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ISSN 0101- 6245 Verso Eletrnica Dezembro, 2011

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Manual de Biossegurana Embrapa Sunos e Aves

ISSN 0101- 6245 Verso Eletrnica Dezembro, 2011 Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuria Embrapa Sunos e Aves Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento

Documentos 150

Manual de Biossegurana Embrapa Sunos e Aves


Paulo Augusto Esteves Gustavo Julio Mello Monteiro de Lima Martha Mayumi Higarashi Rejane Schaefer Mateus Lazzarotti Janice Reis Ciacci Zanella Organizadores

Embrapa Sunos e Aves Concrdia, SC 2011

Exemplares desta publicao podem ser adquiridos na: Embrapa Sunos e Aves Rodovia BR 153 - KM 110 89.700-000, Concrdia-SC Caixa Postal 21 Fone: (49) 3441 0400 Fax: (49) 3441 0497 http://www.cnpsa.embrapa.br sac@cnpsa.embrapa.br Comit de Publicaes da Embrapa Sunos e Aves Presidente: Luizinho Caron Secretria: Tnia M.B. Celant Membros: Gerson N. Scheuermann Jean C.P.V.B. Souza Helenice Mazzuco Nelson Mors Rejane Schaefer Suplentes: Mnica C. Ledur Rodrigo S. Nicoloso Coordenao editorial: Tnia M.B. Celant Reviso tcnica: Ftima R.F. Jaenisch e Paulo S. Rosa Reviso gramatical: Jean C.P.V.B. Souza Normalizao bibliogrfica: Claudia A. Arrieche Editorao eletrnica: Vivian Fracasso Ilustrao da capa: OMS 1 edio Verso eletrnica (2011) Todos os direitos reservados. A reproduo no-autorizada desta publicao, no todo ou em parte, constitui violao dos direitos autorais (Lei n 9.610). Dados Internacionais de Catalogao na Publicao (CIP) Embrapa Sunos e Aves Manual de biossegurana Embrapa Sunos e Aves / organizadores Paulo Augusto Esteves.. [et al]. Concrdia: Embrapa Sunos e Aves, 2011. 82p.; 21cm. (Documentos/Embrapa Sunos e Aves, ISSN 01016245; 150). 1. Biossegurana. 2. Norma-lei. 3. Acidente. 4. Resduos. I. ESTEVES, Paulo Augusto, org. II. LIMA, Gustavo Julio Mello Monteiro de, org. III. HIGARASHI, Martha Mayumi, org. IV. SCHAEFER, Rejane, org. V. LAZZAROTTI, Mateus, org. VI. ZANELLA, Janice Reis Ciacci, org. CDD 660.63 Embrapa 2011

Organizadores

Paulo Augusto Esteves Bilogo, D. Sc. em Cincias Veterinrias, pesquisador da Embrapa Sunos e Aves, Concrdia, SC, pesteves@cnpsa.embrapa.br Gustavo Julio Mello Monteiro de Lima Engenheiro Agrnomo, Ph. D. em Nutrio Animal, pesquisador da Embrapa Sunos e Aves, Concrdia, SC, gustavo@cnpsa.embrapa.br Martha Mayumi Higarashi Qumica, D. Sc. em Qumica, pesquisadora da Embrapa Sunos e Aves, Concrdia, SC, martha@ cnpsa.embrapa.br Rejane Schaefer Mdica Veterinria, D. Sc. em Cincias Veterinrias, pesquisadora da Embrapa Sunos e Aves, Concrdia, SC, rejane@cnpsa.embrapa.br

Mateus Lazzarotti Farmaceutico Bioqumico, analista da Embrapa Sunos e Aves, Concrdia, SC, mateus@cnpsa. embrapa.br Janice Reis Ciacci Zanella Mdica Veterinria, Ph. D. em Virologia Molecular, pesquisadora da Embrapa Sunos e Aves, Concrdia, SC, janice@cnpsa.embrapa.br

Apresentao

O Comit Interno de Biossegurana (CIBio) da Embrapa Sunos e Aves elaborou o Manual de Biossegurana da Embrapa Sunos e Aves conforme preconiza a Lei N 11.105 (Lei de Biossegurana). Tal Lei estabelece que as CIBios devem manter informados os trabalhadores sobre as questes relacionadas biossegurana e garantir o funcionamento das instalaes dentro dos padres e normas da mesma. Assim, o presente Manual objetiva esclarecer o significado de termos tcnicos teis aos empregados e apresenta um conjunto de normas e procedimentos que certamente minimizaro os riscos de trabalho e de uma possvel liberao acidental de organismos geneticamente modificados. Desta forma, a CIBio deve divulgar e fazer cumprir as normas e recomendaes da CTNBio atravs da comunicao com os pesquisadores principais, inspees das instalaes e atividades dos projetos e acompanhamento do trnsito de materiais geneticamente modificados. Alm de preencher os requisitos de funcionamento da CIBio, o Manual explicita as responsabilidades de cada colaborador nas atividades desenvolvidas na Unidade e fornece regras gerais de segurana do uso de equipamentos e dos produtos qumicos manuseados no dia a dia. Dirceu Joo Duarte Talamini
Chefe-Geral da Embrapa Sunos e Aves

Sumrio

Apresentao..................................................................................... 5 Introduo..........................................................................................11 O qu biossegurana.....................................................................12 O que a CTNBio..............................................................................13 O qu o CQB...................................................................................14 O qu a CIBio..................................................................................14 Requerimentos mnimos para reas com CQB na Embrapa..........15 Procedimentos mnimos para trabalho em reas com CQB..........16 Classificao de risco microrganismos e nveis de biossegurana (NB)....................................................................................................16
Classes de risco..............................................................................17
Classes de risco 1.........................................................................17 Classes de risco 2.........................................................................17 Classes de risco 3.........................................................................17 Classes de risco 4.........................................................................18 Classes de risco 5.........................................................................18

Nveis de biossegurana...................................................................18
Nvel de biossegurana 1 (NB-1).....................................................19 Acesso....................................................................................19 Proteo pessoal.......................................................................20 Procedimentos..........................................................................21 Instalaes laboratoriais.............................................................22

Nvel de biossegurana 2 (NB-2)......................................................25 Prticas especiais para o NB-2...................................................26 Equipamentos de conteno para o NB-2.....................................28 Procedimentos padro de laboratrio para NB-2.............................29 Instalaes laboratoriais NB-2.....................................................30 Nvel de Biossegurana 3 (NB-3)......................................................31 Procedimentos padro de laboratrio para NB-3.............................31 Prticas especiais para o NB-3...................................................32 Equipamentos de conteno para o NB-3.....................................34 Instalaes laboratoriais NB-3.....................................................34 Nvel de Biossegurana 4 (NB-4)......................................................38 Procedimentos padro de laboratrio para NB-4.............................39 Prticas especiais para o NB-4...................................................39 Equipamentos de conteno para o NB-4.....................................41 Instalaes laboratoriais NB-4.....................................................41 Laboratrio NB-4 com CSB Classe III...........................................43 Laboratrio NB-4 com o uso de CSB Classe II associado utilizao de roupas de proteo individual com presso positiva, ventiladas por sistema de suporte de vida...................................................43

Trabalho com organismos geneticamente modificados................44


Classes de risco de OGM................................................................46
Classes de risco 1 (baixo risco individual e baixo risco para a coletividade)...........................................................................................46 Classes de risco 2 (moderado risco individual e baixo risco para a coletividade)...................................................................................47 Classes de risco 3 (alto risco individual e moderado risco para a coletividade)........................................................................................47 Classes de risco 4 (alto risco individual e alto risco para a coletividade)...........................................................................................47

Nveis de biossegurana de OGM....................................................48


Nvel de biossegurana 1...............................................................48 Nvel de biossegurana 2...............................................................50

Trabalho com animais geneticamente modificados..........................52 Limpeza, desinfeco, assepsi e esterelizao.................................53 Tecnologias de tratamento dos resduos biolgicos.........................55
Desinfeco qumica ou trmica......................................................56 Desinfeco para tratamento dos resduos do Grupo A.......................56 Autoclavagem..............................................................................57 Tratamento trmico por incinerao.................................................58

Resduos biolgicos...........................................................................60
Definio........................................................................................60 Classificao...................................................................................60 Riscos potenciais.............................................................................62 Acondicionamento de resduos biolgicos.......................................63 Coleta e transporte interno dos resduos biolgicos.........................63
Recomendaes gerais...................................................................64 Procedimentos de coleta interna......................................................64

Armazenamento externo..................................................................65
Local...........................................................................................65 Caractersticas..............................................................................66 Abrigo.........................................................................................67

Acidentes...........................................................................................68
Com prfuro-cortante......................................................................69 Conduta ps-acidente......................................................................69 Devem estar sempre disponvel.......................................................69 Incndio no laboratrio....................................................................70 Choques eltricos............................................................................71 Medidas de emergncia em caso de acidente com produtos qumicos.........................................................................................72
Riscos qumicos............................................................................72 Manipulao com brometo de etdio............................................73 Manipulao com poliacrilamida..................................................73 Descarte de produtos qumicos...................................................73 Riscos biolgicos...........................................................................74 Desinfeco e descarte biolgico................................................74

Cuidados necessrios recomendados aos membros do setor......75 Recomendaes para responsveis por alunos e estagirios.......77 Consideraes finais..........................................................................78 Referncia..........................................................................................80 Anexo.................................................................................................82

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Paulo Augusto Esteves Gustavo Julio Mello Monteiro de Lima Martha Mayumi Higarashi Rejane Schaefer Mateus Lazzarotti Janice Reis Ciacci Zanella

Introduo
Nos primeiros anos da dcada de 90, iniciou-se uma grande preocupao mundial envolvendo questes de Biossegurana. Prova disso foi a proposio da Agenda 21, que ocorreu durante a Conferncia das Naes Unidas sobre o Ambiente e Desenvolvimento (CNUMAD), conhecida como Eco 92, no Rio de Janeiro, em 1992 (UNITED NATIONS DIVISIONFOR SUSTAINABLE DEVELOPMENT, 1992). O princpio 14 deste documento determina que os estados devam cooperar efetivamente para desencorajar ou prevenir a realocao e transferncia para outros estados de qualquer atividade ou substncia que cause grave degradao ambiental, ou seja, nocivo sade humana. Como continuao destes esforos, ocorreu, em 1999, a Conferncia sobre Diversidade Biolgica em Cartagena, Colmbia. Essa conferncia gerou o Protocolo de Cartagena (SECRETARIAT OF THE CONVENTION ON BIOLOGICAL DIVERSITY, 2000). Com base no princpio 15 do Relatrio da CNUMAD, o objetivo do Protocolo de Cartagena foi assegurar um nvel adequado de proteo envolvendo a transferncia, manipulao e uso de Organismos Gene-

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ticamente Modificados (OGM), resultantes da biotecnologia moderna, que podem ter efeitos adversos na conservao e no uso sustentvel da diversidade biolgica, levando em considerao os riscos para a sade humana e principalmente focando na movimentao transfronteiria. No Brasil, a Legislao de Biossegurana foi formatada para os aspectos de Biossegurana relativos a OGM e resultou na Lei de Biossegurana n 8.974, de 5 de janeiro de 1995, posteriormente revogada pela Lei n 11.105, de 24 de maro de 2005. Essa Lei estabelece regulamentaes especficas para adoo de normas de segurana e mecanismos de fiscalizao sobre a construo, o cultivo, a produo, a manipulao, o transporte, a transferncia, a importao, a exportao, o armazenamento, a pesquisa, a comercializao, o consumo, a liberao no meio ambiente e o descarte de organismos geneticamente modificados (OGM) e seus derivados. O objetivo dessa legislao, entre outros, a proteo vida e sade humana, animal e vegetal. Mais detalhes sobre essa legislao e outras normativas em vigor podem ser obtidos na pgina da CTNBio (http:// www.ctnbio.gov.br).

O que Biossegurana?
A palavra Biossegurana vem da expresso segurana biolgica. O termo Biossegurana tem sido aplicado no Brasil como sinnimo no s de aspectos relacionados manipulao segura de organismos vivos ou vrus de carter patognico, mas como a manipulao em regime de conteno e liberao de organismos geneticamente modificados (OGM), que resultem em produtos que possam gerar inclusive a sua comercializao. Basicamente, Biossegurana o conjunto de aes voltadas para a preveno, minimizao ou eliminao de riscos inerentes s atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios, visando a sade do homem, dos animais, a preservao do meio ambiente e a qualidade dos resultados

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(TEIXEIRA; VALLE, 1996). Sempre que procedimentos especficos para evitar ou minimizar os riscos de atividades potencialmente perigosas que envolvem organismos vivos so adotados, a Biossegurana est sendo praticada. Outra viso do conceito de Biossegurana, segundo Almeida; Albuquerque, 2000 : A Biossegurana designa no propriamente uma disciplina, em sentido estrito, mas um campo de conhecimentos e um conjunto de prticas e aes tcnicas, com preocupaes sociais e ambientais, destinados a conhecer e controlar os riscos que o trabalho cientfico pode oferecer ao ambiente e vida.

O que a CTNBio?
A Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana (CTNBio) uma instncia colegiada, multidisciplinar, que conta com a participao de especialistas e representantes ministeriais e de secretarias do governo federal. Criada com a finalidade de prestar apoio tcnico consultivo e de assessoramento ao Governo Federal na formulao, atualizao e implementao da Poltica Nacional de Biossegurana (PNB) relativa OGM, bem como, no estabelecimento de normas tcnicas de segurana e pareceres tcnicos conclusivos referentes : proteo da sade humana, dos organismos vivos e do meio ambiente, para atividades que envolvam: a construo, experimentao, cultivo, manipulao, transporte, comercializao, consumo, armazenamento, liberao e descarte de OGM e derivados. Esta comisso tambm responsvel pela emisso do Certificado de Qualidade em Biossegurana (CQB) para o desenvolvimento de atividades com OGM no pas. O captulo III da Lei de Biossegurana estabelece a composio, competncia e funcionamento da CTNBio.

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O que o CQB?
O Certificado de Qualidade em Biossegurana (CQB) um credenciamento que a CTNBio concede para Instituies de pesquisa, empresas privadas e outras pessoas jurdicas que executem atividades com OGM e seus derivados em conteno ou para liberaes planejadas no ambiente. A Resoluo Normativa n 1, de 20 de Junho de 2006, trata no captulo IV sobre os estabelecimentos dos critrios para solicitao, reviso, extenso e suspenso do CQB e os procedimentos para o credenciamento dos requerentes, fiscalizao e cancelamento. As entidades que utilizam tcnicas e mtodos de DNA recombinante devem ter uma CIBio constituda e solicitar o CQB antes de iniciar as atividades com OGM.

O que a CIBio?
A Comisso Interna de Biossegurana (CIBio) a instncia colegiada, sediada em cada unidade de CQB concedida pela CTNBio, responsvel pelo registro, autorizao de trabalhos em conteno que envolvam OGM de nvel de Biossegurana 1 (NB-1), acompanhamento, auditoria e transferncia de informaes e consultas entre a CTNBio e as entidades com CQB. A esta comisso devero ser informados todos os trabalhos de pesquisas bsicas, aplicadas e testes de liberaes no ambiente que se pretende realizar e esto em andamento no mbito da instituio. Neste caso, se aplicam todas aquelas atividades que resultem de engenharia gentica, manipulao, produo e transporte de OGM no pas e exterior.

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Requerimentos mnimos para reas com CQB na Embrapa


As portas do laboratrio devem ser mantidas fechadas, preferencialmente articuladas com sistema de molas. Crianas no devem ter permisso para entrar no laboratrio. Animais no devem ser admitidos no laboratrio, exceto aqueles envolvidos em experimentos. O acesso ao laboratrio deve apresentar as reas de circulao desobstrudas e livres de equipamentos e estoques de materiais. A sinalizao contendo o smbolo internacional de risco biolgico e advertncia de rea restrita obrigatria. Apresentar identificao e telefone de contato dos responsveis nas reas constantes do CQB. Apresentar lista de pessoas autorizadas ao acesso ou controle de acesso eletrnico. Manter registro de acessos ao laboratrio e dos experimentos em conduo. Identificar equipamentos, armrios e caixas de uso para ensaios, armazenamento e transporte de OGM. Dentro dos laboratrios e casas de vegetao e prximo ao acesso, dever estar disponvel local para guarda de jalecos e outros equipamentos de proteo individual. Equipamentos de proteo coletiva devem estar disponveis em local identificado e de fcil acesso. Todos os coletores de material para descarte devem estar corretamente identificados contendo inclusive os smbolos de Biossegurana e Riscos/ Periculosidade em se tratando de descarte diferentes grupos de resduos. A abertura de todas as portas dever ser feita no sentido de dentro das salas para fora. As portas de sada de emergncia devem estar identificadas, dotadas de sistema de barra para abertura por toque.

