Receptores tipo Toll y el reconocimiento de patgenos

La inmunidad de los vertebrados se puede dividir en dos tipos: Innata

y Adaptativa. La respuesta adaptativa est regulada por linfocitos T y B
distribuidos clonalmente y se caracterizan por su especificidad y memoria. El
reconocimiento depende de la generacin al azar de un repertorio muy
diverso de receptores antignicos, los receptores de clulas T y B, seguidos
por una seleccin y expansin clonal de receptores con una importante
especificidad. Este mecanismo desarrolla memoria inmunolgica, una ventaja
muy importante, sin embargo, su limitacin principal radica en que las clonas
o familias especficas necesitan expandirse y diferenciarse en clulas
efectoras para que puedan participar en las defensas del husped. Por lo
tanto, la respuesta inmunolgica adaptativa inicial o primaria tpicamente se
tarda en aparecer entre 7 y 10 das (Figura 1).



Figura 1. Despus del contacto inicial con el antgeno, se incrementan los linfocitos CD4 y
CD8 circulantes y a continuacin se elevan las inmunoglobulinas, empezando con la IgM.

Por lo anterior, el control de una infeccin durante los primeros das
depende del antiguo, evolucionista y universal sistema inmunolgico innato
(SII). Sus funciones principales incluyen: opsonizacin, activacin de las
cascadas de complemento y de coagulacin, fagocitosis, activacin de
seales proinflamatorias y apoptosis. El SII tambin tiene una importante
funcin en la activacin y regulacin de la respuesta inmunolgica adaptativa
a travs de la induccin de molculas coestimuladoras y citocinas. En
contraste con los receptores clonados tpicos, expresados por los linfocitos T
y B, el SII utiliza tipos no clonados como molculas de reconocimiento
llamados receptores de reconocimiento de patrones, los cuales
identifican estructuras moleculares caractersticas localizadas en las paredes
de las diferentes familias de patgenos.

Receptores de reconocimiento de patrones (PRR) y
patrones moleculares asociados a los patgenos (PAMP)

Como sealamos, el SII reconoce y responde a unas cuantas
estructuras altamente conservadas presentes en los organismos microbianos,
mientras que el sistema inmunolgico adaptativo puede reconocer cada
posible determinante antignico. Las estructuras de los patgenos
microbianos son llamadas patrones moleculares asociados al patgeno
(PAMP). Los receptores de los componentes celulares del sistema inmune
innato identifican a estos PAMP mediante receptores de reconocimientos de
patrones.

Los PAMP incluyen lipopolisacridos bacterianos, peptidoglicanos,
cidos lipoteicoicos, mananos, ARN y ADN bacteriano y glucanos. Solamente
se producen en los patgenos microbianos y no en el husped. Generalmente
son estructuras invariantes compartidas por toda una clase de patgenos
bacterianos, por ejemplo, los lipopolisacridos de las bacterias gram-
negativas. Por lo tanto, el receptor de reconocimiento del patrn de
lipopolisacridos en las clulas del husped puede detectar la presencia de
virtualmente cualquier bacteria gram-negativa.

Los receptores de reconocimiento de los patrones se expresan en las
clulas presentadoras de antgenos como los macrfagos, las clulas
dendrticas y las clulas B, y representan un vnculo con la respuesta
inmunolgica adaptativa. Los receptores de reconocimiento de patrones del
mismo tipo tienen especificidades idnticas. Una vez que estos receptores
interactan con un PAMP en el organismo microbiano, las clulas efectoras
son activadas inmediatamente para entrar en accin sin la necesidad de una
mayor proliferacin o diferenciacin, caracterstica que distingue a este
proceso de la respuesta adaptativa.

Funcionalmente, los receptores de reconocimiento de patrones pueden
dividirse en tres grupos: secretados, endocticos y de seal. Los de tipo
secretor funcionan como opsoninas que se unen a la pared celular microbiana,
con lo cual se facilita la fagocitosis. Por ejemplo, la lectina de unin a la
manosa (colectina) es un receptor que se une a residuos de manosa y
fructosa en las paredes celulares microbianas, e inicia la va de la lectina de
activacin del complemento.

Las protenas de unin a la manosa son secretadas en el suero como
parte de la respuesta de fase aguda y pueden unirse a los carbohidratos de
las bacterias gram-positivas y gram-negativas, as como algunos virus y
parsitos. Las lectinas que se unen a la manosa se asocian a dos
serinaproteasas: las serinaproteasas 1 y 2 asociadas a la lectina de unin a la
manosa (MASP-1 y MASP-2) similares a las proteasas relacionadas con el
primer componente del complemento que lleva a la escisin de C3 y a la
activacin de la C3 convertasa. La familia de protenas de la ficolina
recientemente descrita utiliza tambin las MASP para la activacin de la va
de la lectina del sistema del complemento. Aunque esta va de unin a la
manosa lleva a la activacin de la cascada del complemento, a diferencia de
la va clsica del complemento, no se requieren complejos de antgeno-
anticuerpo.

El grupo funcional endoctico de los receptores de reconocimiento de
patrones es mediador de la captacin y liberacin de patgenos microbianos
en los fagolisosomas. El organismo microbiano es digerido, resultando en
pptidos que pueden ser presentados a las molculas del complejo mayor de
histocompatibilidad (MHC) en la superficie de los macrfagos. Esto sirve
como otro vnculo entre el sistema innato y adaptativo.

Existen varios grupos de PRR que se secretan y expresan sobre la superficie
celular o que residen en compartimentos intracelulares. Entre ellos se
encuentran los receptores tipo Toll (TLR), los cuales constituyen una de las
familias ms importantes de PRR.

