AULA PRTICA N 4

Ttulo: Cromatografia
1-ASSUNTO: propriedades qumicas e separao de misturas.
2-OBJETIVO: separar diferentes compostos presentes numa mistura
3-PR-LABORATRIO: revisou-se os conceitos sobre interaes qumicas e
polaridade e completou-se a introduo.
3.1. INTRODUO:

Uma das tcnicas de separao bastante utilizada a cromatografia.
Esta tcnica foi desenvolvida por Michael Tswett (botnico russo), no comeo
do sculo XX, passando atravs de uma coluna preenchida com carbonato de
clcio CaCO
3
, pigmentos extrados de plantas. Os pigmentos
foram colocados dentro da coluna, sobre o carbonato de
clcio (fase estacionria), adicionando solvente (eluente)
sobre os pigmentos, mantendo um movimento contnuo de
cima para baixo. Aps um certo tempo foi observado que os
pigmentos tinham sido separados em vrias manchas com
cores diferentes, como resultado do fato de que haviam se
movido para baixo na coluna, com velocidades diferentes.
Os pigmentos que interagiam mais com a fase estacionria,
ou apresentavam menor afinidade com o solvente, moviam-
se para baixo mais devagar. Por sua vez, os pigmentos, que
tinham maior afinidade com o solvente e menor com a fase
estacionria, moviam-se mais rpido.

As substncias cujas molculas so polares interagem mais
intensamente com solventes polares. As substncias apolares tem mais
afinidade com solventes apolares. Assim, variando a polaridade do solvente, ou
misturas de solventes, pode-se separar os componentes de uma amostra.





f a s e
e s t a c i o n r i a
s o l v e n t e

Cromatografia em papel

Um exemplo de cromatografia mais clssico a
cromatografia em papel. Neste tipo de cromatografia, uma
amostra lquida flui por uma tira de papel adsorvente
vertical, onde os componentes depositam-se em locais
especficos. O papel, onde a fase estacionria o papel,
sobre o qual colocada a amostra. O papel com a
amostra colocado em um bquer fechado, com solvente
suficiente para molhar apenas a parte inferior do papel,
no tocando a amostra, conforme a figura ao lado.
O papel composto por molculas extremamente longas chamadas
celulose. A celulose um polmero, o que significa ela composta por
milhares de molculas menores que se organizam juntas. Esta organizao
molecular que compe as cadeias de celulose polar e, como resultado, a
celulose tem muitas regies de altas e baixas densidades de eltrons. As
regies "carregadas" em uma cadeia de celulose so atradas para as regies
de cargas opostas de outras cadeias adjacentes, e isto ajuda a unir as fibras de
papel. O fato das longas cadeias de celulose serem alinhadas em uma direo
pode ser demonstrado rasgando um pedao de jornal. Perceber-se- que
aquele jornal rasga facilmente e ao longo de uma linha bastante reta, se
rasgado em uma direo, mas quando rasgado a um ngulo de 90, o papel
no rasgar facilmente ao longo de uma linha reta.
A cromatografia em papel uma das tcnicas mais simples e que requer
menos instrumentos para realizao, porm a que apresenta as maiores
restries para aplicao em termos analticos.

Cromatografia em coluna

A cromatografia em coluna uma tcnica de partio entre duas fases,
slida e lquida, baseada na capacidade de adsoro e solubilidade. O slido
deve ser um material insolvel na fase lquida associada, sendo que os mais
utilizados so a slica gel (SiO
2
) e alumina (Al
2
O
3
), geralmente na forma de p.
A mistura a ser separada colocada na coluna com um eluente(solvente)
menos polar e vai-se aumentando gradativamente a polaridade do eluente e

