TRABAJO ENCARGADO N1 TEMA : DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS INTEGRANTES : CLAUDIA GUARDAMINO ALVAREZ GABRIEL CORONADO JORGE VERNICA TANANTA SNCHEZ ROSA RENGIFO PINEDO ALFREDO RAMOS PEREA DOCENTE : Ing. ENRIQUE TERLEIRA GARCIA FECHA DE ENTREGA : ! En"#$ %" &&1 TARAPOTO PER CARBOHIDRATOS DEFINICIN Y CLASES DE CARBOHIDRATOS: Los carbohidratos constituyn !as trs cuartas "arts d! #undo bio!$%ico y a!rddor d! &'( d! a"ort ca!$rico d !a hu#anidad) E! #*s abundant d ntr !!os s !a c!u!osa+ co#"onnt structura! "rinci"a! d *rbo!s y otras "!antas) E! in%rdint d !os a!i#ntos #ayoritario n ! consu#o hu#ano s ! a!#id$n+ ,u "ro- un ./0&'( d! a"ort nr%1tico tota!) E! t1r#ino carbohidrato+ dri-ado d! a!#*n 23oh!nhydrat4 y si#i!ar a! 5ranc1s 2hydrat d carbon4+ 6"rsa una co#"osici$n !#nta!+ hac ti#"o dtr#inada+ d C 6 7H 8 O9 y ,u contin carbono+ hidr$%no y o6:%no+ stos ;!ti#os n una "ro"orci$n si#i!ar a !a d! a%ua) Con !a -o!uci$n d !a #todo!o%:a ,u:#ica+ sta 5$r#u!a #":rica 5u r#"!a<ada "or una 5or#u!aci$n %r*5ica #*s dscri"ti-a ,u "ro"orcion$ una c!ara -isua!i<aci$n d !a structura s"acia! o s51rica) As:+ !a 5or#u!aci$n d !a D0%!ucosa+ ! a<;car #tab$!ico cntra! n !a #ayor:a d !os or%anis#os+ 5u ori%ina!#nt r"rsntada co#o una cadna abirta+ #*s tard co#o un h#iacta! c:c!ico #*s stab! tr#odin*#ica#nt) La D0%!ucosa+ "os !a 5$r#u!a #":rica C=H>8O=+ y su 5$r#u!a structura! #ustra ,u tin 5unciona!idad a!dh:do y "o!ihidro6i!o) Es un #onosac*rido ,u "os un %ru"o sac*rido) ?n #onosac*rido "ud unirs a otro "ara dar !u%ar a un disac*rido7#a!tosa9+ o a otros n una cadna d unidads d #onosac*ridos "ara "roducir+ tri0+ ttrasac*ridos o #ayors "o!:#ros con cadnas d hasta -arios #i!s d unidads) Cuando son d 8 a >' #onosac*ridos+ 5or#an !a c!as d !os o!i%osac*ridos 7o!i%o@ "oco9A si son #*s d >'+ s conocn co#o "o!isac*ridos 7"o!i @ #uchos9) Los #onosac*ridos s "rsntan n !a natura!<a s$!o n ",uBas cantidads) C*s ,u co#o a<;cars !ibrs+ st*n "rsnts casi si#"r co#o unidads d !os "o!isac*ridos) ?n ",uBo "orcntaD 6ist n 5or#a d disac*rido+ y una cantidad toda-:a #nor 5or#ando "art d otros o!i%osac*ridos) La D0%!ucosa+ ! a<;car #*s abundant d todos+ s ncuntra !ibr co#o #onosac*rido n ",uBas "ro"orcions n !as "!antas+ "ro constituy un ')&>( d !a san%r d !os ani#a!s+ n !a ,u r"rsnta !a #ayor "art d nr%:a "ara !as c1!u!as d! or%anis#o) ?nidads d D0%!ucosa+ n cadnas con n!acs 7>E F9+ constituyn !a c!u!osa+ ! carbohidrato #*s abundant n ! #undo -%ta! co#o co#"onnt structura! d !as "ards c!u!ars) Ta#bi1n unidads d D0%!ucosa+ n cadnas unidas "or n!acs G 7>E F9+ constituyn !os a!#idonsA a! #is#o ti#"o ,u unidads d D0%!ucosa co#binadas con otros a<;cars st*n "rsnts n #uchos otros "o!isac*ridos) Otros a<;cars co#;n#nt ncontrados n "o!isac*ridos son+ d !os ,u "osn = *to#os d carbono 7h6osas9+ D0y L0%a!actosa y D0#anosa+ y d !os ,u "osn / *to#os d carbono 7"ntosas9+ D06i!osa y L0arabinosa) Otras dos "ntosas+ D0ribosa y 80 dso6i0D0ribosa+ st*n "rsnts n ",uBas cantidads co#o co#"onnts d *cidos nuc!icos) Disac*ridos co#uns n a!i#ntos son: sacarosa 7caBa d a<;car y r#o!acha9+ #a!tosa 7Darabs d a!#id$n9 y !actosa 7!ch9) Los disac*ridos+ a! i%ua! ,u !os "o!isac*ridos+ no son ca"acs d atra-sar !a "ard intstina!+ y no son a"ro-chab!s "or tanto co#o 5unt d nr%:a a no sr ,u san "r-ia#nt hidro!i<ados a #onosac*ridos+ !os cua!s "asan r*"ida#nt d! tracto intstina! a! torrnt san%u:no) Los o!i%o0 y "o!isac*ridos no hidro!i<ados "asan a !o !ar%o d! intstino d!%ado hasta ! intstino %ruso+ dond Drcn un 5cto !ubricant bn5icioso 75ibra9) Los o!i%osac*ridos "udn sr atacados "or !a #icro5!ora intstina! "ara dar "roductos #tab$!icos ta!s co#o *cido ac1tico y !*ctico) Cuando 1stos s "roducn n cantidads su5icints tinn un 5cto !a6ant y "udn causar inc!uso diarra) Con #nos 5rcuncia+ !os "roductos "udn sr %ass ,u dan !u%ar a !a 5!atu!ncia) Hst ;!ti#o "ud rsu!tar d !a in%sti$n d cirtos di0+ tri0+ y ttrasac*ridos+ ta!s co#o ! trtrasac*rido sta,uiosa+ "rsnt n !a #ayor "art d !as !%u#brs) O!i%osac*ridos #ayors s ncuntran ta#bi1n n !a natura!<a+ co#o s ! caso d !a -rbascosa+ "rsnt n !as ra:cs d una s"ci d %ordo!obo+ Verbascum thapsus. Est "ntasac*rido no rductor "os !a structura O0G0D0%a!acto"iranosi!07>E=90O0G0D0 %a!acto"iranosi!07>E=90 O0G0D0 %a!acto"iranosi!07>E=90O0 G0 D0 %!uco"iranosi!07>E890I0 D05ructo5uran$sido) Si bin co#o "o!isac*rido s inc!uyn a,u!!os "o!:#ros ,u continn #*s d >' rsto s d a<;car+ no 6istn #uchos con #nos d >'' rstos+ y !a #ayor:a continn ntr >'' y -arios #i!s d !!os) A!%unos "o!isac*ridos st*n 5or#ados so!a#nt "or un ti"o d #onosac*rido+ y a 1stos s ! conoc co#o 2ho#o"o!isac*ridos4 o+ #*s t1cnica#nt 2ho#o%!icanos4) J!icosa s un t1r#ino %nra! "ara dsi%nar cua!,uir #onosac*rido+ y !a tr#inaci$n 2ano4 dnota un "o!isac*rido) ED#"!o d ho#o%!icanos son !a c!u!osa y ! a!#id$n) C!u!osa no "osn sta tr#inaci$n si#"!#nt "or,u 5uron no#brados ants d ,u s instituyra sta no#nc!atura sist#*tica) A#bos son "o!:#ros d D0%!ucosa 7unidads d D0%!uco"iranosi!9 y "udn sr dno#inados d #odo #*s s"c:5ico ho#o%!ucanos) E! 6i!no s un "o!isac*rido co#;n n !as "ards c!u!ars d !os -%ta!s co#"ustos d D06i!osa 7unidads d D06i!o"iranosi!9) En ocasions+ dos ti"os di5rnts d a<;cars s unn "ara 5or#ar dihtro%!icano+ o bin trs a<;cars "ara 5or#ar trihtro%!icano+ y as: sis ti"os di5rntsA no s conoc toda-:a ni un so!o "o!isac*rido ,u contn%a #*s d sis o sit a<;cars di5rnts) A!%unos "o!isac*ridos son cadnas !ina!s #intras ,u otros "osn una structura ra#i5icadaA d !!os+ unos tinn ra#as d un so!o #onosac*rido a !o !ar%o d una cadna "rinci"a!+ y otros "osn ra#as sobr otras ra#as a !a #anra d un arbusto) Todas stas structuras "udn sr ho#o%!icanos+ con un so!o ti"o d a<;car+ o bin htro%!icanos d distintos ti"os) Cuando #*s d dos #onosac*ridos di5rnts st*n "rsnts n un htro%!icano+ !a structura s nor#a!#nt d ti"o arbusti-o) LOS CARBOHIDRATOS EN LOS ALIMENTOS Los carbohidratos constituyn !as trs cuartas "arts d! "so sco d todas !as "!antas trrstrs y #arinas+ y st*n "rsnts n todos !os %ranos+ -rduras+ horta!i<as+ 5rutas y otras "arts d "!antas consu#idas "or ! ho#br) Kor otra "art+ dsd hac #ucho ti#"o s han ido s!ccionando "ara ! consu#o a,u!!as "!antas ,u continn #ayor cantidad d carbohidratos #tabo!i<ab!s) Kusto ,u !a #ayor "art d stos carbohidratos uti!i<ados "or ! ho#br son ! a!#id$n y !a sacarosa+ !as "!antas ,u !os continn n #ayor "ro"orci$n son ntoncs !as #*s "roducidas y consu#idas) Es "rciso rcordar+ sin #bar%o+ ,u !os "o!isac*ridos no di%stib!s 75ibra9+ "rinci"a!