ANEP UDELAR

CETP FACULTAD DE QUMICA

TECNLOGO QUMICO

INFORME FINAL DE PASANTA
REALIZADO EN









Pasante: Beatriz Fast
Tutor Acadmico: Andrea Ortega
Tutor Empresarial: Eleuterio Umpirrez



Junio-Setiembre / 2010




LABORATORIO DE ANLISIS ORGNICO
DROGAS-DOPING





Informe final
Beatriz Fast, 2010
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Tabla de contenido
1.0 Introduccin .................................................................................................................... 3
2.0 Polo Tecnolgico de Pando................................................................................................. 4
2.1 Caractersticas generales .................................................................................................... 4
2.2 Funcionamiento del Polo Tecnolgico de Pando .................................................................... 5
2.3 Responsabilidades de cada rea del PTP .............................................................................. 7
2.4 Principales productos o servicios ......................................................................................... 9
2.5 Unidades del PTP .......................................................................................................... 10
2.6 Unidad Ambiental ......................................................................................................... 10
2.7 Caractersticas del Laboratorio de Anlisis Orgnico Ambiental ........................................... 11
3.0 Conceptos destacados ...................................................................................................... 13
3.1 Cromatografa ................................................................................................................ 13
3.2 Cromatografa de gases ................................................................................................... 13
3.3 Espectrometra de masas ................................................................................................. 17
3.4 Cromatografa de gases acoplado a espectrometra de masas ................................................. 24
4.0 Actividades ................................................................................................................... 25
4.1 Descripcin de las actividades propuestas a realizar ............................................................ 25
4.2 Tareas realizadas ........................................................................................................... 25
4.3 Desarrollo de las tareas realizadas .................................................................................... 26
5.0 Materiales y/o Normas de Referencia ................................................................................ 31
6.0 Autoevaluacin .............................................................................................................. 35
6.1 Competencias puestas en juego para realizar la experiencia .................................................. 35
6.2 Capacidad de integracin al grupo humano ........................................................................ 35
6.3 Capacidad de integracin al mbito laboral ........................................................................ 36
6.4 Vinculacin de las actividades con contenidos y aprendizajes incorporados ........................... 36
7.0 Fuentes de informacin ................................................................................................... 37
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1.0Introduccin
A continuacin se describen las estructuras y objetivos de la Institucin donde se
desarroll la actividad como pasante de la Carrera Tecnlogo Qumico. Esta experiencia
laboral se llev a cabo en el rea de Anlisis de Drogas-Doping en el Laboratorio de
Anlisis Orgnico (LAO), del Polo Tecnolgico de Pando (PTP).

El objetivo de dicha pasanta es adquirir experiencia laboral en un mbito de laboratorio
complejo, aplicando conocimientos adquiridos durante la carrera, integrando un equipo
humano de trabajo.
La pasanta se realiz en un perodo de 16 semanas, dos das por semana, 8 horas por
da.
Se elabor un cronograma con las tareas realizadas y a realizar durante este perodo.
Durante las primeras cinco semanas de dicha actividad, se realizaron tareas varias
como: la lectura de procedimientos, protocolos y normas brindadas por el LAO, trabajos
comunes al laboratorio, manejo de equipos, etc.
En este perodo, mediante la explicacin de los diferentes anlisis y la participacin en
los mismos, se logr una rpida relacin con el grupo humano y la integracin en ste.
Una vez conocidos los instructivos, se llevan a cabo los ensayos de rutina, en forma ms
independiente, mediante los mtodos correspondientes, detallados a continuacin del
presente informe.

El LAO, dentro de la unidad Ambiental del PTP,est dividido en dos sectores: un sector
de Medio Ambiente y otro de Drogas y Dopping siendo en este ltimo donde se realiz
de la pasanta.
El sector de Drogas Doping realiza especficamente anlisis de drogas de abuso en
distintas matrices (polvos, orina, sangre, etc.), tanto de caballos como de humanos y
cuenta con estndares certificados de sus metabolitos para su utilizacin ya sea en
anlisis de drogas laborales (Anfetaminas, xtasis, Opiceos, Marihuana, PCP,
Nicotina, etc.), as como para drogas en Doping animal (equino y bovino).
Adems realiza la determinacin de presencia de Helicobacter Pylori por Cromatografa
de Gases acoplado a Espectrometra de Masas (GC/MS) de unos 200 pacientes
anualmente.
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2.0 Polo Tecnolgico de Pando
2.1 Caractersticas generales
El Polo Tecnolgico de Pando (PTP) es un centro de investigacin y desarrollo e
innovacin (I+D+i), que ofrece servicios en temas relacionados a la innovacin.
Funciona como una incubadora de departamentos de I+D+i para empresas ya existentes,
usando el modelo de consorcios, y tambin como proveedor permanente de I+D+i y
Servicios Tecnolgicos para otras empresas e instituciones, que no optanpor formar
consorcios con el PTP.Est dirigido a atender las necesidades de pequeas y medianas
empresas (PYMES), de los sectores farmacuticos, alimentos, agro-procesamiento y
qumicos, entre otros.(2)

Dentro de sus cometidos se encuentra el diseo y puesta en marcha de estrategias
conjuntas de innovacin y desarrollo en reas clave para el Uruguay. (Por ejemplo
medioambiente)

La misin del centro es promover la incorporacin de conocimiento a la produccin de
bienes y servicios, originando la generacin de empleo y una mejor calidad de vida de
los uruguayos.
Busca ser un centro de referencia en Amrica Latina dedicado a la investigacin y
desarrollo, en las reas de Qumica y Biotecnologa, fuertemente vinculado a los
sectores farmacutico, alimentario y ambiental preferiblemente bajo la forma de
asociaciones de riesgo y beneficio compartidos con las empresas usuarias.

Imagen PTP, extrada de http://www.cnd.org.uy,(2)
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El PTP nace en la Facultad de Qumica en el ao 2001 y se inscribe dentro de una
poltica de la Universidad de la Repblica, para promover la incorporacin de
conocimientos a la produccin de bienes y servicios, colaborando as en la generacin
de riqueza y empleo. (4)

2.2 Funcionamiento del Polo Tecnolgico de Pando
El PTP es dirigido por una Comisin Directiva que est integrada por:
Dos representantes del Departamento Tecnolgico de la Facultad de Qumica;
Dos representantes de un Consorcio entre Fundaquim, que es una fundacin
relacionada a la Facultad de Qumica de la Universidad de la Repblica, y
Urutec, que es una consultora especializada en la gestin de la innovacin;
El Director del Polo Tecnolgico.

Los cinco integrantes de la Comisin Directiva son designados por el consejo de la
Facultad de Qumica. (2)
El PTP acta en contacto directo con las empresas e instituciones que potencialmente
puedan demandar conocimiento, para ello se organiza en equipos de trabajo por
unidades estratgicas, integrados por un Jefe de Proyectos y su correspondiente grupo
de Investigadores y Tecnlogos.
Sus principales destinatarios son los sectores farmacutico y alimentario. (4)
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Ubicacin orgnica y responsabilidades del lugar de desempeo
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2.3 Responsabilidades de cada rea del PTP
Consejo de Facultad de Qumica
El Consejo de Facultad de Qumica es el rgano de mayor jerarqua, toma decisiones
relacionadas con el PTP.

