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INTRODUCCIN
Materiales:
-
Metodologa:
1
Si el medio contiene un agente solidificante (agaragar) hay que calentar el preparado hasta la
ebullicin del mismo agitando de vez en cuando,
para asegurar una completa disolucin del agar
(medios slidos y semislidos); para medios lquidos
no es necesario calentar, nicamente se agita la
mezcla hasta la completa disolucin de la misma.
Esterilizar la disolucin.- Una vez disuelto el medio se debe esterilizar para evitar
el crecimiento de contaminantes. Dependiendo de la forma en que vaya a
utilizarse el medio, el procedimiento ser diferente:
a
RESULTADOS:
Caldo Nutritivo
Extracto de Carne 0.3%
Peptona 0.5%
El caldo nutritivo es un medio lquido que contiene 0.5% de peptona que es un digerido
enzimtico de carne, 0.3% de extracto de carne que es un concentrado de los
componentes hidrosolubles de la carne Fue el resultado de los experimentos de Koch. Es
uno de los medios de cultivo ms utilizados en el trabajo de bacteriologa desde que Koch
lo utilizara en uno de sus experimentos. Y aunque este es un medio complejo y comn, lo
que significa que posee todos los nutrientes necesarios para el crecimiento indiscriminado
de todo tipo de microorganismos, textos sealan que esto no es del todo cierto, ya que
con el avance del conocimiento de la Microbiologa se conoce que las bacterias varan
DISCUSIONES:
Segn Tortora (2002), para favorecer el crecimiento microbiano un medio debe
proporcionar una fuente de energa as como fuentes de carbono, nitrgeno, azufre,
fsforo y cualquier otro factor de crecimiento que el organismo no pueda sintetizar.
Un medio qumicamente definido es uno del que se conoce la composicin qumica
exacta.
Los medios qumicamente definidos suelen reservarse para el trabajo experimental
del laboratorio o para el crecimiento de bacterias auttrofas. Casi todas las bacterias
hetertrofas y los hongos, se cultivan de modo sistemtico en medios complejos,
compuestos por nutrientes como extractos de levaduras, carne o plantas, digeridos
de protenas de estas y otras fuentes. Los extractos de levadura tienen contenidos
particularmente elevados de vitaminas del complejo B. Si un medio complejo se
halla en una forma lquida se denomina caldo nutritivo, cuando se agrega agar se
convierte en agar nutritivo.
Segn Stryer (2008), algunas enzimas tienen un pH ptimo y fuera de un rango de
de pH determinado, estas decrecen su velocidad de reaccin hasta inactivarse. Es
por eso que en algunos medios de cultivo se necesita ajustar el pH para evitar la
inactivacin de algunas enzimas de las que dependen algunos microorganismos
para subsistir. Ejemplo: amilasa a ph7.
Segn Madigan (2003), existen algunos factores que pueden inhibir agentes
microbianos por ejemplo la temperatura, el pH, la salinidad, etc. Es por esto que
algunos medios de cultivo son esterilizados antes y luego se les somete a
condiciones extremas donde solo pueden proliferar ciertos microorganismos.
CONCLUSIONES:
CUESTIONARIO:
1. Cules son las ventajas de los medios complejos para el cultivo de
microorganismos?
Segn Hernandez, A (2003), los medios complejos se preparan a partir de
ingredientes de origen natural cuya composicin qumica no est del todo definida.
Generalmente, los componentes de los medios complejos son subproductos de
alguna industria, por lo que son mucho ms baratos que los medios definidos y se
utilizan en la mayora de los procesos industriales. En el Anexo 1, se desglosa la
composicin de un medio complejo, utilizado para la produccin de penicilina.
La concentracin final de algunos microorganismos depende del tipo de medio de
cultivo empleado. Se seala el caso de la levadura Saccharomyces cerevisiae: en
un medio definido que contiene glucosa, se obtiene un rendimiento de 10 a 20 g/l
de biomasa, mientras que en un medio complejo con melazas de caa o
remolacha, el rendimiento es de 60 a 100 g/l de biomasa; el aumento en el
rendimiento as como el bajo precio de las melazas son factores muy atractivos
para utilizarlo.
2. Por qu no es necesario ajustar el ph en el caldo nutritivo y si lo es en agar
almidn?
la mayora de los microorganismos (con algunas excepciones) se desarrollan en
medios neutros (pH 7) o ligeramente alcalinos, mientras que algunas levaduras lo
hacen en medios cidos, es por eso que es necesario ajustar el pH de los medios
segn los requerimientos de los microorganismos a estudiar.para ello se utiliza
NaOH (hidrxido de sodio) para aumentar el pH y HCl (cido clorhdrico) para bajar
el pH.En el agar almidon, la molcula del almidn es muy compleja y para su
asimilacin por las bacterias, estas deben descomponerla (hidrolizarla) en
sustancias ms simples y facilmnte asimilables. un gran nmero de bacterias son
capaces de elaborar una enzima amilasa que hidroliza el almidn con formacin de
maltosa. la maltosa puede ingresar a la clula para ser utilizada. la enzima amilasa
es tambin una enzima extracelular, por lo tanto la demostracin de la hidrlisis del
almidn puede hacerse tanto en medio lquido como en medio slido.
En el medio slido( sobre las placas) al agregar la solucin de lugol ,se formar un
color azul si no hubo hidrlisis; la aparicin de una zona clara alrededor de las
colonias significa la hidrlisis del almidn. Cuando la bacteria no hidroliza el
almidn todo el medio permanece azul. para evidenciar la formacin cido ser
necesario agregar un indicador apropiado al medio de cultivo. la hidrlisis del
almidn puede ser evidenciada en ausencia de bacterias, ya que la amilasa es una
enzima extracelular. para el efecto un filtro libre de grmenes se agrega una
solucin del almidn al 0.2%, se incuba por 24 horas a 37c. adicionar la solucin de
lugol y comprobar los resultados anteriores.
la
perdida
de
viabilidad
de
los
Formaldehido:
Se utilizan las pastillas de paraformaldehido, las cuales
pueden disponerse en el fondo de una caja envueltas en gasa o
algodn, que despus pueden ser expuestos al calor para una rpida
esterilizacin (accin del gas formaldehido). Tambin pueden ser usadas
en Estufas de Formol, que son cajas de doble fondo, en donde se
colocan las pastillas y se calienta hasta los 60 C y pueden esterilizar
materiales de ltex, goma, plsticos, etc. Las pastillas de formalina a
temperatura ambiente esterilizan en 36 hs.
Esterilizacin por gas-plasma de Perxido de Hidrgeno
Es proceso de esterilizacin a baja temperatura la cual consta
en la transmisin de perxido de hidrgeno en fase plasma (estado entre
lquido y gas), que ejerce la accin biocida.
Posee como ventajas: No deja ningn residuo txico. , Se
convierte en agua y oxgeno al final del proceso. , El material no precisa
aireacin. Y El ciclo de esterilizacin dura entre 54 y 75 minutos.
BIBLIOGRAFA: