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LUIS HUAYANAY CONDE
20111313A 2014
DlSTRlBUClN UNlVERSAL DE
MlCROORGANlSMOS
MICROBIOLOGA
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MICROORGA"ISMOS -
3
DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE MICROORGANISMOS
Contenido
Contenido........................................................................................................................................... 2
OBJETlVOS................................................................................................................................... 3
MARCO TERlCO......................................................................................................................... 3
MORFOLOGlA DE LAS COLONlAS BACTERlANAS................................................................5
LOS MEDlOS DE CULTlVO....................................................................................................... 6
CONDlClONES GENERALES PARA EL CULTlVO DE MlCROORGANlSMOS.........................6
MEDlOS DE CULTlVOS MAS USADOS EN MlCROBlOLOGlA lNDUSTRlAL...........................8
METODOLOGlA............................................................................................................................. 9
PROCEDlMlENTO A................................................................................................................ l0
PROCEDlMlENTO B................................................................................................................ ll
RESULTADOS Y OBSERVAClONES:.........................................................................................ll
Lugar: Laboratorio microbiologa ...........................................................................................l2
Lugar: Fotocopiadora de la FlA ............................................................................................. l3
DlSCUSlONES............................................................................................................................. l4
DETECClN Y MEDlDA DEL CREClMlENTO.........................................................................l5
ClCLO DE CREClMlENTO DE POBLAClONES.......................................................................l6
FACTORES FlSlCOS Y QUlMlCOS QUE lNFLUYEN EN EL CREClMlENTO BACTERlANO.l7
CONCLUSlONES......................................................................................................................... 20
RECOMENDAClONES................................................................................................................. 20
BlBLlOGRAFlA............................................................................................................................. 2l
ANEXOS....................................................................................................................................... 2l
CUESTlONARlO.......................................................................................................................... 22
Procedentes del suelo y las plantas.......................................................................................... 23
Procedentes de animales y personas.......................................................................................23
Procedentes del aire del mar.................................................................................................... 23
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OBJETIVOS
Reconocer la importancia que tienen los microorganismos en el cual nos encontramos y saber en que
condiciones habitan.
Considerar la importancia que tiene la adecuada preparacin del medio de cultivo en la prctica de
microbiologa.
Entender la necesidad de evitar la contaminacin tanto de los medios del cultivo como de los
instrumentos utilizados en el laboratorio de microbiologa.
Observar y catalogar los diferentes tipos de microorganismos que se desarrollan en diferentes
ambientes de la facultad.
amiliarizarse con los materiales y su uso en el laboratorio de microbiologa para futuros laboratorios.
MARCO TERICO
Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de !ste en medios de
cultivo y condiciones de laboratorio controladas. "a poblacin de microorganismos desarrollada en un
medio se de nominacultivo. Cuando !ste contiene una sola especie de microorganismo# se denomina
cultivo puro oa$!nico# cuandocontiene ms de una especie de microorganismos se denominacultivo
mi$to. %n cultivo tipo contiene una especieconocida de microorganismos y es conservada en el
laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.%n cultivo a$!nico consiste en una sola especie
microbiana# proveniente de una sola c!lula. "os cultivos a$!nicosson muy raros en la naturaleza. En
los medios naturales &por e'emplo# en el suelo# agua# o en el cuerpo humano&e$isten cultivos mi$tos.
En un cultivo mi$to# viven muchas y diferentes especies de forma con'unta. %n cultivoa$!nico se
obtiene artificialmente en el laboratorio. ( la hora de obtener un cultivo a$!nico se han
detomar precauciones especiales# ya que los microorganismos estn por todas partes# en la
naturaleza# en el laboratorio yen los instrumentos y recipientes usados en los e$perimentos. Estos
microorganismos no deseados ocontaminantes deben ser eliminados de un cultivo para que !ste
pueda ser a$!nico. El segundo paso paraobtener un cultivo a$!nico es inocular o introducir# una sola
c!lula de un microorganismo en un medio slido oliquido# esterilizado previamente. )e esta manera#
aislamos un solo microorganismo del resto y se podrmultiplicar en condiciones favorables. %n clon
est constituido por una poblacin de c!lulas descendientes de unsolo microorganismo. %na colonia
es un clon lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficiede un medio slido.%n
cultivo microbiano que ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo o matraz# debe ser
transferidoa un medio de cultivo nuevo# de otra manera el crecimiento y sobrevivencia no pueden
continuar. En estatransferencia se deben considerar dos aspectos bsicos referentes a* no introducir
microorganismos indeseables+contaminantes, y concentracin o carga microbiana de la muestra
+inculo, a sembrar.

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-ara impedir la contaminacin de los cultivos# es necesario tener plena conciencia de la ubicuidad de
los microorganismos# lo que determina que el are y todas las superficies est!n densamente pobladas
por microorganismos# de este modo en la transferencia de una muestra microbiolgica a otro
recipiente# se debentener una serie de cuidados que eliminen los riesgos de contaminacin. Estos
incluyen el rea de traba'o# ellavado de las manos# la esterilizacin de todos los utensilios y medios
de cultivo a emplear y realizar latransferencia del microorganismo en una zona est!ril# la que se
obtiene traba'ando cerca de la flama del mechero.(l con'unto de procedimientos realizados para
prevenir o evitar la contaminacin se le llama t!cnica as!ptica. elseguimiento cuidadoso y detallado
de la misma evita accidentes tales como* o
"a contaminacin y p!rdida del cultivo en estudio o "a salida y dispersin de microorganismos del
cultivo# lo que ocasionara la contaminacin de utensilios#productos y del personal. Este /ltimo
aspecto es particularmente importante cuando se traba'a concultivos de microorganismos
patgenos.Con relacin a la concentracin del inculo# un error frecuente del principiante consiste en
tomar muestrasgrandes# lo que es innecesario. %na colonia de bacterias del tama0o de la cabeza de
un alfiler contiene variosmillones de microorganismos# es obvio que con una cantidad peque0sima
+casi invisible, que se adhiera al asa# ser ms que suficiente para efectuar una transferencia e$itosa.
)ispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas* hisopo# pipeta +para uso
microbiolgico sonterminales y la parte superior o boquilla debe estar protegida con filtro de algodn,#
pipeta pasteur# cable de 1olleo portasa con alambre de platino dispuesto en forma de* agu'a# asa#
esptula y2o gancho.En la transferencia de microorganismos se emplean agu'as# asas de inoculacin#
hisopos# pipetas o pipetaspasteur que debern esterilizarse previamente. "a utilizacin de estos
dispositivos# as como de los diferentesmedios de cultivo tienen aplicaciones especficas. -or
e'emplo* los medios lquidos se preparan en tubos omatraces que se cubren con tapones de algodn
o tapones especiales. %n cultivo lquido puede ser transferidomediante un asa microbiolgica# un
hisopo# pipeta o pipeta pasteur. el inculo se deposita dentro del caldo omedio lquido. En este tipo
de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se manifiestaen la superficie o
a trav!s de todo el lquido. %na de las venta'as que presenta este tipo de cultivo se refiere a
laposibilidad de agitarlos acelerando la velocidad de microorganismos anaerobios# por otra parte# en
este tipo decultivos# las poblaciones se encuentran suspendidas y e fcil homogenizarlas# lo que
permite estandarizar laconcentracin del inculo. "a desventa'a que presentan# e que en ellos e difcil
detectar contaminacin a simplevista."os medios semislidos e preparan en tubos# se inoculan con
agu'a de siembra +asa recta, o pipeta pasteur. eneste /ltimo caso es necesario calentar el medio y
cuando se encuentra en estado lquido y a una temperatura deapro$imadamente 345C se agrega el
inculo# se homogeniza y se de'a solidificar. Estos medios se emplean paraestudiar la movilidad de
los microorganismos y para favorecer la separacin de microorganismos con
diferentesrequerimientos de o$geno."os medios slidos e preparan en tubos o matraces
dependiendo de la cantidad o de las necesidades# despu!sde esterilizarlos# estos se inclinan o
vierten en ca'as de petri. "a siembra se realiza con el asa# inoculando lasuperficie del agar con
mucha suavidad. en estos medios# los microorganismos al multiplicarse forman agregadosque se
hacen visibles a simple vista. a estos agregados se les denominan colonias# las que presentan
caractersticas que varan con el tipo de microorganismo cultivado y el medio de cultivo empleado.En
cualquier medio de cultivo es de primordial importancia a'ustar el p6# ya que a/n cuando la mayora
de losmicroorganismos crecen me'or en p6 neutro# algunos requieren de p6 alcalino o cido# por lo
que al proporcionar un p6 adecuado se favorecer el crecimiento del microorganismo de inter!s y la
obtencin del cultivo. Con estemismo propsito durante la incubacin se deben proporcionar las
condiciones adecuadas para el microorganismoen estudio. El crecimiento ptimo de los
microorganismos se presenta a temperaturas que la mayora de lasveces estn relacionadas con la
de su hbitat natural.(lgunos microorganismos crecen por deba'o de 785C# otros requieren
temperaturas ms elevadas +9: a 385C, yalgunos hasta ;:5C. -ara alcanzar y mantener estas
temperaturas se puede usar una incubadora microbiolgicao un ba0o de agua a temperatura
constante# en tanto que para lo microorganismos que presentan su crecimientoptimo a temperaturas
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entre 4: y 485C se pueden incubar en la gaveta o ca'n del laboratorio# a temperaturaambiente.En
general las incubadoras microbiolgicas satisfacen las necesidades en cuanto a los rangos de
temperaturarequeridas por los microorganismos. "a desventa'a que tienen es que estos aparatos
funcionan con are seco# lo que determina la deshidratacin de los medios de cultivo. -or lo tanto# el
crecimiento de cualquier cultivo e$perimental que se realice en incubadora no debe prolongare por
ms de nueve das. Con relacin a las necesidades gaseosas# no todos los microorganismo crecen
en presencia de o$geno atmosf!rico. los que slocrecen en presencia de are se llaman aerobios
obligados. los que slo crecen en ausencia de o$geno sedenominan anaerobios obligados o
estrictos# un tercer grupo se adapta a las dos condiciones y se le conocecomo facultativos. E$iste
una cuarta categora que comprende bacterias que requieren o$geno# pero slo loutilizan cuando
!ste e$iste en concentraciones reducidas. a estos se les llama microaeroflicos. El desarrollo deestos
diferentes grupos e favorece mediante la agitacin de los cultivos o mediante la e$clusin de o$geno
paralo que se emplean sustancias reductoras o equipos especiales."as bacterias son organismos
procariticos# se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza# habitan enel agua# el suelo#
en la superficie o en el interior de plantas y animales incluyendo al hombre. -ueden vivir enforma
libre o en simbiosis con otros organismos# ya sea como parsitos# comensales o mutualistas.
isiolgicamente este grupo presenta caractersticas muy variables# hay bacterias mviles e
inmvilesfotosint!ticas y quimiotrficas# auttrofas y hetertrofas. se desarrollan en un rango muy
amplio de temperatura#p6 y condiciones gaseosas.En el estudio de cultivos bacterianos algunos de
los criterios que se emplean para caracterizarlas incluyen*tama0o# morfologa celular# forma de
agrupacin# reaccin a la tincin de <ram# formacin de esporas# movilidad#presencia de inclusiones
de reserva y caractersticas culturales en medios lquidos y slidos en los que presentan patrones de
desarrollo en cuanto a la forma# tama0o# elevacin y color de las colonias.
MORFOLOGA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS
El desarrollo de colonias sobre las superficies de un agar permite al microbiologa identificar las bacterias
porque las especies forman a menudo colonias con una forma y aspecto caractersticos.
"a identificacin presuntiva o preliminar de una bacteria se basa en la morfologa colonial# para ello se forma
en cuenta las siguientes caractersticas*
7. Elevacin: -lana# ba'o conve$a# conve$a rugosa# crateriforme y conve$a y cncava.
4. Bordes: liso# dentado# ondulado# lobulado# cremado# ciliado y ramosa +mas com/n liso,
9. Superficie: "isa y Rugosa
3. Forma: Circular# ondulada y obulada.
8. Tamao: puntiforme# peque0a# mediana y grande.
=. Transmisin de la luz: opaca o translucida.
>. Reflexin de la luz: ?ate y @rillante.
;. Aspecto: 6/medo y Aeco.
B. Consistencia: @utirosa +brillante# h/meda y translucida,# ?ucoide +como moco,# Citrea +opaca# seco,
y seca +si es dura,.
7:. Pimento: Color +ro'as# verdes# etc., y olor.
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"a morfologa bacteriana es comparable a una estadstica ya que se deriva de una c!lula individual pero es la
caracterstica de la masa celular. (s pues# por e'emplo# la pigmentacin es aparente en la colonia# pero no
en la c!lula individual# en el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la
sustancia capsular en aquellas bacterias con cpsula muy grande.
LOS MEDIOS DE CULTIVO
%no de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento
en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los
microorganismos es el ?edio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Ae han
preparado ms de 7:.::: medios de cultivo diferentes.
-ara que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de
condiciones como son* temperatura# grado de humedad y presin de o$geno adecuado# as como un grado
correcto de acidez o alcalinidad. %n medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar e$ento de todo microorganismo contaminante.
"a mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes comple'os similares en composicin a los lquidos
orgnicos del cuerpo humano. -or eso# la base de muchos medios de cultivo es una infusin de e$tractos de
carne y -eptona a la que se a0adirn otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Ae lic/a
completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 3: grados. Con mnimas
e$cepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en
!l.
"a <elatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan
su licuacin.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos
de carbono# suero# sangre completa# bilis# etc. "os hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos
fundamentales* para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de
los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se a0aden para promover el
crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
Dambi!n se a0aden colorantes que act/an como indicadores para detectar# por e'emplo# la formacin de
cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras +el Ro'o enol se usa como
indicador ya que es ro'o en p6 bsico y amarillo en p6 cido. "a Cioleta de <enciana se usa como inhibidor
ya que impide el crecimiento de la mayora de las bacterias <ram&positivas,.
CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE
MICROORGANISMOS
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de
factores de gran importancia y que# en algunos casos# son a'enos por completo al propio medio.
1- disponibilidad de nutrientes adecuados
%n medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener# como mnimo# carbono#
nitrgeno# azufre# fsforo y sales inorgnicas. En muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas y otra
sustancia inductoras del crecimiento. Aiempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para e'ercer
de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar.
Dodas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne# e$tractos de carne o
e$tractos de levadura. Ain embargo# la preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de
cultivo provocaba la p!rdida de los factores nutritivos lbiles.
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(ctualmente# la forma ms e$tendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que#
adems# representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora de los
microorganismos# que no suelen utilizar directamente las protenas naturales# tienen capacidad de atacar los
aminocidos y otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la peptona.
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se a0ade a muchos medios sustancias
como suero# sangre# lquido asctico# etc. Egualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales
minerales como las de calcio# magnesio# manganeso# sodio o potasio y sustancias promotoras del
crecimiento# generalmente de naturaleza vitamnica.
?uy a menudo se a0aden al medio de cultivo ciertos colorantes# bien como indicadores de ciertas actividades
metablicas o bien por sus capacidades de e'ercer de inhibidores selectivos de ciertos microorganismos.
2- consistencia adecuada del medio
-artiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia a0adiendo productos como alb/mina#
gelatina o agar# con lo que obtendramos medios en estado semislido o slido.
"os medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos microorganismos no se
desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que otros
tienen la capacidad de licuarla.
(ctualmente los medios slidos son de uso universal# por su versatilidad y comodidad# pero hay tambi!n gran
cantidad de medios lquidos cuyo uso est ampliamente e$tendido en el laboratorio.
3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases
<ran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de o$geno normal. (lgunas pueden
obtener el o$geno directamente de variados sustratos. -ero los microorganismos anaerobios estrictos slo
se desarrollarn adecuadamente en una atmsfera sin o$geno ambiental. En un punto intermedio# los
microorganismos microaerfilos crecen me'or en condiciones atmosf!ricas parcialmente anaerobias +tensin
de o$geno muy reducida,# mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a
cualquiera de las citadas condiciones.
4- condiciones adecuadas de humedad
%n nivel mnimo de humedad# tanto en el medio como en la atmsfera# es imprescindible para un buen
desarrollo de las c!lulas vegetativas microbianas en los cultivos. 6ay que prever el mantenimiento de estas
condiciones mnimas en las estufas de cultivo a 98&9>5C proporcionando una fuente adecuada de agua que
mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque el medio.
5- Luz ambiental
"a mayora de los microorganismos crecen mucho me'or en la oscuridad que en presencia de luz solar. 6ay
e$cepciones evidentes como sera el caso de los microorganismos fotosint!ticos.
- p!
"a concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. "a
mayora de ellos se desarrollan me'or en medios con un p6 neutro# aunque los hay que requieren medios
ms o menos cidos. Fo se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el
crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metablicos normales.
"- #emperatura
"os microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 78 y 395C. Otros como los
psicrfilos crecen a :5C y los termfilos a ;:5C o incluso a temperaturas superiores +hipertermfilos,. En
lneas generales# los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos# alrededor de
9>5C# y los saprofitos tienen rangos ms amplios.
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$- %sterilidad del medio
Dodos los medios de cultivo han de estar perfectamente est!riles para evitar la aparicin de formas de vida
que puedan alterar# enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especmenes
inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave +que
utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante,
MEDIOS DE CULTIVOS MS USADOS EN MICROBIOLOGA INDUSTRIAL
&aldo nutriti'o
Es un medio emprico de uso general para el cultivo de la mayora de las bacterias.
"os ingredientes son*
-luripetona 8g
E$tracto de carne 9g
Cloruro de sodio 8 gr.
(gua destilada 7::: ml
Ae pesan los ingredientes y se calientan hasta que se disuelven. %na vez que se ha enfriado# se a'usta el p6
a =.B G& :.4. En el autoclave a 7 atmsfera durante 78 minutos para precipitar los fosfatos. Ae filtra y se
reparte en tubos tapados con algodn o con tapones a rosca +en esta /ltimo caso no se a'usta
completamente las tapas,. Ae esteriliza a 7 atmsfera durante 4: minutos. ('ustar las tapas a roscar antes
de retirar del autoclave.
(gar nutriti'o
El (gar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy
util porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. (dems# el crecimiento bacteriano en
este agar lo hace en la superficie# por lo que se distinguen me'or las colonias peque0as.
En un caldo de nutrientes# la bacteria crece en el lquido# y aparece como una sustancia espesa# con colonias
dificilmente observables. El agar nutritivo contiene normalmente +H2v,*
:.8 I -eptona
:.9 I e$tracto de carne2e$tracto de levadura
7.8 I agar
:.8I JJFaClK
(gua destilada
p6 casi neutro +=.;, a 48 LC
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METODOLOGA
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los
microorganismos. "a composicin precisa depender de la especie que se quiera cultivar# porque las
necesidades nutricionales varan considerablemente. 6ay microorganismos muy poco e$igentes que crecen
bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy e$igentes que necesitan determinadas
sustancias como vitaminas# suero o sangre para crecer.
Preparacin de aar nutritivo
7. -esar 4#3 gr. )e agar
4. Certer el agar en un vaso precipitado y agregar 74:ml. de agua #mover con la bagueta.
9. Ai el agar que no se disuelve por completo se disuelve por medio de
ba0o mara# hasta que hierva.
3. Calentar hasta ;:5c y despu!s colocar en 74 tubos de prueba de 78 ml. (gar tapar los tubos con
algodn
8. Colocar los tubos en una re'illa luego llevarlo al autoclave para esterilizarlos.
=. "uego esperar que la temperatura en el autoclave se eleve hasta 74: 5c despu!s de 78 min.
>. )espu!s sacar los 74 tubos y distribuirlos a los respectivos grupos.
Procedimiento para o!tener caldo nutritivo
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7. Emplear ;gr. por litro de agua destilada.
4. Ai es necesario calentar hasta disolverlo completamente.
9. )istribuir y esterilizar en autoclave a 77;LC M 747LC durante 78 min.
PROCEDIMIENTO A
Tomar 4 tubos de agar nutritivo.
Vaciar el tubo de agar nutritivo en cada una de las 3 placas Petri estriles y en la placa Petri
no estril. Numerar las placas estriles del #l al #3 y la placa no estril con el #4.
Tubos con agar
Nutritivo fundido
Estril
Placas Petri
#l #2 #3 #4 estriles #l, #2 y
#3. Placa Petri
No estril #4.
Una vez que el agar se haya solidificado, se debe destapar la placa Petri #ly exponer el agar al aire
del laboratorio de microbiologa de la FlA (grupo 2) y (grupo 3) la fotocopiadora por l0 min o l5 min.
//Dividir la placa #2 en 4 partes, trazando lneas perpendiculares (cuatro cuadrantes) con algn
marcador.
