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PRACTICA N 3

PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO


MICROBIOLOGA GENERAL
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA
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VERSIN
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OBJETIVO GENERAL
Reconocer los diferentes medios de cultivo existentes para el crecimiento de microorganismos aplicando
los conceptos bsicos de nutricin ! preparacin de los mismos"
OBJETIVOS ESPECIFICOS
#nali$ar la definicin% clasificacin ! propiedades de los medios de cultivo"
&iscutir la t'cnica ! los puntos esenciales (ue deben tenerse en cuenta en la preparacin de un medio
de cultivo"
Enunciar e)emplos ! fundamentos de los medios de cultivos simples% selectivos diferenciales%
enri(uecidos% con a$*cares ! medios de transporte"
+reparar en pe(ue,os grupos los medios de cultivo% l-(uido o slido asignados por el docente. siguiendo
las instrucciones dadas en la eti(ueta del medio respectivo"
#lmacenar los medios de cultivo /preparados o sint'ticos0 en el lugar adecuado"
MARCO TEORICO
1omo todos los organismos vivos% los microorganismos re(uieren ciertos nutrientes bsicos ! factores
f-sicos para el mantenimiento de su vida% estas necesidades var-an seg*n el tipo de microorganismo ! es
necesario conocerlas para cultivarlos en el laboratorio"
2as necesidades nutricionales bsicas pueden suministrarse en el laboratorio por la variedad de medios de
cultivo. estos en general suministran3
1" Una fuente de carbono3 el carbono es un componente esencial ! central para conformar la
estructura celular ! permitir a la c'lula reali$ar todas sus funciones" Seg*n la fuente de carbono los
microorganismos se encuentran en dos grupo3 auttrofos ! 4etertrofos" 2os organismos auttrofos
pueden cultivarse en medios (ue contengan *nicamente compuestos inorgnicos. usan
principalmente dixido de carbono como carbono inorgnico" 2os organismos 4etertrofos en su
lugar necesitan un suministro de carbono orgnico por e)emplo glucosa"
2" Una fuente de Nitrgeno3 elemento esencial para (ue la c'lula constru!a macromol'culas como
prote-nas ! cidos nucleicos" #lgunos microorganismos usan nitrgeno atmosf'rico% otros emplean
sales de nitrato o de amonio como compuestos inorgnicos as- como otras re(uieren compuestos
orgnicos (ue contengan nitrgeno como aminocidos"
5" Elementos no metlicos3 iones no metlicos como el #$ufre ! el 6sforo" El #$ufre puede
encontrarse en prote-nas% sulfatos o #$ufre elemental% mientras el fsforo esta formando sales"
7" Elementos metlicos /1a% 8n% Na% 9% 1u% :n% :g% 6e
;2
! 6e
;5
03 2lamados tambi'n micronutrientes%
oligoelementos o elementos tra$a" Encontrados en sales inorgnicas ! tomados en ba)as
concentraciones"
<" Vitaminas3 los microorganismos puede tomarlas del medio% elaboradas o sinteti$arlas" #lgunos
poseen una variedad de v-as para sinteti$ar vitaminas% mientras otros sinteti$an un n*mero mu!