#nt d "ards c!u!ars -%ta!s+ s in%irn ncsaria#nt a! consu#ir "!antas+ y ta#bi1n ,u stos "o!isac*ridos son bn5iciosos "ara una acti-idad intstina! sana) Kusto ,u !a sacarosa st* "rsnta s$!o n ",uB:si#as cantidads n !a #ayor "art d !os a!i#ntos -%ta!s+ cuando s consu#n stos a!i#ntos natura!s s #inoritaria !a in%sti$n d 1s a<;car) La #ayor "art d !a sacarosa d !a dita no "rocd "us d -%ta!s nati-os sino d! consu#o d a!i#ntos #odi5icados ,u continn tras habr sido ais!ada d !a r#o!acha o d !a caBa d a<;car) La cantidad d sacarosa ,u ntra n !a co#"osici$n d 1stos a!i#ntos s #ayor d !o ,u %nra!#nt s cr) Las 5rutas y !as horta!i<as continn so!o ",uBas cantidads d sacarosa+ D05ructosa y D0%!ucosa) Los cra!s continn #uy ",uBas cantidads d a<;cars+ dado ,u !a #ayor "art d! a<;car trans"ortado a !a s#i!!a s con-rtido n a!#id$n) As:+ ! %rano d #a:< contin ')80')/( D0%!ucosa+ ')>0')F( D05ructosa y >)8( sacarosaA ! %rano d tri%o+ "or su "art+ L')>(+')>( y a!rddor d >( d sos #is#os a<;cars+ rs"cti-a#nt) E! #a:< du!c "os sta "or,u s coschado ants d ,u toda !a sacarosa haya sido con-rtida n a!#id$n) A !o !ar%o d! crci#into+ !a "!anta d #a:<+ co#o otros cra!s+ con-irt una %ran "art d su nr%:a 5oto%nrada n !as hoDas n sacarosa+ ,u constituy ! a<;car d trans"ort nor#a! n !as "!antas) ?na "art #ayoritaria d !a sacarosa %nrada+ s trans"ortada a !as s#i!!as+ dond s trans5or#ada n a!#id$n) Est a!#id$n s !a rsr-a a!i#nticia ,u uti!i<a ! #bri$n d !a "!anta hasta ,u "uda %r#inar y co#n<ar !a 5otos:ntsis d sus "ro"ios carbohidratos) E! #a:< du!c "rsnta "us %ran abundancia d sacarosa ,u sta dstinada a sr con-rtida n a!#id$n) Si !a #a<orca in#adura d #a:< s coschada in#diata#nt sca!dada o con%!ada "ara inacti-ar ! sist#a n<i#*tico ,u con-rtir:a !a sacarosa n a!#id$n+ sa sacarosa ,uda n !as s#i!!as+ dando !u%ar as: a un a!i#nto d!icioso "ara !os hu#anos) Si+ "or ! contrario+ ! #a:< du!c s coschado cuando st* ya #aduro o si no s inacti-ado ! sist#a n<i#*tico+ y s dDa transcurrir ! ti#"o dsd !a coscha hasta ! consu#o+ !a #ayor "art d !a sacarosa s habr* con-rtido n a!#id$n+ y co#o conscuncia+ ! #a:< habr* "rdido su du!<or y ! %rano d-nido 5ir# y duro) Las 5rutas #aduras son du!cs+ con ! obDto d atrar a !os "*Daros y otros ani#a!s ,u ayudan as: a !a a!i#ntaci$n d !as s#i!!as) Las 5rutas ,u s co#rcia!i<an n ! #rcado han sido coschadas ants d su "!na #adur<+ d #odo ,u "udan sr trans"ortadas #intras "osn una consistncia 5ir# y ants d ,u ! dtrioro #icrobiano sa si%ni5icati-o) Los "rocsos n<i#*ticos asociados a !a #aduraci$n conducn a un incr#nto d !a b!ancura y d! contnido d a<;cars) Durant ! a!#acna#into y distribuci$n d !as 5rutas co#rcia!s %nra!#nt #aduran y s -u!-n du!cs+ dbido a !a 5or#aci$n d sacarosa y otros a<;cars a "artir d! a!#id$n d rsr-a) E! 5n$#no d !a #aduraci$n s un #canis#o contrario a !a trans5or#aci$n d a<;car n a!#id$n ,u ocurr n %ranos+ tub1rcu!os y ra:cs) E! a!#id$n s ! carbohidrato #*s co#;n usado "or !a s "!antas co#o rsr-a nr%1tica+ "rsnt inc!uso n !a #adra d !os *rbo!s+ "ro a!#acnado nor#a!#nt n !as s#i!!as+ ra:cs y tub1rcu!os) Est #odo d a!#acnar nr%:a n 5or#a d a!#id$n -o!ucion$ natura!#nt+ "osib!#nt dbido a su co#"acidad+ o ,u s dsca con 5aci!idad cuando !a hu#dad r!ati-a s baDa+ o ,u s rb!andc cuando -u!- a to#ar ! a%ua "rdida+ ya ,u "ud sr r*"ida#nt ds"o!i#ri<ado a %!ucosa "ara obtnr nr%:a) A causa ntoncs d !a o#ni"rsncia d a!#id$n n ! #undo -%ta!+ ! ho#br y #uchos ani#a!s dsarro!!an !os sist#as n<i#*ticos ncsarios "ara uti!i<ar!o co#o 5unt d nr%:a) ?n carbohidrato d rsr-a n s#i!!as ,u !os hu#anos no "od#os #tabo!i<ar s ! %a!acto#anano d "!antas !%u#inosas ta!s co#o %uar+ a!5a!5a y a!%arrobo) Est dihtro%!icano+ "s a no sr #tabo!i<ado tin un %ran uso n !os a!i#ntos co#o aditi-o n h!ados+ sa!sas+ "ostrs y #uchos otros) Los "roductos d ori%n ani#a! continn #nos carbohidratos #tabo!i<ab!s ,u otros a!i#ntos) E! %!uc$%no d #;scu!o h:%ado+ %!ucano d una structura si#i!ar a !a d !a a#i!o"ctina d! a!#id$n+ s #tabo!i<ab! d! #is#o #odo ,u 1st) La !actosa "rsnt n !a !ch F)&( n !a -aca y =).( n !a hu#ana constituy a"ro6i#ada#nt ! /( d! suro !*cto !:,uido co#rcia!) E! a<;car s crista!i<ado co#rcia!#nt a "artir d s suro "roduci1ndos anua!#nt unos M'' #i!!ons d !ibras) CONCLUSIN Los carbohidratos+ tanto !os #*s si#"!s co#o !os #*s co#"!Dos "osn una %ran i#"ortancia+ no s$!o co#o co#"onnts d !a dita bin san di%rib!s o no+ sino ta#bi1n "or ! "a"! ,u ds#"Ban n !a 5or#u!aci$n y "rocsado d %ran cantidad d a!i#ntos) Los carbohidratos+ s"cia!#nt a!#id$n y sacarosa+ "ro-n !a #ayor "art d! a"ort ca!$rico d casi toda !a "ob!aci$n #undia!A st hcho no "arc ,u -aya #odi5icars+ si bin ! consu#o d #*s carbohidratos co#"!Dos a 6"nsas d !a sacarosa ha sido rco#ndado n !as #*s rcints %u:as dit1ticas) E! a!#id$n y #uchos otros carbohidratos son i#"ortant:si#os contribuynts d !as "ro"idads snsoria!s d !os a!i#ntos) EDrcn intnsos 5ctos sobr !a consistncia+ t6tura y "a!atabi!idad+ a tra-1s d su ca"acidad "ara #odi5icar y #Dorar !a -iscosidad+ !as "ro"idads co!i%ati-as+ !a crista!i<aci$n d! hi!o+ !a %!i5icaci$n y !a stabi!idad d !as dis"rsions) Ta#bi1n in5!uyn n ! co!or+ sabor y aro#a+ "usto ,u son ca"acs d su5rir raccions d "arda#into con !a consi%uint 5or#aci$n d co#"ustos con co!or y aro#a+ "or su intr:nsca ca"acidad d du!coraci$n y "or su ca"acidad d in5!unciar !a rtnci$n y !ibraci$n d aro#as) DETERMINACIN DE CARBOHIDRATOS: La dtr#inaci$n d carbohidratos s d i#"ortancia "ara conocr ! -a!or nutriti-o d !os co#"onnts di%rib!s d un a!i#nto o 5orraD) Kudn dtr#inars indircta#nt "or di5rncia ntr >'' y !a su#a d !os "orcntaDs d !os d#*s co#"onnts "rinci"a!s7 hu#dad+ cni<as+ 5ibra+ "rot:nas y !:"idos9) Kro sto nunca s 6acto+ "or !o ,u sta di5rncia su! !!a#ars 26tracti-os no nitro%nados4+ "us inc!uyn otros co#"onnts co#o taninos + "i%#ntos+ "ctinas) DETERMINACIN DE MONO Y OLIGOSACRIDOS (GLCOSA! GALACTOSA! "RCTOSA! ETC.# La #ayor:a d !as sustancias dno#inadas a<;cars son #o#o y o!i%osac*ridos) E6ist una %ran -aridad d #1todos "ara su dtr#inaci$n+ ,u s basan n distintos "rinci"ios) La snsibi!idad d cada #1todo d"nd+ ntr otras cosas+ d !a co#"osici$n d !a #ustra y d su #atri< y s #uy -ariab!) C!asi5ic*ndo!os d !a si%uint #anra: a #1todo cro#ato%r*5ico b #1todo "o!ari#1trico c #1todo ,u:#ico d #1todo n<i#*tico a)0 Mtodo Cromatogrfico De A!care" Red#ctore" $ Sacaro"a% E! #1todo cro#ato%r*5ico s+ n "ri#r !u%ar+ un #1todo s"arati-o "or !!o tndr* a"!icaci$n s"cia!