SabrinaLatansioCostaRibeiro

ECONOMIADONITROGNIOEMRVORESTROPICAIS

CAMPINAS 2013

FICHA CATALOGRFICA ELABORADA POR MARA JANAINA DE OLIVEIRA CRB8/6972 BIBLIOTECA DO INSTITUTO DE BIOLOGIA - UNICAMP

L341e

Latansio, Sabrina Costa Ribeiro, 1982Economia do nitrognio em rvores tropicais / Sabrina Latansio Costa Ribeiro. Campinas, SP: [s.n.], 2013. Orientador: Marcos Silveira Buckeridge. Tese (doutorado) Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia. 1. Sucesso florestal. 2. Nitrato redutases. 3. Aminocidos. 4. Floresta ombrofila densa montana. 5. Cerrados. I. Buckeridge, Marcos Silveira. II. Universidade Estadual de Campinas. Instituto de Biologia. III. Ttulo.

Informaes para Biblioteca Digital

Ttulo em Ingls Nitrogen Economy in Tropical Trees Palavras-chave em Ingls: Sucesso florestal Nitrate reductase Aminoacids Atlantic ombrophilous dense forest Cerrados rea de concentrao: Ecofisiologia Vegetal Titulao: Doutora em Biologia Vegetal Banca examinadora: Marcos Silveira Buckeridge [Orientador] Gilberto Costa Justino Halley Caixeta de Oliveira Carlos Alfredo Joly Catarina de Carvalho Nievola Data da defesa: 16-01-2013 Programa de Ps Graduao: Biologia Vegetal

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Financiamentodotrabalho: Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo (Fapesp) no mbito dos Projetos Temticos que integram o Programa BIOTA/FAPESP: Interao biosferaatmosfera fase 2: cerrados e mudanas no uso da terra(Processon02/092899,Coordenao:Prof.Dr.HumbertoRibeirodaRochaIAG/USP)eComposio florstica, estrutura e funcionamento da Floresta Ombrfila Densa nos ncleos Picinguaba e Santa Virgnia do Parque Estadual da Serra do Mar (Processo n 03/125957, Coordenao: Prof. Dr. Carlos Alfredo Joly IB/UNICAMPeProf.Dr.LuizAntonioMartinelliCENA/USP); Projeto South East Queensland Climate Adaptation Research Initiative (SEQCARI, CSIRO Climate Adaptation National Research Flagship) (Biodiversity Vulnerability of focal habitats to climate change, Coordenao de rea: Catherine Lovelock, Greg Skilleter, Susanne Schmidt e Kerrie Wilson School of BiologicalSciences,UQ); Coordenao de Aperfeioamento de Pessoal de Nvel Superior (Capes), atravs da concesso de bolsa institucional aluna pelo perodo de 31 (trinta e um) meses e de uma bolsa de doutorado sanduche PDEE pelo perodo de 12 (doze) meses na School of Integrative Biology, University of Queensland (UQ), sob orientaodaProf.Dr.SusanneSchmidt(AssociateProfessorinPlantEcology); Conselho Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico (CNPq), atravs da concesso de bolsa institucionalalunapeloperodode05(cinco)meses. Instituiescolaboradoras: InstitutodeBotnicadoEstadodeSoPaulo(IBt/SMA),SeodeFisiologiaeBioqumicadePlantas ParqueEstadualdaSerradoMar:NcleoSantaVirgnia ParqueEstadualdeVassununga:GlbaPdegigante CentrodeEnergiaNuclearparaAgricultura(CENA/USPPiracicaba) EscolaSuperiorLuizdeQueiroz(ESALQ/USP) SchoolofIntegrativeBiology,UniversityofQueensland(UQ),BrisbaneAustrlia iv

Senohouverfrutos,valeuabelezadasflores;senohouverflores,valeua sombradasfolhas;senohouverfolhas,valeuaintenodasemente." Henfil

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Aomeuamadopai(inmemoriam) Aminhaadoradame Asminhasqueridasirms Assbiasflorestas Dedico

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AGRADECIMENTOS
Agradeoaomeuadoradopaipormedeixarumaheranadeamor,pacinciaecompreenso,pormeensinar a ter conscincia do valor do conhecimento e da importncia da firmeza em no desviar do meu caminho, sentiroseuamorelembrarmedesuassbiaspalavrasfoimeucombustvelparaescreveressaTese; A minha amada me por ser meu espelho, por me lembrar das minhas virtudes, por me ensinar a viver agradecidaeserperseverantenosmeusideais,suadourameforneceuforaparacontinuar; Aminhasqueridasirmspelaadmirvelpacinciaquetiveramcomigo,peloamorecompreensoemtodasas fases do meu trabalho, pela fora que me deram quando estive na Austrlia longe de todos os meus, e pela linda recepo que me fizeram quando voltei a pisar em terras brasileiras, o amor de vocs me incentivou muitoacontinuarminhajornadaeretomarmeutrabalhoemmeioatantasdificuldades; Ao Prof. Dr. Marcos Silveira Buckeridge por ter me acolhido com confiana, por aceitar me orientar nesse trabalhoepeloespaooferecidonoLafieco; Ao Dr. Marcos Aidar pela idealizao dessa proposta comigo, pelo companheirismo, confiana, amizade, pacincia, incentivo, pelas extensas discusses, pela ajuda irrestrita em todas as etapas deste trabalho, pela dedicaoecumplicidade; To the dearest Dr. Susanne Schmidt, for opening the opportunity to work in her lab, for the best reception I couldeverhavewhenIarrivedinAustraliaslands,forsharingwithmeherfamilymomentsmakingmefeelat home, for the friendship, for being so lovely always, for all the support on the Field expeditions, for the constructible scientific discussions, for including me on the Fraser Island Field Course, for including me on all the other works on her lab, it was the best way to learn as much as possible about ecophysiology in Aussie, thanksSusanneforbeingsoawesome,Ihaveyouasaninspirationtomyworkandlife; Ao Dr. Mateus Luis Barradas Pacincia pela super ajuda com as anlises exploratrias e multivariadas, e pelo importanteespaoamimdisponibilizadoemsuasalanosltimosperodosdeproduodaTese; vii

Ao Prof. Dr. Carlos Alfredo Joly pela oportunidade de fazer parte do Projeto Biota Gradiente e por possibilitar emmuitosaspectosaexecuodestetrabalho; A Joo Paulo Villani, chefe do Ncleo Santa Virgnia (Parque Estadual da Serra do Mar), por permitir o estudo naFlorestaepelainfraestruturadisponibilizadaparaascoletas; Ao Dr. Everton Ribeiro, chefe do Parque Estadual de Vassununga, por autorizar o estudo na Gleba Pde Gigante; Ao Programa de Psgraduao da Biologia Vegetal da Unicamp, no nome dos coordenadores Marcelo Dornelas, Eliana Forni Martins e Sandra Guerreiro, por todo o suporte e secretria Maria Roseli por toda ajuda,gentilezaeeficincia; A Fapesp pelo suporte financeiro atravs do Programa Biota que possibilitou a realizao das expedies de campoeanliseslaboratoriaisdotrabalho; ACapespelasbolsasinstitucionalesanducheconcedidas; AoCNPqpelabolsainstitucionalconcedidanosltimoscincomesesdapesquisa; AoqueridssimocolegaRenatoBelinello,oPezo,querealizouumincrveltrabalhodecoletadasplantas,sem o qual seria impossvel uma amostragem to ampla, obrigada pelas suas ideias, pela sua leveza e serenidade nos trabalhos to suados de campo, e por participar de tudo sempre to bem humorado, voc mesmo o nossoPGrandedasflorestas; A minha querida mestre Claudia Ruschel Lima, por me acompanhar no meu caminho de autoconhecimento e com isso fazer parte dessa conquista, tambm a Cristina Previdelli e ao pessoal da OPL pela fora e amor, pelasvivnciaseconvivncias,porcompartilharosucessoemeacompanharnotrajeto; viii

A Emiliano de Brito Rossi pelos momentos que se colocou disponvel para ouvir meus lamentos e angstias, compartilhar minhas alegrias e conquistas pessoais, por dividir comigo os momentos difceis de parte desse perodo to estressante que foi o de criao de uma tese de doutorado em meio doena e falecimento de meupai,etantasoutrasmudanaspessoais,agradeosuapacincia; A minha querida amiga Giseli Areias Nbrega pela fora motivacional na fase final desse trabalho, pela amizade sincera, pela invencvel parceria nas expedies de campo, pelas calorosas e construtivas discusses, pelocarinho,pelacompanhia,enfim,porsersimplesmentevoceporfazerpartedaminhavida; A minha querida amiga Fernanda Tresmondi pelas altas horas de conversas telefnicas sobre infindveis assuntos durante todo o perodo de desenvolvimento desse trabalho, pelo carinho e amizade, pacincia e compreenso,porcompartilharminhasafliesealegriascomadmirvellevezaecumplicidade; Aos colegas e amigos que participaram das exaustivas expedies de campo, sob chuva, neblina ou sol, obrigada pelo esforo e por compartilharem comigo timos momentos: Giampiero Bini Cano, Fernanda Macedo, Eduardo Rinaldi, Larissa Pereira (Larisso), Bruno Rosado, Pedro Cavalin, Andr Rochelle, Jos Ataliba, Maira Padgurschi, Viviane Camila de Oliveira (Vivi), Ewerton Manarin, Fernanda Susi (Ferdz), Pablo (Lokinho); Aos colegas e amigos que fiz na Psgraduao da Unicamp pelas altas discusses filosficas e pela amizade: Lucas Kaminski, Rafael Costa, Arildo Dias, Nivea Dias, Jlia Sfair, rico PereiraSilva, Chris Corra, Pedro Eisenlohr,ValriaMartins,CarolScultori,Rubemvila(Rubo),CarolVirillo,Lgia Sims,FelipeAmorim,Larissa Veiga (Larissinha), Lorena Fonseca, Juliano Pequeno van Melis, Leo Meirelles, Enio Sosinski, Bruno Aranha, LviaCordi,GabrielaBieberePaulinho,JananaCortinoz,AdasesMaciel; TothelovelyfriendsIvemadeinAustraliaonSusanneslab,forallthesupportonthelabwork,fieldworkand forthefriendship:RichardBradkin,NicoleRobinson,RobertPrice,JirkoHolst,JessicaVoght; E por ltimo agradeo as florestas, as rvores e a todas as entidades que as protegem, por muito me ensinarem!

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LISTADEFIGURAS
Figura1.Diagramaconceitualdomodelodeusodenitrognio(N)aolongodeumasucessoflorestalnaMata Atlntica, como proposto por Aidar et al. (2003), indicando os principais compostos nitrogenados de baixo peso molecular transportados na seiva do xilema e as tendncias dos parmetros analisados ao longo do contnuoexistenteentreasdiferentesestratgiasderegenerao,onde:leaf15Nassinaturaisotpicafoliar (); transporte na seiva do xilema (xylem sap): Arg arginina, Asn asparagina, Gln glutamina, NO3 nitrato;sucessoflorestal:earlyestgioinicialdesucesso(15anosapsabandono),midestgiomdiode sucesso(25anos),lateestgioavanadodesucesso(>36anos)(Aidaretal.2001,2003)..........................31 Figura 2. Aparato para extrao de seiva. A bomba de vcuo manual, Btubo de silicone, Cramo da planta, D suporte com filme de parafina, E reservatrio de seiva e Ffrasco com tampa de rosca (retirada de PereiraSilva2008)................................................................................................................................................41 Figura 3. Contextualizao geogrfica e localizao da rea de estudo no Parque Estadual da Serra do Mar (PESM),NcleoSantaVirgnia(SV),SoLusdoParaitingaSP..........................................................................44 Figura 4. Precipitao mdia mensal para o perodo de 1973 a 2008 nos quatro diferentes postos de precipitaodosmunicpiosdeSoLusdoParaitingaeUbatuba,SP(Martins2010)........................................46 Figura5.ContextualizaogeogrficaelocalizaodareadeestudonoParqueNacionaldeLamington(LAM), Queensland(QLD)Austrlia,mapadelocalizaodasparcelasselecionadas..................................................48 Figura 6. Balano hdrico normal segundo Thornthwaite & Mather (1955) para o perodo de 1975 a 2011, calculado com uso de dados das estaes meteorolgicas Hinze Dam (40584 28.05S 153.29L, 111 m) e MT Tamborine Fern (040197 27.97 S 153.20 L, 515m). Onde: () precipitao e () temperatura atmosfrica.Fonte:www.bom.gov.au/climate/data(AustralianGonvermentBureauofMeteorology).........50 x

Figura 7. Balano hdrico para o ano de 2010 no Parque Nacional de Lamington, QLD Austrlia, calculado comusodedadosdasestaesmeteorolgicasO'ReillysAlert(4093128.23S153.14L,913m)eHinzeDam (40584 28.05S 153.29L, 111 m). Onde: () precipitao e () temperatura atmosfrica. Fonte: www.bom.gov.au/climate/data(AustralianGonvermentBureauofMeteorology)..........................................50 Figura 8. Contextualizao geogrfica do cerrado no Brasil, localizao do Parque Estadual de Vassununga no estadodeSoPauloedaGlebaPdegigante(PDGfotoareaedistribuiodasfitofisionomiasdecerrado), emSantaRitadoPassaQuatroSP,comalocalizaodaparcelaselecionada.................................................53 Figura 9 Balano hdrico normal segundo Thornthwaite & Mather (1955), calculado com uso de dados da estaometeorolgicadoDAEE/SPC4107,paraoperodode1941a1970emSantaRitadoPassaQuatro/SP. Onde:()precipitao,()temperaturaatmosfrica,()evapotranspiraoreale()dficithdrico..55 Figura10Balanohdricoparaoanode2008nomunicpiodeSantaRitadoPassaQuatro,SP(Dadosobtidos em CIIAGRO http://www.ciiagro.sp.gov.br/ciiagroonline/). Onde: () precipitao, () temperatura atmosfrica,()evapotranspiraoreale()dficithdrico...........................................................................55 Figura11.Ordenao(PCA)das41espciesestudadasemSV,esuasdiferentesestratgiasderegenerao(Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no vero, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeN naseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato, NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela1..........................................................62 Figura12.Ordenao(PCA)das41espciesestudadasemSV,esuasdiferentesestratgiasderegenerao(Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeN naseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato, NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela1..........................................................63 xi

Figura 13. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) nas classes sucessionais das 41 espciesestudadasnaFlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar(PESM),Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)........................................................................................64 Figura 14. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenassignificativasparap<0,05(*)..............................................................................................................65 Figura15.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%)nasclassessucessionaisdas41 espciesestudadasnaFlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar(PESM),Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)........................................................................................66 Figura 16. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) nas classes sucessionais das 41 espciesestudadasnaFlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar(PESM),Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg = arginina, Asn = asparagina, Asp = cido asprtico, Gln = glutamina, Glu = glutamato, NO3=nitrato,outrosaa=somadosoutros20aminocidos.............................................................................67 Figura17.Razocarbono/nitrogniofoliar(CN)nasclassessucessionaisdas41espciesestudadasnaFloresta OmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar(PESM),NcleoSantaVirgnia(SV),SoLusdo Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*).............................................................................................................................................................68 xii

Figura18.Abundncianaturaldoistopoestvel15Nfoliar(15N)nasclassessucessionaisdas41espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenassignificativasparap<0,05(*)..............................................................................................................69 Figura 19. rea foliar especfica (AFE cm2.g1 MS) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativasparap<0,05(*)................................................................................................................................69 Figura20.Densidadedamadeira(DMg.cm3)nasclassessucessionaisdas41espciesestudadasnaFloresta OmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar(PESM),NcleoSantaVirgnia(SV),SoLusdo Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*).............................................................................................................................................................70 Figura 21. Disponibilidade de nitrato (NO3) e amnio (NH4+) (g.g1) no solo da Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, emduasestaesdoano(veroeinverno).Asbarrasrepresentamodesviopadro......................................71 Figura 22. Ordenao (PCA) das 24 espcies estudadas em LAM, e suas diferentes estratgias de regenerao (Si,StePi),baseadanosvaloresde11variveisavaliadasnovero,sendo:%N%deNfoliartotal,CNrazo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeN naseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato, NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela2..........................................................84 xiii

Figura 23. Ordenao (PCA) das 24 espcies estudadas em LAM, e suas diferentes estratgias de regenerao (Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar, 15N abundncia natural do istopo 15N foliar e %NXxx % do composto relativamente % totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Glu glutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela2........................................85 Figura 24. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) nas classes sucessionais das 24 espciesestudadasnaFlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamington(LAM),Queensland(QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*).............................................................................................................................................................86 Figura 25. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*).............................................................................................................................................................87 Figura26.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%)nasclassessucessionaisdas24 espciesestudadasnaFlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamington(LAM),Queensland(QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*).............................................................................................................................................................88 Figura 27. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) nas classes sucessionais das 24 espciesestudadasnaFlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamington(LAM),Queensland(QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundriatardia,Nnomedocomposto=%docomposto relativo%totaldeNnaseiva,Arg=arginina,Asn = asparagina, Asp = cido asprtico, Gln = glutamina, Glu = glutamato, NO3 = nitrato, outros aa = soma dos outros20aminocidos.........................................................................................................................................89 xiv

Figura28.Razocarbono/nitrogniofoliar(CN)nasclassessucessionaisdas24espciesestudadasnaFloresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)............................90 Figura29.Abundncianaturaldoistopoestvel15Nfoliar(15N)nasclassessucessionaisdas24espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*).............................................................................................................................................................90 Figura 30. rea foliar especfica (AFE cm2.g1 MS) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaesdoano(veroeinverno).Onde,Pi=pioneira,Si=secundriainicial,St=secundriatardia.Asbarras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)............................91 Figura31.Densidadedamadeira(DMg.cm3)nasclassessucessionaisdas24espciesestudadasnaFloresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)............................92 Figura 32. Disponibilidade de nitrato (NO3 g.g1) no solo da Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). As barras representamodesviopadro..............................................................................................................................93 Figura 33. Ordenao (PCA) das 27 espcies estudadas no PDG, e suas classes fenolgicas (D,S e P), baseada nosvaloresde11variveisavaliadasnovero,sendo:%N%deNfoliartotal,CNrazocarbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar, 15N abundncia natural do istopo 15N foliar e %NXxx % do composto relativamente % total de N na seiva, onde Xxx = Arg arginina, Asn asparagina, Asp cido asprtico, Gln glutamina, Glu glutamato, NO3 nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela3...................................................................100 xv

Figura 34. Ordenao (PCA) das 27 espcies estudadas em PDG, e suas classes fenolgicas (D, S e P), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeN naseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato, NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela3........................................................101 Figura 35. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa RitadoPassaQuatroSP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S=semidecdua,P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*)...........................................................................................................................................................102 Figura 36. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..........................103 Figura 37. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05 (*).......................................................................................................................................................................104 Figura38.ConcentraodeNO3foliar(NO3folhamol.g1MF)emtrsclassesdas27espciesestudadasna rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..............................................................104 xvi

Figura 39. Contedo de N sob a forma de NO3 na seiva do xilema (NNO3 %) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa RitadoPassaQuatroSP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S=semidecdua,P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05(*)...........................................................................................................................................................105 Figura40.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%)emtrsclassesdas27espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..........................105 Figura 41. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa RitadoPassaQuatroSP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S=semidecdua,P = pereniflia, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg = arginina, Asn = asparagina, Asp = cido asprtico, Gln = glutamina, Glu = glutamato, NO3 = nitrato, outros aa = soma dos outros20aminocidos.......................................................................................................................................107 Figura 42. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg = arginina, Asn = asparagina, Asp = cido asprtico, Gln = glutamina, Glu = glutamato, NO3 = nitrato, outros aa = soma dos outros 20 aminocidos.......................................................................................................................................................108 xvii

Figura 43. Razo carbono/nitrognio foliar (CN) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..........................109 Figura 44. Razo carbono/nitrognio foliar (CN) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)...........................................................................109 Figura 45. Abundncia natural do istopo estvel 15N foliar (15N ) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas para p<0,05 (*).......................................................................................................................................................................110 Figura 46. Abundncia natural do istopo estvel 15N foliar (15N ) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..........................110 Figura 47. rea foliar especfica (AFE cm2.g1 MS) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..........................111 xviii

Figura 48. rea foliar especfica (AFE cm2.g1 MS) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)...........................................................................112 Figura 49. Densidade da madeira (DM g.cm3) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)..........................113 Figura 50. Densidade da madeira (DM g.cm3) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*)...........................................................................113 Figura 51. Disponibilidade de nitrato (NO3 e NH4+ g.g1) no solo do cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno).Asbarrasrepresentamodesviopadro.............................................................................................115 Figura52.Ordenao(PCA)dasespciesdastrsreasestudadas(SV,LAMePDG),baseadanosvaloresde11 variveis avaliadas no vero, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividadedaenzimanitratoredutase,NO3folhaconcentraodenitratofoliar,15Nabundncianaturaldo istopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina, Asn asparagina, Asp cido asprtico, Gln glutamina, Glu glutamato, NO3 nitrato. Os cdigos das espciesestorepresentadosnasTabelas1,2e3............................................................................................122 xix

Figura53.Ordenao(PCA)dasespciesdastrsreasestudadas(SV,LAMePDG),baseadanosvaloresde11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividadedaenzimanitratoredutase,NO3folhaconcentraodenitratofoliar,15Nabundncianaturaldo istopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina, Asn asparagina, Asp cido asprtico, Gln glutamina, Glu glutamato, NO3 nitrato. Os cdigos das espciesestorepresentadosnasTabelas1,2e3............................................................................................123

xx

LISTADETABELAS
Tabela1.Listadas41espciesselecionadasemduasparcelasdoProjetoBiotaGradienteFuncional,noParque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP. Siglas: cod cdigo da espcie, n nmero de indivduos, ER estratgia de regenerao das espcies onde, Pi = pioneira, Si = secundriainicialeSt=secundriatardiaeIVIndicedeValordeImportncia..............................................45 Tabela 2. Lista das 24 espcies selecionadas nas parcelas do Projeto IBISCAQueensland, no Parque Nacional deLamington(LAM),Queensland(QLD)Austrlia.Siglas:codcdigodaespcie,nnmerodeindivduos, ERestratgiaderegeneraodasespciesonde,Pi=pioneira,Si=secundriainicialeSt=secundriatardia e IVI ndice de Valor de Importncia. As espcies marcadas com o smbolo (*) encontravamse fora das parcelaslevantadas,portanto,notmvalordeIVI............................................................................................49 Tabela 3. Lista das 27 espcies selecionadas na rea decerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba P degigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP. Siglas: cod cdigo da espcie, n nmero de indivduos, hbito hbito fenolgico da espcie, onde D = decdua, S = semidecdua e P = pereniflia e IVI ndice de ValordeImportncia............................................................................................................................................54 Tabela 4. Colonizao radicular total (CRT %) e colonizao radicular por micorriza arbuscular (CA %) mdias, das amostras de raz em solo retirado da Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero einverno).Desviopadroentreparntesis.........................................................................................................71 Tabela 5. Colonizao radicular total (CRT %) e colonizao radicular por micorriza arbuscular (CA %) mdias, das amostras de raz em solo retirado da Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padro entreparntesis...................................................................................................................................................92 xxi

Tabela 6. Colonizao radicular total (CRT %) e colonizao radicular por micorriza arbuscular (CA %) mdias, das amostras de raz em solo retirado do cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pde gigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padro entreparntesis.................................................................................................................................................114 Tabela 7. Valores mdios de ANR (pkat.g1 MF), NO3 folha (mol.g1 MF), razo CN e 15N (), das espcies nas reas estudadas (SV, LAM e PDG), em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padro entre parntesis...........................................................................................................................................................124 Tabela8.ValoresmdiosdeAFE(cm2.g1MS)eDM(g.cm3)dasespciesnasreasestudadas(SV,LAMePDG), emduasestaesdoano(veroeinverno).Desviopadroentreparntesis..................................................125 Tabela 9. Valores mdios de CRT (%) e CA (%) das amostras de raz em solo retirado das reas estudadas (SV, LAMePDG),emduasestaesdoano(veroeinverno).Desviopadroentreparntesis.............................125 Tabela A1. Valores mdios foliares da ANR (pkat.g1 MF), contedo de N (%), 15N () e NO3 folha (mol.g1 MF) das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde,Pi=pioneira,Si=secundriainicial,St=secundriatardia.Desviopadroentreparntesis................170 Tabela A2. Valores mdios foliares da ANR (pkat.g1 MF), contedo de N (%), 15N () e NO3 folha (mol.g1 MF) das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland(QLD)Austrlia,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,Pi=pioneira,Si=secundria inicial,St=secundriatardia.Desviopadroentreparntesis..........................................................................171 Tabela A3. Valores mdios foliares da ANR (pkat.g1 MF), contedo de N (%), 15N () e NO3 folha (mol.g1 MF) das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua,P=pereniflia.Desviopadroentreparntesis.........................................................................172 xxii

ABREVIATURAS
aa ANR Aminocidos Atividadedaenzimanitratoredutase Concentraodenitratofoliar Teorrelativodenitratonaseivadoxilema Teorrelativodenitratonaseivadoxilema Teorrelativodecidoasprticonaseivadoxilema Teorrelativodeasparaginanaseivadoxilema Teorrelativodeargininanaseivadoxilema Teorrelativodeglutaminanaseivadoxilema Teorrelativodeglutamatonaseivadoxilema reafoliarespecfica CerradosensustrictodoParqueEstadualdeVassununga,GlbaPdegigante ParqueEstadualdaSerradoMar Colonizaopormicorrizas Colonizaoradiculartotalpormicorrizas Colonizaoradicularpormicorrizaarbuscular Densidadedamadeira Espciesseundriastardiasnasucessoflorestal Espciessecundriasiniciaisnasucessoflorestal Espciespioneirasnasucessoflorestal Espciestransportadorasdearginina Espciestransportadorasdeasparagina Espciestransportadorasdeglutamina Espciesdehbitofenolgicodecduo Espciesdehbitofenolgicosemidecduo Espciesdehbitofenolgicopereniflio FlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar,NcleoSantaVirgnia FlorestaSubtropicalmidaMontanadoParqueNacionaldeLamington,Austrlia Istopoestvel15Nfoliar xxiii

NO3folha NO3seiva %NNO3 %NAsp %NAsn %NArg %NGln %NGlu AFE PDG

PESM MIC CRT CA DM St Si Pi

TrARG TrASN TrGLN D S P SV

LAM 15N

Nr NOx CN

Nitrognioreativo xidosdenitrognio RazoCarbono/Nitrogniofoliar Sulfanilamida N(1Naftil)etilenodiamidadiidroclordeo CloretodeVandioIII

SULF NEDD VCl3

xxiv

RESUMO
EconomiadoNitrognioemrvoresTropicaisDiantedaurgentenecessidadedemaisinformaessobreos mecanismos fisiolgicos e ecolgicos que regulam o crescimento das plantas e a composio de espcies nas comunidades vegetais tropicais, que possam elucidar a dinmica do nitrognio (N) nos processos biogeoqumicos de ciclagem interna e das caractersticas ecofisiolgicas das espcies nessas comunidades, e auxiliar na compreenso sobre a funcionalidade do ciclo do N nos ecossistemas tropicais queesto altamente ameaadospelas mudanas no clima e por presses antrpicas, buscouse com o presente trabalho ampliar o conhecimento sobre as capacidades de assimilao, transporte, estocagem e reciclagem de N nas espcies arbreas de uma Floresta Ombrfila Densa Montana do estado de So Paulo, uma Floresta Montana Subtropical Australiana e um cerrado sensu stricto do estado de So Paulo. Para isso, avaliaramse os seguintes parmetros: atividade da enzima nitrato redutase (ANR); contedo de nitrato (NO3) nos tecidos foliares; contedo de N e C totais (%N, %C, e razo CN) e composio isotpica (15N) foliares; concentrao de compostos nitrogenados na seiva do xilema (aminocidos, amidas e NO3); disponibilidade de NO3 e NH4+ no solo atravs do uso de resina de troca inica; ocorrncia de simbiose radicular (micorriza) e identificao das espcies atravs dos esporos encontrados no solo; rea foliar especfica (AFE) e densidade da madeira (DM). Demonstrouse que mesmo em diferentes ecossistemas, o desempenho das plantas parece seguir algunspadresdeeconomianousodorecursoN,queconcordamcomosteoremaseconmicosquepreveem comoolucrodevesermaximizadocomosrecursosotimamentealocados,propostosporBloometal.(1985)e se encaixam no modelo proposto por Aidar et al. (2003) que preveem a existncia de um contnuo de estratgias entre plantas de diferentes grupos funcionais, e desse modo, numa anlise da economia do N em rvores tropicais, mostrouse que coexistem rvores com estratgias diferentes mas igualmente econmicas. Nesse contexto, trs grupos funcionais se destacaram: o de espcies da classe mais tardia na sucesso florestal (St) e das pertencentes principalmente famlia Myrtaceae no cerrado (TrARG), que adotam uma estratgiamaisconservativanousodoN,baseadanoestoqueereciclagemdereservasinternas,sustentando ciclo de vida longo, crescimento lento e folhas mais longevas, so caracterizadas pelo transporte de arginina na seiva do xilema, alta razo CN, baixa ANR, alta DM e baixa AFE; o de espcies da classe inicial da sucesso florestal (Pi) e de outras quatro espcies do cerrado pertencentes diferentes famlias (Araliaceae, Anonnaceae, Apocinaceae, Myristicaceae) (TrGLN), que adotam uma estratgia mais especialista e de alto custo no uso do N, que compensada pelo acoplamento da assimilao do NO3 diretamente fotossntese, sustentam ciclo de vida curto e crescimento rpido que demanda alta luminosidade, so caracterizadas pelo xxv

transporte de NO3 e/ou Gln, Asn na seiva do xilema, baixa razo CN, alta ANR, baixa DM e alta AFE; e o de espcies da classe secundria inicial da sucesso florestal (Si) e pertencentes principalmente famlia Leguminosae no cerrado (TrASN), que ajustam a alocao dos recursos at igualar o efeito de todos os recursos na limitao ao crescimento ou se ajustam fisiologicamente mudanas na disponibilidade dos recursos para reduzir a taxa de cmbio fazendo um balano entre as reservas internas e externas numa proporo tima para o crescimento, sustentando assim estratgias mais variveis entre os dois extremos anteriores, com ANR e AFE mdios, alta DM como nas primeiras, baixa razo CN como nas segundas e transportando Asn alm de diversos outros compostos tambm eficientes nessa funo como Arg, e so caracterizadas por uma alta plasticidade no uso dos recursos. Concluiuse que os melhores indicadores dessa economia do N nas rvores tropicais so os compostos transportados na seiva do xilema, mas tambm o contedo de N e a razo CN, ANR, AFE e DM so importantes na definio dessas estratgias. Confirmouse a validade do modelo de uso de N proposto por Aidar et al. (2003) ao incluir as plantas de uma Floresta Ombrfila Densa Montana, concedeuse ao mesmo uma amplitude Intercontinental ao inserir as plantas de umaFlorestaSubtropicalMontanaAustralianaeadicionouseumanovaperspectivaemrelaoaocerradoao aplicaressemodelo plantas do cerrado, que se utilizam das mesmas estratgias de uso de N propostas pelo modelo,pormemgruposfuncionaisdiferentesquenodemonstramsucessocronolgicaclaracomoosdas plantasnasflorestas. Palavraschave:sucessoflorestal,nitratoredutase,aminocidos,florestamontana,cerrado,mataatlntica, gruposfuncionais xxvi

ABSTRACT
Nitrogen Economy in Tropical Trees There is an urgent need to better understand physiological and ecological mechanisms that regulate plant growth and species composition in tropical plant communities. Nitrogen (N) dynamics of vegetation interact with biogeochemical processes of internal cycling and on ecophysiological traits of those species, and likewise assist the comprehension about the N cycle funcionality intropicalecosystemsthatarehighlythreatenedbytheclimatechangesandanthropicalpressures,weaimed, in the present research, to broaden the knowledge on aquisition capacity, transport, storage and recycling of NintreespeciesofanOmbrophillDenseMontaneForestofSoPauloState,aSubtropicalMontaneForestof AustraliaandacerradosensustrictoofSoPauloState.Weevaluatedthefollowingparameters:nitrate(NO3) reductase activity (NRA); NO3 and total N and C concentrations (%N, %C, and CN ratio) and isotopic composition (15N) of leaf tissues; N compounds of the xylem sap (aminoacids, amides and NO3); availability of NO3 and NH4+ in the soil using ion exchange resin bags; ocurrence and species identification of root symbiosis (mychorriza); specific leaf area (SLA) and wood density (WD). We demonstrated that even in different ecossystems, plant establishment and success follows some economical patterns in terms of N use, whichagreewiththeeconomictheoremsthatassumethateveryprofitmustbemaximizedtowardanoptimal allocation of resources, as proposed by Bloom et al. (1985), and which fit the model proposed by Aidar et al. (2003)thatassumestheexistenceofacontinuumofstrategiesamongplantsfromdifferentfunctionalgroups. Hence, an economic analysis of N in tropical trees showed that coexistent trees are able to deal with N using peculiar but equally profitable strategies. Thus, three functional groups stand out: firstly the group of late sucessionalspecies(St)andtheonesbelongingtotheMyrtaceaefamilyinthecerrado(TrARG),whichadopta more conservative strategy on the N use, based on storage and recycling of internal reserves, therefore sustaining a long life cycle, slow growth and long leaf life span, and caracterized by the preference of arginine asatransportcompoundonthexylemsap,highCNratio,lowNRA,highWDandlowSLA;secondlythegroup of pioneer species (Pi) and four cerrado species of specific families (Araliaceae, Anonnaceae, Apocinaceae, Myristicaceae) (TrGLN), which adopt a more specialized strategy marked by high costs on the N use, that are compensatedbycouplingNO3uptaketophotosynthesis,therebysustainingashortlifecycleandrapidgrowth (that demand high light), and are characterized by the transport of NO3 and glutamine or asparagine in the xylemsap,lowCNratio,highNRA,lowWDandhighSLA;andthirdlythegroupofearlysucessionalspecies(Si) andtheonesbelongingmainlytotheLeguminosaefamilyinthecerrado(TrASN),whicheitheradjustresource allocationinordertoachieveanequalinfluenceofallresourcesongrowthlimitation,oradjustphysiologically xxvii

to the resources availability changes by reducing the exchange ratio through balancing the internal and external reserves approaching optimal proportions to benefit growth, therefore sustaining more variable strategies between both previous extremes, exhibiting average NRA and SLA, high WD as the former, low CN ratio as the latter, and transporting asparagine as well as arginine (also functionally efficient), being thus characterized by high plasticity on resource use. We conclude that the most suitable indicators in terms of N economyontropicaltreestodefinethosestrategiesarethexylemsapNcompounds,butNcontent,CNratio, and NRA, as well as SLA and WD are also important. In summary, we validated the N use model proposed by Aidaretal.(2003)byprovidingnewevidencesfromanOmbrophillDenseMontaneForestofBrasil,raiseditto an Intercontinental range by including plants of a Subtropical Montane Forest of Australia, and placed it in a new perspective related to cerrado ecosystem plants, that performed the same N use strategies as suggested by the model, however with different functional groups that do not fit in a clear cronological sucession as the forestplantsdo. Keywords: forest sucession, nitrate reductase, aminoacids, montane forest, cerrado, atlantic forest, functionalgroups xxviii

SUMRIO AGRADECIMENTOS............................................................................................................................................... VII LISTADEFIGURAS................................................................................................................................................... X LISTADETABELAS................................................................................................................................................ XXI ABREVIATURAS.................................................................................................................................................. XXIII RESUMO.............................................................................................................................................................. XXV ABSTRACT ......................................................................................................................................................... XXVII 1.INTRODUO ..................................................................................................................................................... 1 2.JUTIFICATIVAS .................................................................................................................................................... 3 3.REVISOBIBLIOGRFICA ................................................................................................................................... 7 3.1.ONitrognio................................................................................................................................................. 7 NutrioeoelementoN ................................................................................................................................. 7 Oligotrofiaeasinovaesnutricionais ........................................................................................................... 7 OciclobiogeoqumicodoNeasplantas ........................................................................................................ 8 UsodeNpelasplantasabsoroeassimilao ........................................................................................ 10 UsodeNpelasplantasestoqueeremobilizao....................................................................................... 14 UsodeNnascomunidadesvegetaisasucessoflorestal ......................................................................... 16 3.2.Alteraodociclopelohomem.................................................................................................................. 18 3.3.Nitrognionosecossistemastropicais....................................................................................................... 22 CiclagemdeNnosecossistemastropicais .................................................................................................... 22 OparadoxodoNnasflorestastropicais....................................................................................................... 24 Florestasmontanas....................................................................................................................................... 25 FlorestasnoBrasileAustrlia....................................................................................................................... 27 UsodeNporplantasdeflorestastropicaisnoBrasileAustrlia ................................................................. 29 3.4.Nitrognionassavanastropicais............................................................................................................... 31 Savanastropicaisnomundo ......................................................................................................................... 31 SavanabrasileiraCerradonoestadodeSoPaulo ................................................................................... 33 xxix

3.5.reafoliarespecficaedensidadedamadeira .......................................................................................... 35 4.OBJETIVOSEHIPTESES............................................................................................................................38 5.MATERIALEMTODOS .............................................................................................................................39 5.1.MaterialVegetal ........................................................................................................................................ 39 5.1.1.Seleoecaracterizaodasespciesvegetaisestudadas................................................................ 39 5.1.2.Estratgiadecoletaedesenhoexperimental..................................................................................... 40 5.1.3.FlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar,NcleoSantaVirgnia(SV) ....................................................................................................................................................................... 42 5.1.4.FlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamingtom(LAM) ............................................. 47 5.1.5.CerradosensustrictodoParqueEstadualdeVassununga,GlebaPdegigante(PDG) ................... 51 5.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) ............................................................................................. 56 5.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) .............................................................................................. 56 5.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(NO3seiva) .................................................................................... 57 5.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema....................................................................................... 57 5.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) .................................................................................................. 58 5.7.reafoliarespecfica(AFE) ........................................................................................................................ 58 5.8.Densidadedamadeira(DM)...................................................................................................................... 58 5.9.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) ...................................................... 59 5.10.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo ................................................................................................... 59 5.11.Tratamentoestatstico............................................................................................................................. 60 6.RESULTADOSEDISCUSSO .......................................................................................................................61 6.1.FlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar,NcleoSantaVirgnia(SV)... 61 6.1.1.AnlisedeordenaoSV .................................................................................................................. 61 6.1.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) ...................................................................................... 64 6.1.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) ....................................................................................... 65 6.1.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(%NNO3)................................................................................ 65 6.1.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema................................................................................ 66 6.1.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) ........................................................................................... 67 6.1.7.Istopoestvel15Nnafolha(15N) ..................................................................................................... 68 xxx

6.1.8.reafoliarespecfica(AFE) ................................................................................................................. 69 6.1.9.Densidadedamadeira(DM) ............................................................................................................... 70 6.1.10.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) ............................................. 70 6.1.11.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo............................................................................................. 71 6.1.12.DiscussoSVOModelodousodeNnaFlorestaOmbrfilaDensaMontana............................... 72 6.2.FlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamington(LAM) ..................................................... 83 6.2.1.AnlisedeordenaoLAM............................................................................................................... 83 6.2.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) ...................................................................................... 86 6.2.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) ....................................................................................... 87 6.2.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(%NNO3)................................................................................ 87 6.2.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema................................................................................ 88 6.2.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) ........................................................................................... 89 6.2.7.Istopoestvel15Nnafolha(15N) ..................................................................................................... 90 6.2.8.reafoliarespecfica(AFE) ................................................................................................................. 91 6.2.9.Densidadedamadeira(DM) ............................................................................................................... 91 6.2.10.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) ............................................. 92 6.2.11.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo............................................................................................. 93 6.2.12.DiscussoLAMOModelodeusodeNemumaFlorestaSubtropicalAustraliana........................ 93 6.3.CerradosensustrictodoParqueEstadualdeVassununga,GlebaPdegigante(PDG) .......................... 98 6.3.1.AnlisedeordenaoPDG ............................................................................................................... 98 6.3.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) .................................................................................... 102 6.3.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) ..................................................................................... 103 6.3.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(%NNO3).............................................................................. 105 6.3.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema.............................................................................. 106 6.3.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) ......................................................................................... 108 6.3.7.Istopoestvel15Nnafolha(15N) ................................................................................................... 110 6.3.8.reafoliarespecfica(AFE) ............................................................................................................... 111 6.3.9.Densidadedamadeira(DM) ............................................................................................................. 112 6.3.10.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) ........................................... 114 6.3.11.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo........................................................................................... 114 6.3.12.DiscussoPDGOusodeNporplantasdeCerrado ..................................................................... 115 xxxi

6.4.Anlisegeralcomparandoasreasestudadas ....................................................................................... 121 6.5.Discussogeralanlisesdesolo ........................................................................................................... 125 6.6.DiscussogeralEconomiadousodeNemrvorestropicais ............................................................... 130 7.CONSIDERAESFINAIS..........................................................................................................................139 8.REFERNCIASBIBLIOGRFICAS ...............................................................................................................143 ANEXO1SV..............................................................................................................................................170 ANEXO2LAM ..........................................................................................................................................171 ANEXO3PDG...........................................................................................................................................172

xxxii

1.INTRODUO
A floresta atlntica brasileira, bem como o cerrado, vem sofrendo crescentes presses antrpicas e poucos remanescentes ainda restam dessas formaes vegetais no Brasil. Em relao primeira, estes esto nasuamaioralocalizadosnolitoraldoestadodeSoPaulo,eossegundosestoconcentradosprincipalmente naregiocentraldoBrasil,pormnolimitesuldesuaocorrncia,noestadodeSoPaulo,queseconcentra a maior biodiversidade nessa vegetao (Weiser & Godoy 2001), justamente pelo maior contato com as florestas atlnticas. Ambos foram considerados por Myers et al. (2000) como hotspots para a conservao da biodiversidade, dentre outros motivos, devido ao algo grau de ameaa que sofrem e por terem mais de 70%desuasreasoriginaisjdesmatadas. Similarmente, do outro lado do planeta, a floresta subtropical mida australiana tambm se restringe atualmente a poucas reas (Steffen et al. 2009), principalmente ao sul do estado de Queensland, sofre crescentes presses antrpicas (Mackey et al. 2008), e abriga uma enorme riqueza de espcies vegetais com alta significncia biolgica, possuindo 13 das 19 famlias de angiospermas primitivas ainda existentes (Vandernbeld1988),eestoentreosecossistemasmaisameaadosdomundo(Malcometal.2006). Por outro lado, apesar da urgncia em se proteger estes remanescentes florestais, o que pressupe o conhecimento sobre o funcionamento das comunidades vegetais que os compe, relativamente pouco se sabesobreascaractersticasecofisiolgicasdavegetao.Almdisso,osestudossobreocomportamentodas espcies do ponto de vista da sucesso ecolgica ainda so escassos e tm se limitado principalmente Mata Atlntica (Gandolfi et al. 1995, Gandolfi 2000, Aidar et al. 2001; Aidar et al. 2003, Godoy 2007, Campos 2009, Silva 2012, Marchiori 2012), mas nestes, tmse observado um avano, traduzido atravs de propostas de investigao de outras evidncias que influenciam o carter sucessional e as estratgias de regenerao das espcies, na tentativa de melhorar o entendimento do processo de sucesso de uma comunidade vegetal (PereiraSilva2008). A organizao das espcies em grupo ecofisiolgicos traz informaes de que a sucesso secundria e a dinmica da regenerao so intimamente relacionadas e dependem de diversos fatores que determinam quaisespciesdacomunidadeteroxitonoestabelecimento(Bazzaz&Picket1980,Whitmore1996). Ento, considerando que o crescimento e estabelecimento das plantas essencialmente limitado pelo elemento N (nitrognio) (Rennenberg et al. 2009), dentre outros aspectos, o estudo da ciclagem do N nas comunidades vegetais de grande importncia para o entendimento dessas e para subsidiar futuras 1

intervenesnasmesmasnosentidodepreservaoe/ouconservao. Nesse contexto, o presente trabalho investigou a ecofisiologia do uso do N em trs ecossistemas altamente ameaados: a Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia, ao litoral do estado de So Paulo Brasil; a Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington, ao sul do estado de Queensland Austrlia; e o cerrado sensu stricto do Parque Estadual de Vassununga, Glba PdeGigante, ao nordeste do estado de So Paulo Brasil; de forma a gerar ferramentas que contribuam para futuros projetos de recuperao de reas degradadas nos domnios fitogeogrficos relacionados, bem como fornecer informaes teis para a modelagem utilizada em previses de possveis efeitos da deposio de N nos ecossistemas estudados ou outros agravantes provocados pelas mudanasnoclimaglobal,equipossibilitaroplanejamentoderemediaodessesefeitosnavegetao.