limitado de ellas a partir de componentes del medio. otros las re(uieren como suministro"
=" Agua"
>" Energa3 Existen dos tipos bioenerg'ticos de microorganismos% fottrofos ! (uimitrofos" 2os
fottrofos emplean la energ-a radiante /lu$ solar0 como *nica fuente de energ-a" 2os (uimitrofos
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obtienen la energ-a por oxidacin de compuestos (u-micos los cuales pueden ser mol'culas
orgnicas o inorgnicas
2as necesidades f-sicas involucran factores como3 temperatura% p? ! gases% los cuales se encuentran en
un rango ptimo espec-ficos para cada microorganismo% por lo tanto su variacin puede acelerar o disminuir
su crecimiento"
El microbilogo busca satisfacer las necesidades nutricionales para recuperar ! crecer los
microorganismos. de manera general estos medios pueden ser medios artificiales o medios (u-micamente
definidos" +ara los (u-micamente definidos se conocen las cantidades exactas de compuestos (u-micos
puros (ue los conforman !a sean de tipo orgnico como inorgnico" 2os medios artificiales estn
compuestos de un n*mero limitado de sustancias comple)as% extractos de plantas% de animales% cu!a
composicin (u-mica exacta no se conoce"
2os microorganismos en general pueden tomar los re(uerimientos nutricionales de los medios de cultivo% !a
sean sustancias naturales o artificiales para multiplicarse"
MEDIOS DE CULTIVO
El conocimiento de la nutricin microbiana permite el cultivo de los microorganismos en el 2aboratorio" @n
medio de cultivo es una solucin acuosa /bien como tal% o bien incorporada a un coloide en estado de gel0
en las (ue estn presentes todas las sustancias necesarias para el crecimiento de un /os0 determinado/s0
microorganismo/s0"
PROPIEDADES DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
?@:E&#&3 Indispensable para el crecimiento de microorganismos% su carencia /desecacin0 puede llevar
a la muerte del microorganismo"
6ERAI2I&#&3 Se refieren a los elementos o compuestos bsicos (ue permiten el crecimiento bacteriano"
p?3 Se refiere a los p? ptimos para el desarrollo bacteriano% indispensable para su aislamiento.
variaciones cidas o alcalinas% pueden in4ibir su crecimiento"
AR#NS+#REN1I#3 +ermite la observacin bacteriolgica% evidenciar morfolgica ! f-sicamente su
crecimiento en medios de cultivo adecuado"
CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
SEGN SU ESTADO
FSICO
S2I&BS 1"< a 2"C D de agar E agar
SE:IS2I&BS C"< D de agar E agar
2FG@I&BS No contienen agar
HI6#SI1B 1ontiene fase slida ! fase li(uida /listos para utili$ar0
N#A@R#2ES @tili$ados para cultivar microorganismos tal ! como se
encuentran en la naturale$a" Se usan con base a la
experiencia ! no a su composicin" E)3 Sangre diluida% lec4e%
)ugos vegetales"
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SEGN SU
NATURALEZA O
COMPOSICIN
SINAIAI1BS &e composicin exactamente conocida" 2os mas utili$ados
son los medios comerciales des4idratados"
VIVBS 1ontienen c'lulas u organismos vivos% como las c'lulas de
ri,n de mono o 4uevos embrionados"
SEGN SU
PROPOSITO
#SI2#:IENAB
&E
:I1RBBRJ#-
NIS:BS
:E&IBS
ENRIG@E1I&BS
1on adicin de sangre% suero o
extractos de te)idos de animales o
plantas al caldo o agar% proporcionando
sustancias nutritivas complementarias
para el crecimiento de microorganismos
exigentes
:E&IBS
SE2E1AIVBS K
1on adicin de algunas sustancias (ue
no permiten el desarrollo de un grupo
de microorganismos sin afectar el
desarrollo de los grupos de inter's" En
principio se pueden seleccionar los
microorganismos (ue se desarrollan en
medios orgnicos poco comunes% caso
en el cual se omiten otros compuestos
de carbono"
:E&IBS
&I6EREN1I#2ESK
1ontienen reactivos (u-micos (ue traen
como resultado determinado tipo de
crecimiento bacteriano despu's de la
incubacin /observacin de 4emlisis !