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Procedimentos mnimos para trabalho em reas com CQB


Trabalhos em um laboratrio, especialmente em reas com CQB, exigem redobrados cuidados, para que no incorram na contaminao da equipe do laboratrio, dos profissionais da limpeza, dos equipamentos, do meio-ambiente e do prprio usurio. Com esse objetivo, alguns procedimentos devem ser respeitados:
Todos os membros da equipe tcnica do laboratrio, casa de vegetao e campo experimental, estagirios e terceirizados devem estar formalmente treinados e orientados para exigir que as regras de Biossegurana sejam cumpridas. responsabilidade de todos os usurios manterem sempre o laboratrio limpo e organizado. Equipamentos de Proteo Individual e Coletiva devem sempre ser utilizados corretamente e quando necessrio. No devem ser usados, esquecidos ou descartados fora da rea de trabalho.

Classificao de risco microrganismos e nveis de biossegurana (NB)


Nos laboratrios onde microorganismos so manipulados, existe um risco em potencial de infeco ou contaminao. Deste modo importante, conhecer a classe de risco do microrganismo que se pretende trabalhar para avaliar e estabelecer os procedimentos adequados para manipulao de, por exemplo, um determinado agente causador de doenas em humanos e animais. Segundo o Ministrio da Sade, os microrganismos, independente de serem geneticamente modificados, so classificados em cinco classes de riscos de acordo com os seguintes critrios: patogenicidade, alterao gentica ou recombinao gnica, estabilidade, virulncia, modo de transmisso, endemicidade, consequncias epidemiolgicas e disponibilidade de medidas profilticas e de tratamento eficaz.

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Classes de risco
De acordo com o Ministrio da Sade, existem mundialmente definidas cinco classes de risco para os agentes biolgicos:

Classe de risco 1
O risco individual e para a comunidade baixo. Aplica-se a agentes biolgicos bem caracterizados, que tm probabilidade nula ou baixa de provocar infeces no homem ou em animais sadios e de risco potencial mnimo para o profissional do laboratrio e para o ambiente. Exemplo: microorganismos do gnero Lactobacillus.

Classe de risco 2
O risco individual moderado e para a comunidade limitado. Aplica-se a agentes biolgicos que provocam infeces no homem ou nos animais, cujo risco de propagao na comunidade e de disseminao no meio ambiente limitado, no constituindo em srio risco a quem os manipula em condies de conteno, pois existem medidas teraputicas e profilticas eficientes. Exemplo: Schistosoma mansoni.

Classe de risco 3
O risco individual alto e para a comunidade limitado. Aplica-se a agentes biolgicos que provocam infeces, graves ou potencialmente letais, no homem e nos animais e representam um srio risco a quem os manipulam. Significam risco se disseminados na comunidade e no meio ambiente, podendo se propagar de indivduo para indivduo. Mas, usualmente, existem medidas de tratamento e/ou de preveno. Exemplo: Bacillus anthracis.

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Classe de risco 4
O risco individual e para a comunidade elevado. Aplica-se a agentes biolgicos de fcil propagao, altamente patognicos para o homem, animais e meio ambiente, representando grande risco a quem os manipula, com grande poder de transmissibilidade via aerossol ou com risco de transmisso desconhecido, no existindo medidas profilticas ou teraputicas. Exemplo: Vrus Ebola.

Classe de risco 5
O risco de causar doena animal grave e de disseminao no meio ambiente alto. Aplica-se a agentes, de doena animal, no existentes no Pas e que, embora no sejam patognicos de importncia para o homem, podem gerar graves perdas econmicas e na produo de alimentos. Os agentes dessa classe devem ter sua importao proibida e, caso sejam identificados ou suspeitada sua presena no pas, devem ser manipulados em laboratrios de conteno mxima, ou seja, NB-4. Exemplo: vrus da gripe aviria e da doena de Newcastle (cepas asiticas). A lista dos organismos classificados em cada uma dessas classes atualizada periodicamente e disponibilizada em publicao eletrnica na pgina do Ministrio da Sade (http://portal.saude.gov.br).

Nveis de biossegurana
Os microorganismos so classificados em quatro nveis de Biossegurana (NB): NB-1, NB-2, NB-3 e NB-4 de acordo com os requisitos crescentes de segurana para o manuseio destes agentes biolgicos. De acordo com a World Health Organization (2004), essa classificao baseada de acordo com:

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Patogenicidade do organismo. Modo de transmisso e espectro de hospedeiro do organismo: esses podem ser influenciados pelos nveis de imunidade existente na populao local, densidade e movimento da populao hospedeira, presena de vetores apropriados, e padro de higiene do ambiente. Disponibilidade local de medidas preventivas efetivas: essas incluem profilaxia por imunizao ou administrao de antissoro, medidas sanitrias (exe.: tratamento da gua e comida), controle de reservatrios animais ou vetores artrpodes. Disponibilidade local de tratamento eficiente: essas incluem imunizao passiva, vacinao ps-exposio, e devem levar em considerao a possibilidade emergncia de linhagens resistentes a antibiticos.

Nvel de biossegurana 1 (NB-1)


Este o Nvel de Biossegurana requerido para o trabalho envolvendo material biolgico que contenha agentes biolgicos da classe de risco 1. Representa um nvel bsico de conteno e se fundamenta na aplicao das Boas Prticas de Laboratrio, na utilizao de equipamentos de proteo individual (EPI) e adequao das instalaes com nfase em indicadores de Biossegurana (MINISTRIO DA SADE, 2004). Um laboratrio NB-1 no precisa ser separado das demais dependncias do edifcio e o trabalho em geral conduzido em bancada. Equipamentos de conteno especficos no so exigidos neste tipo de laboratrio. Alguns procedimentos padro devem ser observados para laboratrio de NB-1, como (MINISTRIO DA SADE, 2004; WORLD HEALTH ORGANIZATION, 2004, U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES et al., 2007):

Acesso
O acesso ao laboratrio deve ser limitado, sendo permitido apenas a pessoas autorizadas. As portas do laboratrio devem ser mantidas fechadas. Crianas no devem ter permisso para entrar no laboratrio. Animais no devem ser admitidos no laboratrio, exceto aqueles envolvidos em experimentos.

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A cesso ao laboratrio deve apresentar as reas de circulao desobstrudas e livres de equipamentos e estoques de materiais. A sinalizao contendo o smbolo internacional de risco biolgico, advertncia de rea restrita, identificao e telefone de contato do profissional responsvel, deve ser afixada na porta de acesso ao laboratrio onde h o manuseio de material biolgico.

Proteo pessoal
As pessoas devem lavar as mos antes e aps a manipulao de agentes de risco e antes de sarem do laboratrio. proibido comer, beber, fumar e aplicar cosmticos (maquiagem, cremes, dentre outros) nas reas de trabalho do laboratrio. No recomendada a utilizao de cosmticos e adereos (brincos, pulseiras, relgio, dentre outros) no laboratrio. proibido levar qualquer objeto boca no laboratrio. Jalecos, aventais ou uniformes devem ser usados durante todo o perodo de trabalho no laboratrio. Luvas apropriadas devem ser usadas em todos os procedimentos que possam envolver contato direto ou acidental com sangue, fluidos corpreos e outros materiais infecciosos em potencial ou animais infectados. Aps o uso, as luvas devem ser removidas e descartadas assepticamente e as mos devem ser bem lavadas. culos de segurana, protetores faciais (visores) ou outros aparatos de proteo devem ser usados quando houver necessidade de proteger os olhos e face de respingos, objetos impactantes e fonte artificial de radiao de ultravioleta. As roupas de proteo, como jalecos, no devem ser usadas fora do laboratrio, como por exemplo, em cantinas, escritrios, biblioteca, banheiros etc. As roupas de proteo que so utilizadas nos laboratrios no devem ser guardadas no mesmo local que as roupas pessoais. Por segurana, sapatos devem ser do tipo fechado e, sempre que possvel, recomenda-se a utilizao de pr-ps descartveis. Sapatos abertos (ex: sandlias) ou de salto alto no devem ser utilizados nos laboratrios.

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Procedimentos
As pipetagens devero sempre ser realizadas com dispositivos apropria dos, nunca com a boca diretamente. Todos os procedimentos tcnicos devem ser realizados de forma a mini mizar a formao de aerossis e gotculas. Todos os procedimentos, sejam tcnicos ou administrativos, devem estar descritos, ser de fcil acesso e do conhecimento dos tcnicos envolvidos em sua execuo. O uso de agulhas e seringas hipodrmicas deve ser limitado. Elas no devem ser utilizadas como substitutas para pipetas ou micropipetas ou para qualquer finalidade que no seja injeo parenteral ou aspirao de fluidos dos animais do laboratrio. No descarte, as agulhas usadas no devem ser dobradas, quebradas, reutilizadas, recapeadas, removidas das seringas ou manipuladas antes de serem desprezadas. Os materiais perfuro cortantes devem ser manuseados cuidadosamente. O descarte do material perfuro cortante deve ser realizado em recipiente de paredes rgidas, resistentes punctura, ruptura e vazamento, com tampa, devidamente identificados, segundo normas legais e tcnicas vigentes, localizado prximo rea de trabalho, sendo expressamente importante no esvaziar esses recipientes para o seu reaproveitamento. Qualquer derramamento, acidente e exposio potencial ou confirmada a materiais infecciosos devem ser relatados ao responsvel pelo laboratrio. Registros por escrito desses acidentes e incidentes devem ser mantidos. As vidrarias devem ser descartadas em recipiente prprio e adequadas e as que estiverem quebradas no devem ser manipuladas diretamente com a mo, devem ser removidas por meio de meios mecnicos, como uma vassoura e uma p de lixo ou pinas e descartadas em recipientes adequados. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas antes e ao final de cada turno de trabalho e sempre que ocorrer derramamento de material biolgico. Instrues por escrito de como limpar todos os derramamentos devem ser desenvolvidas, informadas e seguidas. Lquidos contaminados devem ser devidamente descontaminados (qumi ca ou fisicamente) antes de serem descartados.

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T odos os resduos devem ser descartados segundo normas legais e tcnicas vigentes e em cumprimento ao Plano de Gerenciamento de Resduos da Unidade. Devem ser mantidas a limpeza e a organizao do laboratrio. Materiais e reagentes devem ser estocados em instalaes apropriadas no laboratrio, onde deve haver sempre disponvel caixa de primeiros socorros. No manter alimentos e plantas que no sejam objetos de anlise do laboratrio. necessria a organizao de normas para um plano de contingncia e emergncia. Deve ser mantida uma rotina de controle de artrpodes e roedores.

Instalaes laboratoriais
As instalaes laboratoriais devem ser compatveis com as regulamenta es municipais, estaduais e federais. O espao do laboratrio deve ser amplo para que o trabalho laboratorial possa ser conduzido de forma segura. As paredes, o teto e os pisos do cho devem ser lisos, no porosos, sem reentrncias, com cantos arredondados, fceis de limpar, impermeveis a lquido e resistente a produtos qumicos e desinfetantes normalmente utilizados no laboratrio. O cho deve ser antiderrapante. Os topos dos bancos devem ser impermeveis gua e resistentes a desinfetantes, cidos, alcalinos, solventes orgnicos e calor moderado. A iluminao artificial deve ser adequada para todas as atividades. Refle xos indesejveis e luz ofuscante devem ser evitados. As instalaes fsicas referentes segurana laboratorial e proteo con tra incndio devem estar de acordo com as regulamentaes de segurana do Corpo de Bombeiros local e as normas legais e tcnicas vigentes. As rotas de fuga e sadas de emergncia devem estar identificadas e, preferencialmente, localizadas nas circulaes pblicas e nos laboratrios, na direo oposta s portas de acesso, com sada direta para a rea externa da edificao. As portas de sada de emergncia devem estar identificadas, dotadas de barra anti-pnico, que permita a abertura com um pequeno toque, conforme normas legais e tcnicas vigentes.

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A s instalaes eltricas para os laboratrios e instalaes eltricas de equipamentos eletroeletrnicos ou equipamentos associados operao e/ou controle de sistemas de climatizao devem ser projetadas, executadas, testadas e mantidas em conformidade com as normas legais e tcnicas vigentes. A edificao deve possuir sistema de proteo contra descargas atmosfricas, os equipamentos eletro-eletrnicos devem estar conectados a uma rede eltrica estabilizada e aterrada e todas as tomadas e disjuntores devem ser identificados, conforme estabelecido nas normas legais e tcnicas vigentes. Todas as tubulaes das instalaes prediais devem ser adequadas, identificadas e mantidas em condies de perfeito funcionamento, conforme normas legais e tcnicas vigentes. O sistema de abastecimento de gua deve possuir reservatrio suficiente para as atividades laboratoriais e para a reserva de combate a incndio. A gua de abastecimento deve atender as especificidades do laboratrio e seguir os critrios tcnicos vigentes. As circulaes horizontais e verticais tais como corredores, elevadores, monta-cargas, escadas e rampas devem estar de acordo com as normas legais e tcnicas vigentes. As portas devem ser mantidas fechadas e possuir visores, exceto quando haja recomendao contrria. As portas para passagem de equipamentos devem possuir dimenses com largura mnima de 1,10 m. As janelas e as portas devem ser de materiais e acabamentos que retardem o fogo e facilitem a limpeza e a manuteno. No necessrio requisito especial de ventilao, alm daqueles estabelecidos pelas normas legais e tcnicas vigentes. As janelas com abertura para rea externa ao laboratrio devem conter telas de proteo contra insetos. Deve haver espao suficiente entre as bancadas, cabines e equipamentos de modo a permitir acesso fcil para a realizao da limpeza. A superfcie das bancadas deve ser revestida por material impermevel, liso, sem emenda ou ranhura e resistente ao calor moderado e a ao dos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na descontaminao das superfcies.

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O mobilirio do laboratrio deve evitar detalhes desnecessrios, bem como reentrncias, salincias, quebras, cantos, frisos e tipos de puxadores que dificultem a limpeza e a manuteno, e atender os critrios de ergonomia, conforme normas legais e tcnicas vigentes. As cadeiras e outros mveis utilizados no trabalho laboratorial devem ser revestidos com um material que no seja absorvente e que possa ser facilmente descontaminado. Cada laboratrio deve possuir pelo menos um lavatrio exclusivo para lavagem das mos, localizado prximo sada do laboratrio. Deve existir local fora das reas laboratoriais para guarda de pertences e troca de vestimentas. Prever local, dentro do laboratrio, para a guarda de substncias e materiais de uso frequente (devidamente identificados e catalogados para controle interno), em armrios, prateleiras ou castelos. Para estocagem de grandes volumes e das demais substncias e materiais, deve haver um local em condies adequadas, fora das reas laboratoriais, e em concordncia com as normas legais e tcnicas vigentes. Deve existir um local especfico, externo, coberto, ventilado e em condies de segurana para armazenamento de cilindros de gases, conforme normas legais e tcnicas vigentes. Os cilindros de gases devem ser mantidos na posio vertical e possurem dispositivos de segurana de forma a evitar quedas ou tombamentos. Cilindros pressurizados, de quaisquer dimenses, de alimentao das redes, no devem estar presentes na rea interna do laboratrio. A edificao laboratorial deve possuir um abrigo isolado, identificado, para armazenamento temporrio dos resduos, separado por tipo, com local para higienizao de containeres, provido de ponto de gua, no pavimento trreo ou em rea externa edificao, com sada para o exterior, de fcil acesso aos carros coletores. Estas reas devem ser cobertas, ventiladas, com piso, paredes e tetos revestidos de materiais lisos, impermeveis e resistentes a substncias qumicas, conforme normas legais e tcnicas vigentes. O acesso a essas reas deve ser restrito ao pessoal autorizado. Caso o sistema pblico no disponha de tratamento de efluente sanitrio, h necessidade de se prever tratamentos primrio e secundrio, tais como, tanque sptico e filtro biolgico, a fim de evitar a contaminao da rede pblica com agentes qumicos e biolgicos.

