Laporan ini menjelaskan prosedur pemeriksaan radikal bebas malondialdehide (MDA) dengan metode spektrofotometri. PBS digunakan sebagai penyangga pH dan osmolaritas sel, TCA untuk pengendapan protein, dan TBA untuk mendeteksi MDA hasil oksidasi lipid. Spektrofotometer bekerja berdasarkan hukum Beer-Lambert dimana cahaya monokromatik yang melewati sampel sebagian diserap dan diukur serapannya.
Original Description:
Buat bagan prosedur pemeriksaan MDA
Original Title
Buat Bagan Prosedur PemeriksaanBuat bagan prosedur pemeriksaan MDA MDA
Laporan ini menjelaskan prosedur pemeriksaan radikal bebas malondialdehide (MDA) dengan metode spektrofotometri. PBS digunakan sebagai penyangga pH dan osmolaritas sel, TCA untuk pengendapan protein, dan TBA untuk mendeteksi MDA hasil oksidasi lipid. Spektrofotometer bekerja berdasarkan hukum Beer-Lambert dimana cahaya monokromatik yang melewati sampel sebagian diserap dan diukur serapannya.
Laporan ini menjelaskan prosedur pemeriksaan radikal bebas malondialdehide (MDA) dengan metode spektrofotometri. PBS digunakan sebagai penyangga pH dan osmolaritas sel, TCA untuk pengendapan protein, dan TBA untuk mendeteksi MDA hasil oksidasi lipid. Spektrofotometer bekerja berdasarkan hukum Beer-Lambert dimana cahaya monokromatik yang melewati sampel sebagian diserap dan diukur serapannya.
PBS merupakan sebuah larutan penyangga yang biasa digunakan dalam penelitian biologi. Buffer membantu untuk mempertahankan konstan pH. Osmolaritas dan konsentrasi ion solusi yang sesuai dengan tubuh manusia (isotonik) (Anonim 2, 2009). PBS sering digunakan dalam percobaan biologi sel untuk mempertahankan osmolaritas sel. Garam mengandung ion, yang menyeimbangkan jumlah ion garam di dalam sel. Jika sel yang tenggelam ke dalam solusi yang memiliki terlalu banyak garam ion, air akan bocor keluar dari sel, menyebabkan sel menyusut. Sebaliknya, jika sel terbenam ke dalam solusi yang memiliki ion terlalu sedikit garam, air akan masuk ke dalam sel, menyebabkan sel pecah. Oleh karena itu, sangat
penting saat melakukan percobaan biologi sel untuk menjaga sel-sel di
osmolaritas tertentu. PBS adalah pada osmolaritas yang benar untuk menjaga sel-sel dalam negara isotonik. PBS sering digunakan sebagai larutan penyangga dalam berbagai eksperimen untuk mempertahankan pH protein. Protein memerlukan kisaran pH tertentu untuk menjaga netralitas pada asam amino tertentu, untuk mempertahankan struktur protein. Jika
tidak, struktur protein akan terdenaturasi
Asam thiobarbituric (TBA) (Tarladgis et al.,1960) adalah salah satu yang paling banyak digunakan untuk mengukur lipid Produk oksidasi dalam produk daging dan daging karena itu sederhana dan cepat. Uji TBA menentukan jumlah malondialdehid (MDA), produk sampingan sekunder utama oksidasi lipid, dalam sampel. Penentuan MDA dalam produk daging atau telah dipelajari luas (Hoyland dan Taylor,1991, dan korelasi signifikan antara nilai TBA dan skor sensorik daging unggas telah dilaporkan (Salih et al.,1987). Namun, Kosugi et al.(1989) melaporkan bahwa absorbansi pigmen merah dalam metode TBA mungkin tidak khusus mengukur MDA karena zat lainnya dapat juga bereaksi dengan TBA dan berkontribusi terhadap absorbansi. Selain itu , pemanasan dan kondisi asam dapat menyebabkan terlalu tinggi zat reaktif asam thiobarbituric (TBARS). Gray dan Monahan ( 1992) melaporkan bahwa MDA berinteraksi dengan berbagai unsur makanan seperti amino asam , protein , glikogen , dan bahan makanan lainnya. Sehingga hasil interaksi MDA dan TBA kurang
dianggap benar sempurna.
Senyawa ini banyak digunakan
dalam
bidang
biokimia,
untuk
pengendapan makromolekul seperti protein, DNA dan RNA. Garam
natriumnya digunakan sebagai pembasmi rumput liar. Larutan yang mengandung asam trikloroasetat digunakan untuk penghapus tato dan pengobatan kutil, termasuk kutil kelamin (aman digunakan selama kehamilan). Garam-garam dari asam trikloroasetat disebut trikloroasetat. Reduksi
sebagian
dari
asam
trikloroasetat
menghasilkan
asam
dikloroasetat, merupakan suatu obat aktif yang berpotensi dapat
menyembuhkan penyakit kanker
3. Jelaskan prinsip kerja spektrofotometer!
Prinsip kerja spektrofotometri berdasarkan hukum Lambert-Beer, bila cahaya monokromatik (I0),melalui suatu media (larutan), maka sebagian cahaya tersebut diserap (Ia), sebagian dipantulkan (Ir), dan sebagian lagi dipancarkan (It). Transmitans adalah perbandingan intensitas cahaya yang di transmisikan ketika melewati sampel (It) dengan intensitas cahaya mula-mula sebelum melewati sampel (Io). Persyaratan hukum LambertBeer antara lain : Radiasi yang digunakan harus monokromatik, rnergi radiasi yang di absorpsi oleh sampel tidak menimbulkan reaksi kimia, sampel (larutan) yang mengabsorpsi harus homogeny, tidak terjadi flouresensi atau phosphoresensi, dan indeks refraksi tidak berpengaruh terhadap konsentrasi, jadi larutan harus pekat (tidak encer).