coloraciones de las colonias0"
:E&IBS +#R#
I&ENAI6I1#1IN
+ara determinar el tipo de crecimiento
producido por los microorganismos% as-
como la capacidad para producir
cambias (u-micos% se utili$a de manera
convencional una amplia variedad de
medios de cultivo"
K Existen medios (ue pueden cumplir funciones mixtas es decir permiten aislar organismos ! muestran una
reaccin o cambio (u-mico especifico de metabolismo como coloraciones de colonias o cambios de color
del medio% es decir selectivos ! diferenciales al tiempo"
2a presentacin comercial de los medios sint'ticos ! des4idratados pueden ser en polvo o granulados" En
el mercado se pueden encontrar medios listos para fundir o medios servidos en placas petri o tubos
Medios de !"#i$o %&'(!"'dos
Son medios de cultivo elaborados a partir de materias primas sometidas a molienda% me$clado%
pulveri$acin ! granulacin /#glutinacin de la me$cla polvorienta0 Este tipo de medios tienen algunas
venta)as frente a los medios tradicionales en polvo% como lo es3
Reduce alergi$acin o respiracin de sustancias txicas por produccin de polvo"
:enor ad4erencia a las paredes de los recipientes
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:a!or facilidad de pesa)e"
:e)or 4umectabilidad /grumos fcilmente solubles0
No se produce desme$clamiento de todos los componentes% en el almacenamiento prolongado"
:e)or conservacin"
ALMACENAMIENTO ) CONSERVACIN
2os medios de cultivo des4idratados se deben conservar en lugar seco% protegidos contra la lu$% a una
temperatura entre 1< a 5CL1 ! en envases bien cerrados" &espu's de 4aber sido retirada una cantidad de
medio de los envases% estos deben cerrarse firmemente"
2os medios de cultivo preparados ! esterili$ados listos para su uso son utili$ables por tiempos cortos%
mximo de una semana ! lo ms conveniente es almacenarlos a temperatura de refrigeracin /mximo
7L10% aun(ue algunos medios (ue contienen tioglicolato se conservan me)or a temperatura ambiente !
protegidos de la lu$ por un tiempo mximo de 7 d-as" Ha)o condiciones ptimas de almacenamiento los
medios des4idratados conservan sus cualidades durante el tiempo indicado ! 4asta la caducidad impresa
en la eti(ueta del recipiente"
# los medio de cultivos se les reali$a Aest de esterilidad% !a sea cuando estn des4idratado /Ecom'trico0% o
preparados" En el *ltimo caso se toma del lote una muestra no inferior al <D% incubndose estas muestra a
5>L1M274" 6inali$ado el tiempo de incubacin se observa si presenta crecimiento microbiano con el fin de
descartar los medios contaminados"
PREPARACIN DE LOS MEDIOS DE CULTIVO
Es un proceso clave en el traba)o de rutina e investigacin bacteriolgica" +ara obtener un producto final
bien terminado /medio de cultivo0 deber contarse con la 4abilidad% destre$a% conocimientos bsicos en
fisico(u-mica ! bacteriolog-a"
1" &ISB2@1IN &E2 :E&IB &E 1@2AIVB &ES?I&R#A#&B3
Se debe emplear agua limpia% reci'n destilada o desminerali$ada ! con p? lo ms cercano posible al
neutro" 2os recipientes a usar deben ser lo suficientemente grandes para (ue el medio sea agitado con
facilidad"
Inicialmente se a,ade la mitad de agua ! se agita suficientemente para conseguir una suspensin
4omog'nea. despu's se incorpora la cantidad de agua restante" Aodo tipo de medio de cultivo es sensible
al calentamiento% no debe calentarse ms de lo estrictamente necesario" 2eer siempre la eti(ueta del
envase% en caso de (ue no deba ser sometido a ulterior esterili$acin en autoclave% es imprescindible
prestar atencin en su disolucin completa% esto se confirma cuando al agitar no se ad4iere a la pared
interna del recipiente ninguna part-cula de agar o medio ! la solucin resbala libremente"
Si la preparacin es de ms de 2 litros% se recomienda desle-r el medio de cultivo en una d'cima
aproximada a la cantidad prevista de agua ! de)arla remo)ar durante 1< minutos. calentar a ebullicin el
