GENTICA

AULA DIA 24/03/2014 (Continuao da Aula 5 Slides)

PRADER-WILLI E ANGELMAN
Alguns processos de metilao falha esto envolvidos na gnese de algumas doenas.
O que metilar o DNA? A metilao serve para marcar as fitas me, diferenci-las da fita filha
na via de reparo do NMR (Reparo de Mal Pareamento). Alm disso, a metilao tem uma outra
funcionalidade, sendo essa a funo de ligar e desligar o gene. Todo gene tem a regio
promotora e essa regio promotora que metilada ou no.
Quando a regio promotora est metilada, os fatores de transcrio no conseguem
ligar nessa regio e assim a transcrio e a traduo do gene no ocorre. Ento, toda vez que a
regio promotora de qualquer gene estiver metilada, estiver com grupamento Metil em
citosinas especficas, o gene estar desligado, porque fica um metil l, o fator de transcrio
no se liga ao DNA, pois o metil uma molcula adicional e est ocupando espao e a o gene
no expresso.
Embora eu tenha o meu genoma presente em todas as clulas, isso uma causa do
por qu que o neurnio no tem hemoglobina e por que na hemcia eu no tenho expresso
de acetilcolina. Porque nessas clulas o promotor desses genes est desligado, est metilado.
Regio Promotora Metilada Gene desligado.
Esse padro de metilao para alguns genes, os alelos tanto de origem paterna quanto
os de origem materna so diferencialmente metilados para alguns genes s. Vamos supor o
cromossomo 15, quando voc herda da sua me o cromossomo 15 e do seu pai o cromossomo
15 para um gene especfico, o gene 3 do pai est metilado e o gene 3 na me no est. Isso
uma segunda forma de compensar a dose como ocorre no X, pois os genes do X s esto sendo
expressos uma vez tanto no homem quanto na mulher, no homem porque s tem um X e na
mulher porque o outro X est inativado.
Para alguns genes dos autossomos isso tambm acontece, mas eu posso inativar um
autossomo inteiro? No. Uma maneira de fazer a compensao de dose para aqueles genes
especficos fazer com que um alelo de um genitor seja metilado e o outro no. Quando o
alelo materno est metilado, apenas o alelo paterno se expressa e vice-versa. O nvel da
expresso gnica para determinados genes no pode vir de dois alelos, s pode vir de um.
Ento um alelo est sendo expresso e o outro no, mas isso vai depender do gene.
Imprintado e Metilado so a mesma coisa. Quando um gene est imprintado, significa
que ele est marcado. Essa marcao a metilao da regio promotora. Quando um gene
est metilado, ele est imprintado e no se expressa.

