Universidad de Santiago de Chile.

Facultad de Qumica y Biologa.

Tcnico universitario en anlisis qumico fsico.

Informe de laboratorio N1

Microscopia

Laboratorio de microbiologa.
Eliseo Antigual
Mara Jos Muoz
Miguel Castro

Introduccin.
Todos los organismos estn compuestos por clulas, que en su mayora son
invisibles al ojo humano, para poder estudiarla en detalle es en necesario
utilizar el microscopio. Existen 2 tipos distintos, electrnicos y pticos. El
microscopio ptico, el cual utilizaremos, donde un haz de luz emitido por
una fuente luminosa para ser condensado posteriormente, y pasar a travs
de la muestra, la que puede ser observada con distintos objetivos, que
amplificaran su tamao en distintas proporciones, y podr ser observado
finalmente por medio del lente ocular. La amplificacin de la imagen hace
posible observar detalles que de otra forma seria imposible. En este
prctico el uso del microscopio va enfocado a observar distintos tipos
celulares (vegetal, animal y bacterias). (1)
La mayora de los organismo carecen de una coloracin natural, se deben
teir previamente para lograr resaltarlos de manera artificial. La utilizacin
de un colorante simple permite la conseguir este contraste. (2)
Se observarn clulas provenientes tejido vegetal, animal, y muestras
donde podremos observar bacterias, si bien no ser posible observar
detalles; si podremos diferenciar de manera sencilla un tipo celular de otro.

Objetivos:
General
- Conocer y aprender a utilizar el microscopio electrnico compuesto.
Especficos
- Aprender la preparacin de muestras para ser observadas por el
microscopio.
- Conocer las diferencias de manera amplia, entre una clula
procarionte y eucarionte.

Metodologa
1.- Realizar una preparacin de catafilo de cebolla: Se realiz un
corte, con la ayuda de un bistur, en la porcin cncava de una de las hojas
de la cebolla, se separ una pequea porcin de epidermis. Con una pinza
se deposit el tejido sobre un porta objetos, procurando que no quedaran
dobleces. Luego con una piseta se agreg una gota de agua destilada,
seguido a esto se cubri la muestra con un cubre objeto. Se llev la
muestra al microscopio y se coloc correctamente aplicando el uso del
microscopio. Finalmente se observ el tejido vegetal (epidermis) al
microscopio.
Se realiz un preparado de la muestra de igual forma que en el anterior,
solo que al momento de dejar la muestra en el porta objeto, esta se cubri
con una gota de azul de metileno, el cual se dej actuar por al menos 2
minutos, posteriormente se lav la muestra con agua destilada, con el fin de
eliminar el exceso de azul de metileno. Luego se procedi a tapar la
muestra con el cubre objeto. Para seguir con observacin al microscopio.
2.- Preparacin de un palito de fosforo: Con un bistur, se realiz un
raspado por las paredes del fosforo. Este raspado se dej caer sobre el
portaobjeto, luego de que se obtuvo una cantidad considerable, se dej caer
una gota de agua destilada sobre la muestra, para posteriormente cubrir la
muestra con el cubre objeto.
3.- Preparacin de lmina de corcho: Se realiz la preparacin con la
ayuda de un bistur, con el cual se cort una lmina muy fina de corcho, se
deposit sobre el porta objeto, se aadi unas gotas de agua destilada y se
cubri con el cubre objetos.
4.- Preparacin de clulas descamativas de la cavidad bucal: Con
una trula estril, se rasp con precaucin por la cara interna de la mejilla
de un alumno, se deposit el contenido obtenido sobre un porta objeto, se
tom la precaucin de dejarlo con cuidado. Para fijar la muestra, se procedi
a flamear el reverso del porta objeto con un mechero bunsen, procurando
no acercarla demasiado para no perjudicar la muestra. Hasta que se
observ estuviera seca. Una vez que qued fijada la muestra. Se procedi a
depositar de 2 a 3 gotas de azul de metileno, dejndolo actuar por 3
minutos. Se lav suavemente con agua destilada. Se dej caer sobre la
muestra un cubre objeto limpio. Se observ y se dibuj la preparacin.

5.- Preparacin de agua estancada: de una muestra que fue

proporcionada por el ayudante del laboratorio se extrajo una gota con la
ayuda de una pipeta pasteur, la que fue depositada en el porta objeto, se
dej caer el cubre objeto. Se observ y se dibuj la preparacin.

Resultados
1.- Realizar una preparacin de catafilo de cebolla:
Observaciones: Las clulas de la epidermis de cebolla son de forma
alargada y prismtica, en su mayora. La membrana celular celulsica se
destaca muy clara, teida por el colorante. Los ncleos son granates y
visibles, en el interior de los mismos se puede llegar a percibir
granulaciones. El citoplasma tiene aspecto bastante claro, en l se
distinguen algunas vacuolas grandes, dbilmente coloreadas. En algunas
ocasiones se observa que la preparacin tiene a manera de mosaico otros
estratos de clulas que proceden de las capas ms internas que fcilmente
han podido ser arrancadas al desprenderse la epidermis.
Observamos las clulas vegetales y su forma hexadrica (en celdas) y
alargadas. En 4x logramos diferenciar la membrana y el citoplasma; en 10x
vimos en las celdas que tenan ms proporcin de azul de metileno uno
diminutos puntos (ncleo).

2.- Preparacin de un palito de fosforo:

3.- Preparacin de lmina de corcho
4.- Preparacin de clulas descamativas de la cavidad bucal:
5.- Preparacin de agua estancada

Bibliografia

(1) Brooks, G.F., Butel, J.S. , Morse, S.A. 1999. Microbiologa Mdica de
Jawetz, Meinick y Adelberg. Editorial el Manual Moderno. 16. Edicin.
(2) (2) Gamazo, C., Lopez-Goi, I. & Diaz, R. (2005). Manual prctico de
Microbiologa (3ra Ed). Captulo 3 ( pg. 15-24). Espaa: Masson S.A.