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BIOQUMICA VETERINRIA

PROVA I
GLICLISE
Introduo ao metabolismo
Nas clulas as reaes enzimticas no ocorrem isoladas e sim so organizadas em sequncias de
mltiplos passos que denominamos de vias.
Em uma via o produto de uma reao serve como substrato para a reao subsequente. H tambm as
vias que estabelecem interseces, isto , formam uma rede integrada de reaes qumicas com
propsitos definidos.
Essas redes de reaes so denominadas de metabolismo.
METABOLISMO= Soma de todas as mudanas qumicas que ocorrem nas clulas, nos tecidos ou nos
organismos.
As vias podem ser classificadas como:
Anablicas: De sntese. Formam produtos finais complexos a partir de precursores simples, como a
sntese de um polissacardeo, o glicognio a partir da glicose.
Catablicas: De degradao. Quebram molculas complexas, como protenas, polissacardeos e
lipdeos, em uma variedade de molculas mais simples, como NH CO e gua.
Ciclos: So as vias que regeneram um de seus componentes.
Enzima: Pode catalisar ou regular.
VIAS CATABLICAS oxidativo
Reaes catablicas: propsito de capturar energia qumica, obtidas das reaes da degradao de
molculas combustveis ricas em energia, formando o ATP. Tambm permite que molculas da dieta
sejam convertidas em blocos constitutivos necessrios para a sntese de molculas complexas. A energia
gerada pela degradao de molculas complexas, ocorre em 3 estgios.
1. Hidrlise de molculas complexas: As molculas complexas so quebradas em seus blocos
constitutivos. Ex: protenas em monossacardeos e triacilglicerois em cidos graxos e glicerol;
2. Converso dos constitutivos em intermedirios mais simples: Ento, os blocos constitutivos
so degradados em acetil-coA, e em uma pequena variedade de molculas simples. Parte da
energia capturada como ATP, porm essa quantidade pequena se a comparamos com a
energia produzida durante o 3 estgio.
3. Oxidao de acetil-coA: O ciclo dos cidos tricarboxlicos a via final comum da oxidao de
molculas combustveis como acetil-coA. Grandes quantidades de ATP so geradas na
fosforilao oxidativa, medida que os eltrons do NADH e do FADH para o oxignio.
VIAS ANABLICAS

Essas renem molculas pequenas, como aminocidos para formar molculas complexas como as
protenas. As reaes anablicas so endergnicas, isto , precisam de energia, via de regra, fornecida
pelo ATP, gerando ADP + Pi. Frequentemente, as reaes anablicas envolvem redues qumicas em
que o poder redutor vem do doador de eltrons, o NADPH. O catabolismo convergente: uma ampla
variedade de molculas transformada em poucos produtos finais. Em contraste o anabolismo
divergente: Poucos precursores biossintticos so transformados em uma ampla variedade de produtos
polimricos.
REGULAO DO METABOLISMO
As vias devem ser coordenadas de modo que a produo de energia e a sntese de produtos finais
estejam de acordo com as necessidades da clula. As clulas individuais no funcionam isoladamente,
mas so parte de uma comunidade de tecidos que interagem. Dessa forma, h um sistema de
comunicao que coordena as funes do organismo. Os sinais regulatrios que informam determinada
clula sobre estado metablico do organismo como um todo incluem: hormnios, neurotransmissores e a
disponibilidade de nutrientes. Esses influenciam os sinais gerados dentro das clulas.
Sinais intracelulares
A velocidade de uma via pode responder a sinais reguladores que surgem no interior de uma clula. Por
exemplo, a velocidade de uma via pode ser influenciada pela disponibilidade de substratos, pela inibio
ocasionada pelos produtos ou por alteraes nos nveis de ativadores ou inibidores alostricos. Esses
sinais determinam respostas rpidas e so importantes para a regulao do metabolismo a cada
momento.
Comunicao intercelular
Responder a sinais extracelulares essencial para a sobrevivncia e desenvolvimento dos organismos. A
sinalizao intercelular fornece uma integrao ampla do metabolismo e normalmente mais lento se
comparado com a intracelular. A comunicao intercelular pode ocorrer pelo contato entre as superfcies e
em alguns tecidos pelas junes gap, Para o metabolismo o mtodo mais importante o de sinalizao
qumica, mediada, por exemplo, por hormnios trazidos via corrente sangunea ou por
neurotransmissores.
Sistemas de segundos mensageiros
Os hormnios e os neurotransmissores podem ser imaginados como sinais. E seus receptores como
detectores de sinal. Cada componente age como um elo na comunicao entre os eventos extracelulares
e os intracelulares. Muitos receptores sinalizam o reconhecimento de um ligante acoplado por meio do
desencadeamento de uma srie de reaes que no fim resulta em uma resposta intracelular especfica.
Molculas denominadas segundo-mensageiro atuam entre o mensageiro original (neurotransmissor,
hormnio) e o efeito final dentro da clula. Exemplo: clcio/fosfatidilinositol e adenilato/ciclase.
ADENILATO-CICLASE (Enzima ligada membrana que converte ATP em AMP cclico.)
Um sinal qumico (que pode ser hormnios ou neurotransmissores) atua nas clulas atravs dos
receptores determinados especficos de membrana, como os adrenrgicos, alfa2 e beta, assim, esse sinal
qumico, ativa ou reduz a atividade da adenilato ciclase. Desse modo, tecidos que respondem a mais de 1
sinal qumico devem ter vrios receptores, cada um dos quais pode estar ligado adenilato-ciclase.
Algumas toxinas ativam e outras inibem a enzima. Os receptores possuem uma regio extracelular, na

