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CAPTULO V CLOROPLASTO INDICE

I. INTRODUCCION. II. CLOROPLASTO. 1. CONCEPTO. -----------------------------------------2. GENESIS DE LOS CLOROPLASTOS. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3. ESTRUCTURA DEL CLOROPLASTO. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 4. ESTRUCTURA DEL TILACOIDE. ------------------------------5. ESTRUCTURA DEL ESTROMA. ------------------------------6. COMPOSICIN QUMICA DE LOS CLOROPLASTOS. - - - - - - - - - - - - - - - - - - 7. LAS CLOROFILAS. -----------------------------------------8. LOS CAROTENOIDES. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 9. LOCALIZACION Y DISTRIBUCIN DE LOS PIGMENTOS. ------------10. DESARROLLO DE LOS CLOROPLASTOS. ------------------------III. FOTOSINTESIS. 1. 2. 3. 4. 5. 6. IV. 1. 2. 3. 4. INTRODUCCION. -----------------------------------------22 REACCIN LUMNICA. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 22 REACCIN EN LA OSCURIDAD. ------------------------------23 FOTOSNTESIS ARTIFICIAL. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 24 FOTOSNTESIS: ANTECEDENTES HISTRICOS. - - - - - - - - - - - - - - - - - - 25 FOTOSNTESIS: REACCIONES FOTOQUMICAS (LUMINOSAS). - - - - - - - - - - - - 26 LOS DOS FOTOSISTEMAS. 27 ------------------------------------28 29 ------32 8 11 12 14 15 16 17 20 20 21 ----------------------------------------4

SECUENCIA DEL FLUJO DE ENERGA (FLUJO DE ELECTRONES). - - - - - - - - REACCIONES REDOX. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - FOTOFOSFORILACION CCLICA Y ACICLICA. ----------------30 RESUMEN DE LAS REACCIONES LUMINOSAS. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - -

V. FOTOSNTESIS: REACCIONES SINTTICAS (REACCIONES OSCURAS). 1. CICLO DE CALVIN. ----------------------------------------------2. FOTOSNTESIS C4 (VA DE HATCH-SLACK). - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 3. METABOLISMO CIDO DE LAS CRASULCEAS. -------------------V. OTROS PLASTOS. 39 33 36 38

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VI. VII. VIII. IX.

RESUMEN. 40 CITOCROMO. 40 CONCLUSION. 41

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BIBLIOGRAFIA. - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - - 42

INTRODUCCION
Unos 100 millones de aos despus de que las mitocondrias quedasen establecidas, un nuevo tipo de organismo se uni a ellas en el citoplasma de ciertas clulas. Pero el origen de esta unin no fue la infeccin, sino la ingestin. Los anteriores plastos, probablemente, fueron ingeridos por protoeucariontes. Estos antepasados debieron ser las cianobacterias que se encuentran por todas partes. Algunas de estas resistieron la digestin en el interior de sus hospedadores con sus pigmentos an activos. Antes de esta adquisicin, los eucariota eran hetertrofos, todos ellos requeran compuestos orgnicos preformados u otros organismos enteros en solucin acuosa. Bacterias fotosintticas como por ejemplo Prochloron y otros fottrofos (como se explica a continuacin), pudieron ser ingeridos y acabar convirtindose en los actuales plastos. Este ltimo paso en la teora endosimbitica sobre el origen de los eucariota, algas y plantas es el ms fcil de documentar ya que los plstidos han retenido la mayora de las propiedades de sus ancestros de vida libre. A finales de los 60, Ralph Lewin, bilogo marino del Instituto Scripps de Oceana en California, descubri una oscura bacteria de color verde en varias localidades del Ocano Pacfico. Lewin le dio el nombre de Prochloron. Este microorganismo crece sobre las ascidias, unos invertebrados marinos que viven fijos en el suelo. Al recubrirlos, los colorea de verde y probablemente les proporciona tambin determinados nutrientes. Algunas larvas de ascidias tienen incluso bolsas repletas de Prochloron para asegurar su crecimiento simbitico en la siguiente generacin. El gran tamao de las clulas y el color verde de Prochloron haca suponer que era un alga verde aunque posteriormente se demostr que era una enorme bacteria.

Figura 1: Prochloron es un organismo muy simple formado por una membrana que envuelve ADN y pigmentos vivos, por ejemplo, clorofilas a y b, lo que hace que sea ms parecida a los vegetales, desde el punto de vista metablico que las cianobacterias, que slo tienen pigmentos azul verdosos y clorofila Prochloron sera un cloroplasto de no ser porque tiene pared celular y vive en el exterior de una ascidia en vez de encontrarse en el interior de una planta.

Esta bacteria es un eslabn perdido en la historia de la simbiosis y combina la fisiologa de un vegetal con la estructura de una bacteria. Parece muy probable que los antepasados de Prochloron fuesen ingeridos por muchos tipos de protistas. Algunos de ellos debieron resistir la digestin y evolucionaron convirtindose en los actuales plstidos.

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Los plstidos verdes, llamados cloroplastos, de las plantas y algas verdes son mayores e incluso ms parecidos a bacterias que las mitocondrias. Esto es debido a que: Tienen tambin su propio ADN y ARNm. Sus ribosomas tambin son del mismo tamao que los de las bacterias. Como en el caso de las mitocondrias, los plstidos se encuentran aislados del resto de la clula por una membrana. Su ADN, al igual que el ADN bacteriano, carece de histonas. Tambin se dividen directamente en dos. El ADN, ARN y protenas que producen estos orgnulos son extraordinariamente semejantes a los de las bacterias, especialmente a los de las cianobacterias.

Figura 2: A pesar de haberse desprendido de la mayor parte de los utensilios necesario para su autosuficiencia, los plstidos pueden sintetizar muchas de sus protenas. La mayora, pero no todos, han conservado los sistemas fotosintticos con pigmentos verdes, rojos o verde azulados. Si bien es cierto que todas las clulas vegetales contienen algn tipo de plstido, los hay tambin incoloros, no fotosintticos aunque aun no se conoce su funcin.

Los plastos evolucionaron a partir de simbiontes fotosintticos ms de una vez; por tanto, son considerados polifilticos, como demuestran los diferentes tipos de plastos: plstidos verdes corrientes de los vegetales (clorofila a y b procedentes de Prochloron), plastos verde azulados y rodoplastos de algas rojas (clorofila a y ficobiliprotenas, procedentes de varios tipos de cianobacterias), y diatomeas y algas pardas (clorofilas a y c). TEORIA ENDOSIMBIOTICA: La teora endosimbitica afirma que las mitocondrias, cloroplastos y quizs tambin los centrolos y los flagelos surgieron de relaciones simbiticas (relacin entre dos o ms organismos de diferentes especies) entre dos organismos procariticos. La prueba principal de esta teora es que la mitocondria y los cloroplastos poseen parte de un aparato gentico propio aunque no todo. Sin embargo dicha teora no constituye la respuesta final a la evolucin de las eucariticas a partir de procariticas.

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Figura 3: Teora endosimbiotica.

Figura 4: Semejanza entre Cloroplasto, Bacteria y Mitocondria.

Los cloroplastos son especficos de las clulas vegetales. En su interior tienen lugar los complejos procesos de la fotosntesis. Contienen un pigmento verde, la clorofila, capaz de captar la energa de la luz solar, que es utilizada por la clula vegetal para sintetizar glucosa a partir de dixido de carbono (CO 2) de la atmsfera. En el interior del

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cloroplasto se produce, por tanto un proceso clave para todos los seres vivos del planeta: la formacin de molculas orgnicas biolgicas (glucosa), a partir de molculas vegetales; los seres vivos no hacen sino transformaciones de unas molculas en otras molculas, en procesos de sntesis o degradacin. La estructura del cloroplasto es muy compleja. Tiene una doble membrana, la membrana externa rodea todo orgnulo y la interna forma invaginaciones llamadas lamelas. Sobre las lamelas se encuentran unas estructuras que tienen forma de una fila de monedas que contienen los pigmentos, la clorofila, molculas claves para la funcin del cloroplasto. Los cloroplastos son orgnulos an mayores y se encuentran en las clulas de plantas y algas, pero no en las de animales y hongos. Su estructura es an ms compleja que la mitocondrial: adems de las dos membranas de la envoltura, tienen numerosos sacos internos formados por membrana que encierran el pigmento verde llamado clorofila. Desde el punto de vista de la vida terrestre, los cloroplastos desempean una funcin an ms esencial que la de las mitocondrias: en ellos ocurre la fotosntesis; esta funcin consiste en utilizar la energa de la luz solar para activar la sntesis de molculas de carbono pequeas y ricas en energa, y va acompaado de liberacin de oxgeno. Los cloroplastos producen tanto las molculas nutritivas como el oxgeno que utilizan las mitocondrias. Los cloroplastos son orgnulos celulares exclusivos de las clulas vegetales. Tienen un tamao variable de unas plantas a otras, pero en las plantas superiores es de alrededor de 5 micras de dimetro. Al igual que las mitocondrias, los cloroplastos tienen la capacidad de multiplicarse por divisin. El nmero de cloroplastos vara de unas especies a otras, desde las que tienen una sola por clula, que se divide sincrnicamente con el ncleo, hasta las que tienen cincuenta o ms. Los cloroplastos tienen tambin una doble membrana limitante. La membrana interna emite prolongaciones al espacio interior. Estas prolon-gaciones son tubulares, pero de trecho en trecho se ensanchan y aplanan formando discos. Los discos, a su vez, pueden apilarse para formar una estructura llamada grana, en las que son muy abundantes sustancias tales como las clorofilas y los carotenoides. En los cloroplastos se lleva a cabo la funcin cloroflica, de la que depende en la actualidad toda la vida del planeta. Es frecuente encontrar en muchos de ellos cmulos de almidn, formados al polimerizarse la glucosa obtenida durante los procesos de asimilacin fotosinttica del anhdrido carbnico.

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Figura 5: Esquema de un cloroplasto, orgnulo especfico de las clulas vegetales en cuyo interior tiene lugar la fotosntesis, gracias a la presencia de clorofila, una molcula capaz de captar la energa de la luz del sol.

