http://www.ucm.es/info/genetica/grupod/Mutacion/mutacion.

htm
Terminologa.
o Mutacin somtica y mutacin en la lnea germinal.
o Niveles mutacionales.
o Mutacin espontnea e inducida.
o Clasificacin de las mutaciones gnicas.
o Tipos de mutaciones gnicas.
Mutaciones espontneas.
o Errores en la replicacin.
o Daos fortuitos en el DN.
o Elementos genticos transponi!les.
o Mutaciones espontneas y enfermedades "umanas.
Mutagnesis inducida.
o Especifcidad mutacional.
o Mecanismos de mutagnesis.
#eparacin de los daos en el DN
o $istemas %ue evitan los errores antes de %ue ocurran.
o #eparacin directa de las lesiones en el DN.
o $istemas de reparacin por escisin.
o #eparacin posterior a la replicacin.
#eversin.
Carcter preadaptativo de la mutacin.
o &rue!a de fluctuacin.
o &laca replicada.
'recuencia y tasa de mutacin.
TERMINOLOGA
(a definicin %ue dio De )ries *+,-+. de la mutacin era la de cual%uier cam!io
"ereda!le en el material "ereditario %ue no se puede e/plicar mediante
segregacin o recom!inacin.
(a definicin de mutacin a partir del conocimiento de %ue el material
"ereditario es el DN y de la propuesta de la Do!le 0lice para e/plicar la
estructura del material "ereditario *1atson y Cric23+,45.3 sera %ue una
mutacin es cual%uier cam!io en la secuencia de nucletidos del DN.
(a mutacin es la fuente primaria de varia!ilidad gentica en las po!laciones3
mientras %ue la recombinacin al crear nuevas com!inaciones a partir de las
generadas por la mutacin3 es la fuente secundaria de varia!ilidad gentica.
MUTACIN SOMTICA Y MUTACIN EN LA LNEA GERMINAL
Mutacin somtica: afecta a las clulas somticas del individuo. Como
consecuencia aparecen individuos mosaico %ue poseen dos lneas celulares
diferentes con distinto genotipo. 6na ve7 %ue una clula sufre una mutacin3
todas las clulas %ue derivan de ella por divisiones mitticas "eredarn la
mutacin *"erencia celular.. 6n individuo mosaico originado por una mutacin
somtica posee un grupo de clulas con un genotipo diferente al resto3 cuanto
antes se "aya dado la mutacin en el desarrollo del individuo mayor ser la
proporcin de clulas con distinto genotipo. En el supuesto de %ue la mutacin
se "u!iera dado despus de la primera divisin del cigoto *en estado de dos
clulas.3 la mitad de las clulas del individuo adulto tendran un genotipo y la
otra mitad otro distinto. (as mutaciones %ue afectan solamente a las clulas de
la lnea somtica no se transmiten a la siguiente generacin.
Mutaciones en a !nea "e#mina: afectan a las clulas productoras de
gametos apareciendo gametos con mutaciones. Estas mutaciones se
transmiten a la siguiente generacin y tienen un mayor importancia desde el
punto de vista evolutivo.
NI$ELES MUTACIONALES
Es una clasificacin de las mutaciones !asada en la cantidad de material
"ereditario afectado por la mutacin8
Mutacin "%nica: mutacin %ue afecta a un solo gen.
Mutacin: c#omosmica: mutacin %ue afecta a un segmento cromosmico
%ue incluye varios genes.
Mutacin "enmica: mutacin %ue afecta a cromosomas completos *por
e/ceso o por defecto. o a 9uegos cromosmicos completos.
MUTACIN ES&ONTNEA E IN'UCI'A
Mutacin es(ontnea: se produce de forma natural o normal en los
individuos.
Mutacin in)uci)a: se produce como consecuencia de la e/posicin a
agentes mutagnicos %umicos o fsicos.
MUTACIONES G*NICAS
Sustituciones )e +ases: cam!io o sustitucin de una !ase por otra en el DN.
T#ansiciones: cam!io de una purina *&u. por otra purina3 o !ien cam!io
de una pirimidina *&i. por otra pirimida.
T#ans,e#siones: cam!io de una purina *&u. por una pirimidina *&i. o
cam!io de una pirimidina *&i. por una purina *&u..
Inse#ciones o a)iciones - )eeciones )e nuceti)os: se trata de ganancias
de uno o ms nucletidos *inserciones o adiciones. y de prdidas de uno o
ms nucletidos *deleciones.. Tienen como consecuencia cam!ios en el cuadro
o pauta de lectura cuando el n:mero de nucletidos ganado o perdido no es
m:ltiplos de tres.
'u(icaciones: consiste en la repeticin de un segmento de DN del interior
de un gen.
;n,e#siones: un segmento de DN del interior de un gen se invierte3 para ello
es necesario %ue se produ7can dos giros de +<-= 3 uno para invertir la
secuencia y otro para mantener la polaridad del DN.
T#ans(osiciones: un segmento de un gen cam!ia de posicin para estar en
otro lugar distinto del mismo gen o en otro lugar del genoma.
TI&OS 'E MUTACIONES G*NICAS
En la siguiente ta!la se resumen algunos tipos de mutaciones gnicas en el
DN y en sus consecuencias en las protenas.
Ti(os )e mutaciones
"%nicas
Resuta)os - e.em(os
En e A'N En e A'N
Transiciones
&u>&u o &i>&i8 T>?C3 ?C>T3 C?>T y
T>C?
Transversiones
&u>&i o &i>&u8 T>C?3 T>T3 ?C>T3
?C>C?3 T>?C3 T>T3 C?>T y C?>?C
En a (#ote!na En a (#ote!na
Mutacin silenciosa
Tripletes %ue codifican para el mismo aminocido8
?*arg.>C??*arg.
Mutacin neutra
Tripletes %ue codifican para aminocidos
e%uivalentes distintos. *lys.>?*arg.. m!os
son aminocidos !sicos
Mutacin cam!io de
sentido
parece un nuevo triplete %ue codifica para un
aminocido de distinto tipo. (a protena pierde su
funcin.
Mutacin sin sentido
parece un triplete de terminacin o ';N8
C?*gln.>6?*';N.
Mutacin cam!io de fase o
pauta de lectura
dicin o delecin de un :nico par de nucletidos o
de varios pares de nucletidos3 siempre %ue no
sean m:ltiplo de tres.
Es importante aclarar el concepto de mutacin silenciosa3 una mutacin
silenciosa es cual%uier alteracin en la secuencia de nucletidos del DN %ue
no produce cam!io en el fenotipo estudiado. ;maginemos %ue la caracterstica
e/terna o fenotipo anali7ado es simplemente la funcin de un en7ima3 es
evidente %ue e/isten mutaciones en la secuencia de nucletidos del DN %ue
no producen cam!ios en la secuencia de aminocidos3 pero tam!in "ay
mutaciones en el DN %ue producen cam!ios en la secuencia de aminocidos
%ue no alteran la funcin del en7ima anali7ado. m!as tipos de mutaciones son
silenciosas3 ya %ue ninguna altera la funcin del en7ima.
MUTACIONES ES&ONTNEAS
(as principales causas de las mutaciones %ue se producen de forma natural o
normal en las po!laciones son tres8
Errores durante la replicacin.
