ARTICULO DE REVISION

EL LABORATORIO EN EL DIAGNOSTICO DE
INFECCION POR VIRUS ZIKA
David German Quispe Aranda

I.

INTRODUCCION

Licenciado en Tecnología Medica
Especialista Laboratorio Clínico y Anatomía Patológica
Mg (e) Ciencias Forenses y Criminalística
Catedrático Universitario
i CM
Tecnólogo Medico Internacional MT (ASCP )

La enfermedad por virus ZIKA (ZIKAV), es causada
un arbovirus del género flavivirus (familia
Flaviviridae), se transmite por la picadura de
mosquitos del género Aedes aegypti.
• Virus RNA (+)

• Periodo Incubación 3-12
días
• Es un virus envuelto, con
simetría de nucleocapside
Icosaedrica
• 2 linajes africano y asiático

El virus Zika se encontró por primera vez en 1947
en África, en el bosque de Zika en Uganda, en una
población de macacos rhesus, aislándose por
primera vez en humanos en 1952 también en
Uganda. La primera circulación autóctona de este
virus en las Américas fue confirmada en febrero de
2014 en Isla de Pascua, Chile y hasta el 17 de
enero de 2016 son 18 los países y territorios que
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han confirmado circulación autóctona del virus.
El virus Zika ya llego al Perú y, debido a la gran
cantidad de casos que se han presentado en países
de la región, hay que estar alertas pues
la
posibilidad de que se incrementen los casos
importados puede ocurrir pues ya se registran más
casos en países limítrofes como Venezuela,
Colombia, Brasil y Ecuador.
Cuando el mosquito portador del virus pica a una
persona, el virus en primer lugar infecta células (en
concreto, las dendríticas) cerca del sitio de la
inoculación; luego se extiende a los ganglios
linfáticos y a la sangre. El virus se replica dentro de
las células en el citoplasma, aunque también se han
encontrado componentes del virus dentro del núcleo
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de las células.

Paciente sospechoso de estar infectado con
virus zika: presenta exantema o elevación
de temperatura corporal axilar (>37,2 ºC) y
uno o más de los siguientes síntomas (que
no se explican por otras condiciones
médicas): Artralgias o mialgias, conjuntivitis
no purulenta o hiperemia conjuntival,
cefalea o malestar general.
Paciente
confirmado: sospechoso con
pruebas de laboratorio positivas para la
detección específica de virus Zika.

Sólo el 20-25% de las personas infectadas por el
virus presentan síntomas, que son leves (fiebre no
muy alta, dolores musculares y articulares, dolor de
cabeza, erupción) y desaparecen por sí solos. Se
trata con medidas generales, similares a las que se
emplean en el tratamiento de un catarro común:
reposo, antipiréticos y muchos líquidos.
Además de la transmisión por la picadura de los
mosquitos en zonas tropicales con presencia del
virus, podría producirse la transmisión perinatal
transplacentaria o durante el parto, si la madre está
infectada y tiene presencia del virus en la sangre en
ese momento. La transmisión de la infección
por transfusiones de sangre podría ser teóricamente
posible (En el brote de Zika que se produjo en la
Polinesa Francesa 2013 - 2014 se encontró virus
Zika en la sangre del 3% de los donantes
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analizados, aun estando asintomáticos).
El diagnóstico de confirmación de laboratorio se
basa en el aislamiento del virus o en su detección
por PCR en sangre o a través de pruebas
serológicas, pero se debe tener en cuenta la posible
reactividad cruzada con el dengue en estas, sobre
todo si ha habido infección previa. La detección
temprana permitirá la identificación de las cepas
virales circulantes, la caracterización adecuada del
brote y la implementación de una respuesta
proporcionada.
NO SE HA DESCRITO HASTA LA FECHA
NINGÚN CASO MORTAL POR VIRUS ZIKA.

DAVID GERMAN QUISPE ARANDA M.T.