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1. CONCEPTO. Los cloroplastos son organelos con forma de disco, de entre 4 y 6 micrmetros de dimetro. Aparecen en mayor cantidad en las clulas de las hojas, lugar en el cual parece que pueden orientarse hacia la luz. En una clula puede haber entre 40 y 50 cloroplastos, y en cada milmetro cuadrado de la superficie de la hoja hay 500.000 cloroplastos. Son organelos presentes en el tejido verde de las plantas, llevan a cabo: la absorcin de la energa luminosa, la sntesis de carbohidratos y la produccin de oxgeno molecular. La suma de estos tres procesos se conoce como fotosntesis. La energa luminosa captada por el cloroplasto es convertida en energa qumica potencial en la forma de carbohidratos e inicia la "cadena de energa" en la naturaleza. El oxgeno producido durante la captacin de la energa

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luminosa llega a ser el agente oxidante fundamental de las reacciones metablicas celulares. Las oxidaciones mitocondriales, as como tambin otras oxidaciones en las clulas vegetales, animales y muchas clulas microbianas, dependen de esta fuente primaria de oxgeno. En general se piensa que toda la reserva de oxgeno de la atmsfera actual deriv y se mantiene en la actualidad gracias a la fotosntesis. El cloroplasto es el organelo donde se realiza la fotosntesis. Existen dos fases: Fase lumnica: en la membrana de los tilacoides se produce la conversin de la energa lumnica en energa qumica (ATP) y se genera poder reductor (NADPH). Fase oscura: se produce en el estroma y ah se fija el CO2 mediante el ciclo de Calvin.

Figura 6: Clulas vegetales en las que son visibles los cloroplastos

El cloroplasto es cualquier organelo limitado por membrana que posee clorofila y que pertenece a un grupo de organelos relacionados de las plantas llamados plastos. Los plastos tienen una amplia variedad de formas, llevan a cabo diversas funciones y almacenan muchos compuestos distintos. Por ejemplo, el amiloplasto es el plasto almacenador de almidn de los tubrculos de papa; el cromoplasto es el plasto que posee licopeno, pigmento que le da al fruto de los tomates su color rojo. Se piensa que cada uno de los diversos plastos se origina a partir de un precursor proplastidio comn. Todos los principales grupos de plantas, con excepcin de los hongos, poseen cloroplastos. Hay dos tipos fundamentales de cloroplastos asociados, cada uno a uno, de los dos tipos de fotosntesis: fotosntesis C3 y fotosntesis C4. La fotosntesis C3 convierte (o "fija") el C0 2 en cidos de 3 carbonos, mientras que la fotosntesis C 4 fija el C02 en cidos de 4 carbonos. Las plantas que llevan a cabo la fotosntesis C4 (llamadas plantas C4) por lo general son gramneas o plantas endmicas a ambientes con poca agua. Las plantas C3 (aquellas que llevan a cabo la fotosntesis C3) son por lo general plantas con flor de hoja ancha, plantas que portan conos o plantas que viven en reas de humedad adecuada. En una clula puede haber un solo cloroplasto o docenas de ellos. Con mayor frecuencia, las plantas ms simples como las algas, poseen un solo cloroplasto, mientras que las plantas superiores, como las plantas con flor y las que portan conos, tienen muchos cloroplastos en cada una de sus clulas.

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Figura 7: Cloroplastos en clulas de cebolla

Los cloroplastos, diminutas estructuras verdes y esfricas, son esenciales para el proceso de la fotosntesis. En este proceso, la energa solar que se recibe se combina con agua y dixido de carbono en presencia de una molcula de clorofila, para producir oxgeno e hidratos de carbono; stos pueden ser consumidos por algunos animales. Sin el proceso de la fotosntesis, la atmsfera no contendra el oxgeno suficiente para mantener la vida animal.

En las plantas, los cloroplastos se desarrollan en presencia de luz, a partir de unos organelos pequeos e incoloros que se llaman proplastos. A medida que las clulas se dividen en las zonas en que la planta est creciendo, los proplastos que estn en su interior tambin se dividen por fisin. De este modo, las clulas hijas tienen la capacidad de producir cloroplastos. En las algas, los cloroplastos se dividen directamente, sin necesidad de desarrollarse a partir de proplastos. La capacidad que tienen los cloroplastos para reproducirse a s mismos, y su estrecha similitud, con independencia del tipo de clula en que se encuentren, sugieren que estos orgnulos fueron alguna vez organismos autnomos que establecieron una simbiosis en la que la clula vegetal era el husped.

Figura 8: Cloroplasto y su estructura.

En los estudios acerca de los cloroplastos en las plantas superiores, es comn utilizar las hojas, y las hojas de espinaca y perejil son quiz las fuentes ms utilizadas. En estas hojas, los cloroplastos se encuentran abundantemente en dos tejidos internos, el mesfilo en empalizada y el mesfilo esponjoso. Ambos tejidos se encuentran entre la epidermis superior e inferior y tienen paredes celulares delgadas que se rompen con facilidad. El nmero de cloroplastos por

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clula vara dentro de un organismo a medida que cambian las condiciones ambientales y tambin varan en forma notable de una especie a otra. En la espinaca, hay entre 20 y 40 cloroplastos en cada clula de parnquima en empalizada. En este tejido, los cloroplastos se localizan a lo largo de las paredes laterales de la clula; el centro de esta ltima est lleno de grandes vacuolas. En el parnquima esponjoso, los cloroplastos estn distribuidos ms al azar en todo el citoplasma de la clula. En muchos gneros, la corriente citoplsmica (es decir, la ciclosis) mueve a los cloroplastos por la clula, y en unos cuantos casos, se ha observado un movimiento activo de tipo ameboideo de estos organelos. La posicin de los mismos en la clula y su movimiento en ella aumentan su exposicin a la luz. Los cloroplastos pueden aislarse de los tejidos vegetales por centrifugacin diferencial despus de la disgregacin de las clulas. Las hojas son homogeneizadas en una solucin salina isotnica helada como NaCl 0.35 M amortiguada a un pH de 8.0. La disgregacin celular suele llevarse a cabo a baja velocidad en una licuadora. Despus de una filtracin previa a travs de una gasa de nylon (con poros de 20 micrmetros) para eliminar las partculas de mayor tamao (ncleos, fragmentos de tejidos y clulas no fragmentadas), los cloroplastos son separados por centrifugacin a 200g por 1 minuto. El sedimento rico en cloroplastos vuelve a suspenderse y se centrifuga de nuevo a 2000g durante 45 segundos para resedimentar a los cloroplastos. Las preparaciones de cloroplastos obtenidas mediante esta tcnica por lo general son mezclas de organelos intactos y fragmentados. Debido a que la composicin qumica, velocidad de actividad fotosinttica y otras propiedades de los cloroplastos intactos difieren notablemente de las de los organelos daados, a menudo es conveniente separar las dos poblaciones. Esto puede lograrse mediante centrifugacin por coeficiente o centrifugacin por gradiente de densidad isopcnica de la preparacin de cloroplastos utilizando gradientes de sacarosa, Ficoll o Ludox.

Figura 9: Estructura del cloroplasto.

El tamao de los cloroplastos es bastante variable. Aunque el dimetro promedio de un cloroplasto de las clulas de las plantas superiores flucta entre 4 y 6 micrmetros, el tamao puede fluctuar de acuerdo con la cantidad de iluminacin disponible. A la luz del sol, la planta sintetiza con mayor facilidad la clorofila y los cloroplastos aumentan de tamao; en la sombra, la sntesis de clorofila disminuye y hay una reduccin correspondiente en l tamao de cloroplastos. Los cambios en la forma de los cloroplastos se observan tambin despus de que las plantas han sido expuestas a la luz durante un breve perodo. La exposicin ocasiona una disminucin pequea pero medible en el volumen de los cloroplastos. Quiz esto se debe a una produccin de ATP inducida por la luz, ya que la adicin de ATP a cloroplastos mantenidos en la

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oscuridad provoca la reduccin en el volumen de stos. Las clulas poliploides poseen cloroplastos ms grandes que las clulas diploides comparables. La forma de la mayora de los cloroplastos de las plantas superiores es esferoide, ovoide o discoide. Algunas veces se encuentran otras formas irregulares pero son ms comunes en plantas inferiores. Por ejemplo, en las algas se han observado cloroplastos en forma de copa, as como tambin formas de bandas espirales, de estrella y digitadas. La forma y estructura de los cloroplastos puede alterarse tambin por la presencia de grnulos de almidn. Durante los perodos de fotosntesis dinmica, los azcares formados en los cloroplastos se polimerizan en almidones que se precipitan como grnulos pequeos. Los grnulos de almidn suelen ser elipsoidales y pueden tener una longitud mayor a 1.5 micrmetros.

Figura 10: Disposicin de las clulas con cloroplastos en hojas de plantas que llevan a cabo la: a) fotosntesis C3, y b) la fotosntesis C4. En las plantas que utilizan la fotosntesis C3 (por ejemplo espinaca, perejil y otras plantas de hoja ancha), los cloroplastos se localizan en la capa de empalizada y en las capas del mesfilo esponjoso que estn entre la epidermis superior e inferior. En plantas que llevan a cabo la fotosntesis C4 (por ejemplo el maz, caa de azcar y ciertos pastos), no hay capa de empalizada, pero las nervaduras de la hoja estn rodeadas por las clulas del paquete de la vaina que contienen cloroplastos.

2. GNESIS DE LOS CLOROPLASTOS. Al poseer su propio ADN llevan a cabo la divisin independientemente de la clula. Un cloroplasto procede de un proplasto originado a su vez por la divisin de otro plasto, y que despus de la captacin de luz se transforma en cloroplasto maduro, diferencindose de los dems tipos de plastos, como: los cromoplastos, para almacenamiento de pigmentos, y los amiloplastos, para el almacenamiento de almidn. En las angiospermas se traspasan por va materna, a semejanza de lo que ocurre con las mitocondrias en los animales. Solo se encuentra en las clulas eucariontes vegetales.

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3. ESTRUCTURA DEL CLOROPLASTO.