Caractersticas de la familia TLR

Los TLR son protenas que se han conservado durante la evolucin, las
ms antiguas se han identificado expresndose en Caenorhabditis elegans
(Figura 2A), un nematodo de 1 mm de longitud y se caracterizan por un
dominio repetido extracelular de leucina enriquecida y un dominio intracelular
de receptor tipo Toll/IL-1 (TIR). Las repeticiones de leucina enriquecida se
encuentran tanto en las protenas citoplsmicas como transmembranales y
estn involucradas en el reconocimiento de ligandos y seales de
transduccin.

Los TLR de mamferos son una familia de cuando menos 12 protenas
de membrana en el ratn y 10 en los humanos que disparan la respuesta
inmunolgica innata a travs de vas de sealizacin dependientes de factor
nuclear B (NF-B) y del factor regulador de interfern (IRF). El primer
miembro identificado en la familia TLR fue una protena implicada en el
desarrollo dorsoventral embrionario de la mosca Drosophila (Figura 2B),
posteriormente Gay y Keith demostraron que el dominio intracelular de
Drosophila Toll mostraba fuertes similitudes con el dominio intracelular del
receptor de interleucina-1 de mamferos (IL-1), y finalmente Lemaitre y col
demostraron que Drosophilla Toll estimulaba la produccin de protenas
antimicrobianas en Drosophila melanogaster, con un papel crucial para
determinar la resistencia de D. melanogaster a la infeccin con hongos y
bacterias Gram positivas.




Figura 2A. Caenorhabditis elegans, nematodo donde se han encontrado los TLR ms
antiguos. B. Mosca Drosophila melanogaster, donde se encontr TLR semejante a IL-1.

Los miembros de la familia TLR son receptores de patrones de
reconocimiento (PRR) que colectivamente reconocen lpidos, carbohidratos,
pptidos y estructuras de cidos nucleicos que son ampliamente expresados
por diferentes grupos de microorganismos (Figura 3).




Figura 3. Loa receptores TLR trabajan en pares o dmeros (homodmeros o heterodmeros).

El dominio intracelular de TLR, dominio TIR, es un mdulo de
interaccin protena-protena conservado, el cual tambin se encuentra en
numerosas protenas transmembranales y citoplsmicas de plantas, gusanos,
artrpodos y a veces bacterias. Interesantemente, se ha visto que todas esas
protenas que contienen TIR tienen una funcin en el mecanismo de defensas
del husped, convirtiendo al dominio TIR una de las seales ms tempranas
de la evolucin.

Los receptores de reconocimiento de patrones de seal pueden activar
tambin la transduccin de las vas de la seal, con la expresin subsiguiente
de diversos genes relacionados con la inmunidad que incluyen las citocinas
proinflamatorias y las citocinas que modulan la inmunidad. Los receptores
semejantes a los TLR son parte de los receptores de reconocimiento de
patrones de seal que proporcionan transduccin importante de seales que
llevan a la activacin de diversos genes asociados a la respuesta
inmunolgica especfica. Los TLR confieren reconocimiento a una amplia
gama de organismos microbianos. Representan el primer punto de contacto
entre el sistema inmune del husped y un patgeno potencial.



























Quimocinas, I nmunidad Innata e inflamacin

El Sistema Inmunolgico (SI) consiste de billones de clulas mviles
que viajan a lo largo del cuerpo. En su necesidad de seales de comunicacin
para navegar en tiempo y espacio y formar redes arquitectnicas de rganos
propios, el SI recurre a las quimocinas. Las quimocinas son bloques, de la
mayor versatilidad, para construir sistemas coherentes y funcionales de
seales de comunicacin intercelular. Los mensajes de las quimocinas son
decodificados a travs de receptores especficos de la superficie celular. Las
quimocinas fijadas desencadenan cascadas de mediadores secundarios
intracelulares que encienden programas funcionales intrnsecos especficos de
la clula, incluyendo migracin direccional, el efecto mejor conocido de las
quimocinas. La suma de reflejos celulares individuales resulta en una
respuesta sistmica compleja durante las condiciones de reposo o en las
reacciones inmunolgicas innata y adaptativa.

Las quimiocinas (citocinas quimiotcticas) son pequeas protenas
fijadoras de heparina que dirigen el movimiento de de los leucocitos
circulantes a sitios de inflamacin o dao. Originalmente se estudiaron por su
papel en la inflamacin, sin embargo, actualmente las quimocinas y sus
receptores son conocidas por jugar un papel crucial en dirigir el movimiento
de clulas mononucleares a travs del cuerpo, inducir la respuesta
inmunolgica adaptativa y contribuir a la patognesis de varias enfermedades.

Las aproximadamente 50 quimocinas humanas estn agrupadas en
cuatro familias sobre la base de diferencias en su estructura y funcin. La
familia ms grande consiste de quimocinas CC, llamadas as porque las
primeras dos de los cuatro residuos de cisteina de esas molculas estn
adyacentes una junto a otra. Las quimocinas CC atraen clulas
mononucleares a sitios de inflamacin crnica. La quimocina CC mejor
caracterizada es la protena quimoatrayente de monocitos 1 (MCP-1),
denominada ligando de quimocina CCL2 en la nomenclatura sistemtica. Es
una potente agonista para monocitos, clulas dendrticas, clulas T de
memoria y basfilos. Otras quimocinas CC incluyen a la protena inflamatoria
de macrfagos (MIP)-1 (CCL3), MIP-1 (CCL4) y RANTES (CCL5). Al parecer
los dmeros y a veces los tetrmeros son las formas activas de la mayora de
las quimocinas CC.