#nt n ! caso d #<c!as d -arios a<;cars) En una s%unda instancia s ra!i<ar* !a idnti5icaci$n d !as sustancias s"aradas) Ants d "rocdr a su dtr#inaci$n cuantitati-a "ud sr i#"ortant conocr !a natura!<a d !os a<;cars "rsnts) Kara st obDto s "r"ara una cro#ato"!aca d ')N ## d s"sor a "artir d una sus"nsi$n ho#o%1na d N' % d Si!ica%! J y =' #! d so!uci$n d actato d sodio ')'8 N) S a"!ican >0/ O! d #ustra+ n 5or#a "untada+ d #odo ,u cada #ancha no tn%a #*s d ')8/ #% d a<;cars rductorsA n Du%os d 5ruta+ tc) Con-in di!uir!os a! >')>/(A -inos #uy tBidos s dco!oran con carb$n) E! !:,uido d arrastr con r-!ador s co#"on d actato d ti!o+ iso"ro"ano! y a%ua 7=/PN'P/9+ ,u s adicionan ants d! uso d ')N( d *cido 80tiobarbit;rico y /( d *cido tric!oroac1tico) S cro#ato%ra5:a n at#$s5ra sobrsaturada hasta una a!tura d >= c# y s sca !u%o !a "a!ca n stu5a con air circu!ant a >'/QC "or >/ #in) S rcorrn si#u!t*na#nt so!ucions d co#"araci$n d #<c!a d > #! d so!uci$n d sacarosa a! ')/( con: >+ 8+ N+ F y / #! d so!uci$n d %!ucosa y d 5ructosa a! /( co#"!tando cada -< >' #! con a%ua) La sacarosa "rsnta una #ancha a#ari!!o anaranDada y !a %!ucosa y 5ructosa dan #*s arriba #anchas anaranDado roDi<as+ a R5 ,ui-a!nts a !as d so!ucions d co#"araci$n) Kara 6trar !os a<;cars d! cacao o choco!at n "o!-o+ s ca!intan "ri#ro / % con >/ #! d a%ua a /'0='QC "or >' #inutos+ baDo a%itaci$n) Ds"u1s d cntri5u%ar+ s r5ri%ra "ara so!idi5icar !a %rasa y s 5i!tra "or 5i!tro ndurcido) A! a"!icar una cro#ato%ra5:a dscndnt sobr "a"!+ "ud usars co#o !:,uido d arrastr !a #<c!a d actato d ti!o+ *cido ac1tico y a%ua 7=PNP89 y r-!ars con so!uci$n rcint d "0 anisidina a! >)8N( y d *cido 5t*!ico a! >)==( n actonaA dando !os a<;cars rductors #anchas "ardas+) Ds"u1s d scar a >'/QC) Kara r-!ar 5ructosa s rco#inda+ ta#bi1n+ una so!uci$n ct$nica rcint d antrona a! ')F(+ adicionada d .#! d *cido 5os5$rico a! &/(+ dando #anchas a#ari!!o "aradas) b)0 Mtodo &o'arimtrico Los #1todos "o!ari#1tricos tinn !a -ntaDa d ,u son snci!!os+ r*"idos y no dstructi-os+ s dcir+ no a!tran !a #ustra+ ,u "or !o tanto "odr* ruti!i<ars) No obstant+ "ara !a dtr#inaci$n "o!ari#1trica d a<;cars dbn tnrs n cunta !as si%uints considracions: > Ad#*s d! a<;car a dtr#inar no "odr* star "rsnt nin%;n otro) Esta condici$n+ "or !o %nra!+ no si#"r s cu#"! n !os a!i#ntos) En ! caso d !a dtr#inaci$n d sacarosa "or #dida ants y ds"u1s d !a in-rsi$n s co#"rnsa !a "rsncia d otros a<;cars d #anra ,u 1stos no a"ar<can) 8 La diso!ucions a #dir no dbr*n star ni turbias ni 5urt#nt co!oradas) La turbid< y ! co!or s !i#inan con di5rnts c!ari5icants) No todos son i%ua!#nt a"ro"iados) Si c!ari5ica con diso!ucions d Carr<+ s "roducir*n "1rdidas !-adas d a<;car y sr*n #*s adcuados a! actato d "!o#o y ! subactato d "!o#o) Co#o !os -a!ors d !a rotaci$n rsu!ta a!trados "or !a "rsncia d ions #ta!s "sados+ dbn #"!ars n #uy ",uBa cantidad+ y+ si s "osib!+ dbr*n !i#inars "or co#"!to) N Las diso!ucions a #dir dbn sr r!ati-a#nt concntradas) Kara ,u !a "o!ari<aci$n s "uda #dir 6acta#nt+ !as diso!ucions "rob!#a dbn tnr un contnido n a<;car r!ati-a#nt a!to) La "r"araci$n d diso!ucions !o su5icint#nt concntradas s$!o s "udn ra!i<ar n caso d a!i#ntos n !os ,u ! a<;car sa un co#"onnt i#"ortant 7ED) !os a!i#ntos ricos n sacarosa+ ta!s co#o "roductos a<ucarados+ siro"s+ con5ituras9 La "rinci"a! a"!icaci$n d !a "o!ari#tr:a n ! an*!isis d a<;cars s !a dtr#inaci$n cuantitati-a d sacarosa+ ta#bi1n d a<;car in-rtido y d %!ucosa) Ants d ra!i<ar !a "o!ari#tr:a db co#"robars idnti5icars+ d"ndindo d! caso+ ,u1 a<;car st* "rsnt n !a #ustra) Ad#*s+ !a "o!ari#tr:a tin una %ran i#"ortancia n !a dtr#inaci$n a!#id$n) Determinacin polarimtrica de sacarosa y glucosa Aplicaciones : Kroductos a<ucarados+ diso!ucions a<ucaradas A!i#ntos a<ucarados 7s"cia!#nt !os ,u contn%an sacarosa9 La "o!ari#tr:a s un #1todo "ara !a co#"robaci$n d !a "ur<a y "ara !a dtr#inaci$n cuantitati-a d !:,uidos y diso!ucions d sustancias $"tica#nt acti-as) S basa n ,u st ti"o d !:,uidos y diso!ucions hacn %irar ! "!ano d un ha< d !u< "o!ari<ada un dtr#inado *n%u!o 7 *n%u!o d rotaci$n G 9 d"ndindo d su concntraci$n) La dtr#inaci$n d !a sacarosa + d! a<;car in-rtido y d #onosac*ridos s basa n ,u !a diso!uci$n d sacarosa tras su in-rsi$n su5r un ca#bio n su *n%u!o d rotaci$n) Si hay otros disac*ridos o "o!isac*ridos+ dbr* tnrs n cunta ,u ta#bi1n contribuyn a dicho ca#bio) Fundamento: E! *n%u!o d rotaci$n d una diso!uci$n d sacarosa+ n su caso #<c!ada con %!ucosa+ s dtr#ina "o!ari#1trica#nt ds"u1s d su in-rsi$n 7hidr$!isis *cida9) La di5rncia ntr a#bas rotacions da ! contnido n sacarosa) E! contnido n %!ucosa s "odr* ca!cu!ar ta#bi1n conocindo !a rotaci$n s"c:5ica d !os a<;cars "rsnts) Procedimiento: A(arato" ) materia'e": Ko!ar:#tro d s#iso#bra Tubo "o!ari#1trico d 8 D# @ 8'' ## BaBo d a%ua tr#ostati<ado Catra< a5orado d >'' #! Ki"ta d ')/ #! Ki"ta d /' #! Fi!tro d "!i%us Reacti*o": Actato d "!o#o 7II9 Kb 7CH N COO9 8 ) NH 8 O n a%ua dsti!ada Determi+aci,+: A Rn%u!o d rotaci$n ants d !a in-rsi$n S "asan unos /' #! d a%ua dsti!ada ca!int) Las diso!ucions co!oradas s dco!oran Sc!ari5ican con ')/ #! d !a diso!uci$n d actato d "!o#o) Ds"u1s d #<c!ar+ s nrasa y s 5i!tra) Los >' #! "ri#ros dbn dschars ) Ds"u1s s rco%n /' #! "ara !a "o!ari#tr:a dbn uti!i<ars s$!o diso!ucions abso!uta#nt !:#"idas) La t#"ratura d !a diso!uci$n s aDusta a P0 8'QC ants d car%ar!a n ! tubo "o!ari#1trico) E! "rocso "o!ari#1trico n su tota!idad db !!-ars a cabo a 8'P0 >QC) En caso contrario+ dbr*n hacrs !as corrccions corrs"ondints) La rotaci$n s ! n %rados d *n%u!o con una "rcisi$n d ')'8) Db ra!i<ars !a #dida d cinco !cturas) Ta!or obtnido:G - Nota)0 ants d crrar ! tubo+ dbn !i#inars todas !as burbuDas d air) E! tubo !!no db insta!ars n ! "o!ar:#tro+ ,u db star n cro) B Rn%u!o d rotaci$n ds"u1s d !a in-rsi$n S !!-a a cabo !a hidr$!isis *cida d /' #! d 5i!trado obtnido n A n un #atra< a5orado d >'' #! ds"u1s d nrasar+ s aDusta !a t#"ratura a 8' PS0 >QC y 5ina!#nt s !!na ! tubo "o!arti#1trico y s ra!i<a !a "o!ari#tr:a) Dbn tnrs n cunta !as indicacions d A) Ta!or obtnido:G n C'c#'o": a Contnido n sacarosa ) E! contnido n sacarosa d !a diso!uci$n d "o!ari<aci$n C s n % S>'' #! s obtin con !a si%uint cuaci$n: Cs U% S >'' #!V @ 7G - W 8G n 9) ')/=. Sindo G - *n%u!o d rotaci$n d !a #ustra ants d !a in-rsi$n n %rados d *n%u!o 7obtnidos n A9 G n Rn%u!o d rotaci$n d!a #ustra ds"u1s d !a in-rsi$n n %rados 7obtnidos n B9 8 5actor d di!uci$n+ "or,u s$!o s uti!i<an /' #! d! 5i!trado "ara ra!i<ar !a in-rsi$n) E! contnido n sacarosa d !a #ustra s ca!cu!a a "artir d C S tnindo n cunta ! "so y+ si s ncsario+ !a di!uci$n) b Contnido n %!ucosa) E! contnido n %!ucosa d !a diso!uci$n d "o!ari<aci$n n C J %S>'' #! s obtin rso!