agua restante% agregar 'sta agua con constante agitacin al medio remo)ado% ! calentar 4asta su completa
disolucin"
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- < -
2" ESAERI2I8#1IN3
#ntes de su esterili$acin ! despu's de su completa disolucin se debe repartir el medio de cultivo en los
recipientes definitivos o en los (ue ulteriormente se lleve a cabo el traba)o de investigacin% E*e+#o si
corresponde a ca)as de petri"
2a esterili$acin% si as- lo indica la eti(ueta% se lleva a cabo en el autoclave a 121L1 a 1< libras de presin
por 1< minutos"
Aras la esterili$acin ! despu's de 4aber alcan$ado el e(uilibrio de presiones /vlvula abierta0 ! para evitar
la sobrecarga t'rmica del medio de cultivo% este debe sacarse enseguida del autoclave ! enfriar los
recipientes rpidamente a temperatura de vertido entre 7< ! <CL 1% as- se evitar alterar el medio de cultivo"
5" VERAI&B EN +2#1#3
+reviamente remover el medio de cultivo oscilando el recipiente en sentido circular para entreme$clarlo de
manera uniforme" Verter el medio a las ca)as de petri a la temperatura de vertido evitando la formacin de
4umedad en la tapa de la ca)a de petri"
2as burbu)as de aire en la superficie de la placa se eliminan abanicando brevemente con la llama no
luminosa de un mec4ero de bunsen"
7" A@HBS &E #J#R IN12IN#&B N SIN IN12IN#1IBN3
2os tubos llenos de medio de cultivo esterili$ado% todav-a l-(uido% se colocan en una posicin inclinada de
tal forma (ue se forme una placa de aproximadamente 5 cm" ! una superficie inclinada de iguales
dimensiones" /#gar inclinado en pico de flauta0" En los casos en los cuales se re(uiere el medio sin inclinar%
estos deben de)arse solidificar en posicin vertical sobre una gradilla"
POSIBLES DEFECTOS EN LA MANIPULACIN ) PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO
#pelma$amiento de los medios de cultivo des4idratados" Se debe a una conservacin en ambiente
exclusivamente 4*medo% puede ser la causa de envase abierto por tiempo prolongado o de)ar mal
cerrado el envase despu's de su uso o por ultimo (ue el medio de cultivo este pasado de fec4a" Se
recomienda despu's de usarlos% cerrarlos mu! bien ! almacenarlos en posicin 4ori$ontal"
&esviacin del p?" 1ausado por utili$acin de agua no neutra% envase mal cerrado% sobrecalentamientro
del medio de cultivo durante su preparacin o medio pasado de fec4a"
Aurbide$" +recipitacin causada por uso de recipientes incorrectamente limpios% sobrecalentamiento%
perdida de agua por evaporacin del medio"
Escasa estabilidad del gel" &ebido a la proporcin inadecuada del medio de cultivo des4idratado% mala
disolucin% ineficiencia en la agitacin"
:edios de cultivo contaminados3 por esterili$acin deficiente o contaminacin ulterior a su preparacin"
1olonias inconcretas o desle-das" 1ausada por superficie del medio 4*meda ! por demasiado inculo
en la siembra"
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CLASES DE MEDIOS DE CULTIVO
MEDIOS SIMPLES,
#J#R N@ARIAIVB3 1ontiene extracto de carne% peptona% agar"
1#2&B N@ARIAIVB3 1ontiene extracto acuoso de carne adicionado de peptona al 1D ! cloruro de sodio al
C"<D" E)m" H?I /brain ?eart infusion0% ASH /caldo se so!a tr!pticasa0% Nutrient brot4"
H2BB& #J#R H#SE B ARN+AI1#S# SBN# #J#R3 :edio slido (ue contiene peptona% enri(uecido con
sangre desfibrinada de cone)o al >D" @sado para el desarrollo de todo tipo de bacterias ! especialmente
para observar la actividad 4emol-tica"
MEDIOS ENRI-UECIDOS,
#J#R S#NJRE3 #l medio blood agar sangre se le a,ade sangre de cone)o desfibrinada al >D est'ril
cuando este tenga una temperatura de 7<L 1 luego de su esterili$acin"
#J#R 1?B1B2#AE3 1onsiste en un agar sangre (ue antes de su solidificacin se lleva a 1CCL 1 por 1
minuto /ebullicin0% as- se rompen los glbulos ro)os tomando un color marrn" Se usa para el aislamiento
de Haemophilus y Neisseria.
:E&IB &E AIBJ2I1B2#AB3 +ermite el aislamiento de aerobios tolerante ! anaerobios" &ebe conservarse
en la oscuridad% en tubos tapa rosca% de manera (ue la anaerobiosis se mantenga en el fondo ! la
aerobiosis en la superficie"
MEDIOS SELECTIVOS ) DIFERENCIALES,
#J#R :#1 1BN9EN3 :edio selectivo para el crecimiento de enterobacterias" 1ontiene peptona% sales
biliares% lactosa% ! ro)o neutro"
#J#R SS3 1ontiene sales biliares en ma!or concentracin (ue el agar :ac 1onOe! ! verde brillante (ue
impide el crecimiento de bacterias coliformes pero permite el crecimiento de Salmonella y Shigella.
#J#R E:H /EBSIN# #8@2 &E :EAI2ENB03 1ontiene colorante (ue impide el crecimiento de bacterias
Jram positivas" 2a E. coli crece dando colonias con brillo metlico caracter-stico"
:E&IB &E AE2@RIAB3 +ermite el crecimiento de 1or!nebacterias% Staphylococcus !isterias" El telurito de
potasio al 2D es reducido por las 1or!nebacterias reductoras apareciendo colonias de color gris-negro"
:E&IB &E S#HB@R#@&3 1ontiene dextrosa peptona o maltosa agar% p? entre < - <"< in4ibiendo el
desarrollo de microorganismos (ue no sean 4ongos"
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MEDIOS DE TRANSPORTE
:antienen viables los microorganismos de una muestra antes de (ue se procesen% los conserva evitando
su multiplicacin ! su muerte"
:E&IB &E SA@#RA3 Se utili$a para transportar muestras de materiales purulentos recogidos con
escobilln est'ril"
:E&IB &E H@66ER J2I1ERIN#&B3 +ermite el transporte de muestras de materia fecal para coprocultivos
manteniendo la viabilidad de la Shigella"
MEDIOS BIO-UMICOS DIVERSOS,
Son a(uellos (ue demuestran caracter-sticas bio(u-micas particulares de las bacterias" Son3 medios para
fermentacin de a$ucares% algunos como3 ASI% 1itrato% SI:% 1aldo :R-V+% caldo malonato% etc"
1omercialmente pueden encontrarse sistemas multipruebas bio(u-micas con 1C o ms parmetros (ue
permiten una ms rpida ! precisa identificacin de las propiedades metablicas del microorganismo ! su
consiguiente identificacin"
MATERIALES ) E-UIPOS
1a)as de petri
Aubos de ensa!o
+ipetas
Erlenme!ers
#utoclave
1inta de enmascarar
Jasa
#lgodn
:edios de cultivo des4idratados
:ec4ero de Hunsen
Estufa el'ctrica
Halan$a
Esptulas
#gua destilada
6rascos tapa a$ul de 2<C ml
+robetas
+apel filtro
PROCEDIMIENTO PARA PREPARACIN MEDIOS DE CULTIVO
1" ?aga el clculo correspondiente para la preparacin del medio de acuerdo con las indicaciones del
profesor"
2" :ida el volumen de agua destilada seg*n sus clculos"
5" Aeniendo en cuenta el volumen de agua (ue debe utili$ar% 4aga la relacin de medio a pesar de
acuerdo a lo especificado por la eti(ueta del medio"
7" +ese la cantidad de medio necesaria de acuerdo a sus clculos
<" :e$cle el medio des4idratado con la mitad del agua% agite suficientemente ! agregue el agua
restante" 2leve a ebullicin si es necesario /en el caso de agares"0
