DECIMO-PRIMERA PRCTICA: Oxitcicos, tocolticos y teratgenos EXPERIMENTO N1: Evaluacin de la motilidad uterina in vitro, en cuerno de rata.

Frmacos: Oxitocina 10 Ul/ml / / Ritodrina 50 mg/5ml // Ergonovina 200 mg/ml // Nifedipina 10mg/ml // Misoprostol 200ug/ml // Sulfato de Magnesio 10%. Cuerno uterino de rata

Especie:

CUADRO N1

EVALUACIN DELA MOTILIDAD UTERINA

100 80 60 40 20 0

Efecto

Discusin:

En este experimento se trata de demostrar el efecto de los diferentes frmacos sobre la motilidad uterina, teniendo en cuenta que algunos son estimuladores y otros disminuyen las contracciones uterinas. DISCUSIN: MISOPROSTOL Al utilizar misoprostol en el cuerno uterino in vitro de rata se evidenci su efecto sobre la motilidad uterina provocando un aumento en la frecuencia de las contracciones y se lo catalog con dos cruces, que significa un efecto de tipo moderado. Al administrar el misoprostol (anlogo sinttico oxitcico de la PGE1), acta sobre los receptores EP3 de forma selectiva de la membrana del msculo liso uterino. Estos receptores se encuentran unidos a protenas G, el cual tiene los siguientes efectos: Inhibicin de la adenililciclasa Disminucin del AMPc Apertura de canales Ca+2 voltaje dependientes (intra y extracelular) Aumenta Ca+ intracelular Luego produce contraccin uterina

RITODRINA Este frmaco produjo una relajacin de la musculatura lisa del tero , esto quiere decir que es un tipo de frmaco tocoltico. El efecto que produjo se catalog como uno de tres cruces, lo que significa que su efecto fue de tipo intensa. La ritodrina es un frmaco agonista beta 2 adrenrgico. El receptor 2 se encuentra acoplado a
la protena reguladora Gs (fijadora de nucletidos y con actividad GTPasa) constituida por tres subunidades ( , y ). En reposo, la subunidad est ligada a GDP y asociada con y . Cuando tiene lugar la formacin del complejo agonista-receptor, se estimula el recambio GDP por GTP y son liberadas las subunidades para fijarse a la adenilciclasa (AC) y estimularla. La AC activada cataliza ATP a AMPc que, a su vez, activa una proteincinasa A (PCA). La PCA fosforilar una serie de sustratos que determinarn la relajacin a travs de 2+ diversas vas. La relajacin se consigue reduciendo la concentracin de Ca intraclular o 2+ modificando la sensibilidad al Ca de las protenas contrctiles de diversos modos. Tambin se produce una inhibicin de la fosfodiesterasas y una modulacin de los canales inicos (activacin + 2+ de los canales de K o inhibicin de los canales de entrada de Ca ).

ERGONOVINA Con la administracin de ergonovina se pudo evidenciar un efecto estimulador sobre la

incrementa la fuerza y la frecuencia de las contracciones, adems de incrementar el tono. El tipo de contracciones que produce sobre el msculo liso es de tipo rtmica, permitiendo el retorno del
musculatura lisa uterina. Este frmaco

msculo uterino al tono basal. Despus de administrado el frmaco se catalog el efecto como uno de cuatro cruces. Esto significa que tuvo un efecto muy intenso sobre la musculatura lisa uterina a comparacin del misoprostol. El efecto de la ergonovina en el msculo uterino es sobre los receptores alfa 1 adrenrgicos. Estos receptores activan a la protena Gq, la cual estimula la accin de la fosfolipasa C (PLC), enzima que hidroliza los fosfolpidos de la membrana, entre ellos al fosfatidilinositol (PIP), dando origen a dos segundos mensajeros: diacilglicerol (DAG) y trifosfato de inositol (IP3):
El IP3 provoca la liberacin de calcio de los depsitos intracelulares, aumentando la concentracin intracelular de Ca+2, con lo que se activan todos los procesos calciodependientes. En este caso la contraccin muscular. El DAG estimula la actividad de algunas enzimas sensibles al Ca+2, como la fosfoquinasa C, que fosforila algunas protenas.

El Ca+2 se une a la protena dependiente de calcio, llamada calmodulina formando as el complejo calcio-calmodulina (Ca-CAM), que despus activa la miosina cinasa de cadena ligera (MLCK). La MLCK fosforila la cadena ligera de miosina (MLC) para conducir a la contraccin del msculo liso.

