Mtodos Analticos em Bioequivalncia e Frmacos

Prof. Dr. Emanuel Carrilho Instituto de Qumica de So Carlos - USP

Bioequivalncia
MEDICAMENTOS GENRICOS !Lei 9787 - 10 / 02 / 1999 !Resoluo 391 - ANVS/MS - 09 / 08 / 1999

Frmacos e Excipientes
!Frmacos descritos ou no em compndios oficiais: informar as empresas fabricantes e a rota de sntese. !Os mtodos analticos: identificar e quantificar os principais contaminantes dos frmacos.
!Os excipientes descritos em compndios oficiais: cita-se a literatura !Os excipientes no descritos em compndios oficiais: apresentar especificaes e mtodos de anlise adotados

Frmacos e Excipientes
ENSAIOS FARMACOPICOS ! Identificao ! Contaminantes ! orgnicos ! inorgnicos ! Atividade ptica

Bioequivalncia
! ASPECTOS FARMACOCINTICOS ! Efeito versus tempo ! Parmetros medidos

EFEITO x TEMPO David Bourne. - Pharmaceutics III - Pharmacokinetics and Biopharmaceutics, 1999

PARMETROS MEDIDOS David Bourne. - Pharmaceutics III - Pharmacokinetics and Biopharmaceutics, 1999

Bioequivalncia
! ETAPA CLNICA ! ETAPA ANALTICA ! ETAPA ESTATSTICA

Bioequivalncia
ETAPA CLNICA ! voluntrios ! sade ! idade ! peso ! estado enzimtico ! boas prticas clnicas ! conselho nacional de biotica ! pesquisador mdico

Bioequivalncia
ETAPA ESTATSTICA ! STATISTICA 6.0 for Windows ! GraphPad Prism TM

Bioequivalncia
ETAPA ANALTICA ! ! ! ! ! Pessoal qualificado Mtodos analticos Equipamentos Validao de mtodos Boas Prticas de Laboratrios de Ensaios

Mtodos Analticos
! Mtodos Eletroanalticos ! Mtodos Trmicos ! Mtodos Cromatogrficos
! Cromatografia em fase gasosa (HRGC ou GC) ! Cromatografia em fase lquida (HPLC ou LC) ! Eletroforese Capilar (HPCE ou CE)

! Mtodos Espectroscpicos
! Espectrometria de massas (MS) ! Infravermelho (IR) e ressonncia magntica nuclear (NMR)

Introduo

Cromatografia Lquida acoplada a Espectrometria de Massas (LC-MS)

Introduo
! LC provm a separao, em fase lquida, de misturas complexas, porm dificilmente fornece a identificao positiva de componentes individuais.

Cromatografia Lquida

Introduo
! MS uma tcnica que auxilia na elucidao estrutural de compostos (identificao), porm dificilmente apropriado para a anlise de misturas.

Espectrometria de Massas

Misturas em MS

Introduo
! LC opera em fase lquida enquanto que MS opera em fase gasosa, sob alto vcuo. ! O uso de uma interface necessrio para ter compostos seqencialmente separados em LC e introduzidos para anlise no MS.

Combinando LC com MS

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Aquisio dos Dados

Elevado nmero de espectros por pico

Melhorando os Resultados
Obter a maior eficincia possvel

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Melhorando os Resultados
Apresentao de cromatograma de on selecionado

Melhorando os Resultados
Monitoramento de on selecionado (SIM)

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Aplicaes de LC-MS na Anlise de Compostos Farmacuticos

! LC-MS
! Separao e determinao massa molecular

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Estudo de Metablicos

Aplicaes de LC-MS na Anlise de Compostos Farmacuticos

! LC-MS
! Separao e determinao massa molecular

! LC-MS-MS
! Separao, MM e informao estrutural (identidade) ! Excelente sensibilidade e quantificao

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Aplicaes de LC-MS
! LC-MS
! Separao e determinao massa molecular

! LC-MS-MS
! Separao, MM e informao estrutural (identidade) ! Excelente sensibilidade e quantificao

! MS de alta resoluo
! Identificao positiva de metablicos

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Sumrio
! O interfaceamento de LC com MS resulta
em um poderoso instrumento de LC/MS que pode ser usado para anlises de misturas complexas, originada das mais variadas fontes. Aplicaes de interesse nas reas de farmacologia, meio ambiente, arqueologia, mdica, e forense, alm de qumica e bioqumica.

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