Grampo
Origem
Solvente
Figura1: cromatografia em papel
conseqentemente o seu poder de arraste de substncias mais polares. Uma
seqncia de eluentes normalmente utilizada a seguinte: ter de petrleo,
hexano, ter etlico, tetracloreto de carbono, acetato de etila, etanol, metanol,
gua e cido actico.
O fluxo de solvente deve ser contnuo. Os diferentes componentes da
mistura mover-se-o com velocidades distintas dependendo de sua afinidade
relativa pelo adsorvente (grupos polares interagem melhor com o adsorvente) e
tambm pelo eluente. Assim, a capacidade de um determinado eluente em
arrastar um composto adsorvido na coluna depende quase diretamente da
polaridade do solvente com relao ao composto.
medida que os compostos da mistura so separados, bandas ou
zonas mveis comeam a ser formadas; cada banda contendo somente um
composto. Em geral, os compostos apolares passam atravs da coluna com
uma velocidade maior do que os compostos polares, porque os primeiros tm
menor afinidade com a fase estacionria. Se o adsorvente escolhido interagir
fortemente com todos os compostos da mistura, ela no se mover. Por outro
lado, se for escolhido um solvente muito polar, todos os solutos podem ser
eludos sem serem separados. Por uma escolha cuidadosa das condies,
praticamente qualquer mistura pode ser separada (Figura 2).

Figura 2: Cromatografia em coluna

Outros adsorventes slidos para cromatografia de coluna em ordem
crescente de capacidade de reteno de compostos polares so: papel, amido,
acar , sulfato de clcio, slica gel, xido de magnsio, alumina e carvo ativo.
Ainda, a alumina usada comercialmente pode ser cida, bsica ou neutra.

4-RESULTADOS E DISCUSSO

Experimento 1.
Utilizao de caneta hidrocor

Traou-se uma linha reta com um lpis, a 2 cm da
extremidade, nas duas folhas de papel para cromatografia.
Colocou-se 4 pontos com o hidrocor eqidistantes uns dos
outros ao longo da reta, numerando-os de 1 a 4.
Na maior das folhas de papel filtro, foi feito pequenos pontos
com cada uma das canetas seguindo a ordem das cores
mostradas na figura acima, numere os pontos de 1 a 4 . as
cores utilizadas esto representadas na figura 4

Obs: deixou-se um pequeno espao
as duas extremidades de forma a no se tocarem.

Colocou-se o papel dentro do bquer contendo 1-
butanol, etanol e amnia (2M) na proporo de
1:1:1., de maneira que a mistura solvente no
toque nos pontos que voc colocou a tinta da
caneta hidrocor. Cubriu-se o bquer com uma
placa de petri e evitou-se balan-lo.


Quando a linha do solvente estava quase alcanando a extremidade superior
papel, removeu-se do bquer e marcou a posio da linha do
solvente com um lpis e deixe-o secar naturalmente. Depois de seco foi feito

Grampo
Origem
Solvente

Figura 3: papel de cromatografia
Figura 4: sistema montado para a
cromatografia em papel.
um circulo com um lpis ao redor de cada mancha. O procedimento foi
realizado 3 vezes consecutivas.
A figura a seguir mostra o papel de filtro em que foi utilizado para fazer
a cromatografia as tintas da caneta hidrocor, antes e aps ter mantido um
determinado tempo no bquer com a mistura de solvente.


Figura 5: papel aps o arraste do solvente.
As manchas ficam assim devido s molculas da tinta do hidrocor terem
caractersticas diferentes (como tamanho e solubilidade), quando expostas ao
solvente (1-butanol, etanol e amnia 2M) elas so arrastadas em diferentes
velocidades, assim ficando separadas em diversas manchas como se pode
visualizar na figura 4, cada mancha representa um substncia diferente.
A razo entre a distncia percorrida pelo solvente e a distncia
percorrida pelas manchas constante e denotado por R
f
.
O Rf pode ser calculado utilizando-se a seguinte equao:

S
C
R
f


onde,
C = distncia percorrida pelo composto, da origem ao centro da mancha.
S = distncia percorrida pelo solvente da origem a linha superior (linha do
solvente).
Anotaram-se os valores de S e C correspondente a cada ponto e determinou-
se o R
f




.
A tabelas a seguir mostram a cores das manchas e o Rf das 3 vezes em que
foi realizada a cromatografia.
Tabela 01: resultados obtidos da 1 cromatografia em papel e Rf da aula
pratica.
Cores
Cores iniciais Verde claro Vermelho Verde escuro
Cores das
manchas e Rf
calculado.
Azul; 0,1 cm Rosa; 0,128 cm Azul; 0,143 cm
Azul claro; 0,086
cm
Rosa claro; 0,086
cm
Azul claro 0,071 cm
Amarelo; 0,128
cm
Lils; 0,114 cm Amarelo; 0,2 cm