2.JUTIFICATIVAS
Os aspectos de grande diversidade, endemismos e alto grau de ameaa aos ecossistemas tidos como foco desteestudo,levaraminclusodaMataAtlnticaedocerradobrasileirocomodoisdosprincipaishotspots paraaconservaodabiodiversidade(Myersetal.2000)(http://www.biodiversityhotspots.org/xp/Hotspots/) e das florestas midas australianas como patrimnio natural da humanidade (http://whc.unesco.org/). Mas apesar da importncia destes para a conservao da biodiversidade, so praticamente desconhecidas as caractersticas do metabolismo primrio de N das espcies vegetais que ocorrem nos remanescentes desses ecossistemasnoestadodeSoPaulo(Brasil)enoestadodeQueensland(Austrlia). Aidaretal.(2003)indicamqueasespciesarbreasqueocorremaolongodasucessoflorestalsobresolo eutrfico no alto Vale do Ribeira de Iguape, sul do estado de So Paulo, apresentam um contnuo de estratgias no uso de N, com dois extremos marcados por plantas pioneiras e tardias, que usam NO3 e reciclam N interno respectivamente. O trabalho de PereiraSilva (2008) em Floresta Ombrfila Densa Baixo Montana (300 m) no Parque Estadual de Carlos Botelho, sul do estado de So Paulo, sob solo cido e distrfico, indicou que as espcies pioneiras utilizam principalmente NO3 como fonte de N. Tambm o trabalho de Campos (2009) em Floresta Ombrfila Densa de Terras Baixas (100 m) no PESM, Ncleo Picinguaba, norte do estado de So Paulo, indica a existncia desse contnuo de estratgias de uso de N pelas plantasaolongodasucesso,estandodeacordocomomodelopropostoporAidaretal.(2003). Alm destes trabalhos, o estudo de PereiraSilva (2009), que avaliou as plantas uma Floresta Ombrfila Densa de Terras Baixas (PESM) no centrosul do estado de So Paulo, demonstrou a existncia do mesmo contnuo de estratgias de uso de N pelas espcies numa sucesso florestal, validando o modelo inicialmente propostoporAidaretal.(2003)naquelacomunidade,ecomisso,mudouaabrangnciadessemodelodelocal pararegional. Na Austrlia, o trabalho de Stewart et al. (1988) indicou que as espcies pioneiras de uma floresta mida no sudeste do estado de Queensland, Parque Nacional de Lamington, tm potencial para uso de NO3 enquanto que as demais espcies parecem se utilizar de outras fontes de N, porm no houve investigao maisprofundacomrelaoaoqueacontecenasoutrasclassessucessionais. EmrelaoaoCerrado,praticamentenenhumtrabalhoabordouemprofundidadeoestudodapreferncia quanto ao uso de N pelas espcies. PereiraSilva et al. (2006) indicaram que 30 espcies lenhosas presentes em um cerrado na Estao Ecolgica de Jata, Lus Antnio (SP) apresentam baixa ANR, sugerindo que no 3

utilizam NO3 como principal fonte de N do solo. Os autores tambm mostraram que, de modo geral, o contedo de N foliar foi bastante baixo nestas espcies, quando comparados aos valores de espcies florestais,sugerindoqueaqueleumambientepobreemN.Deacordo,Macedoetal.(2006),emestudocom a espcie Anadenanthera falcata do Cerrado sensu stricto da Gleba Pdegigante, que mostrou clara prefernciapelousodeNH4+,corroborouaafirmaodequeoNH4+aprincipalmentefontedisponveldeN emreasdeCerrado,comoindicadoporNardotoeBustamante(2003).Porm,poucainformaoexistesobre aecofisiologiadousodeNporespciesdeCerrado. Existe uma grande ameaa do aquecimento climtico global como resultado da intensificao do efeito estufa provocado pelas emisses atmosfricas de origem antrpica, que tem provocado crescente preocupaoedebatenosltimosanos.Umconsensodequeasalteraesclimticasprevistastrarosrias consequencias para todos os ecossistemas (Vituosek et al. 1997), principalmente os j bastante ameaados focosdesteestudo,almdegrandeimpactosobreoestilodevidacontemporneo. Muitos autores indicam que as atividades humanas j dobraram a taxa de entrada do N nos ecossistemas terrestres resultando em srios impactos (Vituosek et al. 1997). Estes mesmos autores apontam que florestas e reas midas variam significativamente em relao suas capacidades de reteno de N, e que o estado atual do conhecimento na rea ainda muito restrito. O principal problema que a compreenso dos possveis efeitos das alteraes climticas globais e os impactos da deposio de N sobre a estabilidade e funcionamento dos ecossistemas ainda incipiente, mais ainda devido ao escasso conhecimento que se tem sobre o funcionamento dos ecossistemas antes mesmo de sofrerem qualquer alterao. Phoenix et al. (2006) indicam que a deposio de N nos hotspots de Mata Atlntica e Cerrado vem aumentando muito nos ltimos anos e a previso de que atinjam valores acima daqueles considerados crticos, podendo levar espcies adaptadas baixa disponibilidade de N excluso competitiva. O que refora a importncia do presenteestudonessesecossistemas. Alm disso, muita ateno vem sendo dada nos ltimos anos contribuio potencial dos ecossistemas tropicais na incorporao lquida na biosfera terrestre do CO2 de origem antropognica. Com a evoluo da tecnologia da instrumentao micrometeorolgica, a tcnica de eddycovariance (covariao de vrtices turbulentos ferramenta estatstica utilizada para analisar vento em alta frequncia e sries de dados atmosfricos que resultam em valores de fluxos das variveis analisadas, p.e. CO2 e gua) tem sido aplicada para avaliar a troca de massa (gua e carbono) e energia em ecossistemas, aumentando nosso conhecimento sobre a troca de carbono no sistema solo vegetao atmosfera que integra os fluxos no solo e vegetao (Curtisetal.2002). 4

Os estudos dos fluxos de carbono em ecossistemas terrestres tm sido raramente acompanhados de abordagens ecofisiolgicas de modo a explorar a relao funcional das espcies que compem o ecossistema e os valores lquidos obtidos para o mesmo. Segundo Buchmann (2002) apenas 14% dos estudos de fluxo de vrtices turbulentos em florestas incluem avaliaes ecofisiolgicas das plantas ou estimativas de biomassa. Desse modo, a combinao de estudos micrometeorolgicos, ecolgicos e ecofisiolgicos fortemente recomendada para uma melhor compreenso das dinmicas dos fluxos associados ao funcionamento dos ecossistemasemgeral. Assim, tambm diante dessa necessidade, o presente trabalho deu continuidade ao estudo ecofisiolgico tido como um dos focos do Projeto Temtico Biota/Fapesp Interao BiosferaAtmosfera Fase 2: Cerrados e Mudanas de Uso da Terra (Biota Interao, processo no 02/092899, coordenao do Prof. Dr. Humberto Ribeiro da Rocha IAG/USP) onde o estudo de fluxos e balano de energia, gua e carbono foi um dos principaisobjetivos,podendoposteriormentecontribuirparaoaprimoramentoecompreensodasdinmicas dosfluxosmensuradospelastorresinstaladasnasreasdeflorestaecerradobrasileiros. Alm disso, o presente estudo foi parte integrante do Projeto Temtico Biota/Fapesp nomeado Composio florstica, estrutura e funcionamento da Floresta Ombrfila Densa dos Ncleos Picinguaba e Santa Virgnia do PESM, So Paulo, Brasil (Biota Gradiente, processo no 03/125957, coordenado pelo Prof. Dr. Carlos Alfredo Joly UNICAMP), que teve como um dos objetivos estudar a dinmica do N no gradiente altitudinal na floresta Atlntica do PESM, Ncleos Picinguaba (Ubatuba/SP) e Santa Virgnia (So Lus do Paraitinga/SP),enessecontexto,oestudofocodestaTesedeDoutoradoavaliouadinmicadousodeNpelas espciesdeumadasaltitudesconsideradaspeloProjeto. Ainda,esteestudoseinseriunocontextodoProjetoSouthEastQueenslandClimateAdaptationResearch Initiative (SEQCARI), financiado por CSIRO Climate Adaptation National Research Flagship e Australian Government,dentrodasubareaBiodiversityVulnerabilityoffocalhabitatstoclimatechange(Coordenao de rea: Catherine Lovelock, Greg Skilleter, Susanne Schmidt e Kerrie Wilson School of Biological Science University of Queensland Austrlia), que teve como foco o estudo dos possveis impactos das mudanas climticas globais nos ecossistemas australianos, e dentro deste contexto, a presente pesquisa avaliou a ecofisiologiadousodeNemumadasreasconsideradaspeloProjeto. Na busca de fornecer dados possveis de contribuir com os diferentes Projetos acima mensionados, dos quais o presente trabalho foi integrante, considerouse o conhecimento de que os ciclos de carbono (C) e N so intimamente associados. A eficincia no uso de N para a estruturao e funcionamento do aparato fotossinttico um dos fatores mais importantes na variao interespecfica da capacidade de assimilao de 5

CO2 pelas plantas (Takashima et al. 2004). Ento, as relaes custobenefcio das interaes entre o N e o C disponvel podem ser determinantes nas caractersticas morfoanatmicas e na durao da vida til das folhas,interagindocomadisponibilidadeeeficincianousodagua. Poroutrolado,aciclagemdoestoquedeCnavegetaoesolopodeserafetadapeloteordeNdisponvel. Assim,paraentenderasformasdevariabilidadenaretenoouperdadeCeNdosecossistemasemestudo, necessrio entender as variaes na estrutura e na dinmica do ecossistema, especialmente das rvores; na forma, quantidade e taxa de decomposio da serapilheira; na matria orgnica dos solos e suas inter relaes com os processos fsicos e qumicos, que determinam a sua dinmica, sua biomassa e a sua relao comosteoresnutrientes,especialmenteN,eafertilidade(Neffetal.2002). Dado que a ciclagem de N regula em ltima instncia muitas respostas em escala ecossistmica, este potencialmente um grande lapso no nosso entendimento sobre como as plantas respondem ao elevado CO2 atmosfrico(Millard&Grelet2010). Emsuma,todosessesaspectosindicamaurgentenecessidadedemaisinformaosobrearelaoentreo suprimento de N, associaes microbianas, mecanismos fisiolgicos e ecolgicos que regulam o crescimento e/ouestabelecimentodasplantaseacomposiodeespciesdascomunidadesvegetais(Nordin1998),sendo o armazenamento, a capacidade de assimilao e o transporte, consideradas caractersticas fundamentais paraummelhorentendimentodosprocessosdeutilizaodeNpelasplantas. Assim, um maior conhecimento sobre as capacidades de assimilao, transporte, estocagem e reciclagem de N em espcies arbreas essencial na compreenso dos processos e mecanismos de utilizao de N pelas populaes e comunidades vegetais tropicais. Por sua vez, um maior entendimento sobre a interao solo planta atravs do estudo da dinmica do N nos processos biogeoqumicos de ciclagem interna e das caractersticas ecofisiolgicos das espcies vegetais devero auxiliar na compreenso sobre a funcionalidade dociclodeNnosecossistemasestudados.

3.REVISOBIBLIOGRFICA
3.1.ONitrognio NutrioeoelementoN No universo das plantas o termo nutrio pode ser definido como aquisio e assimilao de nutrientes, sendonutrientesentendidoscomocompostosqumicosquecontmelementosessenciaisemumaformaque possam ser utilizados pelas plantas. Elemento essencial, por sua vez, aquele necessrio para a concluso do ciclo de vida de uma planta sob condies ideais (Raven & Andrews 2010), sendo estes, reconhecidamente definidos pela comunidade cientfica: N, P, K, S, Mg, Ca, Fe, Mn, Cu, Zn, Mo, Ni, Cl, Br. O nitrognio (N) considerado, portanto, um nutriente mineral essencial a vida e est presente na composio de biomolculas comooATP,NADH,NADPH,clorofila,protenaseenzimas(Harper1994). A maior parte do N terrestre, entretanto, encontrase indisponvel para a maioria dos organismos vivos, pois aproximadamente 78% desse N existem na forma de N2 atmosfrico (N molecular ou azoto), o qual se torna indisponvel devido fora da tripla ligao que ocorre entre os dois tomos de N nessa molcula (Galloway et al. 2004). As rochas primrias so o maior reservatrio do N no planeta, contendo 98% do N existente (Werner et al. 2001). Com relao biosfera, 96% do N orgnico terrestre encontrase na matria orgnica morta e 4% nos organismos vivos, sendo 94% em plantas, 4% na microbiota e 2% nos animais (Moreira&Siqueira2006). Durante a histria evolutiva, apenas um limitado nmero de bactrias desenvolveu a habilidade de converteroN2emNreativo(Nr)tornandoos disponveisaosdemaisorganismosvivos(Gallowayetal.2004). Apesar de muitas adaptaes para o uso mais eficiente do N por organismos vivos terem surgido durante o processoevolutivo,muitosecossistemasdomundotmoNcomorecursolimitante(Gallowayetal.2004). Oligotrofiaeasinovaesnutricionais Como uma determinante da evoluo das muitas adaptaes desenvolvidas pelas plantas no processo evolutivo para obteno de N, a oligotrofia merece destaque (Raven & Andrews 2010). Oligotrofia a capacidade de um organismo em completar seu ciclo de vida em ambientes com disponibilidade muito baixa de um ou mais nutrientes, e nesse contexto, vrias simbioses so consideradas importantes na aquisio de nutrientes pelas plantas (Raven & Andrews 2010). Com base em evidncias fsseis, as ectomicorrizas foram 7

uma clara inovao nutricional das plantas arbreas no perodo Cretceo, bem como a maioria das associaes simbiticas, tais como simbioses com protobactrias genericamente conhecidas como Rhizobium (Raven & Andrews 2010) que ocorrem na maioria das plantas da famlia Leguminosae e em Parasponia, membro da famlia Ulmaceae (Sprent 2007). Micorrizas arbusculares, apesar de terem evoludo em plantas herbceas, so tambmuma importante associao simbitica das plantas arbreasno processo de aquisio deN(Raven&Andrews2010). Segundo Raven & Andrews (2010), estas simbioses devem ter muito provavelmente evoludo nas plantas juntamente com a oligotrofia durante as alteraes ambientais ocorridas nos perodos interglaciais do Pleistoceno, resultando na evoluo sequencial de novas espcies arbreas. Sequncia esta que pode ser explicada de um ponto de vista nutricional, quando solos glaciais com pouca ou nenhuma matria orgnica e consequentementenenhumoupoucoN,possibilitavamaexistnciadeorganismosdiazotrficos,i.e.,quetm habilidade de crescer sem uma fonte externa de N fixado, no existia planta arbrea at ento. Com pouco N no solo, P se tornou mais limitante e isso pode ter restringido a possibilidade da diazotrofia ocorrer. Entretanto, no existe evidncia real das mudanas no balano: ocorrncia de plantas arbreas com ectomicorriza ou com micorriza arbuscular durante a sequncia evolutiva de espcies arbreas no perodo interglacial, por exemplo, no se sabe se durante essa evoluo, plantas com ectomicorrizas que ocorriam pela limitao de N foram sendo substitudas por plantas com micorrizas arbusculares ocorrendo pela limitao de P (Smith & Read 2008). O mesmo deve ser provavelmente vlido para outras cronosequncias (Lambersetal.2008),comoporexemploasucessoecolgicaqueacontecenasflorestas. OciclobiogeoqumicodoNeasplantas OciclobiogeoqumicodoNnoecossistemapodeserdivididoemduaspartes,internoeexterno(Martinelli et al. 1999). O ciclo externo inclui os processos que adicionam ou removem N do ecossistema, tais como a denitrificao(queserefereaoprocessodeconversodeformasreativasdeNaNmolecularN2),deposio seca e mida, fertilizao, lixiviao e fixao biolgica (Vitousek et al. 2002). J o ciclo interno consiste nos processos que convertem o N de uma forma qumica para outra e/ou o transferem entre os diferentes compartimentos de um ecossistema (Martinelli et al. 1999), isso inclui os processos de nitrificao (oxidao do amnio NH4+ a nitrito NO2 e ento a nitrato NO3), de assimilao e reciclagem de N pelas plantas, mineralizao da matria orgnica (transformao desta em compostos inorgnicos) e imobilizao microbiana(PereiraSilva2008). 8

Os processos biogeoqumicos que ocorrem no solo refletem a disponibilidade de Ndentro do ecossistema e podem diferir no somente na quantidade e na forma de produo de N mineralizado, mas tambm na sua distribuiosazonaleespacial(Campos2009).UmamaneiradeavaliarobalanolquidodeNnoecossistema atravs da abundncia natural de istopos estveis de N (15N) (Hgberg 1997), e esta ferramenta tem sido sugeridacomosendoeficienteenoinvasivanoacessoemonitoramentodadinmicadoNnosecossistemas, uma vez que processos como a mineralizao, a nitrificao, a denitrificao e a volatilizao de amnia descriminamcontrao15N(Kahmenetal.2008). A comparao da abundncia natural do istopo estvel 15N com os valores de 15N foliar podem refletir a origem do N de uma fonte especfica assimilada pela planta (NO3 ou NH4+ por exemplo) quando estes so marcados com 15N previamente e oferecidos s plantas, podendo revelar informaes sobre o padro de absorodeNnaqueleindivduo(Houltonetal.2007). Bustamante et al. (2004) indicam que as grandes diferenas no 15N das espcies vegetais do Cerrado brasileiro sugerem que plantas podem explorar diferentes fontes de N, e que esta variabilidade pode indicar mecanismos que manteriam a alta diversidade em um ambiente com baixa disponibilidade de nutrientes e estressehdrico,porexemplo.Amundsonetal.(2003)sugeremqueoclimapossuiumpapelfundamentalnos processos de reteno de N no solo assim como na sua composio isotpica. Portanto, considerando que a disponibilidade de nutrientes indiretamente afetada pela disponibilidade de gua, a ocorrncia de um gradiente natural de precipitao (Austin & Vitousek 1998) e diferenas no comprimento da estao seca podem atuar como foras diretrizes que afetam a abertura ou o fechamento da ciclagem de N e como consequencia, a quantidade e a forma na qual o N estar disponvel para as plantas que compem dado ecossistema(Martinellietal.1999). Dentre as formas em que o Nr est disponvel para plantas superiores terrestres destacamse o N mineral (nitrato NO3 e amnio NH4+) que so assimilados pelas razes das plantas; o N2 na forma gasosa que pode serfixadoporassociaosimbiticadealgumasplantascombactriasdiazotrficas,atravsderelmpagosou por fixao biolgica de bactrias livres do solo; o N na forma de xidos de nitrognio (NOx) e NH4+ volteis que so assimilados aps deposio seca ou mida destes compostos, e o N na sua forma orgnica (aminocidos, peptdeos e protenas), assimilados atravs de associaes das plantas com micorrizas ou mesmo diretamente pelas razes (Nsholm et al. 2009). Est claro que o N orgnico dissolvido constitui o maior componente de N solvel em grande parte dos solos e que as plantas podem potencialmente acessar essafontedeN(Jonesetal.2005),comou semapresenadeassociaesmicorrzicas(Nsholmetal.2009). A assimilao direta de N orgnico dissolvido pelas plantas tem o potencial de ser o fator primrio no 9

funcionamento de ecossistemas e na sucesso da vegetao, particularmente em ambientes limitados por N (Jonesetal.2005). Existem evidncias de que a sazonalidade tambm promotora de variabilidade na disponibilidade de certos elementos no solo, incluindo N (Fayers & Trewin 2004, Channing & Edwards 2009). Nos episdios de seca pode ocorrer a nitrificao em solos bem aerados, tornando o NO3 disponvel para as plantas (Raven 2003) enquanto restringe a disponibilidade de Fe e P, enquanto que nos episdios de umidade parece haver uma queda na nitrificao e ento apenas formas reduzidas de N combinado ficam disponveis, bem como Fe e P ficam mais disponveis (Raven & Andrews 2010). Tambm, em solos mais secos, o papel da micorriza arbuscular na aquisio de P e N deve ser mais significativo (Raven & Andrews 2010). A ocorrncia de NO3 como fonte de N para as plantas, mesmo que descontnua, pode ter permitido a evoluo de pelo menos alguns dos mecanismos de regulao cidobase relativos s snteses de cidos orgnicos, envolvendo a assimilaodeNO3pelasfolhasdeplantasterrestres(Raven&Smith1976,Andrewsetal.2004,2009). Knops et al. (2002) indicam que a composio de espcies de uma formao vegetal tem grande impacto sobre a ciclagem de N no solo alm da quantidade e qualidade da serapilheira, atravs da interferncia nos processos de entrada e sada de N do ecossistema como: deposio atmosfrica, perda induzida pelo fogo, lixiviaoefixao,composiodacomunidademicrobianadosoloquepodelevaraalteraesnosprocessos de nitrificao e denitrificao. Ainda, as plantas podem interferir no comportamento dos animais herbvoros e,portantotmopotencialdefacilitarmovimentosdeNentrediferentesecossistemas(Knopsetal.2002). UsodeNpelasplantasabsoroeassimilao A utilizao das diferentes formas de N pelas plantas superiores possvel devido a um complexo e sensvel sistema interno de absoro, assimilao, transporte, e mobilizao nos tecidos (Camargos 2002). Nesses sistemas, os mecanismos de absoro e assimilao assinalam o incio dos processos biolgicos intrnsecos da planta seguidos pela distribuio e circulao internas, que so, por sua vez, mediadas pelo movimento de ons no solo e acmulo nas razes, seu transporte via xilema e sua reduo e incorporao (Haag1985). Aquantidadedenutrientesabsorvidoseassimiladospelasplantasdependedefatoresdiversos,taiscomo: pH do solo e da rizosfera, variaes espaciais e temporais no contedo da matria orgnica do solo, temperatura e umidade do solo (Dias et al. 2006), disponibilidade dos nutrientes na rizosfera, microorganismos do solo (que atuam na mineralizao da matria orgnica resultante do processo de 10

decomposio (Bonato et al. 1998)), bem como as estratgias utilizadas pelas plantas para efetivar esses processos (PereiraSilva 2008). Nesse contexto, o crescimento e a sobrevivncia das espcies vegetais so influenciados ou podem ser resultado das variaes nesses aspectos, que levam tambm a interaes competitivasporrecursosemcomunidadesvegetais(James&Richards2006). Dentre as fontes de N mineral possveis de ser assimiladas pelas razes das plantas superiores, o NO3 tem sidoconsideradoaprincipaldelas(Aidaretal.2003),principalmenteemsolosaerbios(Xuetal.2012)mash evidncias de que NH4+ pode ser predominante em muitas situaes (Stewart et al. 1993, Nardoto & Bustamante2003),especialmenteemsoloscidosoualagados(Xuetal.2012).AassimilaodeNO3ouNH4+ pelas razes constantemente resulta em acidificao ou alcalinizao da rizosfera, que leva a mudanas na disponibilidadedeNparaasplantas(Xuetal.2012). Porm, alguns estudos tm demonstrado que o NH4+ absorvido a maiores taxas, seguido dos aminocidos (aa) e depois do NO3 (FalkengrenGrerup et al. 2000, Thornton 2001, Thornton & Robinson 2005), apesar de em alguns casos a assimilao de aa ser maior que de NH4+ e NO3 (Persson et al. 2006, Kiellandetal.2006).PormessequadropodeserbastantediversoquandoasfontesdeNsomisturadaseas preferncias de assimilao pelas plantas parecem ser eliminadas pela interao entre as fontes no meio (Nsholm et al. 2009), pois alm do N inorgnico, o N orgnico tambm considerado por muitos autores uma fonte importante para comunidades de plantas em uma grande amplitude climtica e edfica (McKee 1962, Mori et al. 1977, Schobert & Komor 1987, Schmidt et al. 1998, Nsholm et al. 1998, Schmidt & Stewart 1999,Nsholmetal.2000,Nsholmetal.2001,Nsholm&Persson2001,Nsholmetal.2009). Assim, considerando os estudos at hoje realizados nesse campo de investigao, afirmase que de modo geral para a maioria das plantas, as taxas de assimilao de aa so provavelmente menores que aquelas para NH4+, mas maiores que aquelas para NO3 (Nsholm et al. 2009). A absoro de aa, NH4+ e NO3 so mediadas por uma vasta gama de transportadores, podendo ser de alta ou baixa afinidade (Williams & Miller 2001, Miller&Cramer2004),sendoessecampodeestudoaindarecente. Astaxasdedifusodestasfontesnosolotambminfluenciamaassimilaopelasplantas,epodemoscilar consideravelmente,comNO3mostrandoumadifusodecercade10a100vezesmaiorqueoNH4+,enquanto que para aa isso muito mais varivel e relativo forma do composto, podendo ir de pequenos compostos semcargacomoGlyatgrandesctionscomoLArg(Miller&Cramer2004). Quanto a absoro das formas inorgnicas pelas plantas, tmse que a absoro do NO3 pelas razes ocorre por simporte e de forma ativa, uma pequena parte desse on permanece no citoplasma das clulas, constituindo uma possvel reserva metablica, enquanto que a maior parte ou transportada para o vacolo, 11

formandoumareservadeestoque,ouexportadaparaoutroslocaisnaplantaparaserassimilado(Bonatoet al. 1998). J a absoro de NH4+ pode ocorrer de duas formas: passiva por difuso, quando as concentraes externas so altas, e ativa atravs de transportadores, quando as concentraes externas so baixas (Willians &Miller2001). Para o NO3, sabese que este no reciclado via floema, assim, sua presena na seiva do xilema indicativa de assimilao e transporte de NO3 do sistema radicular e caracteriza plantas que assimilam NO3 nasfolhas(Stewartetal.1992). A reduo do NO3 pode acontecer nas folhas ou nas razes, o primeiro passo dessa assimilao catalisadopelaenzimanitratoredutase(NR)localizadanocitoplasmadasclulas,quetemoNADHeoNADPH como doadores especficos de eltrons e composta por trs regies envolvidas na transferncia de eltrons destes para o NO3 na sua reduo a NO2. Nas folhas, o NO2 entra no cloroplasto onde a enzima nitrito redutase catalisa sua reduo NH4+. Os eltrons so transferidos por reaes fotoqumicas possibilitadas pelocofatordaNR,aferredoxina.Nostecidosnoverdescomoaraiz,oNO2reduzidonosplastdeos,neste casoaenergiageradanocitosolatravsdociclodaspentosesedagliclise,enasmitocndriaspelociclodo cidotricarboxlico(Oaks&Hirel1985). Por ser a primeira e principal porta de entrada de N na planta, a NR considerada uma enzima chave na regulao do metabolismo de N (Pursino et al. 1994). A regulao de sua atividade, por sua vez, tem dois pontos principais, sendo: a transcrio, que por levar algumas horas para acontecer e por ser responsvel pelas mudanas dirias na sua atividade, tem a maior taxa durante as primeiras horas do dia; e a ps traduo, que um processo muito mais rpido (dura poucos minutos) e ocorre com a fosforilao e desfosforilao da enzima, sendo essa etapa importante para desativar a NR quando a planta passa da condiodeluzparaoescuro,evitandooacmulodeNO2nafaltadeferredoxinareduzida(Sodek2004). O NO3 o principal fator que influencia a sntese da NR na planta, podendo induzir sua sntese quando disponvelnoambiente.Jaatividadedaenzimainfluenciadapelaluz,podendoestacausarumefeitodireto ativando a enzima, ou indireto fornecendo energia para a assimilao do NO3 atravs do processo da fotossntese. Para isso, utilizase de molibdnio, outro cofator da NR, que reduz sua atividade quando deficiente, ou quando a concentrao de NH4+ e de aminocidos (produtos da assimilao de N) alta (Smirnoffetal.1984). Com relao ao NH4+, devido sua alta toxicidade, sua assimilao deve ser feita rapidamente pelas plantas de modo a evitarem seu acmulo nos tecidos. A enzima responsvel por esse processo a glutamina sintetase (GS), que funciona mesmo em baixas concentraes de NH4+, e catalisa a reao deste com 12

glutamato na formao do aminocido glutamina. A eficincia da assimilao de NH4+ nas plantas muito maiorquesuataxaproduopelareduodoNO3e/oupeloprocessodefotorespirao,oquegarantebaixas concentraesdeNH4+nostecidosvegetais. J a sntese do glutamato mediada pelas enzimas amidatransferase de glutamina: 2oxoglutarato (GOGAT) ou pela glutamato desidrogenase (GDH). O sistema GSGOGAT dominante para a sntese de glutamatoemplantassuperioresenquantoaGDHestprovavelmenteenvolvidanasuaoxidao(Oaks1994). NemtodaglutaminaformadaviaGSseguepelaGOGAT,elapodeserexportadacomocompostodetransporte de N ou ser transformada no aminocido asparagina e ento transportada nesta forma. Assim o sistema GS GOGAT tem duas finalidades: produo de aminocidos para a sntese de protenas no prprio tecido (suprindo a demanda local) e produo de glutamato e aspartato para a formao de amidas que so transportadasparaoutrostecidosquefuncionamcomodreno(Sodek2004). Namaioriadosecossistemasterrestres,osuprimentodeNumfatoressencialnocontroledadiversidade e dinmica das populaes vegetais e fundamental nos processos ecolgicos tais como produtividade, ciclagem de carbono (C) e de nutrientes no solo (Martinelli et al. 1999). Em termos globais, o conhecimento sobreastransformaesedisponibilidadedeNemsolosflorestaisedesavanasrazoavelmenteamplo(Xuet al. 2012), entretanto pouco conhecido a respeito das comunidades vegetais e espcies tropicais e subtropicais, pois a maioria dos estudos ainda foca principalmente nos ambientes e espcies temperadas (Schmidtetal.1998). Estudos apontam que a presena de maior tecido lignificado por unidade de biomassa em plantas de hbito arbreo, comparando com plantas herbceas, significa uma maior razo CN nas primeiras, envolvendo maiorreciclageminternadeNeumimpactonoreusodessesnutrientesversusassimilaodeNnovodurante aretomadadoprocessodecrescimentoapsadormnciaemestaessecase/oufrias(Cernusaketal.2008). Sabese at o momento que organismos podem economizar no uso de N e C simplesmente alterando o cdon utilizado no genoma bem como na sntese protica, atravs da seleo dos aminocidos usados na formao de protenas(Ravenet al. 2005). Dependendo da disponibilidade relativados diferentes elementos, a metabolmica pode mostrar variaes genticas ou adaptativas no uso destes elementos (Raven 2005). Entretanto, existem limites na avaliao de como estas economias por substituio podem ser empregadas pelas plantas de modo a manter a funcionalidade (Raven & Andrews 2010). Como exemplo desse tipo de economia, Raven (2005) coloca que compostos de defesa contendo N podem ser substitudos por compostos livres de N, porm no est claro se a funcionalidade do composto substituto igual do original. Genericamente parece no existir nenhum dado relativo a estes tipos de economia em plantas arbreas 13

especificamente,necessitandofuturaspesquisas(Raven&Andrews2010). UsodeNpelasplantasestoqueeremobilizao Atualmente predomina na literatura um consenso geral sobre o ponto de vista que considera o carbono (C) como sendo o elemento mais importante na fisiologia vegetal, e diante do grande questionamento sobre como as plantas arbreas iro responder a aspectos das mudanas climticas globais, como por exemplo, ao aumentodosnveisdeCO2daatmosfera,mudanasnatemperaturaouseca,aspesquisastendemavoltarse ao estudo do C, pressupondo que o crescimento e funcionamento das rvores so limitados essencialmente peladisponibilidadedesseelemento(Millard&Grelet2010). Entretanto,revisesfeitasporKrner(2003)eMillardetal.(2007)evidenciamqueumgrandenmerode cientistas questionam essa ideia. Eles apresentam diferentes evidncias fsseis para argumentar que de fato, o crescimento das rvores raramente, quando , limitado por C. Em contraste, tem sido bastante reportado que o crescimento destas limitado pela disponibilidade de outros nutrientes, particularmente N (Rennenberg et al. 2009) ou P, em reas com alta deposio de N (Akelsson et al. 2008) ou em florestas madurascrescidasemreasnoperturbadas(Wardleetal.2004). Temse demonstrado que em altas concentraes de CO2, a ciclagem interna de N um importante mecanismo para a manuteno do crescimento das plantas (Krner 2003). O ciclo interno de N e C em uma planta ocorre com a remobilizao sazonal de estoques armazenados via translocao para outros tecidos, parareproduo,crescimentoeoutrosmetabolismos(Millard&Grelet2010). Nesse contexto, a reciclagem ocorre quando N ou C remobilizado de tecidos (usualmente durante a senescncia foliar, antes da absciso) para estocagem. Um recurso considerado sequestrado quando acumulado e imobilizado na biomassa da planta impossibilitando sua reutilizao, um exemplo disso o acmulodeargininaemacculasdeconferascomorespostaadeposiodeN.Assim,necessriohaveruma remobilizao e reuso subsequente do N a fim e se acessar o estoque. A remobilizao pode ser um mecanismo de suprir a planta com N quando a assimilao deste pela raiz limitada (Millard & Grelet 2010). Muitos trabalhos demonstram que a reciclagem de N dentro da planta pode ser realizada atravs do transportedeargininanaseivadoxilema(Millardetal.2007,Schmidt1998). A habilidade de uma planta estocar N independente da sua disponibilidade externa, que apenas influencia a quantidade de N estocado. Ento, seu estoque e remobilizao esto intimamente ligados aos eventos fenolgicos nos ciclos de crescimento anual, com seu requerimento para crescimento, manuteno e 14

defesa, sendo coincidente com a remobilizao do estoque ou assimilao direta pela raiz. O balano entre esses dois processos determina tanto a taxa de perda como a eficincia no uso de N, e desse modo contribui paraseudesempenhoemambientespobresemN(Millard&Grelet2010). As profundas diferenas na fisiologia do uso de N e C pelas plantas nos levam a questionar se as mesmas estratgias de estoque e remobilizao so aplicveis para ambos. A maior parte do C assimilado por uma rvore sequestrado, enquanto que a maioria do N assimilado estocado, e assim, sua remobilizao, bem comoseuestoque,soimportantesprocessosregulatriosdocrescimentopotencialdeumarvore(Millard& Grelet2010). O N estocado pelas plantas arbreas na forma de uma ampla variedade de protenas de reserva, tais como protenas do barque (Cooke & Weih 2005, Martins 2007). Em adio, uma gama de protenas metabolicamente ativas, como a RuBisCo, podem servir como suprimento de reserva de N (Millard et al. 2007). Os locais de reserva de N nas rvores podem variar conforme o hbito fenolgico da espcie e restringemse a alguns rgos especficos, rvores decduas tendem a estocar N na madeira ou no barque de razes e troncos (Martins 2007), enquanto que espcies pereniflias estocam N nas folhas mais novas (com algumas excees). Em contraste ao que ocorre com os carboidratos no estruturais usados como reserva de C, o N nunca estocado na planta toda e, durante perodos de remobilizao, todo N estocado utilizado (Millard&Grelet2010). A alocao de N para estoque programada sazonalmente e, portanto est intimamente ligada a fenologia, ao contrrio do que acontece com o C. E essa alocao de N desencadeada por sinais ambientais especficos, notavelmente dias curtos e baixas temperaturas. Outra diferenaentrea alocao de Ce N que a alocao de C dirigida pelo dreno enquanto que a alocao de N dirigida pela fonte. Alm disso, a remobilizao de N depende da quantidade de N estocado e no da demanda para novo crescimento ou da taxadeassimilaodonutriente,comoacontececomoC(Millard&Grelet2010). A habilidade de estoque e remobilizao de N considerada processo chave para a eficincia do uso de N (EUN) por uma planta (Millard & Grelet 2010). Vitousek (1982) definiu EUN como sendo a quantidade de matria orgnica perdida ou permanentemente estocada numa planta por unidade de nutriente perdido ou permanentemente estocado na planta, e mensurada atravs da serapilheira produzida em uma comunidade. De acordo com essa definio, o ndice parcial de EUN inverso concentrao de N na serapilheira. Esses estudos se baseiam no pressuposto de que a ciclagem de N no ambiente reflete sua disponibilidade para assimilao pelas plantas e de que o N mineral a principal fonte de N no solo para o crescimentodestas(Millard&Grelet2010). 15

A remobilizao e retranslocao de nutrientes de folhas e tecidos senescentes para outros rgos em crescimento ou de armazenamento so tambm importantes estratgias na reduo da perda de nutrientes, elevando a eficincia no uso dos mesmos numa planta (Vitousek 1984). O conhecimento sobre a remobilizao de N nas espcies nativas brasileiras ainda muito incipiente, havendo pouca informao disponvel(Aidaretal.2003,Nardotoetal.2006). Est claro que o estoque de N e sua remobilizao so de considervel importncia ecolgica e fisiolgica para plantas (Millard & Grelet 2010), bem como o fato de a remobilizao se tornar mais importante conforme a planta cresce (Miller & Miller 1987), porque a assimilao de N novo tende a diminuir com esse processo enquanto seu potencial de estocar N aumenta (Miller 1986). Uma vantagem em se conservar N dentro da planta em ambientes limitados por N reduzir a competio com outros indivduos pela aquisio de N externo e em ltima instncia reduzir a disponibilidade de N para outras espcies (Millard & Grelet 2010).Em alguns sistemas pobres em N, uma considervel proporo da demanda por N pelas plantas pode ser supridapela associao destas com ectomicorrizas quemobilizam o N da matria orgnica (Read & Perez Moreno2003). UsodeNnascomunidadesvegetaisasucessoflorestal Um aspecto difcil de distinguir quanto s mudanas temporais nas propriedades do solo, e que est relacionado variao na disponibilidade de nutrientes para as plantas, so as mudanas sucessionais na composiodeespciesdecomunidadesvegetais(Raven&Andrews2010). Em contraste s florestas temperadas, a sucesso em florestas tropicais ocorre de forma dinmica e no linear (Bazzaz & Pickett 1980), no sendo previsvel a ocorrncia de um clmax (Bentley 1979). A influncia do distrbionasucessoacontecepelamudananosnveisdefontesdenutrientesdisponveisedeeficinciade recrutamento (Bazzaz & Pickett 1980), e o distrbio que possibilita o incio da sucesso. Esse processo determinante para a composio especfica e estrutura fisionmica e fitossociolgica das comunidades vegetais uma vez que essa heterogeneidade espacial interna de condies ambientais interfere no estabelecimento e desenvolvimento das plantas, criando na floresta um mosaico de diferentes estgios sucessionais,comcomposio,estruturaemicroclimasespecficos(Godoy2007). Devidoadiferenasnacomposiodeespcies,nadiversidadeflorstica,nostiposdesolo,enanaturezae extenso da perturbao, o processo de sucesso varia muito nas regies tropicais, entretanto existem similaridades em tendncias gerais, na morfologia e fisiologia das espcies, e nas mudanas dos 16

microambientes(Bazzaz&Pickett1980). Muitos estudos tm considerado o agrupamento das espcies florestais em guildas ou grupos funcionais comoumaimportanteabordagemparamelhorsecompreenderospadresdecomportamentoexistentes.Os grupos mais usuais so baseados em classificaes das espcies de acordo com suas caractersticas relacionadas s estratgias de regenerao (germinao e estabelecimento), estratificao, disperso, reproduooudesenvolvimento(porte,longevidade,densidadedamadeira)(Campos2009). Entre os grupos mais reconhecidos esto os que classificam as espcies segundo: estgios sucessionais (pioneiras, secundrias iniciais, secundrias tardias e clmax), estrato dominante (subbosque, intermedirio ou dossel), estratgia de disperso que adotam (anemocricas ou zoocricas, anemfilas ou ornitfilas) e hbito fenolgico (pereniflias, semidecduas e decduas) (Whitmore 1989, Tabarelli et al. 1994, Gandolfi et al.1995). Relativamente poucos trabalhos abordam aspectos ecofisiolgicos de sucesso tropical, e apesar de esforos em se caracterizar plantas nos estgios sucessionais terem sido feitos, a maioria das classificaes baseada em atributos limitados (Bazzaz & Pickett 1980), principalmente relacionados germinao das sementes e uso da luz pelas espcies. Alm disso, as divises propostas at hoje so, no geral, baseadas no conhecimento emprico dos autores (Lima 2005). Apenas recentemente, alguns autores tm apontado para a ocorrncia de um contnuo de estratgias ocorrendo entre as espcies (Gandolfi et al. 1995, Whitmore 1996, Gandolfi 2000), porm esse tema permanece cercado de grande debate e h uma carncia de informaes ecofisiolgicasquepermitamumconsensonaclassificaodessasdentrodosdiferentesgruposecolgicos. Por outro lado, alguns estudos tm relacionado as caractersticas de aquisio e uso de N em plantas com sua classe sucessional (Stewart et al. 1988, Freeden et al. 1991, Pate et al. 1993, Stewart et al. 1993, Aidar et al.2003,PereiraSilva2008,Campos2009,Silva2012). TendoemfocoadistribuiodeondeocorreaassimilaoprimriadeN,considerandoaquiasdiferenas entre folhas e razes, e entre espcies iniciais na sucesso (Pioneiras) e espcies mais avanadas na sucesso (Tardias), Raven & Smith (1976) sugeriram que as limitaes dessa assimilao de N pelas plantas so resultado da regulao cidobase que ocorre na restrio da assimilao de NH4+, da associao simbitica comorganismosdiazotrficospelasrazes,edapossvelocorrnciadaassimilaodeNO3emambos,razese folhas. Andrews (1986) resumiu o conhecimento na distribuio do NO3 assimilado como uma funo da concentrao externa de NO3 e da origem (temperada ou tropical) das plantas em questo. Para plantas perenes, incluindo limitada informao relativa a plantas arbreas, Andrews (1986) concluiu que espcies de ambientes temperados assimilam a maioria do NO3 nas razes quando a concentrao externa baixa, e nas 17

folhas quando esta concentrao aumenta. Em contraste, espcies tropicais teriam a maior parte do NO3 sendoassimiladonasfolhas,comindiferenassuasconcentraesexternas. Desde o trabalho de Andrews (1986), um significativo corpo de dados sobre assimilao de NO3 por plantas arbreas foi publicado (Stewart et al. 1988, 1989, 1992, Schmidt & Stewart 1998, Aidar et al. 2003, PereiraSilva 2008, Campos 2009, Silva 2012), e apontaram que a assimilao de NO3 nas folhas mais importantenosestgiosiniciaisdasucessoflorestalquenosestgiosavanados(Stewartetal.1989,Aidaret al.2003)equeafraodeNO3assimiladaaumentaconformeaumentaaconcentraoexternadestenosolo (Stewart et al. 1989). Alm disso, Stewart et al. (1989) colocam que a predominncia da assimilao de NO3 nas razes est relacionada capacidade de assimilao de N pela planta atravs de associaes simbiticas, suprindoNH4+srazes,ouambientesnosquaisoNH4+afontemaissignificativadeNnosolo. A comparao entre espcies dentro de uma sucesso ecolgica baseada essencialmente na dicotomia: plantas adaptadas ao sol versus plantas adaptadas sombra, atravs da qual possvel identificar um contnuo que refletido em uma sequncia de espcies sendo substitudas. Em florestas tropicais essa situao mais complexa devido ao alto nmero de posies verticais possveis de copas individuais e das vrias oportunidades de regenerao. Assim, h um contnuo de adaptaes luz, mas a restrio na classificao destas plantas baseada apenas na dicotomia acima simplista e passvel de erros. A diferena entre espcies mais adaptadas luz ou sombra no clara nessas plantas, que podem alterar suas prefernciasdurantetodooseudesenvolvimento(Bazzaz&Pickett1980). Florestas experienciam no geral pouca variao de temperatura sazonal e usualmente recebem alta pluviosidade, entretanto, a temperatura diria varia consideravelmente e isso ocorre principalmente nos perodos secos. A topografia e o tipo de solo influenciam a diversidade de espcies, a dominncia, as formas de crescimento e a dinmica da floresta. A decomposio rpida e a ciclagem de nutrientes pode ser aumentadapelaocorrnciademicorrizao.Osnutrientessorapidamenteassimiladospelasplantasquando a serapilheira aparece no solo e podem passar diretamente da matria orgnica para as razes das plantas atravsdaassociaodestascomosfungosmicorrizicos(Bazzaz&Pickett1980). 3.2.Alteraodociclopelohomem ParacontextualizaraatualalteraodociclobiogeoqumicodoNpelohomem,umbrevehistricosobrea evoluo do entendimento do ciclo fazse necessrio, e para tanto, a reviso de Galoway et al. (2004) foi utilizada como base nesse aspecto, que por sua vez, utilizouse do livro de Smill (2001) como referncia 18

primria. O elemento N foi formalmente nomeado na tabela peridica em 1790 por Jean Antoine Claude Chaptal (17561832). Na segunda metade do sculo 19, sabiase que o N era um elemento comum nos tecidos de plantaseanimais,indispensvelaocrescimentodasplantaseconstantementetransformadoentrecompostos orgnicos e inorgnicos, bem como era um efetivo fertilizante. At ento no se conhecia a fonte de N na natureza, mas acreditavase que a deposio atmosfrica e os relmpagos eram entradas importantes. Em 1838foidemonstradoporBoussingaultqueplantasdafamliadasleguminosaspoderiamservircomofontede NrnosoloequeelasdealgumaformapoderiamtambmcriarNrdiretamente,eem1888,HermanHellriegel (18311895)eHermannWilfarth(18531904)sugeriramqueessafixaodoN2atmosfricoerafeitapormeio da associao das leguminosas com microorganismos do solo, a qual era absolutamente essencial no processo. Nessa mesma poca foram desvendados processos como a nitrificao e a denitrificao, de forma queaofinaldosculo19oscomponentesessenciaisaociclodeNestavamidentificados(Gallowayetal.2004 apudSmill2001). Apressodeumcrescimentodapopulaohumananoinciodosculo20bemcomoanecessidadedese produzir NO3 para fabricao de munio para a guerra (Keeney & Hatfield 2001) conduziu ao desenvolvimentodoprocessoHaberBoschem1913peloalemoFritzHaber,paraproduzirNH3apartirdeN2 e H2, que veio contribuir ainda mais para o aumento do Nr com do advento dos fertilizantes qumicos produzidos atravs desse processo e aplicados desde ento de forma indiscriminada na produo de alimentos(Gallowayetal.2004). Seguindo o contexto histrico, o sculo 21 iniciouse apresentando uma taxa de produo de Nr cerca de 10 vezes maior que a do sculo anterior, e a magnitude das consequencias dessa produo para o meio ambiente de difcil previso, uma vez que o N como um elemento que possui sete estados de oxidao e por isso possibilita inmeros mecanismos de converso entre suas formas e uma variedade de processos de transporteeestocagempossuisemdvidaociclobiogeoqumicomaiscomplexo(Gallowayetal.2004). Atualmente tmse como consenso que o Nr entra no ambiente por diferentes vias incluindo a fixao biolgica de N, os relmpagos e a deposio atmosfrica seca e mida e que a produtividade de muitos ecossistemas controlada pela disponibilidade desse elemento (Vitousek et al. 2002, Gruber & Galloway 2008). N tambm fator limitante para o crescimento das plantas e produo de alimentos (Gruber & Galloway 2008). E apesar dessa limitao ser parte de um processo natural, isto no foi considerado pela crescente populao humana que precisou aumentar a quantidade de Nr para produzir alimentos, resultando em significativa alterao do ciclo de N na atmosfera, na gua, no solo e em escalas locais, regionais e globais 19