Comisin Directiva del PTP
Esta comisin est integrada por el Director del PTP, dos delegados por el
Departamento Tecnolgico y el Decano de la Facultad de Qumica.
Este rgano tiene la facultad de tomar decisiones en reas claves de la gestin. Es
responsable del control de todo lo concerniente a los aspectos administrativos,
financieros, y cumplimiento de los objetivos estratgicos acordados en el PTP.
Secretara
Gestin de todo lo relacionado con las actividades del Director y de la Comisin
Directiva del Polo.
Gestin de las comunicaciones hacia y desde los diferentes sectores del PTP.
Colaboracin ejecutiva para el relacionamiento del Polo con los sectores acadmico y
administrativo de la Facultad de Qumica, as como con empresas y organismos
internacionales
Directores de Proyectos
Debe mantener un sistema de informacin y control de los diferentes proyectos que se
desarrollen en el PTP, en los aspectos de presupuestacin, control de costos y
cumplimiento de metas. Para ello es necesario que los jefes de proyecto reporten los
avances de las actividades de manera sistemtica.
Otro aspecto fundamental de su gestin se relaciona con el desarrollo y control de las
reglamentaciones internas y de los contratos con las empresas. Tanto para las empresas
de los consorcios como para las incubadas en el Polo, los temas de confidencialidad y
proteccin de la propiedad intelectual son muy relevantes.

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Jefe de Proyectos
Generacin de proyectos de investigacin y servicios tecnolgicos destinados al
desarrollo de la industria. Planificacin del desarrollo del rea. Es el responsable de
cada proyecto, deber poseer habilidades que trasciendan los aspectos puramente
tcnicos. Adems de la idoneidad tcnica en los aspectos particulares del proyecto,
requerir otras habilidades como conductor de un equipo de trabajo multidisciplinario, y
tambin como administrador de recursos tanto humanos como materiales. El criterio
principal para determinar el logro de los resultados ser la satisfaccin de los clientes
en tiempo y forma.

Investigador Senior
Responsable tcnico en relacin con la calidad de los servicios prestados en su rea de
especializacin. Ejecucin de proyectos del PTP destinados a satisfacer las demandas de
los clientes. Planificacin del desarrollo del rea.

Investigador Junior
Ejecucin de proyectos del Polo Tecnolgico destinados a satisfacer las demandas de
los clientes. Planificacin del desarrollo del rea.

Tecnlogo
Ejecucin de tareas en proyectos del Polo Tecnolgico destinados a satisfacer las
demandas de los clientes. Colaboracin en el desarrollo de la infraestructura del rea.
(4)






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2.4 Principales productos o servicios
Los servicios ofrecidos por el PTP son:
Actividades de I+D+i conjuntas o por contrato.
Servicios analticos de alta tecnologa, incluyendo diseo de laboratorios
analticos.
Instalacin de empresas de base tecnolgica en rgimen de incubacin.
Capacitacin de personal adaptada a los requerimientos de las empresas.
Asesoramiento integral en temas de propiedad intelectual.
Asesoramiento en Inteligencia Competitiva (vigilancia tecnolgica y de
mercado).
Consultora en nuevas tecnologas y su gestin (produccin ms limpia,
seguridad, calidad, buenas prcticas).



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2.5 Unidades del PTP
El PTP cuenta con cinco unidades estratgicas de I+D:
Biotecnologa
Alimentos
Farmacutica
Servicios Tecnolgicos
Ambiental y Drogas Doping
Material e imgenes extrados de fuente 4
2.6 Unidad Ambiental
Esta unidad busca soluciones a la problemtica ambiental generada a nivel industrial,
debido al vertido de efluentes y al inadecuado manejo de los recursos naturales.
Presenta un carcter complementario y transversal a todas las actividades realizadas en
el PTP con un fuerte vnculo con el sector productivo e industrial.

El nfasis est puesto en la promocin e implementacin de tecnologas limpias y de
sistemas de gestin ambiental que conlleven una reduccin efectiva de las emisiones y
vertidos contaminantes y de los residuos industriales que generan los procesos
productivos, buscando los beneficios econmicos asociados, indispensables para el
logro de la rentabilidad de las empresas.
En esta rea se realizan estudios de valoracin de los impactos ambientales asociados a
los procesos y/o productos, involucrando todas las etapas del mismo, desde la obtencin
de las materias primas hasta su eliminacin final como residuo. Se analizan los costos
asociados al proceso determinando el gasto a partir de la generacin de desechos y su
gestin. (7)
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2.7 Caractersticas del Laboratorio de Anlisis Orgnico Ambiental
El Laboratorio de Anlisis Orgnico (LAO) es el centro del rea Ambiental, es una
unidad del Departamento de Qumica Orgnica y del Departamento Tecnolgico
(DEPTEC), asociada a la Unidad de Anlisis de Agua (UAA) que brinda servicios para
clientes internos del departamento as como para clientes externos.

Actualmente el LAO busca ampliar la capacidad de servicios que puede brindar al
sector productivo sin competir con firmas en plaza pero brindando las mayores garantas
posibles en lo que respecta a la calidad de los resultados, capacidad tcnica e
independiente (libre de presiones).
Para lograr estos objetivos se cuenta con equipamiento avanzado:
Un Cromatgrafo de Gases acoplado a Espectrmetros de Masas (CG/MS) para
columna capilar. Hewlet-Packard, 5890 II Plus/5972 con inyector automtico
Un Cromatgrafo de Gases acoplado a Espectrmetros de Masas Thermo DSQ
II/Focus, de ionizacin a 70 o a 20 eV, con inyector automtico de SPME, HS y
lquido.
Un Infrarrojo por Transformada de Fourier (FT) Shimadzu.
TLC scannerShimadzu
HPLC con inyector Perkin Elmer, bomba Perkin Elmer y detector Shimadzu
10A.
Absorcin Atmica con Horno de Grafito.
Medidor porttil de vapores de Mercurio en aire.

El LAO realiza en promedio unos veinte asesoramientos y unos 1000 anlisis al ao.
Adems realiza los anlisis de compuestos orgnico (DDT, Aldrin, Eldrin, THM, 2,4-D,
etc.) en el agua potable de todo el pas como Laboratorio asociado a UAA y por el
convenio URSEA-Facultad de Qumica.

El LAO adems cuenta con la tecnologa y personal capacitado para la determinacin de
los componentes desconocidos, dado que posee el equipamiento acorde para ello y que
diariamente a nivel investigacin se estn buscando e identificando nuevas molculas
tanto naturales como sintticas.
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Ofrecer estos servicios sin calidad tcnica y acadmica sera una oferta vaca y carente
de las ms mnimas garantas. Por estas razones el LAO trabaja firmemente para lograr
estos objetivos, mediante la acreditacin ISO 17025 para algunas de sus
determinaciones, para lo cual cuenta con docentes con amplia experiencia en
acreditacin ISO 17025 y certificacin ISO 9001:2000. Actualmente est certificado
como unidad asociada a la UAA por la norma ISO 9001:2000 desde diciembre del ao
2005 a la fecha por el LATU.

