MTODOS ESPECTROMTRICOS

Segn la naturaleza de la excitacin medida

El tipo de espectrometra depende de la cantidad fsica medida. Normalmente, la cantidad
que se mide es una intensidad de energa absorbida o producida. Se pueden distinguir estos
tipos de espectrometra segn la naturaleza de la excitacin:
* Electromagntica. Interacciones de la materia con radiacin electromagntica como la
luz.
* De electrones. Interacciones con haces de electrones. La espectroscopia Auger implica
inducir el efecto Auger con un haz de electrones. En este caso la medida implica la energa
cintica del electrn como variable.
* De masa. Interaccin de especies cargadas con campos magnticos y/o elctricos, dando
lugar a un espectro de masas. El trmino "espectroscopia de masas" est anticuado, ya que
la tcnica es principalmente una forma de medida, aunque produzca realmente un espectro
para la observacin. Este espectro tiene la masa (m) como variable, pero la medida es
esencialmente de la energa cintica de la partcula.
* Acstica. Frecuencia de sonido.
* Dielctrica. Frecuencia de un campo elctrico externo.
* Mecnica. Frecuencia de un estrs mecnico externo, por ejemplo una torsin aplicada a
un trozo de material.
Segn el proceso de medida
La mayora de los mtodos espectroscpicos se diferencian en atmicos o moleculares
segn si se aplican a tomos o molculas. Junto con esta diferencia, se pueden distinguir los
siguientes

tipos

de

espectrometra

segn

la

naturaleza

de

su

interaccin:

* De absorcin. Usa el rango de los espectros electromagnticos en los cuales una

sustancia absorbe. Incluye la espectrometra de absorcin atmica y varias tcnicas
moleculares, como la espectrometra infrarroja y la resonancia magntica nuclear (RMN).

* De emisin. Usa el rango de espectros electromagnticos en los cuales una sustancia

irradia (emite). La sustancia primero debe absorber la energa. Esta energa puede ser de
una variedad de fuentes, que determina el nombre de la emisin subsiguiente, como la
luminescencia. Las tcnicas de luminescencia moleculares incluyen la espectrofluorimetra.
* De dispersin. Mide la cantidad de luz que una sustancia dispersa en ciertas longitudes
de onda, ngulos de incidencia y ngulos de polarizacin. El proceso de dispersin es
mucho ms rpido que el proceso de absorcin/emisin. Una de las aplicaciones ms tiles
es la espectroscopia Raman.
ESPECTROMETRA ULTRAVIOLETA-VISIBLE
La espectrometra ultravioleta-visible o espectrofotometra UV-Vis implica la
espectroscopia de fotones en la regin de radiacin ultravioleta-visible. Utiliza la luz en los
rangos visible y adyacentes (el ultravioleta (UV) cercano y el infrarrojo (IR) cercano.
En esta regin del espectro electromagntico, las molculas se someten a transiciones
electrnicas.
Esta tcnica es complementaria de la espectrometra de fluorescencia, que trata con
transiciones desde el estado excitado al estado basal, mientras que la espectrometra de
absorcin mide transiciones desde el estado basal al estado excitado.
APLICACIONES
La espectrometra UV/Vis se utiliza habitualmente en la determinacin cuantitativa de
soluciones de iones metlicos de transicin y compuestos orgnicos muy conjugados.
Soluciones de iones metlicos de transicin
Las soluciones de iones metlicos de transicin pueden ser coloreadas (es decir, absorben la
luz visible) debido a que los electrones en los tomos de metal se pueden excitar desde un
estado electrnico a otro. El color de las soluciones de iones metlicos se ve muy afectado
por la presencia de otras especies, como algunos aniones o ligandos. Por ejemplo, el color
de una solucin diluida de sulfato de cobre es muy azul; agregando amonaco se intensifica
el color y cambia la longitud de onda de absorcin mxima.
Compuestos orgnicos

Los compuestos orgnicos, especialmente aquellos con un alto grado de conjugacin,

tambin absorben luz en las regiones del espectro electromagntico visible o ultravioleta.
Los disolventes para estas determinaciones son a menudo el agua para los compuestos
solubles en agua, o el etanol para compuestos orgnicos solubles. Los disolventes orgnicos
pueden tener una significativa absorcin de UV, por lo que no todos los disolventes son
adecuados para su uso en espectrometra UV. El etanol absorbe muy dbilmente en la
mayora de longitudes de onda. La polaridad y el pH del disolvente pueden afectar la
absorcin del espectro de un compuesto orgnico. La tirosina, por ejemplo, aumenta su
mximo de absorcin y su coeficiente de extincin molar cuando aumenta el pH de 6 a 13,
o cuando disminuye la polaridad de los disolventes.
Aunque los complejos de transferencia de carga tambin dan lugar a colores, stos son a
menudo

demasiado

intensos

para

ser

usados

en

mediciones

cuantitativas.

La ley de Beer-Lambert establece que la absorbancia de una solucin es directamente

proporcional a la concentracin de la solucin. Por tanto, la espectrometra UV/VIS puede
usarse para determinar la concentracin de una solucin. Es necesario saber con qu
rapidez cambia la absorbancia con la concentracin. Esto puede ser obtenido a partir de
referencias (las tablas de coeficientes de extincin molar) o, con ms exactitud,
determinndolo a partir de una curva de calibracin.
El espectrofotmetro UV/Vis puede utilizarse como detector para la Cromatografa Lquida
de Alta Resolucin (CLAR). La presencia de un analito da una respuesta que puede ser
proporcional a la concentracin. Para resultados precisos, la respuesta del instrumento al
analito debe compararse con la respuesta a un estndar, lo que es muy similar al uso de
curvas de calibracin. La respuesta (por ejemplo, el pico de altura) para un concentracin
particular se conoce como factor de respuesta.
LEY DE BEER-LAMBERT

