Cromatografa Gas-Lquido: En la cromatografa gas-lquido (CGL) o cromatografa de gases (CG), los componentes de una muestra que se vaporiza son

fraccionados como consecuencia de ser repartidos entre una fase gaseosa mvil y una fase estacionaria lquida mantenidas en una columna. Instrumentos para la cromatografa gas-lquido: Se utilizan ordenadores para el control automtico de la mayora de los parmetros instrumentales, tales como la temperatura de la columna, caudales y la inyeccin de la muestra. A travs de un software se pueden obtener los tiempos de retencin, rea y ancho de los picos. Componentes del cromatgrafo de gases: Gas Portador: La fase mvil gaseosa debe ser qumicamente inerte. El He es la fase mvil ms comn, aunque tambin se emplea argn, nitrgeno e hidrgeno. Estos gases se suministran en tanques presurizados. Se requieren reguladores de presin, calibradores y medidores de flujo para controlar la velocidad de flujo del gas. El sistema de gas portador contiene a menudo un tamiz molecular para eliminar el agua u otras impurezas (trampas que retiran elementos que contaminan la fase mvil). Con un medidor de pompas de jabn se puede medir la velocidad de flujo. En la trayectoria del gas se forma una pelcula de jabn cuando se exprime un bulbo de caucho que contiene una solucin de jabn, se mide el tiempo requerido para que esta pelcula se mueva entre dos graduaciones en la bureta y se convierte a velocidad de flujo.

Sistema de inyeccin de muestra: Para que la columna sea eficiente, es necesario que la muestra sea de un tamao apropiado para que pueda ser introducida en un "tapn" de vapor, la inyeccin lenta o las muestras de tamao excesivo causan un ensanchamiento de la banda y una resolucin pobre. El mtodo ms comn de inyeccin de muestra implica el uso de una microjeringa para inyectar una muestra lquida o gaseosa a travs de un diafragma o "septum" de silicona, en una cmara de vaporizacin instantnea situada en la cabeza de columna (la cmara de muestra normalmente est unos 50C por encima del punto de ebullicin del componente menos voltil de la muestra). El lquido pasa a gas en forma explosiva.

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El slit permite que gran parte de la muestra escape al exterior. De no ser as se producira saturacin, es decir, se observara una asimetra de seales.

Saturacin

Lo normal de muestra es aprox. 1/200 L. El tiempo de retencin es inversamente proporcional a la concentracin. Columnas y Fases Estacionarias: Cada fase estacionaria tiene como caracterstica: es muy grande, se

T mnima A < T que sta se produce una constante de reparto falsa. La viscosidad crea resistencia a la transferencia de masa.

T mxima A > T que sta la fase estacionaria empieza a cambiar de estado y se escapa. Pasa al estado gaseoso y abandona el sistema (proceso conocido como "sangrado"). Naturaleza de la Fase Estacionaria: La regla general dice que para separar: Sustancias apolares se compra una columna apolar. Sustancias polares se compra una columna polar.

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Tabla 24.1 Fases estacionarias de uso frecuente en cromatografa de gases Capilar

Actualmente, se requiere tener en el laboratorio tres tipos de fase estacionaria:

Apolar Semipolar Polar

Tipos de Columna: a) Columnas Capilares: Las columnas capilares o capilares abiertas son de dos tipos bsicas: capilares de pared recubierta (WCOT) : son simplemente tubos capilares con la pared interna recubierta de una capa fina de fase estacionaria lquida. Los WCOT se construan de vidrio, luego se introdujeron columnas tubulares abiertas de slice fundida. Se fabrican a partir de slice especialmente purificada con un contenido mnimo de xidos metlicos. Estos capilares tienen las paredes muchos ms delgados que sus equivalentes de vidrio. Se recubren con un polmero para

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hacerla ms flexible. La resistencia de los tubos se refuerza con un recubrimiento externo protector de piliimida. Las columnas que resultan son flexibles y pueden doblarse en forma helicoidal con un dimetro de varios centmetros. Ofrecen ventajas como resistencia fsica, una reactividad mucho menor frente a los componentes de la muestra y flexibilidad. Asimismo tienen menor capacidad de carga, pero son ms eficientes para sustancias voltiles. capilares con soporte recubierto (SCOT): la superficie interna del capilar est revestida de una fina capa (~ 30 m) de un material de soporte, tal como tierra de diatomeas. Este tipo de columnas contiene varias veces la fase estacionaria de una columna capilar de pared recubierta y por tanto, tiene una mayor capacidad de carga (no se satura tan fcilmente). La eficiencia de una columna SCOT es menor que la WCOT, pero es sensiblemente mayor que una columna de relleno.