qual o ligante se acopla, possui tambm 7 hlices transmembrana e um domnio intracelular que reage
com a protena G.
Protenas reguladoras dependentes de GTP
A formao do segundo mensageiro atravs da ligao entre o sinalizador e o receptor no direto e sim,
mediado por protenas trimtricas especializadas que esto na membrana celular. Essas protenas so as
protenas G, por ligarem GTP e GDP a elas e formar um elo de cadeia de comunicao entre o receptor e
a adenilato ciclase.
Quando inativa, a protena G se liga ao GDP. O receptor ativado interage com protenas G e realiza troca
de GDP por GTP. A protena G trimtrica dissocia-se em uma subunidade alfa e um dmero beta e gama.
A subunidade alfa ligada ao GTP move-se do receptor para a adenilato ciclase que ativada.
As aes do complexo protena G + GTP, so de curta durao, pois a protena G promove a hidrlise
rpida do GTP a GDP. Causando a inativao da protena G.
OBS: A ativao ou inibio da adenilato ciclase por um hormnio ou neurotransmissor, depende do tipo
de protena G ligada.
Protena-cinases
As protena-cinases tambm so ativadas atravs do AMPc. O AMPc ativa a protena-cinase A ligando-se
s suas duas subunidades regulatrias, determinando a liberao de subunidades catalticas ativas,
essas subunidades catalisam a transferncia do fosfato do ATP para resduos especficos de serina ou
treonina em protenas substratos dessa enzima. As protenas fosforiladas podem atuar sobre os canais
inicos diretamente, ou ativar/inibir-se. A protena cinase A tambm pode fosforilar protenas especficas
que se ligam a regies promotoras no DNA, determinando aumento na expresso de determinados
genes.
Desfosforilao de protenas
As protenas-fosfatases so responsveis pela retirada do fosfato das protenas (adicionadas pelas
protena-cinases). As protenas fosfatases clivam hidroliticamente steres de fosfato, assegurando que
mudanas enzimticas promovidas por fosfato no sejam permanentes.
Hidrlise do AMPc
A hidrlise do AMPc promovida por meio da fosfodiesterase do AMPc, representante de uma famlia de
enzimas que cliva ligaes 3-5-fosfodister cclico. O 5AMP no uma molcula e sinalizao
intracelular. Assim, os efeitos do neurotransmissor terminam quando o sinal extracelular removido.
VISO GERAL DA GLICLISE
A via glicoltica usada em quase todos os tecidos para a quebra da glicose, como objetivo de fornecer
energia na forma de ATP e intermedirio para outras vias metablicas. A gliclise o centro do
metabolismo dos carboidratos, pois praticamente todos os glicdios (provenientes da dieta e tambm de
reaes catablicas do organismo) podem ser convertidos em glicose.
O produto final da gliclise nas clulas com mitocndrias e oxignio o piruvato. Essa srie de 10
reaes denominada gliclise aerbica, pois necessrio oxignio para a reoxidao do NADH
formado durante a oxidao do gliceraldedo-3-fosfato. Na converso de piruvato a acetil-coA (principal