La espectrometra UV-Vis se utiliza con mayor frecuencia en forma cuantitativa para

determinar las concentraciones de especies absorbentes en solucin, usando la Ley de BeerLambert:

donde A es la absorbancia medida, I0 es la intensidad de la luz incidente a una determinada

longitud de onda, I es la intensidad de transmisin, L la longitud de ruta a travs de la
muestra, y c la concentracin de las especies absorbentes. Para cada especie y longitud de
onda, es una constante conocida como absortividad molar o coeficiente de extincin. Esta
constante es una propiedad fundamental molecular en un solvente dado, a una temperatura
y presin particular, y tiene como unidades 1/M * cm o, a menudo, U/M * cm.
La absorbancia y extincin a veces son definidas en trminos de logaritmo natural en
lugar de logaritmo de base 10.
La ley de Beer-Lambert es til para la caracterizacin de muchos compuestos, pero no sirve
como relacin universal para la concentracin y absorcin de todas las sustancias. En
molculas complejas de gran tamao, como los tintes orgnicos (Xylenol Naranja o Rojo
Neutro, por ejemplo), a veces se encuentra una relacin polinmica de segundo orden entre
la absorcin y la concentracin.
ESPECTROFOTMETRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE
El

instrumento

utilizado

en

la

espectrometra

ultravioleta-visible

se

llama

espectrofotmetro UV-Vis. Mide la intensidad de luz que pasa a travs de una muestra (I), y
la compara con la intensidad de luz antes de pasar a travs de la muestra (Io). La relacin I /
Io se llama transmitancia, y se expresa habitualmente como un porcentaje (%T). La
absorbancia (A) se basa en la transmisin:
A = - log (%T)

Las partes bsicas de un espectrofotmetro son una fuente de luz (a menudo una bombilla
incandescente para las longitudes de onda visibles, o una lmpara de arco de deuterio en el
ultravioleta), un soporte para la muestra, una rejilla de difraccin o monocromador para
separar las diferentes longitudes de onda de la luz, y un detector. El detector suele ser un

fotodiodo o un CCD. Los fotodiodos se usan con monochomadores, que filtran la luz de
modo que una sola longitud de onda alcanza el detector. Las rejillas de difraccin se
utilizan con CCDs, que recogen la luz de diferentes longitudes de onda en pxeles.
Un espectrofotmetro puede ser nico o de doble haz. En un instrumento de un solo haz
(como el Spectronic 20), toda la luz pasa a travs de la clula muestra. La Io debe medirse
retirando la muestra. Este fue el primer diseo, y todava est en uso en la enseanza y
laboratorios industriales.
En un instrumento de doble haz, la luz se divide en dos haces antes de llegar a la muestra.
Un haz se utiliza como referencia, y el otro haz de luz pasa a travs de la muestra. Algunos
instrumentos de doble haz tienen dos detectores (fotodiodos), y el haz de referencia y el de
la muestra se miden al mismo tiempo. En otros instrumentos, los dos haces pasan a travs
de un bloqueador que impide el paso de un haz. El detector alterna entre la medida del haz
de muestra y la del haz de referencia.
Las muestras para espectrofotometra UV-Vis suelen ser lquidas, aunque la absorbancia de
los gases e incluso de los slidos tambin puede medirse. Las muestras suelen ser colocadas
en una clula transparente, conocida como cubeta. Las cubetas suelen ser rectangulares, con
una anchura interior de 1 cm. Esta anchura se convierte en la longitud de ruta, L, en la Ley
de Beer-Lambert. Tambin se pueden usar tubos de ensayo como cubetas en algunos
instrumentos. Las mejores cubetas estn hechas con cuarzo de alta calidad, aunque son
comunes las de vidrio o plstico. El cristal y la mayora de los plsticos absorben en el UV,
lo que limita su utilidad para longitudes de onda visibles.
ESPECTRO ULTRAVIOLETA-VISIBLE
Un espectro ultravioleta-visible es esencialmente un grfico de absorbancia de luz frente a
una longitud de onda en el rango del ultravioleta o la luz visible. Este espectro puede ser
producido directamente con los espectrofotmetros ms sofisticados, o bien pueden
registrarse los datos de una sola longitud de onda con los instrumentos ms simples. La
longitud de onda se representa con el smbolo . Del mismo modo, para una determinada
sustancia, puede hacerse un grfico estndar del coeficiente de extincin () frente a la
longitud de onda (). Este grfico estndar sera efectivamente "la concentracin corregida"

y, por tanto, independiente de la concentracin. Para una sustancia determinada, la longitud

de onda en la cual se produce el mximo de absorbancia en el espectro se llama max, y se
pronuncia "lambda-max".
Las longitudes de onda de los picos de absorcin pueden correlacionarse con los tipos de
enlace en una determinada molcula, y son valiosos para determinar los grupos funcionales
dentro de la molcula. La absorcin UV-Vis no es, sin embargo, una prueba especfica para
ningn compuesto determinado. La naturaleza del disolvente, el pH de la solucin, la
temperatura, la concentracin de electrolitos, y la presencia de sustancias interferentes
pueden influir en los espectros de absorcin de los compuestos, as como las variaciones en
la anchura de la hendidura (ancho de banda efectivo) en el espectrofotmetro.
ESPECTROMETRA DE ABSORCIN ATMICA
En qumica analtica, la espectrometra de absorcin atmica es una tcnica para
determinar la concentracin de un elemento metlico determinado en una muestra. Puede
utilizarse para analizar la concentracin de ms de 62 metales diferentes en una solucin.
Aunque la espectrometra de absorcin atmica data del siglo XIX, la forma moderna fue
desarrollada en gran medida durante la dcada de los 50 por un equipo de qumicos de
Australia, dirigidos por Alan Walsh.
PRINCIPIOS EN LOS QUE SE BASA
La tcnica hace uso de la espectrometra de absorcin para evaluar la concentracin de un
analito en una muestra. Se basa en gran medida en la ley de Beer-Lambert.
En resumen, los electrones de los tomos en el atomizador pueden ser promovidos a
orbitales ms altos por un instante mediante la absorcin de una cantidad de energa (es
decir, luz de una determinada longitud de onda). Esta cantidad de energa (o longitud de
onda) se refiere especficamente a una transicin de electrones en un elemento particular, y
en general, cada longitud de onda corresponde a un solo elemento.
Como la cantidad de energa que se pone en la llama es conocida, y la cantidad restante en
el otro lado (el detector) se puede medir, es posible, a partir de la ley de Beer-Lambert,

calcular cuntas de estas transiciones tienen lugar, y as obtener una seal que es
proporcional a la concentracin del elemento que se mide.
INSTRUMENTOS
Para analizar los constituyentes atmicos de una muestra es necesario atomizarla. La
muestra debe ser iluminada por la luz. Finalmente, la luz es transmitida y medida por un
detector. Con el fin de reducir el efecto de emisin del atomizador (por ejemplo, la
radiacin de cuerpo negro) o del ambiente, normalmente se usa un espectrmetro entre el
atomizador

el

detector.

