HISTOQUMICA BSICA

CICLO ACADMICO
2014-II

TRICRMICA DE
MASOON

LICENCIADO: MANFRED
RAMREZ AGAMA

INTRODUCCION.

ALUMNA:CERVANTES
ALEJO ERIKA
1

Introduccin
El tricrmico de Masson al igual que otros colorantes tricrmicos ,es una tincin especial
que permite visualizar claramente las fibras de colgeno tipo I que se dormn fibras
gruesas o haces , diseados para dar resistencia; tambin evidencia, aunque en menor
intensidad , las fibras reticulares y son usadas para diferenciar entre el colgeno y musculo
liso en tumores e identificar incrementos en tejidos colagenosos en enfermedades como
cirrosis heptica .
Es tincin tricrmica ms simple ya que ocupa solo dos colorantes aninicos despus de
la tincin nuclear con hematoxilina frrica . Se pueden hacer variacin utilizando distintos
colorantes o soluciones con distintos heteropolicidos. Se emplean tres colorante para
diferenciar el ncleo celular; el citoplasma y las fibras de colgeno

Fundamento
El rol por el cido fosfomolbdido en la tincin selectiva de fibras del tejido conectivo ,
fue investigado probando la hiptesis : el cido se une al tejido y de este modo conserva
la capacidad de unir colorantes , por la formacin de enlaces salinos con sus grupos
bsicos ( el cidos ) . La reaccin del azul de molibdeno demuestran que el cido fomoldico
se une a muchas estructuras las cuales son teidas selectivamente por mtodos
tricromicos
o por
la combinacin
de tincin
cido-base
del cido
fosfomolbdico ,particularmente tejido conectivo . As las propiedades adquiridas de la tincin
por las fibras del tejido conectivo , despus del tratamiento con cidos fosfomolbdico
estn probablemente debido a la presencia de este cido sobre las fibras .El cido
fosfomoldico uno fue desplazado por el colorante , como sugiri zeiger ,desde una
reaccin de azul de molibdeno de intensidad regulacin podra ser aun obtenida despus
dela tincin con verde claro . A cualquier velocidad el cido fosfomolbdico es
intercambiado, probablemente por un anin. Esto obviamente , no ocurre desde un
colorante aninico puro que no tie fibra del tejido conectivo despus del cido
fosfomolibdico. Se con concluye que el cido fosfomolibdico es retenido por el tejido y
enlaces por enlaces moleculares de colorantes. Hay varias evidencias de que el enlace
entre el cido fosfomolibdico y el colorante es de naturaleza salina
1. La presencia de grupos catinicos en el
colorante era indispensable
despus del cido fosmolbdico
2. Grupos bsicos fuertes producen tincin ms intensa
3. Con colorantes dbilmente bsicos bajando el PH

para teir

Antecedentes histricos
MASSON, CLAUDE L .PIERRE
( Naci en 1880 en Dijon; muri en 1959)
Patlogo canadiense. Estudio medicina en la universidad del Paris , donde se gradu en
1909 .Continuo su formacin en el instituto Pasteur en Pars entre 1909 y 1914. Despus
de la primera guerra mundial ,la nombraron director del departamento de patologa en le
universidad de Estrasburgo , ha sido la persona ms joven en ser nombrado en este cargo .
se vincul como director del departamento de patologa de la universidad de Monterral
en 1927 ,cargo que desempeo de patologa de varios hospitales de la ciudad , entre
ellos Nostre Dame , Hotel Dieu y Saint- Justine .Masson fue muy conocido por sus
trabajos sobre los tumores del cerebro
y el sistema nervioso , adems
de su
reconocimiento por el desarrollo de la famosa tcnica de coloracin tricrmica , que
se convirti en la estndar de loa laboratorios de patologa de la poca . Tambin fue
autor de un libro de tumores cerebrales (1923) y de ms de 120 artculos cientficos
Da origen a: coloracin tricrmica de Masson