//A. Pelo
B. Huella Digital
///C. lnoculador Estril
D. lnoculador no Estril
"as placas N9 y N3 no se deben abrir.
Envertir las placas petri e incubarlos a 9>c por 3; horas.
A
B
C
D
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E$aminar las placas y dar la e$plicacion de lo ocurrido en cada caso
PROCEDIMIENTO B
-ipeta est!ril pipeta no est!ril pipeta est!ril
222
-ipeta est!ril pipeta no est!ril pipeta est!ril
7 4 9
Dubo est!ril Dubo est!ril Dubo no est!ril
///
7. Dransferencias*
7.7. %sando una pipeta est!ril# transferir el caldo nutritivo esterilizado de un tubo a un tubo de
prueba est!ril.
7.4. %sando una pipeta no est!ril# transferir el caldo est!ril del segundo tubo a un tubo de
prueba est!ril# marcado con el n5 4
7.9. %sando una pipeta est!ril# transferir el caldo nutritivo a un tubo no esterilizado n5 9.
4. -oner los tubos en el incubador a 9>5C e incubarlos por 3; horas.
9. )espu!s de las 3; horas e$aminar los tubos y e$plicar qu! ha ocurrido.
RESULTADOS Y OBSERVACIONES:
)espu!s de 3; horas se revisaorn las placas petri para ver la presencia de microorganismos.
"os grupos N4 y N3 que se encargaron del procedimiento (# El grupo N3 se encarg de de'ar la placa petri en
el laboratorio de microbiologa mientras que el grupo N4 se encarg de llevarlo a la fotocopiadora de la
facultad. Ae observaron los siguientes resultados a las determinadas condiciones*
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L!"#$: L#%o$#to$io &i'$o%io(o")#
O ; personas
O Fo limpio
O Centilacin
O -olvo
O:7 de abril del 4:73 6ora* 7*38 pm
Fo se observ crecimiento de colonias en el sector C donde se puse el inoculador est!ril.
"rupo Placa #$%
est&ril
Placa #$' est&ril Placa
#$(
est&ril
Placa #$) no
est&ril
) (mbiente*
"aboratorio de
?icrobiologa
Aector (*
-elo
Aector @*
6uella
Aector
C*
Enocul
ador
est!ril
Aector )*
Enoculador no
est!ril
Fo abrir Fo abrir
# de Colonias
*+,
3 = 47 : 37 : 4:
Tamao PQ 7 mm+7,
PQ 9mm+7,
PQ 3mm+4,
PQ 7 mm+4,
PQ 4mm+4,
PQ 9mm+7,
PQ 3mm+7,
7 mm+7;,
4 mm+4,
7: mm+7,
& 7 mm+37, & 7mm
-aren Entero+3, Entero+8,
Ondulante+7,
Entero+47, & Entero+37, & Entero
Elevacin -lana+3, -lana+=, -lana+47, & -lana+37, & -lana
Cromo&nesis Cremas+3, Cremas+=, Cremas+47, & Cremas+37, & Cremas
Caracteres
pticos Opacas+3,
Opacas+=, Opacas+47, & Opacas+37, & Opacas
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L!"#$: Foto'o*i#do$# de (# FIA
O 4 personas
O "impio
O Centilacin
O -olvo
OAin Radiacin
O:7 de abril del 4:73 echa* 7*98 pm.
"rupo Placa #$%
est&ril
Placa #$' est&ril Placa
#$(
est&ril
Placa #$) no
est&ril
' (mbiente*
"aboratorio de
?icrobiologa
Aector (*
-elo
Aector @*
6uella
Aector
C*
Enocul
ador
est!ril
Aector )*
Enoculador no
est!ril
Fo abrir Fo abrir
# de Colonias
*+,
4 =: 8: : 74 : 4
Tamao PQ 7 mm+7,
PQ 4mm+7,
PpromQ 7
mm
7 mm
4 mm
& 7 mm+37, & 7:mm
78 mm
-aren Entero+4, Entero+=:, Entero+8:, & Entero+74, & "obulado
Elevacin -lana+4, -lana+=:, -lana+8:, & -lana+74, & -lana
Cromo&nesis Cremas+4, Cremas+=:, Cremas+8:, & Cremas+74, & Cremas
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3
Caracteres
pticos Opacas+4,
Opacas+=:, Opacas+8:, & Opacas+74, & Opacas
El procedimiento @ lo hicieron los grupos N7# N9 y N8. Ae observaron los siguientes resultado en los caldos
nutritivos.
DISCUSIONES
El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza# en la mayora de los casos# mediante la
produccin de colonias aisladas en cultivos slidos.
El crecimiento e$plosivo de las bacterias produce un gran n/mero a partir de una /nica c!lula inicial de forma
que# tras un periodo de tiempo de incubacin en las condiciones ambientales adecuadas# se produce una
colonia de individuos iguales.
-ara crecer# un microorganismo necesita nutrientes que le aporten energa y elementos qumicos para la
sntesis de sus constituyentes celulares.
GRUPO + TUBO + ESTERIL,PIPETA
ESTERIL
TUBO - ESTERIL,PIPETA
NO ESTERIL .DEBE
/ABER0
TUBO 1 NO ESTERIL,PIPETA
ESTERIL
CANTIDAD DE
CRECIMIENTO
NO HAY CREClMlENTO NO HAY ESCASO
DISTRIBUCION DE
CRECIMIENTO
NO HAY DlSTRlBUClON NO HAY POCO TRUBlO
OLOR NO HAY OLOR NO HAY PUTRlDO
GRUPO 1 TUBO + ESTERIL,PIPETA
ESTERIL
TUBO - ESTERIL,PIPETA
NO ESTERIL .DEBE
/ABER0
TUBO 1 NO
ESTERIL,PIPETA ESTERIL
.DEBE /ABER0
CANTIDAD DE
CRECIMIENTO
NO HlClERON EL TUBO ABUNDANTE NO HAY
DISTRIBUCION DE
CRECIMIENTO
SEDlMENTO NO HAY
OLOR PUTRlDO NO HAY
GRUPO 2 TUBO 1A NO
ESTERIL,PIPETA
ESTERIL
TUBO 1B NO
ESTERIL,PIPETA ESTERIL

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO
ABUNDANTE MODERADO
DISTRIBUCION DE
CRECIMIENTO
PELlCULA PELlCULA
OLOR PUTRlDO PUTRlDO
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)ependiendo de la fuente de carbono que utilizan# los microorganismos se pueden clasificar en*
autotrofos* si es el CO4 atmosf!rico +microorganismos que fotosintetizan,
heterotrofos si utilizan carbono orgnico.
"os microorganismos de importancia clnica son todos ellos hetertrofos.
"a frmula elemental de un microorganismo es# apro$imadamente# C36>O4F lo que supone que los
componentes de las c!lulas son* carbono que representa alrededor del 8:I del peso seco# o$geno +94I,#
nitrgeno +73I, y debe estar disponible# normalmente# en forma de F63 o de aminocidos a los que se
pueda tomar su grupo amino. fsforo +9I, y debe estar en forma de -O39&# azufre que representa en torno al
7I y procede de aminocidos sulfurados o de AO34&. y otros elementos traza entre los que se encuentran
e# 1# ?g# ?n# Co# ?b# Cu y Rn.