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importante que haja aferio e manuteno tcnica peridica dos equipamentos e instalaes do laboratrio. Os materiais e substncias para limpeza das instalaes e equipamentos devem ser os adequados, obedecendo-se s recomendaes de manuais tcnicos e conforme legislao vigente. Faz-se necessria uma rotina de limpeza criteriosa das instalaes e equipamentos do laboratrio, que deve ser efetuada por pessoal devidamente orientado.

Nvel de biossegurana 2 (NB-2)


Este o nvel de Biossegurana requerido para o trabalho envolvendo material biolgico que contenha agentes biolgicos da classe de risco 2. Alguns equipamentos de conteno so necessrios em laboratrios de NB-2. Alm dos EPI adequados conforme descritos no NB-1, luvas devem ser utilizadas segundo suas indicaes, e seu uso restrito ao laboratrio. Luvas de ltex descartveis no devem ser lavadas, nem reutilizadas. Devem ser utilizadas cabines de segurana biolgicas (CSBs), classe I ou II, sempre que sejam realizadas culturas de tecidos infectados ou de clulas germinativas e embries, bem como procedimentos com elevado potencial de criao de aerossis como: triturao; homogeneizao; agitao vigorosa; ruptura por sonicao; abertura de recipientes contendo material no qual a presso interna possa ser maior que a presso ambiente e cultivo de tecidos, fluidos ou ovos de animais infectados (MINISTRIO DA SADE, 2004). Sempre que o procedimento for potencialmente gerador de aerossis e gotculas, proveniente de materiais biolgicos deve ser utilizada proteo para o rosto (mscaras, protetor facial, culos de proteo, entre outras). A centrifugao, fora da cabine de segurana biolgica, s deve ser efetuada se utilizada centrfuga de segurana e frascos lacrados. Esses s devero ser abertos no interior da cabine de segurana biolgica (MINISTRIO DA SADE, 2004).

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As instalaes e procedimentos para um laboratrio de NB-2 devem atender s especificaes estabelecidas para laboratrios NB-1, acrescidas das seguintes exigncias (MINISTRIO DA SADE, 2004; WORLD HEALTH ORGANIZATION, 2004, U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES et al., 2007):

Prticas especiais para o NB-2


As equipes do laboratrio e de apoio devem receber treinamentos anuais, apropriados sobre os riscos potenciais associados aos trabalhos desenvolvidos.
Treinamentos adicionais sero necessrios em caso de mudanas de normas ou de procedimentos. O trabalho em laboratrio deve ser supervisionado por profissional de nvel superior com conhecimento e experincia comprovada na rea de Biossegurana. O Profissional Responsvel deve implementar polticas e procedimentos com ampla informao a todos que trabalhem no laboratrio sobre o potencial de risco relacionado ao trabalho. O acesso ao laboratrio deve ser restrito aos profissionais da rea, mediante autorizao do Profissional Responsvel. Pessoas susceptveis s infeces, tais como as imunocomprometidas ou imunodeprimidas, no devem ser permitidas no laboratrio. Cabe ao Profissional Responsvel a deciso final quanto anlise de cada circunstncia e a determinao de quem deve entrar ou trabalhar no laboratrio. Todo o pessoal deve ser orientado sobre os possveis riscos e para a necessidade de seguir as especificaes de cada rotina de trabalho, procedimentos de Biossegurana e prticas estabelecidas no manual de Biossegurana do laboratrio, acessvel a todos os funcionrios. As portas do laboratrio devem permanecer fechadas quando os ensaios estiverem sendo realizados e trancadas ao final das atividades.

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O emblema internacional indicando risco biolgico (Anexo I) deve ser afixado nas portas dos recintos onde se manuseiam microorganismos pertencentes classe de risco 2, identificando o(s) agente(s) manipulado(s), o nvel de Biossegurana, as imunizaes necessrias, o tipo de equipamento de proteo individual que dever ser usado no laboratrio e o nome do Profissional Responsvel, endereo completo e as diversas possibilidades para a sua localizao. Os EPIs devem ser retirados, antes de sair do ambiente de trabalho, depositados em recipiente exclusivo para esse fim, em local apropriado, descontaminados antes de serem reutilizados ou descartados. Mos enluvadas no devem tocar superfcies limpas tais como teclados, telefones, maanetas, entre outros. Um sistema de notificao de acidentes e incidentes, absentesmo de empregados e doenas associadas ao trabalho no laboratrio deve ser organizado, bem como um sistema de vigilncia em sade, contemplando programas peridicos de imunizao e de controle da sade ocupacional. Dependendo do(s) material(is) biolgico(s) manipulado(s), para referncia futura, devem ser mantidas amostras sorolgicas da equipe do laboratrio e de outras pessoas possivelmente expostas aos riscos, inclusive pessoal de limpeza e manuteno. Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente a fim de minimizar a criao de aerossis ou de respingos. Deve-se sempre tomar precaues especiais em relao a qualquer objeto perfurocortante, incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas, tubos capilares e bisturis. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos perfurocortantes devem ficar restritos ao laboratrio e utilizados somente quando necessrio. Devem ser utilizadas seringas com agulha fixa ou agulha e seringa em uma unidade nica descartvel usada para injeo ou aspirao de materiais infecciosos ou quando necessrio, seringas que possuam um envoltrio para a agulha, ou sistemas sem agulha e outros dispositivos de segurana podero ser utilizados. Manter registro da utilizao do sistema de luz ultravioleta das CSBs com contagem do tempo de uso (vida til de 7.500 horas). Manter um sistema de manuteno, calibrao e de certificao dos equipamentos de conteno. A cada seis meses as CSBs e demais equipamentos essenciais de segurana devem ser testados, calibrados e certificados.

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Os filtros HEPA da rea de bioconteno devem ser testados e certificados de acordo com a especificao do fabricante ou no mnimo uma vez por ano. Acidentes ou incidentes que resultem em exposio a materiais biolgicos patognicos devem ser imediatamente notificados ao Profissional Responsvel, com providncias de avaliao mdica, vigilncia e tratamento, sendo mantido registro por escrito dos acidentes e das providncias adotadas. Todos os materiais e resduos devem ser descontaminados, preferencialmente esterilizados, antes de serem reutilizados ou descartados.

Equipamentos de conteno para o NB-2


A equipe deve utilizar no interior do laboratrio os EPIs adequados, conforme descritos no NB-1. Luvas devem ser usadas, segundo suas indicaes, e seu uso restrito ao laboratrio. Luvas de ltex descartveis no podero ser lavadas, nem reutilizadas. Devem ser utilizadas CSBs, classe I ou II, sempre que sejam realizadas culturas de tecidos infectados ou de ovos embrionados, bem como procedimentos com elevado potencial de criao de aerossis, como triturao, homogeneizao, agitao vigorosa, ruptura por sonicao, abertura de recipientes contendo material onde a presso interna possa ser maior que a presso ambiental e cultivo de tecidos, fluidos ou ovos de animais infectados. Sempre que o procedimento for potencialmente gerador de aerossis e gotculas, proveniente de materiais biolgicos dever ser utilizada a proteo para o rosto (mscaras, protetor facial, culos de proteo, entre outras). A centrifugao, fora da CSB, s poder ser efetuada se utilizada centrfuga de segurana e frascos lacrados. Esses s devero ser abertos no interior da cabine. Uma autoclave deve estar disponvel, no interior ou prximo ao laboratrio, dentro da edificao, de modo a permitir a descontaminao de todos os materiais utilizados e resduos gerados, previamente a sua reutilizao ou descarte.

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Procedimentos-padro de laboratrio para o NB-2


As equipes do laboratrio e de apoio devem receber treinamentos anuais, apropriados sobre os riscos potenciais associados aos trabalhos desenvolvidos. Treinamentos adicionais so necessrios em caso de mudanas de normas ou de procedimentos. O trabalho em laboratrio deve ser supervisionado por profissional de nvel superior com conhecimento e experincia comprovada na rea de Biossegurana. O profissional responsvel deve implementar polticas e procedimentos com ampla informao a todos que trabalhem no laboratrio sobre o potencial de risco relacionado ao trabalho. O acesso ao laboratrio deve ser restrito aos profissionais da rea, mediante autorizao do profissional responsvel. Pessoas imunocomprometidas bem como mulheres grvidas no devem ter acesso permitido aos laboratrios. Cabe ao Profissional Responsvel, a deciso final quanto anlise de cada circunstncia e a determinao de quem deve ter permisso para acesso ao laboratrio. Todo o pessoal deve ser orientado sobre os possveis riscos e para a necessidade de seguir as especificaes de cada rotina de trabalho, procedimentos de Biossegurana e prticas estabelecidas no manual de Biossegurana do laboratrio, acessvel a todos os funcionrios. As portas do laboratrio devem permanecer fechadas quando os ensaios estiverem sendo realizados e trancadas ao final das atividades. O emblema internacional indicando risco biolgico deve ser afixado nas portas dos recintos onde se manuseiam microorganismos pertencentes classe de risco 2, identificando o(s) agente(s) manipulado(s), o nvel de Biossegurana, as imunizaes necessrias, o tipo de equipamento de proteo individual que dever ser usado no laboratrio e o nome do profissional responsvel, com seu endereo completo e as diversas formas possveis para a sua localizao. Os EPI devem ser retirados, antes de se sair do ambiente de trabalho, depositados em recipiente exclusivo para esse fim, em local apropriado e descontaminados antes de serem reutilizados ou descartados. No tocar superfcies limpas tais como teclados, telefones, maanetas, (entre outros) enquanto estiver utilizando luvas.

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U m sistema de notificao de acidentes e incidentes, absentesmo de empregados e doenas associadas ao trabalho no laboratrio deve ser organizado, bem como um sistema de vigilncia em sade, contemplando programas peridicos de imunizao e de controle da sade ocupacional.

Instalaes laboratoriais NB-2


Alguns equipamentos de conteno so necessrios em laboratrios
de NB-2. Alm dos EPI adequados conforme descritos no NB-1, luvas devem ser utilizadas segundo suas indicaes, e seu uso restrito ao laboratrio. Sempre que o procedimento for potencialmente gerador de aerossis e gotculas, provenientes de materiais biolgicos deve ser utilizada proteo para o rosto (mscaras, protetor facial, culos de proteo, entre outras). A centrifugao, fora da cabine de segurana biolgica, s deve ser efetuada se utilizada centrfuga de segurana e frascos lacrados. Esses s devero ser abertos no interior da cabine de segurana biolgi ca (MINISTRIO DA SADE, 2004). As instalaes para um laboratrio de NB-2 devem atender s especifi caes estabelecidas para laboratrios NB-1, acrescidas das seguintes exigncias (MINISTRIO DA SADE, 2004; WORLD HEALTH ORGANIZATION, 2004, U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES et al., 2007). Devem estar afastadas das reas de circulao do pblico. exigido um sistema de portas com trancas no acesso ao laboratrio. Recomenda-se a instalao de lavatrios, com acionamentos automti cos ou acionados com o cotovelo ou p, em cada laboratrio. As cabines de segurana biolgica devem ser instaladas longe das passa gens de circulao e fora das correntes de ar procedentes de portas ou janelas e de sistemas de ventilao. Deve haver espao de aproximadamente 0,30 m atrs e em cada lado das cabines de seguranas biolgicas para permitir acesso fcil para a realizao da limpeza e manuteno. O ar de exausto das cabines de segurana biolgica classe II, filtrado atravs de filtros HEPA (High Efficiency Particulated Air/Filtro de Ar de Alta Eficincia) e das capelas qumicas deve ser lanado acima da edificao laboratorial e das edificaes vizinhas, longe de prdios habitados e de tomadas de ar do sistema de climatizao.

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O ar de exausto das cabines de segurana biolgica pode recircular no interior do laboratrio se a cabine for testada e certificada anualmente. No planejamento de novas instalaes devem ser considerados sistemas de ventilao que proporcionem um fluxo direcional de ar sem que haja uma recirculao para outras reas internas da edificao. A rea de escritrio deve ser localizada fora da rea de bioconteno. Uma autoclave ou outros equipamentos de descontaminao devem estar disponveis prximos ou no interior do laboratrio, de modo a permitir a descontaminao de todos os materiais infectados.

Nvel de Biossegurana 3 (NB-3)


aplicvel aos locais onde forem desenvolvidos trabalhos com materiais biolgicos da classe de risco 3. O pessoal do laboratrio deve ter treinamento especfico no manejo dos materiais biolgicos, devendo ser supervisionados pelo Profissional Responsvel. Todos os procedimentos que envolverem a manipulao de material biolgico devem ser conduzidos dentro de CSBs ou outro dispositivo de conteno fsica. Os manipuladores devem usar EPIs especficos. As barreiras secundrias para esse nvel incluem o acesso controlado ao laboratrio e sistemas de ventilao que minimizam a liberao de aerossis infecciosos do laboratrio. Os laboratrios pertencentes a este grupo devem ser registrados junto a autoridades sanitrias nacionais.

Procedimentos-padro de laboratrio para o NB-3


Esse nvel de conteno exige a intensificao dos programas de utilizao das prticas microbiolgicas e de segurana estabelecidas para o NB-2, alm da existncia obrigatria de dispositivos de segurana e do uso, igualmente obrigatrio, de CSB classe II ou III. Todos os procedimentos, sejam tcnicos ou administrativos, devem estar descritos, dispostos em locais de fcil acesso, e ser do conhecimento dos tcnicos envolvidos em sua execuo. Estes devem demonstrar previamente ter o domnio dos procedimentos tcnicos para a execuo das atividades laboratoriais. O acesso ao laboratrio deve ser restrito a profissionais

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qualificados.

Prticas especiais para o NB-3


Alm das prticas estabelecidas para o NB-2, devem ser obedecidas as prticas a seguir discriminadas:
Somente as pessoas necessrias para que o ensaio seja executado ou o pessoal de apoio deve ser admitido no local. As pessoas que apresentarem risco aumentado de contrarem infeces no so permitidas dentro do laboratrio. As equipes do laboratrio e de apoio devem receber treinamento adequado sobre os riscos potenciais associados ao trabalho desenvolvido, os cuidados necessrios para evitar uma exposio ao material biolgico e sobre os procedimentos de avaliao da exposio. A equipe do laboratrio dever frequentar cursos peridicos de atualizao ou treinamento adicional quando necessrio ou em caso de mudanas de normas e procedimentos. Jamais uma pessoa deve trabalhar sozinha dentro do laboratrio NB-3. O Profissional Responsvel deve estabelecer normas e procedimentos pelos quais s sero admitidos para o trabalho no laboratrio pessoas que j receberam informaes sobre o potencial de risco, que atendam a todos os requisitos para a entrada no laboratrio, demonstrem estar aptos para as prticas e tcnicas-padro de microbiologia, demonstrem habilidade tambm nas prticas e operaes especficas do laboratrio e obedeam a todas as regras para entrada e sada no laboratrio. Os procedimentos de Biossegurana devem ser incorporados aos procedimentos operacionais padres. Recomenda-se a mudana frequente das luvas acompanhada de lavagem das mos. proibido o uso de EPIs fora do laboratrio. Estes devem ser descontaminados antes de serem reutilizados ou descartados e trocados depois de contaminados.

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Os exames mdicos peridicos so obrigatrios. O pessoal do laboratrio deve ser apropriadamente imunizado ou examinado quanto aos materiais biolgicos manipulados ou presentes no laboratrio (por exemplo, vacina para hepatite B ou teste cutneo para tuberculose). Coletar sangue para a realizao de testes sorolgicos de toda a equipe e das pessoas expostas ao risco e armazen-las para futura referncia. Amostras adicionais podem ser periodicamente coletadas, dependendo dos materiais biolgicos manipulados ou do funcionamento do laboratrio. Todas as manipulaes que envolvam materiais biolgicos devem ser conduzidas no interior de CSBs ou de outros dispositivos de conteno fsica dentro de um mdulo de conteno. Todos os resduos devem ser obrigatoriamente esterilizados antes de serem removidos do laboratrio e descartados. Todos os materiais utilizados no laboratrio devem ser descontaminados, antes de serem reutilizados. Os filtros HEPA e pr-filtros das cabines de segurana biolgica e dos sistemas de ar retirados devem ser acondicionados em recipientes hermeticamente fechados para serem descontaminados por esterilizao. Acidentes ou incidentes que resultem em exposies a materiais infecciosos devero ser imediatamente relatados ao Profissional Responsvel. Anlise mdica adequada, vigilncia e tratamento devero ser proporcionados em registros por escrito devendo ser mantidos. O Profissional Responsvel deve garantir que o projeto da instalao e todos os procedimentos operacionais do NB-3 estejam documentados; que os parmetros operacionais e as instalaes tenham sido verificados quanto ao funcionamento exigido, antes que o laboratrio inicie as suas atividades; que as instalaes sejam verificadas no mnimo uma vez por ano e os equipamentos verificados, inclusive os sistemas de segurana, quanto ao seu funcionamento, calibrao e eficincia, de acordo com as especificaes do fabricante ou de acordo com as BPLs.