Tricrmica de Masson
Se trata de una tcnica para demostracin de fibras colgenas
1. Fijacin : cualquier fijador es vlido , si bien es de eleccin la solucin de Bouin
2. Cortes : en parafina
3. Procedimientos de coloracin:
a)
Desparafinar los cortes en :
Xilol ..10 min
Xilol10 min
b) Hidratar los cortes en baos decrecientes de alcohol
Alcohol 100...5 min
Alcohol100.5min
Alcohol 96..5 min
Alcohol 96 .................................5 min
Lavar con agua corriente 5 min
c) Colorear con la solucin Bowin 56 o - 60 o 1 hora a estufa
Lavar con agua corriente amarilla hasta que desaparezca el color amarillo
d)
Colorear con hematoxilina de Irum.. .......10 min
Lavar con agua corriente .10 min
Lavar con agua destilada
e)
Colorear con solucin Briebrich -Scarlet Fucsina cida ...5 min
Lavar con agua destilada
f) Colorear con la solucin cido Fosfotungstico acuoso 5 %....................15 min
g)
Colorear con la solucin verde luz..... 20 min
Lavar con agua destilada
Lavar con solucin de actica al 1% ...4 min
Pasar por agua corriente
h)
Deshidratar en baos crecientes de alcohol etlico
Alcohol 96...5min
Alcohol 96........5 min
Alcohol 100...............................................................................................5 min
Alcohol 100...5 min
i) Diafinar empleando xilol y montar
j) Resultados :
Ncleos ..azul negruzco
Citoplasma ,queratina, fibras musculares rojo
Colgeno y retcula .azul o verde

Tincin tricrmica

Mtodo de Masson Fontana

Introduccin
La melanina (de mlas, negro) es un pigmento pardo negruzco, intracelular. Al microscopio de
luz se presenta en forma de grnulos pequeos. El color vara del amarillo pardusco al caf
o negro
La melanina puede demostrarse mediante reacciones histoqumicas. la ms usadas estn
basadas en el poder de reductor de la melanina , as en el mtodo de Fontana -Masson la
melanina reduce el nitrato de plata que se precipita sobre los grnulos del pigmento dando
una coloracin negra .

Hallazgos Patolgicos
El estudio histolgico mostro la presencia de una proliferacin neoplsica de densidad moderada
constituida por clulas de aspecto epitelial , formando estructuras tubo papilares que remedaban
la arquitectura del tubo neural primitivo (figura 3) . En la superficie luminal (interna) de los tbulos
no se observan cilios ni blefaroblastos . Bajo la superficie externa del epitelio se observa una
membrana limitante eosinfila (figura 4). las clulas mostraban
una morfologa cuboidea o
cilndrica , los ncleos eran ovales , perpendiculares a las superficies luminal y externa, con
cromatina en grumos .
Ocasionalmente se observan figuras mitticas, prximas a la superficie luminal de los tbulos (figura
5). En amplias zonas , las clulas mostraban
la presencia
de un pigmento
parduzco
intracitoplasmtico ( figura 5 y 6 ) , positivo con la tincin de Masson - Fontana . Entremezclados
con las estructuras tubulopapilares se observan nidos solidos de clulas indiferenciadas . El
estudio
imunohistoqumico revelo positividad de las clulas para enolasa, sinaptofisina, cito
queratinas y protenas S -100

Figura 3

Figura 4

Figura 6

Figura 5

Tincin de MASSON FONTANA

a)
b)
c)
d)
e)
f)
g)
h)
i)
j)
k)
l)

Desparafinar hasta el agua destilada

Colorear con solucin Gram 10 minutos
Lavar en agua destilada.. 30 minutos
Colorear con solucin fontana Masson ( microondas pot40, 30 segundos )
Lavar en agua estilada
Virar en cloruro de oro 0.1% ..4minutos
Tiosulfato de sodio 5%................................................................................... 2 minutos
Lavar en agua corriente 3 minutos
Safanida 1 minuto
Lavar en agua destilada
Deshidratar ,aclarar y montar
Resultados: grnulos de melanina negros

Bibliografas
1. http://es.scribd.com/doc/203518378/TINCION-TRICROMICA-DE-MASSON-PARACOLAGENA-Y-FIBRAS-MUSCULARES-docx
2. http://dic.idiomamedico.net/coloraci%C3%B3n_tricr%C3%B3mica_de_Masson
3. http://es.scribd.com/doc/58251756/Tincion-Tricromica
4. http://escuela.med.puc.cl/publ/patologiageneral/patol_026.html
5. http://histofotos.com/protocolos-de-tincion/54-deteccion-de-pigmentos/117fontana-masson.html
6. http://conganat.uninet.edu/IVCVHAP/POSTER-E/101/

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