N 26 1996 A.I.M.

Laventure des rcepteurs aux imidazolines

est lexpression dune recherche qui se situe d-
librment la frontire entre le domaine cardio-
vasculaire et la neurobiologie, entre le fonda-
mental et les applications cliniques,
physiopathologiques et thrapeutiques explique
le Pr Pascal Bousquet. Au dpart, son quipe tra-
vaillait sur des substances structure imidazo-
linique susceptibles de faire baisser la pression
artrielle en agissant sur les centres sympa-
thiques contrlant le tonus vasoconstricteur. Cest
dans ce cadre quil a t conduit formuler lhy-
pothse de lexistence de rcepteurs reconnais-
sant spcifiquement ces mdicaments et dis-
tincts des rcepteurs des mdiateurs classiques du
systme nerveux autonome.
Par la suite, de nombreuses observations ont
confirm limplication de tels rcepteurs dans la
rgulation de la pression artrielle et ont fait la
preuve de leur existence non seulement dans le
cerveau, mais aussi dans de nombreux autres tis-
sus. Comme dans dautres cas auparavant (par
exemple, avec la morphine et les rcepteurs aux
opiacs), la dcouverte du rcepteur a donc pr-
cd celle du mdiateur physiologique, actuel-
lement en cours didentification.
Aujourdhui, le rcepteur aux imidazolines est
ltude dans plus dune trentaine de laboratoires
dans le monde. Sa structure, ses modalits de r-
gulation physiologique, son intervention dans cer-
tains processus de rgulation autres que celle de
la pression artrielle, font lobjet de nombreux
travaux passionnants.
I Actualits Innovations Mdecine Lhis-
toire des rcepteurs aux imidazolines com-
mence il y a plus de vingt ans lorsque lon ob-
serve avec un vasoconstricteur nasal la
survenue dun effet secondaire tout fait in-
attendu de la part dun tel mdicament : lhy-
potension.
P. Bousquet
Au dbut des an-
nes 1970, des
chercheurs saper-
oivent en effet
quune molcule
de la famille des
imidazolines, la clonidine, conue comme va-
constricteur nasal ou comme adjuvant pilo-rec-
teur des mousses raser, induit un effet vaso-
constricteur trs fugace qui est immdiatement
suivi dune hypotension, dune sdation et dune
bradycardie. Ils mettent alors lhypothse quelle
exerce son action sur le participation du sys-
tme nerveux central (et plus prcisment du
bulbe rachidien), en tant que site daction privi-
lgi de drogues cardiovasculaires telles que les
antihypertenseurs centraux. Nous confirmons cette
hypothse en obtenant, aprs injection de cloni-
dine directement dans le noyau rticulaire latral
bulbaire (NRL), une diminution significative de
la pression artrielle.
I AIM La clonidine a depuis t com-
mercialise comme anti-hypertenseur daction
centrale (Catapressan, Bhringer-Ingelheim).
Mais comment a-t-on expliqu son effet ?
P. Bousquet Cet effet hypotenseur a dabord
t attribu la mise en jeu de rcepteurs alpha 2-
adrnergiques au niveau crbral, mais nous avons
rapidement rejet cette hypothse, car nous
navons pas observ dhypotension aprs injec-
tion dans le NRL de noradrnaline, le ligand phy-
siologique des rcepteurs alpha-adrnergiques.
Au dbut des annes
1980, avec les membres
de mon quipe, nous
avons repris le problme
la base en injectant
dans le NRL toute une
srie dimidazolines et
de catcholamines. Les premires ont toutes en-
tran un effet hypotenseur alors que les dernires
ne lont pas fait. Ctait la preuve quil existait
des sites capables de reconnatre spcifique-
ment des structures imidazoliniques, telles que
celles de la clonidine ou de ses analogues, et
quil ne sagissait pas de rcepteurs adrner-
giques.
Nous avons alors suggr que laction anti-hy-
pertensive de la clonidine ntait pas uniquement
due un effet sur les rcepteurs adrnergiques
(responsables en revanche de leffet sdatif du
produit), mais galement une liaison avec de tels
sites spcifiques. Ces rsultats, publis en 1984,
laissaient nanmoins perplexes beaucoup de nos
collgues chercheurs ou cliniciens.
