LABORATORISTA

QUIMICO
HONGOS Y
LEVADURAS
INFORMATE
ERIKA GONZALEZ GUZMAN
1

COLEGIO DE BACHILLERES
DE TABASCO
PLANTEL # 4 T.V.


NOMBRE: Erika Gonzlez Guzmn

ASIGNATURA: Laboratorista Qumico

PROFESOR: Carlos Priego

PROYECTO: APLICAR TECNICAS PARA
IDENTIFICACION DE HONGOS Y LEVADURAS


GRADO: 6to GRUPO: A



FECHA: 2 de Junio del 2014
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INTRODUCCION

El tema principal son los hongos y las levaduras, con los cuales se trabajara
se aplicaran tcnicas de identificacin para hongos y levaduras.
Los hongos son un grupo de seres vivos diferentes de las plantas y de los
animales, razn por la cual se clasifican en un reino aparte llamado Fung.
La ciencia que los estudia se llama Micologa. La micologa ciencia que se
dedica al estudio de los hongos. Es una de las ramas de la ciencia ms
extensas y diversificadas con avances significativos en la investigacin y
desarrollo tecnolgico. Los hongos poseen gran capacidad de adaptacin y
pueden desarrollarse sobre cualquier medio o superficie, tanto en los
bosques como en las ciudades. Se reproducen por medio de esporas, las
cuales son diseminadas principalmente por el viento y por el agua.
Dentro del reino Fung se encuentran las levaduras, un grupo de hongos,
presentan al menos una fase de su ciclo vital en forma unicelular; durante
sta, se reproducen por gemacin o biparticin. Se denominan hongos
dimrficos a las especies que alternan una fase unicelular (de levadura) con
otra miceliar (con hifas).
Durante este trabajo se dar un enfoque en especial a los mtodos de
identificacin de hongos y levaduras haciendo un nfasis a los distintos
mtodos de reproduccin, crecimiento, tincin y pruebas bioqumicas.
La importancia de los hongos y las levaduras es que son microorganismos
que tienen inters como causa de alteracin y como elementos biolgicos
utilizados en la manufactura de algunos alimentos: quesos, cerveza, pan,
etc. Ciertos hongos pueden producir al desarrollarseen animales y en el
hombre, sustancias que genricamente reciben el nombre de micotoxinas.
Los hongos se encuentran distribuidos ampliamente en la naturaleza, como
en la tierra y en el polvo, las levaduras se desarrollan con facilidad en los
utensilios que no han sido perfectamente lavados, utilizados en la industria
de carbohidratos.
Por ultimo cabe aclarar que la informacin ser clara, sistemtica y concisa.



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INDICE

Introduccin ------------------------------------------------------------------ 2
Caractersticas --------------------------------------------------------------- 5
Tema: aplicar tcnicas de identificacin para hongos y levaduras utilizando
mtodos de reproduccin ---------------------------------------------- 6
Reproduccin ---------------------------------------------------------------- 7
Mecanismos de accin patgena de los hongos --------------------- 8
Caractersticas generales de los hongos ------------------------------- 9
Mtodos de crecimiento de los hongos ----------------------------- 10
Mtodos de tincin ------------------------------------------------------- 12
Pruebas bioqumicas ----------------------------------------------------- 16
Reproduccin de los hongos ------------------------------------------- 20
Anatoma de los hongos ------------------------------------------------- 25
Conclusin ------------------------------------------------------------------ 28
Bibliografa ----------------------------------------------------------------- 29










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EN EL REINO FUNG

El trmino Fung designa a un grupo de
organismos eucariotas entre los que se encuentran
los mohos, las levaduras y las setas.
Se clasifican en un reino distinto al de las plantas, animales
y bacterias. Esta diferenciacin se debe, entre otras cosas, a
que poseen paredes celulares compuestas por quitina, a
diferencia de las plantas, que contienen celulosa y debido a
que algunos crecen y actan como parsitos de otras
especies.
Los hongos son los descomponedores primarios de la
materia muerta de plantas y de animales en muchos
ecosistemas, y como tales poseen un papel ecolgico muy
relevante en los ciclos biogeoqumicos.
Los hongos tienen una gran importancia econmica:
las levaduras son las responsables de la fermentacin de
la cerveza y el pan, y se da la recoleccin y el cultivo de setas
como las trufas.