(esiones o daos fortuitos en el DN.
(os elementos genticos transponi!les.
ERRORES EN LA RE&LICACIN
)amos a considerar tres tipos de errores durante la replicacin del DN8
La tautome#!a: las !ases nitorgenadas se encuentran "a!itualmente en
su forma cetnica y con menos frecuencia aparecen en su forma
tautomrica enlica o imino. (as formas tautomricas o enlicas de las
!ases nitrogenadas *@3 T@3 ?@ y C@. muestran relaciones de
apareamiento distintas8 @AC3 T@A?3 ?@AT y C@A. El cam!io de la forma
normal cetnica a la forma enlica produce transiciones. (os errores en
el apareamiento incorrecto de las !ases nitrogenadas pueden ser
detectados por la funcin correctora de prue!as de la DN polimerasa
;;;.
Las mutaciones )e cam+io )e /ase o (auta )e ectu#a: se trata de
inserciones o deleciones de uno o muy pocos nucletidos. $eg:n un
modelo propuesto por $treisinger3 estas mutaciones se producen con
frecuencia en regiones con secuencias repetidas. En las regiones con
secuencias repetidas3 por e9emplo3 ...3 o por e9emplo3
TTTTTTTT....3 durante la replicacin se puede producir el
desli7amiento de una de las dos "lices *la "lice molde o la de nueva
sntesis. dando lugar a lo %ue se llama el Bapareamiento errneo
deslizadoB. El desli7amiento de la "lice de nueva sntesis da lugar a
una adicin3 mientras %ue el desli7amiento de la "lice molde origina
una delecin. En el gen lac I *gen estructural de la protena represora.
de E. coli se "an encontrado puntos calientes *regiones en las %ue la
mutacin es muy frecuente. %ue coinciden con secuencias repetidas8 un
e9emplo es el punto caliente CT?? CT?? CT??.
'eeciones - )u(icaciones "#an)es: las deleciones y duplicaciones
de regiones relativamente grandes tam!in se "an detectado con
!astante frecuencia en regiones con secuencias repetidas. En el gen lac
I de E. coli se "an detectado deleciones grandes %ue tienen lugar entre
secuencias repetidas. $e cree %ue estas mutaciones podran producirse
por un sistema seme9ante al propuesto por $treisinger *BApareamiento
errneo deslizadoB. o !ien por so!recru7amiento desigual. Del
so!recru7amiento desigual "a!laremos ms adelante en el curso.
Tautomera
(a tautomera origina
transiciones
&untos calientes gen lacI
Tautomera 0iptesis de $treisinger Deleciones gen lacI
LESIONES O 'A0OS 1ORTUITOS EN EL A'N
&ueden darse tres tipos de daos fortuitos en el DN8
'es(u#ini2acin: rotura del enlace glucosdico entre la !ase
nitrogenada y el a7:car al %ue est unida con prdida de una denina
*. o de una ?uanina *?.. Como consecuencia aparecen sedes
purnicas. E/iste un sistema de reparacin de este tipo de lesiones en
el DN. Este tipo de lesin es la ms recurrente o frecuente8 se estima
%ue se produce una prdida de +-.--- cada C- "oras a 5D=C.
'esaminacin: consiste en la prdida de grupos amino. (a Citosina *C.
por desaminacin se convierte en 6racilo *6. y el 6racilo empare9a con
denina *. producindose transiciones8 ?C>T. El 6racilo *6. no
forma parte del DN3 e/istindo un en7ima llamada glucosidasa de
uracilo encargada de detectar la presencia de 6 en el DN y retirarlo. l
retirar el 6racilo *6. se produce una sede apirimidnica. (a 4AMetilA
Citosina *4AMeAC. por desaminacin se convierte en Timina *T.. (a
Timina *T. es una !ase normal en el DN y no se retira3 por tanto estos
errores no se reparan. Este tipo de mutacin tam!in genera
transiciones.
'a3os o4i)ati,os en e A'N: El meta!olismo aer!ico produce
radicales supero/ido E
C
3 per/ido de "idrgeno 0
C
E
C
e "idro/ilo. Estos
radicales producen daos en el DN3 y una de las principales
alteraciones %ue originan es la transformacin de la ?uanina *?. en <A
o/oAD3<Adi"idroAdeso/iguanina %ue aparea con la denina *.. (a <Ao/oA
D3<Adi"idroAdeso/iguanina reci!e el nom!re a!reviado de <Ao/oA?. Esta
alteracin del DN produce transversiones8 ?C>T. (a Timidina se
convierte en ?licol de timidina.
Desaminacin de Citosina Daos o/idativos en el DN

Desaminacin 4AMetilcitosina
ELEMENTOS GEN*TICOS TRANS&ONI5LES
(os elementos genticos transponi!les son secuencias de DN %ue tienen la
propiedad de cam!iar de posicin dentro del genoma3 por tal causa tam!in
reci!en el nom!re de elementos genticos mviles. &or tanto3 cuando cam!ian
de posicin y a!andonan el lugar en el %ue esta!an3 en ese sitio3 se produce un
delecin o prdida de !ases. $i el elemento transponi!le esta!a insertado en el
interior de un gen3 puede %ue se recupere la funcin de dic"o gen. De igual
forma3 si el elemento gentico mvil al cam!iar de posicin se inserta dentro de
un gen se produce una adicin de una gran cantidad de nucletidos %ue tendr
como consecuencia la prdida de la funcin de dic"o gen. &or consiguiente3 los
elementos genticos transponi!les producen mutaciones.
$u e/istencia fue propuesta por F. McClintoc2 *+,4+ a +,4D. en ma73 sin
em!argo3 su e/istencia no se demostr "asta muc"o ms tarde en !acterias.
En el fenmeno de la transposicin no se "a encontrado una relacin clara
entre la secuencia de la sede donadora *lugar en el %ue est el transposn. y la
sede aceptora *lugar al %ue se incorpora el transposn.. lgunos transposones
muestran una preferencia por una determinada regin *7ona de C--- a 5---
pares de !ases.3 pero dentro de ella parecen insertarse al a7ar.
Transposones en !acterias.
o Tipos de transposones.
o Tipos de transposicin.
Transposones en eucariontes.
o En ma7.
o En !oca de dragn3 en petunia y en so9a.
o En levaduras.
o En Drosophila melanogaster .
o En mamferos.
TRANS&OSONES EN 5ACTERIAS
(a e/istencia de transposones o elementos genticos mviles se demostr en
!acterias. En !acterias e/isten dos tipos de elementos genticos mviles8
Ti(os )e t#ans(osones:
T#ans(osn Sim(e6 Secuencia )e Inse#cin o Eemento )e
Inse#cin 7IS8: los transposones simples contienen una secuencia
central con informacin para la transposasa y en los e/tremos una
secuencia repetida en orden inverso. Esta secuencia repetida en orden
inverso no es necesariamente idntica3 aun%ue muy parecida. Cuando
un transposn simple se integra en luna determinado punto del DN
aparece una repeticin directa de la secuencia diana *4A+C p!..