"a elaboracin de medios de cultivo que permitan aislar microorganismos a fin de iniciar posteriores cultivos
puros requiere proporcionar los nutrientes antes citados y# en ciertos casos# algunos aminocidos o vitaminas
que determinados tipos de microorganismos no pueden sintetizar.
"os medios de cultivo se pueden clasificar en definidos cuando su composicin qumica se conoce totalmente
y comple'os cuando no es el caso porque estn compuestos por mezclas de e$tractos de materiales
comple'os +e$tracto de levadura# e$tracto de carne# etc.,.
-or otra parte# los medios de cultivo pueden ser lquidos o bien slidos si se a0ade alg/n agente solidificante
que no sea consumible por los microorganismos +normalmente agar,.
En funcin de los microorganismos que pueden crecer en ellos# los medios pueden ser*
selectivos cuando favorecen el crecimiento de ciertos microorganismos mientras suprimen el de otros +por
e'emplo# el medio A-A para clostridios,#
diferenciales cuando alguno de sus componentes permite identificar las colonias de un tipo de
microorganismos +por e'emplo medios con hemates para identificar colonias de microorganismos
hemolticos,
selectivo&diferenciales cuando combinan las dos caractersticas anteriores +por e'emplo# el agar de
?acConSey para identificar Escherichia coli,#
medios de enriquecimiento que permiten aislar un tipo determinado de microorganismo a partir de
una mezcla una poblacin mi$ta de gran tama0o.
DETECCIN Y MEDIDA DEL CRECIMIENTO
E$isten diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos. los principales son*
recuento directo# medida de la masa de las c!lulas# recuento d viables# medida del n/mero de partculas#
medida de parmetros bioqumicos y medida de la actividad metablica.
Recuento directo* consiste en la observacin al microscopio de vol/menes muy peque0os de
suspensiones de bacterias. Ae usan unos portaob'etos especiales denominados cmaras de -etroff&
6ausser. -ara que la medida sea correcta es necesario que la densidad de c!lulas sea del orden de
7:8 por ml.
?edida de la masa de c!lulas* el sistema se basa en que las c!lulas en suspensin dispersan la luz
causando la turbidez del cultivo. "a turbidez depende de la masa en suspensin y# por tanto#
midiendo esta se puede estimar aquella. Este es el parmetro de medida ms fcil de usar en los
cultivos de laboratorio. "a densidad de c!lulas debe ser del orden de 7:8 por ml.
-Valor Creativo-
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3
Recuento de viables* consiste en sembrar un volumen determinado de cultivo o muestra sobre el
medio de cultivo slido adecuado para estimar el n/mero de viables contando el n/mero de colonias
que se forman puesto que cada una de estas deriva de una %C. -ara que la medida sea correcta
desde el punto de vista estadstico# es necesario contar ms de 9:: %C.
En ciertas ocasiones en las que la densidad de microorganismos es demasiado ba'a# !stos se pueden
recolectar por filtracin a trav!s de una membrana +de :.4 Tm de tama0o de poro, y posterior colocacin de
la membrana en un medio de cultivo adecuado para que se formen las colonias.
-edida del n.mero de part/culas usando contadores electrnicos de partculas. Estos sistemas no
nos indican si las partculas corresponden a c!lulas vivas o muertas. pero nos pueden dar una idea
del tama0o de las partculas.
-edida de par0metros !io1u/micos tales como la cantidad de ()F# (RF# protenas#
peptidoglicano# etc. por unidad de volumen.
-edida de actividad meta!lica de las bacterias como que respiran producen una disminucin del
potencial redo$ del medio en que se encuentran como consecuencia del consumo de o$geno
+utilizacin de colorantes sensibles a o$idacin&reduccin tales como el azul de metileno,.
CICLO DE CRECIMIENTO DE POBLACIONES3
En un cultivo bacteriano en medio lquido# se pueden diferenciar cuatro fases en la evolucin de los
parmetros que miden el crecimiento microbiano*
ase lag o de adaptacin* )urante la que los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas
condiciones ambientales +de abundancia de nutrientes, para poder iniciar el crecimiento e$ponencial.
ase e$ponencial o logartmica* en ella la velocidad de crecimiento es m$ima y el tiempo de
generacin es mnimo. )urante esta fase las bacterias consumen los nutrientes del medio a
velocidad m$ima. "a evolucin del n/mero de c!lulas durante esta fase se e$plica con el modelo
matemtico descrito anteriormente. Esta fase corresponde a la de infeccin y multiplicacin dentro
del organismo del agente infeccioso.
ase estacionaria* en ella no se incrementa el n/mero de bacterias +ni la masa u otros parmetros
del cultivo,. "as c!lulas en fase estacionaria desarrollan un metabolismo diferente al de la fase de
e$ponencial y durante ella se produce una acumulacin y liberacin de metabolitos secundarios que
pueden tener importancia en el curso de las infecciones o into$icaciones producidas por bacterias.
/
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"os microorganismos entran en fase estacionaria bien porque se agota alg/n nutriente esencial del medio#
porque los productos de desecho que han liberado durante la fase de crecimiento e$ponencial hacen que el
medio sea inhspito para el crecimiento microbiano o por la presencia de competidores u otras c!lulas que
limiten su crecimiento.
"a fase estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente con mayor fidelidad el estado
metablico real de los microorganismos en muchos ambientes naturales.
Fase de muerte* se produce una reduccin del n/mero de bacterias viables del cultivo.
"as fases# parmetros y cin!tica de crecimiento discutidas para el caso de los medios lquidos se presentan
tambi!n en los slidos. "a cin!tica de crecimiento# en este caso# slo se puede seguir utilizando unos
sistemas de deteccin especiales siendo el ms sencillo# la medida del n/mero de c!lulas viables por unidad
de superficie o por unidad de masa.
FACTORES FSICOS Y 4UMICOS 4UE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO
BACTERIANO.
Te&*e$#t!$#: Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Ai
consideramos la variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de cultivo#
podemos observar una temperatura mnima por deba'o de la cual no hay crecimiento. a temperaturas
mayores se produce un incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo
hasta que se alcanza la te&*e$#t!$# 5*ti&# a la que la velocidad es m$ima. -or encima de esta
temperatura ptima# la velocidad de crecimiento decae bruscamente y se produce la muerte celular.
El aumento de la velocidad de crecimiento con la temperatura se debe al incremento generalizado de la
velocidad de las reacciones enzimticas con la temperatura. Ae denomina coeficiente de temperatura a la
relacin entre el incremento de la velocidad de reaccin y el de temperatura. En t!rminos generales# la
velocidad de las reacciones bioqumicas suele aumentar entre 7.8 y 4.8 veces al aumentar 7:5C la
temperatura a la que tienen lugar.
"a falta de crecimiento a temperaturas ba'as se debe a la reduccin de la velocidad de las reacciones
bioqumicas y al cambio de estado de los lpidos de la membrana celular que pasan de ser fluidos a
cristalinos impidiendo el funcionamiento de la membrana celular.