Tipos de atomizadores
Para atomizar la muestra normalmente se usa una llama, pero tambin pueden usarse otros
atomizadores como el horno de grafito o los plasmas, principalmente los plasmas de
acoplamiento inductivo.
Cuando se usa una llama, se dispone de tal modo que pase a lo largo lateralmente (10 cm) y
no en profundidad. La altura de la llama sobre la cabeza del quemador se puede controlar
mediante un ajuste del flujo de mezcla de combustible. Un haz de luz pasa a travs de esta
llama en el lado ms largo del eje (el eje lateral) e impacta en un detector.
Anlisis de los lquidos
Una muestra de lquido normalmente se convierte en gas atmico en tres pasos:
1. Desolvacin. El lquido disolvente se evapora, y la muestra permanece seca.
2. Vaporizacin. La muestra slida se evapora a gas.
3. Atomizacin. Los compuestos que componen la muestra se dividen en tomos libres.
Fuentes de luz
La fuente de luz elegida tiene una anchura espectral ms estrecha que la de las transiciones
atmicas.

* Lmparas de ctodo hueco. En su modo de funcionamiento convencional, la luz es

producida por una lmpara de ctodo hueco. En el interior de la lmpara hay un ctodo
cilndrico de metal que contiene el metal de excitacin, y un nodo. Cuando un alto voltaje
se aplica a travs del nodo y el ctodo, los tomos de metal en el ctodo se excitan y
producen luz con una determinada longitud de onda. El tipo de tubo catdico hueco
depende del metal que se analiza. Para analizar la concentracin de cobre en un mineral, se
utiliza un tubo catdico de cobre, y as para cualquier otro metal que se analice.
* Lsers de diodo. La espectrometra de absorcin atmica tambin puede ser llevada a
cabo mediante lser, principalmente un lser de diodo, ya que sus propiedades son
apropiadas para la espectrometra de absorcin lser. La tcnica se denomina
espectrometra de absorcin atmica por lser de diodo (DLAAS o DLAS), o bien,
espectrometra de absorcin por modulacin de longitud de onda.
MTODOS DE CORRECCIN DE FONDO
El estrecho ancho de banda de las lmparas catdicas huecas hace que sea raro el
solapamiento espectral. Es decir, es poco probable que una lnea de absorcin de un
elemento se solape con otra. La emisin molecular es mucho ms amplia, por lo que es ms
probable que algunas bandas de absorcin molecular se superpongan con una lnea atmica.
Esto puede resultar en una absorcin artificialmente alta y un clculo exagerado de la
concentracin en la solucin. Se utilizan tres mtodos para corregir esto:
* Correccin de Zeeman. Se usa un campo magntico para dividir la lnea atmica en dos
bandas laterales. Estas bandas laterales estn lo suficientemente cerca de la longitud de
onda original como para solaparse con las bandas moleculares, pero estn lo
suficientemente lejos como para no coincidir con las bandas atmicas. Se puede comparar
la absorcin en presencia y ausencia de un campo magntico, siendo la diferencia la
absorcin

atmica

de

inters.

* Correccin de Smith-Hieftje (inventada por Stanley B. Smith y Gary M. Hieftje) - La

lmpara catdica hueca genera pulsos de alta corriente, provocando una mayor poblacin
de tomos y auto-absorcin durante los pulsos. Esta auto-absorcin provoca una ampliacin
de la lnea y una reduccin de la intensidad de la lnea a la longitud de onda original.

* Lmpara de correccin de deuterio. En este caso, se usa una fuente de amplia emisin
(una lmpara de deuterio), para medir la emisin de fondo. El uso de una lmpara separada
hace de este mtodo el menos exacto, pero su relativa simplicidad (y el hecho de que es el
ms antiguo de los tres) lo convierte en el ms utilizado.
ESPECTROMETRA DE ABSORCIN
La espectrometra de absorcin se refiere a una variedad de tcnicas que emplean la
interaccin de la radiacin electromagntica con la materia. En la espectrometra de
absorcin, se compara la intensidad de un haz de luz medida antes y despus de la
interaccin con una muestra. Las palabras transmisin y remisin se refieren a la direccin
de viaje de los haces de luz medidos antes y despus de la absorcin. Las descripciones
experimentales por lo general asumen que hay una nica direccin de incidencia de la luz
sobre la muestra, y que un plano perpendicular a esta direccin pasa por la muestra. En la
transmisin, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector en el lado opuesto de la
muestra. En la remisin, la luz es dispersada desde la muestra hacia un detector en el
mismo lado de la muestra. La radiacin remitida puede estar formada por dos clases de
radiacin: reflexin especular (cuando el ngulo de reflexin es igual al ngulo del
frecuencia) y reflexin difusa (en todos los dems ngulos).
Otro descriptor asociado con la espectrometra de absorcin es la variedad de longitudes de
onda de radiacin que se usa en el haz de luz incidente. Por ejemplo, se habla de
espectrometra infrarroja o de microondas, que son a su vez ejemplos de espectrometra de
absorcin. Por otra parte, tambin se encuentran referencias a otros rangos de longitud de
onda, como la espectrometra de rayos X, que por lo general denotan una espectrometra de
emisin. Este artculo trata principalmente de la espectrometra ultravioleta-visible.
La espectrometra UV-visible se refiere a tcnicas donde se mide cunta luz de una longitud
de onda particular (color) es absorbida por una muestra. Ya que el color a menudo puede
correlacionarse con la presencia y/o la estructura de una sustancia qumica particular, y ya
que la absorbancia es una medida fcil y barata de hacer, la espectrometra de absorbancia
se usa ampliamente en clculos cualitativos, cuantitativos y estructurales. Por ejemplo, el
ADN absorbe luz en el rango ultravioleta (por eso la luz del sol es peligrosa), y por tanto la