T#ans(osn Com(uesto 7Tn8: contienen un elemento de insercin *;$.
en cada e/tremo en orden directo o inverso y una regin central %ue
adems suele contener informaciin de otro tipo. &or e9emplo3 los
'actores de transferencia de resistencia *#T'.3 poseen informacin en la
7ona central para resistencia a anti!iticos *cloranfenicol3 2anamicina3
tetraciclina3 etc...
Transposn simple y transposn
compuesto
&untos de integracin de ;$+3 ;$C3 ;$5 y
Tn+---
En la siguiente ta!la se resumen las principales caractersticas de algunos
elementos ;$8
EementoLon"itu)
Re(eticin
te#mina
in,e#ti)a
Re(eticin
)i#ecta )e a
)iana
Seeccin )e a )iana
;$+ D<G p! C5 p! , p! #egional
;$C +5CD p! H+ p! 4 p! Iona caliente
;$H +HC< p! +< p! ++A+C p! J
C-
.........JTTT
;$4 ++,4 p! +G p! H p! Iona caliente
En la siguiente ta!la se resumen las principales caractersticas de algunos
Transposones compuestos *Tn.8
EementoLon"itu)
Ma#ca)o#
"en%tico
7#esistencia8
M'ULOS TERMINALES
IS O#ientacin
Reacin ent#e
am+os
Tn +- ,5-- p! Tetraciclina ;$ +- ;nvertida Divergencia C34K
Tn 4 4D-- p! Lanamicina ;$ 4 ;nvertida Difieren en + p!
Tn ,-5 5+-- p! Lanamicina ;$ ,-5 ;nvertida ;dnticos
Tn , C4-- p! Cloranfenicol ;$ , Directa ;dnticos *M.
Tanto los elemntos ;$ como los trasnposones compuestos *Tn. tienen %ue estar
integrados en otra molcula de DN3 el cromosoma principal !acteriano o en
un plasmidio3 nunca se encuentran li!res. En la grfica anterior se pueden ver
los puntos de integracin de los Elementos de ;nsercin ;$+3 ;$C3 ;$5 y del
Transposn compuesto Tn+--- en el cromosoma de E. coli.
Ti(os )e t#ans(osicin:
En general se distinguen dos tipos o formas de transposicin8
T#ans(osicin conse#,ati,a: el transposn sale de la sede donadora
%ue %ueda vaca y se incorpora en una nueva sede *sede receptora.. No
aumenta el n:mero de copias7 del transposn en el interior de la clula.
T#ans(osicin #e(icati,a: el transposn permanece en la sede
donadora y mediante un mecanismo com!inado de replicacin y
recom!inacin se incorpora en la sede aceptora. umenta el n:mero de
copias del transposn en el interior de la clula.
Mecanismo de transposicin Transposicin conservativa y replicativa
TRANS&OSONES EN EUCARIONTES
T#ans(osones en ma!2
(os transposones fueron descu!iertos por F. McClintoc2 *+,4+ a +,4D. en
ma73 sin em!argo3 cuando postul su e/istencia la comunidad cientfica no
comprendi adecuadamente sus tra!a9os. os ms tarde3 ella misma compar
los Belementos controladoresB %ue "a!a descrito *elementos cromosmicos
transponi!les. de ma7 con los transposones de los plasmidios. $us tra!a9os
reci!ieron el &remio No!el en +,<5.
Dentro de las familias de elementos controladores de ma7 "ay %ue distinguir
dos clases8
Los eementos autnomos: capaces de escindirse de la sede
donadora y transponerse.
Los eementos No autnomos: son esta!les3 y solamente se vuelven
inesta!les en presencia de los autnomos en posicin trans.
F. McClintoc2 Transposones en ma7
En el sistema Ac-Ds *ctivadorADisociacin. estudiado por F. McClintoc23 Ac es
el elemento autnomo y Ds es el elemento No autnomo. dems del sistema
Ac-Ds en ma7 se "an descrito otros sistemas como el Mu *Mutador.3 sistema
Spm *$upresorAMutador.3 sistema R-stippled y sistema MrRm. lgunas
caractersticas de estos sistemas son las siguientes8
Eemento Lon"itu)
Cua)#os )e
ectu#a a+ie#tos
Re(eticin te#mina
in,e#ti)a
Re(eticin
)i#ecta )e a
)iana
c H4G5 p! 5 ++ p! < p!
Mu +5GD p! H C+5 p! < p!
$pm <C<D p! + +5 p! 5 p!
T#ans(osones en +oca )e )#a"n6 (etunia - so.a:
Tam!in se "an encontrado transposones en otras especies de plantas8
Foca de dragn *Anthirrhinum majus.8 familia de transposones Tam
*+D-- p!.3 Tam! y Tam" *4--- p!..
&etunia3 so9a *#l$cine ma%.3 etc..
T#ans(osones en e,a)u#as:
;gualmente en levaduras tam!in se "an detectado transposones3 por e9emplo3
el sistema B&lip-&lopB de control del tipo de apareamiento en
Schizosaccharom$ces pombe3 el modelo en BcasetteB de Saccharom$ces
cere'isiae. Tam!in3 se "an dscrito los transposones de la familia T$ *G5-- p!..
T#ans(osones en Drosophila melanogaster:
En Drosophila melanogaster se "an descrito varias familias de transposones3
siendo las ms importantes los elementos (copia(3 elementos ) y los elementos
*+ *fold!ac2.. lgunas de sus caractersticas son las siguientes8
Eemento
Co(ias
(o#
"enoma
Lon"itu)
7(+8
Re(eticin
te#mina
)i#ecta
Re(eticin
te#mina
in,e#sa
Re(eticin
)i#ecta )e a
)iana
,opia C-AG- 4--- CGD p! +5 p! 4 p!
*+ N5- 4--A4--- No C4-A+C4- p! , p!
) N4- G- 4--AC--- No 5+ p! < p!
En Drosophila melanogaster se "a descrito el fenmeno d la Disg-nesis
h.brida3 uno de los sistemas responsa!les es el sistema &AM. En los
cru7amientos & x M *mac"os & capturados en la naturale7a por "em!ras
M del la!oratorio. la descendencia "!rida es via!le y aparentemente normal3
aun%ue es estril. En cru7amientos M / & *mac"os del la!oratorio por
"em!ras capturadas en la naturale7a. la descendencia es normal y frtil en las
sucesivas generaciones. Este diferente comportamiento de los "!ridos en las
dos direcciones del cru7amiento3 se denomina Disg-nesis h.brida y se de!e a
la activacin de un elemento ) en la lnea germinal.
(os Retro'irus tam!in pueden ser considerados como elementos genticos
mviles3 presentando algunos una analoga con los elementos copia de
Drosophila.
&arecido entre los retrovirus y transsposones de levaduras *Ty y ,+C. y Drosophila
*Copia.
T#ans(osones en mam!/e#os:
En mamferos se conocen tres clases de secuencias %ue son capaces de
transponerse o cam!iar de posicin a travs de un #N intermediario8
Ret#o,i#us en)"enos: seme9antes a los retrovirus3 no pueden infectar
nuevas clulas y estn restringidos a un genoma3 pero pueden
transponerse dentro de la clula. &oseen largas secuencias repetidas en
los e/tremos *(T#.3 genes en' *con informacin para la protena de la
cu!ierta. y genes %ue codifican para la trasnrciptasa in'ersa3 como los
presentes en retro'irus.