"a muerte celular a altas temperaturas se debe a la desnaturalizacin de protenas y a las alteraciones
producidas en las membranas lipdicas a esas temperaturas.
Es importante tener en cuenta que a temperaturas ba'as# el metabolismo celular es lento y las c!lulas paran
de crecer. aunque suelen morir. Ain embargo# cuando la temperatura es superior a la ptima# se produce la
muerte celular rpidamente y las c!lulas no pueden recuperar su capacidad de divisin si ba'a posteriormente
la temperatura. Esto permite esterilizar por calor y no por fro.
6ay varios tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de crecimiento mnima# m$ima y
ptima.
Tipo de
microorganismo
Temperatura
mnima
Temperatura
ptima
Temperatura
mxima
Mesfilo 5 - 15 30 - 45 35 4
!sicrfilo -5 " 5 1# - 15 15 #0
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!sicrtrofo -5 " 5 #5 - 30 30 35
Termfilo 40 - 45 55 - 5 $0 - %0
"os microorganismos psicrtrofos son mesfilos que pueden crecer a temperaturas ba'as. -or tanto# se les
puede considerar como psicrfilos facultativos. Esto es importante desde el punto de vista aplicado porque
cuando se encuentran contaminando alimentos# son capaces de crecer en condiciones de refrigeracin +3 &
;5C, y de producir infecciones en los consumidores del alimento +9: & 98 5C,.
)esde el punto de vista clnico# los microorganismos capaces de producir infecciones en pacientes son los
mesfilos y algunos psicrtrofos ya que sus temperaturas ptimas de crecimiento coinciden con las
corporales.
Actividad de aua *a2)& Ae denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del
substrato de cultivo +-, y la presin de vapor de agua del agua pura +-:,. El valor de la actividad de agua
est relacionado con el de la humedad relativa +6R,.
El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible metablicamente. -or
e'emplo* comparemos el agua pura donde todas las mol!culas de agua estn libremente disponibles para
reacciones qumicas con el agua presente en una disolucin saturada de sal com/n +FaCl, donde una parte
importante de las mol!culas de agua participa en la solvatacin de los iones de la sal disuelta. En este /ltimo
caso# la actividad de agua mucho menor que en el primero. conforme aumenta la cantidad de solutos en el
medio# disminuye su actividad de agua.
El agua es un substrato en muchas reacciones bioqumicas +proteasas y lipasas# por e'emplo,. Cuando no
hay agua disponible# estas reacciones se detienen y el metabolismo se para. Esta falta de agua tambi!n
detiene muchas de las enzimas que podran degradar las estructuras biolgicas. -or ello# las c!lulas que no
crecen por falta de agua no mueren rpidamente* los sistemas de degradacin tampoco funcionan y no las
degradan.
Es decir* cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con actividad de agua menor que la que
necesita# su crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar asociada la muerte del
microorganismo# sino que !ste se mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos
largo. En el caso de las esporas# la fase de resistencia puede ser considerado prcticamente ilimitada.
"a gran mayora de los microorganismos requiere valores de actividad de agua muy altos para poder crecer.
"os valores mnimos de actividad para diferentes tipos de microorganismos son# a ttulo orientativo# los
siguientes* bacterias aHU:.B:# levaduras aHU:.;8# hongos filamentosos aHU:.;:.
Como puede verse# los hongos filamentosos son capaces de crecer en substratos con actividad de agua
menor +ms secos, de la que permite el crecimiento de bacterias o de levaduras. -or esta razn se puede
producir deterioro de alimentos de ba'a actividad de agua +por e'emplo# el queso o almbares, por mohos
+hongos filamentosos, y no por bacterias.
En funcin de su tolerancia a ambientes con ba'a aH# los microorganismos que pueden crecer en estas
condiciones se clasifican en halotolerantes# halfilos y $erfilos seg/n toleren o requieran condiciones salinas
o hipersalinas# respectivamente.
"a reduccin de la actividad de agua para limitar el crecimiento bacteriano tiene importancia aplicada en
industria alimentaria. "a utilizacin de almbares# salmueras y salazones reduce la actividad de agua del
alimento para evitar su deterioro bacteriano.
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3
p3* Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos ya que cada tipo de
microorganismo tiene un rango de p6 en el que puede vivir adecuadamente# fuera de este rango
muere.
El p6 intracelular es ligeramente superior al del medio que rodea las c!lulas ya que# en muchos casos# la
obtencin de energa metablica depende de la e$istencia de una diferencia en la concentracin de protones
a ambos lados de la membrana citoplsmica.
El p6 interno en la mayora de los microorganismo est en el rango de =#: a ;#:. "os rangos de p6 tolerables
por diferentes tipos de microorganismos son# tambi!n# distintos. 6ay microorganismos acidfilos que pueden
vivir a p6Q7.: y otros alcalfilos que toleran p6Q7:.:.
6ay que considerar que# como consecuencia del metabolismo# el p6 del medio de crecimiento suele tender a
ba'ar durante el cultivo. -or otra parte# la ba'ada del p6 del medio que producen ciertos microorganismos les
confiere una venta'a selectiva frente a otros competidores. (s# por e'emplo# las bacterias lcticas que
producen grandes cantidades de cido lctico como consecuencia de su metabolismo primario reducen el p6
del medio a valores inferiores a los soportables por otras bacterias competidoras +llegan a ba'ar el p6 del
medio hasta 3.8,. )e esta forma# las bacterias competidoras mueren y las lcticas se convierten en la
poblacin dominante.
"a ba'ada del p6 se puede deber a varios factores# uno de los cuales es la liberacin de cidos orgnicos de
cadena corta +frmico# ac!tico# lctico, por ciertas bacterias.
En este sentido# hay que tener en cuenta que la accin bactericida de estos cidos orgnicos de cadena
corta es ms potente que la debida /nicamente a la ba'ada del p6 que producen. Esto es# los cidos
orgnicos de cadena corta son t$icos para algunas bacterias por s mismos.
El efecto letal del p6 cido sobre los microorganismos tiene aplicacin en la conservacin de alimentos
acidificndolos. )e esta forma# la adicin de cido ac!tico en forma de vinagre permite la conservacin de
alimentos perecederos +escabeches# por e'emplo, y la produccin de cidos en el curso de fermentaciones
naturales permite alargar la vida de los alimentos +coles fermentadas# por e'emplo,.
)otencial redox& nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones# esto es* sus
caractersticas o$idantes o reductoras. %no de los factores que intervienen en el potencial redo$# aunque no
el /nico# es la concentracin de o$geno JO4K.
6ay microorganismos que requieren ambientes o$idantes para crecer# mientras que otros necesitan
ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos de microorganismos presenta diferencias notables. El
requerimiento de condiciones o$idantes o reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o
ausencia de o$geno para que se produzca el crecimiento.
En general# cuando un microorganismo requiere un ambiente o$idante se dice que desarrolla un metabolismo
o$idativo +o respirativo, mientras que los microorganismos que requieren ambientes reductores +o menos
o$idantes, realizan un metabolismo fermentativo.
