Seminario n.

18
Ana Laura Cabrera.
Endogenous dendritic cells mediate the effects of intravenously
injected therapeutic immunosuppressive dendritic cells in
transplantation.
INTRODUCCIN.
Principaleslimitacionesdeltransplantederganos:
Rechazo
EICH
Una de las primeras terapias basadas en clulas utilizadas para disminuir la respuesta
del husped contra el injerto fue la transfusin donante especfica (DTS) antes
del transplante, solas o combinados con agentes inmunosupresores.
ElefectobeneficiosodelasDTSdependede:
LapresenciadeAgyleucocitosdeldonador
LacargayinmunogenicidaddelosaloAgtransferidos.
Eltiempodeadministracinantesdeltransplante.
LapresentacindelosAgdeldonadorserealizaatravsdelasAPCdelhuspeden
elcontextodemolculasdelMHC,vaindirectadealoreconocimiento.
DST: sensibilizaporcentajedereceptoresSUSPENDE
introduccindenuevosfrmacosinmunosupresoresUSO
CLNICO
ltimos 15 aos se han generado nuevas terapias basadas en DC derivadas
del donador o husped expandidas in vitro, inmunosupresoras
farmacologicamente o por mtodos genticos y administradas i/v; han sido
utilizadas para regular la respuesta del husped contra el injerto y del
injerto contra el husped.
Modelosmurinos:DCinmaduras
DCresistentesmaduracin(MR)Rechazo
DCalternativamenteactivadas.EICH
DCteraputicashansidoestudiadas:invitroyexvivo.
invivo:????????
AligualqueparaDSTseasumiquelasCDteraputicasdisminuanla
respuestaantidonadorporinteraccindirectaconlasclulasTreactivas
contraeldonador.NOCOMPROBADO
FuncindeDCteraputicasporproveerAgalasAPCdelhuspedyalava
indirecta.
CualeselbeneficiodeintroducirnuevasterapiasbasadasenCD
inmunosupresorasgeneradasinvitro,sisimplementefuncionanpor
elefectoDST??
RPMI, aa
HEPES
Piruvato Na
GM-CSF
1,25(OH)
2
VD
3
1- MR-DCs como prototipo de DCs teraputicas y modulacin de la
inmunidad in vivo.
MR-DC MHC-I/II
Io/int
CD40
neg
CD80/86
neg/Io
BMDC DC control
DC1c
2 TerapiaconMRDCsderivadasdeldonadorregulalarespuestadelhuspedanti
donador yprolongalasupervivenciadelinjertoenratn.
MST:11.1+-2.2 d
MST:14.5+-0.5d
MST:52.2+-33.4d
MST: 53.6+-15.1d
MST:21.2+-8d
La administracin i/v de 5x10
6
MRDC derivadas de BALB/c 7 das
antes del transplante prolonga la sobrevida de los injertos cardacos
de ratones BALB/c en ratones B6.
Corazn BALB/c mice B6 mice
transplante heterotpico
Con la administracin i/v de MRDC disminuye la produccin de INF por las clulas
T de bazo tanto por la va directa e indirecta y prolonga la sobrevida del injerto.
La terapia con MRDCs se asocia con una significativa reduccin de la
inflamacin intra injerto y de la respuesta de clulas T anti donador a nivel
sistmico.
LASMRDCGENERADASCONVD3REPRESENTANUNEJEMPLODELA
TERAPIACONDCINMUNOSUPRESORASYPUEDENSERUTILIZADAS
COMOMODELOPARAESTUDIOS.
3 LasMRDCteraputicasfallanenregulardirectamentelarespuestadelasclulas
Tcontraeldonadorinvivo.
No se ve proliferacin de las
clulas T luego de 3 das de la
inyeccin de las MRDC.
Si la hubo con el agregado de DC
maduras.
LA PERDIDA DEL MHCI POR
EL HUESPED NO AFECTA LA
VIABILIDAD Y LA
PROLIFERACIN DE LAS CEL. T
No se ve proliferacin de las
clulas T luego de 3 das de la
inyeccin de las MRDC.
Si la hubo con el agregado de DC
maduras.