=" Esterilice en autoclave seg*n las indicaciones (ue mencione la casa comercial"
>" 6inali$ada la esterili$acin sirva as'pticamente aproximadamente 1< o 2C ml" del agar en la ca)a de
petri o el volumen adecuado seg*n el tama,o de los tubos"
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- P -
CONSULTA
1omplete la informacin del siguiente cuadro
MEDIO DE CULTIVO COMPOSICIN PREPARACIN USO INTERPRETACIN
1#2&B
AEAR#AIBN#AB
+eptona% carbonato
de sodio% Sales
biliares% Aiosulfato de
sodio% Iodo% Ioduro de
potasio% #gua
Suspender 7= g del
polvo en 1 litro de
agua destilada"
:e$clar
vigorosamente ! llevar
a ebullicin" Enfriar a
7<Q1 o menos"
#gregar 2C ml de
solucin iodurada"
:e$clar ! distribuir 1C
ml por tubo% en tubos
est'riles" No debe
calentarse luego de
agregar la solucin
iodada" El medio base
puede mantenerse a
7Q1 % dura varios
meses% pero una ve$
agregada la solucin
iodada debe usarse
en el mismo d-a
+uede reali$arse la
siembra partiendo de
un caldo de pre
enri(uecimiento o en
forma directa
conservando la
proporcin 131C"
HIS:@AB S@26IAB
Extracto de carne%
&igerido pancretico
de case-na % &igerido
p'ptico de te)ido
animal % &extrosa %
6osfato de sodio %
Sulfato ferroso %
Indicador de sulfito de
bismuto % #gar % Verde
brillante %#gua
destilada "
Extracto de carne <%C
g &igerido pancretico
de case-na <%C g
&igerido p'ptico de
te)ido animal <%C g
&extrosa <%C g
6osfato de sodio 7%C g
Sulfato ferroso 5CC%C
mg Indicador de
sulfito de bismuto P%C
g #gar 2C%C g Verde
brillante 2<%C mg
#gua destilada 1"CCC
utili$ado para el
aislamiento de
Salmonella t!p4i !
otros bacilos
ent'ricos.
Sembrar finamente la
superficie de las
placas con el material
ob)eto de prueba o
con material
+rocedente de un
cultivo de
enri(uecimiento"
Incubacin3 4asta
aprox" 7P 4oras a 5<
Q1% ambiente aerobio
:E&IB 2BRESAEIN
-SENSEN
fosfato monopotsico%
sulfato de magnesio%
citrato de magnesio%
asparragina% 4arina de
papa% glicerina%
4uevos frescos
enteros% verde de
mala(uita% agua
purificada
Re4idratar 5>"5 g del
medio base en =CC ml
de agua destilada"
#dicionar 12 ml de
glicerol" Reposar 1C a
1<
minutos" 1alentar
agitando
frecuentemente 4asta
el punto de ebullicin
durante 1 minuto"
1ultivo !
diferenciacin de mico
bacterias%
fundamentalmente
m!cobacterium
tuberculosis
Bbservar las
caracter-sticas
morfolgicas ! la
presencia o ausencia
de pigmento en las
colonias" tener en
cuenta el tiempo (ue
4a transcurrido desde
la inoculacin 4asta la
observacin de
crecimiento"
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- T -
Esterili$ar en
autoclave a 121L1
/1< lbs de presin0
durante 1< minutos"
Enfriar
aproximadamente a
7<L1" 1onservar en
refrigeracin de 2L a
PL1" El medio
preparado debe
conservarse bien
tapado 4asta el
momento de usarse"
+reparar un litro de
4uevo completo
obtenido
as'pticamente !
me$clado sin formar
burbu)as" :e$clar el
4uevo !