%n microorganismo es aerobio cuando necesita o$geno para vivir y es anaerobio cuando o bien no lo
necesita +anaerobios facultativos como las bacterias ent!ricas# o como Aaccharomyces cerevisiae. o
anaerobios aerotolerantes como las bacterias lcticas, o cuando muere en presencia de o$geno +anaerobios
estrictos como los clostridios,.
6ay microorganismos que# aunque viven en presencia de o$geno# no son capaces de utilizarlo como aceptor
final de electrones y deben desarrollar un metabolismo fermentativo +los estreptococos# por e'emplo,.
-or otra parte# hay microorganismos que pueden desarrollar ambos tipos de metabolismo. Esto es* en
presencia de o$geno desarrollan un metabolismo o$idativo y en su ausencia# fermentativo. El rendimiento de
los procesos fermentativos es menor que el de los respirativos* las bacterias y las levaduras producen menos
biomasa cuando crecen fermentando que cuando lo hacen respirando.
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En el curso de ciertas reacciones metablicas redo$ se forman compuestos altamente reactivos +radicales
libres# formas super$ido, que pueden da0ar las protenas# membranas y cidos nucleicos produciendo la
muerte de las c!lulas. "as c!lulas se defienden de estos compuestos reactivos mediante las enzimas de*
super$ido dismutasa +AO), y catalasa. "os anaerobios estrictos carecen de AO) y de catalasa o tienen
niveles muy ba'os de estas enzimas de forma que no pueden sobrevivir en presencia de o$geno. "a
deteccin de estas enzimas tiene valor ta$onmico.
CONCLUSIONES
El n/mero de colonias que crecieron# tanto el tama0o como la forma y su dems caracterstica vara
seg/n al ambiente al que fue e$puesto ya que las condiciones para el desarrollo no son las mismas.
El n/mero de colonias que creci en el pelo del grupo N4 fue en e$ceso ya que probablemente el
pelo no ha tenido la debida limpieza.
El n/mero de colonias que crecieron en la huella se debi al incorrecto aseo de las manos.
)e acuerdo a lo observado en el laboratorio# los microorganismos estn ms concentrados en
algunos ambientes de nuestra facultad# los factores para que haya ms microorganismos en estos
lugares pueden ser la humedad# poca iluminacin y poca ventilacin. -or e'emplo en el laboratorio de
microbiologa encontramos casi la misma cantidad de colonias que el ba0o de nuestra facultad# y si
vemos las condiciones de estos ambientes# son similares como la humedad# la poca iluminacin y
ventilacin en el ba0o de la facultad +que es evidente,# y en el laboratorio de microbiologa que
tampoco est demasiado ventilado porque no tenemos ventanas abiertas# tambi!n est claro que en
el laboratorio traba'amos con una gran cantidad de compuestos qumicos y anlisis de aguas
servidas que pueden actuar como nutrientes para la formacin de bacterias.
El desarrollo de las bacterias en el caldo nutritivo# se hace notar con la aparicin de precipitados y
coloracin de la muestra# esto es porque la pipeta o el tubo de ensayo no estuvieron esterilizados# de
aqu concluimos que nuestros instrumentos utilizados en el laboratorio no estn libres de
contaminacin a pesar de haberlas lavado con agua destilada.
Cuando se traslada una muestra de un recipiente est!ril a otro est!ril el crecimiento de
microorganismos es casi nulo o nulo en comparacin# si se usaran recipientes no est!riles esto se
debe a que los microorganismos no se generan espontneamente como lo dice -asteur.
-udimos notar que el aire en el ambiente no tiene una concentracin definida de la flora bacteriana#
ya que los microorganismos que habitan en !l no son autctonos sino que son llevados del suelo o
del agua.
Dambi!n se observ +con la teora, que de acuerdo al tipo de bacteria que se requiera sembrar# ser
el ti po de medi o de cul ti vo# esto# ya que cada bacteri a requi ere ci erto ti po de nutri entes
para subsi sti r y formar sus colonias# adems de que cierto tipo de medios de cultivo# nos pueden
mostrar de acuerdo a su composicin ciertas caractersticas que presentan determinado tipo de
bacterias# ya sea por su p6 y que este sea i ndi cado por l os i ndi cadores de l os medi os o por
que reacci one con ci ertos componentes del medio creando colores o formas.
RECOMENDACIONES
7. -ara realizar un traba'o ms e$acto# trate de utilizar materiales de cultivo cuya fecha de
vencimiento sea posterior al traba'o de laboratorio.
4. "avar bien los instrumentos a utilizar para evitar contaminacin.
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9. El mechero no es eficaz para la esterilizacin del inoculador.
3. Esterilizar todo material a utilizar en la preparacin de medios de cultivo.
8. (l introducir las placas -etri a la incubadora# colocarlas invertidas.
=. Dapar bien los tubos de ensayo con algodn al momento de esterilizarlas.
>. 6acer un buen uso del autoclave y horno utilizando todos los instrumentos preventivos para
evitar accidentes en el laboratorio.
;. %na vez concluido el laboratorio# lavarse bien las manos y descontaminarlas con alcohol.
B. Ae debe tener presente# la adecuada esterilizacin de los instrumentos a utilizar para tener un
me'or resultado en los e$perimentos.
BIBLIOGRAFA
?ECRO@EO"O<E( M RO<ER AD(FEER. VO6F EF<R(6(?. ?. W6EE"EA. -. -(EFDER. Aegunda
edicin. Editorial Revert! A.(.
http://es.wikipedia.org/wiki/Conteo_bacteriano
http://microbitos.wordpress.com/20l0/06/l4/morfologia-colonial-bacteriana/
ANE6OS
PROCEDlMlENTO A: Agar nutritivo
//

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PROCEDlMlENTO B: Caldo nutritivo.
/
CUESTIONARIO
l. Explique 3 factores que influyen en la flora bacteriana del aire.
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P$o'edente7 de( 7!e(o 8 (#7 *(#nt#7
"a poblacin microbiana del suelo es superior a la de los dems ambientes naturales# por lo que puede
considerarse la principal fuente para el aire# en dependencia de la actividad del ambiente y de la cantidad de
polvo agitado# entre otros factores. Aeg/n el tipo de suelo variar la microflora del aire.
"os terrenos f!rtiles y cultivados contienen ms microorganismos que los inf!rtiles y sin cultivar# por lo que el
aire de encima de los primeros ser ms enriquecido microbiolgicamente que el de los segundos. )e la
misma forma# al aire pueden llegar los microorganismos procedentes de la microflora epiftica de las ho'as y
tallos.
Entre los microorganismos se tienen*
Bacterias saprfitas pigmentarias: Bacillus subtilis, B. Megaterium, B cereus.
Actinomicetos
Esporas e hifas vegetativas de hongos
P$o'edente7 de #ni&#(e7 8 *e$7on#7
(l aire pueden llegar# 'unto con las gotitas de moco# esputo# saliva# etc.. de los animales y de las personas#
lanzados al toser# al estornudar y al hablar. los microorganismos que componen la microflora normal de la
boca# las fauces# las vas respiratorias superiores de !stos o tambi!n agentes etiolgicos de muchas
enfermedades que encuentran un medio propicio para su diseminacin. "os microorganismos suspendidos
en el aire estn en forma de aerosol bacteriano +gotas# n/cleos goticulares y en polvo,.