(Galloway et al. 2004). Tanto que a agricultura moderna considerada hoje como sendo o maior agente causador de poluio, ao ponto que, numa escala planetria, as quantidades de Nr adicionado ao meio ambiente por ao humana agora to grande que perturbou significativamente o ciclo desse importante nutriente(Rockstrmetal.2009). As consequencias negativas dessa adio de N so substanciais, indo de eutrofizao de sistemas terrestres e aquticos (Seitzinger 2008), poluio de ambientes costeiros e acidificao global destruio da camadadeoznio(Gruber&Galloway2008)eadiodeumgrandenmerodegasesatmosfera,demodoa destruirlentamentearesilinciadeimportantessubsistemasterrestres(Rockstrmetal.2009). Em curto prazo, plantas e micrbios assimilam e acumulam esse excesso de N como um nutriente, mas a longo prazo, a maior parte desse N denitrificado e volta para a atmosfera e rios levando em certos casos a anoxiadesoloseguascomdiversasconsequenciasvidanessesambientes(Seitzinger2008). Esse constante crescimento da produo de alimentos mundial que vem aumentando a quantidade de Nr global ocorre especialmente pelo cultivo em larga escala de plantas leguminosas que fazem associao simbiticacombactriasfixadorasdeNedearrozquecriaumambienteanaerbiofavorvelafixaode N por cianobactrias (Galloway et al. 2004). Particularmente o cultivo de leguminosas converte cerca de 120 toneladas de N2 atmosfrico em formas reativas de N, sendo este nmero maior que a soma dos efeitos combinadosdetodososprocessosnaturaisdeentradadeNrnossistemasdoplaneta(Rockstrmetal.2009). Alm dessa importante via de entrada de Nr no sistema, destacase tambm o aumento na produo de energia global, que atravs da queima de combustveis fsseis disponibiliza formas gasosas de Nr, principalmente xido ntrico (NO), como um produto resultante da oxidao do N2 atmosfrico ou de N orgnico(primariamentecarvo)(Gallowayetal.2002),queumdos maisimportantesgasesestufaalmdo CO2eassim,agediretamentecomoumaforanteradiativa(Rockstrmetal.2009). Particularmente preocupante o fato de que as transformaes qumicas do N ao longo da sua trajetria no ambiente geralmente levam a uma cascata de efeitos (Gruber & Galloway 2008), sendo este um aspecto importante que deixa o problema ainda mais difcil de ser resolvido (Galloway et al. 2003). Com o efeito cascata, um tomo de N pode, em sequncia, aumentar o O3 atmosfrico (com impactos na sade humana), aumentar a quantidade de material particulado na atmosfera, alterar a produtividade nas florestas, acidificar superfcies aquticas (levando perda da biodiversidade), aumentar a produtividade em ecossistemas costeiros, promover a eutrofizao, e aumentar potencialmente a quantidade de gases estufa na atmosfera (via produo de N2O) (Galloway et al. 2004). Assim, muito se tem ainda a entender sobre as implicaes do acmulo de N no meio ambiente, sobre como este interage com os demais ciclos biogeoqumicos, e sobre 20

comoessasinteraesafetamoclimaglobal(Gruber&Galloway2008). O ambiente do planeta tem sido relativamente estvel no decorrer dos ltimos 10.000 anos (Holoceno), porm tamanha estabilidade pode estar agora sob ameaa devido s aes humanas desde a Revoluo Industrial que tem se tornado o principal vetor das mudanas climticas no ambiente global, e o resultado disso pode ser irreversvel e em alguns casos levar a mudanas abruptas que impedir o desenvolvimento humano(Rockstrmetal.2009). Nesse contexto, Rockstrm et al. (2009), buscando o desafio de manter a estabilidade do clima do Holoceno,propuseramumaestruturabaseadaemfronteirasplanetrias,quedefineumespaoseguroparaa humanidade em relao aos processos e subsistemas biofsicos do planeta. Eles identificaram no sistema terrestre, processos e limites associados, os quais se cruzados, podem gerar mudanas ambientais inaceitveis. Nessa anlise, os autores sugerem que trs desses processos j ultrapassaram os limites aceitveis: mudanas climticas, taxa de perda da biodiversidade e interferncia do homem no ciclo de N. No caso do ciclo de N, os autores colocam que isso est relacionado com a taxa de remoo de N2 da atmosfera para converso em Nr para uso humano, o processo de produo de fertilizantes qumicos para a agricultura, concordando com o que j foi comentado anteriormente. Isso pode ameaar os sistemas ecolgicos estabelecidosaofinaldoperodoQuaternrioquesuportamavidanaTerra,epodemseveramentedesafiara viabilidadedassociedadeshumanascontemporneas. As barreiras propostas por Rockstrm et al. (2009) representam uma nova perspectiva para definir precondies biofsicas para o desenvolvimento humano. Existem muitas incertezas sobre como isso pode causar mudanas perigosas no ambiente ou levar a outros feedbacks que reduziro dramaticamente a habilidadedossistemasterrestresemretornaranveisseguros(Rockstrmetal.2009). Outros estudos demonstram que o ciclo de N est intimamente acoplado a variaes no clima global bem comoaociclodoC(Gruber&Galloway2008).ONdepositadonosolosetornarapidamentedisponvelparaas plantas, estimulando a produtividade e acentuando a assimilao de CO2 da atmosfera (Gruber & Galloway 2008). Solos so geralmente os primeiros receptores dessa enorme quantidade de N que o homem adiciona nos sistemas terrestres, e a quantidade de denitrificao no solo pode exceder substancialmente o que removidopelaredeaqutica(Seitzinger2008). Entender os processos que controlam a razo CN dos organismos terrestres de grande importncia para se compreender o ciclo global de N (Gruber & Galloway 2008). Logo que alteraes sistemticas na razo CN dos organismos pode permitir a biosfera terrestre sofrer rpidas e grandes mudanas na produtividade sem a 21

necessidadedealterarasquantidadesdeNbiologicamentedisponvel(Gruber&Galloway2008). A fixao biolgica de N e a denitrificao so os processos naturais mais importantes que poderiam alterar a quantidade de Nr dos sistemas terrestres, e da alterar tambm o ciclo global de C e o clima, sem mudararazoCNdosorganismosauttrofos(Gruber&Galloway2008). EmresumotemsequeocicloglobaldeNjfoialteradonumaescalatograndequeosnveisdeN2O,por exemplo, atingem hoje valores nunca antes observados considerando os 650.000 anos anteriores (Gruber & Galloway 2008). Nesse contexto, no h dvida de que o ciclo global de N estar sob fortes presses nos prximosanos,principalmentedeorigemantropognicaedasmudanasnoclima(Gruber&Galloway2008). 3.3.Nitrognionosecossistemastropicais CiclagemdeNnosecossistemastropicais Nasflorestastropicais,umagrandequantidadedeNcirculaanualmente(Martinellietal.1999),sendoque as taxas de mineralizao, emisses de gases e as perdas por lixiviao so geralmente altas (Vitousek & Sanford 1986). A exceo para esta generalizao so as florestas sobre solos arenosos e florestas montanhosas que so relativamente empobrecidas em N (Cuevas & Medina 1986). Quando o N se encontra emexcessoseuciclotendeasermaisaberto(Martinellietal.1999)easuaperdaocorrepredominantemente atravs da emisso de gases, ao passo que as perdas de N de ecossistemas com baixo teor de N ocorrem predominantementenaformadeNorgnicodissolvido(Matsonetal.1999). As savanas tambm so controladas pelas interaes entre a disponibilidade de gua e nutrientes, sendo especialmenteimportanteasazonalidadeclimtica.Estasnormalmenteapresentammenordisponibilidadede N, sendo a nitrificao e a emisso de gases relativamente baixas (Nardoto & Bustamante 2003), caracterizando desse modo um sistema com ciclo de N mais conservativo quando comparado ao de floresta tropical(Davidsonetal.2000). A fixao biolgica de N (FBN) considerada a principal entrada de N novo no Cerrado (Bustamante et al. 2006). Ometto et al. (2006) indicam que a FBN no aparenta ser uma estratgia amplamente utilizada em florestastropicais,quandoavaliadaatravsdaassinaturaisotpicadasespciesvegetais.Entretanto,Kreibich etal.(2006)indicamqueaproporodeNfixadopodeatingirat66%dototaldoNpresenteemespciesda floresta de vrzea na Amaznia. Em ambos os ecossistemas, a presena de espcies da famlia das leguminosasnotvel,entretantopoucoconhecidosobreseuopotencialdefixaosimbitica,apesardea capacidade de FBN nos trpicos ser considervel como colocado por alguns autores (Cleveland et al. 1999). E 22

foi encontrada atividade nodular na Floresta Ombrfila Densa da Mata Atlntica, com maior ocorrncia de ndulosnasreasdeflorestademenoraltitude(Manarin2012). Tambm a composio de espcies de uma comunidade exerce um papel fundamental sobre a ciclagem de N no solo atravs da facilitao da assimilao de N orgnico e inorgnico por micorrizas (Chapman et al. 2006). Ainda, em ambientes pobres em N, tal como savanas, as plantas exercem maior controle na ciclagem devido dependncia de micorrizao quando comparados a ambientes onde h maior riqueza deste nutriente, p.e. florestas tropicais (Chapman et al. 2006). Aidar et al. (2004) indicam que a ocorrncia de micorrizao em razes de espcies arbreas na Mata Atlntica inversamente proporcional fertilidade do solo,corroborandoasugestoacima. A presena da associao simbitica favorece o estabelecimento, sobrevivncia e crescimento da planta hospedeira e nohospedeira devido ao incremento da absoro de gua e nutrientes minerais, contribuindo tambm para a ciclagem mais eficiente e configurando um importante mecanismo de conservao de nutrientes. O conhecimento sobre a ocorrncia de simbiose nas espcies desses ecossistemas ainda muito incipiente, sendo restritos os estudos sobre a colonizao em Mata Atlntica (Aidar et al. 2004) e Cerrado (Grossetal.2004). Temse que micorrizas arbusculares evoluram para explorar um maior volume de solo por unidade de fonte de nutriente relativa s estruturas de explorao e absoro das plantas (razes e anexos), melhorando substancialmenteaassimilaodenutrientes,especialmenteosdemenormobilidadenosolo comoo fsforo (Smith&Read2008).Assim,micorrizasarbuscularesexercemumimportantepapelnosciclosbiogeoqumicos, resultandonareciclagemdematriaorgnicaeproduzindonutrientesparaasplantas(Tayloretal.2004). O istopo estvel 15N raro na natureza, ocorrendo em abundncia menor que 0,4% em relao ao 14N. Utilizandose da espectrometria de massas fica relativamente fcil detectar pequenas quedas em 15NO3, e aumentos em 15N2 e 15N2O resultantes de denitrificao (Seitzinger 2008). Decrscimos em NO3 marcados isotopicamente (no considerando o N2 e N2O) foram atribudos a assimilao por plantas e micrbios, e permitiram com isso distinguir o que advinha da denitrificao do que tinha origem em reservas de N na biomassaepermitiutambmcalculartaxasdedenitrificaoeassimilaobitica(Seitzinger2008).

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OparadoxodoNnasflorestastropicais Observaes do ciclo do N em ecossistemas tropicais da ltima metade do sculo passado indicam que florestas tropicais intactas tendem a acumular e reciclar largas quantidades de N quando comparadas com florestas temperadas. Entretanto, esta aparente regulao do ciclo de N nos ecossistemas introduz um paradoxo quando se considera os aspetos de fisiologia e evoluo de plantas individuais: a principal fonte da riquezadeNnasflorestastropicaisfixaosimbiticadeNouFBNdeveria,emteoria,serfisiologicamente reguladaquandoosuprimentointernodeNdisponvelsuficiente(Hedinetal.2009). A afirmao de que as florestas tropicais so ricas em N possui incertezas, primeiro porque a maioria dos estudos indireta e existem poucos trabalhos que se utilizaram de informaes empricas de fato, segundo porque teoreticamente difcil de extrapolar a riqueza de N para um nvel ecossistmico baseandose em mecanismos fisiolgicos e ecolgicos que operam em nvel individual de organismos fixadores de N (Hedin et al. 2009). A explicao mais comum afirma que a FBN por plantas da famlia das leguminosas seria a responsvel pela entrada da grande quantidade de N novo no sistema (Cleveland et al. 1999, Galloway et al. 2004, Vitousek & Howarth 1991), mas essa afirmao gera um paradoxo quando considerase que a FBN reguladapelaconcentraodeNnoambiente,noocorrendooudiminuindomuitoemambientesricosemN (Hartwig 1998, Pearson & Vitousek 2001) e portanto no pode ser entendida como um mecanismo que pode sustentar a riqueza de N encontrada nas florestas tropicais como sendo maior que outras fontes (Hedin et al. 2003). Hedin et al. (2003) props que o acmulo de N disponvel em florestas tropicais midas representa um enorme paradoxo no resolvido no ciclo terrestre de N com implicaes para o entendimento de como organismos funcionam nos ecossistemas e como a floresta funciona dentro do sistema terrestre global, e Hedin et al. (2009) propuseram como explicao para esta riqueza um modelo conceitual, chamado por eles de Nitrostat, onde consideram a interao de muitos fatores que determinam a entrada de N nas florestas tropicais, dentre estes esto a fixao biolgica facultativa de N, a deposio atmosfrica de N, a produo anual de serapilheira e a fixao de N na copa das florestas (sendo esta totalmente independente da disponibilidadedeNnosolo). Porm, existem observaes do fluxo de nutrientes em florestas tropicais que oferecem suporte para a ideiadequeasperdasdeNO3dissolvidosoaltasnamaioriadasflorestastropicais(Biggsetal.2004,Fortiet al., 2000, Lesak 1993, McDowell & Asbury 1994, Neill et al. 2001, Schrumpf et al. 2006, Wilcke et al. 2001, Williams et al. 1997), e a afirmao relativa a riqueza de N encontrada nas florestas tropicais pode ser muito relativa. 24

Florestasmontanas As florestas montanas esto entre as mais ameaadas dentre as florestas tropicais (Hamilton et al. 1995, Frana&Stehmann2004).Aconservaodestesecossistemasprecria,principalmentedevidosaltastaxas de desmatamento causadas por explorao de madeira, agricultura e outras presses antrpicas (Hamilton et al. 1995). A importncia destas florestas bem reconhecida pela comunidade cientfica e devese, entre outros fatores, a sua alta biodiversidade e endemismos, complexidade estrutural e riqueza (Summerbell 1991), bem como a importncia destas na regulao da precipitao sazonal que promovem o controle de inundaeseerosonasestaeschuvosaseestocagemdeguanasestaessecas(Stilletal.1999). Entretanto, as espcies destas florestas so muito sensveis a variaes no ambiente, especialmente ao regime de temperaturadevido falta de habitats alternativos para as espcies(Colwell et al. 2008, Pounds et al. 1999). Como consequencia das mudanas atuais no clima global, evidncias de perda da biodiversidade nessas florestas j existem (Rull & VegasVilarrubia 2006, Colwell 2008), assim como um potencial deslocamento de espcies de altaaltitude movendose para cima no gradiente altitudinal devido concorrncia com espcies de baixa altitude. Ainda, aumentos na frequncia de fogo depois de prolongados perodos de seca em vegetao no adaptada ao fogo, como a de algumas florestas midas montanas do mundo, so esperados (Steffen et al. 2009). Alm disso, dados sobre vertebrados endmicos sugerem que as florestasmontanasestoseveramenteameaadaspelasmudanasnoclimaglobal(Williansetal.2003). Portanto, as mudanas globais devem afetar a distribuio dessas florestas podendo levlas extino (Still et al. 1999) pela impossibilidade de migrarem para maiores altitudes devido relativamente baixa taxa demigraocaractersticasdeflorestasmontanas(Malcolmetal.2006). Apesar de a extino nos topos de montanhas ser foco da ateno da maioria das discusses sobre deslocamento altitudinal de espcies, apenas vertebrados (Williams et al. 2003) e borboletas (Wilson et al. 2008) foram examinados em estudos efetivamente de campo. Investigaes com plantas so mais restritas a abordagens baseadas em modelagem computacional e foram at o momento realizadas para florestas montanasdaCostaRica(Colwelletal.2008),Andes(Bushetal.2007),Monteverde,Colmbia,Borneoefrica (Still et al. 1999), as quais predizem mudanas potenciais na distribuio de espcies como consequencia das mudanas climticas globais. E apesar de alguns poucos estudos se preocuparem em examinar os nutrientes dessas florestas (Grubb 1977, Tanner 1977, Tanner 1985), o impacto das mudanas no clima em relao aos nutrientes necessita maiores investigaes (Still et al. 1999). Apenas alguns aspectos de biologia das espcies desse tipo de floresta foram investigados, como composio de espcies, crescimento e distribuio das comunidades (Grubb 1977), e florstica e estrutura das mesmas (Laidlaw et al. 2000, Frana & Stehmann 25

2004). Sabe at o momento sobre as florestas montanas, que elas apresentam geralmente baixas temperaturas (Vitousek & Sanford 1986), e que temperaturas reduzidas levam a reduzidas taxas de decomposio e liberao de nutrientes da serapilheira (Grubb et al. 1977, Tanner 1981). Com relao concentrao de nutrientes nas folhas, Vitousek & Sanford (1986) sugerem, em artigo de reviso, que as florestas tropicais montanas parecem ser pobres em N, que a ciclagem de N nas partes mais altas dessas florestas menor que nas partes mais baixas, e que esse padro afeta a fisiologia, a comunidade, a ecologia e a biologia da populao das mesmas, atravs da mudana na eficincia da ciclagem dos nutrientes, produtividade e crescimento gerais. Eles indicaram que pesquisas para investigar essas interaes so importantes e promissoras. Notvel esforo foi feito nos anos 70 para caracterizar relaes plantasolo em florestas tropicais e esto sumarizados em diversas revises como colocado por Hedin et al. (2009). O consenso emergente de que as florestas com alta umidade do solo frequentemente mostram altos nveis de N, porm as florestas montanas so comparativamente mais pobres em N. A anlise de Vitousek & Sanford (1986) sugere que apesar dos padres na ciclagem de nutrientes diferirem nas florestas sob diferentes solos, a EUN pelas plantas, como evidenciado pela produo de serapilheira (massa seca) por unidade de N nos locais com menos N circulando no solo, parecem ser similares entre as florestas tropicais e temperadas decduas, eles sugerem que as diferenasentreoslocaissoprovavelmenterelacionadasadiferenasnadisponibilidadedeN,porqueaEUN decresce similarmente ao aumento na circulao de N atravs de ambos os tipos florestais (Vitousek 1982). No caso das florestas tropicais, alta EUN foi amplamente associada com florestas montanas que experimentambaixastaxasdecirculaodeN(Vitousek1982). Numcontextoglobal,Craineetal.(2009)sugeriramqueecossistemassecostemaltadisponibilidadedeN, e que plantas com alta concentrao de N, em mdia, ocupam locais com alta disponibilidade de N. Uma deposio de N contnua e acumulada poder mudar a dinmica de N das florestas podendo levar a desvantagem competitiva de espcies adaptadas a baixas concentraes de N, por exemplo plantas arbreas iniciais na sucesso florestal, adaptadas a germinao sob altas temperaturas do solo, podem prosperar em detrimento das plantas mais avanadas na sucesso que requerem temperaturas mais amenas (Colwell et al. 2008). A modelagem de Hilbert et al. (2001) com plantas de florestas midas australianas, mostrou que esses ecossistemas so sensveis a menor alterao do clima e grandes mudanas na sua distribuio so previstas com as mudanas climticas globais, mas com diferentes consequencias de acordo com o tipo de floresta. Os 26

autores firmam que florestas montanas que ocorrem em altas altitudes e baixas temperaturas, tm enorme sensibilidade a temperatura com relao aos demais tipos de floresta, e afirmam que no se tem ainda conhecimento suficientemente preciso sobre como o clima dos trpicos midos ir mudar de forma geral e menoscertezaexisteparamudanasnasazonalidadeeosefeitosdessasnasflorestas. FlorestasnoBrasileAustrlia Sabese que as florestas montanas do estado de So Paulo no Brasil, pertencentes Floresta Ombrfila Densa Montana do Domnio Mata Atlntica (Joly et al. 1999) e do sudeste do estado de Queensland na Austrlia, esto entre os ecossistemas mais ameaados do mundo (Malcolm et al. 2006). Estas florestas evoluram no continente Gonwdwana h cerca de 102 milhes de anos atrs e no caso das florestas Australianas, temse que sua significncia biolgica inclui 13 das 19 famlias de angiospermas primitivas ainda presentes nos dias de hoje (Vandernbeld 1988). No existe informao na literatura sobre quantas famlias e/ou gneros primitivos so ainda remanescentes nas florestas brasileiras, e os estudos so limitados a registrosfsseisedadospalinolgicos(Morh& Friis2000,Gerrieneetal.2001),masobservaesdecampoe de estudos florsticos destacam alguns exemplos importantes como Araucaria e algumas pteridfitas arborescentes,membrosdafamliaCyatheaceae. Como comentado, as florestas montanas esto entre as vegetaes florestais tropicais mais ameaadas, e so reconhecidamente pouco estudadas, pois a maioria dos levantamentos florsticos e fitossociolgicos foi realizada em fragmentos com altitude inferior a 1000 m (Frana & Stehmann 2004). No Estado de So Paulo, poucos trabalhos foram dedicados esta formao vegetal, e recentemente foi publicado um conjunto de trabalhos realizados em uma rea de Floresta Montana localizada na Serra de Paranapiacaba, Municpio de Cotia(ReservaFlorestaldoMorroGrande)(Metzgeretal.2006,Catharinoetal.2006,Alves&Metzger2006), que indicam a predominncia das famlias Myrtaceae, Lauraceae, Fabaceae, Rubiaceae, Melastomataceae e Euphorbiaceae. Tabarelli & Mantovani (1999) estudaram a sucesso aps corte e queima da floresta no Ncleo Santa Virgnia, PESM, e indicam que as fases de sucesso subsequentes foram dominadas pelas famliasMyrtaceae,LauraceaeeEuphorbiaceae. O Bioma Mata Atlntica possui grande parte dos seus maiores e mais preservados remanescentes no Estado de So Paulo nas proximidades dos centros urbanos (LeitoFilho 1994). Um estudo da evoluo da cobertura florestal do Estado demonstrou que entre os anos de 1962 e 1992 a vegetao natural sofreu um decrscimo de 57 % (Projeto Biota 2001). Dos 82 % de Domnio de Mata Atlntica no Estado, atualmente 27

restam apenas 7,8 % de remanescentes florestais (SOS Mata Atlntica 2001). A paisagem florestal altamente fragmentada herana da evoluo da ocupao do solo nas regies tropicais, onde a expanso agrcola avanou nas reas com caractersticas edficas favorveis mecanizao (Viana et al. 1992). As manchas disjuntas da floresta atual, existem particularmente em locais de topografia muito acidentada, que impede qualqueratividadeagrcola(LeitoFilho1987). A Mata Atlntica uma formao heterognea, composta por diferentes fisionomias florestais: Florestas Ombrfilas Densa e Mista (Floresta de Araucria), Florestas Sazonais Decidual e Semidecidual, Mangues e Restingas (Joly et al. 1999). As Florestas Ombrfilas Densas representavam originalmente 15% da cobertura florestal no territrio nacional (GEO Brasil 2002) estendendose por quase toda a faixa litornea brasileira. Atualmente, seus remanescentes restringemse a 7,3% de sua rea original (SOS Mata Atlntica 2000). SegundoTabarelli&Mantovani(1999),essatipologiaflorestalpredominantenaregiosudeste,eoconjunto deestudosflorsticosefitossociolgicosefetuadosnaencostadoestadodeSoPauloindicamelevadariqueza e diversidade de espcies arbreoarbustivas. Os efeitos combinados de ameaa das mudanas no clima global, a fragmentao e a contnua atividade humana local, alm da alta biodiversidade e alto grau de endemismos,fezdaflorestaAtlnticaumhotspotparaaconservaodabiodiversidade(Myersetal.2000). Oliveira Filho e Fontes (2000) sugerem que a evoluo e especiao na Mata Atlntica sofreram grande influncia das variveis geoclimticas, particularmente sazonalidade na precipitao e temperatura. Tambm aaltitude(eastemperaturasassociadas)teriainfluenciadoacomposiodeespciesdasdiversasfisionomias florestaisquecompemoDomnioAtlntico.Sendoestadiferenciaoflorsticafortementeevidenciadaentre asflorestasdonordesteesudestedoBrasil,quetambmapresentamdiferenasnopadrodetransioentre as florestas midas do litoral e florestas sazonais mais interiorizadas, associadas s diferentes temperaturas mdiasregionais. A situao das florestas midas subtropicais australianas muito similar da floresta Atlntica brasileira no que diz respeito ao desmatamento ocorrido em razo da produo agrcola e outras presses antrpicas (Steffen et al. 2009). Porm, a Austrlia continua sendo lder dentre os pases que contribuem para extines em massa de espcies por ao antrpica (Mackey et al. 2008). Cerca de 80 mil km2 de floresta estavam presentes na Austrlia antes da invaso europeia (Webb & Tracey 1981), a rea de cobertura florestal em 1981 era estimada em 02 milhes de hectares (Webb & Tracey 1981), 25% restavam em 1991 (Summerbell 1991)eareaatualencontrasereduzidaa5%dooriginal(Steffenetal.2009). OWorldHeritagelistouaflorestamidaaustralianadosudestedoestadodeQueensland(nortedeNew South Wales NSW) como patrimnio natural da humanidade por ser a mais extensa rea de floresta 28

subtropical remanescente no planeta que contm excelentes exemplares representando grandes etapas da histria evolutiva da terra e onde sobrevivem espcies ameaadas de valor universal excepcional para a cincia e conservao (HTTP://whc.unesco.org/). Dentre as florestas Gowndwanicas dessa regio, o Parque NacionaldeLamingtonumdosmaioresfragmentosquerestaramdeflorestasubtropicalaustraliana(Bryden 1977) e o foco declarado do Parque passou de ser a utilizao da floresta, para ser a conservao da mesma, apssuainclusocomopatrimnionaturaldahumanidade(Laidlawetal.2000). Nessecontexto,importantesalientarasprevisesdePhoenixetal.(2006),queindicaramquedevidoao uso de fertilizantes qumicos pela agricultura moderna e queima de combustveis fsseis (Galloway et al. 1994, Matson et al. 1999), as taxas de deposio de N tem aumentado substancialmente atravs dos trpicos nas ltimas dcadas, e isto tem sido notvel sobre grande parte da costa brasileira (Galloway et al. 2004), incluindo a Floresta Atlntica (Phoenix et al. 2006), que est entre os oito principais hotspots para a conservao da biodiversidade (Myers 2000) que Malcolm et al. (2006) julgaram ser especialmente vulnerveisdevidoaextinodeplantasjterexcedidoovalorde2000espcies. At o final dos anos 90, cerca de 30% da rea de floresta Atlntica registrou uma deposio de N maior que 10kg N ha1.ano1, enquanto que a mdia global na taxa de deposio de N terrestre foi 3,5kg ha1.ano1 (Phoenix et al. 2006). As previses para a deposio de N na floresta Atlntica para o ano de 2050 excedem a mdia de 20kg ha1.ano1, com o mximo de deposio para este hotspot podendo chegar a 60kg ha1.ano1 (Phoenix et al. 2006). Uma anlise sensvel baseada em mltiplos fatores (incluindo diferentes previses de modelos de vegetao e de mudanas no clima global) mostrou que a floresta Atlntica tende a apresentar uma perda de habitat relativamente grande com relao s mudanas no clima (Malcolm et al. 2006). No sendo considerado como um hotspot global, no se tem previso especfica para as florestas do sudeste da Austrlia(Phoenixetal.2006). UsodeNporplantasdeflorestastropicaisnoBrasileAustrlia Apesar da importncia em melhor se compreender o funcionamento das florestas, caractersticas do metabolismo primrio de N em plantas recebem menos ateno pelas pesquisas de um modo geral. Um importante estudo publicado nesse aspecto realizado numa floresta Atlntica do Brasil foi o de Aidar et al. (2003) mostrando que espcies arbreas ao longo de um gradiente sucessional apresentam um contnuo de estratgias relacionadas ao uso de N. Os autores propuseram um modelo de uso de N (Figura 1) em uma floresta sob solo calcreo do sudeste brasileiro, onde espcies pioneiras parecem usar principalmente NO3 29

como fonte de N, e possuem altas concentraes de N nas folhas; espcies do estgio tardio da sucesso forammenosresponsivasaoaumentodadisponibilidadedeNnosoloeexibemumareciclageminternadeN, com baixa concentrao de N nas folhas; e as espcies secundrias inicias na sucesso exibiram um comportamento menos uniforme, com um subgrupo mostrando estratgias mais similares s das espcies pioneiras (incluindo membros das famlias Fabaceae e Lauraceae) e outro subgrupo mostrando similaridade com as estratgias das espcies tardias (incluindo membros das famlias Myrtaeae, Melastomataceae, ProteaceaeeMyrcinaceae). Apsesseestudopioneiro,etendoemvistaaaltariquezadeformaesvegetaisquecompemoDomnio Mata Atlntica e a plasticidade geral das florestas midas em reter N (Vitousek et al. 1997), avaliaes posteriores feitas sob a mesma abordagem, em outras regies da floresta Atlntica a diferentes altitudes e solos,confirmaramaexistnciadessemesmocomportamentonousodeNpelasespciesdentrodasucesso florestal (PereiraSilva 2008, Campos 2009, Silva 2012), dando uma abrangncia regional ao modelo, inicialmente local, proposto por Aidar et al. (2003) e reforando a relao entre as estratgias do uso de N e deregeneraoutilizadaspelasespciesarbreasdasrvoresdaMataAtlnticadoestadodeSoPaulo. Um estudo nesse mesmo aspecto realizado em duas florestas midas australianas, incluindo a floresta de Lamington,foiodeStewartetal.(1988),queencontraramaltosnveisdeANR(atividadedanitratoredutase) nas folhas de plantas pioneiras na sucesso, sendo estas consideradas como espcies predominantemente assimiladoras de NO3 (incluindo membros das famlias Euphorbiaceae e Solanaceae), enquanto que baixas atividades foram mensuradas em plantas do subbosque (incluindo membros das famlias Capparaceae e Monimiaceae), plantas emergentes e dominantes do dossel (incluindo membros das famlias Lamiaceae, Proteaceae e Moraceae). Os autores sugerem que algumas espcies caractersticas de vegetao tardia na sucesso florestal tm pouco potencial em usar NO3 como fonte de N, mesmo quando este facilmente disponvel. Outro estudo, realizado em florestas tropicais australianas, uma monsonal decdua e uma sempreverde, evidenciou a separao das espcies em classes quanto ao uso de N, sugerindo uma clara distino de nichos com a existncia de trs classes de espcies: as que usam NO3, com alta e outra com baixa capacidade, e as que no usam NO3. Os autores sugeriram a existncia de uma relao ntima entre a disponibilidade de N no solo, a porcentagem de N na seiva do xilema das plantas e a concentrao de N nas folhas, e mostraram ocorrer maior concentrao e disponibilidade de N nos solos da floresta monsonal decdua, sendo a maioria encontradasobaformadeNO3(Schmidt1998,Schmidtetal.1998).

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 Figura 1. Diagrama conceitual do modelo de uso de nitrognio (N) ao longo de uma sucesso florestal na Mata Atlntica, como proposto por Aidar et al.(2003), indicando os principais compostos nitrogenados de baixo peso molecular transportados na seiva do xilema e as tendncias dos parmetros analisados ao longo do contnuo existente entre as diferentes estratgias de regenerao, onde: leaf 15N assinatura isotpica foliar (); transporte na seiva do xilema (xylem sap): Arg arginina, Asn asparagina, Gln glutamina, NO3 nitrato; sucesso florestal: early estgio inicial de sucesso (15 anos aps abandono), mid estgio mdio de sucesso (25 anos), late estgio avanado de sucesso(>36anos)(Aidaretal.2001,2003). 3.4.Nitrognionassavanastropicais Savanastropicaisnomundo Basicamente, a composio e a estrutura de ecossistemas de savana esto intimamente relacionadas com a disponibilidade de gua e nutrientes no solo, mas fatores como fogo, herbivoria e manejo das terras para agricultura so tambmimportantes eagem modificando essa estrutura bsica(BernhardReversat & Poupon 1980,IGBP1997,Eamus1999,Schmidt&Stewart2003,Adamsetal.2004,Bustamanteetal.2006). A variao na temperatura entre as estaes do ano em ambientes de savana dependente da altitude, latitude e distncia do oceano. Em savanas ao norte daAustrlia,porexemplo,quesoprximasaooceano 31

e aos trpicos (1220S), a temperatura uniformemente alta o ano todo (2030C). J em savanas marginais aos trpicos ou que ocorrem em altas altitudes, as temperaturas podem ser quase congelantes e a variao sazonal ser de 20C ou mais. Mas de modo geral, estes ecossistemas esto confinados a reas onde a temperaturaanualmdiamaiorque20Ceamdiadomsmaisfriomaiorque13C(Eamus1999). Quantoaoregimedechuvas,emgeralnessesambientes,amdiaanualusualmentemaiorque600mme menorque1700mm,eaduraodaestaosecapodeoscilarentreumesetemeses(Eamus1999). De modo geral, as savanas africanas e indianas so marcadamente compostas por plantas decduas, as savanas da Amrica do sul apresentam principalmente espcies de hbito sempreverde (ou pereniflio), no Brasil parece haver um misto de plantas decduas e sempreverdes (Franco et al. 2005), j as savanas australianas no possuem uma dominncia aparente por espcies de hbito especfico (Eamus 1999). Entretanto,todasassavanastmemcomumumaforteinflunciadasazonalidadeemsuasespcies. A coexistncia de espcies arbreas com comportamento fenolgico contrastante nos ecossistemas de savana tm sido considerada como um indicador de diferenas na profundidade dos sistemas radiculares, de modo que se espera que plantas decduas tenham razes mais superficiais e pouco controle transpiratrio (Francoetal.2005).Plantassempreverdescomsistemasradicularesprofundosdevemsercapazesdemanter altastaxasdetranspiraoeassimilaodeCO2duranteperodossecos(Goldsteinetal.1989).Poroutrolado, supesequeplantasdecduastenhamumaestratgiamenosconservativanousodeguaenutrientes,oque condiz com a baixa longevidade foliar caracterstica de espcies com esse hbito, enquanto que espcies sempreverdesdevemterumaestratgiamaisconservativa(Lloyd&Farquhar1994). Um estudo conduzido por BernhardReversat & Poupon (1980) em uma savana africana dominada por Acacia senegal mostrou que a produo de N no solo durante a estao mida ocorre principalmente sob a forma de NO3. Os autores indicam que o acmulo de N no solo aumenta durante a vida das plantas, o que tambm j foi verificado por diversos outros estudos (Ludwig et al. 2004), e que o fluxo anual de N da vegetao para o solo relativamente alto quando comparado a valores apresentados por alguns ecossistemas de floresta. Assim, a riqueza em espcies leguminosas, caracterstica da maioria das savanas do mundo,podecontribuirparaumciclobastanteativodeN,considerandoofatodequemuitasdessasespcies so fixadoras de N. Os autores apontam tambm, que a chuva o principal fator ambiental influenciando o ciclodoNnessesecossistemas,poislimitaocrescimentodavegetao(tambmautilizaoeoretornodeN), controlaaproduodeNmineralnosolo,epromovenitrificaoouperdadeNdosoloporlixiviao. PormaproduoprimriadavegetaopodeserlimitadaporNdevidoarestriesnafixaodeNpelas plantas, que podem ser impostas pelas baixas concentraes de P e gua no solo, bem como por perdas de N 32

sob a forma gasosa. Neste sentido, a produo primria nesses ecossistemas pode ser prevista atravs da quantificaodoNmineralizado(IGBP1997,Ludwigetal.2004). Variaes na mineralizao lquida de N no solo podem ser consequencia da disponibilidade de NH4+ no solo, e o pico da atividade microbiana no solo de uma savana brasileira parece ocorrer no incio das chuvas, comumperodoinicialdeimobilizaoseguidodemineralizao(Nardoto&Bustamante2003). As savanas emitem grandes quantidades de NOx (xidos de N), advindas principalmente do solo ou queima de biomassa, e o NOx gerado depositado de volta a savana na maioria das vezes, uma vez que o tempo de vida do NOx e dos produtos de sua reao longo (Holland et al. 1999). Dentre os NOx, o NO se destaca porser um gsquimicamente reativo que regula aproduo de oznio troposfrico, eas savanas so afontebiognicamaisimportantedessegs(Matsonetal.1999). Plantasdesavanasquesoqueimadasanualmentetmmaioresvaloresde15Nquandocomparadoscom savanas queimadas com menor frequncia, sugerindo que o 15N pode ser usado como um marcador para acessodohistricodequeimadasnessesambientes(Schmidt&Stewart2003). Medina(1993)apresentaumaextensareviso sobrenutriomineralemplantasdesavanacombastante informao a respeito da ciclagem de N nesses ecossistemas. Em adio, os trabalhos de Bustamante et al. (2006), Sarmiento et al. (2006), Colleta et al. (2009), Chen et al. (2010), Pivello et al. (2010) tambm abordam certos aspectos do N em ecossistemas de savana, e trazem em comum as informaes de que o ciclo do N fortemente influenciado pelo regime de fogo nestes ecossistemas, a deposio de N vem aumentando consideravelmentenessasreas,eessasformaessofortementelimitadasporN. Bustamante et al. (2006), em uma comparao entre savanas tropicais e temperadas, chamou ateno paraofatodequeamaiorregiodesavanaabaixodotrpicodoEquadorestlocalizadanoBrasil,eestende seporcercade2milhesdekm2,sendoconhecidanacionalmentecomonomedeCerrado. SavanabrasileiraCerradonoestadodeSoPaulo O cerrado no estado de So Paulo apresentase atualmente na forma de fragmentos dispersos, especialmente na Depresso Perifrica, Planalto Ocidental Paulista e Vale do Paraba. A rea total com esse tipo de vegetao no estado correspondia originalmente a cerca de 14 % do territrio (So Paulo 1997). Em 1962 essa vegetao cobria 33.929 km2 (13,7% do estado) (Borgonovi & Chiarini 1965) e onze anos depois, SerraFilhoetal.(1975)estimaramessacoberturaemapenas10.388km2(cercade4,2%).Em1992,utilizando imagensdesatlite,Kronkaetal.(1998)estimaramumareatotalremanescentedeapenas2.379km2(cerca 33

de0,96%doestado),ouseja,em30anos,ocerradopaulistafoireduzidoamenosde7%desuareaoriginal, caracterizandoarpidadestruiodesseBioma. As comunidades de cerrado so extremamente complexas em termos estruturais (OliveiraFilho et al. 1989)ericasemespcieslenhosasendmicas.Espciespereniflias,brevedecduasedecduasocorremladoa lado (Franco 2002, Paula 2002). Essa diversidade funcional e estrutural da vegetao resulta em diferentes padres de distribuio do sistema radicular e em diferentes estratgias de utilizao espacial e temporal dos recursos hdricos, com efeitos marcantes da sazonalidade no balano de C, N e no crescimento. Muitas espcies lenhosas do cerrado perdem suas folhas parcial ou totalmente durante a estao seca (Paula 2002), confirmando a relao entre seca e deciduidade. As redues na rea foliar disponvel devido a fatores biticos e abiticos reduzem a capacidade de assimilao de C em espcies com copas perenes durante a estaoseca(Franco1998). Os solos sob cerrado so normalmente pobres, cidos, bem drenados, profundos e com altos nveis de alumniotrocvel.Arelaoentreaocorrnciadealtaconcentraodesteelementonosoloeaocorrnciada vegetao caracterstica de cerrado tem sido matria de controvrsia por muitos anos, sendo que mais recentemente outros fatores ambientais tais como geomorfologia, drenagem do solo e regime hdrico vm sendo estudados de modo a explicar o gradiente cerradofloresta proposto inicialmente por Coutinho (1978) (Ruggiero et al. 2002). Entretanto, do ponto de vista da disponibilidade de N nos solos de cerrado, Nardoto & Bustamante (2003) indicam que apesar da sua pobreza, ocorre predominncia do on NH4+ sobre o on NO3 como fonte disponvel para as plantas. Alm disso, Bustamante et al. (2006) indicam que a produtividade e a ciclagem de matria orgnica no cerrado so controladas pela interao entre a disponibilidade de gua e nutrientesequeestaestruturabsicamodeladapeloregimedefogo. Hoffmann et al. (2005) sugerem que a disponibilidade de nutrientes desempenha papel importante na determinao da distribuio das savanas e florestas tropicais, e que os seus resultados indicam diferenas fundamentais nas caractersticas foliares e relaes com nutrientes entre as espcies de savana e floresta. Estes autores ressaltam ainda que seja necessrios estudos a fim de elucidar os requerimentos nutricionais dasespciesecomoestesinfluenciamnaciclagemdenutrientesnestesdoisextensosBiomastropicais. Oliveira Filho e Fontes (2000) e Mio et al. (2003) indicam que h mais similaridade entre a flora da Mata Atlntica com a do cerrado, do que destas com a da Floresta Amaznica, sugerindo que os climas dos dois primeiros Biomas so mais similares por possurem baixas temperaturas no inverno e estao seca mais pronunciada, sendo esta similaridade ainda mais pronunciada em relao Floresta Ombrfila Montana devidoseuclimamaisameno. 34

Apesar de no existir um consenso sobre a existncia de sucesso entre as espcies de cerrado, ou savanas, alguns autores defendem a ocorrncia de uma transio entre as fitofisionomias caractersticas dessesambientes.Durigan&Ratter(2006)afirmamaexistnciadeumasucessoentreasfitofisionomiascom o decorrer do tempo, na ausncia de perturbaes maiores nesses ecossistemas, em especial dos eventos de queimadas. Os autores demonstram atravs de estudo com acompanhamento de fotos areas, que o cerrado tpico pode evoluir para um cerrado, mais denso, com rvores maiores e com diferente composio de espcies, incluindo espcies tpicas das florestas prximas. Isso ocorre possivelmente devido s mudanas provocadasnosoloemdecorrnciadaausnciadosdestrbios. 3.5.reafoliarespecficaedensidadedamadeira Plantas de espcies pereniflias mantm a copa cheia de folhas durante o ano todo e na poca seca reduzem no mximo 10% de sua folhagem, contrastando com plantas de espcies decduas que derrubam todas as suas folhas por pelo menos um ms, podendo chegar a quatro meses. J as espcies semidecduas so funcionalmente pereniflias, mas chegam a perder 50% de suas folhas na poca seca. Assim, a coexistncia de espcies com estratgias to diferentes devida principalmente reduo da competio pelos mesmos recursos, de modo que apresentam diferentes fenologias, arquitetura hidrulica, morfologia e tempo de vida foliar, taxas de assimilao, distribuindo diferentemente a demanda por recursos ao longo do ano(Eamus1999). A anlise de custobenefcio assume que existe um alto custo para a planta manter sua estrutura (construo e manuteno de folhas) e que o benefcio da maior manuteno com o tempo, o ganho com a fixao de carbono (Eamus 1999). Assim, folhas de plantas decduas normalmente senescem e sofrem absciso quando a disponibilidade de gua ou outro recurso ficam baixos a ponto de o custo de manuteno superar o benefcio de mantlas (Chabot & Hicks 1982, Sobrado 1991, Eamus & Prichard 1998, Eamus 1999, Prioretal.2003). Em plantas pereniflias, o aumento da longevidade foliar aumenta o custo de construo e manuteno destas durante o ano todo, e tambm aumenta a probabilidade de herbivoria, de modo que essas plantas normalmente desenvolvem estruturas e/ou compostos de defesa, geralmente contendo N (Williams et al. 1989), enquanto que folhas de menor longevidade diminuem o custo de construo, pois o tempo disponvel pararecompensaressecustoatravsdafixaodeCmenor. Umparmetromuitoutilizadocomoumbomdescritordeprocessosecossistmicosouemnvelindividual 35

 a rea foliar especfica (AFE) de uma planta, que se relaciona com a fotossntese, fenologia e decomposio foliar(Reichetal.1992,Wrightetal.2004),etambmrefleteocustodeconstruodeumafolhapelaplanta (Witkowski & Lamont 1991). Em ambientes pobres em recursos, as espcies tendem a apresentar folhas com menores AFE e maior longevidade (Westoby et al. 2002, Rosado & de Mattos, 2010), uma vez que a maior durabilidade da folha pode estar associada maior quantidade de tecidos estruturais que possibilitam maior resistncia a intempries (Chabot & Hicks 1982, Reich et al. 1992). A maior durabilidade permite um menor custo de C investido em construo foliar, pois a fotossntese pode ocorrer por um tempo maior na mesma folha(Chabot&Hicks1982,Westobyetal.2002). Entretanto, diferenas em caractersticas foliares tambm podem acontecer em funo de variaes na disponibilidade de luz, por exemplo, levando clara distino entre folhas de espcies tolerantes a sombra e espcies de sombra (Williams et al. 1989, Niinemets 2001). Enquanto espcies de sombra tendem a apresentar maiores AFE para maximizar a interceptao de energia luminosa, espcies tolerantes sombra possuemmenoresAFEcomaumentonalongevidadefoliar(Reichetal.2003,Poorter2009). Prioretal.(2003)emestudocom21espciesdesavananaAustrlia,encontrarammaioresAFEemenores longevidade e espessura foliar em espcies decduas, assim como maior contedo de N foliar e maior fotossntese. Este padro contrapese ao que ocorre em espcies pereniflias, que apresentam menor AFE, maior longevidade foliar, e menores contedos de N foliar e fotossntese. Esse comportamento para espcies perenifliasfoiobservadoemumagamadeespciesarbreasdediferentesambientes(Chabot&Hicks1982, Sobrado 1991, Prado & Moraes 1997, Eamus & Prichard 1998). A relao direta entre AFE, contedo de N foliar e fotossntese e destes parmetros inversamente com a longevidade foliar tem sido demonstradas em uma enorme amplitude de ambientes e espcies como indicados por Medina (1984), Field & Mooney (1986), Mulkey et al. (1995), Diemer (1998), Reich et al. (1998), Bolstad et al. (1999), Eamus et al. (1999), Niinemets (1999),Reichetal.(1999)eWrightetal.(2001). Existe a proposta de um padro global dessas relaes, como elegantemente demonstrado por Wright et al. (2004) em seu artigo The worldwide leaf economic spectrum, que rene dados sobre caractersticas foliares de mais de 2500 espcies em 175 locais no planeta. Os autores demonstram que a ligao entre alta fotossntese e alta concentrao de N resultado de uma relao causal direta, e explicam que uma grande longevidade foliar requer robustez e baixa palatabilidade da folha, que esto diretamente associadas a uma baixa AFE. Ainda, alta fotossntese tende a estar associada baixa longevidade foliar, porque isto requer alto contedo de N e/ou alta AFE, os quais elevam a vulnerabilidade da folha herbivoria, e que devido alta fotossntese,essasplantastmmaiorcrescimentoerapidamentesombreiamasfolhasmaisvelhaslevandoas 36

a senescncia, uma vez que os recursos so mais valiosos quando transferidos para folhas novas e mais bem iluminadas. Os valores de AFE nas folhas de uma planta normalmente decaem com o tempo conforme a folha amadurece(Field&Mooney1983,Simionietal.2004)assimcomoaquantidadedeNpormassafoliar(Chapin & Kedrowski 1983, Millard & Nielsen 1989), provavelmente devido incorporao de N estrutural, ou estocagem de N, e eventualmente como resultado da translocao deste elemento durante a senescncia foliar(Crane&Banks1992,Norbyetal.2000). Alm da AFE, a densidade da madeira (DM) uma importante caracterstica associada s propriedades de transportedeseivaeguanoxilema,aocrescimentoeresistnciadaplantaadanosfsicos (Meinzer2003). AltasDMaumentamaresistnciaaofluxodegua,diminuindoaeficincianotransportedeguaporreade xilema, promovendo valores mais negativos de potencial hdrico foliar (Meinzer 2003). Esta associao entre DMeotransportedeguatemreflexotambmnareafoliarjque,emalgunscasos,humarelaoinversa entre rea foliar e DM (Wright et al. 2007). Uma possvel explicao para esta relao que folhas menores possuem menor demanda por gua o que se ajustaria s maiores restries ao transporte de gua oferecidas pormadeirasmaisdensas(Chaveetal.2009). Meinzer (2003) sugere que uma alta DM permite planta uma alta resistncia cavitao (conseguida com menores dimetros dos vasos), entretanto isso tem como consequencia uma reduo na condutividade hidrulicaquereduzaeficinciadereposiodeguanasfolhasduranteodia.Seguindoomesmoraciocnio, Ribeiro (2007) encontrou em estudo com plantas de cerrado, que as espcies com alto potencial hdrico apresentaram menores AFE, como consequencia da menor densidade de madeira e maiores dimetros dos vasos(Bhaskar&Ackerly2006)possibilitandomenorresistnciahidrulicaemaiorpropensocavitao. Estudos realizados por Choat et al. (2005) com plantas de floresta tropical sazonal na Austrlia, principalmente espcies do gnero Eucalyptus, demonstraram que as espcies decduas possuem maior dimetro nos vasos do xilema e menor DM. Esses resultados contrariam os dados obtidos em outras florestas secas (Brodribb et al. 2002), deixando claro que a relao entre a arquitetura hidrulica e a fenologia foliar aindanoestclaramentecompreendida.