Tabela 02: resultados obtidos da 2 cromatografia em papel e Rf da aula
pratica.
Cores
Cores iniciais Verde claro Vermelho Verde escuro

Cores das
manchas e Rf
calculado.
Azul; 0,1 cm Rosa; 0,171 cm Azul; 0,143 cm
Amarelo; 0,214 cm Rosa claro; 0,057
cm
Azul claro 0,071
cm
----//---- Lils; 0,228 cm Amarelo; 0,2 cm
----//---- Lils claro;
0,243cm
----//----









Tabela 03: resultados obtidos da 3 cromatografia em papel e Rf da aula
pratica.
Cores
Cores iniciais Verde claro Vermelho Verde escuro
Cores das
manchas e Rf
calculado.
Verde bem claro;
0,2 cm
Rosa; 0,243 cm Azul; 0,214 cm
Azul claro; 0,071
cm
Rosa lils; 0,286
cm
Azul claro 0,057 cm
Amarelo; 0,214
cm
------//------ Amarelo; 0,228cm

Ao comparar as tabela notou-se que entre um experimento e outro, ouve certa
variao de Rf e algumas manchas no apareceram, isso acontece pois a cada
cromatografia realizada consegui-se identificar diferentes compostos, e em
outras esse compostos no apareceram, isso tanto pode ter ocorrido por causa
do solvente ou por causa do pontinho do hidrocor no inicio da cromatografia.
Obs: a cor azul que tambm foi colocada no papel para cromatografia no
conseguiu separar, porque o talvez necessitasse de um papel maior para que
seu arraste tivesse acontecido.

Experimento 2
O tcnico de laboratrio triturou material a ser usado na aula em
um almofariz e pistilo que se tratava de azul de brocresol, vermelho de
metileno e slica gel logo em seguida, preparou-se uma emulso
usando a slica gel e hexano. O sistema de cromatografia de coluna
(coluna funil e bquer) j estava montado, ao iniciar pratica foi colocado
um pedao de algodo na coluna para reter os slidos, em seguida
colocou-se a emulso (hexano e slica gel) na coluna e abriu-se a
torneira para que o fluxo fosse continuo, aps certo tempo a slica gel
comeou a decantar no interior da coluna formando assim a fase fixa.
O solvente utilizado foi uma mistura de acetato de etila e hexano, o
solvente faz a funo da fase mvel da cromatografia de coluna, pois o
f a s e
e s t a c i o n r i a
s o l v e n t e

fluxo do solvente que vai separar os compostos atravs de sua
polaridade.
Aps colocar o solvente colocou-se a mistura a ser separada, onde a mesma
ficou depositada no inicio da coluna, aps certo tempo comeou a aparecer a
primeira cor, ento foi adicionado dicloro metano para acelerar o processo de
arraste, ou seja, aumentar a polaridade do solvente com os compostos, a
medida que o tempo passava a mistura e a separando lentamente pois o
processo de cromatografia em coluna relativamente demorado.
Aps alguns minutos pode-se recolher a primeira cor. Foram recolhidas
alquotas de aproximadamente 25 ml das cores que eram arrastadas pelo
eluente a tabela a seguir mostra as cores identificadas no experimento.
Tabela 04: resultados obtidos atravs do arraste do eluente (fase mvel)
recolhidas em amostra de aproximadamente 25ml.
Amostras Cores arrastadas pelo eluente
1 Vermelho
2 Laranja (forte)
3 Laranja (mais claro)
4 Amarelo (dourado)
5 Amarelo claro
6 Amarelo claro
7 Amarelo
8 Amarelo
9 Amarelo escuro
10 Amarelo escuro

O composto que foi arrastado primeiro foi o vermelho de metileno, pois a parte
azul (azul de bromocresol) ficou na parte de cima ento foi separado, com isso
conclui-se que o vermelho de metileno tinha mais afinidade com o solvente por
isso foi separado com maior velocidade que os demais.




