INFORME DETERMINACION DEL pH Y PREPARACION DE SOLUCIONES

AMORTIGUADORAS.

Laboratorio de Bioqumica.
Parra G., Vernica Llanquihun J. Macarena.
Carrera Bioqumica, Departamento Ciencias Qumicas y Recursos Naturales, Universidad
de la Frontera.

RESUMEN.

El pH es una medida de las concentraciones de protones en solucin. Su determinacin se realiza

con un peachmetro el cual posee un electrodo que se sumerge en la muestra a preparar. Las
soluciones amortiguadoras se preparan a un pH requerido, a partir de su conocido valor de pKa
mediante la ecuacin de Henderson Hasselbalch que relaciona estos valores adems con los de
concentracin de cido y base conjugada de este. Una vez preparada la solucin, debe determinarse
su pH, el cual debe encontrarse a un valor aproximado al pKa o pH ptimo de amortiguamiento.
Adems debe seleccionarse un amortiguador que posicione su valor de pKa muy cerca de los rangos
de pH a los que se quiere trabajar para que su capacidad tamponante sea ptima. En este practico, se
prepararon dos soluciones amortiguadoras que trabajan a pH distinto. Una solucin de fosfato
sdico a pH de 7,4, y otra de acetato sdico con un pH requerido de 5,0. Luego se determin su pH
con un peachmetro previamente calibrado. Este prctico demuestra la importancia de preparar una
solucin amortiguadora de manera correcta a peaches distintos a partir de diversos compuestos, as
como tambin el manejo adecuado de un peachmetro en la evaluacin de soluciones recin
preparadas.
PALABRAS CLAVE: pH, ecuacin de Henderson Hasselbalch, solucin amortiguadora,

peachmetro.

1. MATERIALES Y METODOS.
1.1.
-

Materiales.
Peachmetro.
Vasos de precipitado.
Pisetas.
Baguetas.

Agitador magntico.
Imanes de agitacin.
Esptula.
Matraces aforados.
Balanza analtica.
Toalla absorbente.
Pipetas.
1

1.2.

Mtodos.

1.2.1. Preparacin de
amortiguadoras.

soluciones

Se requiere preparar dos soluciones

amortiguadoras: unos 250 mL de
solucin de fosfatos de 200 mM a pH
7.4, y unos 250 mL de solucin de
acetato de sodio 200 mM a pH 5.
Para ello se realizan los clculos
necesarios para saber cunto pesar o
medir en volumen cada reactivo.
Los reactivos para preparar la
solucin amortiguadora de fosfato de
sodio son el NaH2PO4. H2O y el
Na2HPO4, ambos en estado slido.
Para preparar la primera solucin
reguladora de acetato de sodio se
requiere un reactivo solido de acetato
de sodio (CH3COO-) tri-hidratado, y
una solucin de cido actico
(CH3COOH) de una pureza del 90% y
una densidad de 1.060 g/mL.
Se realizan los clculos necesarios
para determinar cunto medir o pesar
de cada reactivo. En el caso de la
solucin de fosfato de sodio, se pes
6.9 g de NaH2PO4 y 7.098 g.
Na2HPO4 en una balanza analtica y
depositando lo extrado del frasco a
un vaso de precipitado. Luego
disolver cada vaso de precipitado con
unos 50 mL de agua destilada
ayudndose con una bagueta y
tambin con un agitador magntico
que tambin provee de calor para
ayudar a disolver el contenido. Luego

de disuelto cada reactivo, se deposita

el contenido de cada vaso de
precipitado a un matraz aforado de
250 mL ayudndose de una piseta que
vaya lavando los bordes de cada vaso.
Luego aforar a los 250 mL con agua
destilada.
Para preparar la solucin de acetato de
sodio se debe pesar en balanza
analtica 1.7 g de (CH3COO-) trihidratado y depositar en un vaso de
precipitado para disolver con unos 50
mL de agua destilada al agitador
magntico con un poco de calor. Por
su parte, el reactivo de cido actico
(CH3COOH)
se
encuentra
en
solucin, por lo que se extrae un
volumen de 0.31 mL desde el frasco
con una pipeta de 5 mL y se deposit
esta cantidad directamente en el
matraz aforado de 250 mL, al cual
tambin se aade el acetato disuelto
del vaso precipitado. Luego se afora
el matraz a los 250 mL con agua
destilada.
1.2.2. Determinacin del pH de las
soluciones amortiguadoras.
Para determinar el pH de las dos
soluciones amortiguadoras recin
preparadas, se necesita de un
peachmetro debidamente calibrado a
dos rangos de pH para lo que se
dispone de dos reactivos standard a
pH cido y neutro. Una vez calibrado,
se procede a la medicin del pH en
cada
matraz
conteniendo
el
2

amortiguador hasta que se registre una

lectura estable en el tiempo. Registrar
cada lectura y lavar con agua destilada
luego y entremedio de cada lectura.

