UNIVERSIDAD NACIONAL DE SAN AGUSTN

FACULTAD DE CIENCIAS BIOLGICAS Y AGROPECUARIAS ESCUELA PROFESIONAL Y ACADMICA DE BIOLOGA

SEMINARIO DE EDAFOLOGA:

Evaluacin de la calidad de suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional mediante nematodos bioindicadores

INTEGRANTES: Apaza Castillo, Gladys Anglica Mamani Barreda, Katherine Pocohuanca Abarca Susan

AREQUIPA PER 2013

Evaluacin de la calidad de suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional mediante nematodos bioindicadores

I. II.

RESUMEN INTRODUCCIN

El modelo de una agricultura sostenible demandado por la sociedad y propuesta por los organismos internacionales fomenta el cambio de un tipo de produccin agraria intensiva, con una excesiva confianza en los agroqumicos, por otro en el que se integren prcticas agrcolas compatibles con el respeto al medio ambiente. En el suelo es fundamental para la produccin agrcola pero tambin debido a que en l se dan procesos importantes que sustentan el bienestar humano en el que intervienen directamente los microorganismos del suelo entre los ms importantes se citan a los nematodos, colmbolos y caros que han sido considerados como indicadores biolgicos, los nematodos han sido considerados bioindicadores con ms frecuencia debido a un mayor conocimiento de su taxonoma e historia natural.

El desarrollo y evaluacin de ndices o indicadores que proporcionen informacin sobre la estructura y funcin de los procesos ecolgicos en los suelos supone, por lo tanto, el primer y fundamental paso a la hora de decidir que agroecosistemas pueden considerarse como sostenibles. El estudio de los indicadores biolgicos del suelo como los nematodos nos brinda una importante informacin de gneros y especies que sean especialmente sensibles o tolerantes a impactos especficos de determinadas prcticas agrcolas. Un agroecosistema sostenible no solo se basa en obtener una produccin mxima sino un respeto a la biota presente en el suelo que puede variar negativa o positivamente segn las prcticas agrcolas que se realicen en l, es por eso que es importante conocer el comportamiento poblacional de los indicadores biolgicos como los nematodos en la agricultura ya que estos estn directamente relacionados a las plantas.

III.

OBJETIVOS Objetivo General

Evaluar la calidad de suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional mediante nematodos bioindicadores Objetivos Especficos Determinar las propiedades fisicoqumicas de suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional Aplicar y comparar ndices ecolgicos de nematodos en suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional. Relacionar y comparar las propiedades fisicoqumicas y los ndices ecolgicos de los suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional mediante el anlisis de los nematodos bioindicadores. Determinar el estado de conservacin y fertilidad de los suelos evaluados mediante el anlisis de los nematodos bioindicadores. Realizar un diagnstico del estado de la red trfica en suelos cultivados de Zea mays L. maz con manejo semiorgnico y convencional

IV.

MATERIALES Y MTODOS

La presente investigacin se desarrollar en el laboratorio de suelos del departamento acadmico de Agronoma para el anlisis de propiedades fisicoqumicas y en el laboratorio de Nematologa del departamento acadmico de Biologa para el anlisis nematolgico, pertenecientes a la Universidad Nacional de San Agustn, entre los meses de Octubre y Noviembre del 2013.

4.1.

Zona de muestreo

Se localizaron cultivos de Zea mays L. maz de aproximadamente 2 meses de edad en el distrito de Quequea cuyo manejo agrcola es semiorgnico (uso de azufre en el suelo), y a la vez se eligi este mismo cultivo en el distrito de Sabanda cuyo manejo agrcola es convencional.

4.2.

Tcnica de muestreo de suelo

La muestra es representativa del cultivo y para ello se muestre en diversos puntos siguiendo un zigzagueo hasta obtener 21 subunidades (Anexo 2), con una profundidad de muestreo de 10-25 cm. Se consider los siguientes pasos para la coleccin: Eliminar los primeros 5 cm de la superficie del suelo. Colectar porciones de tierra o planta, dentro de los puntos de muestreo hasta obtener un 500 g por subunidad. La profundidad de muestreo es hasta la capa arable, es decir que la muestra fue tomada hasta 10-25 cm a partir de la superficie del suelo.