5. PS LABORATRIO

1-Por que importante fazer manchas bem pequenas na obteno de um
cromatograma?
As manchas feitas no papel cromatogrfico devem ser pequenas, pois, o
solvente ir fazer o arraste e expandir os compostos de cada mancha. Se as
manchas fossem grandes haveria a mistura dos compostos e sendo assim uma
dificuldade maior na identificao de cada composto.

2- Determine as distncias C e S e calcule o valor de R
f
correspondente
no experimento1.
VER TABELA 1, 2 E 3

3-Num cromatograma em papel, uma mancha vermelha desloca-se 4,0 cm
da origem enquanto a linha do solvente desloca-se 8,0 cm. Qual o valor
do R
f
para essa mancha?
Rf=

4- Dois cromatogramas de uma mesma substncia so obtidos sob as
mesmas condies exceto que um deixado correr por 10 minutos e o
outro 20 minutos. Sero os valores de R
f
diferentes? Explique sua
resposta.
Sim, porque deixando o papel de cromatografia por mais tempo em contato
com o solvente ele ir arrastar mais ainda as substancias assim aumentando a
distancia entre o percorrida pelo solvente, desta forma aumentando o Rf, ou
seja se aumenta o a distancia do solvente, aumenta o Rf e vice-versa.

7- Discuta algumas aplicaes desta tcnica.
As aplicaes da cromatografia lquida so inmeras tanto quantitativas e
qualitativas. Dentre elas podemos destacas anlises de amostras complexas:
como urina, sangue, alimentos, solo, derivados do petrleo, anti-oxidadentes,
pesticidas, cidos nuclicos, polmeros e uma larga aplicao em produo de
medicamentos. A aplicao desta tcnica ampla pois, possvel a
determinao de uma grande quantidade de compostos qumicos orgnicos e
inorgnicos com pesos moleculares altos ou com uma baixa estabilidade
temperatura, que so impossveis de analisar por cromatografia gasosa e
apresentando enantiometros, bastando que estes sejam solveis na fase mvel
usada.

6-CONCLUSES
6.1 TCNICA
Concluiu-se que a cromatografia uma tcnica bastante usada para
separar vrios compostos e que ela pode ser usada tanto para analises
quantitativas como nas qualitativas. Os tipos de cromatografia usados foram o
de papel e de coluna. O de papel um teste mais rpido e de pouca preciso,
j o de coluna mais demorado, pois requer mais tempo para que o solvente
arraste os compostos. Tambm se aprendeu o principio do qual a
cromatografia que est de acordo com a polaridade dos compostos em contato
com o solvente.

6.2 GRUPAL
Essa aula foi de grande aprendizado para ns do grupo, pois tivemos a
oportunidade de estudar sobre algo que no tnhamos conhecimento, Alem de
aprender uma nova tcnica de separao de uma mistura que concerteza vai
ser usada no decorrer de nossa vida acadmica e profissional.

7- BIBLIOGRAFIA
http://www.yesmag.ca/projects/paper_chromaBW.html
acesso em : 05/11/2010 as 17:40 hs

http://vsites.unb.br/iq/litmo/LQO1_2009/Roteiro/cromatografia_em_camada_del
gada_e_coluna%20_LQO_1_09.pdf
acesso em : 05/11/2010 as 17:46 hs




























AULA PRATICA N 4:
CROMATOGRAFIA

















Mossor-RN, 2010



UNIVERSIDADE DO ESTADO DO RIO GRANDE DO NORTE UERN
Faculdade de Cincias Exatas e Naturais FANAT
Departamento de Qumica



























CROMATOGRAFIA

































Mossor-RN, 2010
ANTONIO ALEX DE LIMA SILVA
ALEXANDRA BOAVENTURA DE OLIVEIRA
GILBERTO GOMES FREIRE JUNIOR
FRANCISCO DAMIAO DE MENDOA
DANIELE DA SILVA OLIVEIRA

Este trabalho
quesito da disciplina
Qumica geral e
experimental bsica do
professor Dr. Luiz di
Souza.