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Las dos membranas del cloroplasto poseen una estructura continua que delimita completamente el cloroplasto. Ambas se separan por un espacio nter membranoso llamado a veces espacio periplastidial. La membrana externa es muy permeable, no tanto como la interna que contiene protenas especficas para el transporte. La cavidad interna llamada estroma, en la que se llevan a cabo reacciones de fijacin de CO 2, contiene ADN circular, ribosomas (de tipo 70S, como los bacterianos), grnulos de almidn, lpidos y otras sustancias. Tambin, hay una serie de sculos delimitados por una membrana llamados tilacoides los cuales se organizan en los cloroplastos de las plantas terrestres en apilamientos llamados grana (plural de granum). Las membranas de los tilacoides contienen sustancias como la clorofila, los carotenoides, los pigmentos fotosintticos y distintos lpidos; protenas de la cadena del transporte electrnico fotosinttico y enzimas, como ciertas ATP.

Figura 11: Estructura detallada del cloroplasto.

Un cloroplasto tiene por tanto tres membranas y presenta tres compartimentos. La membrana externa es muy permeable, gracias a la presencia de porinas. La membrana interna es menos permeable, no presenta pliegues (la de la mitocondria s los presenta). Entre ambas membranas queda un primer compartimiento que es el espacio intermembranal. La membrana interna delimita un espacio que es el estroma, dnde se encuentran ribosomas, copias de ADN, distintos tipos de ARN, grnulos de almidn y gotas de lpidos. La membrana tilacoidal, es el tercer tipo de membrana, aparece formando unos sacos aplanados denominados tilacoides, y forman unas agrupaciones llamadas grana. Los tilacoides estn interconectados y delimitan una tercera cavidad que es el espacio tilacoidal La membrana tilacoidal, es la responsable de la captacin de la energa solar, gracias a la presencia de clorofilas y de otros pigmentos asociados con protenas en unas estructuras funcionales que son los fotosistemas.

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Figura 12: Estructura del Cloroplasto

Los cloroplastos de las plantas C3 estn formados por dos capas de membrana similares a las de las mitocondrias. Cada membrana tiene un espesor de cerca de 70 a 80 ngstrom y las dos membranas estn separadas por un espacio de cerca de 70 a 100 ngstrom. La membrana externa, que carece de pliegues o proyecciones, sirve para delimitar al organelo y regular el transporte de sustancias entre el citoplasma y el interior del cloroplasto. La membrana interna se asemeja a la membrana externa, pero presenta invaginaciones extensas. La membrana interna da lugar a una serie de membranas internas paralelas llamadas lamelas. Las lamelas estn suspendidas en un lquido granular o matriz que muestra cierta densidad electrnica en las fotomicrografas electrnicas. Esta matriz se conoce como estroma. La mayora de las lamelas de los cloroplastos de plantas superiores estn organizadas para formar sacos en forma de disco llamados tilacoides pequeos. Los tilacoides pequeos suelen a menudo estar dispuestos en columnas llamadas grana (cada uno de ellos es un grano) que tienen un dimetro de aproximadamente 300 a 600 nm. Dado que estos tilacoides son redondos, los grana se asemejan bastante a pilas de monedas. Un cloroplasto tpico tiene entre 40 y 60 grana, y cada uno puede estar constituido de 2 a 100 pequeos tilacoides aplanados. Con frecuencia, una pequea porcin del tilacoide se extiende radialmente en el estroma para formar un tubo ramificado, o tilacoide grande, que comunica con otros tilacoides pequeos y grana. El conjunto, la red ramificada y anastomosante se conoce como lmelas del estroma.

Figura 13: a) Corte transversal a travs de un cloroplasto para mostrar la disposicin de las lmelas y los grana, b) Tilacoides de los grana y del estroma formados por las lmelas, c) Cloroplasto de una clula de maz. (Cortesa del Dr. N. Rascio; copyright 1981 por Springer-Verlag, Protoplasma 105,241).

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4. ESTRUCTURA DEL TILACOIDE.

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Las membranas adyacentes de tilacoides vecinos dentro de cada grana forman capas gruesas llamadas lamelas de los grana. Las fotomicrografas electrnicas de las lamelas de los grana fijadas con glutaraldehdo y teidas con osmio revelan una disposicin en cinco capas que consta de tres capas osmioflicas oscuras de 40 ngstrom de espesor en tomo a dos espacios osmiofbicos de 17 ngstrom de grueso. Las tcnicas de criofractura indican que las membranas de los grana poseen numerosas partculas. Las partculas, que son principalmente de naturaleza protenica, parecen ser de dos tamaos bsicos, de 105 y 140 ngstrom de dimetro. Las lmelas del estroma poseen principalmente partculas de tamao pequeo. Las partculas ms grandes aparecen sobre la superficie EF de las membranas de los grana y estn asociadas al Fotosistema II de la fotosntesis. Las partculas ms pequeas estn asociadas al Fotosistema I y se encuentran en cantidades iguales sobre la superficie PF tanto de las membranas de los grana como del estroma.

Figura 14: Diagrama de las lamelas de los grana y de los tacoides del estroma para mostrar la disposicin de las partculas sobre las superficies de fractura de la membrana.

Figura 15 : Membrana de un grana ciofracturado y sublimado para mostrar sus partculas pequeas y grandes. (Cortesa del Dr. K. Muhlethaler; copyright por Springer-Verlag, 1965, Plama67, 305).

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5. ESTRUCTURA DEL ESTROMA.

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El estroma granular posee varias partculas. La micrografa electrnica revela tambin numerosos grnulos osmioflicos y grupos de estructuras elipsoidales llamados estromacentros. De particular inters son las bandas de ADN distribuidas en el estroma y partculas semejantes a ribosomas. Los cloroplastos de las plantas C4 tienen las mismas estructuras generales de las plantas C3 (una membrana externa limitante, tilacoides de los grana y del estroma, un estroma con ADN, ribosomas y estromacentros), pero hay algunas diferencias notables. Los cloroplastos de las plantas C4 tienen un ticulum perifrico, que es un grupo de tbulos anastomosantes en torno a la periferia. En muchas plantas C4, como el maz, hay dos tipos de cloroplastos. Los que se encuentran en las clulas del mesfilo se asemejan a los cloroplastos de las plantas C 3, pero carecen de granos de almidn. Los cloroplastos presentes en las clulas en torno a las venas de la hoja (llamadas clulas del paquete de la vaina) poseen grnulos de almidn, pero tienen grana alargada.

6. COMPOSICIN QUMICA DE LOS CLOROPLASTOS. El componente orgnico presente en mayor cantidad en los cloroplastos es la protena, que puede representar hasta el 69% del peso seco (tabla 1). En clulas de la hoja, el 75% del contenido total de nitrgeno se encuentra dentro de los cloroplastos. Se han identificado protenas tanto estructurales como solubles, pero slo se han extrado y purificado unas cuantas. Un anlisis de pptidos mediante electroforesis en gel-DSS muestra diferencias en composicin entre las lmelas de los grana y del estroma, pero dichas diferencias son en su mayor parte cuantitativas y no cualitativas. Las composiciones relativas de tas lmelas de los grana y del estroma se muestran en la tabla 2. Bsicamente, todos los pigmentos y citocromos se encuentran en las lmelas. El estroma carece de estos compuestos, pero posee ADN y ARN, ausentes en las lmelas. La mayor parte del ARN est asociado a los ribosomas del estroma. La cantidad de ADN es baja; los clculos son de 10-15 a 10-14 gramos por cloroplasto o casi el 0.03% de su peso seco. Sin embargo, esta informacin es suficiente para explicar la sntesis de algunas de las protenas del cloroplasto, incluyendo algunas de las enzimas de la fotosntesis. Se desconoce la distribucin del ADN del cloroplasto durante la divisin de este ltimo. Los lpidos y pigmentos liposolubles comprenden aproximadamente el 34% del peso seco del cloroplasto de la espinaca. Se ha identificado un nmero extremadamente grande de componentes lipdicos diferentes. Los lpidos ms comunes son los galactosil diglicridos, fosfolpidos, quinonas (incluyendo la vitamina K) y los esterles.

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Tabla 1 Composicin qumica de los cloroplastos de la espinaca

Tabla 2 Componentes principales de las lmelas del estroma y de los grana

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7. LAS CLOROFILAS. Los pigmentos verdes del cloroplasto y las principales fuentes del color de las plantas verdes son las clorofilas. Aunque se ha logrado identificar una gran cantidad de clorofilas qumicamente distintas en varios tipos de plantas, las estructuras de esas clorofilas son bsicamente las mismas estructuras de las clorofilas a y b. Por consenso general, se identifica a cada clorofila por medio de una letra distinta. Se ha encontrado que todas las plantas fotosintticas poseen clorofila a, pero la presencia de las clorofilas secundaras b, c o d depende del tipo de planta. Las plantas superiores por lo general tienen clorofila b. En las bacterias fotosintticas, se encuentra una clorofila llamada bacterioclorofila en lugar de la clorofila a. En conjunto, las clorofilas a y b representan cerca del 8% del peso seco del cloroplasto de la espinaca, con una proporcin de peso de a: b de 2.1 a 3.5. En la mayora de las plantas, la proporcin de a: b vara de acuerdo con la intensidad luminosa. Por ejemplo, las plantas alpinas, que reciben luz de gran intensidad, tienen una proporcin promedio de 5.5. La proporcin es de 2.3 en las plantas expuestas a la sombra. Cada clorofila tiene un espectro de absorcin de luz caracterstico. La clorofila a extrada tiene mximos de absorcin de 430 y 670 nm, mientras que los mximos de absorcin de la clorofila b son de 455 y 640 nm. El espectro y mximos de absorcin de los pigmentos de las plantas varan de acuerdo con el solvente utilizado para la extraccin. Por lo tanto, no causa sorpresa que los valores obtenidos durante las mediciones in vivo difieran de aquellos obtenidos con extractos. Por ejemplo, los estudios in vivo de la clorofila a indican que su mximo de absorcin nativo ocurre a 677 nm. Una forma muy importante de clorofila a que se blanquea fcilmente por accin de la luz tiene un mximo de absorcin a 700 nm. Esta forma, que representa slo cerca del 0.1% del total de molculas de clorofila presentes en una muestra, se conoce como P700, o clorofila a1.

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Figura 16: Estructura general de la clorofila

Figura 17: Fluorescencia de la clorofila

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Figura 18: Estructura qumica de las clorofilas a y b.

