Denaturarea i renaturarea proteinelor

Denaturarea proteinelor O protein care posed o proprietate biologic proprie, unic, se numete protein nativ i ea se deosebete de proteina ce i-a pierdut aceast proprietate i pe care o numim de aceea denaturat. O protein denaturat i-a pierdut structura tridimensional sau n ali termeni conformaia sa. Denaturarea proteinelor implic ntreruperea i posibil distrugerea structurilor teriare i secundare. Reacia de denaturare nu este destul de puternic ca s distrug legturile peptidice, aadar structura primar (secvena de aminoacizi) ramne aceeai i dup denaturare. Ea distruge -helixul si -structura proteinei i o ncolcete ntr-o form ntmpltoare. Ageni denaturani Temperatura (60 70), acizii si bazele concentrate, unii solveni organici de felul alcoolului sau eterului, detergeni, ureea, unii ageni mecanici (agitare, ultrasunete), razele Rntgen i razele ultraviolete sunt ageni denaturani. nclzirea (temperatura) Prin nclzire se distrug legturile de hidrogen i interaciunele hidrofobe nepolare. nclzirea mrete energia cinetic i face ca moleculele s vibreze aa de rapid i violent nct legturile sunt rupte. Proteinele din ou sunt denaturate i se coaguleaz n timpul gtitului. Alte produse sunt gtite pentru a denatura proteinele, fcndu-le astfel accesibile enzimele (procesul de digestie decurge mai uor). Instrumentele medicale sunt sterializate pentru a denatura proteinele din bacterii, i aceasta conduce la moartea bacteriilor. Alcoolul Legturile de hidrogen se formeaz ntre gruprile amide n cadrul structurii secundare a proteinelor. Legturi de hidrogen se formeaz ntre laturile laterale n cadrul structurii teriare a proteinelor. Toate acestea pot fi rupte prin adiia alcoolului. Soluia de alcool de 70% este folosit ca dezifectant pentru piele. Aceast concentraie a alcoolului este capabil s penetreze peretele celular bacterian i s denatureze proteinele i enzimele din interiorul celulei. Soluia de alcool de 95% pur i simplu coaguleaz proteinele din exteriorul peretelui celular i previne ptrunderea n celul. Alcoolul denatureaz proteina prin ruperea legturilor de hidrogen intramoleculare ale lanului lateral. n loc, sunt formate legturi noi de hidrogen ntre partea lateral a lanului i molecula de alcool. Acizii i bazele Acizii i bazele perturb punile de sare inute mpreun de ncrcrile ionice. Punile de sare rezult din neutralizarea unui acid i o amina de pe lantul lateral. Reacia final este una ionic dintre grupa de amoniu pozitiv i grupa negativ

de acid. Orice combinaie a diferitor lanuri acide sau amine secundare aminoacide vor avea acest efect. Un tip de reacie de dubl nlocuire are loc acolo unde ionii pozitivi i negativi din sare ii schimb partenerii cu ionii negativi sau pozitivi n noua baz sau acid adugat. Aceast reacie are loc n sistemul digestiv cnd acidul gastric provoac coagularea laptelui. Sruri ale metalelor grele Srurile metalelor grele au practic acelai efect asupra proteinelor precum acizii i bazele. Srurile metalelor grele deseori conin Hg+2, Pb+2, Ag+1 Tl+1, Cd+2 i alte metale cu masa atomic mare. Deoarece srurile sunt ionice, ele perturb punile de sare din protein. Reacia dintre o sare a unui metal greu cu o protein deseori conduce la o sare metalo-proteic insolubil. Aceast reactivitate este folosit pentru proprietile ei de dezinfectante n aplicaii externe. De exemplu AgNO3 este folosit pentru a preveni infectrile de gonoree n ochi a nou-nascuilor. Nitratul de argint este, de asemenea, folosit n tratarea infeciilor nazale sau ale gtului, precum i s cauterizeze rnile. Srurile de mercur administrate ca i mercurocrom sau mertiolat au proprieti similare n prevenirea infectrii rnilor. Aceast reactivitate este folosit n sens invers n cazuri grave de intoxicare cu metale grele. n astfel de situaii, o persoan a inghiit o cantitate semnificativ de o sare a unui metal greu. Ca antidot, i se poate de administrat o protein precum laptele sau albuul de ou pentru a precipita sarea otrvitoare. Apoi i se administreaz un vomitiv pentru a induce voma, astfel ncit precipitatul de metalo-protein s fie expulzat din organism. Metalele grele ar putea de asemenea s distruga legturile bisulfidice din cauza afinitii i atraciei lor nalte pentru sulf i, de asemenea, va conduce la denaturarea proteinelor. Legturile disulfidice se formeaza prin oxidarea grupelor sulfhidril de la cistein. Diferite lanuri de proteine sau bucle dintr-un singur lant proteic sunt inute mpreun de legaturile covalente disulfide puternice. Dac agenii oxidani cauzeaz formarea legturilor disulfide, atunci agenii reductori, de sigur, acioneaz asupra oricaror legturi disulfidice pentru a le separa. Agenii reductori adaug atomi de hidrogen pentru a crea grupa tiol SH. Denaturarea poate fi reversibil sau ireversibil Un exemplu de denaturare ireversibil este cea termic aplicat la fierberea unui ou albuul oului (albumina) se coaguleaz astfel ireversibil. Denaturarea reversibil se poate realiza prin folosirea atent a unor reactivi ca ureea i mercaptoetanolul. Ureea distruge structura apei i de aceea limiteaz interaciunile hidrofobe ale catenelor laterale R i a resturilor de aminoacizi, ceea ce duce la deplierea i la disocierea moleculelor proteice. Mercaptoetanolul reduce legturile S-S. De aceea la ndeprtarea ureei i a mercatoetanolului, proteina s-ar putea renatura.

Renaturarea proteinelor Renaturarea este interpretat ca o dovad n sprijinul ipotezei c o protein avnd o structur primar corect se va plia n mod spontan conducnd la structura unic responsabil pentru activitatea sa biologic. Acest fenomen este denumit autoansamblare a proteinei. Astzi se tie c renaturarea proteinelor poate fi asistat pe dou ci. Una implic proteina disulfid izomeraza o enzim care are rolul de a corecta legturile S-S greit formate. A doua cale implic structurile tip chaperone. Ele se pot defini ca o familie de proteine din clase nenrudite care mediaz asamblarea corect a altor polipeptide dar care nu sunt componente ale structurilor funcionale asamblate.