Ret#ot#ans(osones o #et#o(osones: carecen de (T# y de los genes
en' *con informacin para la protena de la cu!ierta. de retro'irus.
Contienen genes para la transcriptasa in'ersa y pueden transponerse.
Tienen una secuencia rica en pares AT en un e/tremo. 6n e9emplo3 son
los elementos (;NEA+ *elementos largos dispersos. en "umanos y
ratones.
Ret#o(seu)o"enes: carecen de genes para la transcriptasa in'ersa y
por consiguiente son incapaces de transponerse de forma
independiente3 aun%ue si pueden cam!iar de posicin en presencia de
otros elementos mviles %ue posean informacin para la trasncriptasa
in'ersa. &oseen una regin rica en pares AT en un e/tremo y los "ay de
dos tipos8
o &seu)o"enes (#ocesa)os: estn en !a9o n:mero de copias y
derivan de genes transcritos por la #N &oilimerasa ;;3 siendo
genes %ue codifican para polipptidos. Estos pseudogenes
procesados carecen de intrones.
o SINES 7eementos co#tos )is(e#sos8: estn en alto n:mero de
copias en mamferos. Dos e9emplos son la secuencia Alu de
"umanos y + de ratn3 %ue derivan de genes transcritos por la
#N polimerasa ;;; utili7ando un promotor interno.
Es%uema de diferentes tipos transposones en mamferos
(a secuencia Alu es la ms a!undante en el genoma "umano3 e/istiendo
D4-.--- copias dispersas por el genoma3 apro/imadamente e/iste una copia
cada H--- p!. Esta secuencia posee un contenido relativamente alto en *?OC.
y presenta una elevada "omologa *D-A<-K. con la secuencia + de ratn. $e
la denomina secuencia Alu por poseer en su interior una diana para la
endonucleasa de restriccin Alu. (as secuencias Alu "umanas tienen alrededor
de C<- p! y estn flan%ueadas por repeticiones directas cortas *GA+< p!.. 6na
secuencia tpica Alu es un dmero repetido en tandem3 la unidad %ue se repite
tiene un tamao apro/imado de +C- p! y va seguida de una corta secuencia
rica en pares AT. $in em!argo3 e/iste una asimetra en las unidades repetidas3
de manera %ue la segunda unidad contiene una secuencia de 5C p! ausente en
la primera. (as unidades repetidas de la secuencia Alu muestran un elevado
parecido con la secuencia del #N D$(3 un componente %ue 9uega un papel
importante en el transporte de las protenas a travs de la mem!rana del
retculo endoplasmtico.
MUTACIONES ES&ONTNEAS Y EN1ERME'A'ES 9UMANAS
En el siguiente resumen se citan algunos e9emplos de mutaciones espontneas
en la especie "umana8
Mutaciones de cam!io de sentido3 Mutaciones de cam!io de fase o
pauta de lectura y Mutaciones sin sentido.
Deleciones entre secuencias repetidas.
E/pansiones de trinucletidos.
Mutaciones )e cam+io )e senti)o6 Mutaciones )e cam+io )e /ase o (auta
)e ectu#a - Mutaciones sin senti)o:
E/isten muc"os e9emplos de este tipo de mutaciones en la especie "umana.
Muc"os de los errores congnitos del meta!olismo se producen por
mutaciones de cual%uiera de los tres tipos anteriores. lgunos e9emplos de
mutaciones de cam!io de sentido son8 la anemia falciforme con la aparicin de
la "emoglo!ina de tipo $ *0!$.3 o la "emoglo!ina de tipo C *0!C.. Etros
e9emplos de alteraciones de este tipo son la lcaptonuria *acumulacin de
cido "omogentsico o alcaptn. y la fenilcetonuria *&L6..
'eeciones ent#e secuencias #e(eti)as:
Ence/ao(at!a mitocon)#ia: afecta al sistema nervioso central y a los
m:sculos. $e produce por un funcionamiento defectuoso de las
fosforilacin o/idativa. Este mal funcionamiento se produce
consecuencia de una delecin de 4--- pares de !ases del DN
mitocondrial entre secuencias repetidas.
En/e#me)a) )e 1a+#-: afecta al cata!olismo de los glicoesfingolpidos3
el en7ima PAgalactosidasa cuyo gen est en el cromosoma J es
defectuosa de!ido a una delecin entre repeticiones directas de una
secuencia corta.
Delecin en el DN mitocondrial
E4(ansiones )e t#inuceti)os:
En los genomas de las especies eucariontes e/isten secuencias cortas
repetidas en tandem un n:mero varia!le de veces3 %ue se denominan
a!reviadamente )NT#s *)aria!le Num!er Tandem #epeat.. (as )NT#s se
pueden clasificar a su ve7 en Minisatlites y Microsatlites en !ase a la longitud
de la secuencia repetida3 en los Minisatlites la longitud de la secuencia %ue se
repite es superior +- !ases3 en los Microsatlites es inferior a +-. (os
Microsatlites ms frecuentes son dinucletidos repetidos muc"as veces3 por
e9emplo8 TCTCTCTCTCTCTCTC.... Tam!in "ay trinucletidos repetidos
muc"as veces3 por e9emplo3 C??C??C??C??C??..... En las mutaciones
producidas por e/pansiones de trinucletidos el n:mero normal de repeticiones
de un determinado trinucletido en una determinada posicin del genoma
*locus. se altera3 aumentando su n:mero de repeticiones. 6n posi!le
mecanismo propuesto para e/plicar este aumento en el n:mero de repeticiones
sera el Bapareamiento errneo deslizadoB3 sin em!argo3 est "iptesis no
e/plica incrementos demasiado grandes en el n:mero de repeticiones. lgunos
e9emplos de enfermedades producidos por e/pansiones de trinucletidos en la
especie "umana son las siguientes8
S!n)#ome :;/#"i: es la causa ms com:n de retraso mental en
varones. El trinucletido %ue se repite en el cromosoma J en el locus
*'#MA+. es C??. El n:mero normal de repeticiones oscila entre G y 4-3
e/iste un alelo premutacional con un n:mero de repeticiones %ue vara
entre 4- y C-- y la enfermedad se manifiesta cuando el n:mero de
repeticiones oscila entre +-- y +.5--.
Co#ea )e 9untin"ton: enfermedad neurodegenerativa de la edad
adulta3 se suele manifestar despus de la poca reproductiva. Este
microsatlite se locali7a cerca el telmero del !ra7o corto del
cromosoma H3 el trinucletido repetido es C?. El n:mero normal de
repeticiones oscila entre ++ y 5H y el n:mero de repeticiones en los
individuos enfermos vara entre HC y +--. $e trata de una enfermedad
con "erencia autosmica dominante.
'ist#o/ia miotnica: afecta al sistema nervioso central y al sistema
muscular. El trinucletido %ue se repite se locali7a en el cromosoma +, y
es C?3 el n:mero normal de repeticiones vara entre 4 y 543 las
personas enfermas poseen entre 4- y C-- repeticiones. Tam!in tiene
"erencia autosmica dominante.