Como todo laboratorio universitario, su motivacin es la bsqueda de soluciones a los
problemas. Cuenta con la experiencia de lo que significa trabajar en la industria y sus
plazos. Conociendo esta combinacin y en su justa medida se ha ido trabajando por una
Universidad de cara a la sociedad y al sector productivo.

El LAO actualmente est ubicado en tres lugares fsicos de la Facultad de Qumica. Un
laboratorio en el subsuelo de dicha Facultad y dos laboratorios en el PTP. (7)















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3.0 Conceptos destacados
3.1 Cromatografa

La cromatografa agrupa un conjunto de tcnicas que permite separar componentes
estrechamente relacionados de mezclas complejas, lo que resulta imposible por otros
medios. En todas las separaciones cromatogrficas, la muestra se desplaza con una fase
mvil, que puede ser un gas, un lquido o un fluido supercrtico. La fase mvil se hace
pasar a travs de una fase estacionaria con la que es inmiscible, y que se fija a una
columna o a una superficie slida. Las dos fases se eligen de tal forma, que los
componentes de la muestra se distribuyen de modo distinto entre la fase mvil y la fase
estacionaria. Como consecuencia de la distinta afinidad, los componentes de la muestra
se separan en bandas o zonas que pueden analizarse cualitativa y/o cuantitativamente.(7)

Dependiendo del tipo de fase mvil y fase estacionaria y en la clase de equilibrios
implicados en la transferencia de los solutos entre las fases, los mtodos
cromatogrficos se clasifican en:
Cromatografa de gases (GC).
Cromatografa de lquidos (LC o HPLC)
Cromatografa de fudos supercrticos (SCC).
Cromatografia en Papel (PC).
Cromatografa en capa delgada (TLC).
En este caso se profundizar en la cromatografa de gases.
3.2 Cromatografa de gases
La cromatografa de gases es una tcnica separativa que tiene la cualidad de conseguir
la separacin de mezclas muy complejasen fase gaseosa o vapor.En cromatografa de
gases, la muestra se inyecta en la fase mvil, que es un gas inerte. En esta fase, los
distintos componentes de la muestra pasan a travs de la fase estacionaria que se
encuentra fijada en una columna. Actualmente, las ms empleadas son las columnas
capilares. Cada soluto presente en la muestra tieneuna diferente afinidad hacia la fase
estacionaria, loque permite su separacin; los componentesfuertemente retenidos por
esta fase se movern lentamente en la fase mvil, mientras que losdbilmente retenidos
lo harn rpidamente. Unfactor clave en este equilibrio es la presin devapor de los
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compuestos (en general, a mayorpresin de vapor, menor tiempo de retencin en
lacolumna, dependiendo de la polaridad de la columna). Como consecuencia de esta
diferenciade movilidad, los diversos componentes de lamuestra se separan en bandas o
picos que puedenanalizarse tanto cualitativa como cuantitativamentemediante el empleo
de los detectoresseleccionados.La columna debe estar lo suficientemente caliente a fin
de que los analitos alcancen una presin de vapor suficiente para que se volatilicen y
eluyan en un tiempo razonable. El detector se mantiene a una temperatura ms alta que
la columna, de manera que los analitos se encuentren en forma gaseosa.
(7; 8)


Esquema de un cromatgrafo de gases, extrdo de http://www.rabfis15.uco.es
Columnas
Hay varios tipos de columna para GC. Lacolumna tubular abierta (capilar), y la columna
empaquetada son las ms utilizadas. La segunda contiene un soporte slido fundido
recubierto de una fase estacionaria lquida no voltil, o el slido mismo es la fase
estacionaria.
La columna tubular abierta ofrece mayor resolucin, mayor rapidez de anlisis y mayor
sensibilidad que la anterior. Puede presentarse en tres formas diferentes; tubulares
abiertas de pared recubierta, tubulares abiertas de un soporte y tubulares abiertas de
capa porosa. Segn la resolucin, capacidad de muestra, tiempo de retencin que se
requiera, se optar por una de ellas. (5, pg. 656)
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Gas portador
El funcionamiento de la columna y el detector depende de la naturaleza del gas
portador. Los gases ms utilizados son: N
2
, H
2
y He. Es de gran importancia la pureza
de cada uno de ellos, debido a que las impurezas degradan la fase estacionaria.
El H
2
y el He dan mejor resolucin que el N
2
a caudales altos porque los solutos se
difunden rpidamente en estos primeros que en N
2
. El H
2
no se puede utilizar con un
detector de espectrometra de masas genera ionizacin qumica alterando el perfil de
fragmentacin de las molculas.(5, pgs. 665 y 666)

Preparacin de la muestra
La clave del xito para cromatografiar una muestra compleja es su purificacin antes de
introducirla en la columna. Se puede preparar por varios mtodos:
Extraccin en Fase Slida, SPE o SDPE.
Micro Extraccin en Fase Slida, SPME.
Extraccin Lquido-Lquido, L/L
Head Space, HS
Segn sean las propiedades del analito buscado y la matriz de la muestra, se opta por
uno de los mtodos mencionados anteriormente. (7)

Inyeccin
Existen tres tcnicas de inyeccin de muestras (lquidas o gaseosas) en
columnascapilares: Split (inyeccin con divisin), split-less(Inyeccin sin divisin) y
oncolumn (en columna). Las dos primerasconsisten en inyectar y vaporizar la muestra
en una cmara de vaporizacin (inyector). El sistema split desva la mayor parte de la
muestra fuera del sistema cromatogrfico y enva slo una pequea fraccin a la
columna. La temperatura el inyector se mantiene alta, generalmente a350C, pero
depende de la muestra inyectada.
En cambio el sistemasplit-less dirige toda la muestra a la columna, con el inyector a una
temperatura menor que la anterior (220C). Esta tcnica de inyeccin resulta ms
adecuada para el anlisis de trazas o de componentes muy voltiles.
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La inyeccin oncolumn se lleva a cabo en fro, se usa en muestras que se descomponen
por encima de su punto de ebullicin.
En cromatografa de gases, los lquidos o gases (HS), se inyectan mediante una jeringa,
a travs de un septo de goma, en un inyector caliente que contiene un tubo de vidrio
silanizado. El gas portador arrastra la muestra vaporizada desde el inyector a la
columna.
Las jeringas utilizadas suelen ser hermticas a gases, con la aguja biselada para poder
atravesar el septo de goma.(5, pgs. 665-668; 9)

Detectores
El detector de aplicacin general para una cromatografa de columna capilar es un
espectrmetro de masas. El ms popular es el detector de ionizacin de llama pero
responde sobre todo a hidrocarburos y no es tan sensible como el detector de captura
electrnica, el de nitrgeno-fsforo, o los de quimioluminiscencia. El detector de
conductividad trmica es la manera ms general de detectar toda clase de compuestos
pero no es tan sensible en columnas tubulares estrechas.
Si se necesita informacin cualitativa sobre la identidad de los eluatos, una buena
eleccin son los espectrmetros de masas o el de infrarrojo. Este ltimo no es tan
sensible si se trabaja con columnas capilares estrechas. (5, pg 671)