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CARACTERSTICAS

Los hongos crecen en el suelo y, en el caso de las setas, forman
cuerpos fructferos que en algunos casos guardan parecido con
ejemplares de plantas, como los musgos.
Los estudios filogenticos indicaron que forman parte de un reino
separado del de los animales y plantas, de los cuales se separ hace
aproximadamente mil millones de aos.
Algunas de las caractersticas morfolgicas, bioqumicas y genticas de los
hongos son comunes a otros organismos; no obstante, otras son diferentes,
lo que permite su separacin de otros organismos vivos.




Un hongo Coniophara tambin
conocido como "hongo oreja"
pudriendo un tronco de madera.










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Aplicar Tcnicas de Identificacin para Hongos y
Levaduras Utilizando, mtodos de Reproduccin
Crecimiento, Tincin y Pruebas Bioqumicas
Aplicar tcnicas de identificacin para hongos y levaduras
Aplicar mtodos para la reproduccin y crecimiento de hongos y levaduras
Para recrear las condiciones de crecimiento y reproduccin de hongos y
levaduras, es necesario conocer antes como las llevan a cabo en su estado
natural.
La gran mayora de los hongos producen esporas como medio para asegurar
la dispersin de la especie y su supervivencia en condiciones ambientales
extremas. As pues, la espora es la unidad reproductiva del hongo y
contiene toda la informacin gentica necesaria para el desarrollo de un
nuevo hongo.
Conocemos dos tipos de esporas:
Las asexuales, que suelen ser resistentes a la sequedad y a la radiacin, pero
no especialmente al calor, por lo cual no tienen perodo de latencia. Pueden
germinar cuando hay humedad, incluso en ausencia de nutrientes.
Las sexuales, ms resistentes al calor que las asexuales, aunque no tanto
como las endosporas bacterianas, suelen presentar latencia, germinando
slo cuando son activadas, por ejemplo por calor suave o alguna sustancia
qumica.
En los hongos hay dos formas de reproduccin: sexual y asexual, aunque en
algunas especies coexisten ambas formas en el mismo organismo
(holomorfo), denominndose estado perfecto o teleomorfo a la forma
sexual y estado imperfecto o anamorfo a la asexual.
As, los hongos que presentan reproduccin sexual se denominan hongos
perfectos y los que slo tienen (o slo se les conoce) reproduccin asexual
se denominan hongos imperfectos. Las levaduras se reproducen
vegetativamente por gemacin o por fisin, y sexualmente por produccin
de esporas.
Para conocer de manera mejor la reproduccin y crecimientos de hongos y
levaduras hay que recrearla mediante el uso de cultivos en caja Petri o en
tubo de ensayo. En lneas generales, todos los medios de cultivo utilizados
en micologa han de contener los nutrientes suficientes para asegurar el
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desarrollo de los hongos (carbono, nitrgeno, vitaminas, oligoelementos,
etc). El pH ha de ser ligeramente cido para facilitar el crecimiento de los
hongos e inhibir al mismo tiempo el desarrollo de otros microorganismos.
Se aadirn antibiticos antibacterianos para inhibir el crecimiento de las
bacterias saprofitas que suelen contaminar las muestras. Los ms usados
son el Cloranfenicol y la Gentamicina. Se aade tambin actidiona
(Cicloheximida) que inhibe el desarrollo de hongos saprofitos ambientales
(aunque tiene el inconveniente de que inhibe tambin el crecimiento de
Cryptococcus neoformans).

REPRODUCCIN

Los hongos pueden llevar a cabo dos mecanismos de reproduccin: asexual
y sexual.
Reproduccin asexual: incluye la gemacin, la fragmentacin y la
formacin de esporas asexuales.
La gemacin es el mecanismo de reproduccin de las levaduras y algunos
hongos acuticos. Aparece en la clula madre un brote o protuberancia a la
cual pasa un ncleo. Ambas clulas que dan separadas por un tabique, y el
brote es separado por ruptura. La espora pequea que se genera se llama
blastospora. Estas esporas se presentan en el gnero Candida spp.
La fragmentacin consiste en que las hifas se segmentan dando clulas
rectangulares de paredes gruesas, la espora que se genera se llama
artrospora, caracterstica del gnero Coccidioides spp, donde las
artrosporas producen pequeos apndices que favorecen la dispersin.
Las esporas asexuales pueden ser clamidosporas, conidiosporas o conidios
y esporangiosporas, son caractersticas para cada especie. Por ejemplo el
gnero Penicillum spp presenta conidiosporas.
Reproduccin sexual: se lleva a cabo cuando faltan nutrientes en el
medio o cuando las condiciones de crecimiento se vuelven adversas,
en cambio si en el medio existen nutrientes y las condiciones son
ptimas el hongo lleva a cabo la reproduccin asexual. La
reproduccin sexual supone la unin de dos ncleos, proceso por el
cual se forman las esporas sexuales, de las que existen tres tipos:
zigosporas, ascosporas y basidiosporas.
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Las esporas de los hongos son en general ms sensibles a los agentes fsicos
y qumicos que las esporas bacterianas, y entre las esporas de los hongos,
las sexuales son ms resistentes que las asexuales.
Existen hongos que slo llevan a cabo la reproduccin asexual, son
los hongos imperfectos ofungi imperfecti.

MECANISMOS DE ACCIN PATGENA DE LOS HONGOS
Los hongos pueden causar dao al hombre y animales por distintos
mecanismos:
Ingestin de hongos venenosos, constituye una intoxicacin
conocida como mimetismo
La ingestin de productos contaminados con toxinas liberadas por el
hongo al desarrollar sobre los alimentos, se denomina micotoxicosis
Mecanismos de dao por hipersensibilidad tipo I, como el asma
aspergilar, etc.
Micosis propiamente dichas, que son las infecciones debidas a
hongos, capaces de producir enfermedad en el hombre por invasin,
multiplicacin exagerada y/o lesiones tisulares.
Algunos hongos son considerados patgenos primarios por afectar a
individuos aparentemente normales. Otros, en su mayora pertenecientes
al ambiente o a la flora norma, no desarrollan en individuos
inmunocompetentes y requieren, para poder multiplicarse en el husped,
que ste se encuentre en estado de inmunodepresin o supresin. En estos
casos se habla de micosis oportunistas. Es importante el conocimiento de
la flora normal, para comprender las fuentes probables de infeccin en
oportunismos, aplicar medidas profilcticas adecuadas e interpretar el
hallazgo de estos hongos en los cultivos. Forman parte de la flora normal
de piel y mucosas.





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CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS HONGOS

Morfologa y crecimiento: Los hongos que producen micosis en el ser
humano se encuentran en dos estados morfolgicos bsicos: levaduras y
mohos.

Levaduras: Son hongos unicelulares, redondos o elipsoides que se
repoducen por gemacin o fisin binaria. La gemacin es la protusin
externa del protoplasma materno formando un saliente (yema o
gema), que va creciendo poco a poco y, finalmente, se desprende
cnvirtindose en un nuevo individuo. En alguno casos permanecen
unidas distintas gemas alrededor de la clula madre y, en otro, la
gema sigue creciendo a su vez porduciendo nuevos bortes y dando
la imagen de seudomicielio formado por blastoconidias. Una
levadura tambin puede ser el estadio morfolgico en el cilo biolgico
de una espeie filamentosa; a este hecho se le denomina
"dimorfismo" y al hongo "hongo dimrfico". Tambin existe la
situacin inversa: una levadura puede tener capacidad de producir
hifas como ocurre con Candida albicans.