-indo !a si%uint cuaci$n: G T @ UG V J J ) I P C J P UG V S ) I )Cs >'' >'' Sindo: UGV J @ P/8). UGV S @ P==)/ I @ 8d# Cs @ contnido n sacarosa ca!cu!ado n a Y con U% S #!V @ ')MF&) G T 0 >)8=) Cs O-"er*aci,+: C!ari5icaci$n: Ants d ra!i<ar !as #didas "o!ari#1tricas s c!ari5ica sobr todo diso!ucions d sa!s d "!o#o) Kara dtr#inar a<;cars rductors 7"or ED) J!ucosa+ co#o n st caso9 s$!o s uti!i<a !a c!ari5icaci$n con actato d "!o#o nutro+ con !a ,u s obtinn bunos rsu!tados UNV) Si s$!o s -a dtr#inar sacarosa+ s rco#inda rcurrir a !a diso!uci$n b*sica d actato d "!o#o) Cutarrotaci$n: !os "roductos ,u continn %!ucosa u otros a<;cars rductors n 5or#a crista!ina "rsntan #utarotaci$n) Kara obtnr -a!ors constants d rotaci$n+ !as diso!ucions d "o!ari<aci$n s dDan r"osar toda !a noch "ara ,u s ,ui!ibrn) Caso d ,u s -aya a ra!i<ar una #dida in#diata+ s ca!inta a bu!!ici$n !a diso!uci$n nutra d a) 7"H @.)''9 ants d! !!nado+ s #<c!a con unas %otas d a#oniaco 8/(+ s nrasa y s ntoncs cuando s ra!i<a !a "o!ari#tr:a)
c)0 Mtodo" .#/mico": Dtr#inaci$n d a<;cars rductors y tota!s) Kara su -a!oraci$n s"arada n 5rutas+ #i!s+ Du%os+ s "san >8)/% d !a #ustra n un #atra< a5orado d 8/' #!+ s a%r%an >' #! d a%ua+ s a%ita+ s c!ari5ica "or adici$n d 8> #! d racti-o d Carr< I 7actato d <inc crist) > C @ 8>)M(+ adicionado d N #! d *cido ac1tico %!acia!9 y >& #! d racti-o Carr< II 75rrocianuro d "otasio crist) ')8/ C @ >')=X9+ s -u!- a a%itar bin+ s co#"!tan !os 8/' #! y s 5i!tra) En una a!:cuota d st 5i!trado s dtr#inan !os a<;cars dircta#nt rductors 7%!ucosa+ 5ructosa+ #a!tosa9) Kara d tr#inar !os a<;cars tota!s 7!os antriors P sacarosa9 s #id "ara !a hidr$!isis otra a!:cuota d /' #! d! 5i!trado antrior+ s adicionan / #! d HC! conc) Y s a%r%a so!uci$n d NaOH hasta ,u "r#an<ca s$!o una racci$n #uy !-#nt *cida a! tornaso!) Ds"u1s d 5r:o+ s co#"!tan >'' #! Yin%++ a! discutir ! #"!o d d5cants n !a dtr#inaci$n d a<;cars rductors+ rco#inda st 5rrocianuro d <inc 7racti-o d Carr<9A a !a cr#a d a!;#ina+ si s trata d "") Co!oids) Kara s%uir ! #1todo d Cunson y Za!3r+ s co!ocan n dos #atracs c$nicos 8/ #! d Fh!in% I 7NF)=NM % CuSO F "ara /'' #!9+ 8/ #! d Fh!in% II 7>.N % tartrato d sodio y /' % NaOH "ara /'' #!9+ /' #! d a%ua dsti!ada y una a!:cuota 78/0/'#! 9 d! 5i!trado con !os a<;cars rductors) En ! otro #atra< s co!ocan !os #is#os !:,uidos+ 6c"to ! 5i!trado+ ,u s substituy "or una a!:cuota d! hidro!i<ado "ara !os a<;cars tota!s) A#bos #atracs s ca!intan sobr rDi!!a+ d #anra ,u !a bu!!ici$n #"ic a !os F #in) d iniciado ! ca!nta#into A !u%o s contin;a ca!nta#intoA !u%o s contin;a ca!ntando "or 6acta#nt 8 #in) #*s) La so!uci$n ca!int s 5i!tra a tra-1s d un criso! 5i!trant u otro dis"ositi-o d 5i!traci$n a! -ac:o+ sobr -idrio "oroso o a#ianto+ con so!uci$n #odrada+ tarado) S !a-a ! "") con a%ua ca!int+ un "oco d a!coho! y !u%o con 1tr) S sca ! criso! a >'/QC "or N' #in)+ s n5r:a n dscador y s "sa co#o $6ido cu"roso) Kor !ctura d !a tab!a s obtin ! ,ui-a!nt n %!ucosaA #u!ti"!icando "or ')M/ s obtin ! ,ui-a!nt n sacarosa y #u!ti"!icando "or ')M/ s obtin ! ,ui-a!nt n sacarosa y #u!ti"!icando !a %!ucosa "or ')M s obtin ! ,ui-a!nt n a!#id$n) Si dsa a"!icar ! #1todo d Brtrand+ s co!oca un -o!u#n d! 5i!trado ,u contn%a ntr >' y M' #% d %!;cido rductor 7/ #! d! 5i!trado antrior9 n un #atra< c$nico + s a%r%an >' #! d Fh!in% B 7con 8'' % "or #i! d sa! d Si%ntt y >/' % "or #i! d NaOH9 y s hir- 6acta#nt N #in) Ds"u1s d dDar sdi#ntar un instant ! $6ido cu"roso+ s dcanta ! !:,uido sobrnadant 7,u db s%uir a<u! "or 6cso d Fh!in%9 !o #*s r*"ida#nt "osib! hacia un dis"ositi-o d 5i!traci$n a! -ac:o) Ens%uida+ s sus"nd ! $6ido cu"roso n ! #atra< con unos 8' #! d a%ua dsarada "or bu!!ici$n+ s dcanta hacia ! #is#o 5i!tro+ r"itindo ! !a-ado y 5i!traci$n con otros 8' #! d a%ua y s dsca todo ! 5i!trado) Co#o db -itars !o #*s "osib! ! contacto d! $6ido cu"roso con ! O 8 at#os51rico+ a! dcantar tanto ! 6cso d Fh!in% co#o ! a%ua d !a-ado db arrastrars !o #nos "osib! d! $6ido cu"roso+ ,u "r#ancr* n ! #atr*<+ n su #ayor "art+ hasta diso!-r!o con so!uci$n acuosa y ca!int d su!5ato 51rrico 7a! /( con 8'( d H 8 SO F 9) Lu%o+ s hac "asar sta so!uci$n "or ! 5i!tro d A!!ihn y n ! 5i!trado s titu!a !a sa! 5rrosa con Y#nO F NS>' ,ui-a! a =)N= #% d Cu) Ens%uida s uti!i<a !a tab!a d Brtrand "ara stab!cr !a ,ui-a!ncia n %!ucosa) Dtr#inaci$n d %!;cidos rductors "or titu!aci$n yodo#1trica d cobr+ no rducido a Cu 8 O+ s%;n Schoor!) 8/ % d #ustra "u!-ri<ada o ra!!ada s ca!intan hasta su !icuaci$n y s a%r%an baDo a%itaci$n+ F' #! d a%ua a &'QC) S tras!ada con >'' #! d a%ua ca!int a un #atra< a5orado d 8/' #!+ s n5r:a a! chorro d a%ua hasta 8'QC y s c!ari5ica con N)./ #! d actato b*sico d "!o#o 78N' % d actato nutro s disu!- n .'' #! d a%ua hir-int y s a%r%an+ baDo bu!!ici$n+ !nta#nt >8' % d KbO) ?na -< disu!ta !a #ayor "art+ s 5i!tra n ca!int y s co#"!ta > !itro9) A /' #! d 5i!trado c!ari5icado s a%r%an n un #atra< a5orado 8'' #!+ 8 #! d o6a!ato ds odio a! >'( y+ ds"u1s d > #in)+ 8 #! d Na 8 HKO F P >8 H 8 O a! >'() S a%ita+ s co#"!tan !os 8'' #! con a%ua y s 5i!ra+ ds"u1s d a%r%ar un "oco d tirra d in5usirios) Est 5i!trado "ud usars "ara !a dtr#inaci$n yodo#1trica co#o si%u: Si s dtr#inan s$!o a!dosas "ud "rocdrs a una yodo#tr:a n #dio a! ca!ino con ! cua! !a 5ructosa no racciona: 8/ #! d !a so!uci$n 7,u db contnr >' a 8'' #% d %!ucosa o !actosa9 s adicionan s >'' #! d una #<c!a n "arts i%ua!s d Na 8 S 8 O N NS>' n "rsncia d a!#id$n) Est %asto s rsta d a,u! d un nsayo n b!anco) Cada #! d yodo NS>' ,ui-a! a ')M #% d %!ucosa y >& #% d !actosa o #a!tosa) Dtr#inaci$n d %!ucosa n Du%os+ -inos y #i!s 7di!uidos a! >:>'' hasta >:8)/''9) E! Du%o d racti-os Crc3otst J!uc0DH s basa n !a si%uint racci$n: bta0 D0 %!ucosa P NAD E D0%!ucono0!actona P NADH 8 + cata!i<ada "or !a %!ucosa0dhidro%nasaA "or !a adici$n si#u!t*na d #utarotasa s au#nta !a -!ocidad d !a racci$n) A! "asar !a con<i#a: Nicotina#ida0Adnina0Dinuc!otido 7NAD9 a su 5or#a rducida 7NADH 8 9+ "or su absorci$n a !a !u< u!tra-io!ta+ !a cantidad "ro"orciona! d %!ucosa s dtr#ina s"ctrosc$"ica#nt a NF' o N== n#) La %!ucosa0dhhidro%nasa s s"c:5ica#nt a !a %!ucosa+ d #odo ,u no racciona con !a 5ructosa ni !a sacarosa) Si s trata d dtr#inar a!#id$n+ s hidro!i<a "r-ia#nt con *cido "rc!