cantidad de ADN en una muestra puede ser determinarse midiendo la absorbancia de la luz
ultravioleta.
La relacin entre el color visible y el color de absorbancia es complicada; una muestra que
parece roja no absorbe en el rojo, sino que absorbe en otras longitudes de onda (colores) de
modo que la luz que pasa por la muestra se enriquece en rojo.
La palabra "color" se usa para indicar que la espectrometra de absorbancia no slo trata
con la luz en rango visible (fotones con una longitud de onda de aproximadamente 400 a
700 nanmetros), sino tambin con longitudes de onda que estn fuera del rango de la
visin humana (infrarrojo, ultravioleta, rayos X). Sin embargo, los principios son bastante
similares tanto para la luz visible como para la no visible.
Tcnicamente, la espectrometra de absorcin se basa en la absorcin de fotones por una o
ms sustancias presentes en una muestra (que puede ser un slido, lquido, o gas), y la
promocin subsiguiente del electrn (o electrones) desde un nivel de energa a otro en esa
sustancia. La muestra puede ser una sustancia pura, homognea o una mezcla compleja. La
longitud de onda en la cual el fotn incidente se absorbe es determinada por la diferencia en
los niveles de energa disponibles de las diferentes sustancias presentes en la muestra. Esta
es la selectividad de la espectrometra de absorbancia, la capacidad de generar fuentes de
fotones (luz) que son absorbidas slo por algunos componentes en una muestra.
Tpicamente, los rayos X se usan para revelar la composicin qumica, mientras que las
longitudes de onda cercanas al ultravioleta y el infrarrojo se usa para distinguir las
configuraciones de diversos ismeros detalladamente. En la espectroscopia de absorcin,
los fotones absorbidos no son emitidos de nuevo (como en la fluorescencia) sino que la
energa que se transfiere al compuesto qumico en la absorbancia de un fotn se pierde por
medios no radiantes, como la transferencia de energa por calor a otras molculas.
Aunque la intensidad relativa de las lneas de absorcin no vara con la concentracin, a
cualquier longitud de onda dada la absorbancia medida ( log (I / I0)) es proporcional a la
concentracin molar de las especies que absorben y el grosor de la muestra por la que la luz
pasa. Esto se conoce como ley de Beer-Lambert. El grfico de la cantidad de radiacin
absorbida respecto a la longitud de onda para un compuesto particular se conoce como
espectro de absorcin. El espectro de absorcin normalizado es caracterstico para cada

compuesto particular, no cambia con la concentracin y es como la "huella digital" qumica

del compuesto. En las longitudes de onda correspondientes a los niveles de energa
resonantes de la muestra, se absorben algunos de los fotones incidentes, lo que provoca una
cada en la intensidad de transmisin medida y una pendiente en el espectro. El espectro de
absorcin puede medirse usando un espectrmetro. Conociendo la forma del espectro, la
longitud de ruta ptica y la cantidad de radiacin absorbida, se puede determinar la
estructura y la concentracin del compuesto.
Los espectros de absorcin de luz visible pueden tomarse en cualquier material que sea
visiblemente claro. El poliestireno, el cuarzo, y las clulas de borosilicato (Pyrex), son los
materiales ms usados. La luz ultravioleta es absorbida por la mayor parte de cristales y
plsticos, por lo que se usan clulas de cuarzo. El Si-O presente en el cristal y el cuarzo, y
el C-C en el plstico absorben la luz infrarroja. Los espectros de absorcin infrarrojos se
realizan generalmente con una delgada pelcula de la muestra sostenida entre platos de
cloruro de sodio. Otros mtodos implican suspender el compuesto en una sustancia que no
absorba en la regin de estudio. Las emulsiones de aceite mineral (Nujol) y los cristales de
bromuro de potasio suelen ser los ms comunes. El NaCl y KBr, al ser inicos, no absorben
el infrarrojo de forma significativa, y el Nujol tiene un espectro infrarrojo relativamente
sencillo.
Espectrometra como instrumento analtico
A menudo es de inters conocer no slo la composicin qumica de una muestra dada, sino
tambin las concentraciones relativas de varios compuestos de una mezcla. Para hacer esto
debe construirse una escala, o curva de calibracin, usando varias concentraciones
conocidas para cada compuesto de inters. El grfico que resulta de la concentracin
respecto a la absorbancia se hace a mano o usando un software de ajuste de curvas
apropiado, que usa una frmula matemtica para determinar la concentracin en la muestra.
La repeticin de este proceso para cada compuesto en una muestra da un modelo de varios
espectros de absorcin que en conjunto reproducen la absorcin observada. De esta manera
es posible, por ejemplo, medir la composicin qumica de los cometas sin tener muestras de
ellos

en

la

Tierra.

Un ejemplo simple: un cianuro estndar a 200 partes por milln da una absorbancia con un
valor arbitrario de 1540. Una muestra desconocida da un valor de 834. Ya que esta es una
relacin lineal y pasa por el origen, el valor desconocido se calcula fcilmente como 108
partes por milln. Con este mtodo de proporcin no es necesario conocer los valores de los
coeficientes gobernantes, o cromforos, o la longitud de clula experimental.
En la prctica, el uso de una curva de calibracin, ms que un solo punto de comparacin,
reduce la incertidumbre en la medida final por exclusin de la interferencia aleatoria (ruido)
en la preparacin de los estndares.
ESPECTRO ELECTROMAGNTICO

El espectro electromagntico (o simplemente espectro) es el rango de todas las

radiaciones electromagnricas posibles. El espectro de un objeto es la distribucin
caracterstica de la radiacin electromagntica de ese objeto.
El espectro electromagntico se extiende desde las bajas frecuencias usadas para la radio
moderna (extremo de la onda larga) hasta los rayos gamma (extremo de la onda corta), que
cubren longitudes de onda de entre miles de kilmetros y la fraccin del tamao de un
tomo. Se piensa que el lmite de la longitud de onda corta est en las cercanas de la
longitud Planck, mientras que el lmite de la longitud de onda larga es el tamao del
universo mismo, aunque en principio el espectro sea infinito y continuo.
Rango del espectro
El espectro cubre la energa de ondas electromagnticas que tienen longitudes de onda
diferentes. Las frecuencias de 30 Hz y ms bajas pueden ser producidas por ciertas
nebulosas estelares y son importantes para su estudio. Se han descubierto frecuencias tan
altas como 2.9 * 1027 Hz a partir de fuentes astrofsicas.
La energa electromagntica en una longitud de onda particular (en el vaco) tiene una
frecuencia asociada f y una energa fotnica E. As, el espectro electromagntico puede
expresarse en trminos de cualquiera de estas tres variables, que estn relacionadas
mediante ecuaciones.