Mohos: Son hongos multicelulares. El elemento tubular que emerge
se denomina "hifa"; ste sigue creciendo y ramificndose, formando
un conjunto entrelazado al que se denomina "micelio" o thallus.
Parte de las hifas se introducen en el sustrato y forman el micelo
vegetativo, las que se proyectan hacia el exterior constituyen el
micelo areo, que puede presentar microscpicamente un aspecto
algodonoso, velloso, mate, plegad, etc... Estas caractersticas
fenotpicas sirven para una aproximacin taxonmica en la
identificacin. En el se producen los elemento de propagacin que
pueden ser esporas, conidios, fragemento de micelio, etc. En
micologa mdica y microbiologa a este conjunto visible sobre el
medio de cultivo se le denomina colonia.



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MTODOS DE CRECIMIENTO
Los hongos estn disponibles en un amplio rango de tamaos, formas y
colores. Diferentes tipos de hongos suelen tener diferentes necesidades
cuando se trata de las condiciones para su crecimiento, los requerimientos
varan en cuanto a la cantidad de luz, humedad e incluso los nutrientes
necesarios para que crezcan. A pesar de estas diferencias, el mtodo
principal de crecimiento para hongos es bsicamente el mismo.
Preparacin del sustrato
El suelo o material orgnico en el que crecen los hongos es conocido como
sustrato. El sustrato puede consistir de una variedad
de materiales incluyendo paja, arroz, estircol e incluso desechos de
animales. El estrato debe ser estirilizado utilizando una olla a presin u otro
mtodo de estirilizacin para prevenir la posible contaminacin y
crecimiento de bacterias que pueden daar los hongos en crecimiento o
presentar riesgos para la salud de quien los coma. Una vez estirilizado, el
sustrato se coloca en una bolsa, contenedor u otra locacin que cumpla con
los requerimientos de luz y humedad del tipo de hongo que est creciendo.
Inoculacin
La inoculacin es el proceso de introducir esporas de hongo en el sustrato
esterilizado. La inoculacin se realiza generalmente con una jeringa que
contiene agua destilada y esporas de hongo secas. La aguja de la jeringa
debe esterilizarse utilizando alcohol u fuego, y una vez que se enfra, se
inserta en el sustrato. La solucin de esporas usualmente se inyecta en el
sustrato en ubicaciones mltiples para aumentar la probabilidad de una
inoculacin exitosa y para aumentar la velocidad de la colonizacin del
hongo. Algunos cultivadores de hongos pueden utilizar un sustrato ms
pequeo para comenzar el proceso de inoculacin, permitiendo que el
sustrato prensado se colonice antes de moverlo a un rea ms grande de
sustrato.
Colonizacin
La colonizacin se refiere al proceso en el cual las esporas del hongo se
multiplican y se desarrollan como hongos dentro del sustrato. Blancas
cuerdas de hongo, llamadas micelio, crecen dentro de la masa del sustrato,
extendindose hasta que una gran parte del sustrato es cubierto. El micelio
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se desarrolla en cuerdas ms gruesas llamadas rizomorfos, y de stas,
pequeas estructuras conocidas como primordios comienzan a crecer. Se
puede aumentar la humedad para aumentar la tasa de colonizacin,
aunque hay que ser cuidadoso de agregar slo el agua suficiente para
mantener el sustrato hmedo.
Fructiferacin y cosecha
Una vez que aparecen los primordios, se desarrollarn eventualmente para
convertirse en hongos. A medida que aparecen ms primordios en el
sustrato colonizado, algunos comenzarn a crecer rpidamente. Puede
tomar semanas para que la mayora de los hongos alcancen su tamao
completo, momento en el cual pueden ser cosechados retorcindolos
cuidadosamente hasta despegarlos del material de sustrato. Los hongos
deberan ser cosechados cuando llegan a su madurez, despejando espacio
para que ms primordios puedan desarrollarse.
Brote
Los hongos que crecen dentro de contenedores usualmente riegan esporas
que se aferran a los lados de este contenedor. Un ligero roco de agua
destilada en las paredes del contenedor puede remover estas esporas y
darles acceso a los nutrientes que an se encuentran en el sustrato utilizado
para la cosecha inicial. Entre las nuevas esporas y los primordios que an
no se han desarrollado, varias cosechas pueden ser posibles del mismo
sustrato inoculado. Si no crecen hongos adicionales, o los rizomorfos
comienzan a decaer, entonces el sustrato debe ser descartado, pero an as
deberan intentar obtener nuevos brotes para sacarle el mximo provecho
a la cosecha.