Figura 19: Espectro de absorcin de clorofila a, b y c

8. LOS CAROTENOIDES.

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Los carotenoides son compuestos isoprenoides de cadena larga que tienen una serie alterna de enlaces sencillos y dobles. Aunque estos compuestos se sintetizan slo en los tejidos vegetales y participan en la fotosntesis, tambin son los precursores de la vitamina A en los tejidos animales. La mayora de los carotenoides son amarillos, anaranjados o rojos. La mayora de estos pigmentos se localizan en las lamelas del cloroplasto y se piensa funcionan como pigmentos accesorios en la absorcin de luz durante la fotosntesis.

Figura 20: Espectros de absorcin in Vitro de las clorofilas a y b en el solvente ter.

9. LOCALIZACION Y DISTRIBUCIN DE LOS PIGMENTOS. Las clorofilas y carotenoides se localizan casi de manera exclusiva en las lamelas del cloroplasto. Las lamelas tienen aproximadamente el 52% de protenas y el 48% de lpidos, y los dos pigmentos se encuentran en su mayora en el componente lipdico. Algunos lpidos estn representados tambin por los grnulos osmioflicos del estroma, pero se piensa que carecen de clorofila. Debido a que cada molcula de clorofila tiene una porcin hidroflica (el tetrapirrol) y una lipoflica (la cadena de fitol), se piensa que las molculas de clorofila estn alineadas de un modo especfico dentro de las lamelas. Los grupos pirrlicos forman enlaces dbiles con las protenas lamelares, mientras que los carotenoides estn disueltos en los lpidos adyacentes a las molculas de clorofila. El estroma del cloroplasto posee muchas de las enzimas asociadas a la fotosntesis. La sntesis de protenas del cloroplasto ocurre tambin en el estroma. Se ha logrado aislar del cloroplasto bandas circulares de ADN de aproximadamente 40 micrmetros de longitud junto con ribosomas y polirribosomas. Las bandas de ADN tienen de 1 1 5 a 200 kpb (pares de kilobase) y poseen

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genes para casi 180 a 280 polipptidos. Los ribosomas del cloroplasto pertenecen al grupo de 70S y poseen ARN de 23 y 16S; luego, son ms pequeos que los que se encuentran en el citoplasma de las clulas vegetales (y anirnaes). Los ribosomas del cloroplasto son numerosos y determinan casi la mitad de las protenas celulares sintetizadas.

Figura 21: Estructura qumica del alfa, beta y gamma carotenos.

10. DESARROLLO DE LOS CLOROPLASTOS: Los nuevos cloroplastos se forman por la divisin de cloroplastos maduros o por el desarrollo de proplatidios en la clula. Las clulas de vstagos jvenes de plantas superiores pueden poseer de 20 a 40 proplastidios. Estos pequeos cuerpos, que tienen una forma de ovoide a redonda y estn limitados por dos membranas, pueden desarrollarse en varios plastos distintos adems de cloroplastos. A medida que el proplastidio se desarrolla en un cloroplasto, su membrana interna da lugar a membranas internas, que forman entonces las lmelas y los tilacoides. Los proplastidios aumentan su nmero mediante una forma de divisin. El control del desarrollo del cloroplasto an no se ha comprendido del todo. Al parecer, la diferenciacin de nuevos organelos depende de una interaccin entre la informacin gentica presente en el ncleo de la clula y la informacin presente en el propio cloroplasto. Los cloroplastos contienen ADN, el cual es trascrito y traducido dentro del mismo organelo para formar algunas de sus propias protenas; sin embargo, otras protenas del cloroplasto derivan de la trascripcin y traduccin del ADN del ncleo.

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La hiptesis fascinante pero motivo de grandes controversias de que los cloroplastos son los productos evolutivos de organismos semejantes a bacterias que "invadieron" a las clulas eucarintcas y establecieron una relacin simbitica con la clula husped, es similar a la propuesta para el origen de las mitocondrias. En el caso del cloroplasto, el husped habra sido una clula heterotrfica. Es interesante notar que hay cloroplastos en las clulas de un subgrupo de nudibranquios (caracoles marinos que carecen de concha) que se alimentan de algas. A medida que el citoplasma de las clulas de esas algas pasa a travs del intestino del nudibranquio, cloroplastos enteros son absorbidos en el tejido y pueden permanecer ah durante la existencia del animal. Cuando el nudibranquio est expuesto a la luz, puede detectarse la produccin de oxgeno por los cloroplastos absorbidos.

FOTOSNTESIS
1. INTRODUCCIN.

Figura 22: Esquema general de la Fotosntesis

Proceso en virtud del cual los organismos con clorofila, como las plantas verdes, las algas y algunas bacterias, capturan energa en forma de luz y la transforman en energa qumica. Prcticamente toda la energa que consume la vida de la biosfera terrestre (la zona del planeta en la cual hay vida) procede de la fotosntesis. Una ecuacin generalizada y no equilibrada de la fotosntesis en presencia de luz sera: CO2 + 2H2A (CH2) + H2O + H2A El elemento H2A de la frmula representa un compuesto oxidable, es decir, un compuesto del cual se pueden extraer electrones; CO 2 es el dixido de carbono; CH2 una generalizacin de los hidratos de carbono que incorpora el organismo vivo. En la gran mayora de los organismos fotosintticos, es decir, en las algas y las plantas verdes, H 2A es agua (H2O); pero en algunas bacterias fotosintticas, H2A es anhdrido sulfrico (H2S). La fotosntesis con agua es la ms importante y conocida y, por tanto, ser la que tratemos con detalle.

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La fotosntesis se realiza en dos etapas: una serie de reacciones que dependen de la luz y son independientes de la temperatura, y otra serie que dependen de la temperatura y son independientes de la luz. La velocidad de la primera etapa, llamada reaccin lumnica, aumenta con la intensidad luminosa (dentro de ciertos lmites), pero no con la temperatura. En la segunda etapa, llamada reaccin en la oscuridad, la velocidad aumenta con la temperatura (dentro de ciertos lmites), pero no con la intensidad luminosa.

2. REACCIN LUMNICA. La primera etapa de la fotosntesis es la absorcin de luz por los pigmentos. La clorofila es el ms importante de stos, y es esencial para el proceso. Captura la luz de las regiones violeta y roja del espectro y la transforma en energa qumica mediante una serie de reacciones. Los distintos tipos de clorofila y otros pigmentos, llamados carotenoides y ficobilinas, absorben longitudes de onda luminosas algo distinto y transfieren la energa a la clorofila A, que termina el proceso de transformacin. Estos pigmentos accesorios amplan el espectro de energa luminosa que aprovecha la fotosntesis. La fotosntesis tiene lugar dentro de las clulas, en orgnulos llamados cloroplastos que contienen las clorofilas y otros compuestos, en especial enzimas, necesarios para realizar las distintas reacciones. Estos compuestos estn organizados en unidades de cloroplastos llamadas tilacoides; en el interior de stos, los pigmentos se disponen en subunidades llamadas fotosistemas. Cuando los pigmentos absorben luz, sus electrones ocupan niveles energticos ms altos, y transfieren la energa a un tipo especial de clorofila llamado centro de reaccin. En la actualidad se conocen dos fotosistemas, llamados I y II. La energa luminosa es atrapada primero en el Fotosistema II, y los electrones cargados de energa saltan a un receptor de electrones; el hueco que dejan es reemplazado en el Fotosistema II por electrones procedentes de molculas de agua, reaccin que va acompaada de liberacin de oxgeno. Los electrones energticos recorren una cadena de transporte de electrones que los conduce al Fotosistema I, y en el curso de este fenmeno se genera un trifosfato de adenosina o ATP, rico en energa. La luz absorbida por el Fotosistema I pasa a continuacin a su centro de reaccin, y los electrones energticos saltan a su aceptor de electrones. Otra cadena de transporte los conduce para que transfieran la energa a la coenzima dinucleotido fosfato de nicotinamida y adenina o NADP que, como consecuencia, se reduce a NADPH 2. Los electrones perdidos por el Fotosistema I son sustituidos por los enviados por la cadena de transporte de electrones del Fotosistema II. La reaccin en presencia de luz termina con el almacenamiento de la energa producida en forma de ATP y NADPH2.

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Figura 23: Detalle de la etapa luminosa de la Fotosntesis que ocurre en la membrana tilacoides.

3. REACCIN EN LA OSCURIDAD. La reaccin en la oscuridad tiene lugar en el estroma o matriz de los cloroplastos, donde la energa almacenada en forma de ATP y NADPH 2 se usa para reducir el dixido de carbono a carbono orgnico. Esta funcin se lleva a cabo mediante una serie de reacciones llamada ciclo de Calvin, activadas por la energa de ATP y NADPH 2. Cada vez que se recorre el ciclo entra una molcula de dixido de carbono, que inicialmente se combina con un azcar de cinco carbonos llamado ribulosa 1,5-difosfato para formar dos molculas de un compuesto de tres carbonos llamado 3-fosfoglicerato. Tres recorridos del ciclo, en cada uno de los cuales se consume una molcula de dixido de carbono, dos de NADPH 2 y tres de ATP, rinden una molcula con tres carbonos llamada gliceraldehdo 3-fosfato; dos de estas molculas se combinan para formar el azcar de seis carbonos glucosa. En cada recorrido del ciclo, se regenera la ribulosa 1,5-difosfato. Por tanto, el efecto neto de la fotosntesis es la captura temporal de energa luminosa en los enlaces qumicos de ATP y NADPH 2 por medio de la reaccin en presencia de luz, y la captura permanente de esa energa en forma de glucosa mediante la reaccin en la oscuridad. En el curso de la reaccin en presencia de luz se escinde la molcula de agua para obtener los electrones que transfieren la energa luminosa con la que se forman ATP y NADPH 2. El dixido de carbono se reduce en el curso de la reaccin en la oscuridad para convertirse en base de la molcula de azcar. La ecuacin completa y equilibrada de la fotosntesis en la que el agua acta como donante de electrones y en presencia de luz es: 6 CO2 + 12H2O C6H12O6 + 6O2 + 6H2O 4. FOTOSNTESIS ARTIFICIAL. Si los qumicos lograran reproducir la fotosntesis por medios artificiales, se abrira la posibilidad de capturar energa solar a gran escala. En la actualidad se trabaja mucho en este tipo de investigacin. Todava no se ha logrado sintetizar una molcula artificial que se mantenga polarizada durante un tiempo suficiente para reaccionar de forma til con otras molculas, pero las perspectivas son prometedoras.