$rico 7"or ED) En "roductos c*rnos9 d)0 Mtodo" E+imtico" !os #1todos n<i#*ticos tinn una %ran i#"ortancia dntro d! #arco d! an*!isis d a<;cars) En #uchos casos su"ran a !os #1todos ,u:#icos y "o!ari#1tricos) E! #oti-o s ,u !os #1todos n<i#*ticos son #uy s"c:5icos y "or !!o "r#itn obtnr -a!ors -rdadros) Ya ,u !os #1todos n<i#*ticos s !!-an a cabo r*"ida#nt y no r,uirn una "r"araci$n d !a #ustra !ar%a y ad#*s dbido a su s"ci5icidad "r#itn idnti5icar !os a<;cars indi-idua!s d una #<c!a+ s han abirto ca#ino ntr !os #1todos o5icia!s d an*!isis) Dtr#inaci$n n<i#*tica d !a %!ucosa+ 5ructosa y #anosa A"!icacions A!i#ntos !:,uidos+ bbidas concntradas Dri-ados d 5rutas y -rduras A!i#ntos s$!idos+ "roductos d "anadr:a Funda#nto La %!ucosa+ !a 5ructosa y !a #anosa s trans5or#an rs"cti-a#nt n %!ucosa0=0 5os5ato 7J0=0K9+ 5ructosa = 5os5ato 7F0=0K9 y #anosa = 5os5ato 7C0=0K9 %racias a! adnosin0 /0tri5os5ato 7ATK9+ ,u s trans5or#ar* n adnosin0/0 di5os5ato 7ADK9+ n "rsncia d !a n<i#a h6o,uina<a 7HY9) La J0=0K s o6idada s!cti-a#nt a %!uconato0=05os5ato "or ! NADK n racci$n cata!i<ada "or !a %!ucosa0=05os5ato0dshidro%nasa 7JJK0DH9+ a !a -< ,u ! NADKH 5or#ado constituy una #dida d !a cantidad d %!ucosa 6istnt inicia!#nt) Fina!#nt !a F0=0K y !a C0=0K d #anra conscuti-a s trans5or#an "or acci$n d !a 5os5o%!ucosa0iso#rasa 7KCI9 n J0=0K+ ,u s s%uir* trans5or#ando co#o ya s ha indicado) A "artir d !a "ri#ra #dida d !a 6tinci$n a NF' n# s ca!cu!a ! contnido n %!ucosa+ d !a s%unda ! d 5ructosa y d !a trcra ! d #anosa) Krocdi#into A(arato" ) materia'e" Es"ctro5ot$#tro ?T Ki"tas d -idrio o dschab!s d @> c# Ki"tas auto#*ticas d 8' O!+>'' O!+ >'''O! y 8'''O! 7-ariab!9 Es"*tu!a "ara a%itar KH:#tro o "a"! indicador d! "H Reacti*o" : Diso!uci$n ta#"$nA s disu!-n >F)' % d c!orhidrato d tritano!a#ina y ')8/ % d C%SO F ) . H 8 O n un #atra< a5orado d >'' #! con unos &' #! d a%ua bidst+ s aDusta ! "H a .)= con / #! d NaOH 7/ #o! S!9 y s nrasa con a%ua) Diso!uci$n d NADK: diso!-r =' #% d NADK0Na 8 n = #! a%ua bidst) Diso!uci$n d ATK+ diso!-r N'' #% d ATK NAKD0Na 8 H 8 y N'' #% d NaHCO N n = #! d a%ua bidst) Sus"nsi$n d HYSJ=K0DH: sin di!uir 78 #% HYS#!+ > #% J=K0HDS#!9 Sus"nsi$n d KJI: sin di!uir 78 #%S #!9 Sus"nsi$n KCI: sin di!uir 7>' #%S #!9 Dtr#inaci$n a)0 intr-a!o d concntraci$n !a cantidad tota! d %!ucosa+ 5ructosa y #anosa n ! -o!u#n d !a #ustra db sr d N a /' O% 7"ara #didas ra!i<adas a NF' o NNF n#9 o d N a >'' O% 7"ara #didas a N=/ n#9A ! -o!u#n d ')> #! uti!i<ado habitua!#nt corrs"ond a una concntraci$n d ')'N a ')/ 7 o ')>9 % "or !itro d 5!uido "rob!#a) A concntracions #*s !-adas db di!uirs !a #ustra+ y si son #nors dbr* !-ars ! -o!u#n d !a #ustra 7hasta un #*6i#o d 8)' #!9 C*!cu!os E! contnido d %!ucosa J U%S!V d !a #ustra s ca!cu!a co#o si%u: J U%S!V @ N)88 ) >&')>= ) [ > E )F @ ')/&' [ > E)F \ ) > ) ] ) >''' \ ) ] D 5or#a an*!o%a+ "ara ! contnido n 5ructosa F: F U%S!V @ N)8F ) >&')>= ) [ 8 E )F @ ')/&F [ > E)F \ ) > ) ] ) >''' \ ) ] Y "ara ! contnido d #anosa C: C U%S!V @ N)8= ) >&')>= ) [ N E )F @ ')/&. [ > E)F \ ) > ) ] ) >''' \ ) ] En dond: \ @ s ! co5icint d 6tinci$n d! NADKH F @ s ! 5actor d di!uci$n DETERCINACIN EN^ICATICA DE JL?COSA Y SACAROSA A"!icacions) Bbidas) Kroductos c*rnicos+ !*ctos+ dri-ados d 5rutas y -rduras Kroductos d "anadr:a Con5ituras+ #i! Introducci$n La sacarosa+ ! a<;car #*s i#"ortant dsd ! "unto d -ista con$#ico+ s un disac*rido 5or#ado "or !os #onosac*ridos %!ucosa y 5ructosa)0 !a sacarosa s in-irt "or acci$n *cida o n<i#*tico) Funda#nto Kri#ro s dtr#ina n<i#*tica#nt ! contnido n %!ucosa d !a #ustra) Ds"u1s !a sacarosa "rsnt s hidro!i<a con I05ructosidasa 7in-rtasa9 a "H F)= a %!ucosa y 5ructosa y !a %!ucosa as: obtnida s dtr#ina d !a #is#a #anra) E! contnido n sacarosa s obtin "or di5rncia d !as cantidads d %!ucosa ants y ds"u1s d !a in-rsi$n n<i#*tica) Krocdi#into) Racti-os) Diso!uci$n d citrato diso!uci$n d -ta05rutocidaso Diso!uci$n DE ta#"$n Diso!uci$n d NADK Diso!uci$n d ATK Sus"nsi$n d HYSJ=K0DH Dtr#inaci$n) A)0 Intr-a!o d concntraci$n La cantidad tota! d %!ucosa y sacarosa n ! -o!u#n "rob!#a db ncontras ntr / y &' O% 7#didos a NF' o NNFn#9o ntr / y >/'O% 7#didos a>=/n#9)+ n !os d #as casos s uti!i<a un -o!u#n "rob!#a d ')> #! +,u corrs"ond a una concntraci$n d ')'/ a ')&7=>)/%9"or !itro d #ustra 5!uida)0a concntracions #ayors+ !a #ustra db di!uirs corrs"ondint#nt y si son #nors dbr* uti!i<ars un -o!u#n d #ustra #ayor 7hasta un #*6i#o d >)M8 o >).'#!9) B)0 Kr"araci$n d !a #ustra To!u#n d !a #ustra: ] a #! 7"ara concntracions su"riors a ')'/ %S! d !a #ustra "rob!#a 5!uida s uti!i<a a @ ')> #!A "ara concntracions #nors hasta >)M8 o >).' #!9 -o!u#n "rob!#a: T @ N)>F #! Di5rncia d 6tincions [ > E @ UE 8 7C9 J 0 E > 7C9 J V 0UE 8 7B9 J 0 E > 7B9 J VE J!ucosa [ 8 E @ UE 8 7C9 S 0 E > 7C9 S V 0UE 8 7B9 S 0 E > 7B9 S VE J!ucosa tota! [ N E @ [ 8 E 0 [ > EE Sacarosa C*!cu!os E! contnido n %!ucosa J d !a #ustra s ca!cu!a co#o si%u: J U%S!V @ N)>F ) >&')>= ) [ > E )F @ ')/==[ > E)F \ ) > ) ] ) >''' \ ) ] D 5or#a an*!o%a+ "ara !a sacarosa: S U%S!V @ N)>F ) NF8)N ) [ N E )F @ >)'./ [ N E)F \ ) > ) ] ) >''' \ ) ] DETERMINACIN DE &OLISACARIDOS% Dntro d !os "o!isac*ridos s inc!uyn distintos co#"ustos co#o ! a!#id$n+ !as d6trinas+ !os d6tranos+ %!ic$%no+ !a inu!ina +!a c!u!osa+ !as h#ic!u!osas 7"ntosanos+ h6sosanos+9 !as "ctinas+ as: co#o !as sustancias #uci!a%inosas d !as a!%as #arinas y !as %o#as -%ta!s) Aun,u !a co#"osici$n d cada "o!isac*rido s co#"!ta#nt di5rnt tins ! co#;n ! star co#"ustos "or un n;#ro #ayor o #nor d #onosac*ridos) Kor hidr$!isis *cida o n<i#*tica !os "o!isac*ridos s s"aran n sus co#"onnts) Otro "osibi!idad #uy i#"ortant "ara !a dtr#inaci$n cuantitati-a d! a!#id$n s su an*!isis n<i#*tico+ ,u r,uir ta#bi1n una hidr$!isis 7n<i#*tica9 "r-ia) Kara !!o n !a co!cci$n o5icia! d #1todos ana!:ticos + ntr otras + 6istn dirctrics "ara !os biscochos "ara niBos y "roductos !*ctos dstinados a !a a!i#ntaci$n in5anti!) Los "o!isac*ridos s in-sti%an ta#bi1n con #1todos basados n !a "ro"idads d !os n!acs co#o !a racci$n con yodo + !a rotaci$n s"ci5ica+ o !a "rci"itaci$n con !os racti-os adcuados 7co#"robaci$n d d6trinas o "ctinas9) E! an*!isis s #uy co#"!icado y constituy un ca#"o #uy s"cia!i<ado) DETECCIN DE ALCIDN A"!icacions) A!i#ntos n %nra!) Introducci$n