At#o/ia muscua# es(ino +u+a#: microsatlite locali7ado en el
cromosoma J. El trinucletido repetido es CT?3 el n:mero normal de
repeticiones oscila entre ++ y 5+3 mientras %ue las personas afectadas
por esta enfermedad muestran entre H- y G4 repeticiones.
$ndrome J frgil8 e/pansin de trinucletidos
MUTAG*NESIS IN'UCI'A
E/isten diferentes agentes fsicos y %umicos %ue producen mutaciones en el
DN. Durante los primeros tiempos de la ?entica *+,-- a +,5-. los
investigadores trataron de producir artificialmente mutaciones sin conseguirlo3
"asta %ue Muller en +,CD y $tadler en +,C< demostraron los efectos
mutagnicos de los rayos J en Drosophila3 ma7 y ced!ada.
0. Q. Muller reci!i el &remio No!el en +,HG por su descu!rimiento de la
induccin de mutaciones mediante radiacin con rayos J.
0. Q. Muller $tadler
Entre los agentes fsicos %ue producen mutaciones3 estn las radiaciones
ioni7antes *por e9emplo los #ayos J. y las radiaciones no ioni7antes *la lu7
ultravioleta..
(as radiaciones ioni7antes producen los siguientes efectos a nivel celular8
E/ectos "en%ticos: alteraciones en los genes.
E/ectos cito"en%ticos: alteraciones en los cromosomas8 roturas
cromosmicas y translocaciones.
E/ectos /isio"icos: alteraciones en las en7imas y "ormonas.
&osteriormente3 se demostr %ue otros agentes fsicos y %umicos producan
mutaciones.
ES&ECI1ICI'A' MUTACIONAL
(a especificidad mutacional significa %ue muc"os agentes mutgenos tienden a
producir un determinado tipo de mutacin3 por e9emplo8
Etimetanosu/onato 7EMS8: produce fundamentalmente transiciones
?C>T.
Nit#oso"uani)ina 7NG8: produce esencialmente transversiones
?C>T.
Lu2 ut#a,ioeta 7U$8: produce transiciones y transversiones.
Especificidad mutacional del EM$3 la lu7 6) y de la flato/ina
MECANISMOS 'E MUTAG*NESIS
(os principales mecanismos por los %ue se producen las mutaciones son los
siguientes8
#empla7ar una !ase en el DN.
Mutgenos %ue alteran las !ases produciendo empare9amientos
errneos especficos.
gentes de tipo intercalante.
Mutgenos %ue producen prdida del empare9amiento especfico.
Rem(a2a# una +ase en e A'N: (os anlogos de !ases son compuestos
%umicos %ue pueden rempla7ar a una !ase determinada. &or e9emplo3 el 4A
Fromouracilo *4F6. es anlogo de la Timina *T. y puede rempla7arla. El 4F6
en su forma cetnica empare9a con la denina *. mientras %ue en su forma
enlica *4F6@. empare9a con la ?uanina *?.. El 4F6 es ms inesta!le y
produce transiciones. (a CAminopurina *C&. es anlogo de la denina *. y
puede rempla7arla. (a C& aparea con la Timina *T. pero en su forma imno
*C&@. empare9a con la Citosina *C.. Esta alteracin produce transiciones.
Mut"enos <ue ate#an as +ases (#o)ucien)o em(a#e.amientos e##neos
es(ec!/icos: e/isten varios tipos de agentes mutagnicos %ue alteran las
!ases nitrogenadas produciendo empare9amientos errneos
A"entes a<uiantes: como el EM$ %ue aade radicales etilo y produce
transiciones ?C>T. (a N? aade radicales metilo y produce tam!in
transiciones ?C>T.
9i)#o4iamina 79A8: produce especficamente transiciones ?C>T.
Iones +isu/ito - ci)o nit#oso: producen desaminacin. El cido
nitroso transforma la Citosina *C. en 6racilo *6.3 el 6racilo *6. empare9a
con la denina *. produciendo transiciones. (a desaminacin de las
denina *. la convierte en "ipo/antina *0. %ue empare9a con la Citosina
*C. produciendo transiciones.
A"entes )e ti(o inte#caante como a &#o/a,ina6 Na#an.a )e ac#i)ina -
Com(uestos ICR: son compuestos con estructuras planas %ue se meten o
intercalan entre las !ases nitrogenadas del DN produciendo adiciones o
deleciones de un solo par de nucletidos.
Mut"enos <ue (#o)ucen (%#)i)a )e em(a#e.amiento es(ec!/ico: estos
mutgenos daan muc"as !ases nitrogenadas y producen como consecuencia
un !lo%ueo de la replicacin del DN. (a mayora de los compuestos
cancergenos producen este tipo de alteraciones. De!ido a la gran cantidad de
alteraciones %ue producen en el DN como primera medida se produce un
!lo%ueo de la replicacin y se ponen en marc"a un sistema de emergencia
denominado a!reviadamente $E$ para reparar los daos y permitir %ue la
clula se repli%ue y pueda seguir viviendo. El sistema $E$ consta de al menos
tres genes denominados recA3 umu, y umuD. Este sistema produce un
rela9amiento de la especificidad de apareamiento de la DN polimerasa ;;; de
E. coli. lgunos e9emplos de esta situacin son8
Lu2 ut#a,ioeta 7U$8: produce dmeros de pirimidinas. Cuando "ay dos
pirimidinas sucesivas en la misma "lice la lu7 6) "ace %ue se
produ7can puente de "idrgeno entre am!as. (os ms frecuentes son
los dmeros de Timinas.
A/ato4ina 5
=
: se une a la ?uanina *?. modificndola de manera %ue la
?uanina modificada se separa del a7:car al %ue esta!a unida
produciendo una sede apurnica. El sistema $E$ pone "a!itualmente en
la sede apurnica una denina *. dando lugar a transversiones. Es un
potente carcingeno.
5en2o(i#eno: es un producto resultante de los motores de com!ustin y
es un potente carcingeno.
CAminopurina CA;minopurina Molcula intercalante
4AFromouracilo Transicin de!ida a 4AF6 flato/ina F
+
EM$ gentes intercalantes Dmeros de Timina
RE&ARACIN 'E LOS 'A0OS EN EL A'N
Cono "emos venido viendo "asta el momento3 e/isten muc"os agentes fsicos
y %umicos %ue pueden producir lesiones en el DN. &or tanto3 de!en e/istir
mecanismos %ue permitan prevenir y reparar los daos %ue se producen en el
material "ereditario tanto de forma espontnea como los inducidos.
Como ya "emos visto cuando "a!lamos de la replicacin del DN3 la propia
DN polimerasa ;;; posee la su!unidad R %ue tiene una funcin correctora de
prue!as %ue permite detectar cuando la DN polimerasa "a introducido un
nucletido %ue no es el correcto y retirarlo. Este es un primer mecanismo %ue
evita %ue se produ7can mutaciones durante la replicacin. dems de este
mecanismo e/isten otros %ue previenen posi!les daos y %ue reparan las
lesiones producidas8
$istemas %ue evitan los errores antes de %ue ocurran.
#eparacin directa de las lesiones en el DN.
$istemas de reparacin por escisin.
#eparacin posterior a la replicacin.