La segunda familia comprende quimocinas CXC, las cuales tienen un
residuo de aminocido interpuesto entre las dos cisteinas iniciales. Algunas
quimocinas CXC, de las cuales interleucina-8 (CXCL8) es el prototipo, atraen
leucocitos polimorfonucleares a sitios de inflamacin aguda. CXCL8 tambin
activa monocitos y puede dirigir el reclutamiento de esas clulas a las
lesiones vasculares.
La tercera familia se denomina CX
3
C, de la cual la fractalcina (CX
3
CL1)
es el nico miembro. El dominio de la quimocina CX
3
CL1 esta fundido a una
base tipo mucina en las regiones transmembranales y citoplsmicas, por lo
tanto forma un receptor para adhesin celular capaz de detener a la clula
bajo condiciones de flujo fisiolgico. La enzima convertidora del factor de
necrosis tumoral (TNF)-, puede despegar CX
3
CL1 de la membrana celular,
permitiendo que la citocina funcione como un quimoatrayente soluble.
CXCL16, la otra quimocina con un dominio ligado a una base de mucina
tambin regula la adhesin celular y puede ser liberada como un
quimoatrayente soluble. CXCL16 est presente sobre macrfagos y clulas
dendrticas, regulando interacciones entre clulas presentadoras de antgeno
y linfocitos T. CXCL16 tambin tiene funcin como receptor para lpidos
oxidados que contienen fosfatidilserina y pueden participar en aterognesis.
Linfotactina (XCL1), es el nico miembro de la cuarta familia y tiene un solo
residuo de cisteina.

Virtualmente cada tipo celular del SI expresa receptores para una o
dos quimocinas. Las clulas de la mayora de los tejidos inflamados puede
liberar una variedad de quimocinas y los tejidos infectados con diferentes
bacterias o virus liberan quimocinas que reclutan tipos caractersticos de
clulas inmunolgicas. Por ejemplo, mientras que rinovirus induce la
liberacin de quimocinas que resulta en el reclutamiento de neutrfilos, EBV
induce un tipo de quimocinas que resulta en el reclutamiento de clulas B,
clulas NK y clulas T CD4
+
y CD8
+
. La especificidad de estas respuestas
celulares est fuertemente influenciada por las quimocinas liberadas de
tejidos especficos, las molculas de adhesin vasculares expresadas, los
receptores de quimocinas expresados por diferentes poblaciones de
leucocitos y las molculas de adhesin especficas expresadas por ellos.
















Citocinas

Introduccin

Las citocinas y sus receptores comprenden un amplio grupo de
protenas o glicoprotenas con capacidad para modular la actividad funcional
de clulas y tejidos, tanto en condiciones fisiolgicas como patolgicas. Por
su parte, las quimiocinas son un grupo de pequeas molculas proteicas (8-
14 kDa) con caractersticas bioqumicas comunes producidas por muchos
tipos celulares en respuesta a estmulos exgenos o endgenos.

Son molculas de bajo peso molecular, entre 15-30 KDa, constituidas
por 120-180 aminocidos. Generalmente son producidas por los leucocitos,
algunas tambin pueden ser secretadas por otros tipos celulares.
Originariamente se estableci el trmino linfocina para denominar productos
biolgicos producidos por linfocitos en respuesta al antgeno. Posteriormente
su uso se ampli a molculas de caractersticas similares secretadas por otros
tipos celulares, por lo que se cambi el trmino ms amplio de citocina.

En el caso de las interleucinas (IL), el trmino se aplic a aquellas
molculas que servan como seales de comunicacin entre distintos tipos de
leucocitos, numerndose correlativamente a medida que fueron descubiertas
(IL-1, IL-2, etc.). No obstante, algunas de ellas se detectaron inicialmente en
ensayos funcionales in vitro y an conservan su denominacin original de
acuerdo con la funcin biolgica que permiti su identificacin, como es el
caso del TNF (factor de necrosis tumoral) y el TGF (factor transformador de
tejidos).

La expresin de la mayora de las citocinas est estrictamente regulada.
En general, no se detecta una produccin constitutiva significativa de estas
molculas, siendo necesaria la activacin celular para que se produzcan en
cantidades suficientes para ejercer sus efectos biolgicos. La mayora de las
citocinas son secretadas al espacio extracelular, muchas de ellas en forma
glicosilada con lo que incrementa su estabilidad y solubilidad. No obstante,
algunas citocinas se pueden acumular en el interior de la clula, o,
bien, permanecer ancladas a la membrana o en la matriz extracelular.

En general, son molculas que poseen una vida media muy corta y
actan a muy bajas concentraciones, del orden de picogramos, mediante la
unin a receptores de alta afinidad presentes en la superficie de la propia
clula productora o en otros muy variados tipos celulares. Las citocinas
ejercen un efecto autcrino cuando se unen a receptores presentes en la
propia clula productora. Tambin pueden tener un efecto parcrino,
actuando sobre diferentes tipos celulares que se encuentran en su vecindad.
En algunos casos pueden liberarse a la circulacin sangunea o linftica,
ejerciendo su efecto en otros rganos y tejidos, actuando as como las
hormonas, de forma endocrina (Figura 1).


Figura 1. Efecto autcrino, parcrino y endcrino de las citocinas.

Dos caractersticas funcionales importantes de las citocinas son: su
pleiotropismo, o sea que una misma citocina es capaz de ejercer efectos
biolgicos diferentes al actuar sobre distintos tipos celulares, y su
redundancia, es decir, que varias citocinas pueden contribuir al desarrollo
de la misma funcin en un determinado tipo celular. El resultado es que, en
ausencia de una determinada citocina, sus funciones pueden ser
reemplazadas total o parcialmente por otras. Muchas de estas caractersticas
biolgicas se pueden explicar por la estructura y amplia distribucin celular de
sus receptores. Las acciones de las citocinas se engloban dentro de un
sistema o red funcional, donde el efecto de una molcula est estrechamente
regulado, positiva o negativamente, por otras molculas del sistema. As, la
secrecin de una citocina puede estar inducida, potenciada o inhibida por
otra citocina que, a su vez, puede incrementar o inhibir la expresin de sus
receptores.

