Tincin de Ziehl neelsen

Fue desarrollada por Paul Ehrlich para manifestar la presencia de los bacilos causantes
de la tuberculosis.
La tcnica fuerza a la penetracin de la fucsina bsica en la pared celular mediante la
accin combinada del fenol y el calor, que aumentan la fluidez de la capa de acidos
micolicos: el calor deshaceel componente ceroso y el fenol actua a modo de
disolvente, permitiendo el paso del colorante bsico que se une a los acidos micolicos
con carga negativa. Cuando cesa la aplicacin de calor y/o se elimina el exceso de fenol
mediante un lavado con agua, la pared recupera su consistencia cerosa, pero las
molculas de fucsina quedan atrapadas en su espesor.

Procedimiento
1. Sobre una porta debidamente limpia se pasa la muestra patolgica que se
desea observar.
2. Y se fija la muestra haciendo leves pases por la llama.
3. Se compone de tres fases la tincin y es fuscina, alcohol, azul de metileno
4. El primero que se aplica es la fucsina ya que esta tie todas las estructuras
celulares y bacterial de la muestra; se tiene en cuenta que tiene que pasar 10
minutos pero con ayuda del calentamiento de una llama (su paso por la
muestra es leve solo se pasa de una a tres veces durante los 10 minutos),
debe producirse un vapor pero nunca su ebullicin ya que es perjudicial a la
salud y esto sirve ya que son alcohol-acido resistentes ya que se tien con
dificultad.
5. Una vez se completen los 10 minutos se lava con agua destilada para lavar el
excedente y se procede a la segunda fase
6. Para la segunda fase se aade alcohol por 30 segundos y se vuelve a lavar con
agua destilada; ya que con esta decoloracin se elimina el colorante primario
de todas las bacterias que no sea alcohol-acido resistentes se elimina el exceso
de agua y se procede a la ltima fase.
7. Se aplica el azul de metileno durante un minuto se lava con agua para quitar
el excedente y se seca la muestra; esta ltima fase sirve para teir clulas,
exudado y bacterias no alcohol-acido resistentes.
8. Se pone una gota de aceite de inmersin en la mitad de la muestra y se mira
en aumento de 100x
La utilidad de esta tincin es debido a que la caracterstica es que su fondo es azul ya que estas
clulas, bacterias y exudados no son alcohol-cido resistente, sobre ellas se destaca en color
fucsia la presencia de las micobacterias tanto aisladas como agrupadas al haber sido
fagocitadas por macrofagos, es tpica en una mucosa intestinal afectada por paratuberculosis

Los alcohol-acidos resistentes son micobacterias que son unas bacterias
aerobias, y no mviles, muy contagiosas, y que producen una serie de
infecciones altamente prevalentes en el ser humano, entre otras, la tuberculosis
y la lepra. Su nombre proviene del griego , cera, debido a los compuestos
de su pared celular.

Las caractersticas son: Son bacilos finos, largos e inmviles, y que poseen
cido-alcohol resistencia. Esto significa que son resistentes a la decoloracin
de la fucsina debido a la alta concentracin de cido miclico en la pared
celular. Por esto mismo, no se pueden catalogar dentro de la clasificacin de
Gram, aunque tradicionalmente se las considera Gram positivas.
Su cultivo es muy variable, siendo algunas especies fcilmente adaptables al
crecimiento en sustratos muy simples, mientras que otras (entre ellas M.
tuberculosis y M. leprae) tienen un crecimiento muy lento (hasta 20 das),
requiriendo otros medios de cultivo, comoe s el caso del Lwenstein-Jensen,
con colonias secas, esfricas, rugosas y de color blanco cremoso. Son
aerobias estrictas.
Para su visualizacin, se utilizan tinciones especficas, como la de Ziehl-
Nielsen o la de auramina (para una posterior visualizacin con
inmunofluorescencia).