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MTODOS DE TINCIN
El tamao de la mayora de las clulas bacterianas es tal que resultan
difciles de ver con el microscopio ptico. La principal dificultad es la falta
de contraste entre la clula y el medio que la rodea, y el medio ms simple
de aumentar el contraste es la utilizacin
de colorantes. Estos pueden emplearse
para distinguir entre tipos diferentes de
clulas o para revelar la presencia de
determinados constituyentes celulares,
tales como flagelos, esporas, cpsulas,
paredes celulares, centros de actividad
respiratoria, etc.
Las clulas generalmente son tratadas
para coagular el protoplasma antes de teirlas, proceso llamado fijacin.
Para bacterias, la fijacin por el calor es lo ms corriente, aunque tambin
puede fijarse con sustancias qumicas como formaldehido, cidos y
alcoholes. Despus de la fijacin, si se aade el colorante, no se producen
ulteriores cambios estruturales en el protoplasma. La fijacin se realiza
habitualmente en clulas que han sido fijadas sobre un portaobjetos.
tratando despus ste con el agente fijador, y siguiendo inmediatamente el
proceso de tincin. La fijacin produce habitualmente el encogimiento de
las clulas; la tincin, por el contrario, hace que las clulas aparezcan
mayores que lo que son realmente, de manera que las medidas de las
clulas que han sido fijadas o teidas no pueden realizarse con mucha
precisin.
La mayora de los colorantes son compuestos orgnicos que tienen alguna
afinidad especfica por los materiales celulares. Muchos colorantes
utilizados con frecuencia son molculas cargadas positivamente (cationes)
y se combinan con intensidad con los constituyentes celulares cargados
negativamente, tales como los cidos nucleicos y los polisacridos cidos.




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Examen de muestras al microscopio
Segn la manipulacin que efectuemos sobre la muestra a observar y segn
los colorarntes que empleemos durante el proceso, podemos hablar de
diferentes modalidades de tincin.
Sin tincin
No se utiliza ningn tipo de colorante.
Es el montaje directo hmedo o examen en fresco: las muestras se
extienden directamente sobre la superficie de un portaobjetos para su
observacin. El material que es demasiado espeso para permitir la
diferenciacin de sus elementos puede diluirse con igual volumen de
solucin salina fisiolgica estril. Se deposita suavemente un cubreobjetos
sobre la superficie del material.
Este tipo de preparacin se emplea para detectar trofozotos mviles de
parsitos intestinales como Giardia, Entamoeba, huevos y quistes de otros
parsitos, larvas y gusanos adultos, Trichomonas, hifas de hongos, etc.
Tincin simple
Se utiliza un solo colorante, por lo que
todas las estructuras celulares se tien
con la misma tonalidad (Tinta china,
Azul Metileno de Loeffler, Azul de
lactofenol).
El Hidrxido de potasio al 10% (solucin
de KOH) permite ver elementos de
hongos ya que el KOH digiere
parcialmente los componentes proteicos, por ejemplo de la clula husped,
pero no acta sobre los polisacridos de las paredes celulares de los hongos.
La tinta china o Nigrosina permite observar clulas levaduriformes
capsuladas (Cryptococcus), sobre todo en LCR. Los polisacridos capsulares
rechazan la tinta china y la cpsula aparece como un halo claro alrededor
de los microorganismos. Azul de metileno de Loeffler puede agregarse a las
preparaciones en fresco de heces para observar la presencia de leucocitos.
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Tincin diferencial
Se utilizan varios colorantes combinados. Las
estructuras celulares se diferencian en funcin de
los diferentes colorantes que fijan de acuerdo con
su propia constitucin qumica.
Los ejemplos clsicos seran la tincin de GRAM o la
de Ziehl-Neelsen.