Los efectos biolgicos de las citocinas pueden ser muy variados, ya
que, no solamente desempean un papel esencial en la respuesta
inmunolgica, sino que algunas tambin estn implicadas en la embriognesis
y en el desarrollo de rganos (por ejemplo, en la angiognesis), otras juegan
un papel clave en procesos neuroinmunolgicos y neuroendocrinos, y muchas
son importantes reguladores, tanto positivos como negativos, de
acontecimientos celulares como la mitosis, la diferenciacin, la migracin, la
supervivencia, la muerte celular, e, incluso, de su transformacin maligna.

La actividad biolgica de las citocinas se puede medir con distintas
modalidades de bioensayos, utilizando, por ejemplo, lneas celulares cuya
funcin depende de la presencia del factor que se quiere estudiar. En la
actualidad, se utilizan como tcnica ms habitual inmunoensayos en fase
slida, como el ELISA para cuantificar la concentracin de citocinas en fluidos
biolgicos, y el ELISPOT para conocer el nmero de clulas productoras.
Tambin es posible cuantificar y caracterizar las clulas productoras
identificando las citocinas intracelulares mediante citometra de flujo. Otra
posibilidad es la utilizacin de tcnicas de RT-PCR cuantitativa que permiten
detectar y medir los niveles de RNAm que codifican una determinada citocina.

Aunque la mayora de las citocinas no poseen homologa secuencial
entre s, algunas se han agrupado en familias en base a su estructura
tridimensional. De acuerdo con la estructura secundaria de la molcula, se
ha agrupado a las citocinas segn posean una conformacin en alfa-hlice
(IFN-alfa, , IFN-gamma, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-9, G-CSF, M-CSF
y GM-CSF), una estructura de lminas beta (IL-1-alfa, IL-1-beta, TNF-alfa y
TNF-beta) o una estructura compuesta alfa/beta (IL-8 e IFN-gamma).

Por otra parte, el anlisis de su disposicin gnica ha dado lugar a la
definicin de grupos de citocinas que se encuentran asociadas
genticamente. Uno de estos grupos se ha descrito en el brazo largo del
cromosoma 5 (5q31), donde se encuentran los genes que codifican para IL-3,
IL-4, IL-5, IL-9, subunidad p40 de IL-12, IL-13 y GM-CSF, mientras que en el
cromosoma 2 (2q12-14) se localizan los genes que codifican para IL-1 e IL-
1RA, el antagonista natural del receptor de IL-1.

Es difcil establecer una clasificacin funcional de las citocinas debido a
su alto grado de pleiotropismo. No obstante, para facilitar su estudio se
pueden describir englobadas de acuerdo con su funcin ms relevante: 1)
citocinas implicadas en el desarrollo hematopoytico, 2) citocinas implicadas
en la respuesta inmunolgica innatas y, finalmente 3) citocinas generadas
durante la respuesta inmunolgica adaptativa. Por lo tanto, algunas citocinas
se mencionan en ms de una seccin.

Citocinas implicadas en el desarrollo hematopoytico

Comprenden un grupo amplio de citocinas que promueven el crecimiento y
diferenciacin de las clulas sanguneas maduras a partir de clulas madre
hematopoyticas. Son producidas por clulas del estroma de la mdula sea
o por linfocitos maduros activados. Algunas de estas citocinas reciben el
nombre genrico de factores estimuladores de la formacin de colonias (CSF)
por su capacidad para estimular la formacin de colonias celulares en los
cultivos de mdula sea.

IL-3. Es producida mayoritariamente por los linfocitos T activados y
tambin por mastocitos. Induce la proliferacin y diferenciacin de
progenitores hematopoyticos tempranos de todas las series sanguneas, por
lo que tambin es conocida como multi-CSF. Induce fundamentalmente la
hematopoyesis en situaciones de estrs que requieren una respuesta rpida,
siendo menos claro su papel en la hematopoyesis constitutiva.

IL-5. Es secretada en forma glicosilada por LT CD4+ activados del tipo
Th2. Es esencial en la proliferacin y diferenciacin de las clulas precursoras
de los eosinfilos, as como en el mantenimiento de la actividad de los
eosinfilos maduros siendo la responsable de la eosinofilia en infecciones
parasitarias. Acta sobre los linfocitos B incrementando su proliferacin y
estimulando la produccin de IgA.

IL-7. Es producida por clulas estromales de la mdula sea.
Promueve la maduracin de progenitores pro- y pre-B hacia linfocitos B
maduros en la mdula sea y de linfocitos T inmaduros en el timo fetal y
adulto. Tambin acta como factor de crecimiento para linfocitos T y B.

IL-9. Es producida por linfocitos T activados. Tiene un amplio espectro
de actividades no muy bien definidas entre las que se incluye la proliferacin
de precursores eritroides. Al igual que la IL-7, tambin induce la proliferacin
de LT y estimula la produccin de inmunoglobulinas en clulas B.

IL-11. Es producida por fibroblastos del estroma de la mdula sea y
otros tipos celulares. Estimula la megacariocitopoyesis y sinergiza con otras
citocinas para estimular el crecimiento de otros precursores hemticos.
Comparte algunas funciones con la IL-6, como la induccin de protenas de
fase aguda en el hgado. Tambin se ha descrito su capacidad como
estimuladora de la secrecin de inmunoglobulinas por clulas B en respuestas
T-independientes.