E! a!#id$n s un co#"onnt "rinci"a! d #uchos d !os a!i#ntos #*s i#"ortants) A"arc n 5or#a !i%ada n !as "a"as+ ! arro<+ !os cra!s y n !as !%u#brs o ais!ado co#o harina o %ranu!a n !a s1#o!a) E! a!#id$n s una sustancia ho#o%1na+ sino ,u st* 5or#ada "or dos co#"onnts: a#i!osa y a#i!o"ctina) Funda#nto E! a!#id$n 5or#a con ! yodo co#"ustos d inc!usi$n co!orados caractr:sticos) Cada #o!1cu!a d yodo ,uda atra"ada n una s"ira! d! s,u!to d !a #o!1cu!a) La a#i!osa "roduc un co!or a<u! "uro+ #intras ,u ! d !a a#i!o"ctina s roDo) Krocdi#into) A"aratos y #atria!s Taso d "rci"itado K!aca d %oto+ n caso ncsario Racti-os Diso!uci$n d yodo a"ro6) ')> #o!S! 7"ara sr 6actos: diso!uci$n d yodoS "otasio9 Dtcci$n S aBad %ota a %ota !a diso!uci$n d yodo sobr !a #ustra !:,uida acuosa o a! 6tracto acuoso+ obtnido -ntua!#nt "or bu!!ici$n) En ! caso d #ustras s$!idas s "osib! !!-ar a cabo !a racci$n #diant ! "rocso "or %oto) C*!cu!os La a"arici$n d un co!or a<u! -io!ta oscuro indica !a "rsncia d a!#id$n) La racci$n s #uy snsib!: dtcta ')''8 #% d a!#id$n S#! d diso!uci$n) A! ca!ntar ! co!or dsa"arc+ aun,u a! n5riar s r-irt !a racci$n) Las cantidads d tano! ntor"cn !a racci$n) Determ$%ac$&% p'(ar$m)tr$ca *e( c'%te%$*' e% a(m$*&% Ap($cac$'%es 0 r"ostr:a 5ina 0 "an y "roductos d ",uBo ta#aBo dri-ados d #asa d "an 0 harinas d cra!s+ "roductos d #o!inda) I%tr'*ucc$&% E! a!#id$n "os una rotaci$n s"c:5ica 6traordinaria#nt !-ada+ ,u s ncuntra n torno a UGV " @ P>M'_ d"ndindo d! ti"o d trata#into y d !a co#"osici$n d! diso!-nt) Kor !!o "udn #dirs con "rcisi$n cantidads r!ati-a#nt ",uBas d a!#id$n) Las h#ic!u!osas+ ,u "udn star "rsnts n diso!uci$n Dunto con ! a!#id$n+ tinn una acti-idad $"tica si%ni5icati-a#nt ",uBas d a!#id$n) Las h#ic!u!osas+ ,u "udn star "rsnts n diso!uci$n Dunto con ! a!#id$n+ tinn una acti-idad $"tica si%ni5icati-a#nt #nor+ n tanto ,u !as d6trinas+ cuya rotaci$n s"c:5ica s !-ada+ "udn s"arars) Kara !os #1todos "o!ari#1tricos db diso!-rs ! a!#id$n n *cido c!orh:drico) Co#o as: s "roduc una cirta d%radaci$n ,u "odr:a #odi5icar !a rotaci$n s"c:5ica+ ! #antni#into d st "ar*#tro s una condici$n i#"rscindib! "ara cons%uir rsu!tados r"roducib!s con st ti"o d #1todos #":ricos) Db tnrs n cunta ,u !a dtr#inaci$n "o!ari#1trica d a!#id$n no s "ud uti!i<ar n a,u!!os a!i#ntos ,u "osan a!#idons #odi5icados+ co#o "or D#"!o a!#id$n %!atini<ado 7 n ! "o!-o d !os "udins d "r"araci$n n 5r:o9) "u%*ame%t' En ! nsayo "rinci"a! s disu!- ! a!#id$n d !a #ustra n *cido c!orh:drico di!uido ca!int+ dtr#in*ndos ! *n%u!o d rotaci$n tras ds"rotini<ar) En ! b!anco s dtr#ina ! *n%u!o d rotaci$n d !as sustancias rstants 7"or ED) Cono y o!i%osac*ridos9 tras !i#inar ! a!#id$n so!ub! inso!ub! y !as "rot:nas con taninos Ssubactato d "!o#o y s sustrar* d! -a!or obtnido n ! nsayo "rinci"a!) Est s ! #1todo d Baun#ann0Jross5!d standari<ado s%;n Hadr$n0Do-!aar) +r'ce*$m$e%t' A(arato" ) materia'e" 0 "o!ar:#tro: a"arato d s#iso#bra 0 tubo "o!ari#1trico d 8 D# @8'' ## 0 a%itador #a%n1tico 0 cron$#tro 0 "i"tas nrasadas d > #!+ 8 #!+ / #!+ & #!+ >' #!+ 8/ #! y /' #! 0 "robtas d N' #! y >'' #! 0 #atracs d >'' #! 0 #atracs d >'' #! 0 5i!tro d "!i%us Reacti*o" 0(%a%1 0 *cido c!orh:drico a! 8/( o > #o!S! 0 t*nino "uro 0 su!5ato s$dico Na 8 SO F ) IOH 8 O 0 *cido c!orh:drico >+>8F(@'+N> #o!S! 7s co#"!tan F' #! d *cido c!orh:drico 8/( con a%ua dst) hasta >''' #! !a concntraci$n db sr 6acta y db co#"robars ana!:tica#nt) En su !u%ar "udn uti!i<ars N>' #! d *cido c!orh:drico 7> #o!S!9 ,u s co#"!tar*n con a%ua hasta >''' #!9 0 subactato d "!o#o 0 diso!uci$n d taninos a! >'( 0 diso!uci$n d Carr< I y II 0 diso!uci$n saturada d su!5ato s$dico n a%ua dst) 7a 8'_C unos F/ % d Na 8 SO F ) IOH 8 OS>''#!9 Determi+aci,+ a9 Ensayo "rinci"a! S "san 8/'' % d !a #ustra 5ina#nt #o!idos n un #atra< d >'' #! con una "rcisi$n d ` > #% y s #<c!an con 8/+' #! d *cido c!orh:drico >+>8F( in-irtindo ! #atra< d #anra ,u s sus"nda tota!#nt sin ,u ,udn %ru#os) A continuaci$n s aBadn otros 8/+' #! d *cido c!orh:drico >+>8F(+ s co!oca ! #atra< n un baBo d a%ua n "!na bu!!ici$n y s ca!inta durant >/ #in) in-irtindo ! #atra<) Durant N0/ "ri#ros #inutos db in-rtirs constant#nt "ara -itar !a 5or#aci$n d %ru#os+ "ro ds"u1s s su5icint con hacr!o d -< n cuando) A! tr#inar !os >/ #in) 7ar!oDb:a!a bu!!ici$n no db intrru#"irsb9 ! #atra< s saca d! baBo+ s aBadn N' #! 7"robta9 d a%ua dst) 5r:a y s n5r:a r*"ida#nt ! #atra< hasta t#"ratura a#bint co!oc*ndo!o baDo ! a%ua corrint) S aBadn sucsi-a#nt+ a%itando+ -o!;#ns d > #! d !as diso!ucions d Carr< I y II+ s nrasa con a%ua dst)+ s -u!- a a%itar y s 5i!tra "or un 5i!tro d "!i%us) 7E! 5i!trado !i#"io s ,ui!ibra a 8' ` >_C y s "asa a! "o!ar:#tro9) Hst db nDua%ars "r-ia#nt dos -cs con ! 5i!trado) La rotaci$n s"c:5ica s ! con una "rcisi$n d ` '+'8 %rados) Db ca!cu!ars ! "ro#dio ntr cinco !cturas di5rnts) Ta!or obtnido: G " b9 Ensayo n b!anco n ! caso d "ast!s o d "roductos con a!#id$n %!atini<ado o so!ub!) S "san /''' % ` > #% d #ustra 5ina#nt #o!ida n una #atra< d >'' #+ s #<c!an con .'0./ #! d a%ua dst) y s 6tran a%itando 5rcunt#nt a #ano o con ! a%itador #a%n1tico durant > h a"ro6) Ds"u1s d! !a-ado y d ,uitar !a uBa #a%n1tica n su caso+ s #<c!a !a #ustra con / #! d !a diso!uci$n d taninos y con / #! d subactato d "!o#o) S nrasa a 8'_C con !a diso!uci$n d su!5ato s$dico 7a! 6cso d ions Kb "rci"itan co#o KbSO F b9 y s "asa "or un 5i!tro d "!i%us) Si !a 5i!traci$n s di5:ci!+ s cntr:5u%a+ 5i!tr*ndos ! sobrnadant si toda-:a tu-ira "art:cu!as n sus"nsi$n) E! 5i!trado no db contnr a!#id$n 7aco#"robar con !a racci$n con yodo: co!oraci$n #arr$n roDi<a+ no a<u!b9) Si no 5ura as:+ s r"it !a c!ari5icaci$n con >' #! d !a diso!uci$n d taninos y & #! d !a subactato d "!o#o9) S "i"tan /' #! d 5i!trado !ibr d a!#id$n 7@8/'' % d #ustra9 a un #atra< a5orado d >'' #!+ s #<c!an con 8+' #! d *cido c!orh:drico 78/(9 y s ca!inta a! baBo #ar:a durant >/ #in)+ s n5r:a+ s c!ari5ica con !as diso!ucions d Carrr<+ s 5i!tra y s ra!i<a !a "o!ari#tr:a) Ta!or obtnido: G B c9 Ensayo n b!anco n ! caso d harinas o #atria!s sin a!#id$n so!ub! o %!atini<ado 7"rocdi#into si#"!i5icado9 S "san /''' % ` > #% d !a #ustra 5ina#nt #o!ida n un #atra< d >''' #!+ s #<c!an con .'0./ #! d a%ua dst)+ s a%itan con ! a%itador #a%n1tico unos >/ #in) o in-irtindo 5rcunt#nt ! #atra<) S ,uita !a uBa #a%n1tica y s aBadn sndos -o!;#ns d 8 #! d !as diso!ucions d Carr< I y II+ s nrasa con a%ua dst) a 8'_C y s "asa "or un 5i!tro d "!i%us sco) Ad*erte+cia: E! 5i!trado db star !ibr d a!#id$n+ o "or,u n caso contrario ! -a!or d! b!anco sr* d#asiado !-ado+ con !o ,u s obtndr* un contnido n a!#id$n d#asiado baDo) En caso ncsario "ud c!ari5icars con tanino Ssubactato d "!o#o) C*!cu!os E! "orcntaD d a!