evidncia no Brasil como entomopatgenos Os Hifomocetos ou fungos imperfeitos caracterizam-se pela ausncia do teleomofo (forma perfeita ou sexuada) no ciclo roti- neiro e so includos na classe provisria dos Deuteromicetos. Essa ausncia normal da forma sexuada ou perfeita obriga-os, no processo de evoluo, a outros mecanis- O CONTROLE BIOLGICO DE INSETOS NOCIVOS AGRICULTURA COM O EMPREGO DE FUNGOS IMPERFEITOS OU HIMOFICETOS INSETOS CONTROLE BIOLGICO DE Leon Rabinovitch, Clara de Ftima G. Cavados & Marli Maria Lima Pesquisadores do Instituto Oswaldo Cruz - FIOCRUZ Foto cedida pelos autores. Os fungos como agentes de controle biolgico Possuindo o Brasil extensas reas ocupa- das por agricultura intensiva e com boas condies climticas, os insetos-praga cau- sam danos considerveis e prejudicam boa parte da colheita. Por causa disso, a agricul- tura brasileira torna-se a maior usuria de pesticidas qumicos, muitas vezes antieconmicos, e, na grande maioria, txi- cos, que, sendo inadequadamente mani- pulados, resultam problemas no s para os operadores da lavoura, como em ps- colheita para os consumidores dos produ- tos tratados. Esse pesticidas fazem surgir ainda a mdio e longo prazo, efeitos de poluio ambiental e, pelo uso de dosa- gens e de alvos inadequados, resistncia de artrpodes a esses produtos com o consequente o desequilbrio biolgico. Tais problemas vm reforar a necessidade de incentivos a um manejo mais racional dos agroecossistemas, com emprego de prti- cas integradas, inclunda a resistncia varietal de cultivares, o uso de elementos sadios de propagao vegetal e, destacadamente, o uso do controle biolgico natural e do aplicado. Assim, poderia ser diminuida a utilizao dos pesticidas qumicos e passa- do o manejo de prticas culturais, inclusive seu controle biolgico, a ser considerado uma necessidade de proteo fitossanitria sustentvel. Existem vrios exemplos do aparecimento de novas pragas resistentes aos pesticidas convencionais. Entre os agentes de biocontrole de insetos, os fungos preenchem um importante pa- pel, principalmente no caso de insetos dotados de aparelho bucal sugador (Hemiptera, Homoptera). Os fungos entomopatognicos, alm de constiturem 80% das enfermidades responsveis pelos surtos epizoticos dos ecossistemas e agroecossistemas, so de mais fcil disse- minao, pois algumas espcies possuem a capacidade de penetrar atravs da cutcula ntegra de artrpodes e atingir diretamente a hemocele, at mesmo no caso de cochonilhas providas de carapaa (Evans & Prior, 1990). Em se tratando de fungos imperfeitos como os Hifomicetos, os propgulos viveis (condios ou fragmentos de hifas), a colo- nizao do inseto e a exteriorizao do fungo sobre o cadver infectado permitem a sua rpida disseminao pelo vento. Acresce ainda que os Hifomicetos e seus gneros entomopatognicos mais repre- sentativos (Figura 1) desenvolvem-se com certa facilidade em substratos de culturas artificiais (meios de cultura), como gros de arroz. Tais meios de cultura constituem substratos simples e mais econmicos para obteno de biomassa com abundante produo de propgulos. Em se tratando de microorganismos mais especficos na patogenicidade certos insetos-alvo, verifi- ca-se um certo escape na contaminao de artrpodes, tais como visitadores, polinizadores e inimigos naturais. Entre as desvantagens dos fungos como agentes de biocontrole ocorrem certas dependncias de condies ambientais adequadas (microclima da planta) para a induo de epizootias. Caberia tambm lembrar que o emprego dos entomopatgenos nem sem- pre dispensa a complementao de agroqumicos desde que haja uma compa- tibilidade biolgica com os produtos em- pregados. O uso de inseticidas microbianos acha-se tambm regulamentado em diver- sos pases, inclusive no Brasil. Tais medi- das normativas prescritas por entidades governamentais inclui o registro dos bioinseticidas e acham-se ligados segu- rana oferecida aos usurios, impactos no meio ambiente e implicaes na sade pblica. Algumas dessas exigncias vm limitando o emprego dos defensivos biol- gicos, inclusive dos obtidos atravs da manipulao gentica. Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 11 Metarrhizium anisopliae (mais co- nhecida) e M. flavoviride tm potencialidade no biocontrole de gafanhotos na regio Centro-Oeste (vidos e Ferreira, 1977). A primeira espcie, M. anisopliae, tem sido o entomopatgeno mais utilizado, prin- cipalmente na agroindstria canavieira. Foi primeiramente mani- pulada por Metschikoff em 1897, no combate a larvas de um besouro de batata doce (Alves, 1986). O fungo constitudo de duas variedades, a anisopliae ou minor e a major, de acordo com os tamanhos dos condios, sendo a primeira a O entomopatgeno tem sido utilizado no controle das cigarrinhas-das-pastagens, Deois flavopicta e Zulia enteriana, obser- vando-se em todos os casos que as reas- foco tratadas achavam-se abaixo do nvel de controle, o que Fawcett (1948) denomi- nou de ponto de saturao. O problema tem se manifestado com gravidade nos Estados de Minas Gerais, Bahia e Rio de Janeiro.O fungo produz um metablito, a destruxina, incuo para o homem. O estu- do de diversos isolados de M. anisopliae provenientes de algumas regies do Brasil permitiu a seleo de alguns isolados mais eficientes no biocontrole de diversos inse- tos-pragas (Alves, 1986). Com relao formiga sava (Atta sexdens) foi realizado um ensaio na Jari Florestal, no Amap, que apresentou um controle em 60 % dos formigueiros tratados com o fungo cultiva- do em gros de arroz, que foram dispostos sob a forma de iscas, protegidos contra a chuva (copinhos impermeveis invertidos) e distribudos pelos olheiros da sede do sauveiro. O isolado foi cedido pelo Dr. Aurino F. de Lima, da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro (Figura 5). J existem formulaes especiais do fungo registradas no Brasil sob o nome de Metabiol e de Biomax. Outro Hifomiceto menos manipulado que o fungo anterior, porm mostrando bom potencial entomopatognico o Beauveria bassiana, que ocorre em condies naturais enzoticamente ou provocando epizootias em algumas ocasies propcias (Alves, 1986). Observao pessoal de uma epizootia ( Robbs, no publicado, 1986) foi registrada em Alegre, ES, zona nobre da cafeicultura capixaba, com ndice de ataque de 100% do fungo a adultos da broca-do-caf (Hypothenemus hampei). A epizootia do fungo deu-se por ocasio da penetrao do besouro nas cerejas ainda verdes do cafeeiro (Coffea arabica). O fato indica a otimizao da poca de infestao dos adultos para a introduo da biomassa do entomopatgeno no agroecossistema cafeeiro, em uma fase de elevada suscetibilidade do inseto, o que, consequentemente, exi- ge a necessidade de se co- nhecer a bioecologia da pra- ga para que se tenha o bom xito no controle biolgico. O fungo tambm metaboliza t oxi nas, no caso a beauveracina. Nos Estados Uni dos, o fungo comercializado sob as deno- minaes de Boverin e na Unio Sovitica, de Biotrol FBB. O fungo Nomuraea rileyi vem sendo muito estudado nos ltimos anos como entomopatgeno, particular- mente de larvas (lagartas) de Lepidopteros. Figuras 1 e 2: Pulges (adultos e formas jovens) e mosca-branca (adultas e formas jovens) so controlados com aplicaes de fungo Cladosporium herbarum. mos de recombinao gentica, que resul- tam no melhoramento de estirpes entomopatognicas, com ganhos em patogenicidade e adaptao ao meio ambi- ente adverso. Estudos conduzidos no Ins- tituto de Gentica da "Escola Superior de Agricultura Lus de Queiroz", da Universi- dade de So Paulo, em Piracicaba, revela- ram que alguns desses