I AIM Cette hypothse a cependant t
confirme ?
P. Bousquet Oui, cette hypothse a t
confirme par diffrents chercheurs, notamment
Innovateurs
Le Pr Bousquet, Prix Galien Recherche 1995
A la dcouverte de nouveaux rcepteurs
Ses travaux mens depuis 1984 sur les rcepteurs aux imidazolines, quil a dcouverts,
ont valu au Pr Pascal Bousquet (Strasbourg) le Prix Galien 1995 de la recherche
en matire de mdicament. Impliqus dans la rgulation centrale de la pression artrielle,
ces rcepteurs la frontire du cardiovasculaire et du neurologique
ouvrent en effet plusieurs voies thrapeutiques, notamment dans lHTA.
Leur tude est exemplaire des travaux actuels sur les rcepteurs.
Le Pr Pascal Bousquet,
laboratoire de Pharma-
cologie cardio-vascu-
laire et rnale de lUni-
versit Louis Pasteur et
du CNRS, Strasbourg
Dune mousse
raser un
antihypertenseur
central
La dcouverte
de sites
daction
originaux
N 26 1996 A.I.M. A.I.M. 1996 N 26
par D. Reis (New York), qui a pu apporter une
preuve biochimique grce aux techniques de
liaisons spcifiques classiques. Un analogue de
clonidine marqu (triti) fix sur des prpara-
tions membranaires de bulbe rachidien (conte-
nant des rcepteurs aux imidazolines) tait com-
pltement dplac par la clonidine elle-mme
et partiellement seulement par un excs de no-
radrnaline. Cette dmonstration faite chez le
buf a t ensuite effectue par nous-mmes
chez lhomme.
IAIM Lhistoire des rcepteurs aux imi-
dazolines a t ensuite marque par lappari-
tion dun autre anti-hypertenseur daction cen-
trale, la rilmnidine (Hyperium, Biopharma).
Quelles diffrences y a-t-il entre cette molcule
et la clonidine ?
P. Bousquet La ril-
mnidine est proche de la
clonidine du point de vue
structural, mais elle pos-
sde des proprits de
fixation diffrentes. Ds
son apparition, elle a servi
doutil de recherche et a
fait considrablement progresser la connaissance
sur les rcepteurs aux imidazolines en dmontrant
une slectivit particulire pour ces derniers par
rapport la clonidine. Nous avons pu mener
ltude sur la rilmnidine et les rcepteurs aux
imidazolines grce un partenariat exemplaire avec
les quipes de recherche du groupe Servier.
Injecte au niveau du NRL, la rilmnidine en-
trane une diminution immdiate de la pres-
sion artrielle de la mme faon que la cloni-
dine. En revanche, elle agit trs peu sur le lo-
cus coeruleus, responsable de leffet sdatif de
la clonidine. Sa slectivit pour les rcepteurs aux
imidazolines est multiplie par trois par rapport
la clonidine, do la quasi-absence deffets sda-
tifs aux doses thrapeutiques. La rilmnidine reste,
ce jour, lunique exemple dun mdicament pos-
sdant une slectivit favorable pour ces rcep-
teurs aux imidazolines.
I AIM Quel est le rle exact des rcep-
teurs aux imidazolines dans la rgulation de la
pression artrielle ?
P. Bousquet Les r-
cepteurs aux imidazolines
sont ports par des neu-
rones dits cardiovascu-
laires parce quils sont
impliqus dans la rgula-
tion du tonus vasomoteur.
En loccurrence, il sagit
des neurones qui constituent un centre vasopres-
seur situ dans la rgion ventrolatrale du bulbe
rachidien. Un centre vasopresseur est un ensemble
de neurones dont la fonction consiste maintenir
la pression leve dans des conditions normales.
Les rcepteurs aux imidazolines rgulent le
fonctionnement de ces neurones. En loccurrence,
des analyses fonctionnelles de lactivit neuronale
nous ont permis de vrifier que les imidazolines
antihypertensives exercent sur ces neurones une
action inhibitrice. Le mcanisme de transduction
du signal associ ces rcepteurs neuronaux est
en revanche encore inconnu. Il existe cependant
quelques hypothses suggrant lassociation de ca-
naux ioniques ces rcepteurs ; des travaux sont
en cours pour tester ces hypothses.