#id$n A d !a #ustra s ca!cu!a con !a si%uint cuaci$n 7ta#bi1n "ud r5rirs a "so sco9: A U(V@ 87G " 0 G B 9 ) F Sindo G " *n%u!o d rotaci$n d !a diso!uci$n "rob!#a n ! nsayo "rinci"a! n %rados d *n%u!o 7obtnido s%;n a99 G B *n%u!o d rotaci$n d !a diso!uci$n "rob!#a n ! b!anco 7obtnido s%;n b9 o c99 F 5actor "ro"io d cada ti"o d a!#id$n+ obtnido a "artir d !a rotaci$n s"c:5ica d s a!#id$n 0 "ro#dio "ara !a #<c!a d di5rnts ti"os d a!#id$n d cra!s s%;n UNV F @ /+FFF s%;n UFV F @ /+=F 0 a!#id$n d tri%o F @ /+=N/ 0 a!#id$n d #a:< F @ /+=N/ 0 a!#id$n d arro< F @ /+==> 0 a!#id$n d "atata F @ /+/'> 0 a!#id$n d !%u#inosas 7%uisants SDud:as9 F @ /+== O-"er*aci,+ Los c*!cu!os s$!o sir-n "ara !os "sos y di!ucions indicados) En caso contrario dbr*n ra!i<ars !as corrccions corrs"ondints) Determ$%ac$&% ,'t'm)tr$ca *e( c'%te%$*' e% pect$%a A"!icacions 0 a!i#ntos n %nra! Introducci$n Kusto ,u aco#"aBan si#"r a !a c!u!osa+ !as "ctinas ds#"Ban un "a"! sncia! n ! tDido d sost1n d !a "!anta) Contro!an ! ,ui!ibrio h:drico d !a "!anta "or,u son hi%rosc$"icas y 5or#an una ca"a ind"ndint dntro d !a "ard c!u!ar 7!a !*#ina #dia9) La "ctina nati-a "rsnt n !a "!anta+ dno#inada ta#bi1n "roto"ctina+ st* 5or#ada "or *cidos "o!i%a!actur$nicos+ cuyos %ru"os carbo6:!icos st*n stri5icados n "art con #tano!) La %ran !on%itud d !a cadna y a !a -< su ",uBo %rosor hacn ,u s ori%in una rd tridi#nsiona! ,u s #antin unida "or 5ur<as d Tan dr) Zaa!s r!ati-a#nt 5urts y "or n!acs i$nicos 7Ca 8P 9) La tcno!o%:a d !os a!i#ntos s a"ro-chan d stas caractr:sticas y !as "ctinas s uti!i<an co#o %!i5icants+ #u!sionants y stabi!i<ants) Las "ctinas s di-idn n #uy y "oco stri5icadas+ con "ro"idads #uy distintas: n diso!uci$n !as "ri#ras su5rn n "ri#r !u%ar una 5urt hidrataci$n+ a! aBadir sacarosa tin !u%ar una dshidrataci$n+ s dcir+ s "roduc una 5urt uni$n y orintaci$n d! a%ua 2!ibr4 d !a diso!uci$n y d !as ca"as hidratadas d !a "ctina con !a #o!1cu!a d a<;car+ "ro-ocando 5ina!#nt !a adici$n d *cido !a disociaci$n !ctro!:tica d !a "ctina+ "rocso n ! ,u s 5or#an 5urts "unts d hidr$%no) Kor ! contrario+ n ! caso d !as "ctinas "oco stri5icadas ! a<;car no s ncsario "ara !a 5or#aci$n d un %!: !a 5or#aci$n d !a structura tridi#nsiona! d! %! tin !u%ar a tra-1s d n!acs d -a!ncia d cations "o!i-a!nts) Funda#nto Las "ctinas s a:s!an d! a!i#nto "or "rci"itaci$n con #tano!+ 6tray1ndos ! rsiduo rstant con hidr$6ido s$dico di!uido) Tras !a adici$n d carba<o! y d *cido su!5;rico a! 6tracto+ s 5or#a tras -arias ta"as sucsi-as 7*cido /05or#i!"iro#;cico+ 8+/0di5or#i!5urano9 un "roducto d condnsaci$n roDo0anaranDado ,u s #id 5oto#1trica#nt a /8/ n# 7! #*6i#o d absorci$n a /8/ n# s #antin durant dos horas9) Krocdi#into A(arato" ) Materia'e" 0 s"ctro5ot$#tro 0 cubtas d -idrio 7d @ >c#9 0 cntr:5u%a y -asos d /' #! 0 baBo d a%ua con tr#ostato "ara #antnr !a t#"ratura a &/_C 0 "i"ta auto#*tica d /'' O! 0 "i"tas nrasadas d >#!+ / #!+ = #!+ >' #!+ >/ #!+ 8' #! y /' #! 0 #atracs d >'' #! y >''' #! 0 "robta d 8/ #! 0 tubos d nsayo d unos 8' #! 0 #budo d unos .c# c y 5i!tro d "!i%us 0 -ari!!a d -idrio 0 rascador d %o#a Reacti*o" 0(%a%1 0 carba<o! C >8 H M N sub!i#ado 0 *cido %a!actur$nico #onohidratado C = H >' O . W H 8 O s sca con K 8 O / a 8'_C 0 tano! M=( 7-o!9 7"uri5icado9: s ca!inta >''' #! d tano M=( -o! con F % d "o!-o d cinc y 8 #! d *cido su!5;rico a r5!uDo durant 8/ h+ s dsti!a y s -u!- a dsti!ar a tra-1s d F % d "o!-o d cinc y F % d hidr$6ido "ot*sico 0 tano! =N( -o! s #<c!an >'' #! d a%ua dst) con 8'' #! d tano! dsti!ado M=( 7-o!9 0 diso!uci$n d hidr$6ido s$dico > #o!S! 0 *cido su!5;rico M&( 7d@>+&F97no db dar racci$n d co!or con !a diso!uci$n d carba<o!9 0 diso!uci$n tan$!ica d carba<o! '+>(: 0 s #<c!an '+>% d carba<o! con tano! con M=(7-o!9 dsti!ado n un #atra< d >''#! y s nrasa) La #<c!a > #! d a%ua+'+/ #! d carba<o! y = #! d *cido su!5;rico M&( db sr !:#"ida 0 diso!uci$n #adr7 c @>'' #%S!9 d anh:drido %a!actur$nico 7JA9: s #<c!an >8'+/ #% d *cido %a!actur$nico #onohidratado n un #atra< d >''' #! con '+/ #! d diso!uci$n d hidr$6ido s$dico 7> #o!S!9+ s nrasa con a%ua dst)+ s #<c!a y s dDa r"osar durant !a noch 0 diso!uci$n "atr$n d JA7c @>' a .' O%S!9: s "i"tan >'0.' #! d !a diso!uci$n #adr d anh:drido %a!actur$nico a un #atra< d >'' #! y s nrasa con a%ua Dtr#inaci$n a9 Ais!a#into d !as "ctinas S ca!intan >/ #! d <u#o o F+' % d! a!i#nto contnindo "ctinas n un -aso d cntr:5u%a d /' #! con unos >8 #! d a%ua dst) y >8 #! d tano! M=( 7-o!9 ca!int dsti!ado 7./_CA cuidando a! ca!ntar: a! tano! s in5!a#a 5*ci!#ntb9 hasta un -o!u#n a"ro6i#ado d F' #! y s #antin n un baBo n un baBo d a%ua a &/_C durant >' #in) E! "rci"itado s a%ita ocasiona!#nt con una -ari!!a d -idrio 7nDua%ar!a con tano!9 y 5ina!#nt s co#"!ta ! -o!u#n hasta /' #! con tano!) Ds"u1s d cntri5u%ar 7>/ #in)9 y dcantar+ ! sobrnadant s dscha) b9 E6tracci$n d !as "ctinas tota!s E! "rci"itado obtnido s "asa con ayuda d un rascador d %o#a y d a%ua dst) a un #atra< d >'' #! 7anDua%ar bin ! rascador con a%uab9+ s #<c!an con / #! d diso!uci$n d hidr$6ido s$dico 7> #o!S!9+ s nrasa con a%ua dst)+ s #<c!a bin y s 5i!tra ds"u1s d in-rtir ocasiona!#nt ! #atra< ds"u1s d >/ #in) c9 Racci$n d co!or S "i"tan sndos -o!;#ns d > #! d! 5i!trado obtnido a 8 tubos n nsayo) A uno d !!os s aBadn '+/ #! d tano! 7M=( -o!9 7@diso!uci$n "atr$n9 y a! otro '+/ #! d !a diso!uci$n d carba<o! 7@diso!uci$n "rob!#a9) En !a diso!uci$n "rob!#a s 5or#ar* un "rci"itado b!anco cuaDoso) En a#bos -asos s aBadn+ a !a -< ,u s a%ita+ = #! d *cido su!5;rico 7M&(9+ db ra!i<ars n . s+ "ara a!can<ar n !as diso!ucions una t#"ratura d &/_C) Los tubos d nsayo s co!ocan in#diata#nt n un baBo d a%ua 7&/_C9+ s n5r:an ds"u1s a t#"ratura a#bint n ! "!a<o d >/ #in) y 5ina!#nt s !!-a a cabo !a 5oto#tr:a d !a diso!uci$n "rob!#a 5rnt a !a diso!uci$n "atr$n) Nota)0 Kara co#"nsar !os "osib!s rrors conscuncia d !a diso!uci$n d carba<o!+ s "r"ara un b!anco d #anra an*!o%a 7con > #! d a%ua n !u%ar d > #! d 5i!trado9) La di5rncia d 6tinci$n d a#bas #didas 7diso!uci$n d #ustra 5rnt a! "atr$n con ! 5i!trado o con a%ua9 s ha!!a con ayuda d !a cur-a "atr$n) d9 Cur-a "atr$n 0 Kara tra<ar !a cur-a "atr$n s tratan y #idn 5oto#1trica#nt !as diso!ucions "atr$n JA 7 c @ >' a .' O%S#!9 s%;n !as condicions dscritas n c9) C*!cu!os E! contnido n "ctinas K s 6"rsa n JAS! <u#o o n #% JASY%) d a!i#nto con "ctina y s ca!cu!a co#o si%u: Kara <u#o: KU#% JAS!V@ Jd>''S>/ Kara un a!i#nto con "ctinas: KU#% JAS3%V@ Jd>''SF J O% d *cido %a!actur$nico #onohidratadoS#! 