UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

Facultad de Ingeniera Qumica Escuela Profesional de Ingeniera Qumica

E G N N IE I R E
: ALIMENTOS : MOHOS :

FA C U LTA D D

IA

CURSO

LABORATORIO DE MICROBIOLOGA DE LOS

Q U IM IC A

TEMA

OBSERVACIN E IDENTIFICACIN DE

PROFESOR

Ing. Gloria Senz Borrego

OLP

ALUMNO

: 042763-C

Bazalar Bedoya, Ivn

BELLAVISTA CALLAO

UN A C - 1966 2008

Informe #3: Observacin e Identificacin de mohos

OBSERVACIN E IDENTIFICACIN DE MOHOS

I. OBJETIVOS
Identificar el tipo de moho desarrollado en un cierto alimento.

II. FUNDAMENTO TERICO

2.1. MOHO

El trmino moho se suele aplicar para designar a cierto tipo de hongos filamentosos multicelulares cuyo crecimiento sobre la superficie de los alimentos suele reconocerse por su aspecto aterciopelado o algodonoso. La parte principal de su crecimiento suele tener aspecto blanco, aunque puede tener colores distintos, color oscuro de humo. El talo, o cuerpo vegetativo, que es tpico de las talofitas, carece de races verdaderas, de tallos y de hojas.

2.2.

AISLAMIENTO DE LOS MOHOS

Los gneros se encuentran con relativa frecuencia en la naturaleza, por /ejemplo sobre los frutos en putrefaccin, semillas, forrajes, cueros, maderas, etc. Tambin se los encuentra en el suelo. Para aislarlo se tiene ene cuenta su estado natural, procediendo luego a adecuarlo mediante las siguientes tcnicas: Por dilucin en agar Una serie de 4 a 6 tubos de cultivo, cada uno conteniendo 10 ml de un medio de agar adecuado (Medio de Czapeck, medio de Sabouraud, medio de malta), se calienta en bao de agua para fundir el agar. Enfriar el contenido de los tubos a 45 C; se aade a cada uno de ellos una pequea cantidad del material que contiene el moho agitando cuidadosamente, se lleva una pequea porcin

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a un segundo tubo y el resto se vierte aspticamente en una placa de Petri. Se contina del mismo modo hasta obtener 4 o 6 muestras. Por separacin de esporas de una colonia Una vez seleccionada una colonia que se presume pura, se recogen de la misma unas cuantas esporas mediante una aguja esterilizada, llevndolas a un tubo que contiene un medio favorable para el crecimiento. La operacin se efecta con ayuda de una lupa o bien con el microscopio. Mediante el micromanipulador El micromanipulador ms conocido es el de Peterfi, construido por la Zeiss; es de tipo mecnico ya que las agujas, pipetas, ansas y escalpelo se mueven por juegos de tornillos en todas direcciones. Consta de una camarita en la cual se coloca una gota del material a aislar; se observa a travs del microscopio. Por germinacin de una sola espora Se hace una dilucin de esporas en agua estril o salina hasta que cada gota contenga solo una espora, lo que puede comprobarse con auxilio del microscopio. Se ponen entonces varias gotas sobre la superficie de agar, marcando su posicin para poder localizar el cultivo correcto en el caso de existencia de algn contaminante. Por modificacin del mtodo de una sola espora de Keitt Esta modificacin se debe a Ezekial (1930). Con ayuda de una aguja de extremo plano cargada con el material que contiene las esporas, se hacen varios trazos paralelos sobre la superficie de un medio agarizado convenientemente, se invierte entonces la placa incubndola durante 16-24 hs. y observndola a travs del fondo con el microscopio (objetivo de 16 mm). Una vez descubiertas las esporas, se marca con tinta su posicin. Por medio de una aguja de punta cilndrica (que obra como sacabocado) Se corta el cilindro de agar que contiene el esporo. Este cilindro se siembra en una caja de Petri y se observa para estar seguro de que existe un solo elemento, y luego de desarrollado se resiembra en un tubo con medio de cultivo apropiado. Se incuba y aparecer la colonia de desarrollo monocitogentico. Mtodo de Hansen
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En este mtodo (Hansen 1926) se prepara una suspensin de esporas en agar, que se aspira en tubos capilares de dimetro no mucho mayor que el de las esporas. Los tubos capilares se observan al microscopio y cuando se descubre una espora aislada se rompe el tubo de manera que el segmento contenga solo una espora. El cristal se trata con alcohol y luego se coloca en un medio fresco. La espora se desarrolla dando lugar a una colonia. Este mtodo resulta eficaz con esporas grandes y coloreadas, en cambio no lo es con esporas pequeas. 2.3. siguientes: 1. Hifas septadas o no septadas. 2. Micelio transparente u oscuro (color de humo) 3. Micelio coloreado o incoloro. 4. Si se producen esporas sexuales y el tipo de las mismas: oosporas, zigosporas o ascosporas. 5. Tipo de esporas sexuales: esporangiosporas, conidios, o astrosporas (oidios). 6. Caracteres de la cabeza esporal. a. Esporangios: tamao, color, forma y situacin. b. Cabezas esporales que poseen conidios: conidios simples, cadenas de conidios, conidios gemantes, o acmulos de conidios; forma y disposicin de los esterigmas o filides; conidios unidos entre s por una sustancia gomosa. 7. Aspecto de los esporangiforos o conidiforos: simples ramificados y, si son ramificados, tipo de ramificacin; tamao y forma de la colmuela existente en el extremo del esporangiforo; conidiforos separados o formando haces. 8. Aspecto microscpico de las esporas asexuales, sobre todo de los conidios: forma, tamao, color; lisos o rugosos; monocelulares, bicelulares o pluricelulares. 9. Existencia de estructuras especializadas (o esporas): estolones, rizoides, clulas basales, apfisis, clamidosporas, esclerocios, etc. CLASIFICACIN E IDENTIFICACIN DE LOS MOHOS