Hifomicetos pode- riam ser induzidos ao melhoramento atra- vs de um ciclo parassexual. Ainda um novo processo, designado de parameiose, facilita a obteno de recombinantes, que por meio de ensaios laboratoriais, vm mostrando em alguns casos, sua superiori- dade comparada s linhagens parentais. Em algumas regies de clima ameno, os Zigomicetos, representados, principalmen- te, pelos gneros Entomophithora spp., Erynia radicans, Massospora sp. e outros, embora assinalados no Brasil e que cau- sam, no raramente, epizootias em artrpodes, possuem certas exigncias nutricionais e climticas, o que torna mais difcil o cultivo de biomassas e de condi- es ideais para liberao do inculo. Portanto acham-se entre os Hifomicetos os fungos importantes e principalmente cons- titudos por formas filamentosas (hifas) septadas e geralmente frteis (conidiforos) que servem de suporte aos condios isola- dos ou agregados (Figura 1) e de colorao clara/hialina (Moniliceas) ou escura (Dematiceas). Os Hifomicetos tm apre- sentado entre ns maior potencialidade de ser empregado no controle biolgico apli- cado, tanto o clssico (patgenos exticos regio) como o aumentativo (patgenos nativos na regio). Esses entomopatgenos, alm de um ciclo de saprognese que mantm um inculo vivel em substratos orgnicos, possuem condios ou clamidosporos (Cladosporium) persisten- tes e viveis na rea de influncia do inseto praga. Entre os Hifomicetos de maior uso no Brasil, destacam-se os gneros: Metarrhizium spp., Beauveria spp., Nomurea rileyi e Verticillum lecanii, classifica- dos dentre as Moniliceas e, Cladosporium spp., como nica Dermaticea. Seguem-se comentri- os sobre o uso de tais fungos na agriculturabrasileira. mais utilizada entre ns. O entomopatgeno apresenta uma grande variedade gentica decorrente do processo de heterocariose, que ou resulta no aparecimento de algu- mas raas com diferentes graus de viruln- cia, especificidade a vrios insetos e adap- tao a condies ambientais diversas e, com algumas estirpes, resistncia aos raios ultravioleta. Os caracteres mais considera- dos foram: a produo de condios em subst rat os nat urai s (arroz), boa exteriorizao em cadveres de insetos, garantindo a presena do inculo, e tole- rncia aos raios ultravioleta. O ciclo de relaes patgeno-hospedeiro (M. anisopliae x cigarrinha), ilustrado na Figura 2. Aps sua introduo no controle cigarrinha-das-folhas-de-cana-de-acar, no Nordeste, o fungo passou a ser utilizado em larga escala (Guagliumi, 1970). 12 Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento Figura 3: Formiga (soldado) Atta sp. atacada pelo fungo M. anisopliae (inoculao artificial). Bibliografia citada: ALVES, S.B., 1986. Fungos Entomopatognicos. In: S. B. Alves (coordenador). Controle Microbiano de Insetos. Ed. Manole, So Paulo, Brasil p. 73-126. VIDOS, M.F.D. e FERREIRA, L.F. 1977. Gafanhotos: a maldio milenar. Biotecnologia. Cincia e Desenvolvimen- to. Ano 1, n 2 (julho/agosto) p. 8-11. BITANCOURT, A.A. 1935. 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Relatrio de ativida- des fitossanitrias na MAISA (Mossor Agroindustrial S.A., Mossor, RN). No publicado. No Brasil, os produtores de soja j conhecem a sua grande eficincia no controle biolgi- co natural da lagarta da soja (Anticarsia gemmatalis) coincidindo com perodos chuvosos e temperaturas amenas. A alternncia de perodos secos (veranicos) e chuvas importante na disseminao dos condios do fungo, particularmente nas fases pr-enzoticas (Alves, 1986), que nos Esta- dos Unidos, so comercializados sob o nome de Mycar. Um Hifomiceto que muito freqentemente ataca cochonilhas (Hemiptera, Homoptera) o entomopatgeno Verticillium lecanii, descrito no Brasil por Viegas (1939); afetando a cochonilha ver- de (Coccus viridis) do cafeeiro e de outras