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Equipamentos de conteno para o NB-3


obrigatrio o uso de roupas de proteo (macaces, uniformes que promovam menor soluo de descontinuidade, no se admitindo roupas abotoadas na frente), uso de mscaras, gorros, luvas, pr-ps ou sapatilhas. As pessoas que usarem lentes de contato em laboratrios devero tambm usar culos de proteo ou protetores faciais. Utilizar CSBs, classe II, B 2 ou III, em qualquer operao com materiais biolgicos onde se incluem manipulao de culturas e de material clnico ou ambiental. Quando um procedimento ou processo no puder ser conduzido dentro de uma cabine de segurana biolgica devem ser utilizadas combinaes apropriadas de EPIs (por exemplo, respiradores, protetores faciais) com dispositivos de conteno fsica (por exemplo, centrfugas de segurana e frascos selados). Autoclave, preferivelmente de dupla porta, localizada no laboratrio ou localizada dentro da rea de apoio da instalao de bioconteno.

Instalaes laboratoriais NB-3


As instalaes laboratoriais exigidas devem atender as especificaes estabelecidas para o NB-2, acrescidas das exigncias a seguir apresentadas:
O laboratrio deve estar separado das reas de trnsito irrestrito do prdio e possuir acesso restrito. A entrada e a sada dos tcnicos devem ser feita atravs de cmara pressurizada ou vestirio de barreira adjacente rea de conteno do laboratrio, com presso diferenciada, para colocao e/ou retirada de EPIs, dotados de sistema de bloqueio de dupla porta, providos de dispositivos de fechamento automtico e de intertravamento. A entrada de materiais de consumo, amostras biolgicas (humanas e animais) deve ser feita atravs de cmara pressurizada ou outro sistema de barreira equivalente. Instalao de uma autoclave na rea de bioconteno para a sada de resduos. Quando as tubulaes das instalaes prediais atravessarem pisos, paredes ou tetos da rea de conteno, os orifcios de entrada e sada devem ser vedados com materiais que garantam o isolamento.

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O piso deve ser revestido de materiais contnuos, tais como resinas monolticas ou similares. Recomenda-se que o mobilirio seja modulado, com uso flexvel e com mobilidade. Deve haver pelo menos um lavatrio para lavagem das mos, com acionamento automtico, ou acionado com o cotovelo ou p, prximo porta de sada de cada laboratrio. Todas as esquadrias devem ser de material de fcil limpeza e manuteno. So recomendados visores nas paredes divisrias, entre salas e circulaes, e nas portas entre circulaes. As janelas e visores devem ter vidro de segurana e serem devidamente vedadas. Devem existir CSBs em todos os laboratrios. Quando forem utilizadas as CSBs da classe III, elas devem estar conectadas diretamente ao sistema de exaustores, de maneira que se evite qualquer interferncia no equilbrio do ar delas prprias ou do edifcio. Se elas estiverem conectadas ao sistema de insuflao do ar, isto dever ser feito de tal maneira que previna uma pressurizao positiva das cabines. Centrfugas ou outros equipamentos que possam produzir aerossis, devem ser refreados por meio de dispositivos que liberem o ar atravs de filtros absolutos, tipo HEPA, antes de serem descarregados no ambiente do laboratrio. Esses sistemas de filtrao devem ser testados no mnimo uma vez por ano ou de acordo com a especificao do fabricante. Deve haver um sistema de comunicao, ligando as reas de conteno s reas de suporte do laboratrio e de apoio tcnico da edificao. Deve haver chuveiro e lava-olhos de emergncia e lavatrio com dispositivos de acionamento por controles automticos em rea em conteno, adjacentes rea do laboratrio. O laboratrio deve ter um sistema de ar independente, com ventilao unidirecional, garantindo que o fluxo de ar seja sempre direcionado das reas de menor risco potencial para as reas de maior risco de contaminao. O ar de exausto no deve recircular para qualquer outra rea da edificao, devendo ser filtrado por meio de filtro HEPA, antes de ser eliminado para o exterior do laboratrio, longe de reas ocupadas e de entradas de ar. Os filtros HEPA devem ser instalados no ponto de descarga do sistema de exausto.

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Deve haver verificao constante do fluxo de ar no laboratrio. Recomenda-se que um monitor visual seja instalado para indicar e confirmar a entrada direcionada do ar para o laboratrio. Deve-se considerar a instalao de um sistema de automao para monitoramento do sistema de ar. Os pontos de suprimento de gua no laboratrio devem ser providos de dispositivo anti-refluxo. Os registros devem estar localizados fora da rea de conteno do laboratrio para interrupo do fluxo de gua pela equipe de manuteno quando necessrio. Os sifes em reteno devem ser mantidos cheios de um desinfetante ativo. As linhas de suprimento de gases comprimidos devem ser dotadas de filtros de alta eficincia, ou de sistema equivalente, para proteo de inverso do fluxo (dispositivo anti-refluxo). As tubulaes devem estar preferencialmente nos espaos tcnicos, aparentes, de fcil acesso equipe de manuteno. Toda a penetrao de canalizaes, por meio de pisos, paredes e tetos da rea de conteno deve ser vedada com produto malevel, no retrtil. As linhas de vcuo devem ser protegidas por filtros de alta eficincia, ou sistema equivalente, para proteo de inverso do fluxo. Uma alternativa o uso de bombas de vcuo portteis, no conectadas ao exterior da instalao e tambm dotadas de filtro de alta eficincia. Todas as canalizaes das instalaes de servio devem possuir dispositivos de fechamento para fins de descontaminao. Os disjuntores e quadros de comando devem estar localizados fora da rea de conteno do laboratrio. Todos os circuitos de alimentao de energia eltrica devem ser independentes das demais reas da edificao. O permetro de conteno do laboratrio deve ser dotado de sistema que permita sua vedao, possuindo dispositivos de fechamento em todas as canalizaes das instalaes de servio para procedimentos de descontaminao dos ambientes. Deve estar prevista a existncia de sadas de emergncia ou painis removveis.

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Deve possuir sistema de emergncia constitudo de um grupo motor-gerador e chave automtica de transferncia, para alimentar os circuitos da iluminao de emergncia; alarmes de incndio e de segurana predial; dos equipamentos essenciais, tais como CSBs, freezers, refrigeradores e incubadoras, dentre outros, e do ar condicionado de ambientes que necessitam de temperatura e fluxo unidirecional constante.

Observao Algumas instalaes existentes para o trabalho em conteno com agentes biolgicos com caractersticas de transmisso por aerossol podem, temporariamente, no possuir todas as caractersticas recomendadas para um NB-3. Nessas circunstncias, um nvel aceitvel de segurana para conduo dos procedimentos de rotina poder ser conseguido por meio de instalaes recomendadas para o NB-2 garantindo-se que:
O ar de exausto, filtrado, com filtros de alta eficincia, seja lanado acima da edificao laboratorial e das edificaes vizinhas, longe de prdios habitados e de tomadas de ar do sistema de climatizao. A ventilao do laboratrio seja equilibrada de modo a proporcionar um fluxo de ar direcionado para dentro da sala, estabelecendo presses diferenciadas entre as reas de menor e maior risco. O acesso ao laboratrio seja rigorosamente restrito aos tcnicos autorizados e proibido quando o trabalho estiver sendo realizado. Todos os resduos e materiais sejam esterilizados. Os procedimentos-padro, as prticas especiais e os equipamentos de conteno para o NB-3, sejam rigorosamente seguidos. A deciso de implementar as modificaes relacionadas anteriormente deve ser tomada somente pelo Responsvel Legal e pelo Profissional Responsvel, que devero comunic-las aos demais profissionais que trabalham no laboratrio.

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Nvel de Biossegurana 4 (NB-4)


Este nvel de conteno deve ser usado sempre que o trabalho envolver materiais biolgicos da classe de risco 4 ou com potencial patognico desconhecido, que representam um alto risco, no s para o pessoal do laboratrio, mas tambm para a comunidade e para o ambiente, podendo provocar doenas fatais, alm de apresentarem um elevado potencial de transmisso por aerossis. Para estes agentes no h nenhuma vacina ou terapia disponvel. Os agentes que possuem uma relao antignica prxima ou idntica aos dos agentes da classe de risco 4, tambm devem ser manuseados neste nvel de Biossegurana at que se consigam dados suficientes para confirmao do trabalho neste nvel de conteno ou para o trabalho em um nvel inferior. O Profissional Responsvel deve zelar pela aplicao de todos os procedimentos necessrios para a operao segura do laboratrio por toda a equipe, incluindo o pessoal de apoio e de manuteno. A equipe do laboratrio, supervisionada pelo Profissional Responsvel, deve possuir treinamento especfico, direcionado para a manipulao de agentes infecciosos extremamente perigosos e deve ser capaz de compreender, executar e operar as funes da conteno primria e secundria, de executar as prticas padres especficas e gerais de segurana, os equipamentos de conteno e das caractersticas das instalaes do laboratrio. O isolamento dos trabalhadores de laboratrios em relao aos materiais infecciosos aerossolizados realizado primariamente em CSB da classe III ou em CSB da classe II, B 2, associadas utilizao de roupas de proteo com presso positiva, ventiladas por sistema de suporte vida. O laboratrio NB-4 deve ser uma edificao construda separadamente de outras edificaes ou estar localizada em uma zona completamente isolada, possuindo caractersticas especficas quanto ao projeto e aos sistemas de engenharia para preveno da disseminao de microorganismos no meio ambiente. Os laboratrios de conteno mxima s

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devem funcionar com autorizao e fiscalizao das respectivas autoridades sanitrias.

Procedimentos-padro de laboratrio para o NB-4


Esse nvel de conteno exige a intensificao dos programas de utilizao das prticas microbiolgicas e de segurana estabelecidas para o NB-3, alm da existncia obrigatria de dispositivos de segurana especficos e do uso, igualmente obrigatrio, de CSB classe II B2 ou III.

Prticas especiais para o NB-4


Devem ser obedecidas as prticas especiais estabelecidas para o NB-3 acrescidas das exigncias a seguir:
Nenhum material dever ser removido do laboratrio de conteno mxima (NB-4), a menos que tenha sido esterilizado, exceto os materiais biolgicos que necessariamente tenham que ser retirados na forma vive. O material biolgico vivel, a ser removido da CSB classe III ou do laboratrio de conteno mxima, deve ser acondicionado em recipiente de conteno primria inquebrvel e selado. Este, por sua vez, deve ser acondicionado dentro de um segundo recipiente tambm inquebrvel e selado, que dever passar por um tanque de imerso contendo desinfetante, ou por uma cmara de fumigao ou por um sistema de barreira de ar planejada com este propsito. Somente as pessoas envolvidas na programao e no suporte ao programa a ser desenvolvido, e cujas presenas forem solicitadas nos ambientes do laboratrio, devem possuir permisso para entrada no local. O Profissional Responsvel tem a responsabilidade final no controle do acesso ao laboratrio. Antes de entrar no laboratrio, as pessoas devero ser avisadas sobre o risco potencial e devero ser instrudas sobre as medidas apropriadas de segurana.

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O Profissional Responsvel tem a responsabilidade de assegurar que, antes de iniciar o trabalho, toda a equipe apresente uma alta competncia em relao s prticas e tcnicas microbiolgicas, em prticas e operaes especiais, especficas do laboratrio, das precaues necessrias para a avaliao de exposies e dos procedimentos de preveno exposio. As pessoas autorizadas devem cumprir com rigor as instrues e os procedimentos para a entrada e sada do laboratrio. Deve haver um registro, por escrito, de entrada e sada de pessoal, com data, horrio e assinaturas. Deve existir um plano de contingncia e de emergncia com descrio clara dos procedimentos necessrios para a ao em tais situaes. Alm das amostras sorolgicas colhidas rotineiramente, amostras adicionais devem ser periodicamente coletadas, dependendo dos agentes manipulados ou das atividades do laboratrio. Ao estabelecer-se um programa de vigilncia sorolgica deve-se considerar a disponibilidade dos mtodos para a avaliao do anticorpo do(s) agente(s) em questo. Prever uma rea de observao, isolamento e para os primeiros cuidados mdicos com o pessoal suspeito de contaminao em caso de acidentes no laboratrio. Relatos por escrito devem ser preparados e mantidos em atas do laboratrio e estas devem ser encaminhadas CBS. Previamente realizao de trabalhos em conteno utilizando-se CBS da classe III, os profissionais devem trocar suas roupas na entrada do laboratrio, nos vestirios internos, tambm em conteno, adjacentes ao laboratrio, por roupa protetora completa e descartvel. Antes de sair do laboratrio para a rea de banho, devem retirar a roupa usada no laboratrio e deposit-las em recipiente exclusivo para esse fim e encaminh-las para a esterilizao antes de serem descartadas. Na entrada ao laboratrio de conteno mxima, que utiliza roupas protetoras com presso positiva, os profissionais devem retirar suas roupas nos vestirios internos (tambm em conteno), adjacentes ao laboratrio e vestir os macaces. Na sada, os profissionais, ainda vestindo o macaco de presso positiva com sistema de suporte vida, devem passar por um banho de descontaminao qumica. A entrada e sada de pessoal por antecmara pressurizada somente devem ocorrer em situaes de emergncia. Materiais no relacionados ao ensaio, que estiver sendo realizado no momento, no so permitidos no laboratrio.

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Os filtros HEPA e pr-filtros das cabines de segurana biolgica e dos sistemas de ar devem ser removidos e acondicionados em recipiente hermeticamente fechado para subsequente descontaminao e destruio por meio de incinerao. Todos os materiais provenientes da rea de bioconteno devem sofrer esterilizao. Todos os resduos, aps a esterilizao, devem ser incinerados.

Equipamentos de conteno para o NB-4


Existem dois modelos de laboratrio de conteno mxima para manipulaes de materiais biolgicos da classe de risco 4:
(1) manipulaes conduzidas em CSB de classe III; (2) manipulaes conduzidas em CSB de classe II, B 2, neste caso usadas em associao s roupas de proteo pessoal, pea nica ventilada, de presso positiva, possuindo um sistema de suporte vida, protegido por filtros HEPA. O sistema de suporte de vida deve incluir compressores de respirao de ar, alarmes e tanques de ar de reforo de emergncia.

Instalaes laboratoriais NB-4


As instalaes laboratoriais exigidas devem atender s especificaes estabelecidas para o NB-3, acrescidas as seguintes exigncias:
A construo do laboratrio de conteno mxima pode se basear em um dos tipos de laboratrios ou em uma combinao dos dois tipos. Se for utilizada a combinao, a construo deve atender a todos os requisitos de cada tipo. O acesso dos profissionais deve ser controlado por sistemas de identificao acionados por leitor de ris, ou leitor de digitais, ou carto magntico, ou outro tipo de sistema de segurana rigoroso. A entrada e a sada de tcnicos feita por meio de sanitrios/vestirios de barreira, com diferencial de presso entre os ambientes, dotadas de sistema de bloqueio de dupla porta, providos de dispositivos de fechamento automtico e de intertravamento.

