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Tinción de Ziehl neelsen

 Fue desarrollada por Paul Ehrlich para manifestar la presencia de los bacilos causantes
de la tuberculosis.
 La técnica fuerza a la penetración de la fucsina básica en la pared celular mediante la
acción combinada del fenol y el calor, que aumentan la fluidez de la capa de acidos
micolicos: el calor deshaceel componente ceroso y el fenol actua a modo de
disolvente, permitiendo el paso del colorante básico que se une a los acidos micolicos
con carga negativa. Cuando cesa la aplicación de calor y/o se elimina el exceso de fenol
mediante un lavado con agua, la pared recupera su consistencia cerosa, pero las
moléculas de fucsina quedan atrapadas en su espesor.

 Procedimiento
1. Sobre una porta debidamente limpia se pasa la muestra patológica que se
desea observar.
2. Y se fija la muestra haciendo leves pases por la llama.
3. Se compone de tres fases la tinción y es fuscina, alcohol, azul de metileno
4. El primero que se aplica es la fucsina ya que esta tiñe todas las estructuras
celulares y bacterial de la muestra; se tiene en cuenta que tiene que pasar 10
minutos pero con ayuda del calentamiento de una llama (su paso por la
muestra es leve solo se pasa de una a tres veces durante los 10 minutos),
debe producirse un vapor pero nunca su ebullición ya que es perjudicial a la
salud y esto sirve ya que son alcohol-acido resistentes ya que se tiñen con
dificultad.
5. Una vez se completen los 10 minutos se lava con agua destilada para lavar el
excedente y se procede a la segunda fase
6. Para la segunda fase se añade alcohol por 30 segundos y se vuelve a lavar con
agua destilada; ya que con esta decoloración se elimina el colorante primario
de todas las bacterias que no sea alcohol-acido resistentes se elimina el exceso
de agua y se procede a la última fase.
7. Se aplica el azul de metileno durante un minuto se lava con agua para quitar
el excedente y se seca la muestra; esta última fase sirve para teñir células,
exudado y bacterias no alcohol-acido resistentes.
8. Se pone una gota de aceite de inmersión en la mitad de la muestra y se mira
en aumento de 100x
La utilidad de esta tinción es debido a que la característica es que su fondo es azul ya que estas
células, bacterias y exudados no son alcohol-ácido resistente, sobre ellas se destaca en color
fucsia la presencia de las micobacterias tanto aisladas como agrupadas al haber sido
fagocitadas por macrofagos, es típica en una mucosa intestinal afectada por paratuberculosis

Los alcohol-acidos resistentes son micobacterias que son unas bacterias
aerobias, y no móviles, muy contagiosas, y que producen una serie de
infecciones altamente prevalentes en el ser humano, entre otras, la tuberculosis
y la lepra. Su nombre proviene del griego μυκος, cera, debido a los compuestos
de su pared celular.

Las características son: Son bacilos finos, largos e inmóviles, y que poseen
ácido-alcohol resistencia. Esto significa que son resistentes a la decoloración
de la fucsina debido a la alta concentración de ácido micólico en la pared
celular. Por esto mismo, no se pueden catalogar dentro de la clasificación de
Gram, aunque tradicionalmente se las considera Gram positivas.
Su cultivo es muy variable, siendo algunas especies fácilmente adaptables al
crecimiento en sustratos muy simples, mientras que otras (entre ellas M.
tuberculosis y M. leprae) tienen un crecimiento muy lento (hasta 20 días),
requiriendo otros medios de cultivo, comoe s el caso del Löwenstein-Jensen,
con colonias secas, esféricas, rugosas y de color blanco cremoso. Son
aerobias estrictas.
Para su visualización, se utilizan tinciones específicas, como la de Ziehl-
Nielsen o la de auramina (para una posterior visualización con
inmunofluorescencia).