Espectro o cromatograma
El cromatograma es la representacin grfica de la respuesta del detector frente al
tiempo de elucin.
Una mezcla de compuestos inyectada en el cromatgrafo de gases se separa en la
columna capilar, obteniendola elucin sucesiva de los componentes individuales
aislados que pasan inmediatamente al espectrmetro de masas. Cada uno de estos
componentes se registra en forma de pico cromatogrfico y se identifica mediante su
respectivo espectro de masas.
La corriente inica generada por todos los iones dalugar a un pico gaussiano de rea
proporcional a la concentracin del compuesto detectado.
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La interpretacin de un espectro de masas se realiza aplicando la siguiente regla: Una
molcula fragmentar en un espectrmetro de masas de manera tal que se formarn los
iones ms estables. (5, pg. 632;9)
3.3 Espectrometra de masas
La espectrometra de masas (MS)es el arte de medir tomos y molculas para
determinar su masa molecular. Es una de las tcnicas analticas ms completas
queexisten. Recientemente, esta tcnica se utiliza no slo en investigacin, sino tambin
en anlisis de rutina de los procesos industriales, en control de calidad, etc.
Sus principales cualidades son:
Capacidad de identificacin de forma prcticamente inequvoca, ya que
proporciona un espectro caracterstico de cada molcula.
Cuantitativa porque permite medir la concentracin de las sustancias.
Gran sensibilidad, habitualmente se detectan concentraciones del orden de ppm
o ppb.
Universal y especfica.
Proporciona informacin estructural sobre la molcula analizada.
Es una tcnica rpida, se puede realizar un espectro en un corto perodo de
tiempo.
(3; 9)

Un espectrmetro de masas determina la masa de una molcula mediante la medicin de
la relacin masa-carga (m/z) de los iones. Los iones son generados por induccin
mediante la prdida o ganancia de carga, la cual proviene de una especie neutra. Una
vez formados, los iones son electrostticamente dirigidosen un analizador de masas
donde son separados de acuerdo a su m/z y finalmente detectados. El resultado de la
ionizacin molecular, la separacin y la deteccin de iones es un espectro que permite
obtener informacin de la masa molecular e incluso de la estructura de la especie
analizada. Una analoga puede establecerse entre un espectrmetro de masas y un
prisma, como se muestra en la Figura 1.

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Figura 1. El proceso de anlisis de masa en comparacin con la dispersin de la luz por un prisma.
Extrado de http://masspec.scripps.edu/mshistory/whatisms_details.php

En el prisma, la luz se separa en sus diferentes componentes de longitudes de onda que
son detectadas con un receptor ptico, tales como la visualizacin (nuestros ojos actan
como detectores, permitiendo percibir las longitudes de onda en el espectro visible).
Del mismo modo, en un espectrmetro de masas los iones generados se separan en el
analizador de masas, digitalizado y detectado por un detector de iones (tales como un
multiplicador de electrones). La masa o la informacin del peso son a veces suficientes
y siempre tiles para determinar la identidad de una especie. Medidas como las
trayectorias de los iones resultantes de la sustancia analizada responden en el vaco a
varias combinaciones de campos elctricos y magnticos. La condicin de este mtodo
es la conversin de molculas neutras del analito en iones. Para especies pequeas y
simples, la ionizacin es fcilmente producida por los choques en fase gaseosa entre las
molculas neutras y electrones, fotones, u otros iones.
En el espectrmetro de masas, se produce la ionizacin de la muestra mediante
diferentes mtodos. El sistema de ionizacin ms frecuente es el de impacto electrnico
que bombardea las molculas con electrones de una cierta energa, capaz de provocar la
emisin de un electrn de las molculas y as ionizarlas. Adems de molculas
ionizadas o iones moleculares (M
+
) tambin se forman fragmentos de iones debido a la
descomposicin de los iones moleculares con exceso de energa. El tipo y proporcin
relativa de cada uno de estos fragmentos es caracterstico de las molculas analizadas y
de las condiciones del proceso de ionizacin.
Una vez ionizadas las molculas, se aceleran y se conducen hacia el sistema colector
mediante campos elctricos o magnticos. La velocidad alcanzada por cada in ser
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dependiente de su masa. La deteccin consecutiva de los iones formados a partir de las
molculas de la muestra, suponiendo que se trate de una sustancia pura, produce el
espectro de masas de la sustancia, que es diferente para cada compuesto qumico y que
constituye una identificacin prcticamente inequvoca del compuesto analizado. El
espectro de masas puede almacenarse en la memoria del ordenador para compararse con
los espectros de una coleccin de espectros (o biblioteca) y proceder a su identificacin
o puede estudiarse para averiguar la naturaleza de la molcula que le dio origen.

Cuatro componentes bsicos son, en su mayor parte, tpicos de todos los espectrmetros
de masas (Figura 2): una entrada de la muestra, una fuente de ionizacin, un analizador
de masa y un detector de iones. Algunos instrumentos combinan la entrada de la
muestra y la fuente de ionizacin, mientras que otros combinan el analizador de masa y
el detector. Sin embargo, todas las molculas de la muestra se someten a los mismos
procesos, independientemente de la configuracin del instrumento. Las molculas de la
muestra se introducen en el instrumento a travs de la entrada de la muestra. Una vez
dentro de ste, las molculas se convierten en iones por la fuente de ionizacin, antes de
ser electrostticamente impulsadas al analizador de masas. El detector convierte la
energa de iones en seales elctricas que se transmiten a un ordenador. (3)


Figura 2. Componentes de un espectrmetro de masas. La fuente de iones del espectrmetro de masas no tiene que
estar al vaco. Por ejemplo, ESI (Electro-Spray Ionitation) y APCI (AtmosphericPresureChemicalIonization), son a
presin atmosfrica y que se conoce como fuentes de ionizacin a presin atmosfrica (API). (3)

Tcnicas de introduccin de la muestra al MS
Con el fin de realizar el anlisis de la masa en una muestra, que est inicialmente a
presin a atmosfrica (760 torr), la muestra debe ser introducida en el instrumento de tal
forma que el vaco en el interior del mismo se mantenga relativamente sin cambios
(6.10 torr). Los mtodos ms comunes de introduccin de muestra son: la introduccin
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directa con una sonda o una placa de uso general con MALDI-MS,la introduccin
directa por una columna capilar con ionizacin por IE en GC/MS o la inyeccin en la
fuente de ionizacin con electrospray como ESI-MS.
Introduccin directa: un capilar simple o una columna capilar se utiliza para introducir
la muestra en forma de gas o en solucin. La infusin directa tambin es til porque
permite introducir eficientemente pequeas cantidades de muestra en un espectrmetro
de masas sin comprometer el vaco. Las columnas capilares se utilizan habitualmente
como la interface entre las tcnicas de separacin y la fuente de ionizacin de un
espectrmetro de masas. Estas tcnicas, incluyendo la cromatografa de gases y
cromatografa de lquidos, tambin sirven para separar los diferentes componentes de
una solucin antes del anlisis de masas. En cromatografa de gases, la separacin de los
diferentes componentes se produce dentro de la columna capilar de vidrio. Como en la
salida del cromatgrafo de gases la muestra est vaporizada, es introducida directamente
en el espectrmetro de masas. (3)

Ionizacin
La ionizacin se refiere al mecanismo por el cual se producen iones, mientras que la
fuente de ionizacin es el dispositivo mecnico que permite la ionizacin. La ionizacin
de una molcula neutra puede lograrse mediante diferentes mtodos:
Impacto electrnico (IE).
captura electrnica (CE).
Protonacin.
cationizacin o desprotonacin.
transferencia de una molcula cargada de una fase condensada a la fase gaseosa.