De este modo, las ondas electromagnticas de alta frecuencia tienen una longitud de onda
corta y energa alta; las ondas de frecuencia baja tienen una longitud de onda larga y
energa baja.
Siempre que las ondas de luz (y otras ondas electromagnticas) se encuentran en un medio
(materia), su longitud de onda se reduce. Las longitudes de onda de la radiacin
electromagntica, sin importar el medio por el que viajen, son, por lo general, citadas en
trminos de longitud de onda en el vaco, aunque no siempre se declara explcitamente.
Generalmente, la radiacin electromagntica se clasifica por la longitud de onda: ondas de
radio, microondas, infrarroja y regin visible, que percibimos como luz, rayos ultravioleta,
rayos X y rayos gamma.
El comportamiento de la radiacin electromagntica depende de su longitud de onda. Las
frecuencias ms altas tienen longitudes de onda ms cortas, y las frecuencias inferiores
tienen longitudes de onda ms largas. Cuando la radiacin electromagntica interacciona
con tomos y molculas, su comportamiento tambin depende de la cantidad de energa por
cuanto que transporta. La radiacin electromagntica puede dividirse en octavas (como las
ondas sonoras).
La espectroscopia puede descubrir una regin mucho ms amplia del espectro que el rango
visible de 400 nm a 700 nm. Un espectroscopio de laboratorio comn puede descubrir
longitudes de onda desde 2 nm a 2500 nm. Con este tipo de aparatos puede obtenerse
informacin detallada sobre las propiedades fsicas de objetos, gases o incluso estrellas. La
espectrometra se usa sobre todo en astrofsica. Por ejemplo, muchos tomos de hidrgeno
emiten ondas de radio que tienen una longitud de onda de 21.12 cm.
Tipos de radiacin
Aunque el esquema de clasificacin suele ser preciso, en realidad existe algo de
trasposicin entre tipos vecinos de energa electromagntica. Por ejemplo, las ondas de
radio a 60 Hz pueden ser recibidas y estudiadas por astrnomos, o pueden ser conducidas a
lo largo de cables como energa elctrica. Tambin, algunos rayos gamma de baja energa
realmente tienen una longitud de onda ms larga que algunos rayos X de gran energa. Esto
es posible porque "rayo gamma" es el nombre que se le da a los fotones generados en la

descomposicin nuclear u otros procesos nucleares y subnucleares, mientras que los rayos
X son generados por transiciones electrnicas que implican electrones interiores muy
energticos. Por lo tanto, la diferencia entre rayo gamma y rayo X est relacionada con la
fuente de radiacin ms que con la longitud de onda de la radiacin. Generalmente, las
transiciones nucleares son mucho ms energticas que las transiciones electrnicas, as que
los rayos gamma suelen ser ms energticos que los rayos X. Sin embargo, hay transiciones
nucleares de baja energa (p.ej. la transicin nuclear de 14.4 keV del Fe-57) que producen
rayos gamma que son menos energticos que algunos de los rayos X de mayor energa.
Radiofrecuencia
Las ondas de radio suelen ser utilizadas mediante antenas del tamao apropiado (segn el
principio de resonancia), con longitudes de onda en los lmites de cientos de metros a
aproximadamente un milmetro. Se usan para la transmisin de datos, a travs de la
modulacin. La televisin, los telfonos mviles, las resonancias magnticas, o las redes
inalmbricas y de radio-aficionados, son algunos usos populares de las ondas de radio.
Las ondas de radio pueden transportar informacin variando la combinacin de amplitud,
frecuencia y fase de la onda dentro de una banda de frecuencia. El uso del espectro de radio
est regulado por muchos gobiernos mediante la asignacin de frecuencias. Cuando la
radiacin electromagntica impacta sobre un conductor, se empareja con l y viaja a lo
largo del mismo, induciendo una corriente elctrica en la superficie de ese conductor
mediante la excitacin de los electrones del material de conduccin. Este efecto (el efecto
piel) se usado en las antenas. La radiacin electromagntica tambin puede hacer que
ciertas molculas absorban energa y se calienten, una caracterstica que se utiliza en en los
microondas.
Microondas
La frecuencia super alta (SHF) y la frecuencia extremadamente alta (EHF) de las
microondas son las siguientes en la escala de frecuencia. Las microondas son ondas los
suficientemente cortas como para emplear guas de ondas metlicas tubulares de dimetro
razonable. La energa de microondas se produce con tubos klistrn y tubos magnetrn, y
con diodos de estado slido como los dispositivos Gunn e IMPATT. Las microondas son

absorbidas por la molculas que tienen un momento dipolar en lquidos. En un horno

microondas, este efecto se usa para calentar la comida. La radiacin de microondas de baja
intensidad se utiliza en Wi-Fi.
El horno microondas promedio, cuando est activo, est en un rango cercano y bastante
poderoso como para causar interferencia con campos electromagnticos mal protegidos,
como los que se encuentran en dispositivos mdicos mviles y aparatos electrnicos
baratos.
Rayos T
La radiacin de terahertzios (o Rayos T) es una regin del espectro situada entre el
infrarrojo lejano y las microondas. Hasta hace poco, este rango estaba muy poco estudiado,
ya que apenas haba fuentes para la energa microondas en el extremo alto de la banda
(ondas submilimtrica o tambin llamadas ondas terahertzios). Sin embargo, estn
apareciendo aplicaciones para mostrar imgenes y comunicaciones. Los cientficos tambin
buscan aplicar la tecnologa de rayos T en las fuerzas armadas, donde podran usarse para
dirigirlas a las tropas enemigas, ya que las ondas de alta frecuencia incapacitan los equipos
electrnicos.
Radiacin infrarroja
La parte infrarroja del espectro electromagntico cubre el rango desde aproximadamente
los 300 GHz (1 mm) hasta los 400 THz (750 nm). Puede ser dividida en tres partes:
* Infrarrojo lejano, desde 300 GHz (1 mm) hasta 30 THz (10 m). La parte inferior de este
rango tambin puede llamarse microondas. Esta radiacin es absorbida por los llamados
modos rotatorios en las molculas en fase gaseosa, mediante movimientos moleculares en
los lquidos, y mediante fotones en los slidos. El agua en la atmsfera de la Tierra absorbe
tan fuertemente esta radiacin que confiere a la atmsfera efectividad opaca. Sin embargo,
hay ciertos rangos de longitudes de onda ("ventanas") dentro del rango opacao que
permiten la transmisin parcial, y pueden ser usados en astronoma. El rango de longitud de
onda de aproximadamente 200 m hasta unos pocos mm suele llamarse "radiacin
submilimtrica" en astronoma, reservando el infrarrojo lejano para longitudes de onda por

debajo

de

los

200

m.