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Figura 24: SECCIN DE LA HOJA El tejido fotosinttico de la hoja est formado por dos tipos de clulas flexibles de pared delgada: parnquima en empalizada, con clulas largas dispuestas en columnas (aqu tienen lugar casi todas las reacciones qumicas), y parnquima esponjoso, de estructura ms irregular. Ambos tipos de clulas tienen cloroplastos, rganos fotosintticos que ajustan su posicin en el citoplasma para recibir la mayor cantidad de luz. Los nervios transportan agua y nutrientes a las clulas parenquimatosas. En conjunto, parnquima y nervios forman el mesfilo, encerrado entre capas de clulas epidrmicas. Los estomas son unas aberturas que regulan la entrada y salida de gases. La capa ms externa es una cutcula transparente de cera.

5. FOTOSNTESIS: ANTECEDENTES HISTRICOS. Las reacciones completas de la fotosntesis pueden resumirse con la ecuacin:

Los estudios efectuados por muchos investigadores en los ltimos 300 aos han llevado al conocimiento actual que se tiene acerca de la fotosntesis. Uno de los primeros estudios a cargo de Jan Baptista van Helmont (holands, 1577-1640) fue publicado en 1648 despus de su muerte. Van Helmont plant un vstago de sauce de 5 libras en una maceta grande que contena 200 libras de tierra. La planta fue regada regularmente durante un perodo de 5 aos, tras el cual fue removida y pesada cuidadosamente. Mientras que se encontr que el sauce pesaba casi 170 libras, la tierra original pesaba slo unas cuantas onzas menos que las 200 libras originales. Van Helmont concluy que el aumento en peso del sauce se deba principalmente a la adicin de agua, ya que l no saba la funcin que tenan los gases del aire en el crecimiento de la planta. En 1727 Stephen Hales propuso que parte de la nutricin de la planta provena del aire y que la luz participaba en el proceso. Hoy en da se sabe tambin que la pequea cantidad de material removido de la tierra inclua minerales, nitrgeno, fosfato y sales de calcio. Joseph Priestley (ingls, 1733-1804) fue el primero en demostrar que las plantas intercambian gases con la atmsfera. En particular, Priestley encontr que las plantas producan oxgeno durante la fotosntesis. Ms tarde, en el siglo XVIII, Jan Ingenhousz (holands, 1730-1799) demostr que las partes verdes de las plantas producan oxgeno cuando eran expuestas a la luz. Adems, observ que el volumen de oxgeno producido variaba de acuerdo con la cantidad de luz a que era expuesta la planta. En 1804, Nicholas de Saussure (suizo, 1767-1845) encontr que el aumento en el contenido de carbono de las plantas era consecuencia de la acumulacin de este elemento a partir del bixido de carbono del aire. De Saussure tambin demostr que las hojas respiran en la oscuridad: es decir, toman oxgeno y liberan bixido de carbono. Los estudios de Julius Sachs a mediados del siglo pasado demostraron que la clorofila se limita a los cloroplastos y no est distribuida en toda la clula de la planta. Demostr tambin que la luz del sol haca que los cloroplastos absorbieran el bixido de carbono y adems, que la clorofila

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se forma en ellos slo en presencia de luz. Sachs demostr tambin que uno de los productos de la fotosntesis era el almidn. No fue sino hasta 1918 cuando Wilsttter y Stoll aislaron y caracterizaron los pigmentos verdes clorofilas a y b. Con base en esos primeros descubrimientos, las reacciones de la fotosntesis fueron descritas mediante la ecuacin:

Sin embargo, la fotosntesis no es simplemente la fusin de bixido de carbono y agua mediante el us de la energa luminosa. En vez de ello, participan dos series complejas de reacciones qumicas. Una serie de reacciones, llamadas reacciones fotoqumicas o luminosas, ocurre en las lmelas de los cloroplastos. En esas reacciones, la energa luminosa es absorbida y utilizada para formar ATP, y las molculas de agua son rotas, para liberar oxgeno e hidrgeno. El hidrgeno se utiliza en la reduccin del NADP+ y no es producido como gas. La segunda serie de reacciones, llamadas reacciones sintticas u oscuras, ocurre en el estroma del cloroplasto, y aunque estas reacciones no requieren luz, dependen de la disponibilidad de ATP y NADPH de las reacciones fotoqumicas para poder reducir el bixido de carbono para formar azcares.

Figura 25: Esquema del proceso de fotosntesis

Figura 26: Proplastidos. a) En esta totomicrografa con el MET de una clula de espinaca en proceso de divisin, se observan varios proplastidios (p) y mitocondrias (m) a un lado de los cromosomas en metafase (c); aumento, 9000X. b) Proplastidio en proceso de divisin en una clula apical de la raz de la espinaca aumento, 44000X,

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(Cortesa del Dr. J. V. Possingham; copyright 1981, Societe Francatse de Microscopie Electronique; Biologie Cellulaire 41,203).

6. FOTOSNTESIS: REACCIONES FOTOQUMICAS (LUMINOSAS). Absorcin de la luz por la clorofila: La absorcin de energa electromagntica por un tomo o molcula suele implicar un cambio de electrones de un orbital atmico a otro. Cada electrn posee energa, y la cantidad de sta est determinada por la localizacin del orbital del electrn en el espacio y la velocidad a la cual se mueve el electrn. Cuando un tomo absorbe energa luminosa, un electrn pasa a un orbital de mayor nivel de energa o es acelerado en su rbita. En cualquier caso, se requieren ciertas cantidades especficas de energa, ya que cuando los fotones de luz tienen demasiada o muy poca energa no son absorbidos. Los electrones pueden estar en orbita en pares dentro de un orbital y los miembros del mismo orbital girando en direcciones opuestas. La mayora de los tomos en su nivel ms bajo de energa (es decir, en su estado basal) tienen todos sus electrones pareados de esta forma y se dice que estn en el estado de singulete (es decir, en su estado S). Cuando un fotn de luz es absorbido y por lo tanto un electrn pasa a un orbital superior desocupado, puede continuar girando en direccin opuesta a la de su pareja original (en este caso, el tomo est todava en su estado S) o bien puede girar en la misma direccin a la de su pareja original (en cuyo caso se dice que el tomo est en el estado de triplete o estado T). En una molcula, algunos electrones estn en rbita exclusivamente en torno a ncleos atmicos especficos; otros pueden estar compartidos entre dos ncleos formando un enlace (llamados electrones localizados) o bien pueden estar en rbita en torno a varios ncleos (llamados electrones deslocalizados). La absorcin de un fotn de luz puede mover un electrn deslocalizado a una posicin de electrn localizado. La clorofila es normalmente un singulete en su estado basal. Aunque la absorcin de luz hace que algunos electrones deslocalizados se eleven a un orbital localizado, la clorofila permanece en el estado de singulete. Cuando la luz roja (de 680 nm) es absorbida, un electrn sube a un orbital superior, S localizado. La luz azul (430 nm) posee ms energa por fotn que la luz roja, y su absorcin eleva un electrn a un estado de mayor energa.

LOS DOS FOTOSSTEMAS

Cuando algunas, plantas quedan expuestas a una luz que posee slo longitudes de onda de 690 nm o ms, la eficiencia fotosinttica disminuye. Este efecto se conoce como cada roja. Debido a que la energa absorbida es transferida a la P700, se esperara que la absorcin de luz por los pigmentos accesorios, clorofila a o incluso la P700 fuera igualmente eficaz. Esta eficiencia puede aumentar mediante la adicin de radiaciones de longitud de onda ms corta. Este fenmeno de intensificacin puede aumentar la tasa fotosinttica en un 30 al 40% arriba de la tasa obtenida con las longitudes de onda corta y larga solas. El efecto sinrgico de las dos longitudes de onda distintas llevaron a los primeros investigadores a concluir que haba dos sistemas de reaccin fotoqumica distintos. En uno de ellos (llamado Folosistema I, FS-I), la P700 sirve como la ltima trampa de energa; en el otro (llamado Fotosisema II, FS-II), la ltima trampa de energa es una clorofila que tiene su mximo de absorcin a 680 nm y que se conoce como P680. En plantas superiores, el Fotosistema I es una unidad que posee varios cientos de molculas de clorofila (en su mayora del tipo a), cerca de 50 carotenoides, un citocromo F, una plastocianina, dos citocromos b564, una o dos molculas de ferrodoxina y una molcula o dmero de clorofila P 700. El Fotosistema II tiene cerca de 200 molculas de clorofila de los tipos

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a y b que absorben a menos de 680 nm, 50 carotenoides, una molcula o dmero de P 680 (el donador primario de electrones), un aceptor primario de electrones que se piensa es una quinona, cuatro plastoquinonas, seis tomos de Mn y dos molculas de citocromo b559.

Figura 27: Actividad fotosinttica o espectro de accin (es decir, espectro de evolucin del oxgeno) y espectro de absorcin del alga verde Ulva. La diferencia entre las dos curvas a longitudes de onda por arriba de 590 nm se conoce como cada del rojo.

1. SECUENCIA DEL FLUJO DE ENERGA (FLUJO DE ELECTRONES) La absorcin de energa luminosa por las clorofilas P700 o P680 altera el estado de los electrones de las rbitas, y si la energa no se pierde por rerradiacin o calor, los electrones excitados pueden ser transferidos a otro compuesto. Dicha prdida de electrones "blanquea" a la clorofila y la deja en un estado oxidado. La P 700 oxidada puede reducirse al aceptar un electrn del Fotosistema II, mientras que la reduccin de la clorofila oxidada de dicho Fotosistema se lleva a efecto por la oxidacin del agua. En 1938, R. Hill demostr que los cloroplastos aislados expuestos a la luz podran producir oxigeno y reducir varios compuestos sin consumir bixido de carbono. Tres aos despus, S. Rubn y M. Kamen, utilizando el istopo 18O, demostraron que el oxgeno liberado durante toda la fotosntesis de la planta provena de las molculas de agua. Es decir,

Se desconoce el mecanismo mediante el cual se rompen las molculas de agua, aunque se requieren cuatro molculas de sta para producir una molcula de oxgeno y son necesarios tambin cuatro cuantos de luz:

Pueden requerirse tambin Mn++ y Cl- unidos a protenas. Algunas de estas reacciones se muestran en la siguiente figura:

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Figura 28: Absorcin de la energa luminosa por los Fotosistemas I y II y los movimientos resultantes de los electrones. Los electrones transferidos del Fotosistema II al Fotosistema I vuelven a recuperarse a travs de la ruptura de las molculas de agua. Los electrones del Fotosistema I son utilizados junto con el H+ del agua para reducir el NADP+.