SISTEMAS >UE E$ITAN LOS ERRORES ANTES 'E >UE OCURRAN
Su(e#4i)o )ismutasa: este en7ima convierte los radicales super/ido en
per/ido de "idrgeno.
Cataasa: este en7ima convierte el per/ido de "idrgeno en agua.
Gen mutT: este gen codifica para un en7ima %ue impide la incorporacin de la
<Ao/oA? al DN. Este en7ima "idroli7a el trifosfato de la <Ao/oA? a la forma
monofosfato.
RE&ARACIN 'IRECTA 'E LAS LESIONES EN EL A'N
1oto##eacti,acin: sistema de reparacin directa de los daos producidos por
la lu7 6). (a lu7 6) produce dmeros de pirimidinas3 fundamentalmente
dmeros de Timinas. El en7ima *otoliasa codificada por el gen phr reconoce en
la oscuridad los dmeros de Timina y se une a ellos3 y cuando se e/pone a la
lu7 *mediante un fotn. des"ace el dmero de Timinas.
T#ans/e#asa )e "#u(os a<uio 7metio o etio8: elimina los gupos al%uilo
producidos por el EM$ o por N?. El en7ima metiltrans&erasa transfiere el grupo
metilo de la EAGAmetilguanina a una cistena *cys. de la en7ima.
SISTEMAS 'E RE&ARACIN &OR ESCISIN
Re(a#acin )e os )a3os )e a u2 U$ 7Endonucleasa uvrABC8: (a
Endonucleasa u'rA+, es una escilnucleasa codificada por los genes u'rA/
u'r+ $ u'r, %ue corta el DN. (a 0elicasa II de DN separa las dos "lices y
retira +C nucletidos. (a AD1 polimerasa I rellena el "ueco producido por la
0elicasa II y la 2igasa sella los e/tremos.
Re(a#acin A&: reparacin de las sedes apurnicas o apirimidnicas. (a llevan
a ca!o las Endonucleasas A) de la clase ; %ue cortan por el e/tremo 5S y las de
la clase ;; %ue cortan por el e/tremo 4S. 6na e%onucleasa elimina una pe%uea
regin %ue contiene entre dos y H nucletidos3 la AD1 polimerasa I rellena el
"ueco y la 2igasa sella los e/tremos.
Re(a#acin me)iante "ucosi)asas: estas en7imas detectan las !ases
daadas y las retiran rompiendo el enlace NAglucosdico con el a7:car. Como
consecuencia se origina una sede & %ue se repara de la forma indicada
anteriormente *reparacin &.. (a #lucosidasa de 3racilo elimina el 6racilo *6.
del DN. (a #luco%idasa de 0ipo%antina3 elimina la 0ipo/antina *0. del DN.
dems de estas dos glucosidasas e/isten otras diferentes.
Sistema GO: dos glucosidasas producto de los genes mutM y mut4 act:an
con9untamente para eliminar las lesiones %ue produce la <Ao/oA? *?E..
RE&ARACIN &OSTERIOR A LA RE&LICACIN
Re(a#acin )e a(a#eamientos inco##ectos: la reparacin de apareamientos
incorrectos posterior a la replicacin re%uiere la e/istencia de un sistema %ue
sea capa7 de reali7ar las siguientes operaciones8
#econocer las !ases mal apareadas.
Determinar cual de las dos !ases es la incorrecta.
Eliminar la !ase incorrecta y sinteti7ar.
Esta reparacin la reali7an los productos de los genes mut03 mut(3 mut$ y
mut6. dems3 para distinguir la "lice de nueva sntesis de la "lice molde y
as sa!er eliminar la !ase incorrecta3 el sistema consiste utili7a el "ec"o de %ue
la "lice de nueva sntesis tarda un cierto tiempo en metilarse la denina *. de
la secuencia ?TC3 mientras %ue la de la secuencia ?TC de la "lice molde
ya est metilada. El en7ima %ue reconoce la secuencia ?TC metilando la
%ue contiene es la Metilasa de Adenina.
#eparacin directa8 'otorreactivacin #eparacin por escisin8 daos 6)
#eparacin posterior a la replicacin #eparacin sedes &
Re(a#acin (o# #ecom+inacin: cuando la DN polimerasa ;;; encuentra un
dmero de Timina *T. producido por lu7 6) no sa!e %ue nucletido poner
saltando la regin y de9ando un "ueco. Como consecuencia esa regin %ueda
como DN de "lice sencilla. De!ido a %ue la lu7 6) produce muc"os dmeros
de Timina3 se produce un !lo%ueo en la replicacin y para evitar %ue la clula
muera y pueda replicarse se dispara el sistema de emergencia $E$. (a puesta
en marc"a del sistema $E$ comien7a por%ue el DN de "lice sencilla activa a
la protena RecA %ue a su ve7 interacciona con la protena 2e%A. (a protena
2e%A es un represor de los genes u'rA/ u'r+/ u'rD/ sulA $ sul+. Todos estos
genes tienen en el promotor una secuencia denominada ca9a $E$. (a protena
2e%A normalmente impide la transcripcin o e/presin de los genes citados
anteriormente3 pero cuando interacciona con la protena RecA de9a de impedir
la e/presin de estos genes3 pudindose sinteti7ar las protenas
correspondientes y reparar los daos producidos por la lu7 6).
RE$ERSIN
#estauracin total o parcial del fenotipo normal *apariencia e/terna3 actividad
proteica. a partir de un individuo mutante.
Re,e#sin "enot!(ica: se produce por causas genticas.
Re,e#sin /enot!(ica: se produce por causas no genticas *am!ientales..
+T mutacin CT mutacin
In)i,i)uo
No#ma

Mutante

Re,e#tiente
'enotipo mutante #eversin 'enotipo normal
(a reversin es una CT mutacin %ue restaura total o parcialmente el fenotipo
normal a partir de un individuo mutante. l individuo %ue recupera el fenotipo
normal por medio de esta CT mutacin se le denomina #evertiente.
RE$ERSIN GENOT&ICA
(a reversin genotpica se puede conseguir de dos maneras8
Ret#omutacin 7en senti)o est#icto8: consiste en recuperar la
secuencia e/acta de nucletidos en el DN.
Mutacin su(#eso#a: es una mutacin secundaria %ue restaura total o
parcialmente la funcin prdida.
RETROMUTACIN
Consiste en recuperar la secuencia e/acta de nucletidos en el DN3 un
e9emplo de esta situacin sera8 *lys.>?*glu.>*lys..
veces tam!in se "a!la de #et#omutacin en senti)o /unciona3 de manera3
%ue se recupera la actividad en7imtica normal pero no se recupera la
secuencia original de nucletidos en el DN3 por e9emplo8
6CC*ser.>6?C*cys.>?*ser.. $in em!argo3 el concepto de retromutacin
funcional no se diferencia del concepto de mutacin supresora y puede inducir
a error.
MUTACIN SU&RESORA
Es una mutacin secundaria %ue restaura total o parcialmente la funcin
prdida.
En la siguiente ta!la se resumen los diferentes tipos de mutacin supresora8
Mutacin
Su(#eso#a
int#a"%nica
(a segunda
mutacin afecta al
mismo gen %ue la
primera.
Cam+io )e /ase o (auta
)e ectu#a )e si"no
o(uesto
(a +T mutacin es una adicin y
la CT mutacin es una delecin.