* Infrarrojo medio, desde 30 a 120 THz (10 a 2.5 m). Los objetos calientes (radiadores de
cuerpo negro) pueden irradiar fuertemente en este rango. Se absorbe por vibraciones
moleculares, es decir, cuando los diferentes tomos en una molcula vibran alrededor de
sus posiciones de equilibrio. Este rango es llamado, a veces, regin de huella digital, ya que
el espectro de absorcin del infrarrojo medio de cada compuesto es muy especfico.
* Infrarrojo cercano, desde 120 a 400 THz (2500 a 750 nm). Los procesos fsicos que son
relevantes para este rango son similares a los de la luz visible.
Radiacin visible (luz)
La frecuencia por encima del infrarrojo es la de la luz visible. Este es el rango en el que el
Sol y las estrellas similares a l emiten la mayor parte de su radiacin. No es probablemente
una coincidencia que el ojo humano sea sensible a las longitudes de onda que el sol emite
con ms fuerza. La luz visible (y la luz cercana al infrarrojo) son absorbidas y emitidas por
electrones en las molculas y tomos que se mueven desde un nivel de energa a otro. La
luz que vemos con nuestros ojos es realmente una parte muy pequea del espectro
electromagntico. Un arco iris muestra la parte ptica (visible) del espectro
electromagntico; el infrarrojo (si pudiera verse) estara localizado justo a continuacin del
lado rojo del arco iris, mientras que el ultravioleta estara tras el violeta.
La radiacin electromagntica con una longitud de onda entre aproximadamente 400 nm y
700 nm es detectado por el ojo humano y percibida como luz visible. A otras longitudes de
onda, sobre todo al infrarrojo cercano (ms largo de 700 nm) y al ultravioleta (ms corto
que 400 nm) tambin se les llama luz a veces, sobre todo cuando la visibilidad para los
humanos no es relevante.
Si la radiacin que tiene una frecuencia en la regin visible del espectro electromagntico
se refleja en un objeto, como por ejemplo un plato hondo de fruta, y luego impacta en
nuestros ojos, obtenemos una percepcin visual de la escena. El sistema visual de nuestro
cerebro procesa la multitud de frecuencias reflejadas en diferentes sombras y matices, y a

travs de este fenomeno psicofsico que todava no se entiende completamente, es como

percibiramos los objetos.
En la mayor parte de las longitudes de onda, sin embargo, la informacin transportada por
la radiacin electromagntica no es directamente descubierta por los sentidos humanos. Las
fuentes naturales producen radiacin electromagntica a travs del espectro, y nuestra
tecnologa tambin puede manipular un amplio rango de longitudes de onda. La fibra ptica
transmite luz que, aunque no es adecuada para la visin directa, puede transportar datos que
luego son traducidos en sonido o imagen. La codificacin usada en tales datos es similar a
lo que se usa con las ondas de radio.
Luz ultravioleta
La siguiente frecuencia en el espectro es el ultravioleta (o rayos UV), que es la radiacin
cuya longitud de onda es ms corta que el extremo violeta del espectro visible.
Al ser muy energtica, la radiacin ultravioleta puede romper enlaces qumicos, haciendo a
las

molculas

excepcionalmente

reactivas

ionizndolas,

lo

que

cambia

su

comportamiento. Las quemaduras solares, por ejemplo, estn causadas por los efectos
perjudiciales de la radiacin UV en las clulas de la piel, y pueden causar incluso cncer de
piel si la radiacin daa las molculas de ADN complejas en las clulas (la radiacin UV es
un mutgeno). El Sol emite una gran cantidad de radiacin UV, lo que podra convertir
rpidamente la Tierra en un desierto estril si no fuera porque, en su mayor parte, es
absorbida por la capa de ozono de la atmsfera antes de alcanzar la superficie.
Rayos X
Despus del ultravioleta vienen los rayos X. Los rayos X duros tienen longitudes de onda
ms cortas que los rayos X suaves. Se usan generalmente para ver a travs de algunos
objetos, as como para la fsica de alta energa y la astronoma. Las estrellas de neutrones y
los discos de acrecin alrededor de los agujeros negros emiten rayos X, lo que nos permite
estudiarlos.
Los rayos X pasan por la mayor parte de sustancias, y esto los hace tiles en medicina e
industria. Tambin son emitidos por las estrellas, y especialmente por algunos tipos de

nebulosas. Un aparato de radiografa funciona disparando un haz de electrones sobre un

"objetivo". Si los electrones se disparan con suficiente energa, se producen rayos X.
Rayos gamma
Despus de los rayos X duros vienen los rayos gamma. Son los fotones ms energticos, y
no se conoce el lmite ms bajo de su longitud de onda. Son tiles a los astrnomos en el
estudio de objetos o regiones de alta energa, y son tiles para los fsicos gracias a su
capacidad penetrante y su produccin de radioistopos. La longitud de onda de los rayos
gamma puede medirse con gran exactitud por medio de dispersin Compton.
No hay ningn lmite exactamente definido entre las bandas del espectro electromagntico.
Algunos tipos de radiacin tienen una mezcla de las propiedades de radiaciones que se
encuentran en las dos regiones del espectro. Por ejemplo, la luz roja se parece a la radiacin
infrarroja en que puede resonar algunos enlaces qumicos.
Absorcin de la luz
La ley de Beer-Lambert, es una relacin emprica que relaciona la absorcin de luz con las
propiedades del material atravesado.
Ecuaciones
Esto se puede expresar de distintas maneras:
Dnde:

A es la absorbancia (o absorbencia)

I0 es la intensidad de la luz incidente

I1 es la intensidad de la luz una vez ha atravesado el medio

l es la distancia que la luz atraviesa por el cuerpo

c es la concentracin de sustancia absorbente en el medio

es el coeficiente de absorcin o la absorbancia molar de la sustancia

es la longitud de onda del haz de luz

k es el coeficiente de extincin

La ley explica que hay una relacin exponencial entre la transmisin de luz a travs de una
sustancia y la concentracin de la sustancia, as como tambin entre la transmisin y la
longitud del cuerpo que la luz atraviesa. Si conocemos l y , la concentracin de la
sustancia puede ser deducida a partir de la cantidad de luz transmitida. Las unidades de c y
dependen del modo en que se exprese la concentracin de la sustancia absorbente. Si la
sustancia es lquida, se suele expresar como una fraccin molar. Las unidades de son la
inversa de la longitud. En el caso de los gases, c puede ser expresada como densidad, en
cuyo caso es una seccin representativa de la absorcin y tiene las unidades en longitud
al cuadrado. Si la concentracin de c est expresada en moles por volumen, es la
absorbencia molar normalmente dada en mol cm-2. El valor del coeficiente de absorcin
vara segn los materiales absorbentes y con la longitud de onda para cada material en
particular. Se suele determinar experimentalmente. La ley tiende a no ser vlida para
concentraciones muy elevadas, especialmente si el material dispersa mucho la luz. La
relacin de la ley entre concentracin y absorcin de luz est basada en el uso de
espectroscopia para identificar sustancias.
La absorcin es un proceso muy ligado al color. Son los colores que mezclados forman la
luz blanca. Su distribucin espectral aproximada es:
Tipo de radiacin

Longitudes de onda (nm)