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4.OBJETIVOSEHIPTESES
Apresentepesquisatevecomoobjetivos: a) Determinar as estratgias de uso de N utilizadas pelas espcies arbreas vegetais que estruturam os ecossistemas em estudo, atravs da caracterizao da aquisio, transporte, estocagem e remobilizao doN; b) Comparar as caractersticas e estratgias de uso de N utilizadas pelas plantas, buscando similaridades e padres entre os ecossistemas, testando a validade do modelo de uso de N proposto por Aidar et al. (2003)paraasespciesdasflorestasestudadas; c)Buscarmodelosalternativosoucomplementaresnocasodotestedevalidaodomodelopropostono sersatisfatrioparaasreasdeestudo. Formularamsepreviamenteasseguinteshipteses: a)AsflorestasestudadasterocomportamentosimilaremrelaoaousoetransportedeNpelasespcies emdiferentesestgiossucessionais.Assim,espciessecundriastardiasnasucessoprovavelmentesero menos afetadas pela disponibilidade de N no solo por terem uma ciclagem interna de N como estratgia mais importante. Espcies pioneiras tero preferncia pelo uso do NO3 como fonte de N e haver um contnuodeestratgiasentreessesdoisextremosdasucesso. b) No Cerrado deve existir algum padro no uso de N pelas espcies, semelhante floresta no que se refere aquisio e reciclagem, considerando as semelhanas deste ecossistema com as florestas montanas como indicado por OliveiraFilho (2000). Os grupos funcionais adotados sero provavelmente diferentes,poisnoexisteumasucessoecolgicacronolgicaclaramentedefinidaparaesteecossistema. 38

5.MATERIALEMTODOS
5.1.MaterialVegetal 5.1.1.Seleoecaracterizaodasespciesvegetaisestudadas A seleo das espcies de cada rea estudada baseouse em estudos prvios de fitossociologia, que definiram as espcies mais importantes na estruturao da vegetao de acordo com o ndice de Valor de Importncia (IVI), que considera a frequncia, a dominncia e a densidade relativas das espcies na comunidade em questo. Foram selecionadas tambm espcies consideradas como de referncia pelos seguintes aspectos: espcies j estudadas anteriormente com relao ao uso de N, espcies indicadoras de ambientesouestratgiaecolgica,talcomoespciespioneiras,eespciesadequadasparacomparaesentre asreasdeestudooudestascomoutrasreas. A classificao das espcies da floresta Montana brasileira em grupos funcionais baseouse na categorizao sucessional feita por Gandolfi et al. (1995, 2000) e Lorenzi (1992, 1998) coincidindo com as delimitaes altitudinais da Floresta Ombrfila Densa proposta no sistema de classificao da vegetao de Velosoetal(1991).AclassificaodasespciesdaflorestaaustralianatevecomobaseaplanilhadeKanowski et al. (2009). Todas essas classificaes incluem as espcies em trs grupos sucessionais principais, com os conceitosgeraisdescritoaseguir: espcies Pioneiras (Pi) ocorrem preferencialmente em clareiras e bordas de florestas, podendo aparecertambmsobacopadeoutrasrvores,sopoucofrequentesnosubbosque.Caracterizamsepor possurememgeralsementescomgerminaodependentedealtastemperaturas,sobemadaptadasao solpleno,tmcrescimentorpidoeciclodevidacurto. espcies Secundrias Iniciais (Si) possuem um comportamento varivel de dependncia de luz, o que permite seu desenvolvimento nas bordas ou no interior de clareiras, nas bordas de floresta e no interior do subbosque, so praticamente ausentes em reas intensamente sombreadas. Tm em geral alta longevidade,podendoaparecernodosseldeantigasclareiras. espcies Secundrias Tardias (St) so tolerantes sombra, ocorrem em maior abundncia e permanncia no subbosque, incluindo locais intensamente sombreados. Contudo, essas espcies podem eventualmente sobreviver em clareiras recentes ou em preenchimento. Nesse grupo ocorrem dois comportamentos,oprimeirocujaespciepermanecetodavidanosubbosquee,osegundo,emquepode crescer e se desenvolver no subbosque, posteriormente alcanando a condio emergente tpica e 39

compondo o dossel da floresta. Tm ciclo de vida geralmente longo e suas sementes preferem temperaturasmaisamenasparagerminar. Como no existe consenso sobre a existncia de uma sucesso cronolgica para o cerrado, a classificao das espcies desta rea em grupos funcionais foi realizada considerando o hbito fenolgico das mesmas, utilizandosedotrabalhodeLorenzi(1992,1998),queconceituaessesgruposdaseguinteforma: plantas decduas (D) so aquelas que perdem completamente suas folhas em alguma fase do ciclo anual,noimportandooperodoquepermanecemdesfolhadas.Issoocorregeralmentenaestaosecae umcomportamentocaractersticodealgumasespciesdeambientessazonais. plantassemidecduas(S)sodefinidascomoaquelasqueperdemparcialmentesuasfolhasemalgum perododocicloanual,masnuncaficamcompletamentedesfolhadas. plantas pereniflias (P) so aquelas que permanecem sempreverdes durante todo o ciclo anual, podendo perder folhas em algum momento do ciclo de vida, mas a reposio destas ocorre concomitantemente. Aps a escolha e a definio dos grupos funcionais com as espcies de cada rea, foi elaborado um mapa de localizao dos indivduos a serem amostrados. A seleo dos locais de coleta em campo considerou a facilidadedeacessossubparcelaseaseleodosindivduosconsideroualogsticadecoletadeseusgalhos. Demodogeral,asespciesforamidealmenterepresentadasportrsouquatroindivduos,emboraemfuno da dificuldade de coleta de certas rvores com altura elevada ou mesmo da no existncia de mais exemplares,algumasespciesforamrepresentadasporumoudoisindivduos. 5.1.2.Estratgiadecoletaedesenhoexperimental O estudo das preferncias de uso de N em espcies arbreas foi realizado atravs do desenvolvimento de algumas tcnicas experimentais a fim de compor um cenrio ecofisiolgico diante das diferentes exigncias e estratgias empregadas pelas espcies em funo das fontes disponveis de N no ecossistema em estudo. A abordagem foi realizada avaliando os seguintes parmetros: capacidade de reduo de NO3 nitrato atravs dosensaiosdeatividadedaenzimadenitratoredutase(ANR);determinaodocontedodeNO3nostecidos foliares (NO3 folha); determinao do contedo de N e C totais (%N, %C, e razo CN) e composio isotpica (15N) foliares; concentrao de compostos nitrogenados de baixo peso molecular na seiva do xilema (aminocidos aa, amidas e NO3); disponibilidade de NO3 e NH4+ no solo atravs do uso de resina de troca inica; ocorrncia de simbiose radicular (micorriza e nodulao) e identificao das espcies de micorrizas 40

atravs dos esporos de micorrizas encontrados no solo; clculo da rea foliar especfica (AFE) e da densidade damadeira(DM). Emtodasasreasdeestudo,acoletadomaterialfoirealizadaemduasestaesdoano(invernoevero, por serem as estaes mais marcantes quanto variao das condies climticas tropicais), sempre no perodo da manh (entre 7h e 12h quando a ANR maior segundo Sodek (2004)), com uso de podo e escalador de rvores em alguns casos. Especificamente, as coletas foram realizadas nos seguintes perodos: JaneiroeAgostode2008noPDG,Julhode2008eJaneirode2009emSV,JaneiroeJulhode2010emLAM. Cada galho coletado era desfolhado, suas folhas eram ento reservadas em bolsa trmica para posterior anlise de ANR, NO3 folha e AFE, dois pequenos pedaos do galho eram reservados para mensurao da DM, a extremidade inferior do galho desfolhado era lapidada manualmente com uso de canivete para melhor acoplarse ao aparato de coleta da seiva e conectado a uma bomba de vcuo manual (Figura 2). As amostras deseivaerammantidasresfriadasemcampoedepoiscongeladasemfreezera80Catposterioranlise.

Figura 2. Aparato para extrao de seiva. A bomba de vcuo manual, Btubo de silicone, Cramo da planta, D suportecomfilmedeparafina,Ereservatriodeseivae Ffrasco com tampa de rosca (retirada de PereiraSilva 2008).

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5.1.3.FlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar,NcleoSantaVirgnia(SV) AreadeestudodeFlorestaOmbrfilaDensaMontanapertenceaodomniodaMataAtlntica,partedo Ncleo Santa Virgnia (SV) do PESM, e situase nos municpios de So Lus do Paraitinga, Cunha e Ubatuba (Figura 3) entre as coordenadas (2317' a 2324' S 4503' a 4511' W). Tem sua maior rea (7.557 ha) localizadanomunicpiodeSoLuizdoParaitinga(Padgurschi2010). Cerca de 5.000 ha do ncleo so recobertos pela Floresta Ombrfila Densa Montana (Veloso et al. 1991) em altitudes que vo de 850 a 1.100 m, e relevo com grandes declividades (24o a 37o). O clima tropical temperado, sem estao seca (Setzer 1966), com uma precipitao mdia anual superior a 2.000 mm. Nos mesesmaissecos,junhoaagosto,aprecipitaomdiamensalmaiorque60mm.Aaltapluviosidadedessa regio montanhosa explicada pela proximidade com o litoral, que fornece toda umidade do oceano (Townsend et al. 2006, Raven et al. 2007), possibilitando com isso a manuteno de uma alta riqueza de espcies(Gentry1988,TonhascaJunior2005). O Parque Estadual da Serra do Mar (PESM) a maior rea de proteo integral de toda a Mata Atlntica (Instituto Florestal 2010). O Parque, criado em 1977, administrado pelo Instituto Florestal de So Paulo (IF), incorporou no momento de sua criao uma srie de Reservas Estaduais j existentes que abrangemcerca de 20 municpios do Litoral brasileiro e Vale do Paraba, conta atualmente com mais de 315 mil ha, e abriga cabeceiras formadoras dos Rios Paraba do Sul, Tiete e Ribeira de Iguape (Instituto Florestal 2010). Devido a sua extenso, o PESM subdividido em 08 ncleos administrativos: Caraguatatuba, Cunha/Indaia, Curucutu, PedrodeToledo,Picinguaba,Piles,SoSebastioeSantaVirgnia,eporissotambmcumpreumimportante papel como corredor ecolgico, conectando os mais significativos remanescentes de Mata Atlntica do pas (InstitutoFlorestal2010). De acordo com uma diviso proposta por Veloso et al. (1991), a rea do PESM, que essencialmente composta de Floresta Ombrfila Densa, pode ser subdividida em diferentes fisionomias de acordo com a hierarquiatopogrfica,emfunodevariaesentrefaixasaltimtricaselatitudinais: 1.FormaodasTerrasBaixas05a50metrosdealtitude; 2.FormaoSubmontana50a500metros; 3.FormaoMontana500a1500metros; 4.FormaoAltomontanaacimade1500metros. O processo de fragmentao da Mata Atlntica dessa regio teve incio em meados do sculo XIX com a intensaatividadedociclodocaf(Dean2002),emseguidaaeconomiapassouabasearseempastagenspara apecurialeiteiraconcomitantementecomaindustrializaodascidadeslocalizadasasmargensdaViaDutra 42

(Aguirre2008).Porvoltadosanos50ocortedervoresparaproduodecarvodestinadoaoabastecimento dasusinaspaulistasdeaotornouseimportanteatividadeeconmicaemSoLuizdoParaitinga(Dean2002). Nesse contexto, a regio do Ncleo SV encontrase em uma das regies mais densamente povoadas e industrializadas do pas, que o eixo Rio de Janeiro So Paulo (Aguirre 2008), o que explica as presses antrpicas que levaram ao seu desmatamento, bem como justifica a necessidade de se proteger esse remanescenteflorestal. O Projeto Biota Gradiente, j mencionado nas justificativas deste trabalho como sendo um dos Projetos em que se inseriu o presente estudo, realizou um levantamento fitossociolgico em quatro hectares de floresta do Ncleo SV, que foi subdividido em subparcelas de 1ha, das quais escolheuse duas para a realizaodascoletas.Acaracterizaodetalhadadasparcelasamostradas,incluindotopografia,coordenadas geogrficas, estudo hdrico e de nutrientes do solo, bem como outros aspetos estudados esto reunidos no ltimo relatrio do Projeto (Joly 2011). A lista das 41 espcies selecionadas, escolhidas com base no levantamentodePardguschietal.(2011),estrepresentadanaTabela1. O clculo do balano hdrico normal (Martins 2010) para o perodo de 1973 a 2008 com dados fornecidos por quatro estaes meteorolgicas do DAEE/SP (Departamento de guas e Energia Eltrica) nos municpios de So Lus do Paraitinga e Ubatuba indica que mesmo nos meses mais secos a precipitao mdia no ficou abaixodos80mmcomamaiorconcentraodaschuvasentreosmesesdenovembroemaro(Figura4). De acordo com o trabalho de Freitas (2011), que avaliou dados climatolgicos gerados por uma torre de fluxos instalada na rea de estudo, a estao seca nos anos de 2008 e 2009 (anos de coleta dos dados do presente estudo), esteve entre os meses de junho a agosto, como j previsto em literatura, e no houve perodo superior a 11 dias consecutivos sem chuva. Os totais precipitados para 2008 e 2009 foram de 1990 e 2997 mm, respectivamente. O ano de 2009 foi o ano mais chuvoso, e concentrou o maior volume precipitado no segundo semestre. Houve marcante sazonalidade entre o perodo seco e chuvoso, assinalado pela massa de gua presente na atmosfera em relao massa de ar, e a temperatura mdia anual foi de 22C, com mnimade7,8Cemjulhoemximade33,9Cemdezembro.

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Figura 3. Contextualizao geogrfica e localizao da rea de estudo no Parque Estadual da Serra do Mar(PESM),NcleoSantaVirgnia(SV),SoLusdoParaitingaSP.

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Tabela1.Listadas41espciesselecionadasemduasparcelasdoProjetoBiotaGradienteFuncional,noParque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP. Siglas: cod cdigo da espcie, n nmero de indivduos, ER estratgia de regenerao das espcies onde, Pi = pioneira, Si = secundriainicialeSt=secundriatardiaeIVIndicedeValordeImportncia.
Famlia Arecaceae Myrtaceae Myrtaceae Myrtaceae Euphorbiaceae Monimiaceae Euphorbiaceae Monimiaceae Meliaceae Myrtaceae Bignoniaceae Chrysobalanaceae Boraginaceae Sapotaceae LegFaboideae Melastomataceae Meliaceae Sapotaceae Myrtaceae Phyllanthaceae Rubiaceae Araliaceae Chrysobalanaceae Nyctaginaceae Winteraceae LegFaboideae Primulaceae Melastomataceae Euphorbiaceae Araliaceae Lauraceae Urticaceae Elaeocarpaceae LegFaboideae Fabaceae Fabaceae Proteaceae Lauraceae Fabaceae LegFaboideae Solanaceae Espcie Euterpe edulis Mart. Calyptranthes lucida Mart. exDC. Eugenia cuprea (O.Berg) Niendenzii Marlierea tomentosa C ambess Alchornea glandulosa Poit.& Baill. Mollinedia engleriana (Spreng.) Perkins Alchornea triplinervia (Spreng.) Mll. Arg. Mollinedia schottiana (Spreng.)Perkins Guarea macrophylla Vahl. Marlierea silvatica (Gardner) Kiaersk. Jacaranda montana Morawetz Couepia venosa Prance Cordia sellowiana Cham. Chrysophyllum viride Mart. & Eichler exMiq. Inga lanceifolia Benth. Miconia cabussu Hoehne Cabralea cangerana (Vell) Mart. Pouteria caimito (Ruiz & Pav.) Radlk. Campomanesia guaviroba (DC.) Kiaersk. Hieronyma alchorneoides Allemo Bathysa australis (A.St.Hil.) Benth. & Hook. f. Schefflera calva (C ham.)Frodin & Fiaschi Hirtella hebeclada Moric.exDC. Guapira opposita (Vell.) Reitz Drimysbrasiliensis Miers Inga sessilis (Vell.) Mart. Rapanea hermogenesii Jung Mend.& Bernacci Tibouchina pulchra Cogn. Croton macrobothrys Baill. Schefflera angustissima (Marchal)Frodin Cryptocarya aschersoniana Mez Cecropia glaziovii Snethl. Sloanea monosperma Vell. Senna macranthera (DC.ex Collad.) H.S. Irwin& Barneby Dahlstedtia pinnata (Benth.) Malme Pterocarpus rohrii Vahl Roupala montana var.paraensis (Huber)K.S.Edwards Ocotea catharinensis Mez Tachigali friburgensis (Harms) L.F. Gomes da Silva & H.C.Lima Sclerolobium sp. Solanum sp.1 cod Eut Cal Eug Mart Alcg Mole Alct Mols Guar Mars Jac Cou Cor Chr Ingl Mic Cab Pou Cam Hie Bat Schc Hir Guap Dri Ings Rap Tib Cro Scha Cryp Cec Slo Senn Dah Pte Rou Oco Tac Scle Sol n 4 3 3 2 6 4 3 2 2 4 4 3 3 6 5 6 5 5 6 7 5 1 3 6 3 5 6 6 6 2 2 4 5 3 6 2 5 2 2 2 2 ER St St St St Si St Si St Si St Si Si Si St Si St St Si Si Si Si Si St Si St Si Si Si Si Si St Pi St Si St St St St St St Pi IVI 58,6 9,8 9,3 7,2 7,1 7,0 5,5 5,5 5,2 5,1 5,0 4,9 4,5 4,4 4,2 4,1 4,1 4,1 4,0 3,1 2,9 2,8 2,6 2,4 2,1 2,0 1,8 1,7 1,6 1,5 1,5 1,5 0,8 0,7 0,7 0,5 0,4 0,4 0,3 0,3 0,3

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 Figura4.Precipitaomdiamensalparaoperodode1973a2008 nosquatrodiferentespostosdeprecipitaodosmunicpiosdeSo LusdoParaitingaeUbatuba,SP(Martins2010). 46

5.1.4.FlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamingtom(LAM) A rea de estudo de Floresta Subtropical mida Montana australiana localizase no Parque Nacional de Lamington,asudestedoestadodeQueensland(QLD)naAustrlia,entreascoordenadasgeogrficas2813Se 15307E, e altitude que vai de 300m a 1100m. A regio formada por rochas vulcnicas do Tercirio, primariamente baslticas, ao norte do extinto vulco Mt. Warning (Stevens 1977), e recebe uma pluviosidade mdiaanualde1660mm(Clewettetal.1994). O Parque Nacional de Lamington juntamente com as reservas adjuntas, retm um dos mais extensos remanescentes de floresta subtropical mida do planeta (Laidlaw et al. 2000), e o ltimo representante de floresta subtropical mida e de neblina da Austrlia (Bryden 1977). O Parque foi um dos primeiros do pas a ser criado para fins de conservao, devido fortemente aos esforos de Romeo Watkins Lahey, explorador de madeiranaquelapocanosarredoresdaregio(Jarrot1977).Desdeentoomotivoinicialdeconservaoda biodiversidade do Parque mudou diversas vezes at chegar ao ecoturismo, que atualmente a principal atraodoParque(Laidlawetal.2000),chegandoaliderarorankingmundialdosdestinosdeecoturismopor turistas, naturalistas e cientistas. O Parque Nacional de Lamington foi ento includo na lista dos Patrimnios Naturais da Humanidade por abrigar exemplares nicos de espcies chave na histria evolutiva e pela alta biodiversidade,dentreoutrascaractersticas((http://whc.unesco.org/). O Projeto IBISCAQueensland (Investigating the Biodiversity of Soil and Canopy Arthropods), programa internacional de pesquisa que visa de um modo geral estudar a distribuio temporal e espacial dos artrpodesdeflorestasnomundoeainteraodestescomoutrosorganismos,comoasplantas,porexemplo, investigou a biodiversidade da vegetao da floresta subtropical mida do Parque Nacional de Lamington ao longo do gradiente altitudinal, e para tanto, demarcou parcelas permanentes no ano de 1995, iniciandose desde ento um extenso esforo em pesquisas nessa rea (IBISCA 2008, http://www.ibisca.net/). Um levantamento florstico das espcies arbreas foi realizado, e o resultado disso, publicado por Laidlaw et al. (2000) foi utilizado como base para uma anlise fitossociolgica que determinou a importncia das espcies na rea (Tabela 2). As parcelas escolhidas para este trabalho foram: IQ 900 A, B, C, D, e IQ 1100 A (Figura5). Segundo Webb et al. (1984), a vegetao predominante na rea de complex notophyll vine forest (Floresta de Lianas Notfila Complexa) caracterizada pela presena de espcies como Argyrodendron trifoliolatum, A. actinophyllum, Caldcluvia paniculosa (McDonald & Whiteman 1979). Floristicamente, LAM est localizado numa regio de transio entre clima subtropical mido e clima temperado, que possibilita a ocorrncia de espcies tropicais e temperadas nos diversos habitats dessa regio ( Graham et al. 1977). 47

McDonald & Thomas (1990) compilaram a flora de LAM em 1990, mas ainda hoje novas espcies vm sendo descobertas(Laidlawetal.2000).

Figura 5. Contextualizao geogrfica e localizao da rea de estudo no Parque Nacional de Lamington(LAM),Queensland(QLD)Austrlia,mapadelocalizaodasparcelasselecionadas. 48

Tabela 2. Lista das 24 espcies selecionadas nas parcelas do Projeto IBISCAQueensland, no Parque Nacional deLamington(LAM),Queensland(QLD)Austrlia.Siglas:codcdigodaespcie,nnmerodeindivduos, ERestratgiaderegeneraodasespciesonde,Pi=pioneira,Si=secundriainicialeSt=secundriatardia e IVI ndice de Valor de Importncia. As espcies marcadas com o smbolo (*) encontravamse fora das parcelaslevantadas,portanto,notmvalordeIVI.
Famlia Nothofagaceae LegMimosoideae Euphorbiaceae Araliaceae Solanaceae Cannabaceae Malvaceae Myrtaceae Rutaceae Rubiaceae Meliaceae Celastraceae Malvaceae Araucariaceae Cyatheaceae Monimiaceae Sapindaceae Sapindaceae Quintiniaceae Euphorbiaceae Proteaceae Cunoniaceae Myrtaceae Lauraceae Espcie Nothofagusmoorei (F.Muell.)Krasser Acaciamelanoxylon R.Br. Homalanthuspopulifolius Graham Polysciaselegans (C.Moore&F.Muell.)Harms Solanumaviculare G.Forst. Tremaaspera (Brongn.)Blume Argyrodendronactinophyllum (C.Moore)Edlin Syzygiumcrebrinerve (C.T.White)L.A.S.Johnson Acradeniaeuodiiformis (F.Muell.)T.G.Hartley Atractocarpusbenthamianus (F.Muell.)Puttock Synoumglandulosum (Sm.)A.Juss. Elaeodendronaustrale Vent. Argyrodendrontrifoliolatum F.Muell. Araucariacunninghamii AitonexD.Don Cyathealeichhardtiana Copel. Wilkieaaustroqueenslandica Domin Sarcopteryxstipitata (F.Muell.)Radlk. Elattostachysnervosa (F.Muell.)Radlk. Quintiniaverdonii F.Muell. Baloghiainophylla (G.Forst.)P.S.Green Oritesexcelsa R.Br. Caldcluviapaniculosa (F.Muell.)Hoogland Decaspermumhumile (SweetexG.Don)A.J.Scott Cryptocaryaobovata R.Br. cod Not Aca Hom Pol Sol Trem Arga Syz Acra Atra Syn Elae Argt Ara Cya Wil Sar Elat Qui Bal Ori Cal Dec Cry n 4 4 4 4 4 4 6 3 5 4 2 6 3 4 4 6 3 4 4 5 5 4 4 4 ER St Pi Pi Pi Pi Pi St St Si Si Si Si St St Si St St St Si St Si St St St IVI * * * * * * 25,4 12,7 12,0 10,2 9,4 9,3 9,2 8,5 8,2 6,0 5,1 3,7 3,4 2,4 2,3 2,2 2,2 1,8

O clculo do balano hdrico normal para o perodo de 1975 a 2011 com dados das estaes meteorolgicasdeHinzeDameMtTamborineFern,prximasaoParqueNacionaldeLamington,indicaqueos mesesmaissecossonormalmentedejunhoasetembro,pormaprecipitaomdianuncachegaasernula, e a maior concentrao das chuvas ocorre entre os meses de novembro e maro (Figura 6). As temperaturas mdiasvariamentre10Ce25C. O Balano hdrico para o Parque Nacional de Lamington no perodo estudado (Figura 7) referente ao ano de 2010 acompanha o padro do Balano hdrico normal, porm, com maiores temperaturas mdias, e maiores valores de precipitao, que apresentou certa irregularidade quando comparada ao esperado pelo balanohdriconormaldaregio,sendoconsideravelmentealtanosmesesdefev,outedez.

49

600 Precipitao(mm) 500 400 300 200 100 0 J F M A M J J A S O N D

35 25 20 15 10 5 0

Figura 6. Balano hdrico normal segundo Thornthwaite & Mather (1955) para o perodo de 1975 a 2011, calculado com uso de dados das estaes meteorolgicas Hinze Dam (40584 28.05S 153.29L, 111 m) e MT Tamborine Fern (040197 27.97 S 153.20 L, 515m). Onde: () precipitao e () temperatura atmosfrica. Fonte: www.bom.gov.au/climate/data (Australian Gonverment Bureau of Meteorology).

600 Precipitao(mm) 500 400 300 200 100 0 J F M A M J J A S O N D

35 25 20 15 10 5 0

Figura 7. Balano hdrico para o ano de 2010 no Parque Nacional de Lamington, QLD Austrlia, calculadocomusodedadosdasestaesmeteorolgicasO'ReillysAlert(4093128.23S153.14L,913 m) e Hinze Dam (40584 28.05S 153.29L, 111 m). Onde: () precipitao e () temperatura atmosfrica.Fonte:www.bom.gov.au/climate/data(AustralianGonvermentBureauofMeteorology).

50

Temperatura(oC)

30

Temperatura(oC)

30

5.1.5.CerradosensustrictodoParqueEstadualdeVassununga,GlebaPdegigante(PDG) A rea de estudo de Cerrado est localizada na Glba Pdegigante, que uma das seis Glbas disjuntas que constituem o Parque Estadual de Vassununga, criado em 26/10/1970 pelo Decreto Federal 52.546 e administrado pelo Instituto Florestal, Secretaria de Estado do Meio Ambiente (SMA), So Paulo. Um histrico bem detalhado da ocupao da rea pode ser encontrado nos trabalhos de Shida (2000), Shida (2005) e Pires Netoetal.(2005). O Cerrado PDG est localizado margem da Rodovia Anhanguera (SP 330, entre os Km 255 258), no municpio de Santa Rita do Passa Quatro, So Paulo, entre as coordenadas 21 36 38S e 47 36 39W (Figura 8). O nome Pdegigante se deve a um rebaixamento no interior da Unidade de Conservao com o aspecto de uma pegada gigante, causado provavelmente por eroso das cabeceiras do crrego Paulicia (Bittencourt & Pivello 1998). A glba possui 1225 ha. e suas cotas altimtricas variam entre 590 740 m em solosdotipoLatossoloVermelhoEscuro,LatossoloVermelhoAmareloeAreiasQuartzosas(Pivelloetal.1998, Fidelis & Godoy 2003). Predominam na regio rochas sedimentares mesozicas, com origem no Tercirio, provenientesdedepsitosaluvionareseconstitudasprincipalmenteporareiasfinas(arenitosfluviais)(Pivello et al. 1999), pertencentes s formaes Botucatu e Pirambia (Bertoni 1984). Na superfcie, aparece a Formao Serra Geral, com origem no perodo JuraCretceo, assentada tambm sobre a Formao Pirambia, e formada por derrames baslticos e intrusivos bsicos tabulares associados, representados por sillsediquesdediabsio(Almeidaetal.1981,Massoli1981). Aprecipitaomdiaanualnormalde1478mmeastemperaturasmdiasmensaisvariamentre17,6C no ms mais frio (julho) e 23,5 C no ms mais quente (fevereiro) (Pires Neto et al. 2005). O clima da regio enquadrase na categoria Cwa segundo a classificao de Kppen (1948), ou seja, temperado, macrotrmico, moderadamente chuvoso e com inverno seco no rigoroso. A estrutura, a composio e a diversidade de espcies que compem o Cerrado sensu lato da rea de estudo, bem como as relaes entre soloplanta e o histrico do uso da terra j foram amplamente estudados por vrios autores (Batalha 1997, Batalha & Mantovani 1999, 2000 e 2001, Shida 2000, Batalha et al. 2001, Weiser & Godoy 2001, Ruggiero et al. 2002, Fidelis & Godoy 2003, Colli et al. 2004, Bitencourt & Mendona 2004) sendo definido que o Cerrado sensu stricto(cercade80%darea,Figura3)elatossolovermelhoamareloarenosopredominamnarea. OCerradoPDGoquepossuimaiorreacontnuaentreospoucosremanescentescommaisque1000ha. desse Bioma no estado de So Paulo, alm disso, conserva uma rica biota de mais de 500 espcies de plantas vasculares e uma fauna com muitos animais em extino. Informaes detalhadas sobre o meio fsico, seres vivos e interferncias do homem sobre esse Cerrado e sua regio at o ano de 2004 esto reunidos na obra 51

organizada por Pivello & Varanda (2005), o livro Cerrado Pdegigante: Ecologia Conservao, gerado pela reuniodosresultadosdepesquisasdemaisde30autoresaolongodeoitoanosdetrabalhonarea. Olevantamentofitossociolgicorealizadonarea(LatansioAidaretal.2011)foiutilizadocomoreferncia paraaescolhadas27espciesestudadasnopresenteestudo,queestolistadasnaTabela3.Acaracterizao detalhadadolocal,incluindotopografia,coordenadasgeogrficas,estudohdricoedenutrientesdosolo,bem como outros aspetos, esto reunidos no ltimo relatrio do Projeto Biota Interao biosferaatmosfera Fase 2:cerradosemudanasnousodaterra(Rocha2009). Oclculodobalanohdriconormal(Thornthwaite&Mather1955)paraoperodo1941a1970comdados fornecidospelaestaometeorolgicadoDAEE/SP(DepartamentodeguaseEnergiaEltrica)emSantaRita do Passa Quatro indica dficit hdrico no solo entre abril e setembro (Figura 9) com a maior concentrao das chuvas entre os meses de novembro e fevereiro, assim como as maiores temperaturas. Os meses de menor temperaturasojunhoejulho(17C). O Balano hdrico para a regio de Santa Rita do Passa Quatro no perodo estudado (Figura 10) referente ao ano de 2008 acompanha o padro do Balano hdrico normal, porm, com amplitude de temperaturas mdias levemente maiores, maiores valores de precipitao em alguns dos meses mais chuvosos (janeiro, maro e outubro) e menor precipitao nos meses mais secos (Junho a agosto). O deficit hdrico foi muito baixodevidobaixaevapotranspirao.

52

 Figura 8. Contextualizao geogrfica do cerrado no Brasil, localizao do Parque Estadual de Vassununga no estadodeSoPauloedaGlebaPdegigante(PDGfotoareaedistribuiodasfitofisionomiasdecerrado), emSantaRitadoPassaQuatroSP,comalocalizaodaparcelaselecionada. 53

 Tabela 3. Lista das 27 espcies selecionadas na rea decerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba P degigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP. Siglas: cod cdigo da espcie, n nmero de indivduos, hbito hbito fenolgico da espcie, onde D = decdua, S = semidecdua e P = pereniflia e IVI ndice de ValordeImportncia.
Famlia Myrtaceae Annonaceae LegMimosoideae LegCaesalpinoideae Apocynaceae Araliaceae LegFaboideae Annonaceae LegCaesalpinioideae Moraceae Vochysiaceae LegFaboideae Myrtaceae LegFaboideae Myrtaceae LegCercideae Malpighiaceae Vochysiaceae LegCaesalpinoideae LegCaesalpinoideae LegMimosoideae Proteaceae Rubiaceae Myrtaceae Myristicaceae Lauraceae LegCaesalpinoideae Espcie Myrcialingua (O.Berb)Mattos Xylopiaaromatica (Lam.)Mart. Anadenantherafalcata (Benth.)Speg. Diptychandraaurantiaca (Mart.)Tul. Aspidospermatomentosum Mart. Scheffleravinosa (Cham.&Schltdl.)Frodin Platypodiumelegans Vogel Annonacoriacea Mart. Copaiferalangsdorffii Desf. Ficusguaratinica Schodat Qualeaparviflora Mart. Dalbergiamiscolobium Benth. Myrciabella Cambess. Andiralaurifolia Benth. Eugeniahyemalis Cambess. Bauhiniarufa (Bong.)Steud. Byrsonimacoccolobifolia Kunth Plathymeniareticulata Benth. Machaeriumacutifolium Vog. Hymenaeamartiana Hayne Dimorphandramollis Benth. Roupalamontana Aubl. Tocoyenaformosa (Cham.&Schltdl)K.Schum Campomanesiapubescens (DC.)Berg. Virolasebifera Aubl. Ocoteacorymbosa (Meisn.)Mez Hymenaeastigonocarpa Mart.exHayne cod Myrl Xyl Ana Dip Asp Sch Plat Ann Cop Fic Qua Dal Myrb And Eug Bau Byr Plathy Mac Hymm Dim Rou Toc Cam Vir Oco Hyms n 5 6 2 4 5 5 3 4 6 5 5 5 5 6 6 4 5 5 4 6 6 2 3 1 6 2 3 hbito P S D D S P S D D P D P P D D S D D S D D D D D S S S IVI 39,9 24,1 22,2 20,5 15,6 10,3 10,3 9,9 9,6 7,4 6,6 5,0 4,7 4,2 3,9 3,8 3,6 3,5 3,4 2,4 2,4 2,2 2,2 1,7 1,4 1,0 0,6

54

 Figura 9 Balano hdrico normal segundo Thornthwaite & Mather (1955), calculado com usodedadosdaestaometeorolgicadoDAEE/SPC4107,paraoperodode1941a1970 em Santa Rita do Passa Quatro/SP. Onde: () precipitao, () temperatura atmosfrica,()evapotranspiraoreale()dficithdrico.

Figura10Balanohdricoparaoanode2008nomunicpiodeSantaRitadoPassaQuatro, SP (Dados obtidos em CIIAGRO http://www.ciiagro.sp.gov.br/ciiagroonline/). Onde: () precipitao, () temperatura atmosfrica, () evapotranspirao real e () dficit hdrico.

55

5.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) Para mensurao da ANR potencial in vivo, foram amostradas folhas totalmenteexpandidas de dois a trs ramosdacopaexpostosaosoldosindivduosselecionados(noperodo damanh),resfriadasemcampopara posterioranlisenolaboratriodecampo(noperododatardedomesmodia).OsensaiosdeANRbasearam se no mtodo descrito por Stewart et al. (1986), no qual pores medianas de folhas limpas e secas so picotadas com uso de tesoura comum, transferidas para tubos de ensaio com soluo de incubao contendo tampo fosfato (K2HPO4 0,1 M), 100 mM KNO3 e 1propanol 1% (v/v), que fornece o substrato da enzima nitratoredutase(NR),oNO3.Ostubossomantidosemvcuoeescuroporumahora,retiraseumaalquota, e seguese ento a reao em novo tubo de ensaio nessa ordem: 1mL de soluo de incubao (alquota), 1mLde cido sulfanlico 1% em HCl 1N, 1mL de NEDD 0,05% (N(1Naphthyl)ethylenediamine dihydrochloride). Nessa reao, a enzima NR, que induzvel pelo substrato, utilizase do NO3 disponvel produzindo nitrito (NO2), que reage com o cido sulfanlico formando um composto que corado de rosa quando se liga ao NEDD, e essa colorao medida em espectrofotmetro, dando a atividade potencial da enzima,quandoexistentenafolha,expressaempkatporgramademassafrescadafolha(MF). 5.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) Parte das folhas coletadas e utilizadas na mensurao da ANR foram picotadas (0,5 g) e imersas em metanol 100% (5 mL) para extrao do NO3. Foram mantidas em temperatura ambiente por 24 h, e ento congeladas em freezer a 80C para posterior deteco do NO3 de acordo com o mtodo de Cataldo et al. (1975),queutilizasedoprincpiodanitraopelocidosaliclicoedosagemporespectrofotometria. Neste mtodo, alquotas de 0,2 mL do extrato so colocadas em tubo de ensaio, adicionase 0,8 mL de soluo de cido saliclico e cido sulfrico concentrado, aps 20 minutos acrescentase 19,0 ml de hidrxido de sdio 2 N, aguardase o resfriamento da reao e o aparecimento de cor, e ento fazse a leitura em espectrofotmetro na absorbncia de 410nm. Os valores obtidos dessa leitura so convertidos em concentrao de NO3 por grama de massa fresca foliar (MF) utilizando curva de calibrao preparada simultaneamenteanlise.