5i!trado 7to#ado a "artir d !a cur-a d ca!ibrado9 >'' Factor d con-rsi$n a Y% o ! d #ustra y #% d "ctina 7JA9 >/ #ustra d <u#o n #! F #ustra d a!i#nto con "ctinas n % Obsr-aci$n A! cntri5u%ar "ara obtnr ! "rci"itado d "ctinas a "artir d !os 6tractos acuosos d <u#os 5rscos nor#a!#nt ,udan co#"onnts s$!idos inso!ub!s) Kara -itar!o+ s aBad durant !a "ri#ra 6tracci$n e cucharada d ca51 a"r$6) d "asta d "a"! d 5i!tro a! -aso d cntr:5u%a) Durant !a racci$n d co!or s #uy i#"ortant ,u !a cantidad d *cido su!5;rico s aBada n ! ti#"o indicado d . s a"ro6)+ "ara ,u as: s$!o s a!canc una t#"ratura d &/_C n !a diso!uci$n y ! rror n !a 5oto#1trica+ dbido a !as di5rncias d intnsidad+ sa #:ni#o) DETERCINACIN DE LA FIBRA Y RESID?O CEL?LSICO S considra co#o ta! ! rsiduo inso!ub! ,u dDan !os a!i#ntos o 5orraDs cuando s so#tn a un trata#into dtr#inado con *cidos y *!ca!is di!uidos hir-ints) D sta #is#a d5inici$n s dduc ya ,u no s trata n !a 5ibra d una sustancia d co#"osici$n uni5or# y ,u "or !o tanto !os rsu!tados ana!:ticos s$!o #rcn co#"araci$n+ si s han obtnido "or ! #is#o #1todo+ "rcisado n sus dta!!s) En 5cto+ a! tratar d s"arar n un an*!isis d un tDido -%ta! "or hidr$!isis !os co#"onnts d !a "ard c!u!ar+ s so!ubi!i<an+ n "ri#r t1r#ino+ !as %o#as+ #uc:!a%os+ "ctinas+ taninos+ cras y "i%#ntos y !u%o !a !i%nina+ ,u n ra!idad no s un "o!isac*rido+ sino un "o!:#ro a bas d unidads r"tidas d 5ni!"ro"ano: C = H / CH 8 CH 8 CH N ) Lu%o s disu!-n co#"onnts no bin d5inidos+ !!a#ados h#ic!u!osas ,u s di5rncian d !a c!u!osa aco#"aBant "or su #nor %rado d "o!i#ri<aci$n+ "or star 5or#adas "rinci"a!#nt "or "ntosanos 7C / H >' O / 9 n y #nos h6osanos y "or so!ubi!i<ars n *!ca!i di!uido hir-int) D sto s ds"rnd ,u !a !!a#ada 25ibra4 st* 5or#ada "rinci"a!#nt "or c!u!osa+ aco#"aBada d rstos d !os co#"onnts ,u 5or#an incrustacions d !a ##brana c!u!ar y ,u no s hayan so!ubi!i<ado n st trata#into+ co#o rstos d h#ic!u!osasA !i%nina+ cutina y ,uitina) Crca d 8'' t1cnicas di5rnts han sido dscritas n !a !itratura+ "ro+ n %nra!+ s "ud distin%uir ntr #1todos "or hidr$!isis o "or o6idaci$n) Entr !os "ri#ros st* !a t1cnica AOAC+ ,u ra!i<a !os dos trata#intos *cido y a!ca!ino d acurdo con !a d5inici$n d 25ibra4+ #intras ntr !os s%undos st* ! "rocdi#into d o6idaci$n hidr$!isis *cida con una #<c!a d *cidos ac1tico+ tric!orac1tico y n:trico) Kara !a dtr#inaci$n d! rsiduo c!u!$sico s%;n AOAC s "rscrib contro!ar "r-ia#nt "or titu!aci$n+ !a concntraci$n d !os dos racti-os ,u "rcisa ! #1todo y ,u son !os si%uints: a9 So!uci$n *cida: H 8 SO F a! >8+/ % "or #i! ,ui-a!nt a '+8// N y b9 So!uci$n a!ca!ina: NaOH a! >8+/ % "or #i! ,ui-a!nt a '+N>N N) 8 % d #atria! sco ds%rasado 7"ud #"!ars ! rsiduo "ro-nint d !a dtr#inaci$n d 6tracto t1ro9 s co!ocan un #atra< d /'' #!+ s a%r%an 8/' #! d !a so!uci$n *cida hir-int y s a%ita+ d #anra ,u todo ! #atria! ,ud hu#dcido y su#r%ido n ! !:,uido) S ada"ta un r5ri%rant d r5!uDo+ n caso ncsario s a%r%an %otas d a!coho! a#:!ico co#o antis"u#ant y s ca!inta d #anra ,u !a bu!!ici$n s inici n >fA s si%u hir-indo durant N'f 6actos+ -itando ,u "art:cu!as d! #atria! s adhiran a !as "ards d! #atra<+ ,udando 5ura d! !:,uido) Lu%o s 5i!tra a;n ca!int "or un tro<o d !ino+ co!ocado sobr ! #budo d Bgchnr+ hacindo a !a -< ! -ac:o) E! rsiduo sobr ! !ino s !a-a con a%ua ca!int hasta ,u cs !a racci$n *cida d! 5i!tradoA ns%uida s arrastra a! #is#o #atra< con ! chorro d un 5rasco !a-ador ,u !!-a 8/' #! d !a so!uci$n a!ca!ina+ hir-int) En caso ncsario+ s a%r%an %otas d a!coho! a#:!ico y s hir- nu-a#nt a r5!uDo durant N'f) S 5i!tra ahora a tra-1s d un disco d "a"! 5i!tro 7"r-ia#nt scado y "sado9 ,u s ha co!ocado n un #budo d BgchnrA s !a-a con a%ua ca!int hasta dsa"arici$n d !a racci$n a!ca!ina n ! 5i!trado y !u%o con a!coho!A s sca dntro d un "sa05i!tro y s "sa) E! au#nto d "so d! 5i!tro corrs"ond a! rsiduo c!uc!$sico #*s !a "orci$n d !as cni<as ,u haya "odido rsistir a !a diso!uci$n+ "ro ,u 5rcunt#nt s tan rducida ,u s "ud ds"rciar) En caso contrario+ s dstruy !a c!u!osa "or ca!cinaci$n y s -u!- a "sar ! rsiduo rsu!tant d !as cni<as inso!ub!s+ !as cua!s s rstan d! "so antrior) Kara dtr#inar !a 5ibra "or o6idaci$n hidr$!isis *cida s usa un #atra< rdondo+ conctado "or s#ri! con un tubo !ar%o co#o r5ri%rant d air) En st #atra< s "sa !a #ustra ds%rasada 7N %9 y s a%r%an: .' #! d *cido ac1tico a! .'(+ 8 % d *cido tric!oroac1tico y / #! d *cido n:trico conc) S ada"ta ! tubo s#ri!ado d r5!uDo y s ca!inta N'f a "artir d !a bu!!ici$n) S 5i!tra a tra-1s d un criso! 5i!trant 7JA9 a! -ac:o y s !a-a con a%ua ca!int hasta dsa"arici$n tota! d! o!or a *cido ac1tico) S sca a !a stu5a ! criso! 0,u ha sido "r-ia#nt tarado0+ s dDa n5riar y s "sa) 2Fibra dit1tica4) Con st no#br s dsi%na ! conDunto d !os co#"onnts d !as "ards c!u!ars d -%ta!s 7c!u!osas+ !i%nina9 ,u no son di%ridos "or n<i#as d ori%n ani#a! y ,u s dtr#inan "or: hidr$!isis con a#i!asa bactriana+ so!ubi!i<aci$n d !:"idos y "rot:nas con dtr%nt y co#"!Dando ca!cio y "ctinatos a!ca!inos con *cido ti!ndia#inottrac1tico 7EDTA9) '+/0>+' % d #ustra sca a! air+ #o!ida y ta#i<ada 78'0F' #sh9 s adiciona d N' #! d so!uci$n d a!5a0a#i!asa d Baci!!us subti!is+ ti"o III A 7obtnida a! a%itar "or 8'f > % con > !itro d ta#"$n d 5os5atos d "H . y !u%o 5i!trada "or -idrio "oroso9) S a%r%a > #! d to!uno y s incuba a F'_C durant >80>& horas) Lu%o s a%r%an '+/ % d Na 8 SO N y >'' #! d !a si%uint so!uci$n dtr%nt: N' % d !auri!su!5ato d sodioA >&+=> % d EDTA0sa! dis$dica dihidratoA =+&> % d b$ra< crist)A F+/= % d 5os5ato dis$dico anh) y >' #! d 1tr #onot:!ico d! ti!n%!ico! s disu!-n n > !itro d a%ua y s aDusta a "H =+M0.+>) S hir- a r5!uDo "or ='f+ contados dsd ! co#in<o d !a bu!!ici$n+ !a cua! s r%u!a d #odo ,u !as "art:cu!as ,udn n sus"nsi$n+ sin 5or#ars 6cso d s"u#a) S 5i!tra "or criso! d -idrio "oroso 7d F'0/' #! d ca"acidad9 o "or 5i!tro Zhat#an /F 7si ocurrn di5icu!tads d 5i!traci$n s a%r%an a! contnido d! criso! o 5i!tro 8 #! d so!uci$n d a#i!asa a! 8(+ dDando n contacto "or >/f9) E! rsiduo s !a-a dos -cs con a%ua hir-int y dos -cs con actona+ s sca+ s "sa+ s ca!cina a /''_C "or N horas y s -u!- a "sarA !a "1rdida d "so corrs"ond a !a 5ibra) BIBLIO2RA34A: Hr#ann Sch#idt0Hbb!A 2CIENCIA Y TECNOLOJIA DE LOS ALICENTOS40 A!5abta i#"rsionsA Lira >F'0Santia%o >M&>) Rinhard Catiss3+ 2ANRLISIS DE LOS ALICENTOS4A Editoria! Acribia0 ^ara%o<a Es"aBa >MM&) Ohn R) Fn#a 2i?jCICA DE LOS ALICENTOS4+ Edit)Acribia0^ara%o<a Es"aBa >MMN)