Violeta

380-436

Azul

436-495

Verde

495-566

Amarillo

566-589

Naranja

589-627

Rojo

627-770

Cuando la luz blanca choca con un objeto una parte de los colores que la componen son
absorbidos por la superficie y el resto son reflejados. Las componentes reflejadas son las
que determinan el color que percibimos. Si la refleja toda es blanca y si las absorbe todas es
negro. Un objeto es rojo porque refleja la luz roja y absorbe las dems componentes de la

luz blanca. Si iluminamos el mismo objeto con luz azul lo veremos negro porque el cuerpo
absorbe esta componente y no refleja ninguna. Queda claro, entonces, que el color con que
percibimos un objeto depende del tipo de luz que le enviamos y de los colores que este sea
capaz de reflejar.
Interaccin de la radiacin con la materia
Las partculas cargadas como los electrones, los positrones, muones, protones, iones u
otras, interaccionan directamente con la corteza electrnica de los tomos debido a la fuerza
electromagntica.
Los rayos gamma interaccionan con los tomos de la materia con tres mecanismos
distintos.
1. Absorcin fotoelctrica: es una interaccin en la que el fotn gamma incidente
desaparece. En su lugar, se produce un fotoelectrn de una de las capas electrnicas
del material absorbente con una energa cintica procedente de la energa del fotn
incidente, menos la energa de ligadura del electrn en su capa original.
2. Efecto Compton: es una colisin elstica entre un electrn ligado y un fotn
incidente, siendo la divisin de energa entre ambos dependiente del ngulo de
dispersin.
3. Produccin de pares: el proceso ocurre en el campo de un ncleo del material
absorbente y corresponde a la creacin de un par electrn - positrn en el punto en
que desaparece el fotn gamma incidente. Debido a que el positrn es una forma de
antimateria, una vez que su energa cintica se haga despreciable se combinar con
un electrn del material absorbente, aniquilndose y produciendo un par de fotones.
Los neutrones interaccionan con los ncleos de la materia mediante los siguientes efectos:
1. Activacin: es una interaccin completamente inelstica de los neutrones con los
ncleos, mediante la cual el neutrn es absorbido, produciendo un istopo diferente.
Es la base de la transmutacin producida en los ADS's.
2. Fisin: mediante esta interaccin los neutrones se unen a un ncleo pesado (como el
uranio-235) excitndole de forma tal que provoca su inestabilidad y desintegracin

posterior en dos ncleos ms ligeros y otras partculas. Es la base de los reactores

nucleares de fisin.
3. Colisin inelstica: en esta interaccin el neutrn colisiona con el ncleo cediendo
una parte de su energa, con lo que el resultado es un neutrn y un ncleo excitado
que normalmente emite radiaciones gamma, ionizantes, ms tarde.
MEDIDAS DE TRANSMITANCIA
La transmitancia se define como la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en
determinada cantidad de tiempo.
Existen varios tipos de transmitancia, dependiendo de qu tipo de energa consideremos.

La transmitancia ptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una

determinada longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una
parte de esa luz es absorbida por el mismo, y otra fraccin de ese haz de luz atravesar el
cuerpo, segn su transmitancia. El valor de la transmitancia ptica de un objeto se puede
determinar segn la siguiente expresin:
I es la cantidad de luz transmitida por la muestra e I0 es la cantidad total de luz incidente.
Muchas veces encontraremos la transmitancia expresada en porcentaje, segn la frmula:

Podemos hablar de transmitancia trmica como la cantidad de energa en forma de calor

que atraviesa un cuerpo, en cierta unidad de tiempo. Si tenemos en cuenta un cuerpo con
caras planas y paralelas, y entre sus caras hay una diferencia trmica, esta diferencia
constituye la transmitancia trmica del cuerpo. La transmitancia trmica es el inverso de la
resistencia trmica. Se puede definir segn la siguiente frmula:

En esta expresin tenemos que

U = transmitancia en W/m2. Kelvin
S = superficie del cuerpo en m2.
K = diferencia de temperaturas en grados Kelvin.
El concepto de este tipo de transmitancia es aplicado en los clculos para construir
aislamientos trmicos y para calcular prdidas de energa en forma de calor.
Tambin se toman en cuenta estos conceptos al momento de calefaccionar una habitacin,
ya que hay que calcular qu potencia se necesitar en un determinado perodo, para lograr
una cierta temperatura en la habitacin, teniendo en cuenta la prdida de calor debido a la
transmitancia de las paredes de la habitacin.
MEDIDAS DE ABSORBANCIA
Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una parte de esta luz es absorbida
por el cuerpo, y el haz de luz restante atraviesa dicho cuerpo. A mayor cantidad de luz
absorbida, mayor ser la absorbancia del cuerpo, y menor cantidad de luz ser transmitida
por dicho cuerpo. Como se ve, la absorbancia y la transmitancia son dos aspectos del
mismo fenmeno. La absorbancia, a una determinada longitud de onda lambda, se define
como:

Donde I es la intensidad de la luz que pasa por la muestra (luz transmitida) y I0 es la

intensidad de la luz incidente.
La medida de la absorbancia de una solucin es usada con mucha frecuencia en laboratorio
clnico, para determinar la concentracin de anlitos tales como colesterol, glucosa,
creatinina y triglicridos en sangre. Cada uno de estos anlitos se hace reaccionar
qumicamente con determinados compuestos, a fin de obtener una solucin coloreada. A
mayor intensidad de color, mayor ser la absorbancia de la solucin en una determinada

longitud de onda. La absorbancia es entonces directamente proporcional a la concentracin

del anlito en sangre.
Para medir esta absorbancia, se hace incidir un haz de luz con determinada intensidad y
longitud de onda, sobre la solucin, y se mide la luz transmitida al otro lado de la cubeta
que contiene dicha solucin. Estas tcnicas estn comprendidas en el rea de la
espectrofotometra.
DESVIACIONES QUIMICAS
Las desviaciones a la Ley de Beer caen en tres categoras: reales, instrumentales y
qumicas. Dichas desviaciones pueden ser positivas -- si la absorbancia medida es mayor
que la real -- o negativas -- si la absorbancia medida es menor que la real -- y llevan a que
no se obtengan relaciones lineales entre la absorbancia y la concentracin.
Las desviaciones reales provienen de los cambios en el ndice de refraccin del sistema
analtico, pues como e depende del ndice de refraccin de la muestra, la ley de Beer slo se
cumple para bajas concentraciones, en donde el ndice de refraccin es esencialmente
constante, ya que no es la absortividad la que es constante sino la expresin:
e = e verdadero h /(h 2+2)2 [2 donde h es el ndice de refraccin de la solucin.
Las desviaciones instrumentales provienen, en primer lugar de la utilizacin de luz no
monocromtica, ya que la pureza espectral del haz de radiacin proveniente de la fuente,
depende del ancho de banda espectral del monocromador. La deduccin de la ley de Beer
supone radiacin monocromtica y los monocromadores en realidad proporcionan una
banda de longitudes de onda.
Cuando se hace una medida de transmitancia con luz de varias longitudes de onda, l' ,l'' ...
la intensidad del haz que emerge de la solucin de muestra ser ( Il' + Il'' ...) y la intensidad
del haz que emerge de la celda de referencia ser ( I0l' + I0l '' ...) por lo que la transmitancia
leda ser :
T = ( Il' + Il'' ...) / ( I0l ' + I0l'' ...) = ( Il' + Il '' ...) / ( I0l '10-e'bc + I0l ''10-e''bc...)
Entonces, la ley de Beer puede cumplirse con pequeos intervalos de error, si la variacin
de la absortividad con la longitud de onda es constante en el intervalo de longitudes de onda