2. REACCIONES REDOX: Los electrones que son liberados de las clorofilas P700 Y P680 pasan de una molcula a otra en una serie de molculas transportadoras de electrones de las lmelas. Cada una de esas molculas tiene un potencial elctrico especfico llamado potencial redox. Los valores relativos de los potenciales redox de las molculas participantes en la transferencia de electrones determinan el orden en el cual cada molcula participa en la cadena de transferencia. Durante la transferencia de electrones, las molculas aceptan estos ltimos de las molculas menos positivas (ms negativas) y los ceden a molculas ms positivas (menos negativas). Cuando una molcula acepta electrones, se dice que se reduce, y cuando los dona, se dice que se oxida. La transferencia de electrones despus de la absorcin de energa luminosa por la clorofila implica por lo tanto una secuencia de reacciones de oxidacin-reduccin. El Fotosistema I se localiza en las membranas de los tilacoides de los grana y del estroma, mientras que el Fotosistema II se encuentra slo en las membranas de los tilacoides de los grana. Por lo tanto, el Fotosistema I funciona de manera independiente en los tilacoides del estroma, pero funciona junto con el Fotosisiema II en los tilacoides de los grana. La absorcin de energa luminosa por la P700 del Fotosisiema I causa la prdida de electrones a una protena intermediaria de hierro y azufre y de esta manera a la propia ferrodoxina. La ferrodoxina vuelve a oxidarse por la transferencia de electrones a cualquiera de dos compuestos; ferrodoxinaNADP reductasa o citocromo b. La ferrodoxina-NADP reductasa transfiere sus electrones al FAD, el cual acepta tambin H+ del agua y reduce al NADP; es decir:

El NADPH y H+ se vierten en el estroma, donde el primero vuelve a oxidarse en las reacciones oscuras. En el mecanismo alternativo de la reoxidacin de la ferrodoxina, el citrocromo b acepta los electrones de ella e inicia una secuencia de reacciones redox que transfieren los electrones al citocromo f, plastocianina y por ltimo de regreso a la P700, completando el ciclo. La funcin de esta serie cclica de reacciones redox est acoplada a la fosforilacin del ADP (fotofosforilacin cclica).

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En las lamelas de los grana, la P700 oxidada por la absorcin de luz puede reducirse por el regreso cclico de los electrones provenientes de la ferrodoxina o por la transferencia de ellos del Fotosistema II. En este Fotosistema, la energa luminosa es finalmente transferida a la clorofila P680 por los pigmentos accesorios u otras molculas de clorofila. Los electrones expulsados son absorbidos por un aceptor, que en general no se ha logrado identificar, pero que podra ser una quinona. Este fotoevento inicia otra serie de reacciones redox en las cuales los electrones pasan sucesivamente de un aceptor de electrones no identificado a la plastoquinona, cilocromo b559, citocromo f, plastocianina y por ltimo a la clorofila P 700. Los electrones en el Fotosistema II no vuelven a ciclar hasta la clorofila P 680, pero son transferidos mediante reacciones redox a la P7oo y esto est acoplado a la fosforilacin del ADP (fotofosforilacin aciclica). La reduccin de la clorofila P680 oxidada se lleva a cabo a travs de la oxidacin del agua va un sistema enzimtico que est estrechamente asociado a la estructura del tilacoide y que produce tambin oxgeno molecular. Dicho sistema enzimtico procesa quiz cuatro protones en forma simultnea para producir O2.

Se sabe que el Mn++ es un cofactor en dicho sistema. Los electrones producidos reducen la clorofila P680 oxidada por la luz, y el H+ forma una poza disponible para la reduccin del NADP+.

Figura 29: Movimient o de los electrones durante las reacciones luminosas de la

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fotosntesi s.

Figura 30: En esta membrana, se encuentra tambin una cadena de transporte electrnico y una ATP-sintasa que funciona como la ATP-sintasa mitocondrial.

3. FOTOFOSFORILACION CCLICA Y ACICLICA. La fosforilacin del ADP ocurre en los cloroplastos durante las reacciones luminosas y se conoce como fotofosforilacin. La fotofosforilacin se lleva a cabo en las lamelas de estroma y los tilacoides de los grana como parte de los Fotosistemas I y II. Hay una clara similitud entre el mecanismo de la fotofosforilacin en los cloroplastos y el sistema de transporte de electrones en la fosforilacin en las mitocondrias. En ambos organelos, el mecanismo est estrechamente asociado a la membrana y a un compartimiento separado del resto del organelo. En el cloroplasto dicho compartimiento es el espacio dentro de los tilacoides; en la mitocondria, es la matriz encerrada por la membrana interna. En ambos organelos, el proceso de fosforilacin est acoplado al transporte de electrones a travs de una secuencia de reacciones redox. Varias de las molculas que participan en las reacciones redox son similares, incluyendo las quinonas y citocromos. La fotofosforilacin cclica ocurre cuando los electrones liberados por la P700 vuelven a ella a travs de la ferrodoxina, citocromo b, citocromo f y plastocianina. La energa de esas reacciones redox exergnicas est acoplada a la fosforilacin. La fotofosforilacin aciclica ocurre cuando los electrones liberados por la P680 del Fotosistema II van y vienen a travs de la plastoquinona, citocromo b, citocromo f y plastocianina hasta la clorofila P 700 del Fotosistema I. La energa de estas reacciones redox exergnicas acclicas esa acoplada a la fosforilacin. En la actualidad, se desconoce el mecanismo de acoplamiento, aunque hay pruebas que apoyan el concepto de que un gradiente de protones generado a travs de la membrana del tilacoide soporta el acoplamiento quimiosmtico. Los cloroplastos iluminados en un medio no amortiguador hacen que ste se vuelva rpidamente alcalino, lo cual implica que los protones son transportados del medio a los tilacoides. En la oscuridad el sistema se reequilibra. Si el medio se vuelve alcalino, la fosforilacin del ADP ocurre en la oscuridad. Los compuestos que degradan la membrana del tilacoide (como los detergentes) ocasionan tambin la prdida de protones del tilacoide e inhiben la fosforilacin.

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El cambio de energa libre estndar que se produce cuando el ATP se forma a partir de ADP y Pi es de casi 30.5 kj/mol ( 7.3 kcal/mol); esto equivale a un potencial redox de aproximadamente 0.45 a 0.61 volts. La mayora de las estimaciones que se han hecho indican que se forma una molcula de ATP por cada par de electrones transportados del Fotosistema II al Fotosistema I (es decir, a travs de la fotofosforilacn aciclica). Varios estudios recientes indican que se forman ms de una molcula de ATP mediante las reacciones que empiezan con el rompimiento de las molculas de agua (es decir, la fotolisis) y que concluyen con la reduccin del NADP+. Se piensa que la segunda fosforilacin del ADP est acoplada a la fotolisis. Si el nmero de molculas de ATP producidas durante las reacciones luminosas es para balancear el nmero consumido por las reacciones oscuras, deben producirse entonces tres molculas de ATP por cada par de electrones transportados del H 2O al NADP+. El tercer ATP puede generarse a travs de la fotofosforilacin cclica. Otra fosforilacin del ADP inducida por la luz para formar ATP, llamada fotofosforilacin seudocclica, ocurre cuando la ferrodoxina reducida en el Fotosistema I transfiere los electrones a travs de una serie de reacciones hasta el O 2 (no al NADP+ o P700), y como resultado se forman ATP y agua.

Figura 31: Modelo del acoplamiento quimiosmtico para la acumulacin de protones dentro de los tilacoides en presencia de luz. Q aceptor de electrones del Fotosistema II (FSII); F aceptor de electrones del FSI.

4. RESUMEN DE LAS REACCIONES LUMINOSAS. Dos Fotosistemas operan durante las reacciones luminosas de la fotosntesis. A medida que cada sistema absorbe cuatro cuantos de luz, las clorofilas P680 (del Fotosistema II) y P700 (del Fotosistema I) son activadas, transfiriendo dos pares de electrones a las molculas aceptoras. La clorofila P680 vuelve entonces a su estado reducido por la oxidacin de dos molculas de agua, y en el proceso se forma una molcula de oxgeno. La P700 vuelve a su estado reducido por el flujo de electrones del Fotosistema II a travs de compuestos intermediarios de oxidacinreduccin. La transferencia de dos pares de electrones del agua a travs del Fotosistema II al Fotosistema I ocasiona la fotofosforilacin acclica de dos molculas de ADP para producir dos

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molculas de ATP y dos de agua. Los dos pares de electrones liberados del Fotosistema I reducen dos molculas de NADP+ para formar dos de NADPH (+ H+). Por lo tanto, el resultado neto es:

Las dos molculas de ATP y de NADPH producidas por las reacciones luminosas que ocurren en las lamelas de los grana se utilizan en las reacciones sintticas (oscuras) que se llevan a efecto en el estroma. Estas ltimas reacciones fijan el CO2 en azcares. Por cada CO2 fijado, se requieren dos molculas de NADPH (y dos de H +) y tres de ATP. An no se sabe en qu punto se forma la tercera molcula de ATP; puede formarse en la fotofosforilacin cclica o en la fotofosforilacin seudocclica.

FOTOSNTESIS: REACCIONES SINTTICAS (REACCIONES OSCURAS)

1. CICLO DE CALVIN. La aclaracin de la secuencia de reacciones qumicas que dan como resultado la incorporacin del bixido de carbono en azcares y almidones dependi en gran medida del uso de istopos radiactivos. Utilizando bixido de carbono marcado con 14C, fue posible aadir 14 CO2 en tiempos conocidos a un sistema que mostraba una fotosntesis activa, detener el

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proceso un lapso breve despus e identificar entonces los compuestos en los cuales el bixido de carbono marcado se haba incorporado. La identificacin de los intermediarios que contenan 14C se llev a cabo utilizando las tcnicas combinadas de cromatografa en papel y radio autografa.