Los principales criterios par identificar y clasificar a los mohos son los

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III. MATERIALES Y REACTIVOS

Microscopio ptico Portaobjetos Laminilla Mechero de alcohol Asa bacteriolgica Lactofenol Alimento con el moho (papa blanca)

I. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
4.1. CULTIVO DEL MOHO

El tipo de alimento que se escogi fue papa blanca, se tuvieron las siguientes observaciones durante los das de su cultivo: a. Das 0 - 3: El alimento no presenta mayores cambios ms una ligera intensificacin en el color de la papa.

b. Das 3 - 6: La papa comienza a secarse en la superficie y empieza a mostrarse un oscurecimiento en uno de los costados del alimento.

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Das 6 - 9: Las mancha oscura se expande y se oscurecen ms del borde hacia el centro, en el otro costado del alimento tambin comienza a mostrarse una pequea mancha, mientras que el resto de la papa se sigue secando y tornndose de un color pardusco.

c. Das 9 12: Las manchas de los costados se oscurecen ms ya de color negro mientras en el resto del alimento se empieza a cuartear por la sequedad y el color pardo que presentaba a cubierto todo el resto del alimento.

d. Das 12 15: Las manchas en los costados se han expandido y en una de ellos se nota la formacin de micelio blanco (en la parte mas oscura), el resto de la superficie de la papa esta seca.

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4.2.

IDENTIFICACIN DEL MOHO

1. Sobre 6 portaobjetos(previamente lavado con alcohol) se coloca una gota de lactofenol, en cada uno de ellos.

2. Se escogen 6 zonas distintas del alimento para realizar el muestreo y con ayuda de una navaja u objeto filoso se corta un pedazo muy fino del alimento.

3. Con ayuda del asa (previamente calentada en un mechero de alcohol hasta el rojo vivo) depositar sobre el lactofenol la muestra.

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4. Luego colocar el cubreobjetos procurando que no queden burbujas de aire y finalmente observar en el microscopio y dibujar lo observado para su posterior identificacin.

En la zona 1, donde se desarrollo el micelio, se observ pequeas clulas que podran ser microconidios de formas globulares , tambin agrupacin de clulas ovoides y fusiformes que podran ser macroconidios. Se aprecia formas alargadas que pueden ser las hifas.

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Para otras zonas como la zona 4 se observaron clulas en forma de huso as como clulas ovoides (ambos pueden ser microconidios) y cadenas de clulas. En las dems zonas se observaron formas parecidas a la ya mencionadas.

IV. CONCLUSIONES
Por lo observado se determin que el moho que se pudo haber desarrollado en el alimento (papa), fue del gnero fusarium especie podredumbre seca. de la solani (la ms comn en papa), que desarroll una

V. RECOMENDACIONES
Durante el periodo de cultivo del moho se debe de tener este dentro de una bolsa bien cerrada o dentro de un recipiente transparente bien cerrado, teniendo cuidado al momento de realizar las observaciones diarias. Si el alimento presentara micelio se debe de tener mucho cuidado ala ahora de tomar la muestra ya que puede romper las hifas y alterar su morfologa y as cometer un error en la identificacin. Se debe de recordar tener siempre cerca el mechero encendido a la hora de tomar las muestras del alimento.
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Limpiar bien el objetivo con una franela suave y nunca con papel ya que puede rallar el objetivo, tampoco con un algodn ya que este puede dejar pelusa del mismo y provocar errores en la observacin tambin el

VI. REFERENCIAS
FRAZIER, William.C. y WESTHOFF, Dennis.C., Microbiologa de los alimentos, 4ta Edicin, editorial ACRIBIA S.A. Zaragoza, Espaa, 1993, Pg. 23-41 y 276-284. http://fai.unne.edu.ar/biologia/micologia/13_micologia.htm http://es.wikipedia.org/wiki/Solanum_tuberosum http://www.unsa.edu.ar/matbib/hongos/06htextofusarios.pdf

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