Informe N3 / Laboratorio de Espermograma

Luz Miryam Gmez

Mario Jos Medina lvarez Jos Daniel Zuluaga Barrios

Biologa Forense

Tecnolgico de Antioquia Facultad de Ciencias Forenses y de la Salud

Medelln

2014

 Objetivos Conocer mediante una simulacin de laboratorio, las tcnicas orientativas y confirmativas que se le practican a las muestras de semen. Saber los principios de porque se utilizan estas tcnicas, y cul es su propsito en la seminologa forense. Observar los diferentes espermatozoides con la ayuda del microscopio, en los distintos enfoques. Determinar las diferentes caractersticas de los espermatozoides, mediante la coloracin de rbol de navidad.

Materiales y Reactivos Semen Porta y cubreobjetos Guantes Microscopio Pipeta Pasteur plstica Aceite de inmersin Puente para tincin Eosina Colorantes: - Rojo Rpido Nuclear y - Picro ndigo Carmn

 Elemento / Procedimiento 1. 2. 3. 4. 5. 6. Semen Humano

Se tuvo abstinencia sexual de 3 a 6 das. (descrito por el profesor) Se efectu lavado genital con jabn y abundante agua. (asepsia) Se recolecto la muestra por masturbacin. (compaero) Se deposit en un recipiente estril. Obtencin de la muestra recolectada en el hogar: Se practic en el laboratorio en un mximo de 1 hora o hora despus de haberla recolectado. 7. Finalmente se mantuvo la muestra lo ms cercano a la temperatura corporal.

Procedimiento Con una pipeta se agreg una gota de semen en un porta objetos. Se esparci, hasta dejarse secar completamente a temperatura ambiente. Se analiz en el microscopio las diferentes caractersticas enfocando en 10x y 40x. Luego se procedi a emplear la tincin del rbol de navidad adicionando rojo rpido cubriendo toda la placa esperando por 10 minutos. Seguido se le adiciono ndigo carmn por 3 minutos; y se Desech lo que no se necesitaba. Se esper hasta que se secara. Y finalmente se hizo tincin con eosina enfocando con el microscopio en 100x (con aceite de inmersin). Encontrando clulas en el interior teido (muertas) y clulas solo teidas en su entorno (vivas).

Resultados y Anlisis SEMEN HUMANO Resultados Una vez realizado el examen macroscpico se prosigui a realizar el microscpico, colocando una gota de semen en un portaobjetos y enseguida del cubreobjetos (el objetivo de este examen fue obtener la visibilidad de los espermatozoides) Se obtuvo como resultado cada una cada una de las caractersticas vistas de los espermatozoides microscpicas como: Movilidad, vitalidad,

Clulas redondas y otras clulas y macroscpicas como color, viscosidad, y volumen. Se comenz el conteo tomando como referencia por ejemplo una aproximacin en un campo de 100 espermatozoides y se report mediante porcentajes, con su respectiva caracterstica de movilidad. Para reportar la morfologa se prosigui empleando la tincin de rbol de navidad, adicionando rojo rpido que cubriera toda la placa esperando por 10 minutos, luego se le adiciono ndigo carmn por 3 minutos. Y finalmente se lav para esperar que se secara, y as poder concluir caractersticas como espermatozoides con la cabeza roja y la cola verde. Para realizar la viabilidad en otro portaobjeto, se coloc la gota de semen esparcida y una gota de Eosina G, se coloc el cubreobjetos y se esperaron 2 minutos para realizar la observacin (los espermatozoides muertos se observan con la cabeza de un color parecido al naranja). El conteo se realiz tambin tomando en cuenta 100 clulas aproximadas y se report cierto porcentaje.

(Muestra): Jos Daniel Zuluaga Barrios (compaero) Examen Macroscpico Aspecto (color): Blanquecino Licuefaccin: 30 min. Viscosidad: Normal Volumen: 3.9 ml.

Examen Microscpico Motilidad (100 clulas) Progresiva lineal rpida: 78% Progresiva lineal lenta: 11% No progresiva: 8% Inmviles: 3% Viabilidad (% vivos): 90%

Morfologa Normal: 85% Piriformes: 10% Bicfalos: 0% Amorfos: 0% Redondos: 2%

Corta: 0% Sin cola: 0% Doble: 0%

1. 10X

2. 40X

3. 100x

Tincin rbol de navidad Rojo rpido ndigo carmn

100x

Tincin Eosina 100x

 Conclusiones La identificacin del semen es de vital importancia en la investigacin criminal por violacin y otros delitos que tienen implcita la agresin sexual. El lquido espermtico se puede presentar al investigador en cuatro formas distintas: como mancha; impregnado en un tejido; como fluido, mezclado con otros fluidos corporales; como la secrecin vaginal, y por ltimo; como semen o lquido espermtico. De las caractersticas que tiene el semen podemos hablar el esperma total (recin emitido) es un lquido cremoso, de color opalino, que tiende a amarillo verdoso cuando pasa el tiempo. Consta de dos elementos diferentes: las clulas o espermatozoides procedentes de los tubos seminferos del testculo, y el plasma seminal, que procede del epiddimo, prstata, vesculas seminales y glndulas de Cowper. Este laboratorio se realiz con la finalidad de detectar anormalidades en el semen, ubicando una posible malformacin en los espermatozoides, as como determinando una serie de procesos los cuales evalan el semen macroscpicamente (aspecto, viscosidad, volumen,) y microscpicamente analizando las clulas que lo componen (esperma) evaluando su movilidad, morfologa, etc. La coloracin de Eosina solo tie la cabeza del espermatozoide por su contenido nuclear. La tincin de rbol de navidad: Permite contrastar la tincin de los espermatozoides Permite determinar una escasa cantidad de espermatozoides Permite distinguir los espermatozoides por su color y no por su tonalidad. La coloracin resultante de la tincin con eosina es rosada-anaranjada para citoplasmas, y rojo intenso en el caso de los eritrocitos.