Doenas que dependem do Imprinting

Sndrome de Prader-Willi: uma sndrome caracterizada por uma srie de
caractersticas clnicas na qual h retardo mental, hipotonia muscular generalizada, tnus
muscular afetado de forma generalizada, a boca fica em formato de u invertido devido a
essa hipotonicidade que afeta os lbios que no suportam o peso da boca e a boca cai, os
membros so reduzidos.
Sndrome de Angelman: O retardo mental mais pronunciado do que em Prader-Willi,
o indivduo tem comprometimento motor maior.
Essas duas doenas so causadas por um mesmo gene ou por genes diferentes? So
genes diferentes, mas que esto prximos no genoma. Geralmente indivduos com Prader-
Willi e Angelman possuem pais no afetados, pois esses no possuem capacidade reprodutiva
e so doenas de perda de funo, portanto doenas recessivas, esperado que no
heredograma desses indivduos os pais no sejam afetados.
Geralmente os pais no afetados tm um relacionado que provm de famlias
diferentes (no consanguneo) e tem filhos com Prader-Willi e Angelman. Como isso se
explica? O Prader-Willi e Angelman esto no cromossomo 15, significa que todos ns temos o
seguinte: somos diploides no cromossomo 15 e os dois genes: PWS (Prader Willi) e AS
(Angelman) esto em uma regio muito prxima, mais ou menos de 10 kb. Ns temos duas
cpias do gene Prader-Willi e temos duas cpias do gene de Angelman, so genes prximos.
Os dois genes sofrem imprinting. Ns temos um cromossomo paterno e um cromossomo
materno. No cromossomo paterno, o gene de Prader Willi est ativo (no metilado) e o gene
de Angelman est inativo (est metilado). Na me o inverso, o gene de Prader Willi est
metilado e o de Angelman no.
Essa metilao cruzada faz com que ns tenhamos apenas um alelo PWS (Prader-Willi
Sndrome) produzindo 100% de todas as protenas e um alelo AS (Angelman Sndrome)
produzindo 100%. Todos os seres humanos normais so desse jeito: o pai passa o gene Prader-
Willi ativo e a me passa o gene Angelman ativo.
Como surge a doena? Para que a pessoa nasa com Prader-Willi ou Angelman tem
que ter havido uma deleo. Vamos pegar um exemplo: o indivduo tem Prader-Willi e o pai
passou o cromossomo 15 com uma deleo na regio onde esses genes esto localizados.
Ento como se ele tivesse todo o restante do 15, mas no tem a regio que compreende
esses dois genes, eles foram embora. Se eu deletar essa regio Prader-Willi e Angelman, quem
vai determinar a doena o cromossomo materno, o que sobrou. S que o que sobrou?
Sobrou Angelman ativo e Prader-Willi inativo. Qual o gene no est sendo produzido? O
Prader-Willi. Ento o indivduo vai ter Prader-Willi, pois vai ter a doena referente quele alelo
que sobrou, que est inativo e imprintado.
Em outra situao, o indivduo nasceu com Angelman. Sendo que a deleo agora
aconteceu no cromossomo 15 que vem da me. Quem vai determinar a doena o
cromossomo do pai que no sofreu deleo. No cromossomo do pai existe Prader-Willi ativo e
o alelo de Angelman inativo. Logo, ele vai ter a Sndrome de Angelman.
Essas duas doenas surgem porque h o envolvimento de genes imprintados
diferencialmente e, alm disso, a ocorrncia de uma deleo que acomete a regio ocupada
por esses genes. O alelo que sobrou e que est metilado que ir determinar a doena.
Toda mulher passa para a filha o cromossomo 15 com alelo Prader-Willi metilado.
Essas doenas so relativamente frequentes, mas s ocorrem se tiver a deleo.
Se os pais no so afetados, como a deleo surge? A mutao pode ter ocorrido na
gametognese, a qual originou um gameta que inicialmente era normal e sofreu a deleo.
Geralmente as delees vm de dois fatores: ou de um agente externo ou de regies do DNA
que permitem a deleo. Outra opo o surgimento da deleo no zigoto.
Pai Prader-Willi Est ativo
Me Prader-Willi Inativo
Pai Angelman Inativo
Me Angelman Ativo
O inativo do que sobrou vai originar a doena, porque o alelo no ser produzido.
A maioria dos casos acomete os homens.

Beckwith-Wiedemann Excesso na produo de fatores do crescimento. O recm-
nascido possui lngua protrusa e deve ser realizada uma cirurgia urgente, pois seno o beb
engasga. Um lado do corpo tem crescimento hiperplsico e o outro lado normal. Os rgos
da direita ou da esquerda so afetados, tm ocorrncia de cncer e o outro lado normal.
Sndrome de Russel-Silver As duas crianas do slide tm a mesma idade, mas a
menina bem pequena e carece dos fatores de crescimento. Ocorre retardo no crescimento.
Essas duas doenas so causadas por genes que tambm sofrem metilao alternada,
tanto o gene que promove o fator de crescimento quanto os genes que esto envolvidos no
controle do ciclo celular. Quando um fator ativa a diviso, o outro inativa e dependendo de
onde se tem a deleo, existir uma doena ou outra. (Bruno s falou por cima porque no
deu tempo).