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A entrada de materiais de consumo, amostras biolgicas, e sada de resduos deve ocorrer por meio de cmara pressurizada ou sistemas de passagem (autoclaves, tanques de imerso, guichs e outros). Diariamente, antes que o trabalho se inicie, devem ser feitas inspees de todos os sistemas de conteno e de suporte vida, a fim de assegurar o funcionamento de acordo com os parmetros de operao. Devem existir visores localizados nas paredes divisrias e portas, entre a rea de conteno e as reas de suporte do laboratrio. As portas devem possuir caixilhos de construo slidos e dispositivos de vedao total com sistema de acionamento de abertura automtico, aps identificao. Todos os efluentes lquidos, tais como a gua do chuveiro, da condensao da autoclave (conduzida por meio de um sistema fechado) e de outros pontos da instalao deve estar conectado diretamente a um sistema de tratamento mecnico e biologicamente monitorado, para serem esterilizados antes de descartados no esgoto sanitrio. Os sistemas de emergncia devem ser testados periodicamente, de acordo com a especificao do fabricante ou no mnimo uma vez por ano. As linhas de suprimento de gases comprimidos devem ser dotadas de filtros ou de sistema equivalente para proteo de inverso do fluxo (dispositivo anti-refluxo). O laboratrio deve possuir um sistema de comunicao, de circuito interno de imagem e/ou outro dispositivo de comunicao entre as reas de conteno e as reas de suporte do laboratrio e de apoio tcnico da edificao. Deve possuir sistema de abastecimento de energia eltrica de emergncia, ligada aos sistemas de suporte vida, para alimentar os circuitos da iluminao, os alarmes, os controles de entrada e sada, os sistemas de comunicao, as CSBs e os outros equipamentos essenciais que parem de funcionar. Deve possuir sistema de tratamento trmico por incinerao, localizado dentro ou prximo edificao, para eliminao dos resduos gerados, obedecendo s normas legais e tcnicas ambientais vigentes.

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Laboratrio NB-4 com CSB Classe III


O sistema de vcuo deve possuir um sistema de filtrao em srie, por meio de filtros HEPA, em cada ponto onde ser utilizado ou prximo da vlvula de servio. Os filtros devem ser instalados de forma a permitir a descontaminao e a substituio local dos mesmos. Outras linhas utilitrias devem ser providas de dispositivos anti-refluxo. A exausto de ar das CSBs classe III deve ser realizada por sistema de dupla filtragem por filtros HEPA em srie. A autoclave de porta dupla deve ser acoplada CSB classe III para a descontaminao de materiais e de resduos. Deve haver um dispositivo visual para o monitoramento da presso, indicando e confirmando o diferencial de presso da sala da cabine e estar localizado na entrada do vestirio. O fluxo de ar tambm deve ser monitorado.

Laboratrio NB-4 com o uso de CSB Classe II associado utilizao de roupas de proteo individual com presso positiva, ventiladas por sistema de suporte de vida
As circulaes s podem ser efetuadas no mesmo pavimento, entre as reas de conteno e de suporte do laboratrio, com dimenses que permitam a passagem dos tcnicos com macaces ventilados, sem risco de acidentes. As bancadas devem possuir superfcies monolticas, fixas, seladas, sem reentrncias e salincias, impermeveis e resistentes ao calor moderado e aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na descontaminao das superfcies de trabalho e dos equipamentos. O mobilirio deve ter uma construo simples, de modo a minimizar a necessidade de manuteno, e ser resistente a gases, substncias qumicas e ao calor moderado; O sistema de insuflamento de ar pode estar equipado com filtro absoluto, de alta eficcia, tipo HEPA, independente das outras instalaes contguas, caso a atividade a ser desenvolvida exija.

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Os dutos de exausto devem ser equipados com pelo menos dois filtros HEPA, montados em srie antes de serem direcionados para fora do laboratrio. A exausto das CSB deve ser feita por meio de um sistema de dupla filtragem por filtros HEPA. Dever ser instalada autoclave de dupla porta, possuindo controle automtico, para descontaminao de quaisquer materiais utilizados na rea de bioconteno. Materiais e equipamentos que no possam ser descontaminados na autoclave devem passar por tanque de imerso com desinfetante ou cmara de fumigao.

Trabalho com organismos geneticamente modificados


Atualmente existe uma grande preocupao com trabalhos relacionados com a construo, manipulao e estocagem de OGM, pois envolve combinao de informao gentica de diferentes origens, o que pode resultar na criao de organismos que antes no existiam na natureza (WORLD HEALTH ORGANIZATION, 2004). Antes de serem conduzidos experimentos que envolvam a tecnologia do DNA recombinante, com a construo ou uso de transgnicos, os riscos biolgicos devem ser avaliados. Uma propriedade patognica ou risco potencial associado manipulao gentica de um determinado organismo pode ocorrer, podendo ser uma caracterstica nova e no bem caracterizada. No Brasil, qualquer atividade que envolva a construo, experimentao, cultivo, manipulao, transporte, comercializao, consumo, armazenamento, liberao e descarte de OGM e derivados precisa ser autorizada pela CTNBio. A CIBio comisso responsvel por encaminhar CTNBio os documentos para efeito de anlise, registro ou autorizao de pesquisa com OGM. Deste modo, para os projetos de pesquisa a serem conduzidos nas Unidades da Embrapa que envolvam a manipulao de OGM, o pesquisador responsvel dever preencher e

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encaminhar CIBio da Unidade um formulrio solicitando autorizao para trabalho com OGM. Adicionalmente, de acordo com a CTNBio, o pesquisador responsvel por atividade envolvendo OGM e seus derivados e/ou pesquisa com OGM deve:
Assegurar o cumprimento das normas de Biossegurana em conformidade com as recomendaes da CTNBio e da CIBio. Submeter CIBio proposta de atividade, especificando as medidas de Biossegurana que sero adotadas. Apresentar CIBio, antes do incio de qualquer atividade, as informaes e documentao na forma definida nas respectivas Resolues Normativas da CTNBio. Assegurar que as atividades no sero iniciadas at a emisso de deciso tcnica favorvel pela CTNBio e, quando for o caso, autorizada pelo rgo de registro e fiscalizao competente. Solicitar a autorizao prvia CIBio para efetuar qualquer mudana nas atividades anteriormente aprovadas, para que seja submetida CTNBio para aprovao. Enviar CIBio solicitao de autorizao de importao de material biolgico envolvendo OGM e seus derivados, para que seja submetida CTNBio para aprovao. Solicitar CIBio autorizao para transferncia de OGM e seus derivados, dentro do territrio nacional, com base nas Resolues Normativas da CTNBio. Assegurar que a equipe tcnica e de apoio envolvida nas atividades com OGM e seus derivados recebam treinamento apropriado em Biossegurana e que estejam cientes das situaes de riscos potenciais dessas atividades e dos procedimentos de proteo individual e coletiva no ambiente de trabalho, mediante assinatura de declarao especfica. Notificar CIBio as mudanas na equipe tcnica do projeto, enviando currculo dos possveis novos integrantes. Relatar CIBio, imediatamente, todos os acidentes e agravos sade possivelmente relacionados s atividades com OGM e seus derivados. A ssegurar, junto instituio responsvel, a disponibilidade e a manuteno dos equipamentos e da infraestrutura de Biossegurana. Fornecer CIBio informaes adicionais, quando solicitadas, bem como atender a possveis auditorias da CIBio.

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Assim como os agentes infecciosos, os OGM tambm possuem uma classificao em classes de risco. Nessa classificao considerado o organismo e a sua manipulao. Deste modo, a determinao da classe de risco deve observar: a classe de risco do organismo receptor, a classe de risco do organismo doador, a capacidade de replicao no organismo recombinante e fatores patognicos associados com ao produto do gene inserido, como aumento de virulncia, toxicidade, atividade fisiolgica ou alergenicidade (NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH, 2002). Segundo a CTNBio (Resoluo Normativa CTNBIO N 02, de 27 de novembro de 2006) deve-se tambm considerar os seguintes aspectos para a classificao de risco:
P ossibilidade de recombinao de sequncias inseridas no OGM, levando reconstituio completa e funcional de genomas de agentes infecciosos. Outros processos que gerem um genoma infeccioso. Genes que codifiquem substncias txicas ao homem, aos animais, aos vegetais ou que causem efeitos adversos ao meio ambiente. Genes de resistncia a antibiticos de amplo uso clnico.

Classes de risco de OGM


De acordo com a CTNBio (Resoluo Normativa CTNBIO N 02, de 27 de novembro de 2006), os OGM so classificados em quatro classes de risco dos OGM:

Classe de Risco 1 (baixo risco individual e baixo risco para a coletividade)


OGM que contm sequncias de DNA ou RNA de organismo doador e receptor que no causem agravos sade humana e animal e efeitos adversos aos vegetais e ao meio ambiente.

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Classe de Risco 2 (moderado risco individual e baixo risco para a coletividade)


OGM que contm sequncias de DNA ou RNA de organismo doador ou receptor com moderado risco de agravo sade humana e animal, que tenha baixo risco de disseminao e de causar efeitos adversos aos vegetais e ao meio ambiente. Enquadram-se na classe de risco 2 ou superior aqueles vegetais geneticamente modificados (VGM) que so plantas daninhas ou espontneas, que possam cruzar com estas em rea que torne este cruzamento possvel, gerando descendentes frteis com maior capacidade de invaso e dano ao meio ambiente do que os parentais; e OGM que sejam vetores biolgicos de agentes causadores de agravos sade do homem, dos animais, dos vegetais ou ao meio ambiente.

Classe de Risco 3 (alto risco individual e risco moderado para a coletividade)


OGM que contm sequncias de DNA ou RNA de organismo doador ou receptor, com alto risco de agravo sade humana e animal, que tenha baixo ou moderado risco de disseminao e de causar efeitos adversos aos vegetais e ao meio ambiente.

Classe de Risco 4 (alto risco individual e alto risco para a coletividade)


OGM que contm sequncias de DNA ou RNA de organismo doador ou receptor com alto risco de agravo sade humana e animal, que tenha elevado risco de disseminao e de causar efeitos adversos aos vegetais e ao meio ambiente. Algumas observaes importantes so feitas pela CTNBio (Resoluo Normativa CTNBIO N 02, de 27 de novembro de 2006) em relao aos OGM:

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A classe de risco do OGM resultante no poder ser inferior classe de risco do organismo receptor, exceto nos casos em que exista reduo da virulncia e patogenicidade do OGM. O OGM que contenha sequncias de DNA ou RNA de organismos ou agentes infecciosos desprovidas de potencial de expresso nas atividades e projetos propostos ser classificado na mesma classe de risco do organismo receptor. O OGM que contenha sequncias de DNA ou RNA derivadas de organismos de classe de risco superior e com potencial de expresso poder, a critrio da CTNBio, ser classificado na classe de risco do organismo receptor, desde que reconhecidamente no associadas toxicidade ou patogenicidade nas atividades e projetos propostos. O OGM que se torne mais apto sobrevivncia no meio ambiente que os organismos nativos e que, a critrio da CTNBio, represente uma ameaa potencial biodiversidade, pode ter sua classe de risco aumentada.

Baseado nessas classes de riscos dos OGM, a CTNBio (Resoluo Normativa CTNBIO N 02, de 27 de novembro de 2006) determinou quatro nveis de Biossegurana, NB-1, NB-2, NB-3 e NB-4, que so crescentes no maior grau de conteno e complexidade do nvel de proteo.

Nveis de Biossegurana de OGM


Seguem as determinaes da CTNBio para trabalho com OGM de classe de risco 1 e 2.

Nvel de Biossegurana 1
Adequado s atividades e projetos que envolvam OGM da classe de risco 1, realizadas nas seguintes condies:
No necessrio que as instalaes estejam isoladas das demais dependncias fsicas da instituio, sendo as atividades e projetos conduzidos geralmente em bancada, biotrio ou casa de vegetao. A equipe tcnica e de apoio dever ter treinamento especfico nos procedimentos realizados nas instalaes e dever ser supervisionada pelo tcnico principal.

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As instalaes NB-1 devem ser desenhadas de modo a permitir fcil limpeza e descontaminao. A superfcie das bancadas deve ser impermevel gua e resistente a cidos, lcalis, solventes orgnicos e a calor moderado. Os espaos entre as bancadas, cabines e equipamentos deve ser suficiente de modo a permitir fcil limpeza. OGM devero ser manipulados em reas sinalizadas com o smbolo universal de risco biolgico, com acesso restrito equipe tcnica e de apoio ou de pessoas autorizadas. As superfcies de trabalho devem ser descontaminadas uma vez ao dia ou sempre que ocorrer contaminao. Todo resduo lquido ou slido contaminado deve ser descontaminado antes de ser descartado, assim como todo material ou equipamento que tiver entrado em contato com o OGM. Deve-se utilizar dispositivo mecnico para pipetagem. Alimentos devem ser guardados em reas especficas para este fim, fora das instalaes, sendo proibido comer, beber, fumar e aplicar cosmticos nas reas de trabalho. Antes de deixar as instalaes, as mos devem ser lavadas sempre que tiver havido manipulao de organismos contendo DNA ou RNA recombinante. Pias para lavagem das mos e equipamentos de proteo individual e coletiva devem ser utilizados para minimizar o risco de exposio ao OGM. proibida a admisso de animais que no estejam relacionados ao trabalho em execuo nas instalaes. Extrema precauo deve ser tomada quando forem manuseadas agulhas, seringas e vidros quebrados, de modo a evitar a auto-inoculao e a produo de aerossis durante o uso e o descarte. As agulhas no devem ser entortadas, quebradas, recapeadas ou removidas da seringa aps o uso. Agulhas, seringas e vidros quebrados devem ser imediatamente colocados em recipiente resistente a perfuraes e autoclavados antes do descarte. Materiais contaminados s podem ser retirados das instalaes em recipientes rgidos e prova de vazamentos.

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Deve ser providenciado um programa rotineiro adequado de controle de insetos e roedores. Todas as reas que permitam ventilao devero conter barreiras fsicas para impedir a passagem de insetos e outros animais. Um Manual de Biossegurana deve ser preparado de acordo com as especificidades das atividades realizadas. Todo o pessoal deve ser orientado sobre os possveis riscos e para a necessidade de seguir as especificaes de cada rotina de trabalho, procedimentos de Biossegurana e prticas estabelecidas no Manual. Devem ser mantidos registros de cada atividade ou projeto desenvolvidos com OGM e seus derivados. Atividades e projetos com organismos no geneticamente modificados que ocorram concomitantemente e nas mesmas instalaes com manipulao de OGM devem respeitar a classificao de risco do OGM. Todo material proveniente de OGM e seus derivados dever ser descartado de forma a impossibilitar seu uso como alimento por animais ou pelo homem, salvo o caso em que este seja o propsito do experimento, ou se especificamente autorizado pela CIBio ou CTNBio.

Nvel de Biossegurana 2
Adequado s atividades e projetos que envolvam OGM de classe de risco 2, realizadas nas seguintes condies:
As instalaes e procedimentos exigidos para o NB-2 devem atender s especificaes estabelecidas para o NB-1 acrescidas da necessidade de haver uma autoclave disponvel em seu interior, de modo a permitir a descontaminao de todo o material antes do descarte, sem o trnsito do OGM por corredores e outros espaos no controlados. Deve-se sempre utilizar cabines de segurana biolgica (Classe I ou II). Cabe ao Pesquisador ou Tcnico Principal a responsabilidade de avaliar cada situao e autorizar quem poder entrar ou trabalhar nas instalaes NB-2. Deve ser colocado um aviso sinalizando o nvel de risco, identificando o OGM e o nome do Pesquisador ou Tcnico Principal, endereo completo e diferentes possibilidades de sua localizao ou de outra pessoa responsvel e o contato com a CIBio.

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O Pesquisador ou Tcnico Principal deve estabelecer polticas e procedimentos, provendo ampla informao a todos que trabalhem nas instalaes sobre o potencial de risco relacionado s atividades e projetos ali conduzidos, bem como sobre os requisitos especficos para entrada em locais onde haja a presena de animais para inoculao. No interior das instalaes, os frequentadores devem utilizar os equipamentos apropriados de proteo individual tais como jalecos, luvas, gorros, mscaras, culos, protetores pr-p, entre outros, os quais devem ser retirados antes da pessoa deixar as instalaes credenciadas. Aps o uso, os equipamentos de proteo individuais no descartveis devem ser limpos e guardados fora da rea contaminada e as pessoas devem ser treinadas para seu manuseio e guarda apropriada. Todos os requisitos necessrios para a entrada nas instalaes credenciadas devem estar indicados na porta de entrada. As superfcies de trabalho das cabines de segurana e de outros equipamentos de conteno devem ser descontaminadas sempre ao trmino das atividades com OGM. Para experimento de menor risco realizado concomitantemente no mesmo local, dever ser adotado o nvel NB-2. Quando apropriado, a equipe tcnica e de apoio deve estar vacinada contra os agentes infecciosos relacionados aos experimentos conduzidos nas instalaes NB-2. Exames mdicos peridicos para os trabalhadores das instalaes onde so conduzidos atividades e projetos com OGM podem ser solicitados pela CTNBio, incluindo avaliao clnica laboratorial de acordo com o OGM envolvido, levando-se em considerao as medidas de proteo e preveno cabveis.