IAIM Retrouve-t-on des rcepteurs aux
imidazolines dans dautres organes que le cer-
veau ?
P. Bousquet Une floraison dtudes de liai-
son spcifique a montr quil existe des sites de
liaison spcifique aux substances structure imi-
dazolinique ou drive dans de trs nombreux
tissus incluant, bien entendu, le systme nerveux
central mais galement le rein, les plaquettes, les
adipocytes, le foie, le placenta.
IAIM Ces sites rcepteurs sont-ils iden-
tiques aux premiers dcouverts ?
P. Bousquet On sait actuellement que des
sites de liaison centraux sont situs sur la mem-
brane plasmique des neurones alors que des sites
priphriques sont retrouvs sur la membrane ex-
terne des mitochondries. Les premiers, appels
RI-1, sont particulirement sensibles la cloni-
dine, la rilmnidine et lidazoxan (antagoniste
mixte des RI et des rcepteurs alpha-2 adrner-
giques) ; ils sont clairement associs la modu-
lation du tonus vasomoteur. Les seconds, d-
nomms RI-2, sont sensibles lidazoxan, mais
le sont peu ou pas la clonidine et semblent as-
socis la mono-amine oxydase. Cest ce sous-
type que lon retrouve dans le rein par exemple.
I AIM Les diffrents rcepteurs ont-ils
tous la mme fonction, cest--dire la rgula-
tion de la pression artrielle?
P. Bousquet Une trentaine dquipes de re-
cherche travaillent actuellement sur la fonction-
nalit des rcepteurs aux imidazolines. On a pro-
pos des fonctions additionnelles de ces sites : ils
Apparition
dune
molcule
spcifique
La cible :
un centre
bulbaire
vasopresseur
DE LA CLONIDINE AUX RECEPTEURS AUX IMIDAZOLINES ET A LA RILMENIDINE
CONCLUSION : la clonidine agit sur la PA au niveau du noyau rticulaire latral du bulbe (NRL).
CONSTATATION :
La clonidine, utilise au dpart
comme vasoconstricteur nasal,
peut entraner des anomalies,
notamment tensionnelles
VERIFICATION :
Effets reproduits
aprs injection dans le bulbe
(et trs exacteement dans le NRL)
HYPOTHESE :
Ces effets peuvent tre
dorigine centrale
Clonidine
PA
Effet sdatif
Prparation de bulbe rachidien
montrant de la clonidine marque
fixe sur ses rcepteurs
On ajoute
de la clonidine
La clonidine
marque est
entirement
dplace
Prparation de bulbe rachidien
montrant de la clonidine marque
fixe sur ses rcepteurs
La clonidine
marque est
seulement
partiellement
dplace
PA
PA
Injection Injection
Clonidine et autres
imidazolines
dans le NRL
Pas
deffet
sur la PA
Noradrnaline et autres
catcholamines
dans le NRL
PA
Effet sdatif
PA
Pas deffet sdatif
Injection bulbaire
de clonidine
Injection bulbaire
de rilmnidine
PA
Effet sdatif
B
C
D
A
1
1 2
2
1 2
CONCLUSION : la clonidine se fixe la fois sur des rcepteurs spcifiques et sur des rcepteurs adrnergiques.
CONCLUSION : la rilmnidine se fixe slectivement sur les rcepteurs aux imidazolines, responsables de leffet sur la PA.
On ajoute
de la noradrnaline
Site dun
rcepteur
adrnergique
Site dun
rcepteur non
adrnergique
CONCLUSION : les rcepteurs adrnergiques du NRL ne sont pas en jeu dans leffet des imidazolines sur la PA.
pourraient par exemple
participer la rgula-
tion de la rabsorption
du sodiumdans le rein
ou au processus de
contrle de la scr-
tion dinsuline.
On a galement in-
crimin un dysfonc-
tionnement de ces rcepteurs dans certains
dsordres neurologiques (une densit plus faible
de rcepteurs a t retrouve chez les dprims)
ou dans les troubles du mtabolisme lipidique
des adipocytes. Les potentialits anti-arythmiques
ou hypoglycmiantes de composs structures
imidazoliniques sont ltude.
