UJI TSIA (Triple Sugar Iron Agar)

Pembahasan
Pada identifikasi bakteria digunakan juga medium TSIA (Triple Sugar Iron Agar). TSIA
terdiri dari tiga komponen gula, ketiga komponen gula ini akan digunakan untuk menentukan
kemampuan mikrobia untuk menggunakan beberapa atau semua komponen gula. Pada TSIA
juga terdapat komponen besi yang akan bereaksi dengan hidrogen sulfida (H
2
S), gas yang
diproduksi oleh mikrobia. Ketika mikrobia memproduksi H
2
S, lapisan yang terbentuk akan
berubah semua atau sebagian menjadi gelap.
Tiga komponen gula yang terdapat dalam TSIA adalah glukosa, sukrosa, dan laktosa. Jika
ketiga komponen gula digunakan dalam metabolisme mikrobia, mikrobia akan
mengakumulasi produk samping berupa asam. Pada medium yang berwarna merah pada
awalnya berubah menjadi kuning mengindikasi adanya produksi asam.
Pada hasil kelompok 4 pada medium yang awalnya berwarna merah berubah menjadi
magenta atau pink menunjukkan adanya aktifitas mikrobia di dalamnya. Mikrobia hanya
menggunakan glukosa pada metabolismenya, glukosa yang tersapat pada TSIA terbatas,
sehingga langsung terkuras dengan cepat. Namun mikrobia masih memerlukan nutrisi tapi
tidak dapat menggunakan produk gula yang lain. Warna pink yang dihasilkan berasal dari
komponen basa. Bakteria hanya menggunakan glukosa tapi tidak dapat menggunakan laktosa
dan sukrosa.







Medium Urea Broth digunakan untuk menguji aktivitas urease. Urease merupakan
enzim hidrolitik yang menyerang ikatan nitrogen dan karbon pada komponen amida misalnya
urea dan membentuk alkaline yang produk akhirnya adalah amonia. Adanya amonia dalam
media akan menyebabkan warna indikator berubah menjadi pink tua yang menandakan
bahwa bakteri uji memiliki enzim urease sehingga dapat dikatakan reaksi ini menunjukkan
hasil uji positif.