Todos os laboratrios da Unidade da Embrapa onde houver atividades com OGM devero ter a etiqueta de risco biolgico com emblema internacional de risco biolgico e preenchida com os dados de identificao do nvel de risco, o OGM, o nome do responsvel principal, endereo completo e diferentes possibilidades de sua localizao ou de outra pessoa responsvel e o contato com a CIBio, fixada na porta de entrada em lugar visvel (Anexo I).

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Trabalho com animais geneticamente modificados


So considerados Animais Geneticamente Modificados (AnGM) todos aqueles animais cujas sequncias em seu DNA sofreram modificaes induzidas pelo homem. Assim, desde camundongos at animais domsticos de grande porte podem ser classificados como AnGM. Inicialmente, os AnGM foram gerados com o objetivo de se estabelecer modelos de estudo para doenas humanas. Estes tipos de animais, principalmente murinos, vm sendo gerados desde a dcada de 80. Contudo, a partir de 1990, estudos mostraram a possibilidade de se gerar animais domsticos modificados geneticamente para a produo de protenas recombinantes com aplicaes farmacuticas. Essas protenas podem ser produzidas, principalmente, no leite dos AnGM domsticos, proporcionando a produo em maior escala e com reduo de custos dos produtos recombinantes quando comparados com a maioria dos sistemas atuais que envolvem biorreatores utilizando bactrias transformadas ou clulas animais transfectadas e cultivadas in vitro. Os nveis de segurana (NBs) e critrios para a manipulao, em laboratrio de clulas, gametas e embries modificados geneticamente so os mesmos descritos nos itens anteriores para OGM. Porm, quando se trabalha com animais vivos (in vivo) medidas adicionais de biossegurana devem ser adotadas, com o objetivo de evitar a liberao acidental de AnGMs e/ou seus produtos ao meio ambiente antes da avaliao definitiva de que no h riscos a outros animais, microorganismos e ao homem. Portanto, procedimentos de conteno devem evitar que secrees dos AnGM que possam conter algum produto recombinante no testado, contaminem o meio ambiente, bem como o escape dos animais, evitando-se cruzamentos no monitorados de AnGM com animais no modificados geneticamente e, consequente, disseminao involuntria do transgene. Assim, seguindo a Resoluo Normativa CTNBIO N 02, de 27 de novembro de 2006, todas as atividades em conteno que

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envolva AnGM devem adotar medidas de segurana adicionais, alm daquelas citadas para os nveis de Biossegurana para OGM.

Limpeza, desinfeco, assepsia e esterilizao


Preconiza-se realizar a limpeza com gua e sabo ou detergente de todas as superfcies fixas em todas as reas de servios de sade, como forma de promover a remoo de sujeira e do mau odor caracterstico, reduzindo a populao microbiana nas reas do estabelecimento. Os antisspticos descritos como microbicidas ou microbiostticos recomendados para utilizao na pele, mucosa e ferimentos, que so permitidos, abrangem as solues alcolicas (atuam por desnaturao de protenas), iodadas e iodforos (ateno absoro transcutnea em recm-nascidos e necessita de dois minutos de contato para a liberao do iodo livre), solues contendo cloro-hexidina (atua por rutura da parede celular), e o permanganato de potssio utilizado em algumas reas. No so permitidas as formulaes contendo mercrio, acetona, quaternrios de amnio e hipoclorito a 0,5%, ter e clorofrmio. A desinfeco o processo de destruio de microorganismos em forma vegetativa mediante aplicao de agentes fsicos ou qumicos. Os processos fsicos mais aplicados e descritos para a desinfeco incluem a imerso em gua em ebulio por trinta minutos, associando-se processos como calor ou ao mecnica ou ainda adio de detergentes. Quando os artigos so sensveis ao calor, recomenda-se a utilizao de processos qumicos. Os desinfectantes para lactrios mais descritos e permitidos so o hipoclorito de sdio, de ltio e de clcio. Entre os desinfectantes indicados para superfcies fixas de ambientes de servios de sade e que so permitidos encontram-se os lcoois, os fenlicos, o iodo e seus derivados, os liberadores de cloro ativo e os quaternrios de amnio.

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A esterilizao promove destruio de todas as formas de vida microbiana, as formas vegetativas, as esporuladas, os fungos e os vrus mediante aplicao de agentes fsicos e qumicos. O agente esterilizador fsico mais descrito e aconselhado o vapor saturado sob presso (autoclaves); o calor seco recomendado para artigos sensveis a umidade; a radiao ultravioleta no recomendada atualmente para desinfeco de superfcies ou artigos; e a flambagem, embora seja permitido, em laboratrio, deve-se ter o critrio de escolha e o cuidado de no formar aerossis com partculas virulentas ntegras. Os agentes qumicos permitidos com capacidade esterilizante so os aldedos (glutaraldedo) e o xido de etileno descrito com as normas tcnicas na Portaria Interministerial de Sade e Trabalho de nmero 4, divulgada em 31 de julho de 1991.
Acrilamida: neurotxica e deve ser manipulada com cuidados especiais de mscara, proteo ocular e luvas. Ao terminar sua utilizao recomenda-se sua polimerizao prvia ao descarte. Nunca deve ser desprezada na pia ou lixo de descarte em forma lquida. Actinomicina D: antibitico que inibe a transcrio do DNA intercala-se entre dois pares, deformando o molde e impedindo a ao da polimerase. lcool etlico: como outros lcoois, deve ser diludo para que no atue como fixador. Azida sdica: utilizada como preservante, conservante. Bloqueia a cadeia respiratria e em contato direto irrita e queima a pele e a mucosa. Beta-mercaptoetanol ou 2 mercapto-etanol: um agente redutor e deve ser manipulado em capela de exausto. Brometo de etdio: como outros compostos utilizados como corantes fluorocrmicos (iodeto de propdio), nunca deve ser aquecido a uma temperatura superior a 60C por se seu carter carcinognico. mutagnico devido a sua capacidade de associarem-se as cadeias dos cidos nuclicos (intercalando-se ao DNA e associa-se ao RNA). No trmino de sua utilizao deve-se inativ-lo quimicamente para que perca a sua capacidade de interao com os cidos nuclicos (ver mtodo no apndice).

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D etergentes: em geral, irritam as mucosas e a pele pela capacidade de solubilizar as protenas da membrana celular e desengordurar a pele, retirando a sua proteo natural. Devem-se utilizar detergentes neutros para limpeza do material de laboratrio e material hidratante para a pele no final do expediente. Iodeto de propdio: como outros compostos utilizados como corantes fluorocrmicos (brometo de etdio), nunca deve ser aquecido a uma temperatura superior a 60 C por ser seu carter carcinognico. mutagnico devido a sua capacidade de associarem-se as cadeias dos cidos nuclicos. Mistura sulfocrmica: corrosiva e custica, utilizada para retirar produtos e restos de matrias orgnicas de vidraria; oxidante e txica. Devido presena de cromo IV comprovadamente cancergena. Recomenda-se atualmente sua substituio por soluo aquosa 1:2 de cido ntrico que pode ficar em contato com o material durante dois dias e posteriormente exige a lavagem com detergente e bastante gua. Nitrognio lquido: utilizado na criopreservao, no deve ser transportado em recipientes comuns como garrafa trmica sem vlvula de segurana. Os vapores podem resfriar e congelar as vias respiratrias em transportes civis pequenos de cabina especialmente se combinada por pessoal sem treinamento adequado. Piridinas: provocam leses hepatorrenais e esto associadas ao surgimento de tumores malignos. Rifampicina: liga-se subunidade beta da RNA polimerase dos procariontes; previne a iniciao da sntese de RNA. Trisol: utilizado na preparao e manuteno de material para dosagem de RNA, custico e txico. Deve ser manipulado com precauo em lugar seguro de derramamento para evitar acidentes de queimadura na pele.

Tecnologias de tratamento dos resduos biolgicos


Entende-se por tratamento dos resduos slidos, de forma genrica, quaisquer processos manuais, mecnicos, fsicos, qumicos ou biolgicos que alterem as caractersticas dos resduos, visando minimizao do risco sade, a preservao da qualidade do meio ambiente, a segurana e a sade do trabalhador.

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Segundo a Resoluo ANVISA N 306/04, o tratamento consiste na aplicao de mtodo, tcnica ou processo que modifique as caractersticas dos riscos inerentes aos resduos, reduzindo ou eliminando o risco de contaminao, de acidentes ocupacionais ou de danos ao meio ambiente. O tratamento pode ser feito no estabelecimento gerador ou em outro local, observadas, nestes casos, as condies de segurana para o transporte entre o estabelecimento gerador e o local do tratamento. Os sistemas para tratamento de resduos biolgicos de laboratrios de pesquisa animal e de estabelecimentos de sade devem ser objeto de licenciamento ambiental, de acordo com a Resoluo Conama N 237/97 e so passveis de fiscalizao e de controle pelos rgos de vigilncia sanitria e de meio ambiente.

Desinfeco qumica ou trmica


H vrias formas de se proceder ao tratamento como desinfeco qumica ou trmica (autoclavagem, microondas, incinerao), que esto detalhados a seguir.

Desinfeco para tratamento dos resduos do Grupo A


As tecnologias de desinfeco mais conhecidas so a autoclavagem, o uso do microondas e a incinerao. Estas tecnologias alternativas de tratamento de resduos biolgicos e de servios de sade permitem um encaminhamento dos resduos tratados para o circuito normal de resduos slidos urbanos (RSU), sem qualquer risco para a sade pblica. De acordo com o documento Technical Assistance Manual: State Regulatory Oversight of Medical Waste Treatment Technology, da Agncia de Proteo Ambiental (EPA) dos Estados Unidos existem diversos nveis de inativao microbiana. Para as tecnologias de tratamento de resduos de biolgicos e de servios de sade, necessrio atingir pelo menos o nvel 3.

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Autoclavagem
A descontaminao com utilizao de vapor em altas temperaturas (autoclavagem) - um tratamento que consiste em manter o material contaminado em contato com vapor de gua, a uma temperatura elevada, durante perodo de tempo suficiente para destruir potenciais agentes patognicos ou reduzi-los a um nvel que no constitua risco. O processo de autoclavagem inclui ciclos de compresso e de descompresso de forma a facilitar o contato entre o vapor e os resduos. Os valores usuais de presso so da ordem dos 3 a 3,5 bar e a temperatura atinge 135C. Este processo tem a vantagem de ser familiar aos tcnicos de laboratrio que o utilizam para processar diversos tipos de materiais biolgicos dentro da sua rotina. O processo normal de autoclavagem comporta basicamente as seguintes operaes:
Pr-vcuo inicial: criam-se condies de presses negativas de forma que na fase seguinte o vapor entre em contato com os resduos. Admisso de vapor: introduo de vapor na autoclave e aumento gradual da presso de forma a criar condies para o contato entre o vapor e os resduos e para destruio de invlucros que limitem o acesso do vapor a todas as superfcies. Exposio: manuteno de temperaturas e presses elevadas durante um determinado perodo de tempo at se concluir o processo de descontaminao. De acordo com a carga a tratar, o operador define o tempo e a temperatura de cada ciclo. Exausto lenta: libertao gradual do vapor que passa por um filtro poroso com uma malha suficientemente fina para impedir a passagem de microrganismos para o exterior da autoclave. Diminuio gradual da presso at a presso de uma atmosfera. Arrefecimento da carga: reduo da carga at uma temperatura que permita a retirada dos resduos da autoclave.

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Para verificar as condies de funcionamento dessas unidades pode ser feito um teste, de forma a ser atingido o Nvel de Inativao 3. Esse teste do sistema de tratamento deve estar licenciado pelo rgo ambiental competente. Aps processados, esses resduos slidos tratados devem ser encaminhados para disposio final licenciada pelo rgo ambiental competente. Os efluentes lquidos gerados pelo sistema de autoclavagem devem ser tratados, se necessrio, e atender aos limites de emisso dos poluentes estabelecidos na legislao ambiental vigente, antes de seu lanamento em corpo de gua ou rede de esgoto. Tratamento com utilizao de microondas de baixa ou de alta frequncia - uma tecnologia relativamente recente de tratamento de resduo de biolgicos e de servios de sade e consiste na descontaminao dos resduos com emisso de ondas de alta ou de baixa frequncia, a uma temperatura elevada (entre 95 e 105C). Os resduos devem ser submetidos previamente a processo de triturao e umidificao. Para verificar as condies de funcionamento dessas unidades pode ser feito um teste, de forma a ser atingido o Nvel de Inativao 3. Esse teste do sistema de tratamento deve estar licenciado pelo rgo ambiental competente. Aps processados, esses resduos tratados devem ser encaminhados para aterro sanitrio licenciado pelo rgo ambiental.

Tratamento trmico por incinerao


um processo de tratamento de resduos slidos que se define como a reao qumica em que os materiais orgnicos combustveis so gaseificados, num perodo de tempo prefixado. O processo se d pela oxidao dos resduos com a ajuda do oxignio contido no ar. A incinerao dos resduos um processo fsico-qumico de oxidao a temperaturas elevadas que resulta na transformao de materiais com reduo de volume dos resduos, destruio de matria orgnica,

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em especial de organismos patognicos. A concepo de incinerao em dois estgios segue os seguintes princpios: temperatura, tempo de resistncia e turbulncia. No primeiro estdio, os resduos na cmara de incinerao de resduos so submetidos temperatura mnima de 800C, resultando na formao de gases que so processados na cmara de combusto. No segundo estdio, as temperaturas atingem 1.000C a 1.200C. Aps a incinerao dos resduos, os poluentes gasosos gerados devem ser processados em equipamento de controle de poluio (ECP) antes de serem liberados para a atmosfera, atendendo aos limites de emisso estabelecidos pelo rgo de meio ambiente. Dentre os poluentes produzidos destacam-se cido clordrico, cido fluordrico, xidos de enxofre, xidos de nitrognio, metais pesados, particulados, dioxinas e furanos. Alm dos efluentes gasosos gerados no sistema de incinerao, ocorre a gerao de cinzas e escrias da cmara de incinerao de resduos e outros poluentes slidos do ECP, bem como efluentes lquidos gerados da atividade desse sistema de tratamento. As cinzas e escrias, em geral, contm metais pesados em alta concentrao e no podem, por isso, ir para aterros sanitrios, sendo necessrio um aterro especial para resduos perigosos. Os efluentes lquidos gerados pelo sistema de incinerao devem atender aos limites de emisso de poluentes estabelecidos na legislao ambiental vigente.

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Resduos biolgicos
Para questes relacionadas ao tratamento de resduos biolgicos, favor recorrer ao item anterior.

Definio
De acordo com a RDC ANVISA N. 306/04 e a Resoluo Conama N. 358/2005, so definidos como geradores de Resduos de Servios de Sade (RSS), doravante denominados, neste documento, resduos biolgicos, todos os servios relacionados com o atendimento sade humana ou animal, inclusive os servios de assistncia domiciliar e de trabalhos de campo; laboratrios analticos de produtos para a sade; necrotrios, funerrias e servios onde se realizem atividades de embalsamamento, servios de medicina legal, drogarias e farmcias inclusive as de manipulao; estabelecimentos de ensino e pesquisa na rea da sade humana e animal, centro de controle de zoonoses; distribuidores de produtos farmacuticos, importadores, distribuidores produtores de materiais e controles para diagnstico in vitro, unidades mveis de atendimento sade; servios de acupuntura, servios de tatuagem, dentre outros similares.