Las condiciones para el transporte del material fueron: El material muestreado fue colocado dentro de una bolsa de plstico. La bolsa con el material colectado fue sellado y colocado dentro de otra bolsa, se coloc una etiqueta con la informacin necesaria en medio de ambas bolsas. Evitar el calentamiento y resecado de las muestras. Se mantuvo en refrigeracin a 4-6 C, hasta la revisin de la muestra. 4.3. Anlisis Fisicoqumico del suelo

4.3.1. Clase Textural del suelo Se pes 50 gr. De TFSA (Tierra Fina Seca al Aire) para transferirlo al vaso de dispersin, luego se adiciona agua destilada hasta 2/3 del volumen total, y 10ml de solucin de hexametafosfato de sodio para dispersar durante 15 minutos. En la transferencia de la suspensin de suelos a la probeta se tuvo cuidado de que no quede suelo dentro del vaso de dispersin, se enraz con el hidrmetro dentro de la probeta.

Antes de homogenizar la suspensin hasta que desaparezca sedimentos de la base de la probeta se retira el hidrmetro y luego se reintroduce inmediata y cuidadosamente dentro de la suspensin y poder leer exactamente a los 40 segundos, esta fue la primera lectura realizada y la segunda lectura se hizo a las 2 horas. Se midi la temperatura de la suspensin por cada lectura. El hidrmetro ha sido calibrado para indicar los gramos de slidos suspendidos por litro de suspensin a una temperatura de 68 F. En los clculos se corregi la lectura que registra el hidrmetro, por efecto de la diferencia de temperatura de calibracin del hidrmetro y de la suspensin. El factor de correccin encontrado es de 0.2 g/l por cada grado Fahrenheit de diferencia entre la temperatura de calibracin del hidrmetro y el de la suspensin. Si la temperatura de la suspensin es mayor que la temperatura de calibracin del hidrmetro se aadi el factor de correccin al valor registrado en las lecturas, si la temperatura es menor que la temperatura de calibracin del hidrmetro se rest el factor de correccin al valor registrado en las lecturas. 4.3.2. pH Se utiliz 20 gr. de TFSA, es decir, en suspensiones de 1:1 en agua destilada, agua; luego se homogeniz la suspensin con vaguetas 2 a 3 minutos cada 5

minutos hasta llegar a 20 minutos. Se calibr el potencimetro con buffer.

4.3.3. Capacidad de Intercambio Catinico Se colocaron 5 g de suelo dentro de un embudo con papel filtro. Los lavados del suelo se dieron en el siguiente orden: a. Agua destilada para eliminar los iones solubles. b. 100 ml de acetato de amonio. c. Alcohol etlico para remover el exceso de NH4 . El lavado con alcohol termina cuando se obtiene reaccin negativa al reactivo de Nessler. d. 100ml de KCl 1N para desplazar el NH4 adsorbido, colectandose el filtrado. Por ltimo se tom una alcuota de 20ml de filtrado, y fue colocado dentro de un baln micro Kjeldhal. La destilacin fue usando soda 10N y se recibi el destilado en cido brico al 2% ms indicador mixto para titular la solucin con HCl 0.01 N.
+ +

V = ml de HCL gastados en la titulacin.

p = peso de suelo

4.3.4. Materia Orgnica En un erlenmeyer de 250ml se coloc 1 g de suelo adicionando 10 ml de dicromato de potasio 1N y 10 ml de cido sulfrico, mezclando para homogenizar. Luego de la reaccin se agreg una cantidad de agua destilada para dar volumen, ms 5 ml de H PO QP y 3-4 gotas de indicador difenil amina sulfrica.
3 4

Se titul en forma lenta con sulfato ferroso hasta cambio de color llevando en forma paralela un blanco.

= Normalidad del sulfato ferroso.

-3

0.39 = 3 x 10 x 100 x 1.3 1.73 = factor de recuperacin (77%). V1 = Volumen del sulfato para el blanco. V2 = Volumen del sulfato para muestra. p = peso de suelo

4.3.5. Sales Preparacin de la pasta de suelo saturada Se prepar una pasta saturada de suelo al igual que para determinar pH cubriendo el vaso con una luna de reloj y dejando en reposo por 1 hora. La pasta se filtr usando embudo Buchner y bomba de vaco.

Lectura de la conductividad elctrica (CE) Se calibr el equipo con la lectura de la solucin de KCl, a 1.413 mS/cm. Luego se procedi a tomar la lectura de los extractos acuosos de las muestras, registrando el valor de la conductividad elctrica en mS.cm-1 (miliSimens/cm)

4.4.