La tincin GRAM
La tincin de Gram es uno de los mtodos de
tincin ms importantes en el laboratorio
bacteriolgico y con el que el estudiante
debe estar perfectamente familiarizado. Su
utilidad prctica es indiscutible y en el
trabajo microscpico de rutina del
Laboratorio de Microbiologa las referencias
a la morfologa celular bacteriana (cocos,
bacilos, positivos, negativos, etc.) se basan
justamente en la tincin de GRAM
Descrita en forma breve, la secuencia de la tincin es la siguiente: el Frotis
fijado con calor se tie 1 min con Violeta Cristal, se lava con agua, se cubre
con solucin Yodada durante 1 min y se lava de nuevo con agua, decolorar
con mezcla alcohol etlico/acetona. Escurrir y cubrir con Safranina (color de
contraste) durante 20 seg. Lavar y secar.
Esta tincin se denominada as por el bacterilogo dans Christian Gram,
quien la desarroll en 1844. Sobre la base de su reaccin a la tincin de
Gram, las bacterias pueden dividirse en dos grupos, Gram positivas y
gramnegativos (en este caso, los trminos positivo y negativo no tiene nada
que ver con carga elctrico, sino simplemente designan dos grupos
morfolgicos distintos de bacterias).
Las bacterias Gram-positivas y Gram-negativas tien de forma distinta
debido a las diferencias constitutivas en la estructura de sus paredes
celulares. La pared de la clula bacteriana sirve para dar su tamao y forma
al organismo as como para prevenir la lisis osmtica.
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Tincin RODAMINA-AURAMINA
Los cidos miclicos de las paredes celulares de las micro bacterias poseen
afinidad para los fluorocromos auramina y rodamina. Estos colorantes se
fijan a las bacterias, que aparecen de color amarillo o naranja brillante
contra un fondo verdoso. El permanganato de
potasio, empleado como contraste, evita la
fluorescencia inespecfica. Todos los
microorganismos cido-alcohol resistentes,
incluyendo los esporozoarios parsitos, se tien
con estos colorantes.
Tincin NARANJA DE ACRIDINA
El fluorocromo naranja de acridina se une al cido nucleico ya sea en su
forma nativa o desnaturalizada. En algunas preparaciones de naranja de
acridina, el color de la fluorescencia puede variar, dependiendo del pH y de
la concentracin. El naranja de acridina ha sido empleado como colorante
vital, que da una fluorescencia verde si el microorganismo est vivo y roja
si est muerto. De todos modos, como el colorante se intercala en el cido
nucleico, el germen viable se inactivar poco tiempo despus de la tincin.
El uso de naranja de acridina para detectar la presencia de bacterias en los
hemocultivos ha sido ampliamente aceptado. De hecho, un gran cantidad
de estudios han demostrado que la tincin de hemocultivos con naranja de
acridina es tan sensible como el subcultivo ciego para la deteccin inicial de
hemocultivos positivos.
Tincin ZIEHL-NEELSEN (BAAR)
Las paredes celulares de ciertos parsitos y bacterias.
contienen cidos grasos (cidos miclicos) de cadena
larga (50 a 90 tomos de carbono) que les confieren la
propiedad de resistir la decoloracin con alcohol-
cido, despus de la tincin con colorantes bsicos.
Por esto se denominan cido-alcohol resistente. Las mico bacterias como
M. tuberculosis y M. marinum y los parsitos coccdeos como
Cryptosporidium se caracterizan por sus propiedades de cido-alcohol
resistencia. La coloracin clsica de Ziehl-Neelsen requiere calentamiento
para que el colorante atraviese la pared bacteriana que contiene ceras.Se
ha desarrollado una coloracin de cido-alcohol resistencia modificada que
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diferencia las especies de Nocardia (bacterias ramificadas filamentosas
cuyas paredes celulares contienen cidos-grasos de unos 50 tomos de
carbono), de los actinomiceos (muy semejantes pero no cido-alcohol
resistentes). Nocardia spp son decoloradas por la mezcla cido-alcohol
estndar pero no por un tratamiento ms suave con cido sulfrico 0,5 a
1%. Estos microorganismos se denominan cido-alcohol resistentes
parciales o dbiles.
Tincin BLANCO DE CALCOFLOR
Las paredes celulares de los hongos fijan el
colorante blanco de calco flor aumentando
considerablemente su visibilidad en los tejidos y
otras muestras. Segn fue descrito por Hageage y
Harrington, este colorante se emplea en lugar de
KOH al 10% para el examen inicial de los
materiales clnicos. Tambin se emplea para
aumentar la visualizacin de los elementos morfolgicos de los cultivos
puros de los hongos. En algunos laboratorios ha suplantado al azul de
lactofenol en muchas aplicaciones. Los organismos florecen con luz blanco-
azulada o verde manzana, segn la fuente luminosa que se utilice.
PRUEBAS BIOQUMICAS
Con frecuencia, la identidad de una especie requiere que se conozca de
manera detallada su actividad bioqumica, porque otras caractersticas no
son suficientemente distintivas o diferenciales.
En el laboratorio disponemos de numerosas tcnicas para la caracterizacin
bioqumica de una especie.
Adems de los productos finales de los procesos metablicos, tambin se
necesita conocer con detalle cmo se producen estos cambios, como
ocurren paso a paso las reacciones qumicas, cules enzimas intervienen,
cuales son los productos intermediarios adems de que se deben
reconstruir las secuencias de las reacciones bioqumicas que tienen lugar
dentro de la clula.
En general el microorganismo se cultiva en medios que contienen una
sustancia nutritiva especfica o sustrato y despus de la incubacin del
cultivo se examina para ver los cambios qumicos que hayan ocurrido.
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Kligler Hierro Agar