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5.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(NO3seiva) Para a coleta de seiva do xilema, realizada sempre pela manh, fezse uso de bomba de vcuo manual (esquematizadanaFigura4)seguindomtododescritoporPateetal.(1994),emramosdasplantascoletadas. O fludo recolhido em campo foi mantido imediatamente em bolsa trmica contendo gelo em gel, para ento sercongeladoemfreezera80Cparaposterioranlise. O contedo de NO3 na seiva do xilema das amostras previamente congeladas foi analisado segundo mtodo descrito por Miranda et al. (2001), onde tipicamente duplicatas de uma soluo padro contendo NO3 (100L, concentraes de 200 a 1.6 nM) foram dispostas em microplaca de poliestireno com 96 clulas (Corning96WellWhiteFlatBottomPolystyreneNotTreatedMicroplate).Amesmaguadestiladautilizada na diluio foi usada como branco. Depois de preencher a placa com as amostras (100L em cada clula), adicionouse Cloreto de Vandio III (VCl3 100L, 400mg em 50mL de HCl 1M) em cada clula da placa, seguido da adio dos reagentes Sulfanilamida (SULF 50L 2% m/v, dissolvido em HCl 5%) e NEDD (50L 0,1% m/v, dissolvido em gua), conhecidos como reagentes de Griess, que foram preparados imediatamente antes a aplicao dos mesmos na reao e filtrados para remoo de material particulado (filtro de seringa Nylon66). Uma vez que a reduo do NO3 a NO2 ocorre em meio cido, a soluo de deteco deve estar presente durante a reduo ou o sinal poder ser perdido devido difuso de xidos de N na soluo. Os valores do branco foram obtidos substituindose o meio de diluio por reagentes de Griess na deteco de NO3. O NO2 foi medido de forma semelhante exceto pelo fato de que as amostras e os padres de NO2 s foram expostos a reagente de Griess. Em qualquer caso, a leitura foi feita em absorbncia a 540 nm, usando umleitordemicroplacasapsincubaopelotempode3045min. Para determinar a concentrao de NO2 das amostras foram utilizadas curvas de regresso linear dos valores mdios da absorbncia a 540 nm para cada concentrao da soluo padro subtraindose os valores do branco. Esses valores foram ento subtrados da absorbncia medida dando a concentrao de NO3 de cada amostra. Calculouse ento, a porcentagem de tomos de N sob a forma de NO3 das amostras de seiva emrelaoconcentraototaldeN(somadoscompostosencontrados),sendoentoexpressaem%NNO3. 5.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema A composio e a concentrao dos aa livres encontrados nos extratos de seiva do xilema previamente congelados foi analisada em Acquity UPLC (Cromatografia Lquida de Ultra Performance, Waters, USA) equipadocomcolunaBEHC181.7m2.1x100mm(n186002352)eumdetectordetunelamentoUV(TUV)a 57

254nm,eokitdederivatizaodaAcqutagTM,seguindooprotocolodofabricante.OtransportedeNnaforma de aa na seiva do xilema foi estimado atravs da concentrao do aa, levando em conta seu contedo de tomos de N na composio da molcula e o total de N da amostra, os valores foram expressos em porcentagem. 5.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) Para determinao das porcentagens de N e C total nas folhas, bem como a razo CN e a abundncia natural do istopo estvel (15N), as amostras foliares foram secas em estufa a 60 C at obterem valor de massa estvel, trituradas em moinho de bola at formar um fino p e ento mensuradas por fluxo contnuo emAnalisadorelementar(CarloErbaEA1110CHNS,CEInstruments)ligadoemredecomumespectrmetro de massas para razes isotpicas (Delta Plus, ThermoQuestFinnigan) como descrito por Stewart et al. (1995). 5.7.reafoliarespecfica(AFE) rea foliar especfica (AFE = AF / MS) um parmetro que expressa razo entre rea foliar (AF) e massa secafoliar(MS)deumaplanta,ondeAFmensuradanafolhafrescaeMSnafolhaseca(Witkowski&Lamont 1991). Assim, as folhas coletadas foram digitalizadas com uso de scanner, e com suas imagens calculouse AF (cm2) com uso do programa Image J (software para processamento e anlise de imagens, desenvolvido por Wayne Rasband no National Institute of Mental Health,

http://www.superdownloads.com.br/download/174/imagej/). Estas mesmas folhas foram ento secas em estufa a 60C para obteno da MS (em gramas), obtida com uso de balana analtica. Para essas medidas, utilizouseummnimodequatrofolhasparacadaindivduoamostrado. 5.8.Densidadedamadeira(DM) Para as medidas de DM, foram coletados 2 a 3 partes da madeira de diferentes ramos de cada indivduo. Doramoterminaldessesgalhosforamretiradasascascasecomaparterestante(oxilemapropriamentedito) calculouse o volume da madeira segundo o princpio de Arquimedes, que afirma que todo corpo submerso emumfluidoexperimentaumempuxoverticaleparacimaigualaopesodefluidodeslocado. Assim, o pedao da madeiracortado, aps imerso em gua por meiahora para completo preenchimento 58

dos espaos entre os vasos, foi espetado com agulha e submerso em recipiente contendo gua sem que tocasse as laterais e o fundo do recipiente, o valor marcado na balana, referente gua deslocada, foi consideradoigualaovolumedocorposubmerso,nocaso,amadeira.Considerandoqueadensidadedagua iguala1000kg/m3,osvaloresemgramasmensuradosnabalanaforamconvertidosparacm3.Emseguida,as amostrasforamsecasemestufaa60Cporsetediasparaaobtenodamassaseca.Apartirdestesdados,foi calculadaaDMpeladivisodamassasecapelovolume(obtidaemg.cm3)deacordocommtododescritoem Hackeetal.(2001)eIlicetal.(2000). 5.9.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) A ocorrncia de simbiose radicular foi avaliada em amostras de solo como descrito a seguir: ndulos radiculares foram contabilizados atravs de observao, e a ocorrncia de micorriza arbuscular foi avaliada segundometodologiadescritaemAidaretal.(2004)emrazescomdimetromaiorque2mm,ondeasrazes so clarificadas em KOH 10% e HCl 1%, coloridas com 0.05% tryptan blue e a frequncia de colonizao contabilizada pela contagem de intersees em lmina com grade de 1cm. Foram coletadas 28 amostras em SV,20emLAMe16noPDG. 5.10.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo Foram estimadas as disponibilidades de NO3 e NH4+ no solo durante os perodos de coleta atravs do uso de sacos de resina de troca inica mista (Dowex MR3, Sigma), que enterrados nos primeiros cinco centmetros abaixo da superfcie do solo, foram mantidos por um perodo de nomnimo 5 dias para ento serem retirados e mantidos em geladeira, de acordo com metodologia descrita por Stewart et al. (1993) e Aidaretal.(2003).Emlaboratrio,asresinasforamentodiludasemKCl2M.OcontedodeNO3emsoluo foi determinado segundo mtodo de Cataldo et al. (1975) e Miranda et al. (2001), e a determinao do contedodeNH4+seguiumtodocolorimtricocomodescritoporMcCullough(1967).

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5.11.Tratamentoestatstico OcritriodeescolhadasanlisesestatsticasfoiadotadodeacordocomotrabalhodePaciencia(2001).O tratamentoestatstico iniciouse com uma primeira anlisemultivariada aplicada ao valor mdio de cada uma das variveis obtidas atravs de Anlise das Coordenadas Principais (PCoA), utilizandose do programa MVSP verso 3.11b (Kovach Computing Services 1999). Essa anlise teve carter exploratrio e permitiu relacionar indiretamente dados ambientais e biolgicos a fim de se definir grupos ecolgicos semelhantes, que podem vir a explicar padres de distribuio das espcies nas diferentes reas, de modo a expressar a complexidade das relaes existentes entre o conjunto de variveis e reduzir a dimensionalidade dos dados, com combinaes lineares das variveis originais em um novo conjunto de menor nmero de variveis. O ndice utilizado foi o de similaridade de BrayCurtis (Krebs 1999). Para essa anlise, foram utilizadas as seguintes variveis:ANR,razoCN,%N,15N,%NNO3,%NArg,%NAsp,%NAsn,%NGln,%NGlu,NO3folha. Seguiuse da anlise de varincia de dois fatores comparada de modo direto (TwoWay ANOVA, Sokal & Rohlf1995),utilizadaafimdetestardemaneirainterativaainflunciadosfatoresestaodoano(invernoe vero) e classe sucessional das espcies (St, Si e Pi para as florestas, e D, S e P para o cerrado) sobre os seguintes parmetros avaliados: ANR, razo CN, %N, 15N, NO3 folha, AFE, DM, com uso do programa Statistica 6.0 (Statfoft Incorporation 2001). Para os testes a posteriori foi utilizado HSD de Tukey com 5% de siginificnciae/ouotestedeDuncan. Considerando que a anlise de varincia testa diferenas entre as mdias, e caso positivo, inferese que estes ambientes so distintos quanto varivel avaliada, tmse como pressuposto a homocedasticidade (i.e. homogeneidade de varincias) entre os dados, que significa que a variao ao acaso dentro de cada parmetro deve ser a mesma. Assim, antes da aplicao do teste verificouse se esse pressuposto no era ferido,eparatanto,utilizousedotestedehomocedasticidadedeLevene(Zar1999). Posteriormente, para localizao especfica das diferenas existentes, fezse uso do programa MVSP verso 3.11b (Kovach Computing Services 1999) para testar comparaes planejadas (tcnica de contrastes mltiplos, Sokal & Rholf 1995). No caso, testouse a interao entre os fatores estaes do ano, classe sucessionaleoparmetroecofisiolgicoespecfico. Foi realizado o teste t pareado (para amostras dependentes) com o objetivo de verificar as possveis diferenas entre as estaes do ano para cada rea estudada individualmente, quanto aos valores mdios de colonizao radicular total (CRT) e de disponibilidade de NH4+ e NO3- in situ no solo, com uso de software WINSTAT(R.FitchSoftware,Cambridge,MA,EUA). 60

6.RESULTADOSEDISCUSSO
6.1.FlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar,NcleoSantaVirgnia(SV) 6.1.1.AnlisedeordenaoSV Dentreas14variveisavaliadas,descritasnoitem4.1.2.Estratgiadecoletaedesenhoexperimentaldo MaterialeMtodos,11foramselecionadasdeacordocomsuaimportncianometabolismodousodeN,para ordenar as espcies dentro das suas diferentes estratgias de regenerao, atravs de uma anlise de componentes principais (Principal Component Analysis PCA), que teve sua matriz de correlao computadaapartirdosvalorestransformadosemlog10,paracadaestaodoano. AanlisedosresultadosobtidosnoveroemSV(Figura11)teve37,91%davarinciaexplicada,emostrou uma tendncia separao entre as classes de espcies definidas de acordo com a estratgia de regerao, mais claramente entre as espcies Pi e St, com relao ao primeiro eixo da PCA. Enquanto que as espcies secundrias iniciais (Si) apresentaram um comportamento mais heterogneo quanto ao uso de N, com espcies se aproximando das Pi (principalmente quanto a ANR e %NNO3 em relao ao eixo 1 e ANR e NO3 folhaemrelaoaoeixo2),eoutrasmaisprximasdasSt(dadovariveis%NArgemrelaoaoeixo1e%N e%NGlnemrelaoaoeixo2). De modo geral, as variveis que melhor descrevem as espcies Pi no vero so ANR, %NNO3 e NO3 folha. Por outro lado, para as espcies St, as variveis razo CN, %NArg, %N e %NGln so as mais importantes. Para asespciesSi,muitosfatoressemostraramimportantes(15N,%NNO3,ANR,NO3folha,%NGln,%Ne%NArg), caracterizandoaheterogeneidadejcomentadaanteriormente. A anlise de ordenao para o inverno (Figura 12), que tem 39,71% da varincia explicada, confirma a mesma tendncia verificada no vero, com separao mais definida entre as espcies Pi e St com relao ao primeiro eixo da PCA, e as espcies Si apresentando comportamento mais heterogneo entre elas. As variveis que melhor descrevem as Pi so ANR, %NNO3 e 15N com relao ao eixo 1, e as que melhor descrevem as St so razo CN e %N com relao ao eixo 1, e %NAsn, %NGlu, %NArg e %NAsp com relao ao eixo2. Como variveis mais importantes na determinao da posio das espcies Si na PCA, se destacam o 15N e%NNO3comrelaoaoeixo1,%N,%NGlue%NArgcomrelaoaoeixo2.

61

Figura 11. Ordenao (PCA) das 41 espcies estudadas em SV, e suas diferentes estratgias de regenerao (Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadasnovero,sendo:%N%deNfoliartotal,CNrazocarbono/nitrogniofoliar,ANRatividadedaenzimanitratoredutase,NO3folhaconcentrao denitratofoliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina,Asn asparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela1.

62

Figura 12. Ordenao (PCA) das 41 espcies estudadas em SV, e suas diferentes estratgias de regenerao (Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentraodenitratofoliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Arg arginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela1.

63

6.1.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) A anlise dos dados mdios de ANR para SV (Figura 13), realizada atravs de ANOVA de dois fatores, apontou inicialmente diferenas significativas entre as classes sucessionais (p = 0,024), entre as estaes do ano(p=0,019)etambmnainteraoentreambos(F2,157=6,879;p=0,01).Dessemodo,asdiferenasentre as classes sucessionais so dependentes das diferentes estaes do ano, e, nesse caso, essas diferenas se pronunciam devido maior ANR observada nas Pi durante o vero, como confirmado por teste de Tukey a posteriori. Porm, apesar das demais classes no apresentarem diferenas significativas pelo teste de Tukey, os valores mdios analisados para cada classe separadamente, nas duas estaes do ano, sugerem uma tendnciageraldemaioratividadenoinvernonasSi(vero=92,35pkat.g1MF;inverno=95,48pkat.g1MF)e St (vero = 58,81 pkat.g1 MF; inverno = 110,46 pkat.g1 MF). As espcies Pi, por sua vez, caracterizaramse pelo comportamento oposto, com ANR quase cinco vezes maior no vero que no inverno (vero = 343,59 pkat.g1MF;inverno=71,29pkat.g1MF).Paramaisdetalhes,vervaloresnumricosporespcienaTabelaA1 (ANEXO1).

700 600 500 400 300 200 100 0

ANR(pkat.g MF)

vero Pi

inverno

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura 13. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas parap<0,05(*). 64

6.1.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) A anlise dos dados mdios de concentrao de NO3 na folha para SV (Figura 14), realizada atravs de ANOVAdedoisfatores,noevidencioudiferenassignificativasentreasclassessucessionais,estaesdoano, ou na interao entre estes fatores. Para mais detalhes, ver valores numricos por espcie na Tabela A1 (ANEXO1).
NO3 folha(mol.g MF)

5 4 3 2 1 0 vero Pi inverno vero Si inverno vero St inverno

Figura 14. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So LusdoParaitingaSP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,Pi= pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam odesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 6.1.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(%NNO3) A anlise de varincia das porcentagens mdias de contedo de N sob a forma de NO3 na seiva do xilema (Figura 15) das plantas estudadas em SV mostrou que existem diferenas significativas entre as classes sucessionais(F2,157=8,179;p<0,001).OtestedeTukeyaposterioriidentificouaseparaoentreasclassesPi e St, por possurem os maiores e os menores contedos de NNO3 na seiva do xilema, respectivamente. Nas espcies Si, esse contedo no foi significativamente diferente das demais classes. Tambm no foram encontradas diferenas significativas entre as estaes do ano ou na interao entre os dois fatores consideradoscomrelao%NNO3naseivadoxilema. 65

100 80 %NNO3 60 40 20 0 vero Pi inverno vero Si inverno vero St inverno * *

Figura15.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativasparap<0,05(*). 6.1.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema As anlises de varincia das porcentagens mdias da composio de aminocidos na seiva do xilema (Figura 16) das plantas estudadas em SV mostraram que existem diferenas significativas entre as classes sucessionais com relao NArg (p << 0,001), NGln (F2,157 = 4,258; p = 0,016) e NGlu (F2,157 = 4,662; p = 0,011). Porm, quando se procedeu com a anlise de varincia sobre Ranques, essa diferena existiu apenas com relao NArg, evidencianda pelos maiores valores desse aminocido nas espcies tardias na sucesso (St), valores mdios nas espcies Si e menores nas Pi. A % de N sob a forma de NO3 foi representada novamente na Figura 16 a ttulo de comparao com os demais compostos da seiva, estando este detalhado especificamentenoitemanterior. Apesar do teste estatstico a posteriori recusar a diferenas inicialmente encontradas para NGln entre as classes sucessionais, as mdias indicam uma tendncia de ser maior nas Si (mdia 22,93%), que nas demais classes,St(12,09%)ePi(6,54%).BemcomoseobservaumatendnciaaotransportedeNAsnpelasPi. No foram encontradas diferenas significativas entre as estaes do ano ou na interao entre os dois fatoresconsideradoscomrelaocomposiodeaminocidoseNO3naseivadoxilema. 66

NArg vero Pi

NAsn

NAsp

NGln

NGlu

NNO3

outros aa

inverno

vero Si inverno vero St inverno 0% 20% 40% 60% 80% 100%

Figura 16. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg = arginina, Asn = asparagina, Asp = cido asprtico, Gln = glutamina, Glu = glutamato, NO3 = nitrato, outros aa = somadosoutros20aminocidos. 6.1.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN)

A anlise de varincia da razo CN (Figura 17) das plantas estudadas em SV mostrou que existem diferenas significativas entre as classes sucessionais (F2,157 = 11,290; p < 0,001). O teste de Tukey a posteriori identificou a separao entre as classes Pi e St, por possurem os menores (mdia 14,44) e os maiores (mdia 22,18) valores de razo CN na folha, respectivamente. Nas espcies Si (mdia 17,21), esse contedo no foi significativamente diferente das demais classes, mas h uma significncia marginal que diferencia Si de St segundo a anlise de varincia (p = 0,05). No houve diferenas significativas entre as estaes do ano ou na interaoentreosdoisfatores. 67


CN 50 40

30 20 10 0 vero

inverno Pi

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura 17. Razo carbono/nitrognio foliar (CN) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual daSerradoMar(PESM),NcleoSantaVirgnia(SV),SoLusdoParaitingaSP, emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,Pi=pioneira,Si=secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 6.1.7.Istopoestvel15Nnafolha(15N) A anlise de varincia do istopo estvel 15N na folha (15N , Figura 18) nas plantas estudadas em SV mostrou que existem diferenas significativas entre as classes sucessionais (F2,157 = 6,574; p = 0,002). O teste de Tukey a posteriori identificou a diferena entre as classes Pi e Si, com valores mdios de 1,88 e 3,25 respectivamente. Porm, considerando que havia apenas 2 espcies Pi na rea SV e 48 espcies Si, essa diferena pode ter ocorrido devido a grande diferena no tamanho da amostra. Nas espcies St (mdia 1,75), o valor obtido no foi significativamente diferente das demais classes. No houve diferenas significativasentreasestaesdoanoounainteraoentreosdoisfatores.

68

10 8 6 4 2 0 2 vero

N(%o)

15

inverno Pi

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura 18. Abundncia natural do istopo estvel 15N foliar (15N ) nas classes sucessionais das 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativas parap<0,05(*). 6.1.8.reafoliarespecfica(AFE) A anlise de varincia da AFE (Figura 19) das plantas estudadas em SV no evidenciou diferenas significativasentreasclassessucessionais,estaesdoano,ounainteraoentreestesfatores.
300 250 200 150 100 50 0 vero Pi inverno vero Si inverno vero St inverno

Figura19.reafoliarespecfica(AFEcm2.g1MS)nasclassessucessionaisdas 41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam odesviopadro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 69

AFE(cm .g MS)

6.1.9.Densidadedamadeira(DM) A anlise de varincia da DM (Figura 20) nas classes sucessionais das plantas estudadas em SV mostrou que existem diferenas significativas entre as classes sucessionais (F2,157 = 16,623; p << 0,001). O teste de Tukey a posteriori identificou a separao de Pi e as demais classes, por possur menores valores mdios de DM (0,23 g.cm3) em relao a Si (0,50 g.cm3) e St (0,55 g.cm3). No houve diferenas significativas entre as estaesdoanoounainteraoentreosdoisfatores.
DM(g.cm ) 1,0
3

0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 vero

inverno Pi

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura20.Densidadedamadeira(DMg.cm3)nasclassessucessionaisdas41 espcies estudadas na Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 6.1.10.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) A avaliao das 28 amostras de razes no solo das duas reas de coleta em SV nas duas estaes do ano (Tabela 4) mostrou que a porcentagem mdia de colonizao radicular total (CRT) foi maior no inverno, bem comoacolonizaopormicorrizaarbuscular(CA).Foiobservadaaocorrnciadesimbioseradicularemquatro subamostras de solo retiradas de SV no inverno. Estes ndulos no foram avaliados quanto possvel atividade,masocortepermitiuobservarqueestavamvivos. 70

Tabela 4. Colonizao radicular total (CRT %) e colonizao radicular por micorriza arbuscular (CA %) mdias, das amostras de raz em solo retirado da Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da Serra do Mar (PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padro entreparntesis.

CRT CA

vero 29,97(14,68) 22,65(12,16)

inverno 60,76(16,68) 39,78(17,09)

6.1.11.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo As medidas de disponibilidade de NO3 e amnio NH4+ no solo de SV (Figura 21), estimadas atravs do uso de resinas de troca inica, mostraram grande variabilidade entre os pontos de coleta para ambos os ons mensurados. A presena de NO3 foi verificada em todos os pontos de coleta, com um local apresentando at 30g.g1deNO3naresina,edoislocaischegandoaquasezero.AmdiageraldeNO3foide7,47g.g1parao veroe8,06g.g1paraoinverno,mostrandoumatendnciaamaiorquantidadedeNO3noinverno.
30 NO3 vero NO3 inverno NH4 vero NH4 inverno 100 90 80 Amnio (NH4 ug.g ) 70 10 60 50 0 40 30 20 20 10 0 30
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 1

20 Nitrato (NO3 ug.g )

10

10

Resina

Figura 21. Disponibilidade de nitrato (NO3) e amnio (NH4+) (g.g1) no solo da Floresta Ombrfila Densa Montana do Parque Estadual da SerradoMar(PESM),NcleoSantaVirgnia(SV),SoLusdoParaitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). As barras representamodesviopadro. 71

Quanto ao NH4+, o valor zero caracterizou nove resinas no vero e 23 no inverno, mostrando uma tendncia a maiores quantidades de NH4+ no solo no vero. A mdia geral de NH4+ foi de 4,17 g.g1 para o veroe2,63g.g1paraoinverno.Apenas2pontosdecoletaalcanaramvaloresmaioresque30g.g1. 6.1.12.DiscussoSVOModelodousodeNnaFlorestaOmbrfilaDensaMontana As anlises de ordenao aplicadas s espcies arbreas selecionadas para o estudo na rea de Floresta Ombrfila Densa Montana SV, nas duas estaes do ano (vero e inverno), apontaram a existncia de diferentes estratgias utilizadas pelas plantas na aquisio, assimilao, transporte e armazenamento do N disponvel no ambiente, sustentando assim a hiptese da estruturao dessas espcies com diferentes estratgiasdeutilizaodeNemtrscategoriasdesucessoecolgica:Pi,SieSt. Com base no grau de influncia das variveis sobre a componente, foi possvel observar nas espcies Pi estudadas a importncia da ANR potencial, bem como do contedo de NO3 sendo transportado na seiva do xilema. Essa alta atividade de nitrato redutase j foi observada em diversos estudos para espcies pioneiras e/oucolonizadorasdeclareiras(Stewartetal.1988,1990,1992,Aidaretal.2003,PereiraSilva2008,Campos 2009, Silva 2012). Por ser uma enzima induzvel pelo substrato, a maior ANR encontrada nas espcies Pi pode sugerir maior disponibilidade desse on no solo sob essas plantas (Stewart et al. 1988). Desse modo, os resultadosaquiencontradossugeremquenosestgiosiniciaisdasucessoflorestalosonsNO3soasformas deNdisponvelparaasplantas,oqueestdeacordocomoencontradoparaplantasdeflorestasAustralianas, por Stewart et al. (1988, 1990), e por Aidar et al. (2003), PereiraSilva (2008) e Campos (2009) em florestas brasileiras. No outro extremo, observouse que as espcies tardias St, que representam o grupo oposto da sucesso ecolgica, quanto estratgia de uso de N investiram mais na aquisio e assimilao de outras formas de N que no NO3, possivelmente NH4+, e transportam preferencialmente arginina (Arg) na seiva do xilema, tanto no vero quanto no inverno. Do mesmo modo, esse resultado parece concordar com o encontrado para espcies de clmax ou tardias na sucesso florestal por Stewart et al. (1988, 1990) em plantas Australianas e com o encontrado em estudos com plantas de floresta no Brasil, por Aidar et al. (2003), PereiraSilva (2008), Campos (2009), Silva (2012), Marchiori (2012). O custo da assimilao do NH4+ menor que a do NO3 em relao gua e energia gastas no processo (Raven 1985), sendo assim, o custo efetivo da assimilao do on NO3 maior em relao ao on NH4+, e pode sugerir que a planta utilizase de uma estratgia ecolgica mais conservativaeeconmicaqueadasplantasqueusamoNO3comoprincipalfontedeN. 72

Quanto s espcies secundrias iniciais Si, estas se caracterizaram por possuir um comportamento heterogneo, oscilando entre os dois extremos de estratgias ecolgicas utilizados pelas demais espcies no usodeN.EssasdiferentesestratgiasnousodeNobservadasnasespciesdasdiferentesclassessucessionais j eram previstas de ser encontradas nesse estudo, e confirmaram o modelo sugerido por Aidar et al. (2003) que props a existncia de um contnuo de estratgias de uso de N entre as plantas de uma Floresta Ombrfila Densa Submontana ao sul do estado de So Paulo. Esse modelo j havia sido confirmado por PereiraSilva (2008) em duas outras florestas no interior do estado, uma Ombrfila Densa Submontana e a outra Estacional Semidecidual, e tambm por Campos (2009) e Silva (2012) em duas Florestas Ombrfilas DensasdeTerrasBaixasaonorteeaocentrodolitoraldoestadodeSoPaulorespectivamente.Dessemodo, o presente estudo amplia a abrangncia desse modelo de uso de N, incluindo as plantas dessa Floresta OmbrfilaDensaMontanadonortedoestadodeSoPaulo. A existncia de um contnuo entre plantas de floresta j havia sido demonstrada por Stewart et al. (1990) emrelaoatividadedaenzimanitratoredutase,emestudocomoitocomunidadesdeflorestanaAustrlia, que relacionaram esse gradiente AFE das plantas, de modo que essa varivel aumentou paralelamente ao aumento da ANR nas folhas, bem como o contedo de gua, a quantidade de N total e o contedo de clorofila. Os autores assumiram ento que nestas plantas, o potencial fotossinttico das folhas tem relao direta com a AFE, contedo de N total e ANR. E desse modo, concluram que a nutrio e desempenho das plantas de estgios iniciais da sucesso florestal so marcadamente afetados pelo estatus de nutrientes do solo do ecossistema. No houve no presente estudo relao direta entre ANR e AFE, pois esta ltima no se mostroudiferenteestatsticamenteentreasclassessucessionais. De modo geral, a maioria das plantas apresentou valores de ANR de baixa a mdia, considerando o valor de 200 pkat.g1 MF como sendo atividade mdia de assimilao de NO3 foliar, como proposto por Stewart et al. (1992). Esses valores so similares ao encontrado por PereiraSilva (2008), para plantas de Floresta Estacional Semidecidual e Floresta Ombrfila Densa Submontana no estado de So Paulo, que obteve resultados onde a maioria das espcies apresentou baixa ANR, sendo sugerido por este autor isso estar relacionado com as caractersticas oligotrficas do solo, como a escassez de NO3, elevada acidez, pouca reatividadenamatriaorgnicaebaixasatividadesorgnicasebiolgicas,queindisponibilizamosnutrientes. Nocasoespecficodopresenteestudo,observousetambmumabaixaconcentraodessesonsnosolo, como demonstrado pelos resultados de resina de troca inica. Alm disso, estudos realizados em gradiente altitudinal da floresta Atlntica, incluindo a rea especfica deste estudo, mostraram grande acmulo de matria orgnica na superfcie do solo apesar da menor produo de serapilheira, quando comparada s 73

demais altitudes avaliadas, mostraram tambm maiores concentraes de Al, alta acidez e baixas temperaturas na superfcie do solo, que contribuem para uma baixa atividade biolgica agindo na decomposiodomaterialacumulado(Martins2010,Rosado2011,Vieiraetal.2011). AsplantasPi,queusamNO3como principalfontedeN,podemterdiminudoessaassimilaonoinverno devido queda da temperatura, comportamento bastante suportado pela literatura em plantas tropicais. Por sua vez, o frio pode ter possibilitado uma mudana na competio pelo uso do recurso N destas com relao splantasquenopreferemessafontedeN.Assim,plantasSiouSt,quenoveropodemoptarporusarNH4+ pois o NO3 facilmente lixiviado do solo com o advento das chuvas e devido tambm ao maior custo na assimilao deste on, no inverno, utilizamse de outra fonte de N alm do NH4+, podendo ser NO3, como demonstrado pela presena deste sendo transportado na seiva do xilema dessas plantas. Com isso, as plantas Pi, mais especializadas em usar NO3, acabam obtendo desvantagem competitiva pelo uso de NO3 no inverno mas aumentam suas atividades de NR na estao mais mida, juntamente com o potencial fotossinttico (Stewart et al. 1990), possibilitado por dias maiores e maior intensidade luminosa caractersticos dessa estao. Para sustentar essa hiptese, embasamonos no argumento colocado por Ashton et al. (2010) de que a plasticidade no uso de recursos existe como um mecanismo de complementariedade de nicho entre plantas coexistentes.Osautorescolocamquecompetidoressuperioresexibemmaiorplasticidadenousodosrecursos de formas qumicas de N que competidores inferiores, que no mudam o uso dos recursos. De acordo com esse argumento, as plantas St e Si seriam, no caso do presente estudo, melhores competidoras no que diz respeitoaousodeN,emrelaosplantasPi,queusamapenasoupredominantementeNO3. Apesar da falta de suporte estatstico para apontar as diferenas entre as estaes do ano, houve uma tendncia a maiores ANR no inverno em algumas espcies pertencentes a classes secundrias na sucesso ecolgica,observandocadaumaindividualmente.Issonoeraesperado,poisdeacordocomaliteraturaessa atividade geralmente maior na estao chuvosa, devido s maiores temperaturas e maior quantidade de gua no solo, caractersticas dessa estao, que tornam o NO3 mais disponvel para as plantas e com isso possibilita maiores ANR foliares, pois a reduo de NO3 pode estar diretamente relacionada com sua concentraonosolo(PereiraSilva2008). Porm, considerando apenas o fato de a NR ser dependente da concentrao do NO3 no solo, essa maior atividade no inverno consistente com as maiores concentraes dos ons no solo encontradas tambm no inverno, o que poderia evidenciar o comportamento responsivo das espcies disponibilidade sazonal desse elemento no solo. Entretanto, os dados de disponibilidade dos ons no solo, obtidos com o uso das resinas de 74

troca inica, so dependentes da presena de gua para a realizao das trocas, e no caso especfico das coletas realizadas na rea de estudo SV houve uma interferncia causada pela falta de chuvas no vero na poca da coleta, evento mais conhecido como veranico, ou seja, um evento de seca exepcional no pico da estaochuvosa.Comisso,acaracterizaodoqueusualmenteacontececomosnutrientesnosoloduranteo vero ficou prejudicada. Em um estudo realizado na mesma rea sem a ocorrncia de veranico foram verificadas quantidades muito maiores desses ons no vero, com destaque para o NO3 (Marchiori 2012). Nessecontexto,adiscussodosresultadosdesolofoiseparadadadiscussodecadareaespecfica. Rosado et al. (2011), em estudo na rea SV do presente trabalho, encontraram grandes quantidades de razes finas nos primeiros 5cm de solo, maiores que nas demais altitudes da mesma floresta. Isso revelou um maior potencial para assimilao de gua e nutrientes pelas plantas dessa rea, que tm maximizada a assimilao apesar da menor taxa de decomposio no solo decorrente das baixas temperaturas caractersticasdessafloresta(Martins2010). Comparando os resultados de ANR das plantas de SV com os de outros estudos realizados em espcies de floresta encontrados na literatura, podese afirmar que os valores obtidos no presente estudo em termos gerais, independentemente da classe sucessional, foram muito prximos aos obtidos por Stewart etal. (1988, 1992, 1993) para vrios tipos de formaes vegetais da Austrlia e do Brasil, por Schmidt et al. (1998) em cinco tipos de comunidades tropicais na Austrlia, por PereiraSilva (2008) para duas florestas brasileiras localizadas no estado de So Paulo (Estacional Semidecidual e Ombrfila Densa Submontana), por Campos (2009)eSilva(2012)paraduasflorestasbrasileiras(OmbrfilaDensadeTerrasBaixas),tambmnoestadode So Paulo, e foram inferiores aos valores encontrados por Aidar et al. (2003) para uma Floresta Ombrfila DensaSubmontanasobresolocalcrioeutrficoondeomodelodeusodeNfoiestabelecidoinicialmente. As duas espcies Pi (Cecropia glaziovii e Solanum sp.1) e duas das espcies Si estudadas (Shefflera angustissimaeJacarandamontana)apresentaramasmaioresmdiasdeANRfoliar(>200pkat.g1MF),porm estas no ultrapassaram o valor de 665 pkat.g1 MF como aconteceu nos estudos de Aidar et al. (2003), PereiraSilva (2008) e Campos (2009), que encontraram valores de ANR variando de 690 at 1250 pkat.g1 MF para a espcie Cecropia glaziovii especificamente. Altas ANR foram comumente encontradas em espcies Pi de outras florestas mundiais, na Nigria (Stewart & Orebanjo 1983), Austrlia (Stewart et al. 1988, 1990), Mxico (Fredeen et al. 1991) e Brasil (Aidar et al. 2003, PereiraSilva 2008, Campos 2009, Silva 2012) por exemplo. Em contraste, as espcies tardias na sucesso do presente estudo foram caracterizadas pelas menores ANR (< 150 pkat.g1 MF) em ambas as estaes avaliadas, resultados tambm semelhantes aos encontrados 75

porAidaretal.(2003),PereiraSilva(2008),Campos(2009),Silva(2012)eMarchiori(2012). Os trabalhos citados nos dois pargrafos anteriores apresentaram evidncias que corroboram o padro encontrado para este estudo, onde espcies de sombra, generalistas ou tardias na sucesso florestal normalmentenoreduzemNO3nafolhaouofazemempequenasquantidades,aocontrriodeespciesmais especialistas,pioneirasnasucesso,colonizadorasdeclareirasouespciesdeborda,quegeralmentereduzem NO3 em suas folhas ou razes. E esse comportamento especialista das espcies Pi, indica certa desvantagem competitivapelousodosrecursoscomrelaosespciessecundriasnasucessoflorestal,comojsugerido anteriormente. De acordo, as primeiras possuem ciclo de vida mais curto em relao s segundas, que optam porreciclageminternadeNcomoumaalternativaassimilaodeNnovoecomissoeconomizamemcustos relativos esta assimilao de fonte externa de N. Essa plasticidade no uso dos recursos encontrada nas espcies secundrias provm um importante mecanismo de partio desses recursos, particularmente naquelasquetmemgeralsobreposiodepadresdeusodorecurso(Ashtonetal.2010). Seguindo esta linha de raciocnio, segundo Smirnoff et al. (1985) as plantas de comunidades naturais, a menos que estejam fortemente sombreadas, podem estar limitadas mais pela competio por nutrientes que porqualqueroutrofator.OsautoresafirmamqueemsituaesondeosuprimentoenergticoedeCnoso limitantes,pequenasdiferenasnocustoenergticoentreaassimilaodeNO3pelasrazesoufolhaspodem ter baixo valor seletivo. Portanto no surpreendente que no exista uma correlao universal entre a concentraodeNO3noambienteeaassimilaodestepelasrazesoufolhas,ouquenemtodasasespcies assimilem este on em suas folhas. Entretanto, o fato de a assimilao deste pelas folhas prevalecer sobre as razessugerequeistolevageralmenteaumganhoouvantagempelaplantaqueacoplaaassimilaodoNO3 diretamentefotossntese. AreduodoNO3emfolhasverdesseguidadareduodonitritoesubsequenteassimilaodoamnio a glutamato, que so reaes essencialmente fotossintticas (Smirnoff & Stewart 1985). Todas as enzimas da via, com excesso da NR esto situadas nos cloroplastos (Abrol et al. 1983, Wallsgrove et al. 1983). A NR citoplasmtica, mas o NADH utilizado na reduo do NO3 derivado de compostos gerados no transporte de eltrons durante o processo fotossinttico (Abrol et al. 1983). As demais enzimas localizadas nos cloroplastos (nitrito redutase, glutamina sintetase e glutamato sintase) utilizam ATP e reduo por ferredoxina, que so tambmgeradaspelotransportedeeltrons(Wallsgroveetal.1983).Dessemodo,oNO3eoCO2competem por redutores e pelo ATP (Canvin and Atkins 1974) em condies onde a radiao incidente na folha no excessiva. Plantas que crescem em altitudes elevadas so mais suceptveis a saturao pela luz devido a uma 76

combinao de alta intensidade luminosa e baixas temperaturas. Apenas quando a fotossntese saturada pela luz que a planta ter energia suficiente para reduzir NO3 nas folhas sem competir com o processo fotossintticoporredutorese/ouATP.Assim,plantasdesombratmmenorvantagemnaassimilaodoNO3 nasfolhasdevidolimitaodafotossntesepelaluz,eporisso,podemoptarporassimilaresseonnasrazes permitindomaiorcontrolenaassimilaodeNeCsobousolimitadodaluz(Taiz&Zeiger2002). ExistemdiversosestudosdemonstrandoqueavariaodaassimilaodoNO3porplantasdesombraest diretamente relacionada intensidade de radiao que recebem, de modo que essa assimilao aumenta nas plantas crescidas sem limitao de luz (Smirnoff & Stewart 1985), como acontece em plantas das classes iniciaisdasucesso(Pi). A reao de aumento da ANR diante de baixas temperaturas pode ser temporria de acordo com Vogel & Dawson(1991),quedemonstraramquebaixastemperaturaspodemlevaraumaumentodaANRinicialmente nafolhaseguidodereduodestaatividadeconformeaatividadedaenzimanitrogenaseaumentaemplantas de floresta alpina. Os autores sustentam que apesar de os nveis da ANR em tecidos foliares de plantas superiores serem normalmente associados ao suprimento de NO3 aos tecidos (Guerrero et al. 1981), existem autores que defendem a possibilidade de a NR constitutiva foliar estar mais relacionada primariamente ao metabolismo dos uredeos do que ao metabolismo do NO3 in vivo (Li & Gresshoff 1990). Porm, este estudo utilizou plantas Leguminosae fixadoras de N, e no se pode inferir que isso esteja ocorrendo com as plantas avaliadasnesteestudo. Por outro lado, este aumento da ANR no inverno encontrado nas espcies secundrias na sucesso pode estar mais relacionado aclimatao ao frio que competio por recursos, ou mesmo demanda nutricional. Cantrel et al. (2011), em estudo com mutantes de Arabidopsis thaliana para a enzima NR, demonstraram claramente a importncia da NR na produo de NO como um composto chave na resposta da planta ao estressecausadoporbaixasealtastemperaturas,tantonaaclimataoquantonatolerncia. Existem diversas rotas de produo de NO, que so essencialmente nitritodependentes ou LArg dependentes, e at o momento, a NR enzima aparentemente produtora de NO mais estudada, e o NO vem sendo considerado nas ltimas dcadas como uma importante molcula sinalizadora em plantas, e est envolvidoemmltiplosprocessosfisiolgicosededesenvolvimento(Zhaoetal.2009,Guptaetal.2011). Em relao ao NO produzido em condies de baixas temperaturas, sabese que a habilidade das plantas em lidar com o frio dependente de respostas adaptativas apropriadas para prevenir os efeitos deletrios de congelamento das membranas e reduo do metabolismo celular. Assim, a resposta ao frio envolve remodelamentodessemetabolismo,incluindoacmulodecompostoscrioprotetorescomoprolinaeacares 77

(Cook et al. 2004, Kaplan et al. 2004). Este remodelamento resulta, pelo menos parcialmente, da expresso e regulaodegenesespecficos(Cooketal.2004). O NO uma molcula gasosa sinalizadora que conhecidamente participa do desenvolvimento da planta e das respostas a estresses biticos (BessonBard et al. 2008, Neill et al. 2008), ele rapidamente produzido pela planta atravs da induo pelo frio, e participa da regulao da sntese de prolina atravs da ao que exerce sobre genes da via de produo desse aminocido. Alm disso, a funo do NO na regulao da formaodecompostosderivadosdelipdeossinalizadorespossvel(Cantreletal.2011). As duas vias que se destacam na produo dessa molcula em plantas so: converso de arginina em citrulinapelasupostaenzimaNOsintaseouatravsdaatividadedaenzimanitratoredutase,quemostrouser a fonte mais importante como demonstrado atravs do estudo com mutantes de Arabidopsis para o gene da NR (Zhao et al. 2009, Cantrel et al. 2011). Porm, o NO pode ter diversas origens, dependendo da espcie de planta e das condies de frio, como reportado por outros autores, por exemplo, Shimoda et al. (2005) e Corpasetal.(2008),emLotusjaponicusePisumsativumrespectivamente. ApesardasdiferenasdeANRpercebidasentreasclassessucessionais,nohouvediferenassignificativas entre as concentraes de NO3 nas folhas das espcies, e os valores mdios encontrados neste estudo foram consideravelmente baixos quando comparados aos encontrados na literatura para outras plantas de floresta (Schmidt et al. 1998, Aidar et al. 2003, PereiraSilva 2008, Campos 2009, Silva 2012, Marchiori 2012). Alm disso, no se encontrou relao entre ANR e a concentrao de NO3 foliar, revelando uma no dependncia da atividade da enzima NR e a concentrao do substrato na folha. Assim, como j sugerido por Smirnoff & Stewart(1985),oacmulodoNO3foliarpodeterfunodereservadeNnafolha,estandomaisrelacionadoa funesosmticasintracelularesdoquenutricionais,outambmcontribuirparaseevitarafotoinibio. Vogel & Dawson (1991) tambm no encontraram relao entre a ANR e a concentrao de NO3 na folha em estudo realizado com plantas de floresta alpina. Aidar et al. (2003) no estudo de estabelecimento do modelodeusodeNqueopresentetrabalhocorrobora,encontraramvaloresdecontedodeNO3foliaresna sua maioria abaixo dos limites de deteco, e quando detectados foram maiores que aos encontrados neste estudo. Schmidt et al. (1998) tambm observaram baixssimas concentraes de NO3 foliar em espcies australianas,queapareceramnasplantasapenasnovero.Marchiori(2012)encontrouvaloresmuitomaiores que os mostrados por este estudo, atingindo at 120mol.g1 e sendo especialmente maiores no vero em todasasclassessucessionais. Segundo Smirnoff et al. (1984), a ANR est mais relacionada com a concentrao de NO3 na seiva do xilemadoquecomaconcentraodestenafolha.EquantoaocontedodeNO3sendotransportadonaseiva 78

do xilema das plantas deste estudo, as espcies Pi foram as que transportaram as maiores quantidades desse composto, como j era esperado, indicando o uso preferencial dessa forma de N pelas plantas dessa classe sucessional.Porm,suaconcentraonaseivafoimaiornoinvernoquenovero,aocontrriodoqueocorreu com a ANR na maioria dessas espcies Pi, o que pode sugerir menor transpirao foliar resultando em menor transporteemaiorconcentraodeNO3,ouapenasqueduranteaestaosecaefriaestasplantasutilizamo NO3comosolutoosmticoedereserva,deacordocomopropostoporSmirnoff&Stewart(1985). No estudo de Aidaret al. (2003), as plantas Pi exibirammaior quantidades de NO3 sendo transportado na seiva do xilema no vero, porm, a quantidade de outros compostos sendo transportados tanto nas espcies Pi quanto nas espcies secundrias na sucesso foi maior no inverno, sendo sugerido pelos autores isso ser devido menor taxa transpiracional das plantas caracterstica da estao mais seca e consequente aumento daconcentraodoscompostosemumaseivacommenosgua.Schmidtetal.(1998)emestudocomplantas australianastambmencontroumaioresconcentraesdeNO3naseivadoxilemaemespciespioneiras,que tambmexibirammaioresANRemsuasfolhas,enoforamencontradasdiferenassazonaisnessetransporte entre a maioria das espcies. Os autores encontraram relao direta entre a concentrao desse on sendo transportado na seiva do xilema e as concentraes do mesmo no solo, o que no aconteceu no presente estudo. Alm disso, a razo CN foi menor nas espcies Pi, indicando maiores quantidades de N que de C na estrutura das folhas de modo geral, quando comparadas s espcies St, que se caracterizaram pelas maiores razes CN, mostrando investimento maior em C do que em N, o que se explica a maior longevidade foliar nas plantasdessaclassesucessional.EsseresultadotambmconcordacomoencontradoporPereiraSilva(2008), queincluiunovasinformaesaomodelopropostoporAidar(2003),aoafirmarqueasespciesPialmdeter relativamente altas ANR foliar e investirem no transporte de N atravs do NO3 e de Asn, tambm possuem uma baixa razo CN. Do mesmo modo, o trabalho de Silva (2012) mostrou menor razo CN entre as espcies Pi com relao s St. A autora afirma que o N o elemento principal para a determinao da razo CN, e assim,menorrazoCNindicaaltaconcentraodeNfoliar. O estudo de Aidar et al. (2003) j demonstrava uma maior concentrao de N nas folhas das espcies pioneirasquediminuiucomoavanardasucessoflorestal,sendoassimessasconcentraesforammenores nas folhas das espcies tardias. Os autores afirmaram que a elevada concentrao de N nas folhas impe maior requerimento de N e consequentemente, quando o N est disponvel no ambiente, essas plantas tendem amaximizar sua assimilao aumentando com isso o contedo de N. A vantagem desseestilo de vida rico em N, encontrado principalmente em espcies leguminosas, pode ser vantajosa apenas em certos 79

habitatsondeossolossorelativamentepobresemN,efatorescomoguaeluznosolimitantes. Outro aspecto proposto pelo modelo de Aidar et al. (2003) considera que o 15N aumenta no contnuo de sucesso florestal, sendo menor nas espcies Pi e maior nas St. No presente estudo essa tendncia foi verificada apenas em relao s duas primeiras classes sucessionais na rea de floresta SV. Houve uma diferena significativa entre as espcies Pi e Si, com as segundas mostrando maiores valores mdios de 15N queasprimeiras.Porm,asespciestardiasnasucessonorevelaramdiferenassignificativasemrelaos demais. Ainda, considerando a grande diferena no nmero de indivduos que compe cada classe, essas diferenasencontradasentrePieSipodemserdevidodiferenasnotamanhodasamostras.Avegetaoem SVdeumaflorestabastantemaduraeareadecoletanopossuimuitasclareiras,eassim,poucasespcies Pi foram encontradas, deixando a amostra de Pi muito menor que a de Si e St. De qualquer modo, pelo presente estudo, o 15N no mostrou ser um atributo de grande valia na determinao das estratgias de uso deNpelasespcies. Segundo PereiraSilva (2008), os compostos nitrogenados de baixo peso molecular encontrados na seiva do xilema desempenham funes de transporte, distribuio e armazenamento do N absorvido pela raiz. Dentreestes,Asn,Gln,ArgetambmoNO3sedestacampelofatodasomadostomosdeCeNpresentesna composiodesuasmolculasrevelareminvestimentoderazoCNconsideradarelativamenteelevadaparao transporte de N, ou seja, molculas ricas em N como as amidas (Asn 21,2%N, Gln 19,2%N) so formas mais utilizadas para transporte de N (Kang & Titus 1980), e a Arg, que tem a menor razo CN (32,2%N), a forma mais utilizada para estoque e reserva de N, mas tambm Asn e Gln podem ser usadas para este fim. Assim, entendesecomosendoeficienteotransportedeNfeitoatravsdousodessescompostos. Especificamente os compostos Gln e Asn, unem os metabolismos de C e N, e juntamente com Glu e Asp, relacionamse sntese de compostos nitrogenados envolvidos no metabolismo do NH4+. Alm disso, so precursoresdasprincipaisfamliasdeaminocidosproticosedecompostosnitrogenadoscomoaclorofila,os cidos nuclicos e as poliaminas, e por isso so fundamentais na exportao e distribuio de N pela planta (Taiz&Zeiger2002)almdeseremmaisestveismetabolicamente. Alm do uso da Arg como um composto de reserva de N, apresena desse aminocido na seivado xilema pode estar relacionada ao processo de remobilizao de N na estao chuvosa (vero) e ao armazenamento de N na estao mais fria e seca (inverno), o que mostra uma estratgia de reciclagem interna de N. Fato evidente entre a classe de plantas St, que concentraram mais de 20% do N da composio da seiva sob a forma de arginina. Esse comportamento j era esperado e est de acordo com os resultados encontrados nos trabalhosdeAidaretal.(2003),PereiraSilva(2008)eCampos(2009)paraplantasdessaclassesucessional. 80

