Universidad Nacional de Colombia

Laboratorio de Principios de Qumica Orgnica

Cromatografa en Columna
INFORME PRCTICA N 5- GRUPO 2
Andrs Felipe Contreras, Yeferson Andrs Mayorga.
agcontrerash@unal.edu.co, yamayorgaa@unal.edu.co
Universidad Nacional de Colombia
________________________________________________________________________________________

1. OBJETIVOS

INICIO

Adquirir el conocimiento terico de algunos

aspectos relacionados con la cromatografa
Saber las diferencias entre algunas tcnicas
utilizadas en el anlisis cromatogrfico
Lograr separar una mezcla de colorantes por
cromatografa en capa fina.
2. PROCEDIMIENTO OPERATIVO

EL montaje consta de una bureta en la cual se

encuentra la fase estacionaria, la muestra se
encuentra en contacto con la fase estacionaria y
separada por algodn con la fase mvil.
La fase estacionaria esta conformada por silica
y la fase mvil principalmente por tolueno.
1.
Figura 1. Montaje usado para la prctica.

Limpiar el
material a utilizar

Esperar a que la
fase estacionaria
este bien
compactada.

Preparar la fase
estacionaria en
la columna

Agregar la
solucin problema
encima de la fase
estacionaria

Agregar un trozo
de algodon por
encima de la
muestra.

Esperar a que se
separen los
componentes de
la muestra

Agregar la fase
movil encima del
algodon ubicado
previamente.

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Recoger los
diferentes
componentes que
pueda tener la
muestra

Evaporar el
eluyente de los
componentes
recogidos
mediante
evaporacin.

Comparar con los

componentes
patrn para
determinar que
compuestos
contenia la muestra

realizar
cromatografa de
capa fina para cada
componente
separado

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4. ANALISIS DE RESULTADOS
5. CONCLUSIONES

FIN

6. CUESTIONARIO
i.
Un colorante desconocido se piensa que
puede ser azul de metileno cmo se
puede comprobar esta suposicin utilizando
tcnicas de cromatografa?
Por medio de la separacin de las diferentes fases
adems de utilizar los disolventes que sean los
ms adecuados para disolver este colorante,
posteriormente por medio de cromatografa en
capa fina identificando el nmero de fases
correspondiente al azul de metileno y, si se observa
que stas fases corren igual al ser comparadas con
un patrn de azul de metileno, podra tratarse de la
misma sustancia.

Figura 2. Procedimiento usado en la prctica.

3. DATOS Y RESULTADOS

3.1.

DESARROLLO DE LA PRCTICA

Al final de la cromatografa en columna se

pudieron separar 3 componentes, los cuales fueron
calentados para retirar el solvente. Posteriormente
se realizo una cromatografa en capa fina para
determinar que componentes contena la muestra.
Se obtuvieron los siguientes resultados:

ii.
Placa 1
Muestra
o-nitrofenol

Distancia (cm)
4,0
4,2

Rf
0,8
0,84

hRf
40
42

Placa 2
Muestra
p-nitrofenol

Distancia (cm)
4,0
4,3

Rf
0,8
0,86

hRf
40
43

Placa 1
Muestra
Azobenceno
m-nitroanilina

Distancia (cm)
1,5
4,8
2,4

Rf
0,3
0,96
0,48

hRf
15
48
24
2

Qu debe hacerse para encontrar el

eluyente adecuado para una sustancia en
una cromatografa de columna?
Primero se debe encontrar los eluyentes en
los cuales la sustancia problema se
disuelva, posteriormente se debe realizar
pruebas de elucin en cromatoplacas para
verificar con que eluyente o mezcla de los
mismos se presenta la separacin de todos
los componentes de la mezcla o de la
mayora en su defecto, as como tambin la
mayor separacin entre componentes.

iii.

iv.

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La recuperacin cuantitativa del producto
principal de la prctica, seria mas completa
si se recogieran fracciones mayores o
menores a 8 ml, por qu?
La recuperacin cuantitativa del producto
principal de la prctica sera ms completa
si se recogieran fracciones inferiores a 8
mL. Esto permite dos cosas: la primera de
ellas es que al realizar el seguimiento de la
separacin por cromatografa en columna
por cromatografas sucesivas en capa fina
sepamos con mayor precisin en qu
fracciones se encuentran las partes
mayoritarias de sustancia y as recuperar la
mayor parte posible. La segunda es que al
juntar las fracciones para realizar la
destilacin y obtener la sustancia como
slido puro tengamos menor cantidad de
eluyente, lo que permite la realizacin ms
rpida y ms eficiente del producto.