combustvel no ciclo do cido ctrico) ocorre uma descarboxilao oxidativa e isso possvel graas s
condies que a gliclise d para que isso acontea.
GLICOLISE ANAERBIA: Quando a glicose convertida a piruvato, que reduzido pelo NADH para
formar lactato, assim reoxidando o NAD+. Essa converso de glicose a lactato no necessita de oxignio.
A gliclise anaerbia permite a produo de ATP em tecidos sem mitocndrias (eritrcitos p. ex) ou em
condies de hipoxia.
TRANSPORTE DA GLICOSE PARA DENTRO DAS CLULAS
A glicose no capaz de difundir-se diretamente para dentro das clulas. Por isso utiliza:
1. Sistema de transporte por difuso facilitada, independente de NA+
2. Sistema de co-transporte monossacardeo+NA.
1. Transporte por difuso facilitada, independente de NA+
Esse sistema mediado por uma famlia de pelo menos 14 transportadores de glicose encontrados nas
membranas celulares, so designados de GLUT-1 a GLUT-14. Ocorrem em 2 estados: A glicose
extracelular liga-se ao transportador que altera sua conformao, transportando a glicose atravs da
membrana.
a) Especificidade tecidual da expresso gnica dos GLUTs.
GLUT-3= transportador de glicose nos neurnios
GLUT-1= Abundante nos eritrcitos e no encfalo, mas pouca expresso no msculo do adulto
GLUT-4= Abundante no tecido adiposo e no msculo esqueltico.
OBS: O nmero de transportadores ativos do GLUT-4 aumentado pela insulina.
GLUT-5= Principal transportador para a frutose no intestino delgado e nos testculos.
GLUT-7= Encontrado no fgado e em outros tecidos gliconeognicos, medeia o fluxo de glicose atravs
da membrana do retculo endoplasmtico.
b) Funes especializadas das isoformas de GLUT
Na difuso facilitada, o movimento da glicose segue um gradiente de concentrao, do maior para o
menor.
GLUT-1, GLUT-3 e GLUT-4 esto envolvidos principalmente na captao de glicose a partir do sangue.
Em contraste o GLUT-2, que se encontra no fgado e no rim pode transportar a glicose para dentro (nveis
altos no sangue) e glicose para fora (nveis baixos no sangue).
OBS: O GLUT-2 encontrado tambm no pncreas.
2. Sistema de co-transporte monossacardeo-Na+
Esse processo requer energia, pois transporta a glicose contra o gradiente de concentrao, da menor
para a maior concentrao. Esse sistema mediado por um carreador, em que o movimento da glicose
est acoplado ao gradiente de concentrao do Na+, que transportado concomitantemente glicose

para o interior da celular. O carreador um transportador de glicose dependente de sdio. Esse tipo de
transporte ocorre nas clulas epiteliais do intestino, dos tbulos renais e do plexo coroide.
REAES DA GLICLISE
A converso de glicose a piruvato acontece em dois estgios. As primeiras cinco reaes da gliclise
correspondem a uma fase de investimento de energia, em que as formas fosforiladas dos intermedirios
so sintetizadas com o gasto de ATP. As reaes subsequentes constituem uma fase de produ~~ao de
energia em que ocorre a produo lquida de 2 molculas de ATP por cada molcula de glicose
metabolizada por fosforilao no nvel do substrato.
OBS: 2 molculas de NADH so formadas quando produzido piruvato [gliclise aerbia], enquanto o
NADH convertido em NAD+ quando o lactato for o produto final [gliclise anaerbica].

Saldo da gliclise aerbia.


1. FOSFORILAO DA GLICOSE
As molculas de glicdeos fosforiladas no atravessam facilmente as membranas celulares, pois no h
carreadores especficos na membrana para esses compostos. Eles so muito polares para difundir-se na
membrana. A fosforilao irreversvel da glicose, retm efetivamente o glicdio na forma de glicose-6fosfato citoslica, assegurando seu metabolismo na clula. Os mamferos possuem diversas isoformas da
enzima hexocinase que catalisa a fosforilao da glicose a glicose-6-fosfato.
a) Hexocinase: Na maior parte dos tecidos, a fosforilao da glicose ocorre pela hexocinase, uma
das 3 enzimas reguladoras da gliclise (juntamente com a fosfofrutocinase e a piruvato-cinase).
A hexocinase apresenta especificidade ampla quanto ao substrato: capaz de fosforilar outras
hexoses, alm da glicose. A hexocinase inibida pelo produto da reao, glicose-6-fosfato, que
se acumula quando a metabolizao dessa hexose-fosfato est reduzida. A hexocinase
apresenta um baixo km e uma alta afinidade pela glicose. Isso permite uma eficiente fosforilao
e o metabolismo posterior da glicose, mesmo quando as concentraes teciduais de glicose
estiverem baixas.
2. ISOMERIZAO DA GLICOSE-6-FOSFATO
A isomerizao da glicose-6-fosfato, com a produo de frutose-6-fosfato, catalisada pela fosfoglicoseisomerase. A reao reversvel.
3. FOSFORILAO DA FRUTOSE-6-FOSFATO
A reao irreversvel de fosforilao, catalisada pela fosfofrutocinase-1 (PFK-1), o mais importante
ponto de controle e o passo limitante de velocidade da gliclise. A PFK-1 controlada pelas
concentraes disponveis de seus substratos, ATP e frutose-6-fosfato, e pelas seguintes substncias
reguladoras:

Regulao pelos nveis energticos dentro da clula

A PFK-1 inibida alostericamente por nveis elevados de ATP, que atuam como sinal de riqueza
energtica, indicando a abundncia de compostos de alta energia. Nveis altos de citrato, um
intermedirio do ciclo de Krebs, tambm inibe a PFK-1. Essa enzima por outro lado ativada
alostericamente por altas concentraes de AMP, que sinalizam depleo das reservas energticas.

Regulao pela frutose 2-6-bisfosfato

A frutose-2-6-bisfosfato o mais potente ativador da PFK-1, sendo capaz de ativar a enzima mesmo
quando os nveis de ATP esto altos. A frutose-2-6-bisfosfato formada pela fosfofrutocinase-2 (PFK-2),
que diferente da PFK-1. A PFK-2 uma protena bifuncional, tendo tanto atividade cinsica que produz
frutose-2-6-bisfosfato, quanto atividade fosfatsica que converte a frutose-2,6-bisfosfato novamente em
frutose-6-fosfato.
No fgado, o domnio cinase ativo quando desfosforilado e ativo quando fosforilado.
OBS: A frutose-2,6-bisfosfato tambm atua como inibidor da Frutose-1,6-bisfosfatase, uma enzima da
gliconeognese.
As aes recprocas da da frutose-2,6-bisfosfato sobre a gliclise [ativao] e a gliconeognese [inibio]
asseguram que essas vias mo estejam completamente ativas ao mesmo tempo, prevenindo um ciclo
intil, em que a glicose seria convertida a piruvato enquanto ocorreria a sntese de glicose, a partir do
piruvato.
a) Durante o estado alimentado:
A diminuio dos nveis de glucagon, juntamente com nveis elevados de insulina, como ocorre em uma
refeio rica em carboidratos, causa aumento na frutose-2,6-bisfosfato e, portanto, na velocidade da
gliclise no fgado. Desse modo, a frutose-2,6-bisfosfato atua como sinal intracelular, indicando
abundncia de glicose.
b) Durante o Jejum:
Nveis elevados de glucagon e baixos de insulina como no jejum, determinam uma diminuio na
concentrao intracelular de frutose-2,6-bisfosfato heptica. Isso resulta na diminuio geral da gliclise e
um aumento na gliconeognese.
4. Clivagem da frutose-1,6-bisfosfato
A aldolase cliva a frutose-1,6-bisfosfato, dando diidroxiacetona-fosfato e gliceraldedo-3-fosfato. A reao
reversvel e no-regulada.
OBS: A aldolase B, isoforma encontrada no fgado e no rim, tambm cliva a frutose-1,6-bisfosfato e
funciona no metabolismo da frutose da dieta.
5. Isomerizao da diidroxiacetona-fosfato
A triose-fosfato-isomerase interconverte essas duas trioses, a diidroxiacetona-fosfato e o gliceraldedo-3fosfato. A diidroxiacetona-fosfato isomeriza, dando gliceraldedo-3-fosfato, para posterior metabolismo
pela via glicoltica. Essa isomerizao resulta na produo lquida de 2 molculas de gliceraldedo-3fosfato pelos produtos da clivagem da frutose-1,6-bisfosfato.

6. Oxidao do gliceraldedo-3-fosfato
A converso do gliceraldedo-3-fosfato em 1,3-bisfosfoglicerato pela
desidrogenase a primeira reao de oxido-reduo da gliclise.

gliceraldedo-3-fosfato-

OBS: Uma vez que h apenas uma quantidade limitada de NAD+ na clula, o NADH produzido nessa
reao deve ser reoxidado a NAD+ para que a gliclise continue. Os dois principais mecanismos para a
oxidao do NADH so: (1) a converso ligada ao NADH de piruvato em lactato [anaerbica]. (2) a
oxidao NADH via cadeia respiratria [aerbia].
a) Sntese do 1,3-bisfosfoglicerato (1,3-BPG)
A oxidao do grupo aldedo do gliceraldedo-3-fosfato a um grupo carboxila est acoplada ligao de
um Pi a esse grupo carboxila. O grupo fosfato de alta energia no carbono 1 do 1,3-BFG conserva boa
parte da energia livre produzida pela oxidao do gliceraldedo-3-fosfato. A energia desse fosfato de alta
energia impele a sntese de ATP na prxima reao da gliclise.
b) Sntese de 2,3-bisfosfoglicerato nos eritrcitos
Parte do 1,3-BFG convertido em 2,3-BFG pela ao da bisfosfoglicerato-mutase. O 2,3-BFG,
encontrado apenas em quantidades-trao na maior parte da clulas, est presente em alta concentrao
nos eritrcitos. O 2,3-BFG hidrolisado por uma fosfatase, dando 3-fosfoglicerato.
7. Sntese do 3-fosfoglicerato com produo de ATP
Quando o 1,3-BFG convertido em 3-fosfoglicerato, o grupo fosfato de alta energia do 1,3-BFG
utilizado na sntese de ATP a partir de ADP. Essa reao catalisada pela fosfoglicerato cinase, que ao
contrrio das cinases fisiologicamente reversvel. Uma vez que duas molculas de 1,3-BFG so
produzidas por cada molcula de glicose que entra na via glicoltica, a reao desse cinase repe 2
molculas de ATP consumidas na formao inicial de glicose-6-fosfato e frutose-1,6-bisfosfato.
8. Troca do grupo fosfato do carbono 3 para o carbono 2
A mudana do grupo fosfato do carbono 3 para o carbono 2 do fosfoglicerato pela fosfoglicerato mutase
livremente reversvel.
9. Desidratao do 2-fosfoglicerato
A desidratao do 2-fosfoglicerato pela enolase redistribui a energia dentro da molcula do 2fosfoglicerato, resultando na formao do fosfoenolpiruvato (PEP), que contm um enol fosfato de alta
energia. A reao reversvel, apesar do produto ser um composto de alta energia.
10. Formao do piruvato, com produo de ATP
A converso do PEP catalisada pela piruvato cinase, a terceira reao irreversvel da gliclise. O
equilbrio da reao da piruvato-cinase favorece a sntese de ATP.
OBS: Esse outro exemplo de fosforilao no nvel do substrato.
a) Regulao por proao
No fgado, a piruvato cinase ativada pela frutose-1,6-bisfosfato, o produto da reao da
fosfofrutocinase. Essa regulao por proao (ao invs da por retroalimentao) tem o efeito de unir as