que el selector del instrumento deja pasar, siempre que el ajuste de la longitud de onda
nominal sea muy reproducible.
En el mximo de la curva del espectro de absorcin, el coeficiente de absortividad cambia
ms lentamente que en el resto de la banda, igualmente la sensibilidad a la concentracin es
mayor en el mximo de la banda de absorcin, porque la absortividad tiene el valor mximo
en ese punto. Es por esto, que normalmente se selecciona la longitud de onda en el mximo
de la banda para realizar las medidas espectrofotomtricas cuantitativas.
Se presentan tambin desviaciones instrumentales por luz desviada, entendiendo por esta, la
luz de otras longitudes de onda que se superponen a la banda de luz utilizada . Cuando en
los instrumentos se fija una longitud de onda nominal ,lx, el ancho de banda espectral del
monocromador condiciona la banda de luz que pasa, que corresponder a la regin lx D l
llamada regin de la luz til. La intensidad de esta banda de luz disminuir cuando ocurra
la absorcin de luz por parte de la muestra, al igual que puede disminuir la intensidad de la
luz desviada, sobretodo para l 230 nm.
La luz que proviene de la celda de referencia induce una corriente fotoelctrica en el
detector al igual que la luz que proviene de la muestra pero la luz desviada tambin induce
una corriente adicional en el detector, lo que lleva a una transmitancia falsa, T'' , que tiene
el valor:
T'' = ( I + If ) / ( I0 + If ) donde If es la intensidad de la luz desviada.
Las desviaciones qumicas a la ley de Beer tambin se llaman desviaciones aparentes
porque dependen de la naturaleza qumica del sistema en estudio y si se trabaja bajo ciertas
condiciones ( pH, concentracin de reactivos, etc. ) es posible hacer que el sistema cumpla
dicha ley. Las desviaciones son causadas, generalmente, por equilibrios en solucin que
involucran a la especie absorbente y alteran su concentracin originando desviaciones
positivas o negativas.
Si alguna reaccin qumica que ocurra en el sistema origina un producto que absorba ms
fuertemente que la sustancia ensayada, a la longitud de onda a la cual se hace la medida o
longitud de onda analtica, se producir una desviacin positiva. Si, al contrario, se origina

un producto que no absorbe a la longitud de onda analtica, la concentracin de la sustancia

se ver disminuida y se originar una desviacin negativa.
Entre los tipos de reacciones qumicas que llevan a desviaciones de la ley de Beer estn:
reacciones de asociacin-disociacin, reacciones cido-base, reacciones de polimerizacin,
reacciones de formacin de complejos y reacciones con el solvente.
Cuando un analito se disocia, se asocia o reacciona con un disolvente para dar lugar a un
producto con un espectro de absorcin diferente al del analito, se producen desviaciones de
la ley de Beer. Las disoluciones acuosas de los indicadores cido-base son un ejemplo
caracterstico de este comportamiento. Por ejemplo, el cambio de color asociado con un
indicador tipo HIn se produce como consecuencia de los cambios en el equilibrio
HIn-----H+ + InDESVIACIONES INSTRUMENTALES ORIGINADAS POR LA RADIACIN
POLICROMTICA
El cumplimiento estricto de la ley de Beer slo se observa cuando la radiacin es realmente
monocromtica; esta observacin es otra manifestacin aun del carcter lmite de la ley.
Desafortunadamente, en la prctica es raro el uso de radiacin restringida a una sola
longitud de onda debido a que los dispositivos que aslan porciones de la seal de salida de
una fuente continua generan una banda de longitudes de onda ms o menos simtrica en
torno a la deseada.
La siguiente deduccin muestra el efecto de la radiacin policromtica en la ley de Beer.
Consideramos un haz formado slo por dos longitudes de onda ' y ''. Asumiendo que la ley
de Beer se aplica estrictamente para cada una de estas longitudes de onada, podemos
escribir para la radiacion landa':
Cuando la medida de la absorbancia se realiza utilizando una radiacin compuesta por
ambas longitudes de onda, la potencia del haz emergente de la disolucin viene dado por
P'+P'' y la del haz del disolvente por P'o y P''o. Por tanto, la medida de la absorbancia Am
es:

Y se cumple la ley de Beer. Sin embargo, la relacin lineal entre Am y la concentracin

deja de ser lineal cuando las absortividades molares difieren entre s; es ms, cabe esperar
mayor desviacin de la linealidad cuanto mayor sea la diferencia entre ' y ''. Esta deduccin
puede extenderse de forma que incluya longitudes de onda adicionales; el efecto seguira
siendo el mismo.
Es un hecho experimental observado que las desviaciones de la ley de Beer resultantes del
uso de un haz policromtico no son apreciables, con tal de que la radiacin utilizada no
abarque una regin del espectro en la cual el absorbente muestre cambios grandes en la
absorcin en funcin de la longitud de onda.
Tambin se ha observado experimentalmente que las medidas de absorbancia en el mximo
de los picos estrechos hace que la desviacin de la ley de Beer no sea significativa si la
anchura de banda efectiva del monocromador o filtro f es menor que 1/10 de la mitad de la
anchura del pico de absorcin en la semialtura.
DESVIACIONES INSTRUMENTALES ORIGINADAS POR LA RADIACIN
PARSITA:
La radaicin que emerge del monocromador suele estar contaminada con pequeas
cantidades de radiacin dispersada o parsita, la cual alcanza la rendija de salida como
resultado de dispersiones y reflexiones en varias superficies internas. La radiacin parsita,
con frecuencia difiere sustancialmente en su longitud de onda de la radiacin principal, y
adems, puede no haber atravesado la muestra.
Cuando las medidas se hacen en presencia de radiacin parsita, la absorbancia observada
viene dada por
Cuando las concentraciones y los caminos pticos son elevados, la radiacin parsita puede
causar desviaciones significativas en la relacin lineal entre la absorbancia y el camino
ptico.