Classificao
A classificao dos resduos biolgicos vem sofrendo um processo de evoluo contnuo, na medida em que so introduzidos novos tipos de resduos nas diversas reas de abrangncia e como resultado do conhecimento do comportamento destes perante o meio ambiente e a sade, como forma de estabelecer uma gesto segura com base nos princpios da avaliao e gerenciamento dos riscos envolvidos na sua manipulao. Os resduos biolgicos so parte importante do total de resduos slidos urbanos, no necessariamente pela quantidade gerada (cerca de 1% a 3% do total), mas pelo potencial de risco que representam sade e ao

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meio ambiente. Os resduos biolgicos originados dos servios de sade ou de laboratrios que trabalham com pesquisa na rea animal so classificados em funo de suas caractersticas e consequentes riscos que podem acarretar ao meio ambiente e sade. De acordo com a RDC ANVISA N. 306/04 e Resoluo Conama N 358/05, estes resduos so classificados em cinco grupos: A, B, C, D e E.
G rupo A: engloba os componentes com possvel presena de agentes biolgicos que, por suas caractersticas de maior virulncia ou concentrao, podem apresentar risco de infeco. Exemplos: placas, lminas e lamnulas de laboratrio, carcaas, peas anatmicas (membros), tecidos e bolsas transfusionais contendo sangue. Grupo B: contm substncias qumicas que podem apresentar risco sade pblica ou ao meio ambiente, dependendo de suas caractersticas de inflamabilidade, corrosividade, reatividade e toxicidade. Ex: medicamentos apreendidos, reagentes de laboratrio e resduos contendo metais pesados. Grupo C: quaisquer materiais resultantes de atividades humanas que contenham radionucldeos em quantidades superiores aos limites de eliminao especificados nas normas da Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN), como, por exemplo, servios de medicina nuclear e radioterapia. Grupo D: no apresentam risco biolgico, qumico ou radiolgico sade ou ao meio ambiente, podendo ser equiparados aos resduos domiciliares. Ex: sobras de alimentos e de seu preparo de alimentos e resduos das reas administrativas. Grupo E: materiais perfurocortantes ou escarificantes, tais como lminas de barbear, agulhas, ampolas de vidro, pontas diamantadas, lminas de bisturi, lancetas, esptulas e outros similares.

A resoluo foi adotada pela ANVISA considerando os princpios da Biossegurana de empregar medidas tcnicas, administrativas e normativas para prevenir acidentes ao ser humano e ao meio ambiente.

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A classificao dos resduos biolgicos propostos pela resoluo da ANVISA complementa a classificao do Conama citada acima. O smbolo de identificao de cada grupo de resduos se encontra no Anexo I.

Riscos potenciais
Na avaliao dos riscos potenciais dos resduos biolgicos deve-se considerar que os geradores vm sofrendo uma enorme evoluo no que diz respeito ao desenvolvimento da cincia, com o incremento de novas tecnologias incorporadas. Resultado deste processo a gerao de novos materiais, substncias e equipamentos, com presena de componentes mais complexos e muitas vezes mais perigosos para o homem que os manuseia, e ao meio ambiente que os recebe. Os resduos biolgicos ocupam um lugar de destaque, pois merecem ateno especial em todas as suas fases de manejo (segregao, condicionamento, armazenamento, coleta, transporte, tratamento e disposio final) em decorrncia dos imediatos e graves riscos que podem oferecer. Dentre os resduos biolgicos destacam-se os que contm agentes patognicos que possam causar doena e dentre os componentes radioativos utilizados em procedimentos de pesquisa, diagnstico e terapia, os que contm materiais emissores de radiao ionizante. Para a comunidade cientfica e entre os rgos federais responsveis pela definio das polticas pblicas pelos resduos biolgicos e de servios sade (ANVISA e Conama) esses resduos representam um potencial de risco em duas situaes:
Para a sade ocupacional de quem manipula esse tipo de resduo, seja o pessoal ligado assistncia mdica ou mdico-veterinria, seja o pessoal ligado ao setor de limpeza e manuteno. Para o meio ambiente, como decorrncia da destinao inadequada de qualquer tipo de resduo, alterando as caractersticas do meio.

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Acondicionamento dos resduos biolgicos


Consiste no ato de embalar os resduos segregados, em sacos ou recipientes. A capacidade dos recipientes de acondicionamento deve ser compatvel com a gerao diria de cada tipo de resduo. Os sacos de acondicionamento devem ser constitudos de material resistente ruptura e vazamento, impermevel, respeitados os limites de peso de cada saco, sendo proibido o seu esvaziamento ou reaproveitamento. Os sacos devem estar contidos em recipientes de material lavvel, resistente punctura, ruptura e vazamento, com tampa provida de sistema de abertura sem contato manual, com cantos arredondados e ser resistentes ao tombamento. Os resduos lquidos devem ser acondicionados em recipientes constitudos de material compatvel com o lquido armazenado, resistentes, rgidos e estanques, com tampa rosqueada e vedante. Os resduos perfurocortantes ou escarificantes - grupo E - devem ser acondicionados separadamente, no local de sua gerao, imediatamente aps o uso, em recipiente rgido, estanque, resistente punctura, ruptura e vazamento, impermevel, com tampa, contendo a simbologia referente.

Coleta e transporte interno dos resduos biolgicos


A coleta e transporte interno dos resduos consistem no translado dos resduos dos pontos de gerao at local destinado ao armazenamento temporrio ou armazenamento externo, com a finalidade de disponibilizao para a coleta. nesta fase que o processo se torna visvel para o usurio e o pblico em geral, pois os resduos so transportados nos equipamentos de coleta, caminhes de coleta do sistema pblico municipal, em reas comuns.

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Recomendaes gerais
A coleta e o transporte devem atender ao roteiro previamente definido e devem ser feitos em horrios, sempre que factveis no coincidentes com a distribuio de roupas, alimentos e medicamentos, perodos de visita ou de maior fluxo de pessoas ou de atividades. A coleta deve ser feita separadamente, de acordo com o grupo de resduos e em recipientes especficos a cada grupo de resduos. A coleta interna deve ser planejada com base no tipo de resduo, volume gerado, roteiros (itinerrios), dimensionamento dos abrigos, regularidade, frequncia de horrios de coleta externa. Deve ser dimensionado considerando o nmero de funcionrios disponveis, nmero de carros de coletas, Equipamento de Proteo Individual (EPIs) e demais ferramentas e utenslios necessrios. O transporte interno dos recipientes deve ser realizado sem esforo excessivo ou risco de acidente para o funcionrio. Aps as coletas, o funcionrio deve lavar as mos ainda enluvadas, retirar as luvas e coloc-las em local prprio. Ressalte-se que o funcionrio tambm deve lavar as mos antes de calar as luvas e depois de retir-las. Os equipamentos para transporte interno (carros de coleta) devem ser constitudos de material rgido, lavvel, impermevel e providos de tampa articulada ao prprio corpo do equipamento, cantos e bordas arredondados, rodas revestidas de material que reduza o rudo. Tambm devem ser identificados com o smbolo correspondente ao risco do resduo nele contido. Os recipientes com mais de 400 L de capacidade devem possuir vlvula de dreno no fundo.

Procedimentos de coleta interna


Os carros de coleta devem ter, preferencialmente, pneus de borracha e estar devidamente identificados com smbolos de risco. Estabelecer turnos, horrios e frequncia de coleta. Sinalizar o itinerrio da coleta de forma apropriada. No utilizar transporte por meio de dutos ou tubos de queda. Diferenciar as coletas, isto , execut-las com itinerrios e horrios diferentes segundo o tipo de resduo. Coletar resduos reciclveis de forma separada.

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Fazer a manuteno preventiva dos carros para a coleta interna e higieniz-los ao final de cada coleta.

Armazenamento externo
O armazenamento temporrio externo consiste no acondicionamento dos resduos em abrigo, em recipientes coletores adequados, em ambiente exclusivo e com acesso facilitado para os veculos coletores, no aguardo da realizao da etapa de coleta externa. O abrigo de resduos deve ser dimensionado de acordo com o volume de resduos gerados, com capacidade de armazenamento compatvel com a periodicidade de coleta do sistema de limpeza urbana local. Deve ser construdo em ambiente exclusivo, possuindo, no mnimo, um ambiente separado para atender o armazenamento de recipientes de resduos do grupo A juntamente com o grupo E e um ambiente para o grupo D.

Local
O local desse armazenamento externo deve apresentar as seguintes caractersticas: Acessibilidade: o ambiente deve estar localizado e construdo de forma a permitir acesso facilitado para os recipientes de transporte e para os veculos coletores. Exclusividade: o ambiente deve ser utilizado somente para o armazenamento de resduos. Segurana: o ambiente deve reunir condies fsicas estruturais adequadas, impedindo a ao do sol, chuva, ventos etc. e que pessoas no autorizadas ou animais tenham acesso ao local; Higiene e saneamento: deve haver local para higienizao dos carrinhos e contendores; o ambiente deve contar com boa iluminao e ventilao e ter pisos e paredes revestidos com materiais resistentes aos processos de higienizao.

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O abrigo de resduos do Grupo A deve atender aos seguintes requisitos:


Ser construdo em alvenaria, fechado, dotado apenas de aberturas para ventilao, teladas, que possibilitem uma rea mnima de ventilao correspondente a 1/20 da rea do piso e no inferior a 0,20 m2. Ser revestido internamente (piso e paredes) com material liso, lavvel, impermevel, resistente ao trfego e impacto. Ter porta provida de tela de proteo contra roedores e vetores, de largura compatvel com as dimenses dos recipientes de coleta externa. Possuir smbolo de identificao, em local de fcil visualizao, de acordo com a natureza do resduo. Possuir rea especfica de higienizao para limpeza e desinfeco simultnea dos recipientes coletores e demais equipamentos utilizados no manejo de resduos.

A rea deve possuir cobertura, dimenses compatveis com os equipamentos que sero submetidos limpeza e higienizao, piso e paredes lisas, impermeveis, lavveis, ser provida de pontos de iluminao e tomada eltrica, ponto de gua, canaletas de escoamento de guas servidas direcionadas para a rede de esgotos do estabelecimento e ralo sifonado provido de tampa que permita a sua vedao. O estabelecimento gerador de resduos de servios de sade, cuja produo semanal no exceda 700 L e cuja produo diria no exceda 150 L, pode optar pela instalao de um abrigo reduzido.

Caractersticas
O local de armazenamento deve possuir as seguintes caractersticas:
Ser exclusivo para guarda temporria de resduos biolgicos e de servios de sade, devidamente acondicionados em recipientes. Ter piso, paredes, porta e teto de material liso, impermevel, lavvel, resistente ao impacto. Ter ventilao mnima de duas aberturas de 10 x 20 cm cada (localizadas uma a 20 cm do piso e outra a 20 cm do teto), abrindo para a rea externa. critrio da autoridade sanitria, essas aberturas podem dar para reas internas do estabelecimento.

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Ter piso com caimento mnimo de 2% para o lado oposto entrada, sendo recomendada a instalao de ralo sifonado ligado rede de esgoto sanitrio. Ter identificao na porta com o smbolo de acordo com o tipo de resduo armazenado. Ter localizao tal que no abra diretamente para reas de permanncia de pessoas, dando-se preferncia aos locais de fcil acesso coleta externa.

Abrigo
O abrigo de resduos do Grupo B deve ser projetado, construdo e operado de modo a:
Ser em alvenaria, fechado, dotado apenas de aberturas teladas que possibilitem uma rea de ventilao adequada. Ser revestido internamente (piso e parede) com material de acabamento liso, resistente ao trfego e impacto, lavvel e impermevel. Ter porta dotada de proteo inferior, impedindo o acesso de vetores e roedores. Ter piso com caimento na direo das canaletas ou ralos. Estar identificado, em local de fcil visualizao, com sinalizao de segurana - com as palavras RESDUOS QUMICOS - com smbolo. Prever a blindagem dos pontos internos de energia eltrica, quando houver armazenamento de resduos inflamveis. Ter dispositivo de forma a evitar incidncia direta de luz solar. Ter sistema de combate a incndio por meio de extintores de CO2 e PQS (p qumico seco). Ter kit de emergncia, incluindo produtos absorventes, para os casos de derramamento ou vazamento. Armazenar os resduos constitudos de produtos perigosos corrosivos e inflamveis prximos ao piso.

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Observar as medidas de segurana recomendadas para produtos qumicos que podem formar perxidos. No receber nem armazenar resduos sem identificao. Organizar o armazenamento de acordo com critrios de compatibilidade, segregando os resduos em bandejas. Manter registro dos resduos recebidos. Manter o local trancado, impedindo o acesso de pessoas no autorizadas.

Acidentes
Nunca entrar em pnico. Se o acidente j aconteceu, tem-se que pensar na melhor soluo para minimizar os riscos e danos, mantendo a situao sob controle e sem atropelos.
E vitar o pnico e chamar imediatamente o responsvel pelo setor para o controle da situao. Evitar aglomeraes na rea. Atender o acidentado e imediatamente conter o acidente - no permitir vazamento e disseminao do material. Cobrir o lquido derramado ou fluido com hipoclorito de sdio, deixar repousar, no varrer o local antes de descontaminar a rea e no provocar a formao de aerossis. Isolar a rea. Identificar a origem do material contaminado. Registrar o acidente, se possvel, com testemunhas e apresentar o fato ao responsvel superior no setor. Em caso de emergncia, proceder ao encaminhamento do acidentado a um hospital ou pronto atendimento.

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Com prfuro-cortantes
L avar o local com sabo e cobrir o local com gaze estril. Identificar o soro / sangue / paciente e falar com o responsvel tcnico presente. Os acidentes devem ser registrados e informados as instncias superiores do Setor e da Unidade.

Conduta ps-acidente
Os acidentes devem ser registrados e documentados oficialmente. Oportunamente devem ser discutidos nas reunies peridicas da Comisso Interna de Biossegurana (CIBio), Comisso Interna de Preveno de Acidentes (CIPA), quando devem ser identificadas e determinadas as falhas nos dispositivos, na metodologia, na segurana e no treinamento do indivduo. Em reunies peridicas deve-se ter a preocupao de analisar e sugerir atualizaes e meios de reviso e fiscalizao nos cuidados e medidas de proteo.

Devem estar sempre disponveis


aixa de primeiros-socorros/farmcia do setor. C Guarda-p sobressalente. Documento/formulrio para registro de acidente. Documento do tcnico/estudante/trabalhador com dados gerais e pesso ais. Contatos telefnicos e contatos para registro do acidente na Secretaria de Sade/Vigilncia Sanitria.

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Incndio no laboratrio
Os equipamentos de combate a incndio esto colocados nos corredores
externos aos laboratrios e em pontos estratgicos de acordo com os conselhos dos bombeiros locais. A vida til, as datas de inspeo e de manuteno desses extintores esto indicadas nas etiquetas coladas nos mesmos. Os locais destinados aos extintores devem possuir etiquetas demons trando o tipo de extintor. O piso abaixo do extintor deve estar desobstrudo. O extintor instalado a uma altura mxima de 1,60m acima do piso. O histrico dos extintores deve ser registrado. Nunca use extintores de gua para combater fogo em equipamento e instalaes eltricas. Em caso de incndio, o laboratrio deve ser evacuado, o funcionrio res ponsvel e os gestores do laboratrio devem ser imediatamente contatados.

As causas mais frequentes dos incndios em laboratrios so as seguintes:


1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Sobrecarga da rede eltrica. Falta de manuteno da rede eltrica. Canos de gs e cabos de eletricidade demasiado compridos. Equipamento que permanece ligado sem necessidade. Chamas abertas. Encanamento de gs defeituoso. Uso indevido de fsforos. Falta de cuidado ao lidar com substncias inflamveis. Guarda de compostos qumicos inflamveis ou explosivos dentro do refrigerador comum.

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Choques eltricos
O choque eltrico e os defeitos da rede de eletricidade colocam a vida em risco e podem provocar incndio. Portanto, indispensvel que todas as instalaes eltricas e os equipamentos eltricos sejam examinados a intervalos regulares (inclusive o aterramento). Esta manuteno deve ficar a cargo de um eletricista qualificado. A equipe do laboratrio no deve, em hiptese alguma, se propor a consertar qualquer tipo de equipamento eltrico. Observaes teis:
A voltagem da rede eltrica varia ente as tomadas do laboratrio (110V ou 220V). Deste modo, preciso ter sempre muita ateno ao ligar os equipamentos respeitando a voltagem determinada pelo fabricante que est indicada no cabo de fora ou na parte de trs do equipamento. O Laboratrio possui um gerador para o caso de falhas no suprimento de energia eltrica. No devem ser ligados aparelhos alm dos que j esto conectados a este sistema para evitar sobrecarga ao gerador. Todo equipamento eltrico do laboratrio dever ter aterramento, de preferncia mediante plugues de trs pinos. A rede no ligada ao terra pode transmitir a corrente eltrica em consequncia de alguma falha despercebida.