NIFEDIPINA Se le administr nifedipina al cuerno uterino de rata y se procedi a medir su efecto sobre la musculatura lisa. Lo que produjo fue una relajacin del tero. El efecto de la nifedipina sobre la musculatura lisa es a travs de la inhibicin de los canales de Ca+2 tipo L predominante en msculo liso. Este canal presenta algunos receptores de frmacos. Su estructura est compuesta de subunidades alfa 1 (la mayor, que forma el poro), as como alfa2, gamma y delta. La difedipina se liga a un sitio en la subunidad alfa 1. La fijacin del frmaco aminora la frecuencia de abertura en reaccin a la despolarizacin. Al disminuir la entrada de calcio, este ya no se combina con la calmodulina para formar un complejo que transforma la enzima cinasa de cadena ligera de miosina hasta su forma activa (MLCK). Esta ltima ya no fosforila las cadenas ligeras de miosina y no inicia la interaccin de la miosina con la actina. Por lo tanto, una disminucin intensa en la corriente de calcio transmembrana hace que se produzca relajacin de la musculatura lisa pero, esta no de mucha intensidad. Al finalizar el experimento se catalog a la nifedipina con dos cruces. Esto significa que tuvo un efecto moderado sobre la motilidad uterina in vitro, en cuerno uterino de rata. OXITOCINA

Luego del lavado del cuerno uterino de rata se procedi a administrarle 0.10ml de oxitocina, se esper unos segundos y se continu con la toma de resultados. Los efectos de la oxitocina sobre la musculatura lisa uterina fueron los de aumentar las contracciones tipo rtmicas, y a diferencia de otros oxitcicos la oxitocina permite que la musculatura lisa regrese a su tono basal como tambin ocurre con los alcaloides derivados del Ergot. La oxitocina acta sobre receptores especficos (OT) acoplados a la protena G y activa el sistema de segundo mensajero de fosfoinositida-calcio, para contraer el msculo liso uterino. El dominio alfa Gq activa a la fosfolipasa C (PLC), esta a su vez lo hace cataliza la degradacin del PIP2 en diacilglicerol (DAG) y inositol trifosfato (IP3). Este ltimo acta fosforilando los canales d calcio situados a ni vel del retculo sarcoplsmico y produciendo la liberacin de calcio (Ca+2) al citosol. El Ca+2 se une a la protena dependiente de calcio, llamada calmodulina formando as el complejo calcio-calmodulina (Ca-CAM), que despus activa la miosina cinasa de cadena ligera (MLCK). La MLCK fosforila la cadena ligera de miosina (MLC) para conducir a la contraccin del msculo liso. Pero, el efecto de contraccin del msculo liso uterino por la oxitocina se da principalmente por su estimulacin sobre la sntesis de prostaglandinas. El DAG activa a la proteinquinasa C (PKC), la cual convierte la fosfolipasa A2 en una fosfolipasa A2 activa. Esta ltima enzima acta sobre el fosfatidil glicerol que se encuentra en la membrana celular transformndola en cido araquidnico. La COX-1 acta sobre el cido araquidnico produciendo principalmente la prostaglandina E2 y la F2. La PGF2 estimula la contraccin del cuerpo uterino, mientras que la PGE2 acta sobre el cuello relajndolo. SULFATO DE MAGNESIO Se le administr 0.50 ml de sulfato de magnesio al cuerno uterino de rata y se procedi a registrar sus efectos. Luego de unos segundos se evidenci una disminucin en la motilidad uterina, comprobndose el efecto tocoltico de este frmaco. Al final se le catalog como una accin con dos cruces, esto significa que tuvo un efecto moderado sobre el msculo liso uterino. El mecanismo de accin del sulfato de magnesio no est bien dilucidado pero, la accin ms aceptada es la de una competicin antagonista con el calcios sobre los canales de calcio de tipo L en la membrana celular, disminuyendo las concentraciones intracelulares del calcio necesarias para la interaccin actina-miosina. Altos niveles de magnesio incrementa los niveles de AMPc, reduciendo el calcio intracelular. El aumento del AMPc activa a la proteincinasa A (PCA). La PCA fosforilar una serie de sustratos que
determinarn la relajacin a travs de diversas vas. La relajacin se consigue reduciendo la 2+ 2+ concentracin de Ca intraclular o modificando la sensibilidad al Ca de las protenas contrctiles de diversos modos. Al disminuir la entrada de calcio, este ya no se combina con la calmodulina

para formar un complejo que transforma la enzima cinasa de cadena ligera de miosina hasta su forma activa (MLCK). Esta ltima ya no fosforila las cadenas ligeras de miosina y no inicia la

interaccin de la miosina con la actina. Por lo tanto, una disminucin intensa en la corriente de calcio transmembrana hace que se produzca relajacin de la musculatura lisa.