Medio de cultivo frecuentemente usado en microbiologa de alimentos
para la diferenciacin de entero bacterias, en base a la fermentacin de
glucosa y lactosa, y a la produccin de cido sulfhdrico.
En el medio de cultivo, la peptona de carne y la triptena, aportan los
nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano.
La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables.
El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la produccin de
cido sulfhdrico, el citrato de hierro y amonio, es la fuente de iones
Fe 3+, los cuales se combinan con el cido sulfhdrico y producen
sulfuro de hierro, de color negro.
El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene
el balance osmtico. El agar es el agente solidificante.

TSI Agar
Medio universalmente empleado para la diferenciacin de entero
bacterias, en base a la fermentacin de glucosa, lactosa, sacarosa y a la
produccin de cido sulfhdrico.
En el medio de cultivo, el extracto de carne y la pluripeptona, aportan
los nutrientes adecuados para el desarrollo bacteriano.
La lactosa, sacarosa y glucosa son los hidratos de carbono
fermentables.
El rojo de fenol es el indicador de pH, y el cloruro de sodio mantiene
el balance osmtico.
Por fermentacin de azcares, se producen cidos, que se detectan
por medio del indicador rojo de fenol, el cual vira al color amarillo en
medio cido.





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Lisina Hierro Agar
Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos,
especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilacin /
desaminacin de la lisina y en la produccin de cido sulfhdrico.
El citrato de hierro y amonio, y el tiosulfato de sodio, son los
indicadores de la produccin de cido sulfhdrico.
El purpura de bromocresol, es el indicador de pH, el cual es de color
amarillo a pH igual o menor a 5.2, y de color violeta a pH igual o mayor
a 6.8.
Por decarboxilacin de la lisina, se produce la amina cadaverina, que
alcaliniza el medio y esto produce el viraje del indicador al color
violeta.
La decarboxilacin de la lisina, tiene lugar en medio cido, por lo que
es necesario que la glucosa sea previamente fermentada.