A equipe do laboratrio deve ter conhecimento e evitar os seguintes sinais de perigo: 1. 2. 3. 4. 5. Superfcies midas ou molhadas perto do equipamento eltrico; Cabos eltricos compridos e flexveis. Cabos com isolamento precrio ou gasto. Sobrecarga da rede, devido ao uso de adaptadores. Equipamento capaz de produzir fascas nas imediaes de substncias ou vapores inflamveis. 6. Uso de extintor errado (gua ou espuma em lugar de CO2) no combate ao fogo causado pela eletricidade.

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Medidas de emergncia em caso de acidente com produtos qumicos


N o manusear qualquer produto qumico derramado sem os EPIs adequados. O lquido derramado pode ser neutralizado da seguinte maneira: - cidos e compostos qumicos corrosivos: com soda custica ou com bicarbonato de sdio (recomenda-se diluir previamente, despejando-se cuidadosamente gua em abundncia). - lcalis: cobrindo-os com areia seca. Informar imediatamente aos responsveis pelo laboratrio. Atender as pessoas que podem ter se contaminado. Tratando-se de derramamento de substncia inflamvel, extinga todas as chamas abertas, desligue o gs na sala e nos recintos adjacentes e o equipamento eltrico capaz de produzir fascas. Evitar respirar o vapor do produto derramado. Providenciar as substncias e os materiais necessrios para limpar os locais contaminados pelo produto. Em caso de derramamento de solventes ou produtos volteis, recomenda-se evacuar a sala e, se possvel, abrir as janelas.

Riscos qumicos
As principais substncias carcinognicas manipuladas so: Formaldedo; cido clordrico; Brometo de etdio. As principais substncias explosivas e corrosivas manipuladas so: cido perclrico; cido pcrico; Azida sdica; lcool; Acetona; ter; cido clordrico; cido ntrico; cido sulfrico; cido actico; Hidrxido de sdio; Hidrxido de potssio.

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Manipulao com brometo de etdio


O brometo de etdio um dos reagentes mais perigosos utilizados no laboratrio, por ser um agente intercalante da molcula de DNA/RNA, podendo causar mutao gentica, alm de ser carcinognico.
S empre usar luvas e jaleco ao pegar o frasco com brometo de etdio na forma de p ou na forma de soluo de trabalho. Nunca atender ao telefone, pegar na maaneta da porta ou em qualquer outro objeto que no seja diretamente relacionado com o trabalho de colorao e visualizao dos gis, usando luvas contaminadas com brometo de etdio.

Manipulao com poliacrilamida


A acrilamida um produto neurotxico, especialmente antes da polimerizao. Deve ser manuseado com todo cuidado, e dada ateno especial para a limpeza da rea de trabalho.
S empre usar luvas e jaleco ao pegar o frasco com poliacrilamida lquida. Nunca atender ao telefone, pegar na maaneta da porta ou em qualquer outro objeto que no seja diretamente relacionado com o trabalho de eletroforese em gis de poliacrilamida, usando luvas contaminadas com este produto.

Recomendaes: A soluo concentrada de poliacrilamida dever ser preparada utilizando todos os EPIs, como luvas, jaleco fechado e mscara facial para reduo da exposio individual.

Descarte de produtos qumicos


Os resduos txicos gerados no laboratrio de Biotecnologia so:
Gis e solues com Brometo de Etdeo. Poliacrilamida polimerizada. Resduos cidos. Solventes orgnicos.

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Os descartes dos resduos lquidos de Brometo de etdio e resduos cidos devem ser feito de acordo com as instrues especficas descritas no local de uso. O brometo de etdio usado em solues aquosas muito diludas, e sob essas condies pode ser transformado no produto fisiologicamente inativo, 2-carboxi-benzofenona, com o uso de alvejante (hipoclorito). Use luvas, roupas e culos de proteo. Trabalhe na capela. A uma soluo contendo 34mg/100 mL de brometo de etdio, adicione 300 mL de alvejante domstico. Mantenha sob agitao temperatura ambiente por duas horas. A soluo pode ser despejada no ralo com fluxo abundante de gua. Os resduos slidos contaminados com brometo de etdio e com solventes orgnicos, bem como outros resduos, devem ser acondicionados em recipientes destinados para esse fim, localizados em pontos predeterminados nos laboratrios. Quando os recipientes atingirem sua capacidade mxima, o assistente responsvel providenciar que os mesmos sejam removidos e levados para o galpo de armazenamento de resduos txicos.

Riscos biolgicos
Desinfeco e descarte de material biolgico
As atividades de pesquisa que envolve materiais biolgicos devem ser conduzidas cuidadosamente de modo que seja evitada a disperso de microorganismos. Deste modo, essas atividades devem ser realizadas em cmaras de fluxo destinadas para tal, e no livremente sobre as bancadas de uso comum do laboratrio. As amostras, reagentes e materiais contaminados com material biolgico devero ser colocados na sala de lavagem de vidrarias, no laboratrio Bio l, no espao destinado ao descarte de resduo biolgico. Todo material contaminado dever ser autoclavado antes de ser descartado em lixo comum. As cmaras de fluxo no final da atividade devero ser desinfestadas com lcool 70% ou com hipoclorito de sdio a 2%. Aps o descarte do resduo biolgico, as vidrarias devero ser lavadas, secas e autoclavadas.

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Cuidados necessrios recomendados aos membros do setor


Conhecer a classificao dos nveis de biossegurana.
C onhecer as regras e riscos. Treinamento especfico na rea que visa atuar. Evitar trabalhar sozinho, a companhia recomendada para ajuda nos socorros em casos de acidentes. Proteo por imunizao (hepatite, ttano e raiva) e monitoramento sorolgico da resposta imunolgica. Limitar o acesso ao laboratrio de pessoas e visitantes leigos. Usar os equipamentos ou dispositivos de proteo individual invariavelmente e continuamente o uso de roupas, eventualmente no momento de trabalho utilizar mscaras, culos adequados, luvas adequadas. Respeitar as normas de limpeza e higiene do local. Usar os equipamentos ou dispositivos de proteo coletiva, cabinas e fluxos laminares e de exausto quando necessrio. Minimizar a produo de aerossis e solventes volteis. Proteger a pipeta com algodo hidrfobo, nunca pipetar com a boca. Desinfeco da maioria dos microorganismos, incluindo protozorios, helmintos e bactrias; pode ser com solues de uso comum em laboratrios (fenol 5% / formol 4% / lcool 70% / hipoclorito de sdio 1-2%). Para inativao da maioria dos vrus e fungos. Preparar o POP vlido e necessrio para cada laboratrio para discusso, vigilncia, monitoramento e atualizao. Possuir prticas constantes de higiene. Ter precauo com os resduos gerados e acondicionados para posterior descarte. Ao ingressar no servio - nunca calando sandlias abertas e roupas com decotes lavar as mos, prender os cabelos e lav-las novamente antes de vestir as luvas. Apresentando ferimento nas mos, deve-se utilizar duas luvas (uma dentro da outra). No reutilizar a luva usada que se retirou em algum momento. Nunca ter pressa para realizar as atividades intermedirias e/ou finais, pois a pressa pode causar um acidente.

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N unca utilizar luvas de manipulao quando atender ao telefone e abrir portas ou tocar as maanetas. Ao lavar as mos, lembrar-se de fechar a torneira com o papel toalha protegendo assim a mo de tocar na mesma torneira que se tocou com a luva / mo suja (isto vale inclusive para a utilizao das pias de sanitrios no residenciais). Saindo de um setor - ao passar nas portas com maanetas - utilizar as luvas tipo manopla descartveis sempre no bolso do avental (guarda-p) para abrir as maanetas giratrias. No bolso do avental deve haver sempre um pouco de papel toalha ou higinico limpo para eventuais manipulaes em setores no contaminados com soros. Ao sair do laboratrio para outro setor, retirar as luvas e lavar as mos. Determinar previamente com o pessoal de apoio / limpeza / manuteno, o procedimento para transporte do material de descarte no trmino do servio (indicar o perodo de menor trnsito ou movimento no setor). Uma vez na sala, o material em gua sanitria permanecer at o dia seguinte para ser ento autoclavado. Alternativamente, o material contaminado dever ser acondicionado na caixa apropriada para autoclavagem antes de ser liberado como lixo descontaminado. Lavar as mos cada vez que retirar as luvas, evitar arrastar e ampliar problemas com pequenos erros deste tipo. A mo em ambiente no domiciliar nunca est limpa. Retirar a luva, lavar as mos para tocar em cabelos, pele, boca etc; Nunca levar para casa as canetas, lpis, materiais manipulados no setor ou prximos a fluidos biolgicos. Os aventais que sofrerem respingos de fluidos devem ser colocados em balde com gua sanitria na unidade/setor de lavagem, antes de ser transportado para casa, e no momento do trabalho deve ser substitudo por um limpo, disponvel para este fim. Ao retornar do trabalho, lembrar-se de retirar os sapatos antes de entrar em casa, coloc-los fora do alcance de crianas. Devendo os mesmos ficar separados para a limpeza da sola com gua sanitria, protegendo-se assim o ambiente domstico onde se caminha descalo. Colocar o avental para ser lavado separado da roupa domstica e de peas ntimas.

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Recomendaes para responsveis por alunos e estagirios


Ao aceitar um estudante ou estagirio, o pesquisador responsvel deve: Informar aos outros trabalhadores do novo componente do grupo ou
visitante temporrio. I nformar que ao executar uma tcnica ou atividade pela primeira vez - deve estar acompanhado, em todas as etapas, at ser autorizado a execut-la de forma independente. Recomendar que avisasse quando houver previso da necessidade de uso de uma soluo ou material. Quando houver autorizao de uso, ao estar por terminar a soluo, antes de seu trmino procurar ajuda para renov-la. Indicar que execute na preparao de material a metodologia escolhida para uso geral, salvo em caso de preparaes nicas e de uso individual que deve ser discutido anteriormente. Incentivar o aluno a que procure ler sobre diluio e solues, molaridade e normalidade de livro que abordem a matemtica de laboratrio no setor. Recomendar que nunca utilizar um aparelho, por mais simples que lhe parea, sem perguntar ou se certificar de conhecer o seu funcionamento. Em caso de dvida, procure o responsvel pelo aparelho. Informar que havendo; qualquer problema ou questionamento deve-se dirigir ao responsvel pelo setor e/ou Chefe/Coordenador de rea. Recomendar que leia os itens do POP, geralmente disponibilizado pelo responsvel pelo setor. Lembr-lo de sua responsabilidade de deixar sempre organizado e limpo o local aps o trabalho. Lembr-lo sobre sua responsabilidade de acatar as recomendaes de tica, cidadania e biossegurana.

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Consideraes finais
O gerenciamento adequado dos resduos pode contribuir significativamente para a reduo da ocorrncia de acidentes de trabalho, especialmente aqueles provocados por perfurocortantes. Dessa forma, tambm se pode reduzir a exposio percutnea dos trabalhadores a materiais biolgicos, uma medida no contexto da Biossegurana que teria grande valor para a sade ocupacional. Existem trs princpios orientadores no gerenciamento de resduos: reduzir, segregar e reciclar. Esses princpios devem ser incorporados ao Programa de Gerenciamento de Resduos Biolgicos PGRB das Unidades da Embrapa. A primeira providncia para um melhor gerenciamento dos resduos biolgicos a reduo no momento da gerao. Evitar o desperdcio uma medida que tem um benefcio duplo: economiza recursos no s em relao ao uso de materiais, mas tambm no tratamento diferenciado desses resduos. A segregao o ponto fundamental de toda a discusso sobre a periculosidade ou no dos resduos biolgicos e de servios de sade. Apenas uma parcela potencialmente infectante, contudo, se ela no for segregada, todos os resduos que a ela estiverem misturados tambm devero ser tratados como potencialmente infectantes, exigindo procedimentos especiais para acondicionamento, coleta, transporte e disposio final, elevando assim os custos do tratamento desses resduos. Depois da segregao adequada, os resduos de cada categoria devero ser acondicionados corretamente, identificados e encaminhados para coleta, transporte e destinao final especfico. Os resduos com caractersticas especiais nunca devem ser misturados com os resduos comuns ou domiciliares.

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A suposta ausncia de risco por falta de evidncia cientfica que comprove que os resduos biolgicos provocam doenas no deve servir de justificativa para a negligncia no gerenciamento desses resduos. Um caminho para solucionar a questo dos resduos biolgicos o exerccio do bom senso, somada com a educao e o treinamento dos profissionais envolvidos, e o esclarecimento da populao. A tomada de medidas no contexto da Biossegurana, aliando economia de recursos, preservao do meio ambiente, tica e responsabilidade, poder garantir mais qualidade de vida no presente e um futuro mais saudvel para as prximas geraes. Telefones teis
Corpo de Bombeiros: 193 SAMU: 192

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Referncias

ALMEIDA, A. B. S.; ALBUQUERQUE, M. B. M. Biossegurana: um enfoque histrico atravs da histria oral. Histria, Cincias, Sade-Manguinhos, Rio de Janeiro, v. 7, n. 1, 2000. Disponvel em: <http://www. scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0104-59702000000200 009&lng=en&nrm=iso>. Acesso em: 29 out. 2007. COMISSO TCNICA NACIONAL DE BIOSSEGURANA. CTNBio, Braslia, DF, 2006. Disponvel em: <http://www.ctnbio.gov.br>. Acesso em: 04 out. 2007. CONSELHO DE INFORMAES SOBRE BIOTECNOLOGIA. Perguntas e respostas: biossegurana. Conselho de Informaes sobre Biotecnologia, So Paulo, [2007]. Disponvel em: <http://www.cib.org. br/faq. php?id=3>. Acesso em: 05 out. 2007. MINISTRIO DA SADE. Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos. Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com material biolgico. Braslia, DF: Ministrio da Sade [2004]. 60 p. (Srie A. Normas e Manuais Tcnicos). Disponvel em: <http:// dtr2001.saude. gov.br/editora/produtos/livros/pdf/04_0408_M.pdf>. Acesso em: 04 out. 2007.

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NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH. Guidelines for Research Involving Recombinant DNA Molecules. Office of Biotechnology Activities, Bethesda, MD, 2002. Disponvel em: <http://www4.od.nih. gov/oba/rac/ guidelines_02/NIH_Gdlnes_lnk_2002z.pdf>. Acesso em: 04 out. 2007. SECRETARIAT OF THE CONVENTION ON BIOLOGICAL DIVERSITY. Cartagena Protocol on Biosafety to the Convention on Biological Diversity: text and annexes. Montreal: Secretariat of the Convention on Biological Diversity, 2000. Disponvel em: <http://www. biodiv.org/ doc/legal/cartagena-protocol-en.pdf> Acesso em: 04 out. 2007. TEIXEIRA, P.; VALLE, S. Biossegurana: uma abordagem multidisciplinar. Rio de Janeiro: Fiocruz, 1996. U.S. DEPARTMENT OF HEALTH AND HUMAN SERVICES, CENTERS FOR DISEASE CONTROL AND PREVENTION CDC & NATIONAL INSTITUTES OF HEALTH. Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. 5. ed. Washigton: US Government Printing Office, 2007. Disponvel em: <http://www.cdc.gov/OD/ohs/biosfty/bmbl5/bmbl5toc. htm>. Acesso em: 04 out. 2007. UNITED NATIONS DIVISION FOR SUSTAINABLE DEVELOPMENT. Agenda 21. Rio de Janeiro, 1992. Disponvel em: <http://www.un.org/ esa/sustdev/documents/agenda21/english/Agenda21.pdf>. Acesso em 04 out. 2007. WORLD HEALTH ORGANIZATION. Laboratory Biosafety Manual. 3. ed. Malta: World Health Organization, 2004. Disponvel em: <http:// www.who.int/csr/resources/publications/biosafety/Biosafety7.pdf>. Manual e Biossegurana, Parte III Laboratrios Captulo 13 - Biossegurana no Laboratrio de Diagnstico e de Pesquisa 195.

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Anexo
Anexo I. Emblema internacional indicando risco biolgico

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