GM-CSF. El Factor Estimulante de Colonias de Granulocitos y
Macrfagos es producido por linfocitos T activados y por otras clulas como
fibroblastos, clulas endoteliales y monocitos. Es un polipptido con varios
posibles lugares de glicosilacin. Induce la proliferacin de los progenitores
de granulocitos y macrfagos, producindose en respuesta a estmulos
especficos en situaciones que requieren una elevada produccin de stas
clulas. Tambin puede actuar sobre granulocitos y macrfagos maduros.

G-CSF. Es producido por fibroblastos, clulas endoteliales y monocitos
en respuesta a estmulos especficos. Acta sobre los precursores
hematopoyticos de los granulocitos y sobre los granulocitos maduros. La
granulocitosis asociada a ciertas infecciones se debe a que el LPS de las
paredes bacterianas es un potente inductor de la produccin de esta citocina.
Se han descrito otras funciones de este factor, como la estimulacin de la
fagocitosis y de la citotoxicidad mediada por Ac.

M-CSF. Es producido por monocitos y macrfagos maduros activados
y est implicado en el desarrollo de las clulas progenitoras de los
macrfagos. Tambin se ha visto que facilita el desarrollo de la placenta,
siendo producido por clulas del epitelio uterino en respuesta a los
estrgenos.

En el Cuadro 1 se describen las citocinas ms relevantes que participan en el
desarrollo hematopoytico.

Cuadro 1. Citocinas implicadas en el desarrollo hematopyetico.

Citocina Efecto biolgico principal Clula productora principal
IL-3 Hematopoyesis en situaciones de stress Linfocitos T activados
IL-5 Diferenciacin, proliferacin y activacin
de eosinfilos
Linfocitos Th activados
IL-7 Maduracin de linfocitos T y B Clulas estromales de mdula sea
IL-9 Proliferacin de precursores de eritroides
y de clulas T
Linfocitos T activados
IL-11 Megacariocitopoyesis Fibroblastos de la mdula sea
GM-CSF Desarrollo y diferenciacin de granulocitos
y macrfagos
Linfocitos T activados
G-CSF Desarrollo y diferenciacin de granulocitos Fibroblastos, endoteliales, monocitos
M-CSF Desarrollo y diferenciacin de macrfagos Monocitos y macrfagos


Citocinas producidas en las respuestas inmunes innatas

Estas citocinas se producen de forma inmediata tras el contacto de las
clulas implicadas en la respuesta inmunolgica innata con un agente extrao.
Los monocitos y macrfagos activados son la principal fuente de estas
molculas aunque tambin pueden ser producidas por linfocitos activados y
otras clulas no pertenecientes al sistema inmune, como clulas endoteliales
y fibroblastos.

IL-1. Es producida fundamentalmente por monocitos y macrfagos,
pero tambin por clulas dendrticas, endoteliales, NK y otros tipos celulares.
Existen dos formas, IL-1alfa e IL-1beta que, aunque solamente tienen un
25 % de homologa en su secuencia aminoacdica, comparten el mismo
receptor y ejercen efectos biolgicos similares. Parte de sus efectos
proinflamatorios se debe a que induce la liberacin de histamina en los
mastocitos, generando vasodilatacin y aumento de la permeabilidad vascular
en el lugar de la inflamacin. Es el principal pirgeno endgeno, induciendo
fiebre a travs de la produccin de prostaglandinas. Tambin promueve la
sntesis de protenas de fase aguda por los hepatocitos y acta sobre el SNC
induciendo sueo y anorexia, tpicamente asociados con los procesos
infecciosos (Figura 2).




Figura 2. Acciones biolgicas de la IL-1 sobre diferentes rganos del cuerpo humano.

TNF. Los factores de necrosis tumoral fueron descritos inicialmente
por su capacidad de causar necrosis en algunos tumores. Sin embargo,
posteriormente, ganaron protagonismo por las numerosas funciones que
ejercen sobre la respuesta inmunolgica. Se han descrito dos molculas
estrechamente relacionadas, el TNF-alfa y el TNF-beta, con elevada
homologa en su secuencia aminoacdica. El TNF-alfa es producido
fundamentalmente por monocitos y macrfagos en respuesta a antgenos
bacterianos, tales como el LPS, siendo esta citocina el principal responsable
del choque sptico asociado a bacteriemias. Tambin puede ser producido
por linfocitos T y B, NK, fibroblastos y mastocitos. Junto con la IL-1 est
implicado en los procesos inflamatorios derivados de los procesos infecciosos,
elevando la temperatura corporal y produciendo caquexia y sueo al actuar
sobre el SNC. Por otra parte, induce la expresin de molculas de adhesin y
estimula la produccin de IL-8 por clulas del endotelio vascular, lo que
contribuye a la extravasacin de linfocitos, neutrfilos y monocitos. El TNF-
beta, o linfotoxina, es producido exclusivamente por linfocitos T activados,
aunque se une a los mismos receptores que el TNF-alfa e induce funciones
similares.

Interferones tipo I. Los interferones fueron inicialmente descritos
como agentes producidos por clulas infectadas por virus. Posteriormente se
descubri que adems de su capacidad antiviral ejercan efectos reguladores
sobre la proliferacin y la diferenciacin de varios tipos celulares y tenan
capacidad de modular el sistema inmune. Se clasificaron en dos grupos. Los
interferones tipo I, que incluyen el IFN-alfa y el IFN-beta, con capacidad
principalmente antiviral y antiproliferativa, y el IFN-gamma (tipo II), al que
nos referiremos posteriormente, con un mayor efecto inmunomodulador. El
IFN-gamma es producido fundamentalmente por monocitos y macrfagos,
mientras que el IFN-alfa es secretado por fibroblastos y algunas clulas
epiteliales. Ambos incrementan la expresin de molculas de MHC de clase I.
En algunos casos se ha observado que poseen actividad antitumoral,
posiblemente debido a su efecto antiproliferativo sobre las clulas tumorales,
y modulador sobre el sistema inmune.