Figura 32: Etapas iniciales en la fijacin del CO2 durante la fotosntesis. C* = 14C, que traza la trayectoria del carbono a travs de la secuencia de reaccin. Enzimas: 1) RDP-carboxilasa o carboxidismutasa; 2) cido fosfoglicrico cinasa; 3) triosa fosfato deshidrogenasa; 4) isomerasa; 5) fructosa difosfato aldolasa; 6) fructosa difosfatasa.

Rubn y sus colaboradores demostraron primero que la forma activa del CO2 en el cloroplasto era el cido carbnico. M. Calvin y sus colaboradores determinaron la secuencia de reacciones que se producen despus de la formacin del cido carbnico y su entrada al cloroplasto. Aadieron I4CO2 a cultivos del alga Chlorella y dejaron que las clulas fotosintetizaran durante determinados perodos (por lo general entre 2 y 60 segundos). Las clulas del alga fueron entonces destruidas y los componentes celulares solubles extrados y concentrados. Los extractos que contenan el carbono radiactivo fueron tratados con cromatografa en papel y se identificaron las manchas que mostraban radiactividad. En 1961, Calvin recibi el Premio Nbel por esta serie de experimentos de gran importancia. Cuando se dejaba que la fotosntesis procediera en presencia de 14CO2 al cabo de nicamente 2 segundos, el principal compuesto marcado que pudo identificarse fue e! cido 3-fosfoglicrico (PGA). Al cabo de 7 segundos, se encontraron adems de este compuesto azcares, fosfatos y difosfatos. Una segunda exposicin a 14CO 2 durante 60 segundos produjo cido fosfoenolpirvico marcado (PEP), cidos carboxlicos y aminocidos. Con la utilizacin de in-

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tervalos distintos, se descubri la secuencia de reacciones completa, y se encontr que muchas de las etapas eran opuestas a las de la va glucoltica.

Figura 33: Resntesis de la ribulosa-1, 5difosfato. Enzimas: 1) transcetolasa; 2) aldolasa; 3) sedoheptulosa-1. 7difosfatasa; 4) transcetolasa; 5) isomerasa; 6} epmerasa; 7) cinasa.

En el estroma del cloroplasto, el CO 2 en la forma de cido carbnico reacciona con el azcar ribulosa difosfato (RuDP) para formar un compuesto de 6 carbonos inestable que se separa inmediatamente para formar dos molculas de cido 3-fosfogIicrico (PGA). La enzima que cataliza esta reaccin es la rbulosa-1, 5-difosfato carboxilasa y el carbono radiactivo del 14CO2 se incorpora al grupo carboxilo del PGA. El PGA se reduce entonces a 3-fosfogliceraldehdo (PGAL) en dos etapas. Primero, cada PGA es fosforilado por el ATP y reducido entonces por el NADPH. El ATP y NADPH fueron producidos por las reacciones fotoqumicas en las lamelas de los grana. As, por cada molcula de CO 2 fijada y convertida a PGAL, se requieren dos molculas de ATP y dos de NADPH. Estas reacciones son catalizadas por una cinasa y una deshidrogenasa. Parte del PGAL es isomerizado por la enzima triosa fosfato isamerasa para formar dihidroxiacetona fosfato (DHAP). La enzima aldolasa condensa entonces al PGAL y DHAP para producir fructosa-1,6-difosfato (FDP). La fructosa difosfatasa separa al grupo fosfato del

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primer carbono, produciendo fructosa-6-fosfato (F6P). Esta molcula puede convertirse entonces en fructosa, glucosa o almidn. Las molculas de F6P y PGAL se utilizan tambin para la resintesis de RuDP, se convierten tambin en eritrosa-4-fosfato (E4P) y xilulosa-5-fosfato (X5P). Una aldolasa cataliza entonces la condensacin de E4P y DHAP para formar sedoheptulosa-l,7difosfato (SDP), que se convierte entonces en sedoheptulosa-7-fosfato (S7P). La S7P y el PGAL reaccionan tambin para formar ribosa-5-fosfato (R5P) y X5P. La R5P es isomerizada entonces para formar ribulosa-5-fosfato (Ru5P). Esta ltima se forma tambin a partir de X5P. Finalmente, el ATP fosforila a la Ru5P para formar RuDP. Por cada molcula de CO 2 fijada, se consumen una RuDP, dos ATP y dos NADPH y se forma un azcar fosfato. En realidad, toda la RuDP se resintetiza. La fijacin de cada tres molculas de CO 2 da como resultado la formacin de seis molculas de PGAL. Cinco de stas son reciclados para volver a llenar la poza de RuDP. El PGAL extra es el producto fotosinttico y se utiliza para la sntesis de azcar y almidn. En la figura 34 se resumen todas las e tapas y el nmero de molculas requeridas que participan en las reacciones oscuras; la va se conoce como ciclo de Calvin.
Figura 34: Va del carbono en la fotosntesis. La molcula de PGAL del recuadro es el producto fotosinttico y se utiliza para la sntesis de almidn y azcar Ru5P, rbulosa-5fosfato; RuDP. Ribulosa-1,5difosfato; PGA, cido 3-fosfoglicrico; PGAL, 3-fosfogliceraldehdo; DAHP, dihidroxiacetona fosfato; F6P, fructosa6-fosfato; SDP, sedoheptu-losa-1,7difosfato; S7P, sedoheotuIosa-7fosfato; E4P, eritrosa4-fosfato; X5P, xilulosa-5-fosfato R5P, ribosa-5-fosfato; Pi, fosfato inorgnico.

Debido a que se consume ATP adicional en la formacin de RuDP, se requieren un total de nueve ATP y seis NADPH para la fijacin de tres molculas de CO2. Dado que se requieren seis molculas de CO 2 para producir una molcula de azcar de seis carbonos, se consumen 18 molculas de ATP en el proceso de fijacin (o tres ATP/CO2). Se estima que aproximadamente 5 X 1016 g de carbono se fijan anualmente a travs de la fotosntesis y esto corresponde a un almacenamiento de 20.1 X 1017 kJ. 4.8X 10 17 kcal. de energa. Debido a que aproximadamente 28.0 x 1021 kJ 6.7 X 1021 kcal de energa luminosa llegan a la Tierra cada ao, la fotosntesis captura slo el 0.0072%.

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Figura 35: Reacciones no lumnicas de la fotosntesis (ciclo de Calvin)

2. FOTOSNTESIS C4 (VA DE HATCH-SLACK). El ciclo C 3 o ciclo de Calvin no es la nica va metablica presente en las plantas para la fijacin del C0 2 . En 1967, M. D. Hatch y C. R. Slack demostraron que en algunas plantas el CO2 tambin es fijado en compuestos de 4 carbonos. Este mecanismo (que opera en conjunto con el ciclo de Calvin en las hojas de esas plantas) se conoce desde entonces como fotosntesis C 4 o va de Hatch-Slack. Las plantas que utilizan esta va (como por ejemplo, el maz, la caa de azcar y ciertas gramneas) se encuentran caractersticamente en ambientes ridos y poseen una anatoma foliar poco comn. En las hojas de plantas que utilizan slo el ciclo de Calvin, las reacciones C3 ocurren tanto en las capas del mesfilo en empalizada como en las del mesfilo esponjoso. Sin embargo, en plantas que llevan a cabo tambin las reacciones C4, el ciclo de Calvin ocurre nicamente en la capa de clulas de la vaina del haz que rodea a las venas de la hoja. Las reacciones C 4 se llevan a cabo en las capas del mesfilo que estn justo por debajo de la epidermis inferior y superior. Adems de su anatoma foliar poco comn, las plantas que utilizan la va de Hatch-Slack se caracterizan por sus elevadas tasas fotosintticas y de crecimiento, bajas tasas de fotorrespiracin y bajas tasas de prdida de agua a travs de los estomas de las hojas. Al igual que el ciclo de Calvin, la secuencia de reacciones que constituyen la va C4 (y las relaciones de esas reacciones con el ciclo de Calvin) se determin utilizando bixido de carbono marcado con 14C. Las reacciones se resumen en la figura 36. El bixido de carbono pasa del aire en torno a las hojas a travs de la epidermis hacia las clulas del mesfilo. Ah, el CO2 se condensa con el fosfoenolpiruvato (PEP, un compuesto de tres carbonos) para formar oxalacetato (un compuesto de 4 carbonos). La reaccin es catalizada por la enzima fosfoenolpiruvato carboxilasa.

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Figura 36: Fotomicrografa electrnica de las clulas del paquete de la vaina y de clulas del mesfilo adyacente. (Cortesa del Dr. C. C. Black, Plant Physiol. 47, 15, (1971)). El diagrama muestra las reacciones fotosintticas C4 asociadas a cada upo de clula.

En algunas especies vegetales, el oxalacetato se convierte luego en malato, mientras que en otras se convierte en aspartato. El malato (o aspartato) pasa entonces hacia las clulas del paquete de la vaina donde se descarboxila dentro de los cloroplastos de la clula. Como se observa en la figura anterior, el CO2 liberado posee el mismo tomo de carbono del CO 2 que entr a las clulas del mesfilo. Este bixido de carbono se incorpora entonces a las reacciones del ciclo de Calvin de las clulas del paquete de la vaina. Los compuestos de 3 carbonos formados despus de la descarboxilacin del malato o aspartato son transportados de regreso a las clulas del mesfilo, donde se convierten en PEP. Los azcares que se acumulan de las reacciones del ciclo de Calvin se convierten temporalmente en almidn bajo condiciones fotosintticas activas. En la noche o durante la oscuridad o luz tenue, los almidones se convierten de nuevo en azcares y son transportados fuera de la hoja por el tejido vascular de las venas (haces vasculares). La presencia de la va C4 puede parecer una adicin innecesaria al sistema del ciclo de Calvin. Sin embargo, hay datos que indican que el mesfilo tiene la capacidad de alcanzar una elevada concentracin de CO2 fijado a travs de este mecanismo, el cual podra presentar ventajas evolutivas. Adems, la fijacin y almacenamiento rpido y eficiente del CO2 como cidos de 4 carbonos disminuye la necesidad de la hoja de tener un gran nmero de estomas (aberturas de la epidermis de la hoja que permiten que el CO 2 y otros gases se difundan hacia la hoja). Los estomas abiertos, mientras permiten la difusin del CO2 en la planta, permiten tambin que el agua salga de ella, una desventaja para las plantas en climas ridos!