plantas no Estado de So Paulo. O Entomopatgeno, alm de cochonilhas, ata- ca igualmente pulges e moscas brancas (Aleirodidea), Figuras 3 e 4, mantendo no agroecossistema tais populaes em nveis de equilbrio ou no limiar de no causar danos. As condies favorveis para o in- cio de epizootias situam-se entre 20 e 25 C, com a umidade elevada do ar, limitando as aplicaes do fungo. Na Gr-Bretanha, o fungo vem sendo bastante utilizado em estu- fas, contra pulges (afdios) e moscas bran- cas, sendo comercializado sob a denomina- o de Vertalec e de Mycotal, e so produtos compatveis em mistura com alguns inseti- cidas utilizados. Quanto ao Hifomiceto Cladosporium spp., o nico entomopatgeno includo na famlia Dematiaceae, foi assi- nalado por Bitancourt (1935) parasitando pulges e mosca branca em folhas de man- dioca, no Estado de So Paulo, identificado como C. herbarum var. aphidicola, sendo denominado, respectivamente, de mofo e dos afdios e aleiroddeos. Viegas (1940), estudando o mesmo fungo em culturas de mandioca, nos municpios de Campinas e Piracicaba, no Estado de So Paulo, iden- tificou-o como Cladosporium herbarum, sugerindo maiores estudos quanto taxonomia do patgeno. O mesmo autor verificou que, inicialmente, o fungo coloni- za as gotculas aucaradas habitualmente expelidas pelos insetos (saprognese) atravs da abertura anal, passando posteriormente, para o interior do corpo e introduzindo um ciclo de parasitismo oportunista. Fawcet (1948) menciona bibliografia de Cladosporium spp. afetando diversas cochonilhas e considerando o fungo como simples saprfita, semi-parasita ou parasita fraco. Farias e Santos Filho (1992) isolaram os fungos Botrytis sp. e Cladosporium sp. atacando ninfas de mosca branca (Aleurothrixus aepim) das folhas de mandi- oca na Bahia, e cultivando-os em meio gar/ arroz. Os propgulos da biomassa constitu- dos por suspenso de condios (3x105 mL) pulverizados sobre as colnias de insetos apresentou, inicialmente, uma boa mortali- dade (3 dias); aps 10 dias a contagem foi de 47,8% para Botrytis e somente de 28,6% para Cladosporium. Robbs (1994), traba- lhando com uma estirpe de Cladosporium herbarum isolada de ninfas de mosca bran- ca da mandioca, em Santa Vitria, no Esta- do de Minas Gerais, em plena estiagem no cerrado, obteve timos resultados (90%) so- bre pulges (Aphis gossypii e Myzus persicae) e atomizou suspenses de propgulos de biomassa em cerca de 400 hectares de aceroleira (Malpighia emarginata) na fa- zenda da MAISA (Mossor agroindustrial S. A ) no Rio Grande do Norte. As aplicaes eram realizadas nos focos infestados e os resultados asseguraram eficiente controle biolgico dos pulges. O mesmo xito foi obtido no controle do pulgo (A. gossypii) do cajueiro ano. Atualmente a empresa vem empregando o entomopatgeno para o con- trole regular dos pulges da acerola e do cajueiro, banindo o uso semanal de insetici- das, para assegurar a eliminao de pulges na rea. O Cadosporium cladosporioides utilizado por Sudo e outros (1996) para o controle do pulgo do fumo ( Myzus nicotianae), com alta eficincia na regio do sul no obteve a mesma resposta em acerola no semi-rido do Rio Grande do Norte. Os ensaios posteriores levados a efeito em pulges (Aphididae e mosca branca (Aleyrodidae) indicam as possibilidades de explorar o po- tencial do Cladosporium spp. sobre insetos que excretem substncia aucarada, que tem sido como principal porta de entrada do fungo. Esse entomopatgeno poder ser clas- sificado como oportunista. Algumas tentati- vas feitas para o controle da mosca branca Bemisia argentifolii na cultura do melo no tem demonstrado bons resultados, possi- velmente por faltar uma estirpe mais especi- alizada ou uma tcnica mais adequada de aplicao no campo. Biotecnologia Cincia & Desenvolvimento 13