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Separacin de acido actico, alcohol
etlico y metil-etil cetona.
Separacin e identificacin de los
compuestos intermedios de una
sntesis orgnica
En la produccin sinttica de
acetaminofn, identificacin de la
amina de la N-acetil benzoquinona.
Identificacin de levo-alfa-acido
aminoadpico, durante la biosntesis
de penicilina.
Identificacion de 8-nitroisoquinolina,
durante la sntesis de
Ciprofloxacina, un antibitico.

Indique algunas de las aplicaciones de la

cromatografa de adsorcin en columna y
capa fina.
La cromatografa de adsorcin, es una
tcnica que est particularmente bien
adaptada para la separacin de polaridad
baja y media. La cromatografa de gases
constituye el mejor mtodo analtico ideado
para la separacin de gases, lquido o
slidos que pueden pasar fcilmente al
estado de vapor o transformndolos
previamente en otros estados voltiles Ej.
Metilacin de cidos grasos en el anlisis
de aceite y a resuelto problemas de muy
difcil solucin para la qumica analtica
empleada hace una dcada. Por eso su
utilizacin es indispensable en:
Separaciones de componentes de
plantas medicinales.
Separacin de componentes de una
sntesis orgnica.
Separacin de colorantes.
Separacin e identificacin de
hioscina y de morfina.
3

v.

Escriba una lista de eluyentes utilizados en

cromatografa en columna en orden de
polaridad decreciente.
a) Agua.
b) Metanol.
c) Acetonitrilo.
d) Acetona.
e) Etanol.
f) MEK
g) Isopropanol.
h) Acetato de etilo.
i) THF
j) Diclorometano.
k) ter.
l) Tolueno.
m) Hexano.
Bibliografa: Eduardo Primo Yfera.
Qumica Orgnica bsica y aplicada: De la
molcula a la industria. Volumen 2. Pag
1228.

vi.

Cual es la diferencia entre la cromatografa

en capa fina y la de papel.
La cromatografa de capa fina se diferencia
con la de columna en que la fase
estacionaria, en la de capa fina esta
constituida por una cromatoplaca de vidrio
generalmente, con una capa de silicagel o
almina. La fase estacionaria est
constituida por un slido que se empaqueta
en una columna, normalmente de vidrio.
Otra diferencia es que en la cromatografa
en columna el eluyente y la mezcla por
analizar descienden por la columna gracias
a la gravedad, y en la de capa fina el

vii.

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eluyente recorre la cromatoplaca por
capilaridad.

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7. BIBLIOGRAFA

Indique la toxicidad de las sustancias que

utiliz y como podra desecharlas.

https://www.clubensayos.com/Ciencia/Cromato
grafia-En-Columna/1194183.html
https://www.clubensayos.com/Ciencia/CROMAT
OGRAFIA-EN-COLUMNA/77811.html
https://es.scribd.com/doc/30138137/CROMATO
GRAFIA-EN-COLUMNA
http://www.quimica.unam.mx/IMG/pdf/17tolueno
.pdf
https://es.wikipedia.org/wiki/Serie_eluotr
%C3%B3pica

La principal sustancia toxica usada fue el

tolueno, este es medianamente toxico y ante su
exposiciones se generan irritaciones severas y
alteracin en el sistema nervioso. Mientras se
degrada es nocivo en los ecosistemas, por lo
cual para su disposicin final el tolueno debe
incinerarse.

viii.

Que fenmenos fsico-qumicos intervienen

en una cromatografa.
En primer lugar la cromatografa constituye un
mtodo fsico de separacin en el cual los
componentes a separar se distribuyen entre dos
fases, una fase estacionaria de gran rea
superficial y una fase mvil que pasa a travs
de la primera.
Un principio fundamental de la cromatografa se
basa en las solubilidades o adsortividades
diferentes de las sustancias a separar en
relacin a las dos fases entre las cuales se
deben particionar. Por esta razn, se distinguen
dos fenmenos muy importantes y que son
prcticamente los rectores del proceso de
separacin: adsorcin y particin.

ix.

Que es una serie eluotrpica.

Una serie elutropica es una lista de compuestos
ordenados segn su poder de elucin (desde el
menos polar hasta el ms polar) para un
adsorbente dado. Estas series son de gran
importancia ya que estas son el criterio de
seleccin del compuesto a utilizar en la
separacin cromatogrfica.

x.

Realice un cuadro comparativo entre la

cromatografa de columna y capa fina.
Presentada en anexos

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ANEXOS

Fase
estacion
aria
Fase
mvil
Fuerza
impulsor
a

Cromatografa en
columna
Partculas finamente
divididas de slice o
almina
Lquido

Cromatografa en
capa fina
Gel de slice o almina

Gravedad, polaridad,
adsorcin desorcin.

Polaridad, adsorcin,
desorcin.

Lquido