Impacto electrnico
Como su nombre lo indica, la ionizacin por eyeccin electrnica se logra a travs de la
expulsin de un electrn para producir una carga positiva neta de 1
+
, formando cationes
radicales libres. Este mtodo es usado generalmente en compuestos relativamente no
polares con bajo peso molecular y de manera de generar fragmentos de iones
significativos. El catin radical se trata del in molecular y tendr mayor o menor
tendencia a fragmentar en funcin de su estabilidad. Los iones moleculares muy
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estables tendrn poca tendencia a fragmentar y sern muy abundantes. Al in ms
abundante del espectro se le denomina pico base. Los fragmentos ms abundantes de un
espectro de masas nos dan una informacin valiossima sobre la estructura de la
molcula. El espectro de masas resultante de una ionizacin por IE de antraceno se
muestra a continuacin, en la figura 3:


Figura 3. Espectro por ionizacin electrnica. (3)

Ventajas:puede proporcionar informacin de la masa molecular, as como informacin
de fragmentacin.
Desventajas: a menudo se genera fragmentacin excesiva, puede no estar claro si la
mayor masa se iones es del ion molecular o fragmento.

La ionizacin electrnica es una de las fuentes de ionizacin ms importantes para el
anlisis de rutina de las pequeas molculas, hidrofbicas y molculas trmicamente
estables. La IE suele generar numerosos fragmentos de iones debido a que es una "dura"
fuente de ionizacin. Sin embargo, la informacin de la fragmentacin tambin puede
ser muy til. Por ejemplo, el empleo de bases de datos con ms de 200.000 espectros de
masas de ionizacin de electrones, es posible identificar un compuesto desconocido en
segundos (siempre que exista en la base de datos). Estas bases de datos, combinada con
la capacidad actual de almacenamiento de equipo, permiten una comparacin rpida
entre molculas, facilitando as la identificacin de molculas pequeas. (3)

Fuente de ionizacin electrnica
La fuente de ionizacin electrnica tiene un diseo sencillo. (Figura 4). La muestra debe
ser entregada en forma de gas como se explic anteriormente.Cuando se trata de GC, la
columna capilar del mismo, proporciona la separacin de las molculas de la
muestra. La desorcin de la muestra se ve facilitada por el vaco del espectrmetro de
masas. Una vez en la fase gaseosa, el compuesto pasa a la fuente de ionizacin de
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electrones, donde los electrones excitan las molculas, provocando la ionizacin del
electrn de eyeccin y la fragmentacin de cada una de las molculas.


Figura 4. Ionizacin electrnica. (3)
La utilidad de la ionizacin de electrones disminuye de manera significativa para los
compuestos por encima de un peso molecular de 400 Da, porque la desorcin trmica
requerida de la muestra a menudo conduce a la descomposicin trmica antes de
producirse la vaporizacin. Los principales problemas asociados con la desorcin
trmica de ionizacin de electrones son:
Involatilidad de molculas grandes.
La descomposicin trmica.
La excesiva fragmentacin.
El mtodo o mecanismo de eyeccin de electrones para la formacin de iones positivos
ocurre de la siguiente manera:
1. La muestra se vaporiza trmicamente.
2. Los electrones emitidos por un filamento caliente se aceleran a travs de un
campo elctrico a 70 V para formar un haz de electrones continuo. La molcula
de la muestra pasa a travs del haz de electrones.
3. Los electrones, con 70 V de energa cintica (70 eV), transfieren parte de su
energa cintica a la molcula. Esto da como resultado la transferencia de
ionizacin (electrn de eyeccin) con el ion internamente manteniendo por lo
general no ms de 6 eV.
M + e
-
(70 eV) M
+
(
~
5 eV) + 2e
-
(
~
65 eV)
El exceso de energa interna (6 eV) en la molcula da lugar a un cierto grado de
fragmentacin.
M
+
iones moleculares + fragmentos de iones + fragmentos neutros



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Cuadrupolo
Estos analizadores de masas (Figura 5) se han utilizado con fuentes de IE desde la
dcada de 1950 y siguen siendo los analizadores de masas ms comunes en la
actualidad. Curiosamente, los cuadrupolo han encontrado una nueva utilidad en su
capacidad para interactuar con la ionizacin por electrospray y la ionizacin qumica a
presin atmosfrica.
Los cuadrupolos ofrecen tres ventajas principales:
Toleran presiones relativamente altas.
Cuentan con una amplia capacidad de masa significativa para analizar, hasta un
m/z de 4000, que es til porque la ionizacin electrospray de las protenas y
otras biomolculas comnmente producen distribuciones de carga de m/z 1000 a
3500.
Los espectrmetros de masas cuadrupolo son instrumentos de un costo
relativamente bajo. Teniendo en cuenta las caractersticas mutuamente
complementarias de las ESI y cuadrupolos, no es de extraar que fueran los
primeros instrumentos con xito comercial de electrospray, junto con los
analizadores de masas cuadrupolar.
Los cuadrupolos de masas estn conectados en paralelo a una radiofrecuencia (RF) y un
generador potencial de corriente continua, (CC). En un determinado campo de RF, los
iones slo de una m/z especfica pueden pasar a travs del cuadrupolo donde se detectan
slo los iones de m/z 100. (3)



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3.4 Cromatografa de gases acoplado a espectrometra de masas
La espectrometra de masas puede identificar de manera casi inequvocacualquier
sustancia pura, pero normalmente no es capaz de identificar los componentes
individuales de una mezcla sin separar previamente sus componentes, debido a la
extrema complejidad del espectro obtenido por superposicin de los espectros
particulares de cada componente. Por lo tanto, la asociacin de los dos mtodos, GC y
MS da lugar a una tcnica combinada GC/MS que permite la separacin e identificacin
de mezclas complejas.
Esta combinacin GC/MS requiere sistemas especiales de conexin. En principio, se
trata de dos mtodos que trabajan en fase gaseosa y necesitan una muy pequea
cantidad de muestra para su anlisis, por lo que son muy compatibles. El nico
problema a la hora de realizar su acoplamiento es que el eluato de la columna
cromatogrfica sale a presin atmosfrica y debe introducirse en el interior del
espectrmetro de masas que trabaja a alto vaco. Actualmente, el acoplamiento directo
resulta fcil cuando se utiliza la cromatografa de gases en columna capilar. (9)















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4.0 Actividades
4.1 Descripcin de las actividades propuestas a realizar
Colaborar con las tareas de laboratorio en la recepcin de muestras.
Registro de muestras, alicuotado.
Preparacin de muestras por distintas tcnicas de extraccin; lquido-lquido
(L/L), en fase slida (Solid PhaseExtraction, SPE), microextraccin en fase
slida (Solid Phase Micro Extraction, SPME), espacio de cabeza, (Head Space,
HS), participacin en el anlisis instrumental de las mismas.
Lavado de material utilizado y tratamiento de residuos.