Essa estratgia de armazenamento de N pelas plantas St, pode permitir a manuteno do crescimento no inverno apesar da menor disponibilidade de gua e de N no solo, tpicas desse perodo. Alm disso, o fato desse aminocido ser o principal constituinte da seiva do xilema pode indicar ocorrncia de remobilizao do N armazenado, o que ocorre pelo fato deste aminocido ser bastante solvel quando comparado a Asne Gln, que so tambm muito utilizados no transporte a longa distncia em plantas superiores (Schmidt & Stewart 1998). AsespciesStanalisadastiverambaixocontedodeNO3naseivaepredomniodeAspeGlualmdaArg, o que possivelmente est tambm relacionado com a reciclagem interna do N nessas plantas e com a assimilao de outra forma de N do solo, podendo ser N inorgnico sob a forma de NH4+ ou N orgnico (Stewartetal.1988). Uma outra varivel que mostrou ser significativamente diferente entre as espcies Pi e as secundrias na successoflorestalnareadeestudoSV,foiadensidadedamadeira(DM),sendomenornasPiemaiornasSi e St, que no mostraram diferenas significativas entre elas, no havendo tambm diferenas entre as estaes do ano para todas as classes avaliadas. Isso est de acordo com o j documentado na literatura e ao esperadoinicialmente. Plantas intolerantes sombra tendem a possuir crescimento rpido em reas abertas ou clareiras ou sob condies favorveis de luminosidade (Laurance et al. 2006, Poorter et al. 2008), elas entram em fase reprodutiva mais cedo, tendem a produzir mais sementes porm de pequeno porte e rpida disperso (Melo et al. 2006), mostram maiores taxas de mortalidade (Oliveira et al. 2008) caractersticas de plantas com ciclo de vida curto, e possuem madeiras com baixa densidade. Ao contrrio, as plantas tolerantes sombra caracterizamse por tendncias opostas e as plantas de tolerncia intermediria sombra, tendem a apresentarcaractersticastambmintermediriasentreosdoisextremos(Ptzetal.2011). Existe uma interrelao bem estabelecida entre conduo de gua, densidade da madeira e altura das plantas, mas a fora e a direo dessas relaes variam consideravelmente entre os estudos, principalmente devido s diferenas ambientais (MartnezCabrera et al. 2011). A eficincia na conduo hidrulica influencia a transpirao e as taxas de fixao de C, e consequentemente o crescimento (Tyree 2003, Poorter et al. 2009). O aumento de vasos do xilema juntamente com a diminuio de seus calibres, permitem planta um aumento na resistncia falhas hidrulicas como a cavitao por exemplo (Carlquist 1980, Ewers et al. 2007), e refletem o investimento da planta em suporte mecnico e carbono, bem como a eficincia na conduo hidrulica, e est consequentemente relacionado caractersticas da histria de vida das plantas (Martnez Cabreraetal.2011). 81

Assim, maiores densidades da madeira esto associadas geralmente a menores taxas de crescimento, maior sobrevivncia, ciclo de vida longo e estatus sucessional tardio (ter Steege & Hammond 2001, Muller Landau 2004, Chave et al. 2009, Poorter et al. 2009), bem como maior resistncia a formao de embolias (Hackeetal.2001). Por outro lado, a altura da planta determina sua habilidade de competir por luz e se correlaciona com caractersticasdeganhodecarbono,comoAFE,%Nfoliarereadacopa(Falster&Westoby2003)epodeser positivamente relacionada com caractersticas da histria da vida como longevidade e tempo de reproduo (Molesetal.2004,Petit&Hampe2006). Algunsestudosporm,tmencontradotantorelaespositivasquantonegativasentrealturaedensidade damadeira(Thomas1996,terSteege&Hammond2001,Falster&Westoby2005a,b,Prestonetal.2006,van Gelderetal.2006,Aiba&Nakashizuka2009),eessespadresopostostemsidoexplicadospordiferenasnas estratgias ecolgicas das plantas. Assim, espcies pioneiras que demandam maior luminosidade e tendem a crescer rpido aumentando temporariamente a competio por recursos, so caracterizadas por madeira menos densa que aquelas da mesma classe sucessional de ciclo de vida relativamente maior. J entre as espcies mais tolerantes sombra, as de menor porte tendem a ser mecanicamente mais fortes, permitindo maior resistncia possveis danos causados pela queda das rvores maiores (Gartner 1989, Putz & Brokaw 1989),enquantoquenestas,umamenordensidadedamadeiraestassociadaamaiorestaxasdecrescimento (Falster&Westoby2005a,vanGelderetal.2006). Segundo MartnezCabrera et al. (2011) devido forma de crescimento e a altura necessria ao suporte mecnico das plantas de porte arbreo, existe uma forte relao entre o ambiente e a DM, que sugere que a eficincia no crescimento em altura depende de uma coordenao entre a capacidade de conduo e allocao para suporte mecnico. Alm disso, os autores sustentam a hiptese de que plantas crescidas em ambientesmaisfrios,secosouescurospossuemmaioresDMs. Podese afirmar que os resultados obtidos no presente estudo sustentam a hiptese de que plantas tolerantes sombra e tardias na sucesso florestal possuem madeiras mais densas, estas tambm se caracterizam por possurem ciclos de vida mais longo e maior altura em relao as plantas de espcies pioneiras ou colonizadoras de clareiras. Considerando este atributo (DM) e o uso de N especificamente, observouse que as espcies secundrias na sucesso, alm de maiores DMs apresentaram maior razo CN foliar e menores NRA e %NNO3 sendo transportado na seiva do xilema, elementos que ajudam a compor a estratgia mais conservativa no uso do recurso N adotada por estas espcies, mostrando que estas plantas investem mais em estrutura (carbono na folha e maior DM), possibilitando maior longevidade, e economizam 82

na utilizao de N atravs do uso de compostos mais eficientes no transporte de N, como arginina por exemplo,eassimilamformasmaisbaratasdeNinorgnicoquenooNO3,queimpemaiorcustoenergtico nasuaassimilaodireta. 6.2.FlorestaSubtropicalmidadoParqueNacionaldeLamington(LAM) 6.2.1.AnlisedeordenaoLAM A anlise de ordenao dos resultados obtidos no vero em LAM (Figura 22) teve 56,39% da varincia explicada, e mostrou uma tendncia separao entre as classes sucessionais, mais especificamente, das espcies Pi e as demais classes (St e Si) com relao ao primeiro eixo da PCA. Notase uma separao mais clara das espcies Si com relao as Pi, e as espcies St mostram uma heterogeneidade no comportamento com relao ao uso de N, hora apresentandose semelhante s Pi (principalmente quanto ao transporte de %NAsn),horamaissimilarsespciesSi(dadosvariveisrazoCN,%NNO3e%NArg).Porm,demodogeral, existemaiorproximidadedasespciesSisespciesSt. Os parmetros %NArg e %NNO3 so os que melhor descrevem a ordenao das Si com relao ao eixo 2. Os parmetros que melhor descrevem as espcies St so razo CN com relao ao eixo 1, %NGln e %NNO3 com relao ao eixo 2. A ordenao das espcies Pi pode ser explicada pelos parmetros ANR, %N e 15N em relaoaoeixo1e%NAsncomrelaoaoeixo2. A anlise de ordenao para o inverno (Figura 23), que tem 56,39% da varincia explicada, confirma a mesma tendncia verificada no vero, porm com separao mais definida entre as espcies Pi e Si com relao ao primeiro eixo da PCA, e as espcies St novamente, mostraram comportamento mais heterogneo entre elas com relao s outras classes. As variveis que melhor descrevem as espcies Pi foram ANR, %N, 15N, NO3 folha e %NGln com relao ao eixo 1. As variveis que melhor descrevem as espcies Si foram %NNO3 com relao ao eixo 2, razo CN, %NAsp e %NArg com relao ao eixo 1. E como variveis mais importantes na determinao da posio das espcies St na PCA, se destacam a razo CN em relao ao eixo 1,%NNO3emrelaoaoeixo2.

83

Figura 22. Ordenao (PCA) das 24 espcies estudadas em LAM, e suas diferentes estratgias de regenerao (Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadasnovero,sendo:%N%deNfoliartotal,CNrazocarbono/nitrogniofoliar,ANRatividadedaenzimanitratoredutase,NO3folhaconcentrao denitratofoliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina,Asn asparagina,Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela2.

84

Figura 23. Ordenao (PCA) das 24 espcies estudadas em LAM, e suas diferentes estratgias de regenerao (Si, St e Pi), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentraodenitratofoliar,15Nabundncianaturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Arg arginina, Asn asparagina, Asp cido asprtico, Gln glutamina, Glu glutamato, NO3 nitrato. Os cdigos das espcies esto representados na Tabela 2.

85

6.2.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) A anlise dos dados mdios de ANR para LAM (Figura 24), realizada atravs de ANOVA de dois fatores, apontoudiferenassignificativasentreasclassessucessionais(F2,88=6,879;p<<0,001).Nohouvediferenas entre as estaes do ano e na interao entre os fatores. Essas diferenas so devido maior ANR observada nasPiquenasdemaisclasses,comoconfirmadoportestedeTukeyaposteriori. Apesar de no haver estatisticamente diferenas significativas entre as estaes do ano, existe uma tendncia da ANR mdia ser maior no inverno que no vero para as espcies Si (inverno = 29,82 pkat.g1 MF; vero=16,30pkat.g1MF)eSt(inverno=32,09pkat.g1MF;vero=6,63pkat.g1MF),eocontrrioocorrenas espcies Pi (inverno = 338,07 pkat.g1 MF; vero = 414,76 pkat.g1 MF). Para mais detalhes, ver valores numricosporespcienaTabelaA2(ANEXO2).

700 600 500 400 300 200 100 0 vero

ANR(pkat.g MF)

inverno Pi

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura 24. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*).

86

6.2.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) A anlise dos dados mdios de concentrao de NO3 na folha para LAM (Figura 25), realizada atravs de ANOVAdedoisfatores,noevidencioudiferenassignificativasentreasclassessucessionais,estaesdoano, ou na interao entre estes fatores. Para mais detalhes, ver valores numricos por espcie na Tabela A2 (ANEXO2).

NO3 folha(mol.g MF)

0,2

0,1

0,0 vero Pi inverno vero Si inverno vero St inverno

Figura 25. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. As diferenas encontradasnoforamsignificativas. 6.2.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(%NNO3) A anlise de varincia das porcentagens mdias de contedo de N sob a forma de NO3 na seiva do xilema (Figura 26) das plantas estudadas em LAM mostrou que existem diferenas significativas entre as classes sucessionais(F2,88=30,047;p<<0,001)eentreasestaesdoano(F1,88=16,002;p<0,001).OtestedeTukeya posteriori identificou a separao de Pi das demais classes, por possuir o maior valor de contedo de NO3 sendo transportado na seiva do xilema, sendo maior que o dobro encontrado nas espcies das outras classes sucessionais. As diferenas entre as estaes do ano evidenciaram que as espcies transportam mais NO3 durante o invernoqueduranteovero,emtodasasclassessucessionaisestudadas. 87

 Figura26.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical midadoParqueNacionaldeLamington(LAM),Queensland(QLD)Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 6.2.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema As anlises de varincia das porcentagens mdias da composio de aminocidos na seiva do xilema (Figura 27) das plantas estudadas em LAM mostraram que existem diferenas significativas entre as classes sucessionaiscomrelaoNArg(F2,88=9,879;p<0,001)eNGlu(F2,88=4,509;p=0,014),eentreasestaes doanocomrelaoNAsp(F1,88=4,778;p=0,031),NGln(F2,88=4,778;p=0,038)eNGlu(F1,88=4,203;p= 0,043).A%deNsobaformadeNO3foirepresentadanovamentenaFigura27attulodecomparaocomos demais compostos da seiva, estando este detalhado especificamente no item anterior. No foram encontradas diferenas significativas na interao entre os dois fatores considerados com relao composiodeaminocidoseNO3naseivadoxilema. De modo geral, as espcies Pi foram caracterizadas pelo transporte de N na seixa do xilema atravs de NO3 e Asn, as espcies Si transportaram principalmente Asn, Arg e Gln, enquanto que as espcies St se destacaramnotransportedeArgeAsn,sendotambmimportantesoNO3eAspnoinvernoeGlnnovero.
%NNO3

100 80 60 40 20 0 vero Pi inverno * vero Si inverno * vero St inverno * *

88

NArg vero Pi

NAsn

NAsp

NGln

NGlu

NNO3

outros aa

inverno

vero Si inverno vero St inverno 0% 20% 40% 60% 80% 100%

Figura 27. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg = arginina, Asn = asparagina, Asp = cido asprtico, Gln = glutamina, Glu=glutamato,NO3=nitrato,outrosaa=somadosoutros20aminocidos. 6.2.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) A anlise de varincia da razo CN (Figura 28) das plantas estudadas em LAM mostrou que existem diferenassignificativasentreasclassessucessionais(F2,88= 13,582;p<<0,001). OtestedeTukeyaposteriori identificou a separao entre Pie as demais classes Si e St. Assim, Pi caracterizaramse pelos menores valores de razo CN na folha (mdia 18,29), Si e St evidenciaram os maiores valores (31,61 e 30,40 respectivamente). Nohouvediferenassignificativasentreasestaesdoanoounainteraoentreosdoisfatores.

89

50 40 CN 30 20 10 0 vero Pi inverno vero Si inverno vero St inverno *

Figura 28. Razo carbono/nitrognio foliar (CN) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenassignificativasparap<0,05(*). 6.2.7.Istopoestvel15Nnafolha(15N) Aanlisedevarinciadoistopoestvel15Nnafolha(15N,Figura29)nasplantasestudadasemLAM mostrouqueexistemdiferenassignificativasentreasclassessucessionais(F2,88=57,728;p<<0,001).

10 8 6 4 2 0 2 vero

N(%o)

15

inverno Pi

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura 29. Abundncia natural do istopo estvel 15N foliar (15N ) nas classes sucessionais das 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia. As barras representam o desvio padro.Foram consideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 90

OtestedeTukeyaposterioriidentificouadiferenaentrePi(mdiade5,99)easdemaisclassesSieSt, com valores mdios de 1,59 e 1,10 respectivamente. No houve diferenas significativas entre as estaesdoanoounainteraoentreosdoisfatores. 6.2.8.reafoliarespecfica(AFE) A anlise de varincia da AFE (Figura 30) das plantas estudadas em LAM evidenciou diferenas significativas entre as classes sucessionais (F2,88 = 10,584; p << 0,001). No houve diferenas significativas entreasestaesdoano,ounainteraoentreosfatoresavaliados. OtestedeTukeyaposteriorimostrouqueasespciesPi,queobtivemmdiade126,61cm2.g1noveroe 118,74cm2.g1noinverno,nosodiferentesestatisticamentedasdemaisclasses.JasespciesSi(mdiasde 101,47cm2.g1noveroe105,46cm2.g1noinverno)foramdiferentesdasespciesSt(mdiasde64,53cm2.g1 noveroe87,68cm2.g1noinverno),sendoasprimeirasmaioresqueassegundas.

300 250 200 150 100 50 0 vero

AFE(cm .g MS)

**

inverno Pi

vero Si

inverno

vero St

inverno

Figura30.reafoliarespecfica(AFEcm2.g1MS)nasclassessucessionaisdas 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia.Asbarrasrepresentamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenas significativasparap<0,05(*). 6.2.9.Densidadedamadeira(DM) A anlise de varincia da DM (Figura 31) nas classes sucessionais das plantas estudadas em LAM mostrou queexistemdiferenassignificativasentreasclassessucessionais(F2,88=4,125;p=0,019).OtestedeTukeya posteriori identificou a separao entre as espcies dos dois extremos da sucesso, Pi e St, com mdias de 91

0,172 g.cm3 e 0,287 g.cm3 respectivamente. As espcies Si no so significativamente diferentes das demais classes (mdia de 0,216 g.cm3). No houve diferenas significativas entre as estaes do ano ou na interao entreosdoisfatoresconsiderados.

1,0 DM(g.cm ) 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 vero Pi inverno vero Si inverno vero St inverno
3

**

Figura31.Densidadedamadeira(DMg.cm3)nasclassessucessionaisdas24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira, Si = secundria inicial, St = secundria tardia.Asbarrasrepresentamodesviopadro.Foramconsideradasdiferenas significativasparap<0,05(*). 6.2.10.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) Aavaliaodas20amostrasderazesnosolodareadecoletaemLAMnasduasestaesdoano(Tabela 5) mostrou que a porcentagem mdia de colonizao radicular total (CRT) bem como a colonizao por micorriza arbuscular (CA) no se alteraram com as estaes do ano. No foi observada a ocorrncia de simbioseradicularnasrazesencontradas. Tabela 5. Colonizao radicular total (CRT %) e colonizao radicular por micorriza arbuscular (CA %) mdias, das amostras de raz em solo retirado da Floresta Subtropical mida do Parque Nacional deLamington(LAM),Queensland(QLD)Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padroentreparntesis.

CRT CA

vero 61,69(22,53) 22,28(12,37)

92

inverno 60,12(20,38) 24,21(13,66)

6.2.11.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo AsmedidasdedisponibilidadedeNO3nosolodeLAM(Figura32),estimadasatravsdousoderesinasde trocainica,mostraramgrandevariabilidadeentreospontosdecoleta.Oonamnio(NH4+)nofoidetectato emambasasestaesdoano,porissonoestrepresentadonaFigura. Quanto presena de NO3 nas resinas de troca inica, esta no foi verificada em todos os pontos de coleta,emostrousemaiorque10g.g1emapenasumdeles,evidenciandobaixasconcentraesdeNO3,de modogeral,nosolodeLAM. A mdia geral de NO3 foi de 0,19 g.g1 para o vero e 1,08 g.g1 para o inverno, mostrando uma tendnciaamaiorquantidadedeNO3noinverno.
NO3 vero NO3inverno

30 Nitrato(NO3 ug.g )
1

20

10

0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 Resina

Figura 32. Disponibilidade de nitrato (NO3 g.g1) no solo da Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland (QLD) Austrlia, em duas estaes do ano (vero e inverno). As barras representamodesviopadro. 6.2.12.DiscussoLAMOModelodeusodeNemumaFlorestaSubtropicalAustraliana As anlises de ordenao aplicadas s espcies arbreas selecionadas para o estudo na rea de Floresta Subtropical Montana LAM, nas duas estaes do ano (vero e inverno), apontaram uma separao entre as classes sucessionais, mostrando haver maiores diferenas entre as estratgias utilizadas pelas plantas das espcies da classe Pi e as demais classes (Si e St), que entre estas ltimas no que se refere a aquisio, assimilao,transporteearmazenamentodoNdisponvelnoambiente. De acordo com o grau de influncia das variveis sobre a componente, foi possvel observar que nas espcies Pi estudadas em LAM a importncia da ANR potencial tambm evidente, bem como da %N foliar, 93

15N e o contedo de NO3 sendo transportado na seiva do xilema. A alta atividade de nitrato redutase para espcies pioneiras j foi observada em diversos estudos j citados anteriormente (Stewart et al. 1988, 1990, 1992, Aidar et al. 2003, PereiraSilva 2008, Campos 2009, Silva 2012) bem como nas plantas da rea de floresta SV deste estudo, sugerindo maior disponibilidade desse on no solo sob as plantas dessa classe sucessional(Stewartetal.1988),econfirmandoquenosestgiosiniciaisdasucessoflorestalosonsNO3so as formas de N disponvel para as plantas, tambm de acordo com o encontrado para outras florestas Australianas, por Stewart et al. (1988, 1990), e por Aidar et al. (2003), PereiraSilva (2008), Campos (2009), Silva(2012)eMarchiori(2012)emflorestasbrasileiraspertencentesaodomnioAtlntico. No outro extremo, observouse que as espcies tardias St de LAM, que representam o grupo oposto da sucesso ecolgica, quanto estratgia de uso de N investiram mais na aquisio e assimilao de outras formas de N que no NO3, possivelmente NH4+, e transportam preferencialmente arginina (Arg) na seiva do xilema, tanto no vero quanto no inverno. Do mesmo modo, esse resultado concorda com o encontrado para asplantasStdaflorestaSVnopresenteestudo,eparaespciestardiasnasucessoflorestalporStewartetal. (1988, 1990) em plantas de duas florestas Australianas, incluindo a rea de estudo LAM, e com o encontrado nos estudos com plantas de florestas no Brasil, por Aidar et al. (2003), PereiraSilva (2008), Campos (2009), Silva (2012) e Marchiori (2012), sugerindo o uso de uma estratgia ecolgica mais conservativa em relao s espciesPi. Quanto s espcies secundrias iniciais Si de LAM, estas se mostraram similares no comportamento s espciesSt,esecaracterizaramprincipalmentepelotransportedeArgeAspnaseivadoxilema. De modo geral, as tendncias mostradas pelas espcies de LAM referentes s estratgias no uso de N observadas nas diferentes classes sucessionais acompanham as j observadas em SV, e assim, confirmam o modelo sugerido por Aidar et al. (2003) que prope a existncia de um contnuo de estratgias de uso de N entre as plantas de uma Floresta Ombrfila Densa Submontana ao sul do estado de So Paulo. E desse modo, o presente estudo em rea de floresta na Austrlia, amplia ainda mais a abrangncia desse modelo de uso de N, incluindo as plantas dessa Floresta Subtropical Montana e adicionando ao modelo uma abrangncia Intercontinental. NoestudodeStewartetal.(1990),realizadoemoitocomunidadesdeflorestanaAustrlia,algumasdelas prximas a rea do presente estudo, foi observado o mesmo contnuo de estratgias em relao atividade da enzima nitrato redutase, que foram pelos autores relacionadas diretamente AFE, contedo de gua, quantidade de N foliar total e contedo de clorofila. Similarmente a esses resultados, as variaes na AFE das espcies de LAM, tambm revelaram diferenas significativas entre as classes sucessionais Si e St, de modo 94

que essa varivel mostrouse diminuir conforme a sucesso avana. Os autores assumem que conforme o potencial fotossinttico aumenta (como sugerido pelo aumento no contedo de clorofila observado), h paralelamente um aumento tanto na AFE quanto na %N foliar, e com estes tambm aumenta a ANR. Isso j havia sido demonstrado em diversas outras comunidades de plantas tanto de clima tropical quanto mediterrneo (Fieldet al. 1983, Medina 1986, Mooney et al.1978, Field & Mooney 1986). Em recente estudo com mutantes de Arabidopsis, foi demonstrado que a distribuio do NO3 nas folhas influencia da expanso destas,equeessadistribuioreguladaporumgenelocalizadonopecolofoliar(Wangetal.2012). NasespciesPideLAM,apesardeseobservarumatendnciageralamaioresmdiasdeAFE,estasnose mostraram significativamente diferente das demais classes, porm sua mdia geral, no vero e no inverno respectivamente, (126,61 cm2.g1, 118,74 cm2.g1) est mais prxima das espcies Si (101,47 cm2.g1, 105,46 cm2.g1)quedasSt(64,53cm2.g1,87,68cm2.g1). Da mesma forma que aconteceucom as plantas em SV, a maioria das plantas de LAM apresentou valores deANRdebaixaamdia,considerandoovalorde200pkat.g1MFcomosendoatividademdiadeassimilao de NO3 foliar, como proposto por Stewart et al. (1992). O que tambm similar ao encontrado por Pereira Silva(2008),querelacionaessabaixaatividadecomascaractersticasoligotrficasdosolo,comoaescassezde NO3 e de NH4+, elevada acidez, pouca reatividade na matria orgnica e baixas atividades orgnicas e biolgicas, que indisponibilizam os nutrientes. E no caso dos solos de LAM, tambm se encontrou baixa concentraodessesons,menoresaindaqueasencontradasemSV. Stewart et al. (1998) em estudo em outra regio da floresta de LAM a 300m de altitude, encontrou atividades de NR ainda menores que as mostradas por este estudo, segundo os autores, 90% das espcies tiveramANRmenorque100pkat.g1MFeem55%delasissofoimenorque25pkat.g1MF.Asnicasespcies que ultrapassaram esses valores foram as pioneiras, que tiveram 80% delas ultrapassando os 250 pkat.g1 MF ealgumas,comoSolanumspp.eTremaaspera,alcanandoos2000pkat.g1MF. J as espcies tardias na sucesso do presente estudo foram caracterizadas pelas menores ANR (< 100 pkat.g1 MF) em ambas as estaes avaliadas, resultados tambm semelhantes aos encontrados em SV, e no geral menores que o encontrado em outros estudos: Stewart et al. (1988, 1990, 1992, 1993), Schmidt et al. (1998),Aidaretal.(2003),PereiraSilva(2008),Campos(2009),Silva(2012)eMarchiori(2012). Acompanhando o comportamento das espcies estudadas em SV, as plantas em LAM tambm evidenciarammaioresANRnaclassedaspioneiras,pormnogeralessaatividadefoimaiorqueasdasplantas de SV. A maior atividade no vero nas plantas Pi foi mantida, porm em menor escala de diferena. Assim, sugerese que para esta classe sucessional, a ANR diminuiu no inverno devido queda da temperatura e 95

diminuio das chuvas, e se manteve alta no vero juntamente com o aumento do comprimento do dia e maiorintensidadeluminosa(Stewartetal.1990). Em particular a espcie Pi Polyscias elegans obteve ANR ainda maior que a apresentada pela mesma espcie no estudo de Stewart et al. (1988), enquanto que Trema aspera e Solanum aviculare mostraram menores atividades no presente estudo. A primeira espcie citada aqui, porm, quando observada individualmente teve maior ANR no inverno que no vero (ver ANEXO 2), comportamento este similar ao encontradoparaespciessecundriasdeSV. Em LAM, as plantas parecem ser menos afetadas pela sazonalidade no que se refere ao uso de N, pois a nica varivel que apresentou diferenas significativas entre as estaes do ano para todas as classes sucessionais estudadas foi a %NO3 na seiva do xilema, que foi menor no vero, revelando que as plantas de LAM transportam mais NO3 na estao mais seca, o inverno, em adio ao que ocorre com ANR que se mostrou maior na estao seca na maioria das espcies, apesar desse resultado no ser significativamente diferentequandoconsideradoemtermosmdiosentreosgrupossucessionais. Deacordocomadiscussofeitaanteriormentediantedesseresultadoentreasespciesdareadeestudo SV, sugerese que este aumento da ANR no inverno est mais relacionado aclimatao ao frio que competio por recursos, ou mesmo demanda nutricional, e no caso das espcies de LAM, isso foi acompanhado de um aumento no transporte de NO3 na seiva. Assim, a ANR nessa poca do ano estaria mais comprometida com a produo de NO em resposta da planta ao estresse causado por baixas temperaturas, como sugerido por Cantrel et al. (2011), que no caso de LAM parece ter sido acompanhada da retranslocao doNO3comomolculasinalizadora. O on NO3 conhecido por funcionar como molcula sinalizadora que regula a expresso gnica, arquitetura das razes, expenso foliar, dormncia das sementes e florao (Krouk et al. 2010). Uma vez dentro da planta, o NO3 pode ser estocado nos vacolos ou assimilado em amnio para sntese de aminocidos, e a translocao deste das razes para os galhos tem como primeiro passo a entrada nos vasos doxilema,eestudosdemonstramqueesteinfluxomaiorquantomaiscidoopHdasoluoexternaeque existeumainterdependnciadessemovimentocomasconcentraesdeP(Wangetal.2012). A aparentemente menor influncia da sazonalidade quanto ao uso de N pelas plantas dessa floresta em LAM pode ser devido a sua localizao em menor latitude que a floresta SV, de modo que apesar de possurem uma mesma altitude, o fato de LAM estar mais abaixo dos trpicos que SV, sugere maior aclimatao ao ambiente pelas espcies dessa floresta australiana, que esto aparentemente mais adaptadas sazonalidade existente. Marcadamente tambm se pode observar nos dados de clima das duas florestas, 96

apresentados no tem Material e Mtodos, que existe menor variao tanto no regime de chuvas quanto nas temperaturas da floresta australiana no ano avaliado, ao contrrio do que ocorreu em SV, que revelou um invernomuitomaisfrioqueodeLAMnoanodecoleta. Nesse sentido, o uso de N pelas plantas da floresta de LAM confirma as evidncias j encontradas nas plantas de SV, com espcies tardias reciclando mais o N interno (como sugerido pelo transporte de Arg, de acordo com Schmidt & Stewart 1998, PereiraSilva 2008), mostrandose mais plsticas em relao ao uso desse recurso (Ashton et al. 2010) e transportando N de forma mais eficiente, e com espcies pioneiras reduzindo e transportando NO3, estando de acordo com os resultados encontrados em SV e com os estudos de Stewart et al. (1988, 1990, 1992, 1993), Schmidt et al. (1998), Aidar et al. (2003), PereiraSilva (2008), Campos(2009),Silva(2012)eMarchiori(2012). De fato, similar ao que foi encontrado nas plantas de SV, em LAM, no houve diferenas significativas entre as concentraes de NO3 nas folhas das espcies, e os valores mdios encontrados neste estudo foram baixos quando comparados aos encontrados na literatura (Schmidt et al. 1998, Aidar et al. 2003, PereiraSilva 2008, Campos 2009, Silva 2012, Marchiori 2012). Alm disso, no houve relao positiva entre ANR e NO3 foliar,mostrandonohaverdependnciadaANRcomaconcentraodosubstrato nafolha(Vogel&Dawson 1991) e sugerindo que o acmulo do NO3 foliar tem funo de reserva, estando mais relacionado a funes osmticas intracelulares do que nutricionais (Smirnoff & Stewart 1985). Em adio, a razo CN tambm foi menor nas espcies Pi, mostrando maior investimento destas em N que em C, ao contrrio do que fazem as espcies secundrias, que investem mais em estrutura para manter a maior longevidade (PereiraSilva 2008, Silva2012). Em relao ao 15N, as espcies de LAM mostraram uma queda na assinatura isotpica nas classes secundrias da sucesso, ao contrrio do proposto pelo modelo de Aidar et al. (2003), que considera que o 15N aumenta no contnuo de sucesso florestal. Quando se comparou esse resultado com o encontrado nas plantas de SV, que mostraram menores valores nas espcies da classe Pi, no foi possvel relacionar esses dados com os demais e sugeriuse novamente que essa varivel no muito importante na determinao de padresrelacionadosasestratgiasdeusodeNpelasespcies. Ainda similarmente ao encontrado para as plantas em SV, em LAM a densidade da madeira (DM) aumentou com o avano da sucesso florestal, com as espcies Pi mostrando os menores valores e as St os maiores, enquanto que as espcies Si obtiveram valores intermedirios. Assim, esses resultados confirmaram o j observado por outros estudos na literatura, de que plantas iniciais na sucesso e com ciclo de vida curto possuemmadeirasdebaixadensidade,aocontrriodasplantastolerantessombraoudeestgiosucessional 97

tardioeciclodevidalongo,quesecaracterizamportendnciasopostas,eplantasdetolernciaintermediria sombra, tendem a apresentar caractersticas tambm intermedirias entre os dois extremos (ter Steege & Hammond2001,MullerLandau2004,Chaveetal.2009,Poorteretal.2009,Ptzetal.2011). Consequentemente, a maior DM das espcies tardias na sucesso possibilita maiores alturas em suas plantas, maior vantagem competitiva por luz, mais ganho de C, maiores longevidade e tempo de reproduo (Falster & Westoby 2003, Moles et al. 2004, Petit & Hampe 2006), e concordam com os resultados encontrados em SV, sugerindo que as plantas destas espcies, juntamente com maior razo CN foliar e menores NRA e %NNO3 sendo transportado na seiva do xilema, sustentam uma estratgia mais conservativa no uso do recurso N em relao s espcies iniciais na sucesso, possibilitando s primeiras maior longevidade, e economia na utilizao de N em relao s segundas, que tm maior custo energtico no uso de N com sua estratgia menos conservativa, compensada geralmente por maiores taxas fotossintticas e menortempodereproduo. 6.3.CerradosensustrictodoParqueEstadualdeVassununga,GlebaPdegigante(PDG) 6.3.1.AnlisedeordenaoPDG A anlise de ordenao dos resultados obtidos no vero no PDG (Figura 33) teve 48,33% da varincia explicada,enomostrouumaclaradistinoentreasclassesfenolgicasdasespcies. Porm, a PCA evidencia a separao das espcies pertencentes famlia Leguminosae (Dim, Mac, Bau, Plat, And, Ana, Cop, Plathy, Dip, Dal, Hymm, Hyms) que juntamente a outras cinco espcies (Fic, Oco, Toc, Xyl e Byr) restringemse ao lado direito do eixo 1. A localizao dessas espcies na PCA pode ser mais bem explicada pelas seguintes variveis: %NAsn e %N em relao ao eixo 1, e %NAsp e NO3 folha com relao ao eixo 2. Esse grupo de espcies foi didaticamente denominado de TrASN ou spp transportadoras de asparagina. A anlise feita a posteriori pde constatar que este grupo possui em comum uma preferncia pelo transporte de Asn e Glu na seiva do xilema, alm de Arg, com esta sendo menos importante que as primeiras. Por outro lado, puderamse verificar outras duas tendncias de separao distintas: a das espcies definidas pelo uso de Arg (TrARG ou spp transportadoras de arginina), que inclui todas as espcies pertencentes famlia Myrtaceae Myrb, Myrl, Eug, Cam alm de Qua Vochysiaceae e Rou Proteaceae, que esto no quadrante de valores negativos para os eixos 1 e 2, e que contam com razo CN, %NGln e %NNO3 como variveis importantes na sua definio; e o TrGLN ou das spp transportadoras de 98

glutamina, que incluem Ann, Sch, Asp e Vir, e so melhor explicadas por ANR, %NGlu, 15N com relao ao eixo 2, e razo CN, %NGln e %NNO3 com relao ao eixo 1. Notase que estas ltimas, como verificado em anlise a posteriori, tm em comum alta ANR, maiores AFE (mdia de 18,32 cm2.g1) quando comparadas s mdias dos demais grupos (9,43 para o TrASN e 9,22 para o TrARG), menores DM e a concentrao de NO3 sendotransportadonaseivadoxilemabemmaiorquenosoutrosdoisgruposobservados. Esses padres observados para a PCA no vero so tambm vlidos para a ordenao feita com os dados do inverno (Figura 34), que teve 42,89% da varincia explicada. A diferena do vero para o inverno est na importncia das variveis na definio da localizao das espcies na ordenao. Assim, no inverno, o grupo TrASNdefinidopor%NAsne%NAspcomrelaoaoeixo 1,erazoCNemrelaoaoeixo2;o grupoTrARG definido no apenas pela %NArg, mas tambm pela %N e %NGln com relao ao eixo 1 e %N e %NGln com relao ao eixo 2; e o grupo TrGLN definido por %NGln, %NArg e %N com relao ao eixo 1, e razo CN, %NGln,%NNO3eANRcomrelaoaoeixo2.

99

Figura 33. Ordenao (PCA) das 27 espcies estudadas no PDG, e suas classes fenolgicas (D, S e P), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no vero, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar, 15N abundncia natural do istopo 15N foliar e %NXxx % do composto relativamente % total de N na seiva, onde Xxx = Arg arginina, Asn asparagina, Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela3.

100

Figura 34. Ordenao (PCA) das 27 espcies estudadas em PDG, e suas classes fenolgicas (D, S e P), baseada nos valores de 11 variveis avaliadas no inverno, sendo: %N % de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar, 15N abundncia natural do istopo 15N foliar e %NXxx % do composto relativamente % total de N na seiva, onde Xxx = Arg arginina, Asn asparagina, Aspcidoasprtico,Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnaTabela3.

101

6.3.2.Atividadedaenzimanitratoredutase(ANR) A anlise dos dados mdios de ANR para o PDG (Figura 35), realizada atravs de ANOVA de dois fatores considerando como base as classes fenolgicas, apontou diferenas significativas entre as estaes do ano (F1,116=4,791;p=0,031).Nohouvediferenasentreasclassesfenolgicasenainteraoentreosfatores.As diferenas apontadas so devido maior ANR observada no inverno para todas as fenologias avaliadas, como confirmadoportestedeTukeyaposteriori.DetalhesporespcienaTabelaA3(ANEXO3). A anlise dos dados mdios de ANR para o PDG considerando as classes encontradas a posteiori (Figura 36), realizada atravs de ANOVA de dois fatores, apontou diferenas significativas entre as estaes do ano (F1,116 = 6,407; p = 0,012), entre as classes (F1,116 = 8,734; p < 0,001) e na interao entre os fatores (F1,116 = 3,686; p = 0,028). As diferenas apontadas so devido maior ANR observada no inverno para as classes TrASNeTrARG,enoveroparaaclasseTrGLN,edevidomaiorANRobservadanaclasseTrGLN.

700 600 500 400 300 200 100 0

ANR(pkat.g MF)

vero D

inverno

vero S

inverno

vero P

inverno

Figura 35. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa QuatroSP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 102

700 600 500 400 300 200 100 0

ANR(pkat.g MF)

* *

* * inverno vero

vero

inverno

vero

inverno

TrGLN

TrASN

TrARG

Figura 36. Atividade da enzima nitrato redutase foliar (ANR pkat.g1 MF) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 6.3.3.ConcentraodeNO3nafolha(NO3folha) A anlise dos dados mdios de concentrao de NO3 na folha para o PDG baseada nas classes fenolgicas (Figura 37), evidenciou diferenas significativas entre as estas (F2,116 = 3,907; p = 0,023), mostrando que as espcies P so diferentes das espcies pertencentes s demais fenologias possuindo menores concentraes de NO3 foliar com relao estas, e entre as estaes do ano (F1,116 = 14,291; p < 0,001), apontando que no inverno a concentrao de NO3 maior que no vero. Para mais detalhes, ver valores numricos por espcie naTabelaA3(ANEXO3). J a anlise dos dados mdios de concentrao de NO3 na folha com base nas classes encontradas a posteriori (Figura 38), evidenciou diferenas significativas entre as estaes do ano (F1,116 = 13,17; p < 0,01), mostrandoqueaconcentraodeNO3nafolhafoimaiornoinvernoparatodasasclasses. 103

NO3 folha(mol.g MF)

5 4 3 2 1 0 vero D inverno vero S inverno vero P inverno * * * *

Figura 37. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semi decdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*).
NO3 folha(mol.g MF) 5 4 3 2 1 0

vero

inverno

vero

inverno

vero

inverno

TrGLN

TrASN

TrARG

Figura 38. Concentrao de NO3 foliar (NO3 folha mol.g1 MF) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 104

6.3.4.ContedodeNO3naseivadoxilema(%NNO3) A anlise de varincia das porcentagens mdias de contedo de N sob a forma de NO3 na seiva do xilema baseada nas classes fenolgicas das plantas estudadas no PDG (Figura 39) mostrou que existem diferenas significativasapenasentreasmesmas(F2,116=3,339;p=0,039).
100 %NNO3

80 60 40 20 0 vero D inverno vero S inverno vero P inverno * ** *

Figura39.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*).
100 80 60 40 20 0 vero

%NNO3

inverno

vero

inverno

vero

inverno

TrGLN

TrASN

TrARG

Figura40.ContedodeNsobaformadeNO3naseivadoxilema(NNO3%) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro.Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*). 105

O teste de Duncan realizado a posteriori identificou a separao entre D e S, sendo P igual s duas outras classes estatisticamente. As espcies S transportam mais NO3 que as D, as espcies P, por sua vez, transportamoNO3emquantidadessimilaresaambasasprimeiras,emambasasestaesdoano. Aanlisedosdadosmdiosde%NNO3naseivadoxilemaparaasclassesencontradasaposteriori(Figura 40) evidenciou diferenas significativas entre as classes (F1,116 = 17,21; p << 0,01), mostrando que a %NNO3 foimaiornaclasseC. 6.3.5.Composiodeaminocidosnaseivadoxilema Asanlisesdevarinciadasporcentagensmdiasdoscompostospresentesnaseiva,nacomparaoentre as classes fenolgicas (Figura 41), mostraram que existem diferenas significativas entre estas com relao NGln (F2,116 = 10,012; p = 0,001), com as espcies P se diferenciando das demais por transportar mais Gln, como confirmado pelo teste de Tukey a posteriori, e com relao NGlu (F2,116 = 4,001; p = 0,021), com as espcies S transportando mais Glu, D transportando menos e P sendo no diferente estatisticamente das demaisclassesfenolgicas.Diferenassignificativasentreasestaesdoanoocorreramapenascomrelao NAsp(F1,116=10,012;p=0,002),mostrandomaiortransportedesseaminocidonoveroquenoinvernoem todasasclassesfenolgicas. A % de N sob a forma de NO3 foi representada novamente na Figura 40 a ttulo de comparao com os demaiscompostosdaseiva,estandoestedetalhadoespecificamentenoitemanterior. Demodogeral,independentedaclassefenolgica,todasasespciestransportaramArgeAsnemmaiores quantidades, enquanto que os demais compostos apareceram em menores quantidades, mas se mostraram tambmpresentesnaseivadetodaselas. Considerando a anlise da composio da seiva do xilema com base na comparao entre as classes observadas a posteriori (Figura 42), foram encontradas diferenas significativas em relao NArg (F1,116 = 122,1; p << 0,01), NAsn (F1,116 = 79,81; p << 0,01), NAsp (F1,116 = 5,292; p = 0,006), NGln (F1,116 = 29,76; p << 0,01) e NNO3 (F1,116 = 17,21; p << 0,01). Apenas NAsp mostrou diferenas entre as estaes do ano (F1,116 = 13,17;p<0,01).

106

NArg vero D

NAsn

NAsp

NGln

NGlu

NNO3

outros aa

inverno

vero S inverno vero P inverno 0% 20% 40% 60% 80% 100%

Figura 41. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S=semidecdua, P = pereniflia, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg =arginina, Asn = asparagina, Asp= cido asprtico, Gln = glutamina, Glu= glutamato,NO3=nitrato,outrosaa=somadosoutros20aminocidos.

107

NArg vero

NAsn

NAsp

NGln

NGlu

NNO3

outros aa

TrGLN TrASN TrARG

inverno

vero

inverno

vero

inverno 0% 20% 40% 60% 80% 100%

Figura 42. Teor de N na forma de aminocidos e NO3 na seiva do xilema (%) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaesdoano(veroeinverno).Onde,TrASN=espciestransportadorasdeAsn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln, Nnome do composto = % do composto relativo % total de N na seiva, Arg = arginina,Asn=asparagina,Asp=cidoasprtico,Gln=glutamina,Glu=glutamato, NO3=nitrato,outrosaa=somadosoutros20aminocidos. 6.3.6.RazoCarbono/Nitrognionafolha(CN) A anlise de varincia da razo CN das plantas estudadas no PDG, na comparao entre as classes fenolgicas (Figura 43) mostrou diferenas significativas apenas entre as estaes do ano (F1,116 = 6,545; p = 0,012).OtestedeTukeyaposterioriidentificouqueosvaloresderazoCNparaoinvernoforammaioresque osencontradosnoveroparatodasasclassesfenolgicasestudadas.

108

50 40 CN 30 20 10 0 vero D inverno vero S inverno vero P inverno * * *

Figura 43. Razo carbono/nitrognio foliar (CN) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativasparap<0,05(*).
50 40 30 20 10 0 vero * * * *

CN

inverno

vero

inverno

vero

inverno

TrGLN

TrASN

TrARG

Figura 44. Razo carbono/nitrognio foliar (CN) em trs classes das 27 espcies estudadasnareadecerradodoParqueEstadualdeVassununga,GlbaPde gigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativasparap<0,05(*). As anlises estatsticas baseadas na separao entre as classes encontradas a posteriori (Figura 44), mostraram diferenas entre as estaes do ano (F1,116 = 5,893; p = 0,016), entre as classes (F1,116 = 10,5; p << 0,01) e na interao entre estes fatores (F1,116 = 3,998; p = 0,021). O teste de Tukey realizado a posteriori revelou que estas diferenas foram devidas principalmente ao maior razo CN na classe TrARG, e no inverno paraasplantasdaclasseTrASN. 109

6.3.7.Istopoestvel15Nnafolha(15N) A anlise de varincia do istopo estvel 15N na folha (15N ) nas plantas estudadas no PDG segundo a comparao entre as classes fenolgicas (Figura 45) no mostrou diferenas significativas entre estas,entreasestaesdoano,ounainteraoentreosfatoresavaliados.

4,0

N(%o)

2,0 0,0 2,0 vero D inverno vero S inverno vero P inverno

Figura 45. Abundncia natural do istopo estvel 15N foliar (15N ) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa QuatroSP,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S = semidecdua, P = pereniflia. As barras representam o desvio padro. As diferenasencontradasnoforamsignificativas.
4,0

15

N(%o)

* 2,0 0,0 2,0 vero inverno

15

vero

inverno

vero

inverno

TrGLN

TrASN
15

TrARG

Figura46.Abundncianaturaldoistopoestvel Nfoliar( N)emtrs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foramconsideradasdiferenassignificativasparap<0,05(*).
15

110

Na anlise que considera as classes encontradas a posteriori (Figura 46) revelou diferenas significativas entre as estaes do ano (F1,116 = 4,054; p = 0,046), mostrando que os valores mdios de 15N foram maiores noveroparatodasasclassesavaliadas. 6.3.8.reafoliarespecfica(AFE) A anlise de varincia da AFE (Figura 47) das plantas estudadas no PDG, na comparao entre as classes fenolgicas, no evidenciou diferenas significativas entre estas, entre as estaes do ano, ou na interao entre os fatores avaliados. Porm a anlise baseada nas classes encontradas a posteriori (Figura 48) mostrou diferenas significativas entre as classes (F1,116 = 9,372; p < 0,01), sendo os valores mdios de AFE nas plantas daclasseCmaioresqueosdaclasseA,porsuavezmaioresqueosencontradosnaclasseB.