Anlisis Nematolgico

4.4.1. Mtodo de centrifugacin en azcar

Cada muestreo de suelo se someti bajo el mtodo de centrifugacin en azcar; colocando 100 cc de suelos en un envase graduado de 2 litros y completando con agua hasta 200 ml luego se agitar con una esptula para desmenuzar el suelo y este se suspende en el agua, se agrega 500 ml ms y se agita nuevamente para facilitar la separacin de los nematodos de las partculas del suelo. Dejando reposar 10 segundos para que las partculas ms grandes del suelo sedimenten para pasar la suspensin a travs del tamiz de 500 um sobre otro recipiente o balde, adems se elimina los restos que han quedado sobre el tamiz, luego esta suspensin se tamiz en el tamiz de 50 um, en el cual al ser lavado se obtuvo una nueva suspensin. La suspensin se traslad a un tubo centrifuga de 10 a 15 cc agregndole solucin de azcar al 34.5 % hasta completar el tubo; agitando nuevamente para resuspender el suelo y los nematodos se colocaron los tubos a centrifugacin 2500 rpm durante 1 minuto. Los nematodos flotaron en la solucin de azcar y las partculas del suelo sedimentaron en el fondo del tubo. Tras la centrifugacin se someti el tubo con solucin a un tamiz de 50 um e inmediatamente se enjuag con agua corriente eliminando el azcar y evitando la plasmlisis de los nematodos. Por ltimo pas por un solo lado del tamiz de 35 um donde se concentraron estos y al ser enjuagados con una pizeta el lquido se recepcion en un vaso precipitado de 100 cc. Con ayuda de una pipeta 5 ml se trasladaron a una placa Petri para observacin en estereoscopio y contar a posterior los nematodos.

4.4.2. Mtodo de la Bandeja Se coloc un colador de malla dentro de la bandejita de tal manera que quede suspendido en esta. Luego se dobl tres cuadriculas de papel higinico dentro de la malla, de modo que cubri completamente el interior de este. Con una esptula de manera representativa, se coloc suelo muestreado en un vaso de 100 cc hasta su lmite; esta muestra representativa se ech sobre el papel higinico. Posteriormente se procedi al llenado por un costado entre la bandejita y la malla con agua de grifo a un bajo volumen hasta que el agua cubra el suelo. Luego de 48 horas se retir el suelo, el agua de la bandejita con los nematodos se pas por un tamiz de 50 micras colectando en una placa Petri los nematodos del tamiz. La observacin fue al estereoscopio haciendo el contaje respectivo.

4.5.

ndices ecolgicos evaluados de la poblacin de nematodos edficos Abundancia

La clasificacin de los nematodos edficos ser fundamentalmente en cinco grupos trficos: I y II) Microvoros, que se alimentan de bacterias (bactervoros) y hongos

(fungvoros), III) Herbvoros, que se alimentan de las races de las plantas, IV y V) Omnivoros y predadores, que se alimentan de otros organismos edficos incluidos nematodos. Segn esta clasificacin se determinar la abundancia y porcentaje de cada grupo de nematodos en 100 g de suelo representativo, para los cultivos elegidos manejados orgnicamente y convencionalmente. Adems se calcularn % de Dorilaumus y % de Criconemoides Diversidad Para calcular la diversidad se utilizara el Indice de Shannon-Wiener H=-pi ln pi Parametros de Diversidad 1 > 5 Equidad Para la equidad se utilizara el ndice de Diversidad Pielou. Donde: S= numeroo de sps Hmax=Ln (S) J=H/Hmax Parmetro de equidad 0>1 como estn representadas las especies 4.6. Determinacin del estado de conservacin y fertilidad de los suelos 2.5= media; < 1 = baja; > 2.5 = alta.

