una secuencia autnoma por medio de una transposasa se corta y liga la secuencia en el cromosoma de la clula husped. Un transposn est constitudo por secuencias de insercin, genes de resistencia a antibiticos principalmente y una transposasa . Puede ser conservativa, en donde la secuencia se corta de un sitio y se liga en otra posicin. O replicativa, cuando la secuencia se copia en otra posicin y se conserva la secuencia original en el primer sitio. Ejemplos: Tn 5, Ty

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LAS SECUENCIAS DE INSERCIN (IS)

son secuencias que poseen repetidos invertidos en ambos extremos de aproximadamente 40 pb c/u, poseen una transposasa en la parte central , con una longitud total de aprox. 1327 pb.

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 COMO SE PUEDE INTRODUCIR EL DNA A UNA CLULA HUSPED ?

Transformacin Electroporacin Transduccin: generalizada o especializada

Conjugacin
Vectores de clonacin Biobalstica

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TRANSFORMACIN EN CLULAS COMPETENTES

Unin del DNA de doble cadena por una protena de unin a DNA que solo existe en clulas competentes.

Una nucleasa degrada una de las cadenas del DNA, y la otra cadena se introduce a la clula husped en donde es atrapada por las protenas de unin a DNA ss (SSB) Ejemplos de transformacin espontnea:

Azotobacter sp, Bacillus sp

Streptococcus sp, Thermophilus sp, Neisseria sp, Thermus sp.
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ELECTROPORACIN

Se producen poros en la membrana de las clulas a travs de campos elctricos pulsados, o por medio de sustancias qumicas; las molculas de DNA pueden entrar o salir de las clulas.

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TRANSDUCCIN
El DNA es inyectado a la clula a travs de un fago

Transduccin generalizada.-Una bacteria es infectada por un fago, y ste empaqueta accidentalmente DNA bacteriano producindose virus defectuosos que al infectar otra bacteria es incapaz de replicarse, pero si hay recombinacin homloga entre la clula receptora y la donadora.
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Transduccin especializada

Hay replicacin autnoma del fago, pero lleva informacin gentica de la clula husped, bajo el control de un promotor del husped ( fago lambda).

Explicar que es un promotor

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CONJUGACIN

La informacin gentica es transferida de una clula donadora a otra receptora a travs del pili por medio de elementos genticos denominados plsmidos quienes se replican independientemente del genoma celular.
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VENTAJAS QUE LE CONFIEREN LOS PLSMIDOS A LAS CLULAS

Resistencia a antibiticos Resistencia a metales Produccin de enzimas para degradar compuestos no usuales. Rutas metablicas especiales

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CARACTERSTICAS DE LOS PLSMIDOS

Miden entre 1-1000 kpb La mayora son ds DNA Estn presentes en 1-3 copias o hasta 100 copias Requieren no ser compatibles Pueden ser o no conjugativos Pueden transferir grandes segmentos de DNA de una clula a otra Pueden o no integrarse al DNA de la clula husped.
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Plsmidos o episomas

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EJEMPLOS:
CONJUGATIVOS: PLSMIDOS R
F en Escherichia coli pfdm y K en Pseudomonas Pi en Vibrio cholerae scp en Streptomyces amp en Staphylococcus sp. Hg,Cd,Ni,Zn, As en Pseudomonas

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FUNCIONES FISIOLGICAS
Fijacin de N2 ..........................Rhizobium sp. Produccin de hemolisina, coagulasa, fibrinolisina.................................Staphylococcus sp Degradacin de hidrocarburos...Pseudomonas sp. Produccin de tumores....Agrobacterium tumefasciens

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BIOBALSTICA

El adn o arn que se va a introducir a la clula se introduce en un microproyectil, que se dispara a gran velocidad para romper las barreras de la clula blanco.

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