MIO Medio
Medio usado para la identificacin de Enterobacteriaceae en base a su
movilidad, actividad de ornitina decarboxilasa y produccin de indol.
Medio de cultivo semislido, altamente nutritivo debido a la
presencia de extracto de levadura, peptona y triptena.
Adems, la triptena aporta grandes cantidades de triptofano,
sustrato de la enzima triptofanasa, para la realizacin de la prueba
del indol.
La dextrosa es el hidrato de carbono fermentable, la ornitina es el
sustrato para la deteccin de la enzima ornitina decarboxilasa, el
prpura de bromocresol es el indicador de pH, que en medio alcalino
es de color prpura y en medio cido es amarillo.
Por su composicin, es posible detectar 3 reacciones en un mismo
tubo: movilidad, presencia de ornitina decarboxilasa e indol.
La presencia de acidez, otorga condiciones ptimas para la actividad
de la enzima ornitina decarboxilasa, la cual decarboxila la ornitina
presente.
Por decarboxilacin, se alcaliniza el medio, con el consecuente viraje
del indicador hacia el color prpura.

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SIM Medio
Es un medio semislido destinado a verificar la movilidad, produccin de
indol y de sulfuro de hidrgeno en un mismo tubo. Es til para diferenciar
miembros de la familia Enterobacteriaceae.
El triptfano es un aminocido constituyente de muchas peptonas, y
particularmente de la triptena, que puede ser oxidado por algunas
bacterias para formar indol.
En el proceso interviene un conjunto de enzimas llamadas
triptofanasa.
El indol producido se combina con el aldehido del reactivo de Kovac
s o de Erlich, para originar un compuesto de color rojo.
Cepas mviles: producen turbidez del medio, que se extiende mas
all de la lnea de siembra.
Cepas inmviles: el crecimiento se observa solamente en la lnea de
siembra.
Cepas SH2 positivas: ennegrecimiento a lo largo de la lnea de
siembra o en todo el medio.
Cepas SH2 negativas: el medio permanece sin cambio de color.
Urea
Medio utilizado para la identificacin de microorganismos, en base a la
actividad uresica. Es particularmente til para diferenciar Proteus spp. de
otros miembros de la familia Enterobacteriaceae.
Este medio de cultivo, formulado por Rustigian y Stuart, presenta
bajo contenido de nutrientes y alta capacidad buffer.
El extracto de levadura es la nica fuente de carbono, nitrgeno,
vitaminas y cofactores, y aporta los nutrientes esenciales para el
desarrollo bacteriano.
Las sales de fosfatos constituyen el sistema buffer, el rojo de fenol es
el indicador de pH y la urea es el sustrato de la enzima ureasa.
Simmons Citrato Agar
Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la
capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa.
El cloruro de sodio mantiene el balance osmtico, y el azul de
bromotimol es el indicador de pH, que vira al color azul en medio
alcalino.
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CONCLUSIN

Durante este trabajo los conocimientos adquiridos fueron
bastantes e importantes para lo que conlleva esta materia, se
podra decir que queda ms que aprendido en especial, por as
decirlo, aplicar tcnicas de identificacin para hongos y levaduras
los cuales son indispensables para la microbiologa y la micologa
aplicada con ello el saber operar hongos y levaduras , tambin
aplicar las tinciones para distinguir estos distintos tipos de
organismos microscpicos, en este caso hongos y a manejarlos, de
igual manera se determin como aplicar mtodos para la
reproduccin y crecimiento de hongos y levaduras, juntos con su
tincin para reconocer su morfologa y estructura anatmica y con
ello conocer las tcnicas de su identificacin mediante.














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BIBLIOGRAFIA

http://es.scribd.com/doc/29029546/tincion-de-hongos

http://www.danival.org/fungi/clinica/fungi_clin.html

http://biologia.laguia2000.com/botanica/metabolismo-de-los-
hongos

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