Il reste que, pour le moment, cest dans le do-
maine de la rgulation de la pression artrielle que
les choses sont le mieux tablies.
I AIM Vous avez galement travaill
lidentification et la purification des protines
formant les rcepteurs aux imidazolines. O
en sont ces travaux ?
P. Bousquet De ce point de vue, notre quipe
sintresse au rcepteur crbral humain alors que
dautres quipes se consacrent ltude des r-
cepteurs priphriques. Rcemment, nous avons
isol une protine rvle par marquage anticorps.
Puis, nous avons montr que cette protine cor-
respondait bien un site de liaison spcifique aux
imidazolines. Cette protine est en cours de s-
quenage.
IAIM Lexistence de rcepteurs sous-en-
tend gnralement celle de ligands endognes,
cest--dire de substances synthtises par lor-
ganisme et jouant un rle dans les processus
de rgulation physiologiques. Connat-on ac-
tuellement le ou les ligands endognes des r-
cepteurs aux imidazolines ?
P. Bousquet La
question du ligand endo-
gne des rcepteurs aux
imidazolines est certaine-
ment la plus difficile. Sur
le plan exprimental,
nous disposons dextraits
crbraux bovins et hu-
mains ainsi que dextraits sanguins qui contien-
nent une ou plusieurs substances ayant des ac-
tivits biologiques qui en font de bonnes
candidates pour tre de tel(s) ligand(s). En ef-
fet, elles interfrent avec la liaison spcifique des
imidazolines. De mme, elles modifient la pres-
sion artrielle lorsquelles sont administres di-
rectement dans la rgion du noyau rticulaire la-
tral du bulbe rachidien.
Nous ne sommes cependant pas parvenus
identifier dfinitivement la ou les substances en
cause. Jusqu prsent, des obstacles techniques
nous en ont empch, au premier rang desquels se
trouve le fait que ces substances nexistent quen
quantits trs faibles dans le cerveau et dans le sang.
Une quipe amricaine a propos quun m-
tabolite dcarboxyl de larginine, lagmatine,
puisse jouer ce rle de ligand endogne. Linter-
action de cette substance avec les rcepteurs aux
imidazolines napparat cependant pas trs spci-
fique et la ralit de cette hypothse reste lobjet
dun dbat.
I AIM La dcouverte et ltude des r-
cepteurs aux imidazolines ont-elles ouvert la
voie la mise au point de nouveaux mdica-
ments ?
P. Bousquet La dcouverte des rcepteurs
aux imidazolines a permis de discriminer dfi-
nitivement le mcanisme de laction hypoten-
sive des substances de type clonidine de celui
qui prside leurs principaux effets indsi-
rables, telles la sdation, la scheresse de la
bouche et la bradycardie. Ce sont des rcepteurs
2-adrnergiques qui sont clairement impliqus
dans ces effets indsirables.
Ds lors que cette discrimination a t rendue
possible par nos travaux, confirms par de nom-
breux autres, la voie tait ouverte pour le dve-
loppement de substances antihypertensives cen-
trales slectives des rcepteurs aux imidazolines
et, de ce fait, prsentant moins deffets secon-
daires. La premire molcule sinscrivant dans
cette perspective a t la rilmnidine. On peut rai-
sonnablement penser que dautres antihyperten-
seurs prsentant ce type de profil pharmacolo-
gique seront bientt dvelopps.
Dans un avenir plus lointain, des drogues s-
lectives de rcepteurs aux imidazolines auront
peut-tre des utilisations thrapeutiques diff-
rentes. Limplication de tels rcepteurs dans des
processus pathologiques varis comme le diabte,
la dpression, les arythmies ventriculaires par
exemple, est actuellement ltude. I
Propos recueillis par
Elisabeth Soufflet
Plusieurs
candidats
pour le rle
de ligand
Dautres
fonctions
pour dautres
rcepteurs aux
imidazolines
QUESTION : quels sont les rcepteurs en jeu ? RECHERCHE : dautres imidazolines sont-elles plus spcifiques ?
QUESTION : o se fixe la clonidine ?