RESULTADOS Y DISCUSION.
La lectura registrada para la solucin de
fosfato de sodio mostro un pH de 7.20 el cual
se acerca bastante pH deseado de preparacin
que es de 7.40, de modo que podemos inferir
que la preparacin de la solucin
amortiguadora fue satisfactoria. Para la
solucin de acetato de sodio, la lectura
registrada para su pH fue de 4.99 que tambin
se acerca bastante al pH deseado de 5.00,
mostrando as una buena preparacin de la
solucin.
La preparacin de estas soluciones
amortiguadores a un pH deseado, debe
pretender acercarse al valor de pKa que posea
el amortiguador, debido a que es en torno a
este valor en donde el amortiguador resiste de
3

manera ptima los cambios de pH ante la

adicin de pequeas cantidades de cido o
base a la solucin que lo contenga (2). Si una
solucin amortiguadora es preparada a un pH
alejado de su pKa, bsicamente ser
incompetente al amortiguar los cambios
bruscos de cido o base. Por ello, es
importante considerar este valor en el clculo
de las concentraciones requeridas para
preparar el amortiguador. Este valor, viene
incluido en el clculo de la ecuacin de
Henderson Hasselbalch el cual adems
relaciona las concentraciones del cido y su
base conjugada. Hay que considerar adems,
que las soluciones amortiguadoras no ven
alterado su pH al diluirse. Lo que si se altera
son las concentraciones del cido y de su base
conjugada. Sin embargo, la relacin
fraccionaria entre ambos no se altera, de
modo que tampoco lo harn las
concentraciones de protones hidratados en la
solucin (4).

Para preparar una solucin amortiguadora a

un pH determinado, debe considerarse su
respectivo valor de pKa del tipo de reaccin
que se est tratando, el cual ser utilizado en
la ecuacin de Henderson Hasselbalch junto
con los valores de concentracin molar que se
exige de cada reactivo.

Una solucin amortiguadora una vez

preparada, debe ser evaluada inmediatamente
en su pH para cerciorarse que este dentro del
rango solicitado. Adems los clculos
realizados para estimar cuanto se debe
disponer de cada reactivo tambin relacionan
estos valores con los de pKa y pH requeridos,
por lo que deben tenerse en cuenta estos
valores caractersticos para cada compuesto al
momento de preparar una solucin (2).

(1) Martin S. Silberberg. (2002). Qumica. 2a

edicin. Editorial Mc Graw Hill. Mxico.

Se debe considerar que una solucin

amortiguadora que trabaja adecuadamente lo
hace cuando se encuentra a un pH alrededor
de +/- 1 de su correspondiente valor de pKa
segn la literatura, vale decir, cuando ms se
amortigua la adicin de cidos o bases a las
soluciones (1).

En la prctica, es posible seleccionar y

preparar un amortiguador para un rango o pH
especifico en particular. Se debe procurar que
al preparar una solucin amortiguadora, esta
sea de un pH aproximado al valor de pKa o
pH ptimo de amortiguamiento, en un rango
de +/- 1. Adems para que sea efectivo, un
amortiguador idealmente seleccionado es
aquel que posea un valor de pKa lo ms
prximo posible a los pH con los que se
quiere trabajar.

REFERENCIAS.

(2) Harris C. Daniel. (1992). Anlisis Qumico

Cuantitativo. Grupo Editorial Iberoamrica.
Universidad Nacional Autnoma de
Mxico.Mxico.
(3) Longo Frederick. (1979). Qumica general.
Editorial Mc Graw Hill. Buenos Aires,
Argentina.
(4) Angelini M. y otros. (2000). Gua de
problemas, Qumica. Ciclo bsico comn.
Universidad de Buenos Aires. Argentina.

CONCLUSIONES.
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