Columna tubular abierta de pared recubierta (WCOT): la pared interior de la columna est recubierta de una fase estacionaria lquida. Columnas tubulares abiertas recubiertas de soporte (SCOT): la fase estacionaria lquida recubre un soporte slido unido a la pared interior de la columna.

b) Columnas de Relleno (Empaquetadas): En estas la fase estacionaria corresponde a una pelcula delgada de lquido colocada en la superficie de un soporte (empaque) slido inerte y finamente dividido, de modo tal que el rea de la superficie expuesta a la fase mvil sea lo ms grande posible. El empaque slido ideal consiste de pequeas partculas uniformes, esfricas, con buena resistencia mecnica y con una superficie especfica de al menos 1 m 2/g. Adems, el material debe ser inerte a las elevadas temperaturas y esta humedecido uniformemente por la fase lquida. Las actuales columnas de relleno se fabrican con tubo de vidrio, metal (acero inoxidable, cobre, aluminio) o de tefln, con una longitud caracterstica de 2 a 3 m y un dimetro interno de 2 a 4 mm. Ya estn fuera de uso, solo se emplean en cromatografa HPLC. El nmero de platos tericos (N) es funcin del largo de la columna (L). Sin embargo, N no es propio de la columna, sino que depende tambin del soluto con que se trabaja, es decir, de la naturaleza del soluto. En general, a mayor N se tiene una mejor separacin. Para mejorar la resolucin, usa una columna ms larga (aumentara el tiempo de retencin) una columna ms estrecha (disminuye la capacidad de carga) una fase estacionaria ms fina. Otra fase estacionaria (cambia la interaccin con el analito)

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Grosor del film df Al disminuir el grosor de la fase estacionaria 1. disminuye la altura de plato 2. disminuye el tiempo de retencin 3. disminuye la cantidad de analito que se puede analizar - A mayor df mayor tiempo de retencin (tr) mayor varianza (2) - A mayor temperatura de la columna menor varianza (2) y menor tiempo de retencin (tr). Cuando se separan compuestos voltiles es recomendable utilizar un df mayor. Hay otro tipo de cromatografa que trabaja la adsorcin GLC KL (constante de particin) GSC KD

Cromatografa Gas-Slido: La cromatografa gas-slido se basa en la adsorcin de sustancias gaseosas sobre superficies slidas. Los coeficientes de distribucin son generalmente mucho mayores que en el caso de la cromatografa gas-lquido. En consecuencia, la cromatografa gas-slido es til para la separacin de especies que no se retienen en columnas de gas-lquido, tales como los componentes del aire, sulfuro de hidrgeno, disulfuro de carbono, xidos de nitrgeno, monxido de carbono, dixido de carbono y gases nobles. La cromatografa gas-slido se lleva a cabo tanto en columnas de relleno como en columnas abiertas. En estas ltimas, se fija en las paredes del capilar una delgada capa del adsorbente; estas columnas a veces se denominan columnas abiertas de pared porosa, o columnas PLOT. Se encuentran dos tipos de adsorbentes: los tamices moleculares y los polmeros porosos. Anlisis Cualitativo: Vg Volumen especfico de retencin

Se debe tener un patrn para calcular Vg. Luego se compara con el Vg de la muestra y se observa si son iguales. Tambin se puede acudir a alguna referencia o Handbook de cromatografa.

Obsrvese que Vg a una temperatura dada depende solamente de la constante de distribucin del soluto y de la densidad del lquido que constituye la fase estacionaria, y como tal, debera ser en principio un parmetro til para la identificacin de la especie. Salazar-Jimnez

Tiempo de retencin relativo (t RR): Se calcula el tiempo de retencin relativo, asignando un tiempo 1 para algn compuesto. ndice de retencin (ndice de Kovats) [I]

El ndice de retencin I fue propuesto por primera vez por Kovats en 1958 como un parmetro para identificar solutos a partir de los cromatogramas. El ndice de retencin para un soluto dado puede deducirse del cromatograma de una mezcla del soluto con al menos dos alcanos normales (de cadena lineal) que tengan unos tiempos de retencin tales, que el del soluto considerado quede entre los mismos. Esto es, los alcanos normales son los patrones en los que se basa la escala de ndices de retencin. Por definicin, el ndice de retencin para un alcano normal es igual a 100 veces el nmero de carbonos del compuesto sin considerar el relleno de la columna, la temperatura u otras condiciones cromatogrficas. El ndice de retencin para todos aquellos compuestos que no sean alcanos normales vara, a menudo varios cientos de unidades de ndice de retencin, con las variables de la columna. El ndice de retencin relaciona el tiempo de retencin de un soluto con los tiempos de retenciones de los alcanos lineales. Del conjunto de alcanos lineales se busca el que tenga el pico cromatogrfico inmediatamente antes y despus del compuesto problema (X). El ndice de retencin se calcula segn:

log(t ' Rx) log(t ' Rc) I = 100 * C +100 log(t ' Rc +1) log(t ' Rc)
Donde: C: nmero de tomos que tiene la sustancia (alcano) que antecede tRx: tiempo de retencin corregido de X tRc+1: tiempo de retencin corregido del alcano que procede tRc: tiempo de retencin corregido del alcano que antecede Detector: Espectrmetro de masa

Un espectrmetro de masas es un potente detector para anlisis cualitativo y cuantitativo de analitos en cromatografa de gases y de lquidos. La espectrometra de masas es una tcnica que se basa en ionizar molculas gaseosas (de ordinario, convirtindolas en cationes), acelerarlas en un campo elctrico, y luego separarlas de acuerdo con sus masas.13 El proceso de ionizacin de ordinario suministra suficiente energa para que las molculas se rompan en diversos fragmentos. Un espectro de masas es un grfico que muestra la abundancia relativa de cada fragmento que choca con el detector de un espectrmetro de masas. Se toma el espectro de la muestra y se compara con el espectro de la biblioteca (archivos), si existe un 96% de similitud se podra tratar del compuesto del archivo.

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