atividades das 2 cinases: o aumento: o aumento na atividade da fosfofrutocinase resulta em nveis


elevados de frutose- 1,6-bisfosfato, ativando a piruvato-cinase.
b) Modulao covalente da piruvato-cinase
A fosforilao por uma protena-cinase dependente de AMPc leva inativao da piruvato cinase no
fgado. Quando os nveis sanguneos de glicose esto baixos, um aumento no glucagon provoca a
elevao provoca nos nveis intracelulares de AMPc levando fosforilao e consequente inativao da
piruvato-cinase. Desse modo, o PEP no consegue prosseguir na via glicoltica, entrando, ento, na via
da gliconeognese. Isso explica, em parte a inibio da gliclise e a estimulao da gliconeognese
observadas em resposta ao glucagon. A desfosforilao da piruvato-cinase, por fosfoprotena-fosfatase
resulta na reativao da enzima.
c) Deficincia da piruvato-cinase
Um eritrcito maduro normal no apresenta mitocndrias e , portanto, completamente dependente da
gliclise para produo de ATP. Esse composto de alta energia necessrio para satisfazer as
necessidades energticas do eritrcito e tambm para alimentar as bombas necessrias para a
manuteno da forma bicncava e flexvel dessa clula, o que permite que ela force o seu caminho por
capilares muito estreitos. A anemia observada na deficincia de enzimas glicolticas consequncia da
reduo da velocidade da gliclise, levando a diminuio na produo de ATP. As alteraes na
membrana do eritrcito, resultantes dessa condio levam a mudanas no formato da clula e, por fim,
sua fagocitose por clulas do sistema reticuloendotelial, especialmente p macrfagos do bao. A morte
prematura desses eritrcitos resulta em anemia hemoltica. Entre os pacientes com defeitos genticos em
enzimas glicolticas, cerca de 95% apresentam deficincia na piruvato cinase e 4% apresentam
deficincia na fosfoglicose-isomerase.
GLICLISE ANAERBIA:
1. Reduo de piruvato a lactato
O lactato, formado pela ao da lactato-desidrogenase, o pruduto final da gliclise anaerbia nas
clulas eucariticas. A formao do lactato o principal destino do piruvato no cristalino e na crnea do
olho, na medula renal, nos testculos, nos leuccitos e nos eritrcitos, pois todos eles apresentam-se
pobremente vascularizados ou privados de mitocndrias.
2. Consumo do lactato
O sentido da reao da lactato-desidrogenase depende das concentraes intracelulares relativas de
piruvato e lactato e da razo NADH/NAD+ na clula. Por exemplo no fgado e no corao, a razo
NADH/NAD+ mais baixa do que no msculo em exerccio. Esses tecidos oxidam lactato (obtido a partir
do sangue), produzindo piruvato. No fgado, o piruvato pode ser convertido em glicose pela
gliconeognese, ou oxidado no ciclo do cido ctrico. O msculo cardaco oxida lactato a CO e HO, na
via do ciclo de Krebs.
3. Acidose lctica
Concentraes elevadas de lactato no plasma sanguneo, uma condio denominada acidose lctica,
ocorrem quando h um colapso do sistema circulatrio, como infarto de miocrdio, na embolia pulmonar,
ou na hemorragia no controlada ou quando o indivduo est em choque. A falha em levar quantidades
adequadas de O aos tecidos resulta em prejuzo na fosforilao oxidativa e diminuio da sntese de

ATP, produzindo cido lctico como produto final. O aumento no oxignio, necessrio para a recuperao
aps um perodo em que sua disponibilidade foi inadequada, e denominado dbito de oxignio.