ETEC SUZANO

EXPERIMENTO N02

ESPECTROFOTOMETRIA UV -VISVEL

Graziela Dantas Gonzaga -N15 3 Qumica Noite Quimica Instrumental Professora Marli

SUZANO AGOSTO DE 2013

1- OBJETIVO
Treinar o manuseio bsico do espectrofotmetro de feixe simples, Observar a propriedade e a curva de absoro do permanganato de potssio e observar a relao entre transmitncia e absorbncia atravs do uso das leis de Beer Lambert.

2- INTRODUO TERICA
A espectrosfotometria um mtodo de anlise ptica utilizado em pesquisas biolgicas e fisico-qumicas. Esse mtodo serve para comparar e indicar a radiao absorvida e transmitida por uma soluo nal qual no se conhece o soluto e suas concentraes. Isso se torna possvel pelo fato de todas as substncias absorverem energia. Essa absoro ocorre quando um feixe de luz atravessa a substncia e consequentemente parte dessa energia ser absorvida. Ela tambm diretamente ligada concentrao, ou seja, quanto mais concentrada maior a absoro. Outro fenmeno que ocorre a transmitncia que esta diretamente relacionada absrvancia, entretanto consiste na radiao no absorvida pela substncia e que chega at nossos olhos com frequencia visvel. a transmitncia que nos possibilita ver as cores. Existem clculos que podem ajudar nos clculos da transmitncia levando em considerao os feixes de luz que incidem e os que so transmitidos, entretanto tambm ser calculado a trasmio de luz do material onde a soluo est armazenada. TRANSMIO = It /Io Onde: It: total de luz transmitida, Io: total de luz que incide. J para se calcular a absro, termo mais aceito, faz-se uso do logartimo inverso do valor de transmitncia, assim: A= LOG 1/T A Lei de Lambert-Beer estabelece uma relao exponencial entre a transmisso da luz em uma sustncia e sua concentrao, assim temos: A=exlxc

Onde: e: constante de coeficiente molar; c: concentrao; l: a distncia que a luz atravessa a substncia.

Fazendo a anlise da equao pode-se deduzir que a absorbncia uma funo linear da concentrao. Na espectrofotometria, a fonte de radiao emite at a regio ultravioleta do espectro. Desta radiao selecionam-se comprimentos de onda definidos que constituem bandas, com largura menor que 1nm. O instrumento utilizado para este procedimento o espectrofotmetro. O espectrofotmetro um aparelho que faz passar um feixe de luz monocromtica atravs de uma soluo, e mede a quantidade de luz que foi absorvida e a luz transmitida por essa soluo. Usando um prisma (difrator), o aparelho separa a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda. Para se obter informao sobre a absoro de uma amostra, ela inserida no caminho ptico do aparelho. Ento, luz UV e/ou visvel em certo comprimento de onda (ou uma faixa de comprimentos de ondas) passada pela amostra o que nos permite sabe a quantidade de luz absorvida ou transmitida pela amostra em determinado comprimento de onda. Para determinao da concentrao de um soluto em uma amostra por espectrofotometria, temos a comparao da absorbncia da amostra com uma soluo padro, na qual j conhecida a concentrao do soluto. Em geral, utilizada uma soluo-padro com diferentes concentraes (padres de referncia), que tem sua absorbncia determinada. Esses padres so preparados diluindo-se a soluo-padro na proporo necessria para a obteno das concentraes desejadas. Com os valores de absorbncia e de concentrao conhecidos, pode-se traar um grfico cujo perfil conhecido como curva-padro ou curva analtica. Nesse grfico, a reta indica a proporcionalidade entre o aumento da concentrao e da absorbncia e a poro linear correspondente ao limite de sensibilidade do mtodo espectrofotomtrico para o soluto em questo. A espectrofotometria molecular tambm pode ser influenciada por alguns parmetros tais como a natureza do solvente, o pH da soluo e a presena de substncias interferentes, dentre outros.

Os efeitos desses parmetros devem ser conhecidos e as condies para anlise escolhidas de maneira que as pequenas variaes de suas grandezas no afetem de forma significativa a absorvncia

de mxima absoro (nm) 380 420 420 440 440 470 470 500 500 520 520 550 550 580 580 620 620 680 680 780

Cor absorvida Violeta Violeta/azul Azul Azul/verde Verde Amarelo/verde Amarelo Alaranjado Vermelho Roxo

Cor observada Verde/amarelo Amarelo Alaranjado Vermelho Roxo Violeta Violeta/azul Azul Azul/verde Verde

Tabela de comprimento de onda e cor caracteristica na regio do UV Vis. A sensibilidade de um mtodo espectrofotomtrico (ou fotomtrico) governada pela Os fatores que podem mudar a absortividade molar da espcie absorvente so: Estrutura eletrnica da molcula absorvente, ou seja, dos tipos de transies

possveis que ela pode sofrer. Probabilidade de transio; Comprimento de onda da radiao incidente (); Natureza solvente; ndice de refrao do meio (ni).

Dentre outras variveis que podem influenciar no espectro de absorbncia de uma substncia podemos citar: natureza do solvente, pH da soluo, a temperatura, as concentraes do eletrlito e a presena de substncias interferentes.