IL-6. Es producida fundamentalmente por monocitos/macrfagos,
fibroblastos, clulas endoteliales, linfocitos T y clulas del estroma de la
mdula sea. Junto con la IL-1 es la principal inductora de la sntesis de
protenas de fase aguda, sobre todo de fibringeno. Adems de su efecto en
la inflamacin, se ha observado que promueve la diferenciacin de linfocitos
B hacia clulas plasmticas, induciendo la produccin de inmunoglobulinas.
Tambin puede aumentar la produccin de IL-2 y el desarrollo de los
precursores hematopoyticos dependientes de la IL-3 (Figura 3).




Figura 3. Principales acciones biolgicas de IL-6 sobre diferentes rganos y clulas.

IL-10. Es producida por linfocitos del tipo Th2, as como tambin por
monocitos/macrfagos, linfocitos B, queratinocitos y otros varios tipos
celulares. Es la citocina inmunosupresora por excelencia, inhibiendo la
sntesis de muchas otras citocinas, entre las que podemos citar IFN-gamma,
TNF-alfa, IL-2, IL-12, y la expresin de MHC-II y molculas de adhesin en
monocitos. Tambin tiene efectos antiproliferativos sobre muchos tipos
celulares. La IL-10 ejerce adems mltiples actividades inmunomoduladoras.
Se ha visto que es un cofactor para el crecimiento de lneas y colonias de
clulas mastocticas in vitro. Regula las funciones mediadas por linfocitos B
induciendo la sntesis de IgG, y por linfocitos T, influyendo en el desarrollo de
timocitos y clulas T. Tambin ejerce efectos reguladores sobre la
angiognesis. El virus de Epstein Barr secreta una protena que posee una
gran homologa estructural con la IL-10 humana (vIL-10), y que tras unirse
con baja afinidad al propio receptor de la IL-10, ejecuta actividades
biolgicas similares. Relacionadas estructural y funcionalmente con la IL-10
se han descrito recientemente nuevas molculas tales como la IL-19, IL-20 e
IL-22, cuyas funciones son todava poco conocidas (Figura 4).

Figura 4. Acciones de IL-10 e IFN sobre clulas T cooperadoras en el sistema murino.




IL-12. Es producida mayoritariamente por monocitos/macrfagos,
aunque su produccin puede ser tambin inducida en clulas dendrticas y
linfocitos B. Inicialmente se describi como el factor estimulador de las
clulas asesinas naturales (NK), pero la actual importancia de esta citocina
deriva de su capacidad de dirigir la diferenciacin de los linfocitos Th hacia
clulas efectoras tipo Th1 de la hipersensibilidad retardada. La forma madura
de esta molcula (p75) est compuesta de dos subunidades, p35 y p40. La
sntesis de ambas subunidades est regulada diferencialmente, siendo ambas
necesarias para la actividad funcional del heterodmero. Esta citocina
incrementa la actividad citotxica de las clulas NK e induce clulas LAK
(linfocitos asesinos activados por linfocinas). Incrementa la produccin de
IFN- por linfocitos T y clulas NK y activa linfocitos T citotxicos.

Recientemente se ha descrito un factor proteico denominado p19, sin
actividad biolgica por s mismo, que se combina con la subunidad p40 de la
IL-12 para dar lugar a una nueva citocina biolgicamente activa denominada
IL-23. Esta citocina es producida por clulas dendrticas activadas, se une al
receptor de la IL-12 y comparte algunas de las funciones biolgicas con ella.

IL-18. Esta citocina est estrechamente relacionada en sus funciones
biolgicas con la IL-12, ya que posee la misma capacidad de induccin de
IFN-gamma en linfocitos T y clulas NK. Sin embargo, es producida por
diferentes tipos celulares que la IL-12, siendo las clulas adrenales y de
Kupffer las principales fuentes de produccin de la IL-18.

En el Cuadro 2 se presenta un resumen de las citocinas producidas
durante la respuesta inmunolgica innata.


Cuadro 2. Citocinas producidas durante la respuesta inmunolgica innata.

Citocina Efecto biolgico principal Clula productora principal
IL-1a
IL-1b
Proinflamatorias. Inducen la sntesis
de protenas de fase aguda. Pirgenos
Monocitos, macrfagos
IL-6 Proinflamatoria. Induce la sntesis
de protenas de fase aguda. Regula la
hematopoyesis. Estimula la secrecin Igs
Monocitos, macrfagos
TNF- Proinflamatoria. Responsable del shock
endotxico. Pirgeno. Induce expresin
de molculas de adhesin
Monocitos, macrfagos, LT
IL-10
IL-19
IL-20
IL-22
Inmunosupresoras. Inhiben la expresin
de citocinas y otros mediadores
proinflamatorios y la expresin de MHC-II
y molculas de adhesin en monocitos.
Estimulan B e inducen sntesis de IgG
Monocitos, macrfagos, LT, LB
IL-12 Inductor de la diferenciacin Th1.
Estimula la actividad citotxica de T y NK
Monocitos, macrfagos
IL-18 Estimula la actividad citotxica de T y NK Clulas adrenales, de Kupffer
IL-23 Estimula la actividad citotxica de T y
clulas NK
Clulas dendrticas activadas
IFN-
IFN-
Efecto antiproliferativo e
inmunomodulador, actividad antitumoral
Monocitos, macrfagos, Fibroblastos,
clulas epiteliales



Citocinas producidas en la respuesta inmunolgica adaptativa

En respuesta a una estimulacin antignica, los linfocitos T se activan,
proliferan y se diferencian hacia clulas efectoras especficas. Estas clulas
ejercen sus funciones produciendo una serie de molculas solubles,
verdaderas artfices de los mecanismos efectores de la respuesta inmune
adaptativa (Cuadro 3).