30 25 20 15 10 5 0 vero D inverno vero S inverno vero P inverno

Figura 47. rea foliar especfica (AFE cm2.g1 MS) nas classes fenolgicas das 27 espciesestudadas na rea decerrado do Parque Estadual de Vassununga, GlbaPdegigante(PDG),SantaRitadoPassaQuatroSP,emduasestaes doano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S=semidecdua,P=pereniflia. As barras representam o desvio padro. As diferenas encontradas no foram significativas.

AFE(cm .g MS)

111

35 30 25 20 15 10 5 0 vero

AFE(cm .g MS)

inverno TrGLN

vero

inverno

vero

inverno

TrASN

TrARG

Figura 48. rea foliar especfica (AFE cm2.g1 MS) em trs classes das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, GlbaPdegigante(PDG),SantaRitadoPassaQuatroSP,emduasestaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenassignificativasparap<0,05(*). 6.3.9.Densidadedamadeira(DM) A anlise de varincia da DM (Figura 49) das plantas estudadas no PDG, na comparao entre as classes fenolgicas, evidenciou que no existem diferenas significativas entre estas, entre as estaes do ano, ou na interao entre os fatores avaliados. Porm nas anlises baseadas na comparao entre as classes encontradas a posteriori (Figura 50), houve diferenas significativas entre estas (F1,116 = 18,5; p << 0,01), devidoaosmanoresvaloresencontradosparaasplantaspretencentesclasseC.

112

1,0 DM(g.cm )
3

0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 vero D inverno vero S

3

inverno

vero P

inverno

Figura 49. Densidade da madeira (DM g.cm ) nas classes fenolgicas das 27 espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, GlbaPdegigante(PDG),SantaRitadoPassaQuatroSP,emduasestaes doano(veroeinverno).Onde,D=decdua,S=semidecdua,P=pereniflia. As barras representam o desvio padro. As diferenas encontradas no foram significativas.
1,0 0,8 0,6 0,4 0,2 0,0 vero

DM(g.cm )

inverno

vero

inverno

vero

inverno

TrGLN

TrASN

TrARG

Figura50.Densidadedamadeira(DMg.cm3)emtrsclassesdas27espcies estudadas na rea de cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba P degigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, TrASN = espcies transportadoras de Asn, TrARG = espcies transportadoras de Arg e TrGLN = espcies transportadoras de Gln. As barras representam o desvio padro. Foram consideradas diferenas significativasparap<0,05(*).

113

6.3.10.Ocorrnciadesimbioseradicularecolonizaopormicorrizas(MIC) A avaliao das 18 amostras de razes no solo do cerrado PDG nas duas estaes do ano (Tabela 6) mostrouqueaporcentagemmdiadecolonizaoradiculartotal(CRT)bemcomoacolonizaopormicorriza arbuscular (CA) foram maiores no vero do que o inverno. Foi observada a ocorrncia de simbiose radicular nasrazesencontradasemcincoamostrasdesolocoletadonoinverno.Essesndulosapresentavamcolorao alaranjadaeocortepermitiuobservarumidadeinterna,oquesugerepossvelatividadefixadoranosmesmos. Tabela 6. Colonizao radicular total (CRT %) e colonizao radicular por micorriza arbuscular (CA %) mdias, das amostras de raz em solo retirado do cerradodoParqueEstadualdeVassununga,GlbaP degigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padroentreparntesis.

CRT AC

vero 74,91(9,16) 62,67(9,12)

inverno 37,30(14,86) 27,28(11,26)

6.3.11.DisponibilidadedeNO3eNH4+nosolo As medidas de disponibilidade de NO3 e NH4+ no solo do PDG (Figura 51), estimadas atravs do uso de resinas de troca inica, mostraram grande variabilidade entre os pontos de coleta, para ambos os ons avaliados. O on amnio (NH4+) foi detectato em apenas trs pontos de coleta no vero, e em um deles apresentou concentraoaltanovalorde28,13g.g1.Amdiadostrspontosfoide2,02g.g1. QuantopresenadoonNO3nasresinasdetrocainica,estafoiverificadaemtodosospontosdecoleta novero,pormapareceuemapenastrspontosnoinverno,embaixssimaconcentraoquandocomparado ao vero. No vero, dois pontos de coleta mostraram concentrao mdia desse on maior que 10 g.g1, evidenciandoqueoNO3estpresentenosolodocerradoPDG,eemmaioresconcentraesquenasflorestas estudadas.AmdiageraldeNO3foide6,08g.g1paraoveroe0,002g.g1paraoinverno,mostrandouma tendnciaamaiorquantidadedeNO3novero. 114

30 20 Nitrato (NO3 ug.g )

1

NO3 vero NO3 inverno NH4 vero NH4 inverno

100 90 80 60 50 40 30 20 10 0 10 Amnio (NH4 ug.g ) 70

1 +

10 0 10 20 30

10

11

12

13

14

15

16

17

18

Resina

Figura 51. Disponibilidade de nitrato (NO3 e NH4+ g.g1) no solo do cerrado do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duasestaesdoano(veroeinverno).Asbarrasrepresentamodesviopadro. 6.3.12.DiscussoPDGOusodeNporplantasdeCerrado As anlises de ordenao aplicadas s espcies arbreas selecionadas para o estudo na rea de Cerrado sensu stricto do Parque Estadual de Vassununga, Glba Pdegigante (PDG), nas duas estaes do ano (vero e inverno), no apontaram uma separao clara entre as classes fenolgicas em relao s variveis alusivas ao uso de N, e juntamente com as demais anlises realizadas com estes dados, mostraram haver maiores diferenasentreasestaesdoanoqueentreasestratgiasfenolgicasdasespcies.Assim,noqueserefere aquisio, assimilao, transporte e armazenamento do N disponvel no ambiente, no existe dependncia diretadousodeNcomafenologiadasespciesdestecerrado. Porm, a PCA evidencia uma separao clara das espcies pertencentes famlia Leguminosae e outras cinco espcies (Fic, Oco, Toc, Xyl e Byr) em relao s espcies pertencentes famlia Myrtaceae, que juntamente com outras duas espcies (Qua e Rou) se agruparam por comportamento similar em relao s variveis analisadas, e que por sua vez se mostraram diferentes de um terceiro grupo que mostrou funes 115

similaresentresuasespcies(Sch,Vir,AnneAsp). Assim, de acordo com o grau de influncia das variveis sobre a componente, foi possvel observar a separaodetrsgruposdistintos,criadosaposteriori:ogrupodeespciestransportadorasdeAsn,ArgeGlu que foi nomeado didaticamente como TrASN ou spp transportadoras de asparagina que contm todas as espcies da famlia Leguminosae alm de Fic, Oco, Toc, Xyl e Byr; o grupo de espcies que transportam preferencialmente arginina que foi nomeado como TrARG ou spp transportadoras de arginina, que contm todas as espcies amostradas da famlia Myrtaceae alm de Qua e Rou; e o grupo de espcies que transportamglutamina,TrGLNouspptransportadorasdeglutamina,quecontmasdemaisespciesque seassemelhamtambmdevidoANReAFE(Sch,Vir,AnneAsp). De modo geral, considerando as nicas variveis que mostraram diferenas significativas entre as classes fenolgicas, temse que a concentrao de NO3 foliar foi menor nas plantas de hbito P, e foi maior no inverno que no vero em todas as classes. Tambm a %NNO3 transportado na seiva do xilema se mostrou diferente entre as classes, com as plantas S transportanto mais que as D e P. Porm, essa porcentagem foi muito baixa em relao aos demais compostos em todas as plantas, que tiveram marcadamente maiores quantidades de Arg e Asn sendo transportados na seiva do xilema, e isso foi maior no inverno que no vero para as classes P e D. As demais diferenas significativas que apareceram na anlise baseada nas classes fenolgicas das espcies foram entre as estaes do ano. Assim, as variveis ANR, razo CN e NO3 na folha, mostraramse maiores no inverno que no vero, e os demais parmetros avaliados (15N, AFE e DM) no mostraramdiferenassignificativasentreasclassesfenolgicas. Nardoto et al. (2006) tambm no encontraram grandes variaes nas concentraes de N foliar entre classes fenolgicas de espcies de cerrado do Brasil central, mostrando que estas diferenas esto mais relacionadas a outras caractersticas particulares, como por exemplo a famlia a que as espcies pertencem queaohbitodasmesmas. Assim como as savanas Africanas e Indianas, o cerrado brasileiro possui predominantemente espcies decduas, com marcante presena da famlia Leguminosae, coexistindo com espcies pereniflias, semi decduas e brevidecduas. A coexistncia de plantas de hbito decduo e pereniflio, entre outros, no est claramente compreendida, mas numa anlise de custobenefcio entre esses dois extremos, temse que espcies pereniflias possuem relativamente menores contedos de N em suas folhas para se aumentar a impalatabilidade a possveis predadores, j que possuem folhas de maior longevidade e os custos para a construo destas alto (Eamus 1999). Porm, os resultados do presente estudo no evidenciaram grandes diferenasentreasclassesfenolgicasnasquantidadesdeNfoliar,comoevidenciadopelarazoCN. 116

Por outro lado, as espcies decduas geralmente investem menos em estrutura foliar, pois perdem suas folhas na estao seca, e com isso sustentam menor longevidade foliar e maiores concentraes de N, que permitemporsuavez,amanutenodemaiorestaxasfotossintticas(Reichetal.1992).Similarmente,aAFE de espcies pereniflias geralmente menor que de espcies decduas (Eamus & Prichard 1998), refletindo maioresclerofiliaecustodeconstruodasprimeiras(Eamus1999). Nas plantas estudadas no PDG, houve uma tendncia a menores AFE nas espcies P, porm no significativa em relao s demais pela anlise de varincia, sugerindo que este atributo foliar no uma varivel diagnstica muito clara na busca de diferenciao entre as estratgias de uso de N pelas espcies destesgruposfuncionais. Entretanto,foramencontradasnopresenteestudomaioresconcentraesdeNO3nasfolhasdasespcies D e S, sugerindo maior investimento em reserva de N pelas plantas destas classes fenolgicas, que podem estaracumulandoesseoncomumafunoosmticaparacontribuirnoajusteosmticoduranteperodosde seca(Smirnoff&Stewart1985).AalocaodoNparareservaprogramadasazonalmenteeestdessaforma intimamente ligada fenologia (Millard & Grelet 2010), alm de ser disparada por certas mudanas ambientais, principalmente dias curtos (Coleman et al. 1991) e baixas temperaturas (van Cleve & Apel 1993). No caso do presente estudo, isso explicaria tambm as maiores ANR e NO3 foliares no inverno que no vero, sugerindo que os dias curtos e as baixas temperaturas da estao seca adicionam um estresse a mais para estas plantas alm da falta de gua, que disparam um mecanismo de alocao de N para reserva nas folhas, aumentando tambm a ANR nessa estao, que parece ser a enzima chave na resposta das plantas ao frio (Cantreletal.2011). J a maior razo CN encontrada para todas as classes fenolgicas no inverno, pode ser explicada como sendo uma estratgia de economizar nos custos da manuteno do crescimento durante a escasss de gua. Em plantas terrestres, o custo pelo uso da gua para o crescimento uma funo dos suprimentos de N e C (Ravenet al. 2004), e os mecanismos de economia no uso de N e de gua so interdependentes (Patterson et al.1997). Considerando as classes de plantas encontradas a posteriori no PDG, pdese observar que apenas as variveis NO3 folha e 15N no mostraram diferenas significativas entre os grupos TrASN, TrARG e TrGLN. O NO3 foliar foi maior no inverno para todos os grupos, como j havia sido na anlise baseada nas classes fenolgicas,eo15Nfoimaiornoveroparatodososgrupos.Todasasdemaisvariveisavaliadas(ANR,razo CN,AFE,DM,NO3foliareaa)mostraramdiferenassignificativasentreosgrupos. Analisando separadamente o grupo TrGLN, das spp transportadoras de glutamina", observouse que 117

estasespciesexibemumcomportamentobastantesimilaraodasplantaspioneirasnasucessodasflorestas, pois possuem as maiores ANR foliares; maior quantidade de N sob a forma de NO3 sendo transportado na seivadoxilema,apesardestesermenosimportantequeaarginina(Arg),glutamina(Gln)eoglutamato(Glu); maiorcontedodeNfoliar,evidenciadopelamenorrazoCN;emenoresDMs. Segundo o modelo proposto por Aidar et al. (2003), as espcies pioneiras, alm dessas caractersticas, possuemmenores15Nemrelaosdemaisclasses,transportamAsnalmdeNO3naseivadoxilema,bem como mostram maiores contedos de NO3 foliar. Verificouse que as plantas do grupo TrGLN no cerrado estudado apresentaram algumas diferenas de estratgia em comparao s plantas pioneiras relativas a estesparmetros.Assim,estasplantasexibemotransportedeAsnnaseivacomoaspioneirasdafloresta,mas com menor importncia que Gln e Arg, sugerindo maior eficincia no transporte de N, pois a Arg contm quatro tomos de N, em contraste Asn e Gln que contm dois em sua composio, e com isso se assemelhando neste aspecto s plantas secundrias iniciais pelo modelo proposto por Aidar et al. (2003). Porm,emrelaoao15N,asespciesdestegruponosemostraramdiferentesdosdemaiscomonomodelo propostoparaasplantasdefloresta. Considerando o NO3 foliar, as plantas do grupo TrGLN no exibiram diferenas significativas aos demais grupos e no houve relao positiva entre este e a ANR, o que similar ao encontrado nos resultados dos estudos nas reas de floresta do presente trabalho, mostrando novamente no haver dependncia da ANR com a concentrao do substrato na folha (Vogel & Dawson 1991) e sugerindo que o acmulo do NO3 foliar nestas plantas tem funo de reserva, estando mais relacionado a funes osmticas intracelulares do que nutricionais(Smirnoff&Stewart1985). No outro extremo, observouse que as espcies do grupo TrARG, ou spp transportadoras de arginina, marcadamente pertencentes famlia Myrtaceae, exibem comportamento similar ao das espcies tardias na sucesso florestal, se caracterizando por transportar principalmente Arg na seiva do xilema (composto bastante eficiente no transporte de N); tm menor quantidade de N foliar e consequente maior razo CN; menor ANR foliar; e maior DM. Desse modo, sugerem uso de uma estratgia ecolgica mais conservativa em relaoaosdemaisgrupos.EstasespciespossuemtambmmenorAFE,mostrandomaiorinvestimentoemC queemN,devendoterprovavelmentemaiorlongevidadefoliar(Stewartetal.1990). Quanto s espcies do grupo TrASN, ou spp transportadoras de Asn, marcadamente pertencentes famlia Leguminosae, o comportamento varivel em relao aos dois extremos (grupos TrARG e TrGLN). Assemelhamse mais ao grupo TrARG por transportar muito pouco NO3 na seiva do xilema, e pela maior DM, mas possuem valores de N foliar e de razo CN similares ao grupo TrGLN. A ANR e a AFE mostraram valores 118

mdiosintermediriosentreosencontradosparaestesdoisgrupos. As espcies da famlia Leguminosae, segundo o modelo proposto por Aidar et al. (2003), se encaixam na classe das espcies secundrias iniciais da sucesso florestal, mas com algumas peculiaridades. Dentre estas, osautoresapontamotransportedeAsncomoprincipalcompostonaseivadoxilemadestasplantasevalores intermedirios de ANR e N foliar com relao s outras classes sucessionais, o que semelhante ao encontrado nas espcies do TrASN no PDG. Muitas destas espcies so caracterizadas por estilo de vida rico em N, que as impe certa vantagemcompetitivae alguns custos a mais,que so compensados em ambientes de alta luminosidade e temperatura, solos relativamente ricos em nutrientes e com alta disponibilidade de gua(McKey1994). Segundo Lea et al. (2007), a Asn o principal composto utilizado para o transporte de N em plantas, principalmenteemespciespertencentesfamliadasLeguminosae,esuaformaoemobilizaopodemser induzidas em situaes de estresse, quando age na manuteno da presso osmtica, sendo ento consideradaumaeficientemolculaparareservaetransportedeNemorganismosvivos.Almdisso,Asntem se mostrado importante no metabolismo da senescncia foliar, e isso combina com o hbito decduo da maioriadasplantasLeguminosasdesseestudopretencentestodasaogrupoTrASN. ArgeGlupodemagirdamesmaformaqueAsncomoeficientescompostosparareservaetransportedeN (Lea et al. 2007), e assim, essas spp transportadoras de asparagina ou TrASN, se mostram bastante eficientesnousodeN,tantoemrelaoaoscompostosutilizadosnotransporte,comonacombinaodealta DM que permite maior eficincia no transporte e uso da gua, com o alto contedo de N foliar, que possibilitamaltastaxasfotossintticasecomissomaiorganhodecarbono(Smirnoff&Stewart1985). AocompararosresultadosencontradosnoPDGcomoutrostrabalhosdaliteratura,observousequeaAFE das plantas do PDG foram no geral menores que as encontradas por Hoffman et al. (2005) e Hoffmann & Franco(2003)emespciesdocerradodaregiocentraldoBrasil,quemostrarammenoresAFEemplantasdo cerrado brasileiro quando comparadas a outras savanas do mundo e tambm encontraram menores contedos de N nessas folhas (mdia de 1,48%) quando se compara ao presente estudo (mdia de 2%). O estudo de Schmidt et al. (1998) em savana Australiana, tambm encontrou menor porcentagem de N foliar em suas plantas (mdia de 1,3%). Estes ltimos autores mostraram tambm uma baixa concentrao de NO3 foliarnasplantasdascomunidadesdesavana,comonopresenteestudo. Altos valores de N foliar em espcies Leguminosas foram tambm encontrados por Nardoto et al. (2006), que em estudo no cerrado na regio central do Brasil observaram os menores valores de N na espcies Roupala montana, que neste estudo foi includa no grupo TrARG, das espcies que mostraram os menores 119

contedosdeNfoliarsimilarmente. EmrelaoANR,osvaloresencontradosnasplantasdoPDGforamsimilaresaosencontradosnasoutras reasdeestudo,comamaioriadasespciesmostrandovaloresdemdioabaixoconsiderandoovalorde200 pkat.g1 MF como sendo atividade mdia de assimilao de NO3 foliar, como proposto por Stewart et al. (1992).Podendoissoestartambmquerelacionadoacaractersticasoligotrficasdosolo,comoaescassezde NO3 e de NH4+, elevada acidez (PereiraSilva 2008), sendo esta ltima uma caracterstica bastante conhecida dos solos de cerrado (Nardoto et al. 2006). As maiores ANR caracterizaram as espcies do grupo TrGLN, que similarmente a espcies pioneiras de florestas ultrapassam o valor de 200 pkat.g1 MF, como nos estudos de Stewartetal.(1988,1990,1992,1993),Schmidtetal.(1998),Aidaretal.(2003),PereiraSilva(2008),Campos (2009),Silva(2012)eMarchiori(2012). De modo geral, as tendncias mostradas pelas espcies do PDG referentes s estratgias no uso de N observadas nos diferentes grupos encontrados a posteriori (TrASN, TrARG e TrGLN) acompanham as j observadas em SV, LAM e no modelo proposto por Aidar et al. (2003) para plantas de floresta e assim, confirmam que essse modelo tambm funciona para plantas de cerrado, com algumas peculiaridades e em grupos funcionais diferentes. Existe um contnuo de estratgias de uso de N entre as plantas, mas estas coexistemenosesucedemcronologicamentecomoacontecenasflorestas.Edessemodo,opresenteestudo em rea de cerrado, amplia ainda mais a abrangncia desse modelo de uso de N e adicionando uma nova perspectivaemrelaoaocerrado,evidenciandoassimilaridadesdesseambientecomasflorestas.

120

6.4.Anlisegeralcomparandoasreasestudadas A anlise de ordenao dos resultados obtidos no vero para todas as reas estudadas (Figura 52) teve 36,65% da varincia explicada, e caracterizou um gradiente de respostas entre elas quanto ao uso de N, com umaaproximaomaiorentreasespciesdeLAMePDGdoquedestascomSV.ObservasequeasespciesPi de LAM so as que mais se aproximam das espcies SV, enquanto que as espcies Si e St de LAM esto mais prximassdoPDG. As variveis que melhor explicam essa proximidade entre LAM e PDG foram %NAsn em relao ao eixo 2, razo CN e %NArg em relao ao eixo 1. As demais variveis mostraramse importantes na definio das espciesdeSV,comdestaquepara%N,15N,%NAsp,ANR,%NNO3eNO3folhaemrelaoaoeixo1e%NAsn e%NGlnemrelaoaoeixo2. Na anlise de ordenao feita com os dados do inverno (Figura 53), que teve 38,71% da varincia explicada, verificouse uma distino muito mais clara quanto distribuio espacial das espcies das diferentes reas estudadas em relao aos parmetros avaliados. Existe uma separao entre as reas, caracterizada por um gradiente entre elas em relao ao eixo 1, onde as espcies de SV localizamse espacialmente entre LAM e PDG, que estoem lados opostos desse gradiente. Nessa PCA, PDG e SV possuem maiorproximidadeentresuasespcieseLAMaparecemaisisolado. AsvariveisquemelhordescrevemasespciesdeLAMso principalmenterazoCNe%NNO3 emrelao aoeixo1,e%NAspemrelaoaoeixo2.AsespciesdoPDG,poroutrolado,somaisbemdescritasporNO3 folha,%N,%NAsneANRemrelaoaoeixo1,e%NAsne%Nemrelaoaoeixo2.Adimensodosatributos que melhor definem as espcies de SV so relativas ao eixo 2, e dentre eles se destacam %NGlu, %NAsp, %NGlne%N.

121

Figura52.Ordenao(PCA)dasespciesdastrsreasestudadas(SV,LAMePDG),baseadanosvaloresde11variveisavaliadasnovero,sendo:%N%deN foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar, 15N abundncia naturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico, Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnasTabelas1,2e3.

122


Figura53.Ordenao(PCA)dasespciesdastrsreasestudadas(SV,LAMe PDG),baseadanosvaloresde11variveisavaliadasnoinverno,sendo:%N %de N foliar total, CN razo carbono/nitrognio foliar, ANR atividade da enzima nitrato redutase, NO3 folha concentrao de nitrato foliar, 15N abundncia naturaldoistopo15Nfoliare%NXxx%docompostorelativamente%totaldeNnaseiva,ondeXxx=Argarginina,Asnasparagina,Aspcidoasprtico, Glnglutamina,Gluglutamato,NO3nitrato.OscdigosdasespciesestorepresentadosnasTabelas1,2e3.

123

Tabela 7. Valores mdios de ANR (pkat.g1 MF), NO3 folha (mol.g1 MF), razo CN e 15N (), das espcies nas reas estudadas (SV, LAM e PDG), em duas estaesdoano(veroeinverno).Desviopadroentreparntesis.

ANR

vero

SV 85,21 (97,08)

LAM 96,44 (191,85) 89,09 (149,32) 0,02(0,07) 0,12(0,52) 28,77(11,72) 27,75 (9,35) 2,19(2,31) 2,33(2,76)

PDG 94,94(124,09) 146,48 (118,36) 2,08 (1,45) 2,72 (1,50) 24,55(8,22) 28,31(7,45) 0,93 (1,19) 0,39 (1,18)

Inverno 102,17 (125,64) NO3 folha vero inverno vero inverno 15N

1,77 (0,92) 1,75 (0,85) 20,00(7,29) 20,09(7,70) 2,40 (2,01) 2,28 (1,92)

CN

vero inverno

Em termos gerais, quando se compara os valores mdios encontrados para as diferentes reas estudadas, pouca diferena entre elas existe quanto ANR (Tabela 7), devido principalmente ao alto desvio padro. Porm, observaes dos valores obtidos para as espcies ou mesmo famlias individualmente, mostram uma tendncia geral de maior atividade no inverno para as reas de floresta. Isso foi bastante varivel no cerrado (verAnexos). Ainda na Tabela 7 notamse maiores valores mdios de NO3 folha no cerrado, seguido de SV e LAM respectivamente, em ordem decrescente. Quanto razo CN, parece no haver notveis diferenas entre as reas no vero, porm no inverno, o valor mdio no PDG muito menor que nas demais reas estudadas, mostrando que nesta rea, as espcies alteram consideravelmente o investimento em N de acordo com a estaodoano,demodoquenoinvernoaquantidadedeNnasfolhasmuitomaiorquenovero,alterando assimarazoCN. Outra varivel que mostrou diferena quando avaliada de um modo geral na comparao entre as reas foio15N,queseapresentoumaisprximodezeronocerradoquenasflorestas,sugerindopossvelfixaode N pelas razes das plantas em associao simbitica com bactrias fixadoras de N (Hoffmann et al. 2005, Schimannetal.2007). 124

 Tabela 8. Valores mdios de AFE (cm2.g1 MS) e DM (g.cm3) das espcies nas reas estudadas (SV, LAM e PDG), em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padro entreparntesis.

AFE DM

SV 138,68(49,32) 0,52(0,14)

LAM 93,63(39,90) 0,61(0,10)

PDG 14,28(8,68) 0,59(0,13)

Com relao aos parmetros AFE e DM, na comparao das mdias gerais entre as reas (Tabela 8), verificouse que a AFE maior em SV, seguida de LAM e PDG respectivamente, em ordem decrescente, sugerindooinvestimentodemaismassaporreadefolhanasplantasdocerradoquenasdefloresta,eentre estas,maioremLAMqueemSV.JDMparecenosediferenciarentreasreasdemodogeral. Tabela 9. Valores mdios de CRT (%) e CA (%) das amostras de raz em solo retirado das reas estudadas (SV, LAM e PDG), em duas estaes do ano (vero e inverno). Desvio padroentreparntesis.

CRT SV LAM PDG

CA vero 22,65(12,16) 22,28(12,37) 62,67(9,12) inverno 39,78(17,09) 24,21(13,66) 27,28(11,26)

vero 29,97(14,68) 61,69(22,53) 74,91(9,16)

inverno 60,76(16,68) 60,12(20,38) 37,30(14,86)

Considerando a porcentagem de colonizao das razes por micorrizas (Tabela 9), tanto total (CRT) como arbuscular(CA),observousequeestasforammaioresnoinvernoparaSV,noveroparaPDGenomudaram entreasestaesavaliadasparaLAM. 6.5.Discussogeralanlisesdesolo Ao contrrio do encontrado pelo estudo de PereiraSilva (2008), a concentrao dos ons NO3 e NH4+ no solo de SV foi levemente maior no inverno que no vero, sugerindo um provvel efeito das baixas temperaturas caractersticas dessa estao, que reduzem a decomposio do material orgnico e podem ter contribudoparamudanasnacompetiopelorecursoNentreasplantasdasdiferentesclassessucessionais. 125

Essacompetiopodetercontribudoparaamaiorocorrnciademicorrizaarbuscularnoinverno,queem solosmaissecostendeaterpapelmaissignificativonaaquisiodeNqueemsolosmidos(Raven&Andrews 2010). Alm disso, segundo Raven (2003), a nitrificao pode ocorrer nos episdios de seca quando os solos sobemaerados,tornandooNO3disponvelparaasplantas,enquantoquenosepisdiosdeumidadeparece haverumaquedananitrificaoeentoapenasformasreduzidasdeNcombinadoficamdisponveis(Raven& Andrews2010). Porm, ao refletir sobre o possvel efeito da sazonalidade nessa regio de floresta, que marcada por baixas temperaturas no inverno, supsse inicialmente que essa queda na temperatura tornaria o N indisponvel para as plantas nesse perodo por reduzir a decomposio da serapilheira e devido menor quantidade de gua no solo necessria na mineralizao e mobilidade dos nutrientes para as razes. Porm, foramencontradosvaloresdedisponibilidadedeNH4+eNO3nosolomuitosemelhantesentreasestaesdo ano avaliadas, com tendncia a serem levemente maioresno inverno, e comparando esses resultados com os encontrados por Marchiori (2012) na mesma rea de estudo, confirmamos a influncia da sazonalidade como promotoradavariabilidadenadisponibilidadedeNnosolojsugeridaporFayers&Trewin(2004)eChanning &Edwards(2009),poisasmudanasnoregimedechuvasetemperaturamesmodentrodamesmaestaodo anolevaclaramentevariaesnadisponibilidadedosnutrientesnosolo. PereiraSilva (2008), em estudo em duas florestas Atlnticas no estado de So Paulo, tambm observou uma baixa concentrao de N nos solos na forma inorgnica, e o predomnio do on NH4+ sobre o NO3, principalmente no perodo seco. O autor atribuiu este predomnio de NH4+ ao fato do NO3 ser facilmente assimiladopelasplantasedesuaaltaconcentraonosoloserdificilmentemantida,nospelassubstanciais perdas por lixiviao, como tambm pela competio entre os organismos e por denitrificao. Segundo o autor, os eventos de precipitao local, principalmente no perodo mido, proporcionam a formao de lenis freticos suspensos, infiltrao e conduo de gua, que podem causar rpida saturao do solo e consequente lixiviao do NO3. Essa baixa concentrao tambm pode ser atribuda constante disponibilidade de gua no solo da regio quando a mobilidade do NO3 e sua absoro pelas plantas so facilitadas, pois apesar do NO3 ser a fonte de suprimento de N mais comum aos organismos, a carga lquida negativadesuperfciedoscolidesdosolofazcomquepartedoNO3noseligueaestamatrizeacabesendo lixiviadarapidamentepelapercolaodagua(PiresOBrien&OBrien1995). SabesequeaconcentraodoNO3nosdiferentesambientespodeapresentaramplasvariaesespaciais e sazonais e ser afetada por fatores biticos e abiticos que muitas vezes resultam na rpida diminuio de seu contedo no solo (Crawford & Glass 1998). Uma acidez elevada tambm pode diminuir a mineralizao 126

pordificultaraatividademicrobiananosolo(Malavolta&Kliemann1985),ealteraracompetiopeloNentre plantas e microorganismos (Hodge et al. 2000, Ivans et al. 2003). Em ecossistemas onde o N disponibilizado em pulsos concomitantes aos eventos de precipitao, a resposta da comunidade microbiana do solo entrada de gua no sistema imediata (Austin et al. 2004), e promove alteraes na composio e na biomassadessesmicroorganismos(Saetre&Stark2004),bemcomoemsuasatividades. O trabalho de Martins (2010), em estudo avaliando gradiente altitudinal incluindo SV, caracterizou o solo da rea como sendo bastante intemperizado, com pr dominncia de xidos, alto teor de P em relao s outras altitudes avaliadas, consequencia direta do maior acmulo de material orgnico na superfcie, apesar de a literatura colocar que os solos de florestas tropicais so geralmente deficientes em P. O pH menor que 4 revelou ser este um solo bastante acidificado. Porm, ainda um solo mais rico que o encontrado em altitudesmaisbaixasnessemesmoestudo,apesardabaixafertilidadeeelevadosnveisdeAl,poisosnveisde NeCsemostrarammuitomaiores,bemcomoasomadebases. O trabalho de Marrs et al. (1988, apud Vitousek 1988) j reportava uma queda na mineralizao e nitrificao em locais mais altos de um gradiente altitudinal de florestas na Costa Rica, e do mesmo modo, h uma diminuio da ciclagem de N orgnico, acmulo de matria orgnica e queda na sua qualidade e decomposionessasreas. A capacidade de subsistir em solos cidos com alta diluio de nutrientes e alta saturao por Al fator determinante na Mata Atlntica, e caracteriza muitos solos da regio. Nesses ambientes atuam mecanismos diferenciados de economia de nutrientes entre as espcies, um considervel efeito da constante decomposio e deposio de detritos orgnicos sobre o solo, da respirao de razes e dos microorganismos dosolo,almdacapacidadederealizarassociaessimbiticas,principalmentemicorrizas(Martins2010). AbaixadisponibilidadedeformasdeNinorgnicoinfluencianadiversidadedecomunidadesvegetais(Dias etal.2006)enaFlorestaOmbrfilaDensa,aaltadiversidadedeespciesarbreas(Jolyetal.1991)poderser, emparte,atribudalimitaodoNparaasplantas,sobretudoaformainicadoNO3nosolo. UmaparcelasignificativadasexignciasdeNdaplantafornecidapelamineralizaodamatriaorgnica do solo durante a estao de crescimento (Follet 2001), e o fato de na rea de estudo SV existir um acmulo de material orgnico pouco mineralizado no solo, reforado pelas baixas temperaturas no inverno e elevada acidez, que diminuem ainda mais a atividade microbiana que torna os ons disponveis para as plantas, fica compreensvel o porqu das baixas concentraes dos ons encontradas para estes solos, bem como o aumento substancial da ocorrncia de micorrizas arbusculares e da colonizao radicular total nas razes das plantas de SV do vero para o inverno. As micorrizas nessa rea ampliam a possibilidade de aquisio de 127

nutrientes na estao menos favorvel, e assim, ajudam na manuteno do crescimento diante da escassez daquelesnoambiente(Aidaretal.2003). NocasoespecficodopresenteestudoemLAM,observousetambmumabaixaconcentraodessesons no solo, como demonstrado pelos resultados de resina de troca inica, que evidenciaram concentraes de NH4+quasenulasedeNO3emgeralmenoresque30g.g1.Almdisso,anlisesrealizadasnosolodareade estudo mostraram uma elevada acidez (dados no mostrados), que contribui para uma baixa atividade biolgica agindo na decomposio do material acumulado como tambm acontece na rea SV e em outras florestas montanas (Martins 2010, Rosado 2011, Vieira et al. 2011). Porm a quantidade de micorriza encontradanoverofoisimilaradoinverno,diferentedoqueaconteceuemSV. Apesar de areduo deNO3 pelas plantas poder estar diretamenterelacionada com sua concentrao no solo (PereiraSilva 2008), no se verificou maior concentrao desse on no solo no vero, quando era esperado acontecer devido maior quantidade de chuvas. Entretanto, da mesma forma como aconteceu na rea SV, em LAM houve falta de chuvas no vero na semana da coleta e atrapalhou a caracterizao da disponibilidade de N no solo. Sugerese que pode estar ocorrendo pulsos de disponibilidade desses ons no solo concomitantes com os eventos de chuva como demonstrado por PereiraSilva (2008) em duas florestas brasileiras,eassim,acoletarealizadasobfaltadechuvanodetectouopossvelpulsoinicoacontecendono solo. Alm disso, sabese que as concentraes do NO3 no solo podem flutuar em mais de quatro ordens de magnitude(Wangetal.2012). Outros estudos j haviam demonstrado que os fluxos de nutrientes em florestas tropicais ocorrem geralmente em pulsos, e que estes pulsos modificam o destino dos nutrientes no ecossistema. Alm disso, a sincronia da mineralizao e da assimilao pelas plantas pode diminuir a competio entre micrbios e plantas por limitar os nutrientes do solo ao manter uma ciclagem mais fechada, considerando que essa assincronia pode acarretar perdas dos nutrientes pelo sistema. Assim, pulsos de nutrientes podem ter um papelimportantenamanutenodaprodutividadenasflorestastropicais(Lodgeetal.1994). Jnareadecerrado(PDG),nohouveveroatpicoeaschuvasaconteceramduranteasemanadecoleta das resinas de troca inica nessa estao, assim, os resultados demonstraram que as trocas acontecem mais noveroquenoinverno,quequasenoapresentouconcentraesdeonsnasresinasanalisadas,bemcomo norecebeuchuvasduranteasemanadecoletacomotpidodessaestaodoano. Entretanto, os dados mostraram maiores concentraes de NO3 que de NH4+ no solo, o que contraria o encontrado tradicionalmente na literatura em solos de cerrado (Nardoto & Bustamante 2003, Bustamante et al. 2006), e apesar de os valores de disponibiliadde de NO3 serem baixos quando comparados aos solos de 128

floresta,estesforammaioresqueosencontradosnasoutrasreasdopresenteestudo(SVeLAM). A anlise feita por Bustamante et al. (2006) sobre a ciclagem de N para savanas tropicais e temperadas, mostra que apesar da natureza transiente do NO3 nesses solos, o baixo contedo desse on nos solos de cerrado pode estar relacionado a baixas taxas de nitrificao, mesmo quando significativas quantidades de NH4+ produzido. Os autores afirmam ainda que ocorre competio entre plantas e microorganismos por NH4+equeapopulaodebactriasnitrificadorasnestessolosdeveserbaixa. De qualquer forma, mesmo essa disponibilidade de NO3 sendo baixa, isso foi maior no vero, parecendo estarassociadomaiorquantidadedechuva,tpicadestaestao,quecombinadacommaiorestemperaturas possibilita aumento na atividade biolgica do solo, maior mineralizao e nitrificao, que por sua vez aumentam a disponibilidade desse on no solo (Nardoto & Bustamante 2003, PereiraSilva 2008). E esse resultado evidencia um possvel pulso desse nutriente no solo do PDG concomitante disponibilidade de gua,antesdaassimilaopelasplantasocorrer. Apesar de a vegetao ser fortemente associada s propriedades do solo, no est claro se o solo que determina a distribuio da vegetao ou viceversa, e assim, a distribuio da vegetao pode no estar sempre em equilbrio com as propriedades do solo (Hoffmann et al. 2005) e pode ser mais limitada pelo estoque de nutrientes total do que por sua disponibilidade no solo (Haridasan 1992). Nos trpicos, onde uma grandefraodoestoquedenutrientesresidenavegetao,aconcentraodosnutrientesnosolopodeno refletiroqueacontecenavegetao(Hoffmannetal.2005),comoaconteceunesteestudo. Outroresultadodiferentedoencontradonasreasdeflorestaodaocorrnciademicorrizanossolosdo PDG, que ao contrrio do esperado foi maior no vero que no inverno, sugerindo uma possvel influncia da estrutura fsica do solo desse cerrado, que por ser mais arenoso e possuir menos argila que os solos de floresta e com isso promoverem maiores perdas de nutrientes por lixiviao, estaria exigindo das plantas o desenvolvimentodessasassociaesnapocachuvosavisandoaumentaracapacidadedestasemassimilaros recursosdisponveisnaestaomaisfavorvel,oquefazsentidotambmdiantedofatodequeasmicorrizas, como associaes de razes com fungos, no se desevolvem sem a presena de gua. Ruggiero et al. (2002) encontrouumamudananaestruturadavegetaodoPDGassociadaquantidadedeargilanosolo,assim,a quantidadedeargiladiminuinocontnuodeflorestasemidecduaparacampocerrado. A argila, como um composto coloidal do solo, est relacionada com a absoro de bases, que depende do pH do mesmo (Ellis & Mellor 1995). Assim, um aumento na porcentagem de argila no solo adiciona a este maior capacidade de reteno de gua (Ellis & Mellor 1995) que tem sido sugerida como um fator muito importante na determinao de ocorrncia de um tipo de vegetao florestal ou de savana (Ruggiero et al. 129

2002),commenosargilapredominandonestasegunda. Plantascomassociaesmicorrzicaspossuemvantagemcompetitivaemrelaosplantasquenofazem essas associaes, principalmente em ecossistemas com limitao de N onde a maioria do N ciclado no solo ocorredevidomisturadomaterialorgniconasuperfciedosolocomosmicroorganismoseanimaismortos. Nestes casos, devido ampla capacidade enzimtica dos fungos micorrzicos comparado das razes das plantas, e por causa do seu tamanho, as hifas desses fungos tm maior capacidade de penetrar os locais com matria orgnica em decomposio e competir diretamente com outros microorganismos pelos produtos dessematerialdecomposto(Jonesetal.2005). Ruggiero et al. (2002) em estudo comparando a estrutura da vegetao com o solo do PDG, encontrou altas concentraes de Al trocvel na superfcie do solo e elevada acidez, que contribui para uma baixa atividade biolgica no solo e baixa decomposio da matria orgnica, similarmente ao que acontece com os solos das florestas deste estudo. Os autores mostraram uma clara correlao negativa entre a quantidade de AleopHdosolo,ondeasolubilidadedoAleaconcentraodesuaformatrocvelsocontroladosporeste. Nessecontexto,ediantedificuldadeencontradaparaassociarosdadosdosolodopresenteestudocomos resultadosdavegetao,concluiusequeomtodoqueseutilizaderesinadetrocainicaparadeterminao da disponibilidade de N no solo mais bem aplicado quando o desenho experimental considera um tempo maiordepermannciadasresinasnosolo.Comparandoessesresultadoscomosdealgunsoutrosestudosque se utilizaram do mesmo mtodo (PereiraSilva 2008, Campos 2009, Marchiori 2012, Silva 2012), observouse que a abordagem que se utiliza de maiores quantidades de coleta e por maior tempo de permanncia da resina no solo, possibilita melhor caracterizao do perfil das formas inorgnicas de N disponvel alm de observar os pulsos dos nutrientes acontecendo, como no trabalho de PereiraSilva (2008), e desse modo, mostrousermaisdiagnsticoetermaiorgraudeconfianaquandoaplicadodessaforma. 6.6.DiscussogeralEconomiadousodeNemrvorestropicais Comparando todas as espcies das reas estudadas, foi verificado um gradiente de respostas entre elas quanto ao uso de N, com uma aproximao maior no vero entre as espcies de LAM e PDG do que destas com SV, porm as espcies Pi de LAM foram as que mais se aproximam das espcies de SV, enquanto que as espcies Si e St de LAM esto mais prximas s do PDG. No inverno, as espcies de SV localizaramse espacialmente entre as espcies de LAM e PDG, que ficaram em lados opostos desse gradiente. Assim, nessa estaoPDGeSVpossurammaiorproximidadeentresuasespcieseLAMapareceumaisisolado. 130