4.2 Tareas realizadas
Semana
Actividades
1
Recorrido y muestra del laboratorio.
Lectura de tcnicas. Screening II (Extraccin de drogas de alto peso molecular).
Lectura de manuales de los equipos a manejar.
Consulta de dudas sobre las actividades en el LAO.
Prueba de manejo de equipo GC/MS para determinar H. Pylori.
2
Lectura de tcnicas. Screening I (Extraccin de estimulantes libres)
Preparacin de muestras por tcnica L/L.
Lectura y realizacin de ELISAS (Ensayo por inmunoabsorcin ligado a enzimas) en muestras de orina y
sangre de equinos.
Participacin en dichos anlisis.
3
Revisin de materiales y reactivos necesarios. Control de stock.
Lavado material utilizado en los screening.
Molienda de Arroz para determinacin de Herbicidas en aguas arroceras.
Participacin en el manejo de HPLC para determinar Herbicidas.
4
Recepcin y registro de muestras de orina y sangre de equinos.
Preparacin de muestras por tcnica (L/L).
Realizacin de ELISAS en las muestras.
Preparacin de muestras para Screening I.
Tratamiento de residuos.
5
Prueba de manejo de equipo GC/MS para determinar H. Pylori.
Preparacin de soluciones y lavado de materiales utilizados en dicha preparacin.
6
Inyeccin de muestras de pacientes en el GC/MS para la determinacin de H. Pylori mediante tcnica de
HS.
Derivatizacin y anlisis de muestras de sangre y orina de equinos. Screening I y IV (hidrlisis enzimtica
y derivatizacin).
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7
Recepcin de muestras de orina y sangre de equinos. Participacin en realizacin de ELISAS.
Tratamiento de las muestras para realizar screening I y II.
8
Recepcin de muestras de orina y sangre de equinos. Prueba de ELISAS.
Tratamiento de muestras de orina y sangre por tcnica L/L.Screening Iy II.
Determinacin de grasas y aceites por mtodo EPA (Material Extrable con Hexano).
Continuacin de mtodo EPA.
9
Tratamiento de muestras de orina y sangre por tcnica L/L. Realizacin de screeningI.
Determinacin de organoclorados en aguas residuales.
10
Limpieza de un molino de cuchillas y martillos para el posterior anlisis de herbicidas en tierras.
Molienda de tierras para la determinacin de herbicidas.
11
Revisin de materiales y reactivos necesarios. Control de stock.
Limpieza de materiales utilizados para los screening.
Tratamiento de residuos.
Control del cuadernos de registros de inyecciones de ambos GCs
12
Tratamiento de muestras de orina y sangre de equinos por tcnica L/L.
Screening I y II.
Continuacin de screening IV. Participacin en la inyeccin de muestras en GC/MS DSQ II/Focus.
13
Recepcin de muestras de orina y sangre de equinos. Determinacin de la densidad por refractmetro de
grados brix. Observacin del color de cada muestra.
Inyeccin de muestras en GC/MS para determinar H. Pylori.
14
Preparacin de muestras por mtodo de extraccin L/L de orinas y sangre de equinos.
Recepcin de reactivos. Almacenamiento y rotulado de reactivos.
Control de reactivos y descarte de los mismos.
Evaporacin de extractos de orina en viales. Inyeccin al GC/MS DSQ II/Focus.
15
Participacin en limpieza de columna del GC/MS DSQ II/Focus.
Quema de pasta base en vial de 10 mL para su posterior identificacin en GC/MS DSQ II/Focus.
Limpieza de columna del GC/MS DSQ II/Focus.
Lavado y arreglo de jeringas de inyeccin de GC.
16
No se pudo realizar inyecciones en los GCs/MS debido a falta Helio.
Participacin en redaccin de protocolo de recepcin y tratamiento de muestras de equinos.

4.3 Desarrollo de las tareas realizadas
Como la tabla lo indica en el primer perodo de la pasanta, se realiz el estudio de los
equipos e instrumentos utilizados para la determinacin de los diferentes analitos a
informar, haciendo uso de los instructivos propios de la empresa. Con el transcurso del
tiempo, a travs de la participacin en los tratamientosde las muestras de equinos y
muestras de pacientes, se adquiri prctica para un eventual manejo de los equipos
GC/MS. El equipo utilizado con una mayor frecuencia fue el GC/MS 5890 II Plus/5972,
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usado para el anlisis de Helicobacter Pylori en muestras de pacientes, por el mtodo
HS.

Drogas en muestras de sangre y orina de equinos
Las diferentes drogas de abuso, pueden ser administradas por distintas vas, tales como
la va parenteral (por medio de inyectables), la va oral, va cutnea o subcutnea, va
rectal etc. Gran parte de la dosis de estas drogas son absorbidas y metabolizadas por el
organismo ya sea por hidrlisis, oxidacin, reduccin, descarboxilacin, etc.
(comnmente en el hgado). Una menor proporcin de ellas, son posteriormente
conjugadas, para formar con el cido glucurnico: glucurnidos, o con el cido
sulfrico: sulfatos o acetatos. Una vez conjugados, estos compuestos adquieren
polaridad hacindose ms hidrosolubles (metabolitos), y posteriormente sern
fcilmente excretados en la orina.

Tratamiento de las muestras
Luego de la recepcin de las muestras, se sigue con el tratamiento de las mismas. Las
muestras de sangre de equino son sometidas a una centrifugacin para poder obtener el
plasma, de manera de poder trabajar luego con el ste. ( por ser en el plasma donde se
encuentran los metabolitos mencionados anteriormente).
Se realizan las tomas correspondientes,(ya sea del plasma o directamente de la orina),
colocndolas en tubos largos de centrfuga. Se someten las muestras a una hidrlisis
cida o hidrlisis enzimtica a una determinada temperatura o simplemente se alcaliniza
el medio con solucin de NaOH, verificando el pH con papel pH. A continuacin se
agrega una mezcla de solventes orgnicos. Eltratamiento de la muestra y la solucin
estndar interno a utilizar dependen del screening que se realice.
Finalizado el ajuste de pH, los tubos se sellan, se colocan en el Shaker (agitador) y se
agitan por determinado tiempo. Luego son centrifugados para separar la fase orgnica
de la fase acuosa. Realizada la extraccin L/L, se trabaja con el extracto orgnico. Se lo
trasvasa a un vial de 2 mL, adecuado para GC, se evapora y si corresponde realizar una
derivatizacin se aade el volumen correspondiente de derivatizante para llevar a cabo
la reaccin. Los viales son sellados para luego inyectar 1 L en el cromatgrafo de
gases.
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Las sustancias de alto peso molecular son sustancias usadas como agentes dopantes de
baja volatilidad que se descomponen a altas temperaturas o que se encuentran
conjugadas y que tienen que ser hidrolizadas o derivatizadas para su determinacin por
CG.
La hidrlisis es necesaria para liberar las drogas de su conjugacin, como se mencion
anteriormente. Se alcaliniza para tener todas las drogas de carcter bsico en su forma
no protonada y se realiza la extraccin L/L con solventes orgnicos.
Las drogas de carcter bsico se encuentran de forma protonada en la orina. Son
extradas alcalinizando la orina y haciendo una extraccin L/L con solventes orgnicos.
El extracto orgnico se analiza por GC.
La derivatizacin se realiza para formar compuestos voltiles por la reaccin entre las
drogas a analizar y un agente derivatizante que convierte grupos polares reactivos en
grupos no polares. Aparte de aumentar la volatilidad, los derivados pueden ser
preparados para aumentar la respuesta del detector a la droga o la separacin con
diferentes derivados. (6)