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3. METABOLISMO CIDO DE LAS CRASULCEAS.

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El metabolismo cido de las crasulceas (CAM) es una forma especial de metabolismo asociado a la fotosntesis que es llevada a cabo por los miembros de la familia de plantas Crassulaccae (hierbas suculentas como Sedum). Las plantas que llevan a cabo esta forma de metabolismo tienen sus estomas cerradas durante las horas del da y por lo tanto, no pueden absorber suficiente bixido de carbono para su fotosntesis. Sin embargo, durante las horas de la noche (en la oscuridad), los estomas se abren y las clulas de la hoja pueden fijar el CO2 en la oscuridad al combinarlo con el PEP para formar oxalacetato. El oxalacetato se convierte en malato para almacenamiento. Durante las siguientes horas del da, el malato se descarboxila, y el CO2 es utilizado por las reacciones del ciclo de Calvin. El piruvato de 3 carbonos que queda despus de la descarboxilacin se convierte primero en PEP y entonces en cido fosfoglicrico y es utilizado tambin por el ciclo de Calvin. El PEP requerido pan fijacin del CO 2 en la oscuridad proviene de parte del almidn producido a partir de los productos del ciclo de Calvin.

Figura 37: Principales etapas de reaccin de las fases oscura y luminosa del metabolismo cido de las crasulceas.

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OTROS PLASTOS
El cloroplasto es slo uno de los varios plastos distintos presentes en las clulas vegetales. Otros plastos como los etioplastos, amiloplastos y cromoplastos tienen estructuras y funciones distintas. Todos son llamados plastos debido a que parecen desarrollarse a partir de una estructura comn o uno de otro. Los proplastidios son estructuras pequeas, generalmente incoloras, presentes en clulas jvenes o en proceso de divisin. Tienen una estructura interna poco desarrollada, pero estn delimitados por una doble membrana. Adems, dan lugar a otros tipos de plastos. Los etioplastos abundan en las hojas de plantas que crecen en la oscuridad. Su estructura elipsoidal y algunas veces irregular est tambin limitada por una doble membrana. En su interior, los etioplastos contienen uno o ms cuerpos prolamelares paracristalinos y numerosas vesculas aplanadas llamadas tilacoides primarios. Los etioplastos, adems, se desarrollan en cloroplastos funcionales cuando son expuestos a la luz. La membrana externa del amiloplasto encierra al estroma, el cual contiene de uno a ocho grnulos de almidn. En ciertos tejidos vegetales como el tubrculo de papa, los grnulos de almidn dentro de los amiloplastos pueden llegar a ser tan grandes que rompen la membrana limitante. Dichos grnulos estn constituidos tpicamente de capas concntricas de almidn. Los cromoplastos contienen carotenoides y son las estructuras que imparten color (amarillo, anaranjado, rojo) a ciertas porciones de las plantas como los ptalos de la flor, el fruto y algunas races. Los cromoplastos de las zanahorias contienen grandes cantidades de lpidos que reducen su densidad total a menos de 1 g/ml; en consecuencia, durante la centrifugacin de homogeneizados de raz, los amiloplastos suben hasta la superficie del tubo. La estructura de los cromoplastos es bastante diversa; pueden ser redondos, elipsoidales o incluso en forma de aguja, y los carotenoides que contienen pueden encontrarse en gotitas o en estructuras cristalinas. La funcin de los cromoplastos no es clara, pero en muchos casos (por ejemplo, en flores y frutos) el color que imparten tiene quiz una funcin de atraccin para insectos y otros animales en la polinizacin o dispersin de las semillas. Se han descrito varios otros plastos que aparecen con menos frecuencia, como los elaioplastos llenos de aceite que incluyen a los esterinocloroplastos ricos en colesterol y los proteoplastos que poseen protenas.
Figura 38: a) Etioplasto en una clula de frijol cultivado en la oscuridad. Ntese el cuerpo prolamelar prominente dentro del organelo. Aumento, 29000X, b) Amiloplasto en una clula del cotiledn de una planta de espinaca. El organelo posee cuerpos prolamelares en los bordes de los grnulos de almidn. Aumento, 16000X. (Fotomicrografas cortesa del Dr. J. V. Possingham; copyright 1976.

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RESUMEN
En los eucariontes, la fotosntesis, al igual que las reacciones mitocondrales, est relacionada con la formacin de ATP e implica el transporte de hidrgeno y electrones en compuestos como el NADPH y los citocromos. Los dos procesos difieren en que la fotosntesis utiliza luz en lugar de sustratos qumicos como fuente de energa, el CO 2 y el agua son consumidos en lugar de producirse y el O2 y carbohidratos son producidos en lugar de ser consumidos. La reaccin general:

Puede dividirse en una fase luminosa (en la cual ocurre la fotolisis del agua) y una fase oscura (en la cual se produce la fijacin del CO2). En la fase luminosa, la luz visible absorbida por la clorofila o varios otros pigmentos que se localizan en los titacoides membranosos del cloroplasto. La energa luminosa excita a las molculas, inducindolas a reemitir luz o calor o a transferir su energa a las molculas de clorofila P700 P680. La activacin de la clorofila P680 desencadena las reacciones del Fotosistema II, las cuales generan ATP a travs del proceso llamado fotofosforlacin acclica y concluyen con la reduccin de la clorofila P 700. La absorcin de energa luminosa activa directamente al Fotosistema I. Este Fotosistema puede producir tambin ATP (mediante el proceso de la fotofosforilacin cclica) o la reduccin del NADP+ a NADPH. El ATP y NADPH transportados hacia el estroma del cloroplasto son consumidos en las reacciones oscuras. Durante las reacciones oscuras de las plantas C 3, el CO2 es fijado mediante su unin a la ribulosa difosfato y es reducido posteriormente por el NADPH. El ATP acta como la fuente de energa de estas reacciones endergnicas. El producto final son los carbohidratos, por lo comn en la forma de azcares, que pueden almacenarse como almidn. En las plantas C 4, el CO2 se fija primero como un cido de 4 carbonos en los cloroplastos de las clulas del mesofilo y es transferido entonces a las clulas del paquete de la vaina, donde ocurren las reacciones del ciclo de Calvin y se almacena el almidn. Los cloroplastos slo se encuentran en clulas vegetales eucarinticas. Se forman a partir de proplastidios, los cuales se transforman en otros plastos, como los cromoplastos y etioplastos, o bien a travs de la divisin de cloroplastos preexistentes. Los plastos asociados a la fotosntesis C3 tienen membranas internas dispuestas en capas y organizadas en grana. Los plastos asociados a la fotosntesis C 4 pueden tener una estructura semejante, pero suelen carecer de granas.

CITOCROMO
Es una protena de color oscuro que desempea una funcin vital en el transporte de energa qumica en todas las clulas vivas. Las clulas animales obtienen la energa de los alimentos mediante un proceso llamado respiracin; las plantas capturan la energa de la luz solar por medio de la fotosntesis. Los citocromos intervienen en los dos procesos. Tienen un anillo nitrogenado llamado porfirina que encierra un tomo metlico (de hierro o cobre, por ejemplo). El tomo metlico es el que da al citocromo el color oscuro caracterstico. Hay tres grandes tipos de citocromos llamados a, b y c. El a contiene cobre, mientras que los b y c contienen hierro. Los citocromos estn incorporados en la membrana celular de las bacterias y en las membranas internas de las mitocondrias (orgnulos presentes en las clulas animales y vegetales) y de los cloroplastos (que slo se encuentran en las clulas vegetales). Durante la respiracin y la fotosntesis, las molculas de citocromo aceptan y liberan alternativamente un electrn, que pasan a otro citocromo en una cadena de reacciones qumicas llamada transferencia de electrones, que funciona con liberacin de energa. Esta energa se almacena en forma de trifosfato de adenosina (ATP). Cuando la clula necesita energa, la toma de sus reservas de ATP.

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CONCLUSION
Como se ha podido ver a lo largo de toda la explicacin, puede casi afirmarse lo que vena sospechndose desde hace mucho tiempo. Aunque en un principio pudo parecer sacrlega, igual como pas con el Origen de las Especies de Darwin, la idea de que la clula eucariota procediese de la simbiosis de varias clulas procariotas tuvo muchas connotaciones. No fue slo el hecho aparente aqu detallado sino que supuso un duro golpe en el ego y la soberbia humana. Tradicionalmente, se ha estudiado la vida en la Tierra como un prlogo de la humanidad, todo lo que ocurri antes de nosotros parece tener como nico fin nuestra aparicin cuando, en realidad, la historia del hombre no representa ms de un uno por ciento de todo este tiempo. Las formas de vida inferior y carente de inteligencia nos parecen muy por debajo de nuestra especie y nos vemos con el derecho de manipular el ADN y hacer todo tipo de experimentos. Los conocimientos actuales, como la teora endosimbitica, nos han demostrado la insensatez de considerar al ser humano como especial ya que nos muestran, cada da ms claramente, nuestro lugar en la Naturaleza. Ahora parece ser que estos pequeos seres, adems de ser los cimientos de la vida y haber estado aqu desde el origen, forman parte de toda estructura viva y son necesarios para su supervivencia. Nosotros somos una representacin viva de toda la evolucin y no existiramos de no ser por el resto de animales, plantas y organismos con los que compartimos la Tierra. Por ello, es muy importante que no olvidemos el papel que juegan todos ellos para seguir conocindolos y aprendiendo sin destruirlos.

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BIBLIOGRAFIA

BIOLOGA CELULAR, 1era edicin. Mxico, Phillip Sheeler, 1993. http://images.google.com.pe/imgres http://www.mipagina.cantv.net/biologia_elangel/apuntes4.htm http://www.puc.cl/sw_educ/biologia http://recursos.cnice.mec.es/biosfera.

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