Esse panorama sugere um possvel efeito da sazonalidade, que explicaria a maior proximidade entre as reas PDG e SV no inverno, e um possvel efeito da idade das plantas ou maturidade da vegetao, que explicaria a maior similaridade entre PDG e LAM no vero. As pequenas diferenas encontradas entre as plantas das classes Si e St em LAM, sugerem que estas plantas esto mais prximas das caractersticas de plantastardiasnasucessoflorestal,ecomisso,essaflorestaparecesermaismaduraqueaflorestaestudada em SV. E o fato de nessa anlise as plantas pioneiras de LAM serem mais similares s espcies de todas as classesdeSVsugereconsistncianessahiptese. Porm, como no se estudou nenhum parmetro que possa nos indicar com certeza a idade das plantas avaliadasnessesambientes,eoquesetemsoapenasdadoshistricosdeexploraoounodasreas,estas consideraespodemsertidasapenascomohiptesesinteressantesaseremtestadasemfuturaspesquisas. De qualquer forma, esses resultados confirmam a existncia do contnuo proposto por OliveiraFilho (2000), que afirma que a abordagem mais correta para florestas ombrfilas do sudeste brasileiro em termos florsticos de um contnuo de distribuio de espcies, esse contnuo tambm vlido para estratgias de uso de N mesmo em plantas de ambientes diferentes. E incluindo a floresta Australiana, demonstram uma proximidade entre essas reas que pode ser melhor avaliada sob uma tica histrica e evolutiva, j que os continentes aos quais estas plantas hoje pertencem foram um dia unidos no grande continente conhecido comoGondwanna. Os campos de estudo da Ecologia e da Economia dividem mais que apenas sua terminologia, modelos econmicos tem aplicabilidade na descrio do comportamento animal e de processos ecolgicos de diversas formas e tem influenciado polticas de utilizao de recursos h algum tempo. No caso da economia em plantas, eclogos utilizamse dos conceitos econmicos principalmente na avaliao das relaes de custo benefcioeutilizaoderecursosparaocrescimento(Bloometal.1985). Nesse sentido, a economia das plantas se baseia na aquisio de recursos do ambiente (gua, carbono e nutrientes) que sero destinados ao estoque ou mobilizao para a construo de produtos (folhas, galhos, razes, etc), que contribuem na aquisio de recursos adicionais para a manuteno do crescimento, e desse modo,precisamoperardeacordocomasmudanasimpostaspeloambienteemqueesto,eassim,osucesso de uma estratgia em certas condies pode ser um desastre em outras e timas solues so normalmente efmeras,demodoqueasplantasprecisamseengajaremumplanejamentodecurtoelongoprazo(Bloomet al.1985). Nesse contexto, a moeda de troca no universo das plantas so os recursos do ambiente, essencialmente gua,carbonoenutrientes,eapesardemuitosautoresconsideraremocarbonocomoorecursodeterminante 131

no sucesso do estabelecimento de uma planta, o nitrognio tm se mostrado ser mais importante nesse desempenho(Krner2003,Millardetal.2007,Rennenbergetal.2009). Aaquisiodosrecursosporumaplantacompreendesuaabsoro,translocaoeassimilaoemformas que sero estocadas ou imediatamente utilizadas, e uma vez dentro da planta esta passa a ser uma fonte internaqueserutilizadatambmnaaquisiodorecursodafonteexterna.Essaregravalendoparatodasas plantas facilita a avaliao dos parmetros econmicos nestes seres vivos, principalmente porque a demanda pelos recursos em certa planta relativamente uniforme, a resposta de uma planta a um recurso pode ser monitorada em condies reais, a competio entre as plantas pelo recurso segue um comportamento pouco sociolgicoeaevoluodosprocessosocorredeformalenta(Bloometal.1985). Sendo assim, a teoria econmia supe que qualquer negcio visa maximizar os lucros e que apenas empresasquemantmoslucrossobrevivem,domesmomodo,aecologiaassumequeaseleonaturaltende a maximizar o desempenho de uma planta, e este funo de sua produtividade primria, que permite o crescimento,reproduoesobrevivncia(Bloometal.1985). Nas reas estudadas neste trabalho, foram selecionadas apenas espcies de alto valor de importncia, segundoadominnciaefrequnciarelativasdecadaespcieemseurespectivoecossistema.Assim,assumiu se que estas espcies apresentam sucesso nas suas estratgias de utilizao de recurso, especificamete o N nestecaso,eporissoelascoexistemnomesmoambiente. Nesse contexto, comparando as mdias gerais das espcies estudadas em todas as reas (Tabela 7), tem se que ANR apresentou valores muito semelhantes entre elas, com aumento no inverno para as reas brasileiras, sugerindo menor efeito da sazonalidade em LAM, que pode ser explicado por sua posio geogrfica que define aquela floresta como subtropical, e com isso suas plantas parecem ser mais adaptadas ao frio e com isso sofrem menor variao na ANR com o advento das baixas temperaturas como parece acontecernasoutrasreassegundooargumentodeCantreletal.(2011). O NO3 foliar maior no cerrado seguido da floresta SV, e as plantas de LAM possuem as menores concentraes, sugerindo que na rea de cerrado em resposta aos maiores perodos de seca as plantas acumulam NO3 durante os perodos de abundncia externa e o consomem quando as fontes externas so escassas (Bloom et al. 1985), e onde a sazonalidade foi menos marcante como em LAM, as plantas no acumularamtantodesseon. A razo CN tambm se mostrou semelhante entre as reas com marcada reduo no inverno para o cerrado PDG, sugerindo que as plantas desta rea, ao sofrer estresse hdrico na estao menos favorvel inibem o ganho de C em maior escala que a aquisio de N devido queda na transpirao e na atividade 132

fotossinttica, e tem um consequente aumento da razo CN pelo aumento da demanda por N para suprir a faltadeC(Hanson&Hitz1983).Aindanessadiscusso,ocustodeNnaaquisiodeCmaiorqueocustode C naaquisio de N, pois a taxa demanuteno da respirao muitomaior paraas razes que para as folhas e porque a energia requerida para assimilao pelo menos duas vezes maior por unidade de NO3 que por unidade de CO2 (Johnson 1983). Alm disso, a aquisio de C diretamente proporcional aos nveis de N foliares (Field 1983), e por isso as plantas acabam acumulando mais N, pois o perodo anual menos favorvel, sendo pela seca ou pelas baixas temperaturas, um evento no qual a maioria das plantas perenes remobiliza oestoquedenutrientesparareservavisandoutilizarnocrescimentosubsequente(Bloometal.1985). O 15N foi menor no cerrado, em acordo com outros resultados encontrados em comparao de savanas com florestas mundiais (Schmidt & Stewart 2003, Hgberg & Alexander 1995). Porm os valores individuais foram bastante variveis como aconteceu na comparao feita por Hoffmann et al. (2005) entre plantas de cerradoeflorestanoBrasil,eissosugerequeessasdiferenassomaisprovavelmentedevidoaprocessosdo ecossistema que a diferenas no nvel de espcie. Assim, como os ltimos autores afirmaram, no presente estudo tambm no houve clara distino nesse parmetro que possa indicar diferenas no uso de N entre estesgruposdeplantas. Por outro lado, considerando o argumento de que associaes com bactrias fixadoras de N por plantas acarretam menores assinaturas isotpicas de 15N (Hedin et al. 2009), isso pode ser explicado pela alta densidade de espcies da famlia Leguminosae na rea de cerrado, que possuem plantas potencialmente fixadorasdeN. Quanto a AFE (Tabela 8), as florestas mostraram maiores mdias que o cerrado, fato tambm observado por Hoffmann et al. (2005), que associaram baixas AFE a ambientes pobres em nutrientes. Menor AFE em plantasdocerradopodepermitiraumentodalongevidadefoliaredaeficincianousodenutrientes(Reichet al. 1992), significando que a durao do retorno de um investimento em tecido foliar tende a ser menor nessesambientes(Wrightetal.2004),bemcomoestarassociadacomaltairradinciaesecassazonais,tpicas desavanas(Hoffmannetal.2005). Hoffmann et al. (2005), estudando plantas de floresta e de cerrado crescendo em rea tpica de cerrado, mostrou que a AFE foi mais fortemente determinada pelo hbitat da espcie que pela sua afinidade taxonmica, e esteve relacionada diretamente quantidade de N foliar. Paralelamente, encontrouse maior porcentagem de N nas folhas de SV que de LAM, e essas porcentagens foram menores ainda no PDG, concordandocomoencontradopelosautoresacima. Em relao a DM, no houve diferenas entre as reas quando consideradas as mdias gerais, porm, 133

considerando as diferenas individuais, as plantas de LAM e PDG mostraram maiores DM que em SV, sugerindo que nos primeiros as plantas em geral possuem menores taxas de crescimento, maior sobrevivncia, ciclo de vida longo, maior resistncia a formao de embolias e estatus sucessional tardio (ter Steege & Hammond 2001, Hacke et al. 2001, MullerLandau 2004, Chave et al. 2009, Poorter et al. 2009). E isso pode estar associado mais uma vez com a idade de cada uma dessas formaes e/ou frequncia de distrbios, pois o histrico das duas reas mais antigas (LAM e PDG), diferente do que houve em SV (Dean 2002), no registra explorao de carvo, que de fato, eliminou grande parte das rvores mais antigas de grandeportenestaltima. Quanto comparao dos resultados gerais de micorriza para as reas estudadas, observaramse diferenas entre as florestas e o cerrado principalmente em respeito s estaes do ano. Nas florestas ocorre um aumento dessa ocorrncia no inverno, seja na colonizao total (como em SV) ou na colonizao por micorriza arbuscular (como em LAM e tambm em SV). J no cerrado h uma queda na colonizao na estao mais seca, podendo isso estar relacionado com as caractersticas do solo, como proposto anteriormente, ou isso pode estar associado com as quantidades de Al desses solos, como sugerido por Hoffmannetal.(2005).MascomonosetemdadosdeAldosolodasreasdeestudonaspocasdascoletas noseconseguiufazeressaassociaocomclareza. Considerando as particularidades de cada rea e partindo para um contexto econmico seguindo a analogia feita por Bloom et al. (1985), essa discusso faz mais sentido quando se considera os grupos funcionais encontrados nas diferentes reas de estudo que na comparao entre elas usando os resultados mdios gerais de todas as plantas avaliadas, que do uma viso geral do ecossistema sem aprofundar nas comunidadesemsi. Nessa perspectiva, uma anlise comparativa das comunidades voltase para os gupos funcionais encontrados nas reas estudadas, que evidenciaram estratgias econmicas semelhantes em termos de uso deN,adicionalmenteosatributosAFEeDMajudaramacomporouniversodessasformasdeeconomia. De um lado temse as espcies Pi nas florestas e as espcies do grupo TrGLN no cerrado, que maximizam seu desempenho utilizando uma estratgia econmica no uso do recurso N que se caracteriza por maiores custos compensados por altos ganhos na produtividade, que sustentam um crescimento rpido, com isso as madeiras so de baixa densidade e as folhas possuem maiores AFE. Essas espcies investem na reduo do NO3 foliar, e o fazem de acordo com a disponibilidade do recurso no ambiente, assim exibem alta ANR no vero, e este custo compensado por maior assimilao de carbono. Como o CO2 no limitante, e a assimilao deste tem menor custo com gua disponvel no ambiente, o NO3 do solo que tambm est mais 134

disponvel na poca chuvosa rapidamente assimilado e destinado ao crescimento. Essas espcies transportam NO3 e Asn na seiva do xilema nas plantas das florestas e Gln e Asn nas do cerrado, sugerindo a dependncia da entrada de novo N e grande eficincia na sua utilizao. Alm disso, suas folhas exibem maiores quantidade de N foliar, portanto menor razo CN, mostrando o menor investimento em construo da folha e confirmando a estratgia de alto custo no uso do N compensada pelos lucros em crescimento rpido. Esta estratgia econmica pode ser entendida em paralelo ao Teorema 2, como sugerido por Bloom et al. (1985),ondeumaempresabuscamaximizarseuslucrosdemodoqueonveldesadadoscustosmarginaisse iguala ao custo da receita marginal, ou seja, o custo marginal e a receita marginal so a mudana no custo ou receita, respectivamente, resultantes de uma mudana na produo. Assim, para empresas e plantas, o custo marginal normalmente diminui, alcana um mnimo e, em seguida, aumenta com o aumento do nvel de produo. Nesse sentido, como a relao entreo custo marginal e a receita mudam com o nvel da produo, umaempresadeveaumentaraproduoconformeoaumentonocustoporunidadedeprodutomenorque o aumento na receita. Por analogia, a fotossntese lquida (lucro de carbono) se iguala diferena entre fotossntese bruta (receita) e a respirao (custo). E ento para maximizar o lucro de carbono (fotossntese lquida),aplantacontinuaaproduzirfolhasnovasatqueoaumentonareceita(fotossntesebruta)seiguale aoaumentonocusto(respirao). No contexto do uso de N por estas plantas, sugerese que na tentativa de maximizar o lucro de N, as plantas continuam a reduzir NO3 foliar e mantm o aumento dessa assimilao de N externo (ANR), paralelamente a maior fotossntese, at que o aumento na receita (fotossntese bruta, N total) se iguale ao aumento no custo (respirao de razes e folhas). Essas espcies mostram maior flutuao com o ambiente e aceleram seu ciclo de vida e reproduo para aperfeioar a sobrevivncia, por isso diminuem a ANR na estao seca, quando amenor disponibilidadede guae aescasss dos nutrientes no solo aumenta os custos dessesprocessos. Por outro lado, no outro extremo, as plantas da classe St nas florestas e do grupo TrARG no cerrado, que se caracterizam pelo transporte de arginina, um marcador de reciclagem interna de N, maximizam seu desempenho utilizando uma estratgia econmica no uso do recurso N que se caracteriza por um desacoplamentodolucro(p.ex.crescimento)comadisponibilidadedesserecursonosolo(partedareceita). Em paralelo ao Teorema econmico 1, proposto por Bloom et al. (1985), uma empresa pode buscar maximizar seus lucros comprando recursos a menor preo e utilizando estes quando so mais valiosos. O custo de um recurso pode ser fixo ou varivel, dependendo da amplitude de variao nos custos durante um 135

tempo relativamente curto ou longo, de acordo com o nvel de produo. Nesse raciocnio, quando os custos so variveis, refletem o suprimento e a demanda pela empresa ou planta, onde ento um recurso escasso queimediatamentenecessrioterumaltocusto. No universo das plantas em seu ambiente natural, os recursos so geralmente bastante variveis, e assim tm custos variveis devido sua flutuao atravs das estaes do ano e at mesmo durante o dia. As plantas podem maximizar seus lucros, ou sua produtividade primria, atravs da compra a menor custo e fazendo investimento oportuno, isto , adquirindo um recurso quando este abundante, reservando ou estocandoomesmo,eoutilizandoquandoesteproverummximodeprodutividade(Bloometal.1985). Assim,estegrupodeplantasinvestenaestratgiadereciclare/oureutilizarosrecursosestocadosquando adquirir recurso novo do ambiente fica mais caro, elas optam por sustentar um crescimento mais lento e um ciclodevidamaislongo,comissoasmadeirasexibemmaiordensidadeeasfolhaspossuemmenorAFE.Essas espcies reduzem o custo no uso do recurso N investindo mais no estoque e reciclagem do N interno que na aquisio de N externo, e quando o fazem, optam pela fonte inorgncia NH4+ que exige menor custo em relao assimilao do NO3, com isso exibem baixas ANR foliar em relao ao grupo das plantas Pi e TrASN, e transportam preferencialmente arginina na seixa do xilema, que evidencia a reciclagem interna e alta eficincia no transporte de N. Alm disso, estas espcies apresentam menor concentrao de N foliar, portanto maior razo CN, mostrando maior investimento em carbono, que permitem folhas mais longevas. Essas plantas podem usar compostos de reserva para diferentes funes, o que tende a reduzir os custos diretosdareservaemsi(Bloometal.1985). ComointermediriasnessecontnuodeestratgiasnousodeN,temseasespciesdeplantasdaclasseSi das florestas e TrASN do cerrado, que se caracterizam pela utilizao de uma outra estratgia de economia, queseencaixamnosTeoremas3e4sugeridosporBloometal.(1985).OTeorema4dizqueaempresabusca maximizar seus lucros ao otimizar a alocao entre os processos que competementre si quando cada recurso limitatodososprocessosnomesmograu.Ouseja,aempresaouplantadecidequantodecadarecursoutilizar em cada processo, considerando que os recursos, ou reservas, podem substituir um ao outro em certo grau, assim, por exemplo, essas plantas podem modificar o composto de transporte de N na seiva do xilema e manterdiversasestratgiasdiferentesnaaquisiodeNexterno. DeacordocomoTeorema3,amaximizaodoslucrostendeaequalizarataxadeprodutomarginalsobre oscustosdetodososrecursos,eento,aempresacontinuacomprando/investindoemumcertorecursoato correspondente aumento na produo seja maior do que poderia ser pelo mesmo gasto de qualquer outro recurso. Em termos biolgicos, o produto marginal de um recurso a resposta da produtividade primria a 136

umamudananadisponibilidadedecarbono,nutrientesougua,eporesteteorema,umaplantadeveajustar alocao de modo que por um dado gasto na aquisio de cada recurso, alcanada a mesma taxa de crescimento,eestelimitadoigualmenteportodososrecursos(Bloometal.1985). NoparalelodessesTeoremascomocomportamentodasespciesSieasTrASN,observasequeestasno investem muito em ANR, sendo o NO3 um recurso de alto custo, elas possuem a capacidade de utilizlo mas ofazemempequenograu.ConsiderandoqueaassimilaodoNO3requeraltastaxasfotossintticas,sugere sequecomonoTeorema4,essasplantasbuscamequalizaroproduto(crescimento)comocustodosrecursos necessrios para a produo (gua, CO2 e NO3 por exemplo), e ao mesmo tempo otimiza a alocao dos recursos internos entre os processos, como no Teorema 3. Tambm exibem menor N foliar e maior razo CN, mostrando investimento em estrutura foliar que permite maior longevidade foliar, com AFE intermediria, ou seja, investe em rea e estrutura de forma mais homognea. A maior DM, similar das plantas St e TrARG, sustenta maior longevidade da planta em geral e maior eficincia no transporte de gua. E o transporte de N sob diversas formas, principalmente Asn, confirma a estratgia mais generalista dessas espcies, podendo ser eficiente com menor gasto e maior plasticidade no uso do recurso. Por isso se mantm intermedirias nesse contnuodeestratgiasdentrodaflorestaetambmnocerrado. Sendo assim, a fim de alcanar tanto uma taxa de custobenefcio similar para cada recurso (Teorema 3) quanto uma tima alocao de recursos entre os processos (Teorema 4), as plantas das espcies Si e TrASN parecem se ajustar fisiologicamente em ambos curtoprazo (aclimatandose) e longoprazo (adaptandose geneticamente) para minimizar as diferenas nas taxas decmbio atravs dos diversos habitats, o que seria o Teorema 5 proposto por Bloom et al. (1985). Onde taxa de cmbio nessa teoria econmica significa a quantidade relativa de dois recursos que podem ser adquiridos por um dado gasto de reserva, e este um parmetro chave na predio de respostas de plantas a mudanas no balano entre recursos internos e externos. Uma ltima considerao importante sobre a taxa de cmbio que os custos de gua e nutrientes na aquisiodocarbonosomaioresquenaaquisiodenutrientes,entretanto,ocustodocarbononaaquisio do carbono menor que na aquisio de nutrientes, ento a taxa de cmbio entre carbono e nutrientes (razo CN) ser maior em termos de gua e nutrientes que em termos de carbono. Assim, a variao na demanda e no suprimento relativo e o diferencial nos custos da aquisio de recursos indicam que a taxa de cmbio entre carbono e nutrientes altamente varivel, tanto sazonalmente quanto entre os diferentes ambientes(Bloometal.1985). Nessecontexto,asplantasreduzemadisparidadenosuprimentodeCeNaumentandosuacapacidadede 137

assimilar os recursos mais limitantes, e os processos que determinamessa capacidade geralmente competem entre si por reservas internas. As plantas podem ento moderar a relativa demanda por C e N atravs do uso prudente das reservas estocadas e flexibilizar os requerimentos para o crescimento, criando mudanas compensatriasnaaquisioedemandarelativasdaproduo,reduzindoataxadecmbioentreCeN. Em resumo, observouse que mesmo em diferentes ambientes, o crescimento vegetativo das plantas segue alguns padres de economia no uso do recurso N, que concorda com os teoremas econmicos que preveem como o lucro deve ser maximizado e os recursos otimamente alocados, propostos por Bloom et al. (1985)eseencaixamnomodelopropostoporAidaretal.(2003)quepreveemaexistnciadeumcontnuode estratgiasentreplantasdediferentesgruposfuncionais. Desse modo, na economia do nitrognio, as rvores: ajustam sua histria de vida para adquirir formas mais baratas de N (NH4+), estocar estes recursos internamente de forma eficiente (Arg) e utilizar os mesmos (reciclagem interna) quando as condies so favorveis para o crescimento (Plantas das classes St e TrARG), sustentando ciclo de vida longo, alta densidade da madeira, menor AFE e maior razo CN; continuam a aumentar o investimento no crescimento rpido assimilando N externo apenas at que a receita marginal desse aumento na produo se iguale aos custos, flutuando mais com as mudanas no ambiente e mantendo umaltocustonousodoN(PlantasdasclassesPieTrGLN),sustentandoassimumciclodevidamaiscurtocom menor DM, maior AFE e menor razo CN, e transportando Gln ou Asn principalmente; e ajustam a alocao dos recursos at igualar o efeito de todos os recursos na limitao ao crescimento ou se ajustam fisiologicamente mudanas na disponibilidade dos recursos para reduzir a taxa de cmbio fazendo um balano entre as reservas internas e externas numa proporo tima para o crescimento (Plantas das classes Si e TrASN), sustentando assim estratgias mais variveis entre os dois extremos anteriores, com ANR e AFE mdios, alta DM como as primeiras, baixa razo CN como as segundas e transportando Asn principalmente. Ainda, pdese concluir que os melhores indicadores dessa economia do N nas rvores so os compostos transportados na seiva do xilema, mas tambm o contedo de N, a ANR, bem como a razo CN tambm so importantesnadefiniodessasestratgias.

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7.CONSIDERAESFINAIS
1. O presente estudo confirmou a validade do modelo de uso de N proposto por Aidar et al. (2003) ao incluir as plantas da Floresta Ombrfila Densa Montana do norte do estado de So Paulo, promove ao mesmo uma amplitude Intercontinental ao inserir as plantas de uma Floresta Subtropical Montana Australiana e adicionou uma nova perspectiva em relao ao cerrado ao se aplicar s plantas de um cerrado ao norte do estado de So Paulo, que se utilizam das mesmas estratgias de uso de N propostas pelo modelo, porm em grupos funcionais diferentes que no demonstram sucesso cronolgicaclaracomoosdasplantasnasflorestas; 2. OaumentodaANRnoinvernoencontradonasespciessecundriasnasucessoflorestalenosgrupos correspondentes aestas no cerrado (TrARGe TrASN), pareceu relacionarse mais aclimatao ao frio que competio por recursos, ou mesmo demanda nutricional, demonstrando a importncia da NR narespostadaplantaaoestressecausadoporbaixastemperaturasqueenvolveremodelamentodesse metabolismo; 3. No se encontrou relao entre ANR e a concentrao de NO3 foliar, revelando umano dependncia da atividade da enzima NR e a concentrao do substrato na folha. Assim, como j sugerido por Smirnoff & Stewart (1985), o acmulo do NO3 foliar nessas plantas mostrou estar mais relacionado a funesosmticasintracelularesdoquenutricionais; 4. O15NnomostrouserumatributodegrandevalianadeterminaodasestratgiasdeusodeNpelas espciesdentrodosgruposfuncionaisavaliados; 5. EmLAMasespciesestomaisadaptadassazonalidadenoqueserefereaousodeNpelasplantas,o que se sugeriu ser devido combinao da sua localizao em menor latitude que as demais reas estudadascomaaltaaltitude,e/oumaturidadedavegetao; 6. No que se refere aquisio, assimilao, transporte e armazenamento do N disponvel no ambiente, noexistedependnciadiretadousodeNcomafenologiadasespciesdocerradoPDG,pormaAFE de espcies pereniflias geralmente menor que de espcies decduas, refletindo maior esclerofilia e 139

custo de construo das primeiras, existem maiores concentraes de NO3 nas folhas das espcies decduas e semidecduas, sugerindo maior investimento em reserva de N pelas plantas destas classes fenolgicas, que podem estar acumulando esse on com uma funo osmtica para contribuir no ajusteosmticoduranteperodosdeseca(Smirnoff&Stewart1985); 7. As plantas do cerrado possuem uma estratgia de economia nos custos da manuteno do crescimentoduranteaestaomenosfavorvel,marcadapelamaiorrazoCNnoinvernoemtodasas anlises realizadas, e isso confirmou os argumentos de que em plantas terrestres, o custo pelo uso da guaparaocrescimentoumafunodossuprimentosdeNeC(Ravenetal.2004),eosmecanismos deeconomianousodeNedeguasointerdependentes(Pattersonetal.1997); 8. Confirmouse a influncia da sazonalidade como promotora da variabilidade na disponibilidade de N no solo j sugerida por Fayers & Trewin (2004) e Channing & Edwards (2009), pois as mudanas no regime de chuvas e temperatura mesmo dentro da mesma estao do ano levam claramente a variaesnadisponibilidadedosnutrientesnosolo.E,almdisso,confirmousequenostrpicos,onde uma grande frao do estoque de nutrientes reside na vegetao, a concentrao dos nutrientes no solopodenorefletiroqueacontecenavegetao(Hoffmannetal.2005); 9. Concluiusequeomtodoqueseutilizaderesinadetrocainicaparadeterminaodadisponibilidade de N no solo mais bem aplicado quando o desenho experimental considera um tempo maior de permanncia das resinas no solo, podendo ser mais diagnstico e aumentar o grau de confiana quandoempregadodessaforma; 10. Demonstrouse que mesmo em diferentes ecossistemas, o desempenho das plantas segue alguns padres de economia no uso do recurso N, que concorda com os teoremas econmicos que preveem como o lucro deve ser maximizado e os recursos otimamente alocados, propostos por Bloom et al. (1985) e se encaixam no modelo proposto por Aidar et al. (2003) que preveem a existncia de um contnuo de estratgias entre plantas de diferentes grupos funcionais, e desse modo, em anlise da economia do nitrognio em rvores tropicais, mostrouse que coexistem rvores com estratgias diferentesmasigualmenteeconmicas,comdestaqueparatrsgruposfuncionaisaseguir: 140

11. PlantasdasclassesSteTrARGajustamsuahistriadevidaparaadquirirformasinorgnicasdeNde menor custo energtico (como o NH4+), tm menor vantagem na assimilao do NO3 nas folhas por causa da limitao da fotossntese pela luz, e por isso, podem optar por assimilar esse on nas razes permitindomaiorcontrolenaassimilaodeNeCsobousolimitadodaluz,estocandoestesrecursos internamente de forma eficiente (Arg) e utilizandoos (reciclagem interna) quando as condies so favorveisparaocrescimento,sustentandociclodevidalongo,altadensidadedamadeira(quereflete o investimento da planta em suporte mecnico e carbono, bem como a eficincia na conduo hidrulica), menor AFE, maior razo CN foliar e menores NRA e %NNO3 sendo transportado na seiva do xilema, elementos que ajudam a compor a estratgia mais conservativa no uso do recurso adotada por estas espcies, mostrando que estas plantas investem mais em estrutura (maior razo CN e DM), possibilitando maior longevidade, e economizam na utilizao de N atravs do uso de compostos mais eficientesnoarmazenamentoenotransporte,comoarginina; 12. Plantas das classes Pi e TrGLN continuam a aumentar o investimento na captao de recursos assimilando N externo (NO3), mas apenas at que a receita marginal desse aumento na produo se iguale aos custos, flutuando mais com as mudanas no ambientee mantendo um alto custo no uso do N, que compensado pelo acoplamento da assimilao do NO3 diretamente fotossntese, sustentando assim uma estratgia mais especialista, associada a um ciclo de vida mais curto e um crescimento rpido que demanda alta luminosidade, e que gera madeiras de baixa densidade. PossuemmaiorAFEindicativademenorlongevidadefoliar,menorinvestimentoemestruturaemenor eficincianousodenutrientescomaumentodotempoderetornodoinvestimentoemtecidofoliar,e menor razo CN foliar, mostrando menor capacidade de assimilar os recursos mais limitantes e confirmando sua maior especialidade. E transportam N atravs do uso de compostos menos eficientes queArg,pormtambmefetivosnessafunocomoGln,NO3eAsnprincipalmente; 13. Plantas das classes Si e TrASN ajustam a alocao dos recursos at igualar o efeito de todos os recursos na limitao ao crescimento ou se ajustam fisiologicamente mudanas na disponibilidade dosrecursosparareduzirataxadecmbiofazendoumbalanoentreasreservasinternaseexternas numa proporo tima para o crescimento, sustentando assim estratgias mais variveis entre os dois extremos anteriores, com ANR e AFE mdios, alta DM como nas primeiras, baixa razo CN como nas segundas e transportando Asn alm de diversos outros compostos tambm eficientes nessa funo 141

como Arg. Essa plasticidade no uso dos recursos encontrada nas espcies secundrias provm um importante mecanismo de partio desses recursos, particularmente naquelas que tm em geral sobreposiodepadresdeusodorecurso(Ashtonetal.2010); 14. Ainda, concluise que os melhores indicadores dessa economia do N nas rvores tropicais so os compostos transportados na seiva do xilema, mas tambm o contedo de N, a ANR, razo CN, bem comoaAFEeDMsoimportantesnadefiniodessasestratgias; 15. Assim, os objetivos: a) Determinar as estratgias de uso de N utilizadas pelas espcies arbreas vegetais que estruturam os ecossistemas em estudo, atravs da caracterizao da aquisio, transporte, estocagem e remobilizao do N; b) Comparar as caractersticas e estratgias de uso de N utilizadas pelas plantas, buscando similaridades e padres entre os ecossistemas, testando a validade do modelo de uso de N proposto por Aidar et al. (2003) para as espcies das florestas estudadas; e c) Buscar modelos alternativos ou complementares no caso do teste de validao do modelo proposto nosersatisfatrioparaasreasdeestudo,foramalcanados; 16. Foi confirmada a hiptese (a), de que As florestas estudadas teriam comportamento similar em relao ao uso e transporte de N pelas espcies em diferentes estgios sucessionais. Assim, espcies secundrias tardias na sucesso provavelmente seriam menos afetadas pela disponibilidade de N no soloporteremumaciclageminternadeNcomoestratgiamaisimportante.Espciespioneirasteriam preferncia pelo uso do NO3 como fonte de N e haveria um contnuo de estratgias entre esses dois extremosdasucesso; 17. EencontrouseumpadronousodeNpelasespciesdocerrado,semelhanteaodaflorestanoquese refereaquisioereciclagem,comgruposfuncionaisdiferentes. 142

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169

ANEXO1SV
Tabela A1. Valores mdios foliares da ANR (pkat.g1 MF), contedo de N (%), 15N () e NO3 folha (mol.g1 MF)41espciesestudadasnaFlorestaOmbrfilaDensaMontanadoParqueEstadualdaSerradoMar(PESM), Ncleo Santa Virgnia (SV), So Lus do Paraitinga SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, Pi = pioneira,Si=secundriainicial,St=secundriatardia.Desviopadroentreparntesis.
ANR(pkat.g1) Hbito Pioneira Secundria inicial spp. Sol Cec Tib Senn Schc Scha Rap Pou Jac Hie Guar Guap Cro Cou Cor Cam Bat Alct Alcg Tac Slo Scle Rou Pte Oco Mols Mole Mic Mart Mars Ings Ingl Hir Eut Eug Dri Dah Cryp Chr Cal Cab vero 218,75(0,00) 664,93(36,09) 15,74(0,00) 201,16(0,00) 155,56(0,00) 228,13(0,00) 8,41(155,44) 86,03(115,85) 440,35(23,80) 127,20(11,07) 98,73(32,99) 53,78(38,68) 153,24(0,00) 93,98(117,36) 131,94(87,90) 96,68(41,66) 133,02(53,66) 65,74(26,35) 170,68(57,60) 29,40(0,00) 20,76(75,46) 12,27(0,00) 27,78(13,47) 25,93(0,00) 8,33(0,00) 34,72(41,58) 46,18(411,82) 27,55(57,16) 14,81(27,99) 60,26(0,00) 144,37(62,81) 24,85(73,29) 33,56(78,01) 32,25(12,23) 78,47(279,41) 2,55(52,38) 65,86(338,09) 34,49(0,00) 74,72(343,70) 74,07(105,07) 34,65(15,91) inverno 291,20(0,00) 320,49(161,66) 8,97(1,84) 148,96(24,39) 149,77(0,00) 310,88(352,57) 3,59(3,16) 33,62(42,39) 336,23(330,60) 71,01(33,21) 43,15(26,79) 94,52(2,32) 205,65(129,33) 91,44(4,14) 72,80(50,16) 128,43(123,33) 75,98(73,45) 174,07(133,44) 82,02(73,96) 18,98(0,00) 10,76(5,29) 34,72(0,00) 26,56(6,25) 102,31(0,00) 12,04(7,53) 16,15(0,49) 46,53(4,91) 28,53(28,51) 10,73(1,96) 138,10(158,80) 88,02(71,44) 31,89(13,83) 41,90(51,52) 28,15(9,06) 95,25(22,42) 3,32(6,06) 46,24(40,84) 19,21(0,00) 75,17(77,37) 44,75(18,56) 20,78(6,14) ContedodeN(%) vero inverno 2,94(0,00) 3,92(0,00) 3,10(0,40) 2,83(0,54) 2,92(0,05) 2,86(0,05) 2,47(0,00) 3,48(0,15) 1,58(0,00) 1,81(0,00) 2,45(0,32) 2,67(0,18) 3,27(0,10) 3,18(0,09) 2,27(0,28) 2,21(0,23) 3,14(0,07) 3,22(0,24) 1,92(0,26) 1,98(0,22) 3,50(0,84) 2,85(1,43) 1,87(0,46) 1,94(0,99) 4,42(0,99) 3,98(1,09) 2,91(0,17) 2,04(0,12) 1,97(0,22) 2,00(0,24) 2,39(0,38) 2,46(0,22) 2,39(0,13) 4,12(0,04) 4,21(0,00) 2,84(0,23) 1,15(0,54) 2,80(0,38) 2,73(0,00) 1,61(0,00) 3,20(0,09) 3,57(0,26) 3,56(0,00) 4,05(0,00) 2,47(0,18) 2,56(0,09) 1,62(0,00) 1,81(0,00) 2,69(0,00) 1,57(0,50) 1,94(0,95) 2,06(0,00) 3,11(0,28) 2,98(0,02) 2,59(0,42) 3,06(0,29) 3,43(0,00) 4,11(0,20) 2,19(0,47) 2,25(0,24) 2,81(1,21) 2,61(0,33) 1,81(0,57) 1,78(0,44) 1,15(0,30) 1,18(0,13) 2,26(0,19) 2,16(0,35) 1,81(0,00) 1,94(0,15) 3,54(0,09) 3,49(0,44) 3,62(0,47) 4,52(0,57) 1,82(0,00) 1,98(0,00) 2,99(0,46) 2,89(0,41) 3,75(0,37) 2,40(0,41) 1,86(1,05) 1,76(1,26) 15N() vero 5,51(0,00) 0,37(1,45) 3,18(0,44) 5,77(0,00) 3,28(0,00) 1,60(1,41) 1,29(0,20) 1,94(0,23) 1,82(1,98) 4,16(2,40) 4,02(1,19) 3,30(0,35) 0,89(1,08) 0,26(1,26) 4,50(0,49) 4,37(0,80) 5,20(0,91) 3,01(0,00) 5,89(3,09) 0,24(0,00) 3,41(1,34) 0,13(0,00) 2,18(0,43) 0,50(0,00) 0,26(0,00) 1,80(1,55) 1,76(0,26) 0,17(0,63) 4,10(0,00) 1,67(0,81) 3,04(1,48) 2,72(0,41) 2,58(0,69) 0,09(0,29) 0,67(0,00) 0,32(0,31) 0,97(2,29) 2,50(0,00) 1,56(1,18) 2,00(0,39) 3,05(1,18) inverno 5,27(0,00) 0,45(1,73) 3,66(0,72) 4,60(1,36) 3,15(0,00) 1,08(0,97) 1,57(0,50) 2,08(0,25) 2,27(1,22) 3,37(2,33) 4,37(0,72) 3,67(0,37) 2,01(0,86) 1,01(0,87) 4,72(1,34) 4,74(0,98) 5,04(0,45) 5,52(2,32) 4,91(1,99) 0,65(0,00) 2,55(1,23) 0,28(0,00) 2,13(0,81) 0,67(0,00) 0,58(1,65) 1,76(0,00) 2,92(0,32) 0,34(1,19) 4,16(1,93) 1,60(2,66) 2,87(0,77) 3,42(0,83) 3,32(1,55) 0,51(0,32) 1,02(0,43) 0,21(0,25) 0,09(2,63) 3,18(0,00) 1,51(1,24) 1,75(0,31) 3,82(1,79) NO3folha(mol.g1MF) vero inverno 0,65(0,00) 1,13(0,00) 2,74(0,47) 2,02(0,29) 2,06(0,61) 2,74(0,96) 1,82(1,75) 2,01(1,68) 2,33(0,00) 1,70(0,00) 2,25(0,08) 2,05(0,07) 0,69(0,16) 0,90(0,14) 1,24(0,20) 1,82(0,28) 2,29(0,30) 2,35(0,51) 1,57(0,49) 1,80(0,21) 0,61(0,16) 1,06(0,35) 1,04(0,07) 0,93(0,16) 3,69(1,24) 3,72(1,65) 1,32(0,55) 1,25(0,59) 1,18(0,31) 1,54(0,23) 1,33(0,81) 1,73(0,98) 1,52(0,38) 1,40(0,12) 2,63(0,27) 2,66(0,48) 2,21(0,29) 1,79(0,42) 1,43(0,00) 1,23(0,00) 2,27(0,79) 3,27(0,80) 1,78(0,00) 1,35(0,00) 1,07(0,16) 0,97(0,02) 1,03(0,00) 1,11(0,00) 0,71(0,15) 0,69(0,00) 1,13(0,46) 0,97(0,42) 0,42(0,00) 0,86(0,16) 0,70(0,06) 0,69(0,13) 1,06(0,39) 1,44(0,45) 1,41(0,35) 2,02(0,49) 1,63(0,15) 1,81(0,43) 1,23(0,20) 1,29(0,32) 2,19(0,36) 2,14(0,20) 1,69(0,18) 2,76(0,07) 1,94(0,00) 1,87(0,20) 1,24(0,19) 0,71(0,00) 0,92(0,13) 0,83(0,02) 3,82(0,00) 2,43(0,00) 2,37(0,13) 2,32(1,21) 2,02(0,12) 2,59(0,67) 1,74(0,46) 1,92(0,73)

Secundria tardia

170

ANEXO2LAM
Tabela A2. Valores mdios foliares da ANR (pkat.g1 MF), contedo de N (%), 15N () e NO3 folha (mol.g1 MF) 24 espcies estudadas na Floresta Subtropical mida do Parque Nacional de Lamington (LAM), Queensland(QLD)Austrlia,emduasestaesdoano(veroeinverno).Onde,Pi=pioneira,Si=secundria inicial,St=secundriatardia.Desviopadroentreparntesis.
ANR(pkat.g1) Hbito Pioneira spp. Aca Hom Pol Sol Trem Acra Atra Cya Elae Ori Qui Syn Ara Arga Argt Bal Cal Cry Dec Elat Not Sar Syz Wil vero 195,60(197,40) 454,05(61,70) 1,46(34,37) 603,24(199,03) 674,18(1,80) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 69,98(62,64) 4,17(5,89) 4,98(7,04) 0,00(0,00) 3,36(0,49) 27,62(21,04) 59,03(0,00) 0,69(0,65) 0,00(0,00) 3,47(3,60) 45,95(17,19) 1,39(1,96) 0,00(0,00) 1,62(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) inverno 84,72(68,42) 359,02(96,24) 252,31(21,93) 636,11(0,98) 358,21(68,91) 9,03(4,29) 27,43(0,49) 1,27(1,47) 51,85(43,38) 11,11(5,84) 36,69(31,92) 24,54(0,00) 6,71(2,62) 59,03(27,09) 85,07(14,57) 48,84(23,50) 2,66(3,44) 29,75(13,26) 29,51(29,30) 64,81(27,50) 4,75(2,46) 89,12(111,63) 2,08(0,00) 3,71(2,06) ContedodeN(%) vero inverno 2,50(0,39) 2,52(0,17) 4,07(0,25) 2,74(0,03) 1,61(0,47) 1,62(0,29) 5,76(1,62) 4,32(1,80) 3,18(0,67) 2,45(0,00) 1,44(0,00) 1,57(0,08) 1,59(0,19) 1,81(0,16) 2,01(0,04) 2,04(0,01) 1,45(0,11) 1,56(0,08) 0,93(0,01) 1,05(0,14) 1,71(0,12) 1,86(0,10) 1,44(0,00) 1,43(0,00) 0,83(0,08) 1,02(0,02) 1,97(0,07) 1,75(0,18) 1,91(0,00) 1,93(0,07) 2,12(0,14) 1,94(0,23) 1,42(0,06) 1,30(0,16) 1,83(0,02) 1,84(0,08) 1,66(0,13) 1,49(0,26) 3,07(0,18) 3,34(0,42) 1,28(0,28) 1,35(0,00) 1,53(0,00) 1,57(0,03) 1,53(0,22) 1,58(0,00) 1,68(0,09) 1,92(0,09) 15N() vero 4,27(0,42) 6,24(0,11) 4,48(1,37) 6,19(0,08) 5,01(0,62) 1,61(0,45) 1,89(0,48) 2,40(0,20) 1,43(0,52) 3,55(1,96) 0,32(0,35) 1,79(0,00) 3,46(1,36) 2,87(1,38) 4,89(0,00) 2,20(0,63) 1,11(0,74) 0,44(0,54) 3,05(1,05) 1,80(0,49) 1,04(0,24) 0,16(0,00) 2,42(0,03) 0,16(1,15) inverno 7,72(0,75) 5,66(0,24) 5,70(0,86) 8,43(1,75) 6,18(2,27) 1,35(0,42) 1,18(1,15) 1,87(0,07) 1,16(0,50) 2,52(0,86) 1,24(0,79) 0,99(0,00) 3,74(0,52) 1,81(1,79) 4,25(0,44) 2,23(0,34) 0,18(0,14) 0,33(0,28) 3,19(1,43) 1,79(0,16) 0,29(2,79) 2,81(0,50) 1,10(0,00) 0,38(0,25) NO3 folha(mol.g MF) vero inverno 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,06(0,09) 1,83(2,57) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,01(0,00) 0,05(0,07) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,16(0,02) 0,00(0,00) 0,18(0,03) 0,00(0,00) 0,17(0,04) 0,10(0,10) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,14(0,19) 0,04(0,04) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,03(0,05) 0,00(0,00) 0,16(0,13) 0,00(0,00) 0,09(0,13) 0,00(0,00) 0,00(0,00) 0,12(0,18) 0,00(0,00)
1

Secundria inicial

Secundria tardia

171

ANEXO3PDG
Tabela A3. Valores mdios foliares da ANR (pkat.g1 MF), contedo de N (%), 15N () e NO3 folha (mol.g1 MF)27espciesestudadasnareadecerradodoParqueEstadualdeVassununga,GlbaPdegigante(PDG), Santa Rita do Passa Quatro SP, em duas estaes do ano (vero e inverno). Onde, D = decdua, S = semi decdua,P=pereniflia.Desviopadroentreparntesis.
ANR(pkat.g ) Hbito Pereniflio spp. Dal Sch Myrl Myrb Fic Asp Bau Hymm Mac Oco Plat Vir Xyl Ana And Ann Byr Cam Cop Dim Dip Eug Hyms Plathy Qua Rou Toc vero 32,10(32,80) 324,69(200,30) 31,56(15,62) 26,62(11,34) 204,40(104,12) 289,66(212,79) 130,71(13,42) 52,31(14,46) 51,00(19,79) 38,54(0,00) 52,08(0,00) 91,44(27,92) 2,39(1,54) 13,43(0,00) 60,42(56,27) 202,55(133,24) 182,10(93,41) 34,49(0,00) 62,04(53,97) 4,78(8,29) 75,93(27,99) 67,59(33,27) 44,21(27,17) 32,64(7,84) 77,31(55,32) 2,01(0,00) 378,32(91,17) inverno 64,58(47,96) 281,71(10,97) 163,27(27,17) 51,00(12,11) 190,66(59,74) 420,37(238,48) 129,63(8,35) 88,43(72,76) 104,55(0,00) 102,20(0,00) 224,69(209,02) 137,19(27,92) 33,02(35,37) 14,35(0,00) 183,33(126,92) 320,06(41,90) 355,67(252,23) 105,79(0,00) 67,21(42,34) 26,70(15,05) 48,84(43,38) 306,64(44,64) 111,96(0,00) 133,10(145,68) 219,91(133,07) 55,15(0,00) 211,96(0,00)
1

Semidecduo

Decduo

ContedodeN(%) vero inverno 3,71(0,40) 2,24(0,90) 2,10(0,02) 2,24(1,51) 1,37(0,21) 2,06(0,10) 1,29(0,17) 1,90(0,34) 1,78(0,11) 2,47(0,12) 2,13(0,14) 1,72(0,04) 2,83(0,20) 2,00(0,50) 1,66(0,16) 2,11(0,33) 3,53(0,37) 1,77(0,00) 1,92(0,00) 3,01(0,00) 3,15(0,00) 1,74(1,32) 1,88(0,06) 1,62(0,35) 2,34(0,09) 1,55(0,82) 2,51(0,00) 1,57(0,00) 2,18(0,47) 1,48(0,66) 1,69(0,18) 2,98(0,16) 1,96(0,24) 1,39(0,51) 1,75(0,00) 1,34(0,00) 2,31(0,10) 2,26(0,65) 3,96(0,50) 1,97(0,46) 2,99(0,40) 2,41(0,16) 1,46(0,11) 1,67(0,54) 1,69(0,15) 1,45(0,00) 2,68(0,52) 3,24(0,57) 1,99(0,32) 1,72(0,34) 1,20(0,00) 1,80(0,00) 2,07(0,34) 2,08(0,00)

N() vero 0,29(0,40) 1,12(0,48) 0,01(0,60) 0,06(0,10) 0,51(0,63) 2,37(0,64) 2,43(0,94) 1,51(0,56) 1,20(0,66) 0,88(0,00) 0,46(0,00) 0,36(0,44) 1,13(0,92) 1,43(0,00) 1,48(0,79) 2,26(0,92) 1,26(0,43) 0,85(0,00) 1,08(0,56) 1,18(0,62) 0,66(0,42) 1,64(0,29) 1,67(0,18) 0,17(0,69) 0,47(0,46) 2,06(0,00) 1,24(0,50) inverno 1,20(1,33) 0,97(1,61) 0,14(0,64) 0,36(0,99) 0,37(0,33) 1,19(1,00) 0,53(0,81) 0,87(0,31) 0,30(0,00) 1,33(0,00) 0,03(0,36) 0,86(0,64) 0,44(1,85) 0,59(0,00) 0,97(0,46) 1,65(0,33) 0,64(1,09) 0,07(0,00) 0,25(1,22) 0,71(1,16) 0,58(0,73) 0,37(1,15) 0,95(0,00) 0,76(1,67) 0,16(2,02) 2,03(0,00) 0,33(0,00)

15

NO3 folha(mol.g MF) vero inverno 1,81(1,05) 1,81(0,33) 1,51(1,26) 2,45(1,11) 1,26(0,38) 1,93(0,06) 3,51(0,60) 3,04(0,95) 1,59(0,51) 2,36(0,95) 0,83(0,12) 1,06(0,36) 2,89(0,11) 2,26(0,09) 1,71(0,27) 2,99(0,14) 3,06(0,21) 1,16(0,00) 2,74(0,00) 2,35(0,00) 3,16(0,00) 2,63(0,07) 1,28(0,69) 3,15(0,15) 2,53(1,11) 4,52(0,39) 3,87(0,00) 7,62(0,00) 3,14(0,50) 2,66(0,47) 0,62(0,15) 1,21(0,30) 2,13(0,77) 2,68(0,11) 1,90(0,00) 2,49(0,00) 1,45(0,14) 3,56(0,83) 1,89(1,31) 1,77(0,32) 1,97(1,32) 2,89(0,36) 1,75(1,45) 4,74(0,94) 1,98(0,30) 2,79(0,00) 2,62(0,46) 3,26(1,09) 2,09(0,66) 2,00(0,70) 1,66(0,00) 2,12(0,00) 1,70(0,27) 1,17(0,00)

172