Cuadro 3. Citocinas producidas durante la respuesta inmunolgica adaptativa.

Citocina Efecto biolgico principal Clula productora principal
IL-2 Induce proliferacin de T, B y NK.
Citotxica e inflamatoria
LT activados, LTh1, LT citotxicos
IFN- Incrementa la expresin de MHC-I y II.
Activa macrfagos y NK. Inhibe la
proliferacin de clulas Th2.
LTh1, LT citotxicos, NK
TNF Proinflamatoria. Pirgeno. Induce
expresin de molculas de adhesin.
LTh1, LT citotxicos
IL-4 Inductor de la diferenciacin Th2. Inhibe
citocinas y mediadores proinflamatorios e
induce IL-1Ra. Estimula crecimiento y
diferenciacin de linfocitos B. Induce IgE
e IgG4.
LTh2, mastocitos, basfilos
IL-5 Diferenciacin, proliferacin y activacin
de eosinfilos
LTh2
IL-10 Inhibe la expresin de citocinas y otros
mediadores proinflamatorios y la
expresin de MHC-II y molculas de
adhesin en monocitos. Estimula B e
induce la sntesis de IgG
LTh2, monocitos, macrfagos, LB
IL-13 Inhibe la expresin de citocinas y otros
mediadores proinflamatorios. Estimula
crecimiento y diferenciacin de B y
promueve el cambio de isotipo hacia IgE.
LTh2
IL-16 Quimiotctio de T. LT citotxicos
TGF- Inmunosupresora. Inhibe el crecimiento
de muchos tipos celulares, la sntesis de
varias citocinas y la citotoxicidad natural
LT activados
GM-CSF Desarrollo y diferenciacin de granulocitos
y macrfagos
LT activados


Los linfocitos T CD4+, como consecuencia de una estimulacin
antignica, pueden diferenciarse hacia linfocitos T cooperadores de tipo Th1
o Th2, estando esta diferenciacin en parte condicionada por las citocinas
que se encuentran en el medio. As, la presencia de IL-12 promueve la
diferenciacin hacia Th1, mientras que la IL-4 condiciona el desarrollo Th2.
Los linfocitos Th1, en colaboracin con los macrfagos, estn implicados en la
respuesta inmune celular, mientras que los Th2 promueven la respuesta
inmune humoral. Para llevar a cabo su funcin los linfocitos Th1 secretan IL-
2, IFN-gamma y TNF, mientras que los Th2 producen IL4, IL-5, IL-10 e IL-13.
Se han descrito otras subpoblaciones de linfocitos T CD4+ efectores que
secretan un perfil de citocinas diferente y llevan a cabo funciones especficas.
Este es el caso de los linfocitos T reguladores de los que se han descrito
varios tipos.

Los linfocitos T CD8+ se diferencian hacia linfocitos T citotxicos como
respuesta a la estimulacin antignica y a la presencia de citocinas
secretadas por otras clulas. Ejercen su funcin efectora mediante la
secrecin fundamentalmente de IL-2, IL-16, IFN-gamma y TNF. Finalmente
hay una serie de citocinas que pueden ser producidas por ambos tipos de
linfocitos T, CD4+ y CD8+, tales como IL-2, GM-CSF y TGF-beta.

IL-2. Es secretada por linfocitos T CD4+ y CD8+ activados en
respuesta a un estmulo antignico. Inicialmente se describi como factor de
crecimiento de clulas T, ya que es el principal agente que controla su
proliferacin. Ejerce otros muchos efectos sobre el sistema inmune, teniendo
un papel esencial en el desarrollo de las respuestas inflamatorias crnicas,
tanto humorales como celulares. Es un factor estimulador del crecimiento de
linfocitos T , B y NK. Promueve la actividad citotxica mediada por linfocitos T
y clulas NK, as como el desarrollo de clulas LAK (clulas asesinas activadas
por citocinas). Tras unirse a su receptor en linfocitos T, activa la secrecin de
IFN-alfa, linfotoxina, IL-4, IL-3, IL-5 y GM-CSF. Sobre los linfocitos B
estimula su crecimiento y diferenciacin e incrementa la expresin de
molculas de MHC de clase II.

IL-15. Es secretada por una amplia variedad de clulas, entre las que
se incluyen clulas epiteliales, monocitos, msculo esqueltico, hgado,
pulmn y placenta. Aunque no es una citocina producida por linfocitos Th1 se
incluye en este apartado por su similitud funcional con la IL-2, con la que
comparte la mayora de sus actividades biolgicas, como la estimulacin de
clulas NK, y la proliferacin y diferenciacin linfocitaria.

IFN. Es producido por linfocitos Th1, LTC y por clulas NK. Adems de
su efecto antiviral posee una importante actividad inmunomoduladora.
Incrementa la expresin de antgenos de HLA de clase I y II en varios tipos
celulares, lo que facilita su funcin presentadora de Ag y activa a los
macrfagos, incrementando su capacidad tumoral y de defensa contra las
infecciones. Acta de forma autocrina sobre las propias clulas NK que lo
producen, aumentando su actividad citoltica y, como consecuencia,
incrementando su efecto antitumoral. Sobre los linfocitos Th2 inhibe la
proliferacin, de manera que su presencia durante la estimulacin antignica
induce la diferenciacin de linfocitos T hacia clulas efectoras tipo Th1
favoreciendo, por lo tanto, el desarrollo de las respuestas inflamatorias
(Figura 5).






