INFORME: SEPARACIN CROMATOGRFICA DE PIGMENTOS VEXETAIS

DATOS DE IDENTIFICACIN Nombre: Lab. de Ensayos Biotecnolgicos Centro: IESA Sardieira Direccin: Avenida de Sardieira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Corua (A) Provincia: A Corua Responsables: Pedro Ramn Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanesa Novs Velo, Elas Rivera Triana

Introduccin
A cromatografa en capa fina (CCF) unha forma de cromatografa de Adsorcin slido-lquido. unha tcnica importante usada para anlise rpida de mostras que nalgns casos poden estar no rango de 10-9g. Para a anlise dunha mostra por CCF utilizse un adsorvente slido coma o xel de slice (SiO2.H2S) ou almina (Al2O3), aplicada sobre unha placa rectangular de vidro, plstico ou alumnio. O adsorvente funciona como fase estacionaria. A mostra aplicada en solucin cun capilar de vidro nunha das extremidades da tarxeta, pero non sobre o bordo. De seguido, a placa introdcese nun tanque pechado, contendo un disolvente ou mestura de disolventes (fase mbil), de xeito que a tarxeta repousa sobre o fondo e co punto de aplicacin da mostra por enriba do nivel do lquido. O tanque contn unha atmosfera saturada no solvente, para o que se insire un anaco de papel de filtro. A fase mbil ascende por capilaridade, de xeito que se produce un avance maior ou menor dos compoentes da mestura segundo a sa polaridade.

Procedimiento
1. A preparacin das mostras Nun morteiro, esmagar unha folla de espinaca cunha mestura de 4mL de hexano e 2mL de etanol. Cunha pipeta Pasteur trasladar o extracto a un tubo de ensaio e homoxenizar a modo cunha cantidade igual de auga, impedindo a formacin de emulsins. Eliminar a fase acuosa mediante unha pipeta Pasteur e lavar sucesivamente, das veces con 2mL de auga para eliminar o etanol. Transferir a fase orgnica nun tubo de ensaio e engadir unha esptula de sulfato de sodio anhidro para eliminar a auga.

Grupo 3 - LACC2

INFORME: SEPARACIN CROMATOGRFICA DE PIGMENTOS VEXETAIS

DATOS DE IDENTIFICACIN Nombre: Lab. de Ensayos Biotecnolgicos Centro: IESA Sardieira Direccin: Avenida de Sardieira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Corua (A) Provincia: A Corua Responsables: Pedro Ramn Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanesa Novs Velo, Elas Rivera Triana
Preparacin da tarxeta de cromatografa. Marcar na tarxeta cunha punta de lapis, Unha lia que indique o punto de insercin da mostra (tres puntos). Cun capilar, depositar un pouco da solucin orgnica contendo pigmentos na tarxeta de cromatografa; depositar tres puntos diferentes concentracins. Para evitar a mestura difusa a travs da tarxeta, baleirar o contido do capilar de cada ves e soplar suavemente para secar o disolvente.

2. Desenvolvemento das placas Preparar varias mesturas de disolventes (Hexano, Cloroformo, Acetona, Etanol). Preparar uns 10mL de eluinte de cada vez, comezando cunha mestura de hexano/acetona 7:3 Resultados Unha boa separacin pode chegar a revelar a presenza de polo menos sete puntos de cores.

Grupo 3 - LACC2

INFORME: SEPARACIN CROMATOGRFICA DE PIGMENTOS VEXETAIS

DATOS DE IDENTIFICACIN Nombre: Lab. de Ensayos Biotecnolgicos Centro: IESA Sardieira Direccin: Avenida de Sardieira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Corua (A) Provincia: A Corua Responsables: Pedro Ramn Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanesa Novs Velo, Elas Rivera Triana

Informe

Parmetro Rf
Tarro 1: Fase mbil 1: 7ml hexanol + 3ml acetona

Parmetro Rf
Tarro 2: Fase mvil 2: 5ml etanol

Grupo 3 - LACC2

INFORME: SEPARACIN CROMATOGRFICA DE PIGMENTOS VEXETAIS

DATOS DE IDENTIFICACIN Nombre: Lab. de Ensayos Biotecnolgicos Centro: IESA Sardieira Direccin: Avenida de Sardieira, s/n, C.P.: 15007 Localidad: Corua (A) Provincia: A Corua Responsables: Pedro Ramn Agulleiro, Alejandra Castelo Naveira, Vanesa Novs Velo, Elas Rivera Triana

Parmetro Rf
Tarro 3: Fase mvil 3: 7ml acetona

Creo que a mellor mestura (das que nos utilizamos) para a separacin de pigmentos e a de hexanol e acetona, xa que apreciase con maior claridade as diferentes franxas de cor. Ademis que foi a fase mvil que mis rpido ascendeu.

Grupo 3 - LACC2