El agregado de estndar interno permite controlar los siguientes parmetros:
que el mtodo de extraccin empleado se realiz correctamente, que el equipo
funciona.
que el equipo GC/MS est funcionando en los parmetros adecuados. (Flujo de
la fase mvil, Temperatura del inyector, de la columna y del detector, etc)
que los reactivos usados estn en buenas condiciones.
que el operador procedi correctamente.

Extracciones
Las extracciones realizadas para llevar a cabo un anlisis por cromatografa de gases
fueron:
Extraccin L/L para la determinacin de estimulantes libres. Screening I
Los extractos son trasvasados a viales, se evapora con corriente de aire hasta 0.5 mL.
Se sellan y luego son inyectados en el GC/MS.
Extraccin L/L para la determinacin de drogas de alto peso molecular.
Sceening II.
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La diferencia entre ellos es que el Sc. II lleva hidrolisis cida y una derivatizacin con
temperatura. Esta metodologa requiere ms tiempo debido a estos dos tratamientos. Se
realiza en dos das, sellando los viales y almacenndolos adecuadamente.
Extraccin L/L para la determinacin de anabolizantes. Screening IV.
Se agregan los reactivos correspondientes para la hidrlisis enzimtica y se aade el
estndar interno. Luego se ajusta a pH bsico. Posteriormente se agrega mezcla de
solventes orgnicos, se somete a agitacin luego a centrifugado y se trasvasa a viales
realizando derivatizacin a una temperatura y tiempo determinados. Se sella el vial y se
inyecta el GC/MS.

Ensayos por inmunoabsorcin ligado a enzimas (ELISAS)
Antes de realizar los screening correspondientes, se le realiza prueba de ELISAS a cada
muestra para poder identificar ausencia o presencia de algunos compuestos especficos
como por ejemplo corticoides de uso veterinario.
Este ensayo se basa en el uso de antgenos o anticuerpos marcados con una enzima, de
forma que los conjugados resultantes tengan actividad tanto inmunolgica como
enzimtica. Al estar uno de los componentes (antgeno o anticuerpo) marcado con una
enzima e insolubilizado sobre un soporte (inmunoadsorbente) la reaccin antgeno-
anticuerpo quedar inmovilizada y, por tanto, ser fcilmente revelada mediante la
adicin de un sustrato especifico que al actuar la enzima producir un color observable a
simple vista o cuantificable mediante el uso de un espectrofotmetro o un colormetro.
Este mtodo sirve como criterio para poder elegir entre los diferentes screening posibles
a realizar.

Anlisis de rutina
Helicobacter Pylori
En lo que ms participacin se tuvo fue en el anlisis de determinacin de Helicobacter
Pylori en pacientes.
Inicialmente serealiza la recepcin de las muestras, que consiste en cuatro tubos por
cada paciente, hermticamente cerrados con septos de goma y protegidos con papel
aluminio. Cada tubo contiene un polvo blanco.
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Este polvo es el soporte donde se encuentran adsorbidos componentes del aliento de
cada paciente. De los cuatro tubos, dos de ellos contienen el aliento normal del paciente
y los restantes el aliento luego de 30 minutos de la ingesta de urea marcada con C
13
.

Luegode recibidas las muestras, se procede al agregado de cido clorhdrico diluido a
dos de ellos (tiempo 0 y 30 min.). ste reacciona con los componentes retenidos en el
polvo, y se produce liberacin de CO
2
. Se agita suavemente para evitar que el septo
salga disparado por efecto de la presin y para que se alcance el equilibrio entre los
gases liberados y el lquido. La extraccin de espacio en cabeza evita la prdida de los
componentes ms voltiles.

La bacteria HelicobacterPylory se caracteriza por vivir en el estmago humano
produciendo infecciones, llegando a generar gastritis y/o lceras estomacales.Esta
bacteria por su metabolismo produce CO
2
a partir de urea.Por ello es que se puede
diagnosticar a travs del anlisis de la respiracin.
Se determina presencia de dicha bacteria por el mtodo de HS por GC/MS. Y se
informa resultado de la relacin C
13
/C
12
.

Tareas varias
Tambin se tuvo participacin en tareas de laboratorio de anlisis tales como control de
stock de reactivos,preparacin, etiquetado y rotulado de los mismos, recepcin de
muestras, informacin detallada de stas tales como densidad, color y pH y el correcto
etiquetado de las mismas.
Se manej tambin planillas de Excel para un mejor uso de herramientas estadsticas,
orden y claridad en lo que respecta a resultados de H. Pylori.
En lo que refiere a cromatogramas de drogas en muestras de equino, no se tuvo la
oportunidad de un estudio detallado de los mismos. Slo se observaron desde la pantalla
del sistema de deteccin, analizando los diferentes tiempos de retencin de los picos
obtenidos durante la corrida. El informe cualitativo lo realiza el jefe responsable del
LAO Eleuterio Umpirrez, informando resultados positivos o negativos de drogas de
abuso.
Se tuvo participacin en limpieza de un molino de martillos y cuchillas, el cual ser
usado para la molienda de tierras de cultivos. stas se analizarn para la determinacin
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31

de herbicidas por los mtodos de GC y HPLC (High Performance
LiquidChromatography, cromatografa lquida de alta eficiencia).

Conclusiones
Se cumplieron los objetivos, con excepcin de las tcnicas de extraccin en fase slida
y microextraccin en fase slida, que no fueron realizadas. Se logr cierta prctica en el
manejo de cromatgrafos de gases por la tcnica HS.
Tambin se particip en el anlisis de aceites y grasas, herbicidas y fertilizantes en
diferentes matrices, como aguas residuales, aguas arroceras y en arroz, utilizando
mtodos de HPLC o GC.

5.0 Materiales y/o Normas de Referencia
Para llevar a cabo las tareas propuestas, se hace uso de varios instructivos,
procedimientos, equipos instrumentales, materiales y normas.