la base con suavidad"
&istribuir en tubos de
ensa!o est'riles con
tapn de rosca"
1olocarlos en
posicin inclinada%
coagular
! espesar el medio de
P<L a TCL1 durante 7<
minutos" 2a superficie
del medio tiene un
color verde claro
:E&IB A?#NER-
:#RAIN
+luripeptona% #lmidn
soluble% 6osfato
dipotsico% 6osfato
monopotsico%
1loruro de sodio%
#gar"
:edio A4a!er :artin
modificado listo para
usar 6undir el
contenido de un
frasco de <C ml de
#gar Hase J1 doble
concentracin !
enfriarlo a <CQ1"
Reconstituir el Hritalex
! el V1NA con 2%1 ml
de solvente cada uno"
#dicionar
as'pticamente la
solucin de
4emoglobina% 1 ml de
V1NA ! 1 ml de
HRIA#2EU a la base
J1 doble
Sembrar inicialmente
el material con 4isopo
o ansa sobre un tercio
de la superficie de la
placa% estriando el
resto de la superficie
para obtener colonias
aisladas"
Bbservar las
caracter-sticas de las
colonias" 2as colonias
de gonococos !
meningococos
obtenidas en este
medio selectivo son
usualmente opacas%
grisceas% convexas%
de 1-7 mm de
dimetro"
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- 1C -
concentracin"
1onservar el resto de
V1NA ! Hritalex
reci'n preparados en
congelador /estable
1< d-as a -2CQ10"
:e$clar para
4omogenei$ar"
&istribuir unos 1C ml
por placa ! de)ar
solidificar" 2as placas
pueden conservarse
en 4eladera por 5
semanas% sin perder
su potencia in4ibidora"
H#IR& +#R9ER
+eptona de case-na%
Extracto de carne%
1loruro de litio% #gar%
Jlicina% +iruvato de
sodio"
Suspender =C g del
medio des4idratado
en T7Cml de agua
destilada" &e)ar en
reposo < a 1C
minutos" 1alentar
agitando
frecuentemente !
4ervir durante 1
minuto" &istribuir !
esterili$ar en
autoclave a 121Q1 /1<
libras0 durante 1<
minutos" Enfriar a 7<Q-
<CQ1 ! agregar <C ml
de la emulsin de
!ema de 4uevo !
1Cml de la solucin de
telurito /1digo HC5-
=C1-=10"
?omogenei$ar !
distribuir en ca)as de
+etri"
:edio de alta
especificidad
diagnstica% selectivo
! diferencial para el
aislamiento ! recuento
de estafilococos
coagulasa positiva en
alimentos ! otros
materiales de
importancia sanitaria"
B'#e&i's /!e
&ed!e( e" #e"!&i#o
de +o#'sio3 colonias
de color grisceo-
negro"
B'#e&i's /!e (o
&ed!e( e" #e"!&i#o
de +o#'sio3 colonias
del color del medio%
transparentes"
B'#e&i's o(
'#i$id'd
"ei#i(0si'3 4alo
claro en el medio de
cultivo alrededor de la
colonia" +uede existir
tambi'n un 4alo
opaco
alrededor de la
colonia con un 4alo
claro externo"
B'#e&i's si(
'#i$id'd
"ei#i(0si'3 ausencia
de 4alo claro
alrededor de la
colonia"
2:UM62@BRB1@2A
RE#&N1@2A
1psula" Ariptosa C%<.
Sodio cloruro C%<.
Sorbitol C%1.
Ariptfano C%1. &i-
ELABORADO POR: DOCENTES DE MIROBIOLOGA GENERAL

PRACTICA N 3
PREPARACIN DE MEDIOS DE CULTIVO
MICROBIOLOGA GENERAL
UNIVERSIDAD DE PAMPLONA
Pgina 11 de
11
VERSIN
- 11 -
potasio 4idrgeno
fosfato C%2>. +otasio
di4idrgeno fosfato
C%2. """
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ELABORADO POR: DOCENTES DE MIROBIOLOGA GENERAL