Sndrome do X Frgil

uma doena muito comum em qualquer pas do mundo e por isso obriga a realizao
do teste do pezinho. Afeta 25% mais homens do que mulheres, justamente por estar presente
no cromossomo X e leva retardo mental. Geralmente todas as doenas de deleo levam
retardo mental.
O indivduo tem a face alongada, criptorcodismo.
O gene FMR1 um gene que est presente no cromossomo X. A sndrome do X frgil
uma doena de expanso, que significa que h uma regio de nucleotdeos que se repete, que
no caso da doena CCG. Ento, se voc pegar uma populao, cada indivduo possui um
nmero de CCGs diferentes nesse gene. A pessoa que normal possui de 6 a 50 repeties
CCG. A pessoa que portadora, possui de 50 a 200, e quem tem a sndrome possui um nmero
maior de 200 repeties.
Porque que essas repeties acontecem? Qual a explicao para uma regio do
genoma repetida, a cada diviso celular, ela se expandir? A DNA Polimerase, toda vez que
encontra uma regio repetida, ela derrapa, ou seja, derrapagem da polimerase. Toda regio
repetida do genoma tem a tendncia de aumentar ou diminuir de tamanho. No caso da
sndrome do X frgil, a regio tende a aumentar com o passar das geraes.
Qual o efeito dessa repetio? Quando se observa o caritipo de um indivduo que
possui mais de 200 repeties CCG, observa-se que no cromossomo X existe uma quebra,
porque essa regio repetida frgil. medida que ela se expande, ela tem a tendncia de
quebrar e quando se quebra essa regio, o X perde um pedao. Se esse pedao acentromrico
do X for perdido, ocorre a perda de muitos genes que esto ligados ao X e quando se perde um
grande bloco de genes ao mesmo tempo, o indivduo tem retardo mental que uma das
caractersticas funcionais da doena.
No heredograma geralmente as mes portadoras tm filhos afetados, porque como a
regio que se repete est no X, um homem pode at ter o alelo expandido, mas ele no passa
essa expanso. preciso que haja uma mulher com dois cromossomos X, com dois genes
FMR1 para que haja recombinao e essa regio aumente ainda mais.
A quebra ocorre no ncleo da clula, durante a mitose. Na mitose o stio frgil se
rompe e perdido e as prximas clulas no tero essa regio telomrica do X.
O aumento da repetio por gerao ocorre da seguinte maneira: eu tenho um
indivduo com 50 a 55 repeties CCG, quando esse alelo passado para o indivduo seguinte,
na hora de replicar o DNA a polimerase vai ter que passar pelo gene FMR1 assim como passa
por qualquer gene e vai encontrar essa regio repetida e derrapa. Ento uma repetio que
era de 50 CCG, para o prximo indivduo pode aumentar em 60, e quando esse indivduo for
produzir gameta, a regio com 60 se expande para 100. Ento, a cada gerao a repetio vai
aumentando at o indivduo que receber um fragmento de 200 ou mais do que isso vai
apresentar a doena, porque s acima desse tamanho ocorre perda de uma regio contendo
muitos genes do cromossomo X. Para eu ter essa expanso, preciso que o gene contenha
uma regio repetida e seja susceptvel expanso quando a polimerase derrapa.
Uma mulher assintomtica possui em um cromossomo 50 repeties e no outro
cromossomo ela tem 150. Ainda no atingiu o limite de quebra do X. O crossing-over igual,
mas se ocorrer de forma desigual, no final eu vou ter um cromossomo com 0 repeties ou
poucas e o bloco de 50 transferiu-se para o outro cromossomo, que passou a ter 200. Esse
cromossomo X quando passado para o filho, se ele for homem s vai ter o X e o Y
pequenininho e parte do X se quebra.
Para essa regio do X se expandir tem dois processos: derrapagem da polimerase na
hora da replicao e o crossing-over desigual, fazendo com que uma regio ganhe mais
repeties do que a outra.
Caso uma mulher tenha um cromossomo X com 100 repeties e o outro com 200, o
nico que vai se quebrar vai ser o que tem o nmero de expanses maior, mas como os genes
que vo sobrar do outro so haplossuficientes, mais difcil a melhor ter a doena. Portanto,
mais comum o homem ser afetado.