El LAO cuenta con instructivos y procedimientos estandarizados y certificados.
Dichos instructivos en los que se basan los anlisis hasta ahora efectuados son:
Procedimiento de operacin y calibracin de espectrmetro de gases acoplado a
espectrmetro de masas (GC/MS), P-OR-04.
Procedimiento de mantenimiento del GC/MS, P-OR-05.
Procedimiento de operacin y calibracin GC/MS DSQ II, I-OR-09.
Instructivo para el encendido del GC/MS, I-OR-10.
Instructivo para realizacin e interpretacin del tuning, I-OR-11.
Instructivo para el ingreso de secuencias en GC/MS, I-OR-12.
Instructivo para el apagado del GC/MS I-OR-13.
Instructivo para extraccin de estimulantes libres, IE-0101
Instructivo para extraccin de drogas de alto peso molecular, IE-0201.
Instructivo para realizacin de Elisas, IE-0301.
Instructivo para anlisis de anabolizantes, IE-0401
Instructivos para preparacin de reactivos estndares.
Norma ISO 9001:2000.
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Equipos e instrumentos
Para la deteccin de diferentes analitos en diferentes matrices el LAO cuenta con
equipos de alta tecnologa:
CROMATGRAFO DE GASES ACOPLADO A ESPECTRMETRO DE MASAS PARA LA
ANLISIS DE H. PYLORI (5890 II Plus/5972 con inyector automtico)

CROMATGRAFO DE GASES ACOPLADO A ESPECTRMETRO DE MASAS PARA
ANLISIS DE DROGAS EN ORINA DE CABALLOS (DSQ II/Focus, con inyector automtico
de SPME, HS y lquido)
Los cromatgrafos de gases cuentan con columna capilares con inyeccin Split/Split-
less. (optimizado para ambos modos de inyeccin).
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EQUIPO A VACO PARA SPE

CETRIFUGADORA
BLOQUE TRMICO


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SHAKER J & K (AGITADOR)


Algunas actividades extras
Limpieza de molino de martillo y cuchillas con el equipo de proteccin personal
adecuado.



El molino estaba muy deteriorado y al cepillar sus diferentes partes, con cepillo de
acero, hubo produccin y acumulacin de partculas (bsicamente xido de hierro).



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6.0 Autoevaluacin
6.1 Competencias puestas en juego para realizar la experiencia
Considero que las actividades realizadashan contribuido a adquirir prctica para realizar
las tareas en el LAO, as como en otro laboratorio de anlisis.
A la hora de realizar los anlisis no encontr problemas, ya que stos se encontraban en
instructivos elaborados por el docente a cargo del LAO junto a otros responsables.
Tuve ciertas dificultades para la comprensin e interpretacin de resultados pero cont
con un grupo de personas que siempre estaban a disposicin para evacuar mis dudas.
Al conocer cmo es el trabajo en un laboratorio, me di cuenta de lo importante que es el
orden y la limpieza en el mismo.
Pude verificar que trabajar con planillas de Excel mejora la calidad de orden de trabajo,
agilizando as los clculos para la obtencin de resultados numricos concordantes.
Tambin tuve la oportunidad de trabajar con equipos de alta tecnologa y aprender su
manejo y cuidado, que requiere de un conocimiento previo de su funcionamiento.
Contar con todo el material y reactivos necesarios para los diferentes anlisis es de suma
importancia, porque el factor tiempo es crtico a la hora de informar los resultados
obtenidos.

Dado los tipos de anlisis realizados a las muestras como las corridas en los equipos
(GC/MS), hay perodos de tiempo en los que no es necesario estar pendiente de ellos,
por lo que aprend a ejecutar otras tareas como por ejemplo limpieza de materiales,
tratamiento de residuos, ordenar las mesadas de trabajo, leer procedimientos y/o
instructivos, etc., en paralelo.

6.2 Capacidad de integracin al grupo humano
Considero que me he integrado rpidamente al grupo humano de trabajo perteneciente a
esta rea del Polo Tecnolgico.
La relacin fue muy buena y me gust el ambiente de trabajo, ya que si me surgan
dudas, ellos trataron de evacuarlas y ayudarme a comprender nuevos conceptos en lo
que respecta a los anlisis, como por ejemplo los screening.
Trat de estar siempre a disposicin pero no descuidando lo que se estabarealizando.
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6.3 Capacidad de integracin al mbito laboral
Considero que el mbito laboral fue muy agradable, en el cual me adapt rpidamente.
Pude notar que se coordina bastante entre los integrantes del LAO, ayudndose
mutuamente para la realizacin de las diferentes actividades, el uso de equipos y
espacios en el laboratorio, (ejemplo muy claro de trabajo en equipo).
Me sent muy animada a desempear las tareas tpicas de un laboratorio. Pude poner a
prueba, mi aptitud en lo que se refiere a trabajo en equipo, responsabilidad y
compromiso, tomndolo como experiencia para trabajos futuros.
6.4 Vinculacin de las actividades con contenidos y aprendizajes incorporados
El tipo de trabajo de pasanta asignado me pareci muy interesante porque est
relacionado bsicamente a la qumica orgnica. En la carrera de Tecnlogo Qumico
lamentablemente no se dicta la materia Qumica Orgnica, por lo que tuve la
oportunidad de ampliar mis conocimientos en esta rea de la qumica.
Durante el perodo depasanta he podido vincular las actividades realizadas con
conceptos adquiridos en los diferentes cursos de la carrera e incorporarlos ms
firmemente (Qumica Analtica, Control de Calidad, Seguridad e Higiene
Industrial).Con respecto a esto, me di cuenta de lo importante que es tener el
conocimiento previo de los reactivos a utilizar y anlisis a realizar, ya sea por la
peligrosidad de los mismos como el manejo responsable y cuidadoso de las muestras.
Considero que la pasanta me dio una visin ms amplia acerca del trabajo en un
laboratorio y el relacionamiento con otros operadores y profesionales.
Tambin pude adquirir bastante prctica en lo que respecta al manejo de equipos tales
como GC/MS y HPLC.







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7.0Fuentes de informacin

Normas
1 ISO 9001:2000

Pginas Web
2 http://www.cnd.org.uy
3 http://masspec.scripps.edu/mshistory/whatisms_details.php
4 http://www.polotecnologico.fq.edu.uy

Libros
5 Skoog, Duglas A; Holler, F. James; Nieman, Timothy A. - Principios de Anlisis
Instrumental - Editorial Mcgraw-Hill, Madrid, 5 Ed, ao 2000.

Otros
6 Instructivos y protocolos propias de la empresa.
7 Material del Departamento de Qumica Orgnica, Laboratorio de Anlisis
Orgnico, Facultad de Qumica, Polo Tecnolgico, proporcionado por el Tutor
empresarial Eleuterio Umpirrez.
8 Ortega, Andrea Tcnicas Separativas, Cromatografa de gases - Terico
Qumica Analtica II, Tecnlogo Qumico, Facultad de Qumica, ao 2010
9 Tesis doctoral. M.C. Gutirrez; M. Droguet; La Cromatografa de gases y la
Espectrometra de Masas, publicada por la Universidad Politcnica de
Catalunya.

Grupo de trabajo