Una vez identicados taxonmicamente los nematodos en cada uno de los puntos de muestreo, estos se clasicarn biolgicamente de dos formas: la primera, segn su hbito alimentario o el gremio funcional al que pertenecen, es decir, bacterifagos (Ba), micfagos (Fu), depredadores (Ca), toparsitos (Fp) y omnvoros (Om); la segunda, mediante la escala colonizador-persistente (c-p) en series de uno a cinco (de cp-1 a cp-5), que abarcan desde los estrategas de extrema r (oportunistas de riqueza) hasta los estrategas de extrema k (indicadores de estabilidad del ecosistema) (Bongers & Ferris, 2009). El ndice de madurez (IM) para nemtodos de vida libre se calcula como IM = vi * fi Donde fi es la frecuencia de la familia i en la muestra y vi es el valor c-p asignada a la familia i (Bongers, 1990; Bongers y Bongers, 1998). El ndice de parsitos de plantas (IPP), se calcula igual que el ndice IM (ndice de perturbacin del suelo) pero solamente con nematodos fitoparsitos (Bongers, 1990). IPP= v*f

La relacin PPI/IM (ndice de madurez de nemtodos fitoparsitos sobre el ndice de madurez de nemtodos de vida libre) se analizar como ndice de fertilidad del suelo (Bongers et al., 1997). IF=IPP/IM

4.7.

Diagnstico del estado de la red trfica en suelos

El ndice de Enriquecimiento se relaciona positivamente con la cantidad de N presente en el suelo, y con la biomasa producida por el cultivo en cuestin (DuPont et al. 2009). El ndice de Estructura, por su parte, se correlaciona con la presencia de otros organismos edficos predadores, como los caros (Snchez-Moreno et al. 2009). La combinacin del ndice de Estructura y el de Enriquecimiento, indicadores de dos de las funciones ms importantes en el agroecosistema (mantenimiento de la fertilidad del suelo y supresin de especies plaga), puede representarse grficamente, para llevar a cabo un diagnstico del estado de la red trfica, con cuatro posibles estados: Degradada, Madura, Perturbada o Estructurada. Una vez realizada la clasicacin de los nematodos a nivel biolgico se calcularn los componentes del ndice de Estructura (IS) y el ndice de enriquecimiento (IE), componente estructural (s), componente de enriquecimiento (e) y componente basal (b), mediante la siguiente frmula: Se calcular el componente basal b de la red trfica (grupos de nemtodos fungvoros y bacterifagos incluidos como c-p = 2) como b = kb*nb donde kb es la constante ponderada para el grupo y n es el nmero de nematodos en ese grupo. Los componentes de enriquecimiento (e) y de estructura (s) se calcularn de la misma manera, utilizando los grupos indicativos de enriquecimiento (bacterifagos con valor de c-p = 1 (Ba1) y fungvoros con c-p = 2 (Fu2)) y aquellos grupos que estn relacionados con la estructura de la red trfica (bacterifagos con valor de c-p = 3-5, fungvoros con c-p =3-5, omnvoros con c-p = 3-5 y predadores con c-p = 2-5) s = (Ban x W n+ Can x W n + Fun x W n + Omn x W n) Dnde: n = series cp-3 a cp-5, W3=1,8, W 4=3,2, W 5=5,0 B = (Ba2 + Fu2) x W2 Dnde: W2 =0,8 Despus de calcular los anteriores componentes, se aplica la siguiente frmula: Indice de Estructura Indice de Enriquecimiento .

Dnde: IE: ndice de estructura b: componente basal s: componente estructural e: componente de enriquecimiento

Los nematodos colonizadores en el extremo inferior de la escala (cp-1), como individuos de las familias Rhabditidae o Diplogasteridae, son considerados oportunistas de enriquecimiento, por lo tanto, indican disponibilidad de recursos; los nematodos persistentes en el extremo superior de la escala (cp-5), como individuos de las familias Actinolaimidae y Dorylaimidae indican estabilidad del sistema y complejidad de la red alimentaria. En general, cada taxn de nematodos se clasica por mbito familiar en una de las cinco clases c-p (Bongers & Ferris, 2009). V. RESULTADOS

5.1. Anlisis fisicoqumico del suelo

DISTRITO : TIPO DE MANEJO: Clase textural pH* CIC Materia Orgnica Sales Quequea Orgnico Franco arenoso 7.1 11.4mEq/100g 3.12 % 3,82 mS/cm Sabanda Convencional Franco arenoso 6.7 14,8 mEq/100 g 2.55 % 2,85 mS/cm

*ph: proporcin 1:1 solvente de agua destilada

5.2. Anlisis nematolgico

Tipo de Manejo Familia Rhabditidae Aphelenchidae *Tylenchidae * Pratylenchidae *Hoplolaimidae *Hemicycliophoridae Dorylaimidae *Trichodoridae TOTAL
*Nemtodos fitoparsitos

Semiorgnico n 35 2 0 1 0 0 0 0 Pi 1 2 2 3 3 3 4 4

Convencional n 53 0 6 2 1 1 19 1 83 Pi 0.639 0 0.072 0.024 0.012 0.012 0.229 0.012

Valor Cp

VI.

DISCUSIN As mismo, los nematodos desempean un papel fundamental en la estructura y organizacin funcional del suelo como micfagos por ser tolerantes a contaminantes, bacterifagos por ser indicadores de enriquecimiento orgnico, fitoparsitos por ser sensibles a perturbaciones, y depredadores por ser indicadores de estabilidad; por lo que pueden ser utilizados en estudios medioambientales como bio-indicadores ecolgicos (BONGERS, 1999; MORENO, 2001). Debido a la importancia de los nematodos como indicadores ambientales y al desconocimiento de las comunidades de nematodos en suelo y races de guadua y bosque en Colombia, el objetivo de esta investigacin fue identificar y generar un registro fotogrfico de las comunidades de nematodos que habitan ecosistemas de guadua y bosque secundario en la granja Montelindo de la Universidad de Caldas.

VII.

CONCLUSIONES

6. Revisin Bibliogrfica Arriba Sanatamaria Y. (2013) Tesis doctoral: Accin nematicida (g. rostochiensis) y metablica del suelo en procesos de biodesinfeccin por aplicacin de enmiendas de origen animal, vegetal y antrpico. Univ Burgos. Espaa.

Talavera M. y S. Snchez-Moreno1 (2013) Los nematodos como indicadores ambientales en agroecosistemas. Rev. Cientfica de ecologa y medio ambiente 22(1):50-55. Espaa. Azpilicueta C.; M. C. Arauni. y E. Chaves (2011) Relacin entre la nematofauna y la historia de manejo del suelo en huertos frutcolas. Agro Sur Vol. 39 (1) 13-23. Argentina. Chica Martnez P., G. Cruz Cern, O. Guzmn Piedrahita (2011)Propuesta metodolgica para la evaluacin de biodiversidad de nematodos en dos ecosistemas naturales. Rev. agron. 19(2): 7 18. Colombia. Mondino E, Tavares O., Lima E. y Berbara R. (2010) Comunidades de nematodos en caa de azcar bajo diferentes sistemas de labranza y cosecha. Rev. Nematrpica Vol.40 n2. Ro de Janeiro-Brazil. ANEXOS Tabla 1: Familias y valores cp utilizados para el ndice de madurez*

Familia Neotylenchidae Anguinidae Aphelenchidae Aphelenchoididae Rhabditidae Alloionematidae Diploscapteridae Bunonematidae Cephalobidae Ostellidae Panagrolaimidae Myolaimidae Teratocephalidae Diplogasteridae Neodiplogasteridae Mononchidae Anatonchidae Nygolaimidae Dorylaimidae Chrysonematidae Thornenematidae Nordiidae Qudsianematidae Aporcelaimidae Belondiridae Actinolaimidae Discolaimidae Leptonchidae Choanolaimidae

valor cp 2 2 2 2 1 1 1 1 2 2 1 2 2 1 1 4 4 5 4 5 5 4 4 5 5 5 5 4 4

Familia Achromadoridae Ethmolaimidae Cyatholaimidae Desmodoridae Microlaimidae Odontolaimidae Aulolaimidae Bastianiidae Prismatolaimidae Ironidae Tobrilidae Onchulidae Tripylidae Alaimidae Bathyodontidae Tylopharyngidae Odontopharyngidae Monhysteridae Xyalidae Linhomoeidae Plectidae Leptolaimidae Halaphanolaimidae Diplopeltidae Rhabdolaimidae Chromadoridae Hypodontolaimidae Diplogasteroididae Diphtherophoridae

valor cp 3 3 3 3 3 3 3 3 3 4 3 3 3 4 4 1 1 1 2 3 2 3 3 3 3 3 3 1 3

Tabla 1: Familias y valores cp utilizados para el ndice fitoparastico*

cp2 Tylenchidae

cp3 Dolichodoridae

cp4

cp5

Trichodoridae Longidoridae

Psilenchidae Tylodoridae Ecphydophoridae Paratylenchidae Anguinidae

Hoplolaimidae Pratylenchidae Heteroderidae Hemicycliophoridae