Figura 5. Efectos biolgicos del IFN- sobre la mdula sea y clulas.




IL-4. Es producida por linfocitos Th2, mastocitos, basfilos, clulas del
estroma de la mdula sea y, posiblemente, por determinadas
subpoblaciones de clulas NK. Es una citocina muy pleiotrpica, ya que ejerce
numerosos efectos en diferentes tipos celulares. Promueve la diferenciacin
de linfocitos T vrgenes hacia clulas de tipo Th2, inhibiendo la generacin de
clulas Th1. Posee efectos inmunosupresores, ya que inhibe la produccin de
determinados mediadores inflamatorios de los macrfagos e induce la
produccin de IL-1Ra, que bloquea la accin de la IL-1. Por otra parte,
promueve el desarrollo de las respuestas inmunes humorales a travs de la
induccin del crecimiento y diferenciacin de linfocitos B, produciendo el
cambio isotpico hacia IgG4 e IgE e incrementando la expresin de molculas
CD23 en linfocitos B, basfilos y eosinfilos. Por todo ello, los efectos de
esta citocina se han relacionado con el desarrollo de los procesos alrgicos y
con el incremento de IgE en las infecciones parasitarias

IL-13. Es producida por linfocitos T activados del tipo Th2,
compartiendo muchas de sus funciones con la IL-4 con la que se encuentra
genticamente relacionada. Es una citocina con actividad inmunosupresora ya
que inhibe, junto con la IL-4 y la IL-10, la produccin de citocinas
inflamatorias por los monocitos (IL-1beta, TNF-alfa, IL-8, IL-6). Por otra parte,
esta citocina incrementa la proliferacin y diferenciacin de monocitos y
clulas B, incrementa la expresin de CD23 y promueve el cambio de clase de
inmunoglobulinas hacia la produccin de IgE

IL-16. Est producida por los linfocitos T CD8+ donde se acumula y
se secreta en respuesta a la estimulacin con serotonina o histamina.
Originariamente se identific como factor quimiotctico de linfocitos,
recibiendo el nombre de linfotactina, debido a su efecto atrayente sobre los
linfocitos T CD4+. En la actualidad es el nico miembro de la familia C de
quimiocinas (vase ms adelante).

TGF. Hay dos tipos de factores transformadores del crecimiento, el
TGF-alfa y el TGF-beta, que no poseen ninguna similitud estructural ni
comparten los mismos efectos. Solamente el TGF-beta tiene efectos
inmunomoduladores. Es producido por linfocitos T, plaquetas y otros muchos
tipos celulares. Su nombre responde a la observacin inicial de que induca
cambios fenotpicos en los fibroblastos de rata. Incrementa la proliferacin de
fibroblastos, osteoblastos y clulas musculares lisas e incrementa la sntesis
de protenas de la matriz extracelular, lo que favorece la curacin de las
heridas. Esta citocina tiene tambin efectos inmunosupresores ya que se
observ que inhiba el crecimiento y la funcin de muchos tipos celulares. En
el sistema inmune inhibe la sntesis y/o el efecto del IFN-gamma, TNF-,
TNF, IL-1, IL-2 e IL-3, as como la citotoxicidad natural y especfica.

Citocinas proinflamatorias e inmunosupresoras.

En relacin con la respuesta inflamatoria algunas citocinas favorecen el
desarrollo de la misma (citocinas proinflamatorias) mientras que otras ejercen
un efecto supresor de la inflamacin (citocinas inmunosupresoras).

Las citocinas con actividad antiinflamatoria e inmunosupresora
inhiben el crecimiento celular o suprimen la secrecin de otras citocinas.
Entre ellas se encuentran la IL-4, IL-13 e IL-10, que activan las acciones de
los linfocitos B a la vez que inhiben las respuestas inflamatorias. Como ya
comentamos, la IL-10 es la citocina inmunosupresora por excelencia.
Tambin se incluye en este apartado el TGF-beta que, como se ha dicho
anteriormente, inhibe el crecimiento y la funcin de muchos tipos celulares, la
sntesis de determinadas citocinas y la actividad citotxica natural y especfica.
Finalmente, los interferones tipo I (alfa y beta), tambin se pueden
considerar citocinas supresoras debido a su capacidad antiproliferativa y a su
efecto regulador de la produccin de citocinas proinflamatorias.

En el grupo de las citocinas con actividad proinflamatoria se incluyen
las producidas por los monocitos y macrfagos activados durante las
respuestas inmunes innatas, aunque tambin pueden ser producidas por
linfocitos activados (Th1 o citotxicos), y otras clulas no pertenecientes al
sistema inmune. Las principales citocinas que participan en los
acontecimientos celulares y moleculares asociados con los fenmenos
inflamatorios son la IL-1, IL-6, TNF-alfa y algunos miembros de la familia de
las quimiocinas, que describimos a continuacin. Otra importante citocina
proinflamatoria es el IFN-gamma, producido por linfocitos Th1 en las
respuestas inmunes especficas y por clulas NK activadas.

En la Figura 6 se presenta un esquema general de la respuesta
inmunolgica en donde se incluye la mayora de la citocinas conocidas.
Tambin se incluye un esquema (Figura 7) donde se especifican las
principales citocinas que intervienen sobre los linfocitos T, B y macrfagos su
orden de aparicin (Figura 8) en infecciones de tipo agudo.

Figura 6. Principales puntos de accin de las citocinas en la respuesta inmunolgica.




Figura 7. Principales citocinas que intervienen entre los linfocitos y las macrfagos.