LA PERDIDA DEL MHCII POR
EL HUESPED NO AFECTA LA
VIABILIDAD Y LA
PROLIFERACIN DE LAS CEL. T
LAS MR-DC NO INTERACTUAN DIRECTAMENTE CON LAS CLULAS T DEL
HUESPED.
4LasAPCdelreceptorregulanlarespuestaantidonadorporclulasTluego
delaterapiabasadaenDC.
Las MRDC inyectadas son procesadas por las DC del receptor
para la presentacin por va indirecta a las clulas T CD4 +,
resultando en una activacin abortiva y delecin, sin efectos
perjudiciales indirectos en el nmero de clulas T CD4 +Fox P3+.
3 das despus de las administracin
de las MR-DC de BALB/c las clulas
T esplnicas proliferan pero
expresan CD69
lo
CD62L
hi
y
contenan un alto porcentaje de
clulas apoptticas. (signos de
activacin abortiva)
Ratn B6, con clulas T CD4+ 1H3.1
5 LasMRDCtienencortavidamediaysoninternalizadasporlasDCdelhusped.
MRDC CD45.2+ , en bazo de ratones B6
MRDC PKH26+ (BALB/c)
CD11c-eGFP+(B6)
Las clulas NK del husped
contribuyen a eliminar las
MRDC del donador.
Las MRDC del donador inyectadas i/v, mueren
rpidamente in vivo, en parte debido a muerte
mediada por clulas NK, y son internalizadas
como clulas apoptticas por DC esplnicas del
husped
6 MRDCsonprocesadasypresentadasporlasDCCD11c
hi
alasclulasTanti
donador.
LAS MRCD INYECTADAS
SISTEMICAMENTE IN VIVO SON
PROCESADAS Y PRESENTADAS A
CLULAS T CD4+ INDIRECTAS
POR DC ESPLNICAS
CONVENCIONALES CD11c
hi
CD8

Y CD8
+
, NO ASI LAS DC
PLASMOCITOIDES Y LAS APC
CD11.
7FuncindelasDCimunosupresorasteraputicascomotranportadorasdeAg.
LAS MR-DC SON INCAPACES
DE FUNCIONAR COMO APC
PERO SON CAPACES DE
ENTREGAR LOS Ag DEL
DONADOR A LAS APC DEL
HUESPED PROLONGANDO LA
SOBREVIDA DEL INJERTO EN
ESTE MODELO.
Los ratones B6 MHC-I/-IIdouble
KO
expresan pocoo ninguna molcula de
superficie MHC, pero son capaces de
producir cadenas del MHC que son
retenidas intracelularmente y constituyen
la fuente de Ag del donador en el modelo.
El efecto en la respuesta antidonador fue independiente del mtodo
utilizado para generar las DC teraputicas o de su viabilidad.
La prolongacin de la sobrevida del injerto ocurre usando MRDC
apoptticas del donador o sin moleculas MHC en su superficie.
DISCUSIN:
Conociendo el mecanismos por el cual las CD inducen
tolerancia y los mtodos para expandir las DC in vitro, abren
el camino para el desarrollo de terapias basadas en DC
inmunosupresoras en modelos experimentales para prevenir
o disminuir EICH y rechazo de tejidos.
Apesardelosresultadosprometedores,elmecanismoporel
quelasDCteraputicasmodulaenmenoslaaloinmunidad
invivotodavanoseconoce.
Cualeselmecanismoporelqueinteractanconlasclulas
T?
Enconclusin:
Las terapias basadas en DC modulan la respuesta antidonador a
traves de las APCs del huesped. La funcin de las DC teraputicas
en prolongar la sobrevida del transplante dependera mas bien de
la capacidad como clulas transportadoras de Ag que como clulas
presentadoras de Ag.
Todava falta comprobar la eficacia en modelos animales ms
grandes.
Este estudio no se opone a la futura generacin de DCs
inmunosupresoras capaces de mediar directamente la
supresin de las clulas T, pero dado el costo, tiempo y
riesgos de las terapias basadas en DC los autores presentan
dudas acerca de los potenciales beneficios de las terapias
actuales basadas en DC en transplante, sobre otros mtodos
ms simple y ya testeados como las DST.