Cam+io )e senti)o en un
?@ sitio
(a segunda mutacin recupera la
actividad de la protena o en7ima.
Mutacin
su(#eso#a
inte#"%nica
(a segunda
mutacin afecta a
un gen distinto al
%ue afect la
primera mutacin.
Mutaciones su(#eso#as
in/o#macionaes
Mutacin supresora de codones
sin sentido o de ';N. &or
e9emplo3 #NAt de tyr %ue lee un
codn de fin *6?.
Mutacin supresora de cam!io e
fase o pauta de lectura. &or
e9emplo3 #NAt %ue lee un codn
de H !ases y suprime una
adicin.
Mutacin supresora de cam!io
de sentido. &or e9emplo3 #NAt
de gly %ue lee codones de arg.
Mutaciones su(#eso#as
/isio"icas
Defecto en una ruta meta!lica
compensado por una segunda
mutacin %ue a!re otra ruta
alternativa con el mismo
resultado.
CARCTER &REA'A&TATI$O 'E LA MUTACIN
6na de las preguntas ms importantes acerca de las mutaciones es sa!er si
estas se producen en los individuos de las po!laciones independientemente de
si confieren o no al individuo alguna venta9a adaptativa3 en cuyo caso la
mutacin tendra un carcter preadaptativo3 o si por el contrario3 las mutaciones
se producen como consecuencia de una adaptacin fisiolgica de los
individuos al am!iente3 en cuyo caso la mutacin tendra un carcter
postadaptativo3 ya %ue estara inducida por el propio am!iente.
&RUE5A 'E 1LUCTUACIN 7LURIA Y 'EL5RACB6 =CDE8
(as mutaciones %ue confieren resistencia a agentes am!ientales especficos
%ue no son tolerados por los individuos normales o silvestres3 se pueden
estudiar con facilidad en !acterias. El fago T infecta y mata a la mayora de
las clulas de E.coli. $i se siem!ra una placa con un gran n:mero de !acterias
*alrededor de +-
,
. y fagos3 la mayora de las !acterias morirn y unas pocas
so!revivirn produciendo colonias de !acterias resistentes %ue pueden ser
aisladas.
Cuando se o!servaron las primeras !acterias resistentes a T+ se pens %ue
podan e/plicarse por mutacin al a7ar de un alelo sensi!le Ton
$
a un alelo
resistente Ton
#
o !ien a una adaptacin fisiolgica de la !acteria %ue detectara
la presencia del fago y a9ustara su meta!olismo resistiendo la infeccin. Este
a9uste fisiolgico sera seme9ante al reali7ado por las !acterias cuando se
aade al medio un nuevo nutriente.
daptacin 'isiolgica Mutacin al a7ar
(uria y Del!rUc2 *+,H5. disearon un e/perimento ya clsico para distinguir
entre estas dos "iptesis y la metodologa empleada serva para calcular tasa
de mutacin y continua utili7ndose "oy da. Este e/perimento se "a
denominado )rueba o test de *luctuacin.
(uria y Del!rUc2 reci!ieron en +,G, el &remio No!el por sus descu!rimientos
so!re el ciclo de reproduccin de los virus y el papel del material gentico en
las !acterias y los virus.
$alvadore E. (uria Ma/ Del!rUc2
(uria y Del!rUc2 pensaron %ue si la causa de la resistencia a T+ era un suceso
de mutacin poco frecuente3 tal suceso podra producirse pronto o tarde
durante el crecimiento del cultivo !acteriano3 ya %ue la mutacin es un
fenmeno aleatorio a lo largo del tiempo. $i se produce pronto en la "istoria del
cultivo dara lugar a una gran cantidad de clulas resistentes3 por el contrario3 si
se produce tarde originara muy pocas clulas o !acterias resistentes. &or
consiguiente3 si se anali7an muc"os cultivos !acterianos pe%ueos3
esperaramos una gran variacin en el n:mero de !acterias resistentes de un
cultivo a otro. $in em!argo3 si se trata de una adaptacin fisiolgica no "ay
ra7n para esperar dic"a variacin3 ya %ue la adaptacin fisiolgica sera
!astante constante en su funcionamiento.
&ara llevar a ca!o el e/perimento utili7aron C- cultivos pe%ueos de -.C ml con
una concentracin inicial de +-
5
clulas de E.coli por mililitro. dems iniciaron
un cultivo grande de +- ml con igual concentracin *+-
5
clulas de E.coli por
mililitro.. De9aron crecer am!os tipos de cultivos "asta alcan7ar una
concentracin de +-
,
clulas por mililitro *alrededor de C- generaciones.. Cada
uno de los cultivos pe%ueos d -.C ml se sem!r por separado en una placa
%ue "a!a sido cu!ierta con una densa capa de fago T. &or otro lado3 tomaron
+- muestras de -.C ml del cultivo grande o masivo y las sem!raron por
separado en +- placas cu!iertas con una densa capa de fago T.
$i la resistencia se de!iera a una mutacin al a7ar y poco frecuente %ue "a
tenido lugar en alguna de las C- generaciones transcurridas desde el inicio de
los cultivos3 en cada cultivo pe%ueo la mutacin se "a!ra producido en un
momento distinto3 en algunos al principio *apareciendo como resultado muc"as
clulas resistentes.3 en otros al final *apareciendo pocas clulas resistentes. y
en otros incluso ni se "a!ra producido *no "a!ra clulas resistentes.. &or
tanto3 en los cultivos pe%ueos se o!servara una variacin grande en el
n:mero de colonias resistentes. &or el contrario3 si la resistencia se de!e a una
adaptacin fisiolgica inducida por la presencia del fago T+3 sera espera!le
%ue la tasa de clulas resistentes fuera la misma de un cultivo a otro.
El cultivo grande o masivo sirve como control3 ya %ue lo %ue se espera en las
+- muestras de -.C ml tomadas de dic"o cultivo es %ue todas tengan el mismo
comportamiento ya %ue proceden del mismo cultivo grande y comparten la
misma "istoria3 por consiguiente3 el n:mero de colonias resistentes en las
placas procedentes de las +- muestras del cultivo grande de!era ser
seme9ante y la variacin sera muy pe%uea.
(os resultados o!tenidos fueron los siguientes8
Cuti,os (e<ue3os )e FG? m
Cuti,os (#oce)entes )e cuti,o
"#an)e o masi,o
NHme#o )e cuti,o
N@ )e coonias
#esistentes a T=
NHme#o )e cuti,o
N@ )e coonias
#esistentes a T=
+ + + +H
C - C +4
5 5 5 +5
H - H C+
4 - 4 +4
G 4 G +H
D - D CG
< 4 < +G
, - , C-
+- G +- +5
++ +-D
+C -
+5 -
+H -
+4 +
+G -
+D -
+< GH
+, -
C- 54
Me)ia I ==GE Me)ia I =JGK
$a#ian2a I JCD $a#ian2a I =L
Coe/iciente )e ,a#iacin IJ= Coe/iciente )e ,a#iacin IFGC
Como puede o!servarse3 los resultados o!tenidos apoyan el car5cter
preadaptati'o de la mutacin3 es decir3 la mutaciones se producen al a7ar
independientemente de si confieren o no alguna venta9a adaptativa a los
individuos.