Entre las enfermedades que se transmiten por esta va se tienen*
Pleuroneumona bovina
Peste aviar
lnfluenza
Sarampin
Varicela
Rubeola
Tuberculosis
P$o'edente7 de( #i$e de( &#$
Ae han aislado microorganismos del aire del mar# pero !ste suele contenerlos en menor n/mero que el de
origen continental o terrestre.
Entre los microorganismos se tienen* esporas bacterianas# conidios y fragmentos de hongos# que localizados
en estratos superiores pueden ser llevados a grandes distancias y llegan al pas# procedentes de las zonas
continentales.
"as composiciones cualitativa y cuantitativa de los microorganismos del aire varan entre grandes lmites y
depende de su procedencia# naturaleza y de diversos factores que influyen sobre la misma. El estudio del
contenido microbiano del aire debe hacerse al considerar el aire e$terior y el aire interior. (dems# la
composicin y la cantidad de la microflora del aire varan seg/n la !poca del a0o en las diferentes latitudes.
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4. E$plique 9 enfermedades que son transmitidas por el aire.
"a trasmisin a!rea es una va de transmisin estresante para el microorganismo ya que el aire carece de los
nutrientes y la humedad neccesarios para permitir una larga supervivencia de muchos patgenos.
?uchas bacterias son transmitidas a trav!s del aire en gotas o aerosoles producidos al toser# estornudar o
hablar. Aon especialmente importantes los aerosoles producidos por tos o estornudo porque la gran
velocidad con la que se emiten las partculas en estas condiciones reducen mucho el tiempo de trayectoria de
la partcula hasta llegar al nuevo hu!sped y# de esta forma# se hace mnima la desecacin.
En general# esta va requiere una estrecha pro$imidad entre la fuente y el receptor para que se produzca el
contagio.
El polvo es un coadyuvante para la transmisin de microorganismos por va a!rea porque permite a !stos
resistir ms tiempo en suspensin en el aire# y facilitan la entrada en el hu!sped. Este factor +el polvo,#es
importante en la transmisin de infecciones nosocomiales por esta va.
Enfermedades bacterianas transmitidas por va area:
Tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis)
Faringitis causada por (Streptococcus pyogenes)
Neumona causada por (Streptococcus pneumoniae)
Difteria (Corynebacterium diphteriae)
Legionelosis causada por (Legionella pneumophila)
Tosferina causada por ordetella pertusis!
)4 56u& rupo de aentes causa la ma7or incidencia de enfermedades respiratorias8
Aentes causales 9
Rinovirus 48&4B
"ripe 4;&98
Parainfluenza ;#8&B:
Adenovirus 44&98
Coronavirus 48&=9
Mycoplasma pneumoniae 9&9>
Chlamydophila
pneumoniae
9:
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Streptococcus pyogenes 4#9&7B
-etapneumovirus :umano 3&B7
;4 -encione las caracter/sticas principales< R:izompus niricans =alternar/a =sac:arom7ze
cerevisiae
Rhizopus* Es un gnero de mohos que incluyen especies cosmopolitas de hongos
filamentosos hallados en el suelo, degradando frutos y vegetales, heces animales, y
residuos.
Las especies de Rhizopus producen esporos asexuales y sexuales. Los esporangiosporos
asexuales se producen dentro de una estructura aguzada, el esporangium, y son
genticamente idnticos a su padre. En Rhizopus, el esporangio es soportado por una gran
columela apofisada, y el esporangiforo asoma entre rizpodes distintivos. Cigosporos
negros se producen despus de dos fusiones compatibles de micelios durante la
reproduccin sexual. Y hacen colonias que pueden ser genticamente diferentes de sus
padres.
Diagrama equemtico de Rhizopus spp.
Algunas spp. de Rhizopus son agentes oportunistas de cigomicosis humana. Pueden
causar serias (y con frecuencia fatales) infecciones en humanos y en animales debido a su
rpido crecimiento a relativamente altas temperaturas. Algunas especies son patgenos
vegetales. Dos son usados en fermentacin: Rhizopus oligosporus, en la produccin de
tempeh, un alimento fermentado derivado de grano de soja; R. oryzae se usa en la
produccin de bebidas alcohlicas, en partes de Asia y de Africa.
(lternara* Es un hongo de los que se registran con mayor frecuencia en las muestras de aire
atmosfrico de exteriores. Habita en hojas cadas, plantas y material orgnico en
descomposicin, y sus esporas flotan en el aire.
Se registra todo el ao, pero ms en los das calurosos y hmedos. Su presencia en el
interior de las viviendas es reflejo de su concentracin exterior y la proporcin encontrada
entre aire exterior e interior es de 4 a l aproximadamente.
Se le asocia indiscutiblemente con la produccin de cuadros de rinoconjuntivitis alrgica y
asma bronquial y aisladamente a neumonitis por hipersensibilidad.
A diferencia de los plenes , que producen principalmente rinoconjuntivitis alrgica, la
alternaria produce con mayor frecuencia la asociacin de esta con asma , sobre todo en
nios y en situaciones de exposicin como lo son lugares hmedos con material orgnico
Ej.: pastizales jardines , regados etc.
Los sntomas por alergia a este hongo son ms frecuentes en primavera tarda y otoo.
-Valor Creativo-
-DISTRIBCI!" "IV#RSAL D#
MICROORGA"ISMOS -
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Alternaria sp
A. cerevisiae* es uno de los modelos ms adecuados para el estudio de problemas
biolgicos. Es un sistema eucariota, con una complejidad slo ligeramente superior a la de
la bacteria pero que comparte con ella muchas de sus ventajas tcnicas. Adems de su
rpido crecimiento, la dispersin de las clulas y la facilidad con que se replican cultivos y
aslan mutantes, destaca por un sencillo y verstil sistema de transformacin de ADN. Por
otro lado, la ausencia de patogenicidad permite su manipulacin con las mnimas
precauciones.
-S. cerevisiae es un sistema gentico que, a diferencia de la mayora de los otros
microorganismos, presenta dos fases biolgicas estables: haploide y diploide. La fase
haploide permite generar, aislar y caracterizar mutantes con mucha facilidad, mientras que
en la diploide se pueden realizar estudios de complementacin. Una levadura haploide
contiene l6 cromosomas que varan en tamao de 200 a 2200 kilobases (kb).
-Una ventaja adicional de este microorganismo consiste en que se conoce la secuencia
completa de su genoma y se mantiene en constante revisin. Ello ha permitido la
manipulacin gentica de los casi 6600 genes que codifica el genoma de levadura, el uso
extensivo de micromatrices de ADN para investigar el transcriptoma y estudios a escala
genmica de, entre otros muchos aspectos, la expresin gnica, localizacin de protenas y
la organizacin funcional del genoma y el proteoma.
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-Valor Creativo-
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MICROORGA"ISMOS -
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