3- PARTE EXPERIMENTAL
3.1 MATERIAIS Becker de 40 ml Esptula Balo volumtrico de 25ml Pipeta graduada de 10ml Espectrofotmetro modelo Nova 1600W 3.2 REAGENTES KMnO4 H2O destilada

3.3 PROCEDIMENTO
Preparou se 100ml de uma soluo estoque de permanganato de potssio (KMnO4 Massa Molar = 158,034 g/mol), que posteriormente foi utilizada para a preparao de outras cinco solues que foram usadas como padro para a montagem da curva de calibrao (tabela1). Aps a preparao das solues, calibrou-se o equipamento e, atravs de rastreamento e uso do branco com intervalo de 20 em 20 a partir de 500nm, determinou se o melhor comprimento de onda para leitura da amostra (525nm) e a partir da montou se a curva de calibrao. Para efetuar as diluies das amostras para a calibrao, transferiu se os volumes conforme a tabela 1.

SOLUO 1 2 3 4 5
Tabela 1- diluio

C1 (g/l) 0,5 0,5 0,5 0,5 0,5

V1(ml) 1 1,5 2,0 2,5 3,0

C2 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06

V2 (ml) 25 25 25 25 25

Atravs do seguinte calculo: C1 x V1 = C2 x V2 determinou se a concentrao das solues. Onde: C1= concentrao inicial V1= volume inicial C2= concentrao final V2= volume final. Com as concentraes definidas, foi possvel fazer o clculo da concentrao molar atravs da equao M = massa do soluto /massa molar do soluto. Aps a preparao dos padres, analisou se um a um dentro do comprimento de onda de 525 nm. Os resultados obtidos encontram se inseridos na tabela 2 SOLUO Pb 1 2 3 4 5 Amostra 01 Amostra 02 CONCENTRAO (Mg/L) 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 T% 100 46,7 33,2 22,6 14,4 10,3 33,8 23,5 CONCENTRAO MOL/L (10-4) 1,26 1,90 2,53 3,16 3,80 Abs. 0 0,3306 0,4788 0,6458 0,8416 0,9781 0,4749 0,6289

Tabela 2 absorbncia e transmitncia em comprimento de onda de 525nm.

partir dos resultados da tabela 2, montou se a curva padro.

4 DISCUSSO DE RESULTADOS
Com a obteno da concentrao e absorbncia das solues, montou se um curva padro para posterior anlise das amostras 1 e 2. A curva foi determinada atravs da seguinte equao: Y= bx +a, onde: Y = sinal obtido atravs da leitura do aparelho (no caso Absorbncia) B = coeficiente angular X= concentrao A= coeficiente linear. O grfico 1, mostra a curva de calibrao pronta, e pode se perceber um pequeno desvio na amostra 4 que pode ter sido ocasionado por um erro de aferio no momento em que houve a

diluio da soluo, erros mnimos podem causar grandes desvios, j que esse tipo de anlise trabalha com propores muito pequenas, mas de qualquer forma ele obedece a lei de Beer Lamber que diz que com o aumento da concentrao, aumenta se tambm a absorbncia. O inverso ocorre no caso em que se analisa a transmitncia me relao concentrao, o que tambm um fator que obedece a lei de Beer Lambert (grfico 2).

1.2 1 absorbancia 0.8 0.6 0.4 0.2 0 -0.2 0 0.01

Absorbancia x concentrao.

y = 16.565x - 0.0048 R = 0.9989

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

0.07

concentrao Series1 Linear (Series1)

Grfico 1 absorbncia x concentrao.

Transmitancia x concentrao
0.07 0.06

concentrao

0.05 0.04 0.03 0.02 0.01 0 0 20 40 60 transmitancia 80 100 120

Grfico 3 transmitncia em relao concentrao.

Aps a montagem da curva de calibrao, e posterior analise das amostras, tornou se possvel determinar as respectivas concentraes, o clculo usado para determinao da concentrao, foi o mesmo usado anteriormente para a montagem da curva padro.

SOLUO PROBLEMA 1 2

T (%)

ABS.

FATOR DE CORREO

CONCENTRAO (mol/L)

23,9 37,0

0,622 0,421

10 10

2,9.10-1 3.810-1

Tabela 3 valores de correspondncia s solues problema.

5- CONCLUSO
A realizao do experimento completo, de forma geral, pode ser entendido como: utilizando um espectrofotmetro, obter a o espectro de absoro do permanganato de potssio e atravs da determinao do comprimento de onda, montar uma curva padro atravs da mesma determinar a concentrao de solues problemas. O experimento tambm nos leva a observar o quo importante a preciso durante o preparo das solues e a calibragem dos equipamentos, esses procedimentos junto ao manuseio correto do equipamento, diminui muito os riscos de desvios. O resultado da anlise ocorreu dentro do esperado, j que o comprimento timo para anlise do permanganato de potssio foi identificado no comprimento de onda de 525nm, este valor est prximo do encontrado na literatura (520), o que mostra um resultado coerente da anlise.

A absortividade molar de certa substncia 14.000 m-1cm-1 no comprimento de onda mximo de absoro. Calcular a molaridade dessa substancia que pode ser medida no espectrofotmetro com clula de 1cm, para uma absorbncia de 0,850. Resposta: Formula para o clculo: A = x b x c, onde A= absorbncia = absortividade molar b = caminho ptico (espessura da cubeta). c = concentrao (mol/l)

0,850 = 14000 . 1.c 0,850 = 14000c C= 0,850/14000 C= 6,07 x10-5 mol/l

6- BIBLIOGRAFIA http://www.rc.unesp.br/ib/bioquimica/esp.pdf DATA :29/08/2013 20:15 http://www.ufrgs.br/leo/site_espec/ DATA: 31/08/2013 16:25 Cetef qumica RJ Analise instrumental Espectrofotometria. Pdf