&LACA RE&LICA'A 7LE'ER5ERG Y LE'ER5ERG =CL?8
El e/perimento llevado a ca!o por (uria y Del!rUc2 *+,H5. sugiere %ue el fago
T selecciona a las !acterias %ue ya son previamente resistentes y no induce
su aparicin. Es decir3 el agente am!iental selecciona a los individuos de la
po!lacin %ue son previamente resistentes sin inducir su aparicin. &or
consiguiente3 ca!e preguntarse si es posi!le demostrar la e/istencia previa de
los mutantes resistentes en una po!lacin antes de introducir el agente
selectivo. Dic"a demostracin la llevo a ca!o el matrimonio (eder!erg y
(eder!erg en +,4C.
Q. (eder!erg
E/perimento de la )laca Replicada *(eder!erg y (der!erg
+,4C.
$em!raron una po!lacin de !acterias *+-
D
colonias. %ue no "a!an estado en
contacto con el fago T en una placa sin el agente selectivo *sin fago T..
esta placa se la llama )laca Matriz. Mediante un tampn o mue%uilla con una
pie7a de terciopelo estril de la forma de la placa se saca una copia de las
colonias de la )laca Matriz poniendo en contacto la pie7a de terciopelo con la
)laca Matriz y posteriormente se aplica el terciopelo a tres placas nuevas
*)lacas replicadas. %ue contienen el agente selectivo *fago T+.. Esta operacin
se lleva a ca!o marcando la &laca Matri7 y las tres )lacas Replicadas de
manera %ue no se altere la posicin relativa de las colonias de la )laca Matriz.
Teniendo en cuenta %ue la mutacin de resistencia es poco frecuente3
aparecieron pocas colonias resistentes en las )lacas Replicadas3 pero lo ms
interesante es %ue en las tres )lacas Replicadas aparecan las mismas
colonias resistentes y en las misma posiciones relativas. $i se tratar de una
adaptacin fisiolgica a la presencia del fago T3 la distri!ucin espacial de
colonias resistentes en las tres replicas no tendra %ue ser la misma. $in
em!argo3 si las !acterias ya eran resistentes al fago T antes de entrar en
contacto con l3 las tres replicas presentaran el mismo n:mero de colonias
resistentes y en las mismas posiciones. dems3 sera posi!le identificar en la
)laca Matriz las colonias resistentes tomar muestras de ellas e iniciar un cultivo
l%uido en presencia de T3 si realmente son resistentes las !acterias creceran3
cosa %ue sucedi. $in em!argo3 si se toma de la )laca Matriz una muestra de
colonias %ue no "an originado !acterias resistentes en las replicas y se inicia
un cultivo l%uido en presencia de T las !acterias no crecen. &or consiguiente3
este e/perimento demuestra %ue en la po!lacin inicial de !acterias sem!radas
en la )laca Matriz ya "a!a mutantes resistentes al fago T *agente selectivo.
antes de "a!er estado en contacto con l3 es decir3 demuestra %ue la mutacin
tiene ,ar5cter )readaptati'o.
TASA Y 1RECUENCIA 'E MUTACIN
Tasa )e mutacin: es el numero de mutaciones %ue se producen por unidad
de tiempo3 las unidades de tiempo %ue se emplean "a!itualmente son el
perodo correspondiente a la vida de una clula3 de un organismo *generacin.
o de una divisin celular. Como puede o!servarse3 las unidades de tiempo
corresponden a unidades !iolgicas.
En el es%uema de la i7%uierda "a tenido
lugar una sola mutacin *M. y el perodo
de tiempo completo para %ue la mutacin
"aya tenido lugar es o !ien el n:mero
total de lneas *+H perodos
generacionales. o !ien el n:mero total de
divisiones celulares *siete.. En este :ltimo
caso la tasa de mutacin sera +VD.
Es%uema de tasa y frecuencia de
mutacin
E/plicacin clculo de la tasa de
mutacin
En general3 las mutaciones son poco frecuentes3 en la siguiente ta!la *datos
recopilados por $tadler. se indican las frecuencias de mutacin de diferentes
loci en ma7.
Gen
N@ )e "ametos
anai2a)os
N@ )e
mutaciones
N@ me)io )e mutaciones (o#
min )e "ametos
#>r 44HD<G CD5 H,C.-
;>i CG45,+ C< +-G.-
&r>pr GHD+-C D ++.-
$u>su +GD<D5G H C.H
W>y +DH4C<- H C.C
$">s" CHG,C<4 5 +.C
1/>X/ +4-5DHH - -.-
Como se puede o!servar en el caso de ma73 diferentes genes muestran
diferentes frecuencias de mutacin.
1#ecuencia )e mutacin: es la frecuencia con la %ue se o!serva un tipo
particular de mutacin *o mutante. en una po!lacin de clulas o de individuos.
(a po!lacin de clulas puede referirse a gametos3 esporas se/uales o casi
cual%uier otro tipo celular. En el es%uema anterior la frecuencia de mutacin de
la po!lacin final de < clulas sera CV< Y -.C4.
En la siguiente ta!la se indican algunas tasas y frecuencias de mutacin en
varios organismos diferentes.
O#"anismo Mutacin $ao# Uni)a)es
T! *fago. ;n"i!icin lisis r>r
O
+ / +-
A<
Tasa8 lelos
mutantes por
replicacin gnica
T! *fago. #ango de "ospedador "
O
>" 5 / +-
A,
E. coli *!acteria. 'ermentacin de lactosa lac>lac
O
C / +-
AD
Tasa8 clulas
mutantes por
divisin celular
E. coli *!acteria.
#e%uerimiento de "istidina "is
A
>"is
O
H / +-
A<
,hlam$domonas reinhardtii
*alga.
$ensi!ilidad a estreptomicina
str
s
>sts
r
+ / +-
AG
1eurospora crassa *"ongo.
#e%uerimiento de inositol inos
A
>inos
O
< / +-
A<
*recuencia por
espora ase/ual 1eurospora crassa *"ongo.
#e%uerimiento de adenina ad
A
>ad
O
H / +-
A<
6ea ma$s *ma7. $u>su3 *ver ta!la anterior. C.H / +-
AG
*recuencia por
gameto
Drosophila melanogaster
*mosca.
Color de los o9os 1>X H / +-
A4
*recuencia por
gameto
Mus musculus *ratn. &ela9e de color diluido D>d 5 / +-
A4
0omo sapiens *"umanos. Mutacin $ao# Uni)a)es
utosmicos dominantes
Enfermedad de 0untington -.+ / +-
A4
*recuencia por
gameto
$indrome BuaArtulaB -.C / +-
A4
Epilopia
-.HA-.< / +-
A
4
&oliposis m:ltiple en intestino
grueso
+A5 / +-
A4
condroplasia *enanismo. HA+C / +-
A4
Neurofi!romatosis 5AC4 / +-
A4
(igados al J recesivos
0emofilia CAH / +-
A4
Distrofia muscular de Duc"enne HA+- / +-
A4
Cultivo de clulas mdula
sea
Normal>resistencia a a7aguanina D / +-
AH Tasa8 clulas
mutantes por
divisin celular