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otra dificultad es que los virus crecen y se pueden aislar solo en sistemas vivos (líneas celulares) una alternativa engorrosa y costosa. anticuerpos o segmentos genómicos virales. si se desea observar el virus se necesitaría de un microscopio electrónico siendo su uso muy limitado por razones prácticas y económicas. Debido a esto el diagnóstico de las enfermedades virales se realiza de manera general por procedimientos de detección de antígenos. DIAGNOSTICO ZIKAV Dado que la enfermedad por virus Zika suele ser leve.  III. Métodos directos: determinan la presencia de un virus o de alguno de sus componentes (ácidos nucleicos. Aunque el período de viremia aún no ha sido plenamente establecido. etc. Las muestras de tejido de ambos recién nacidos 5 resultaron positivas para virus Zika. correspondientes a dos abortos y a dos recién nacidos a término que fallecieron en las primeras 24 horas de vida.  En octubre de 2015. el ARN viral ha sido detectado en suero hasta 10 días después de iniciados los síntomas.) Métodos indirectos: permiten detectar la presencia del virus a través de métodos serológicos es decir se basa en la determinación de la respuesta inmune humoral del paciente 6 contra el virus. Aunque todavía no está claramente establecida la etiopatogenia ni los factores 4 de riesgo. Conservación de la muestra: I.II. EVIDENCIA DE COMPLICACIONES  Existen hallazgos consistentes de una asociación entre el virus Zika y la aparición del SÍNDROME DE GUILLAIN-BARRÉ.7 molecular) DAVID GERMAN QUISPE ARANDA M. NUEVAS Evidencia de TRANSMISIÓN VERTICAL del virus Zika. DIAGNOSTICO del VIRUS POR EL LABORATORIO El diagnostico de laboratorio de una infección viral presenta dificultades como por ejemplo. a través de la técnica RT-PCR en 4 casos de malformación congénita.T. En las fases tempranas de la infección cuando existe mayor excreción viral las pruebas ideales son: aislamiento viral y pruebas de detección directa. los síntomas iniciales pueden pasar desapercibidos lo cual disminuye la oportunidad para la toma de la muestra. mientras que en etapas tardías es más práctico tomar muestras de suero para detectar la presencia de anticuerpos. 2 .  Congelada (-10 a -20 °C) si será procesada después de 48 horas o durante un periodo no mayor de 7 días. se informó sobre la detección de genoma de virus Zika.  Refrigerada (2–8 °C) si será procesada (o enviada al laboratorio de referencia) antes de 48 horas. en Brasil se notificó la detección de un incremento inusual de recién nacidos con MICROCEFALIA y calcificaciones cerebrales en los que se 4 presume infección intrauterina ZIKAV. en Brasil en enero de 2016.  Congelada (-70 °C) si será procesada después de Detección de Componentes Virales (Test una semana.

Previene la contaminación de la muestra. Se recomienda la confirmación de los resultados positivos del test serológico con el PRNT (test de neutralización mediante reducción en placa). y en menor proporción con el virus del Nilo Occidental. DAVID GERMAN QUISPE ARANDA M. determinando así el poder neutralizante de un 11 suero es decir determinar su título de anticuerpos.En los primeros 5 días tras el establecimiento del cuadro clínico de una infección por virus zika (fase aguda) se puede lograr la detección del RNA viral a partir de SUERO y mediante: Reacción en Cadena de la Polimerasa en tiempo Real o RTPCR El RTPCR es un test molecular que a diferencia del PCR convencional. se han encontrado pacientes con historia previa de infección por otros flavivirus: sobre todo con el dengue. una técnica sensible que se basa en la reacción de anticuerpos específicos con el virus. si el suero contiene anticuerpos específicos contra el virus. se debe evidenciar al menos un aumento de cuatro veces del título de anticuerpos neutralizantes frente a virus Zika. 3 . II. de hecho. Detección Mediante Respuesta Inmune (test Serológico) En suero. se ha demostrado que sueros de individuos con historia previa de infección por otros flavivirus (especialmente dengue y fiebre amarilla) pueden 10 cruzar en estos ensayos. El componente genómico . En infecciones primarias (primera infección con un flavivirus) se ha demostrado que las reacciones cruzadas con otros virus genéticamente relacionados son mínimas. La neutralización se puede determinar por medio de la inhibición del efecto citopatico. que ante infección por ZIKAV elevan hasta cuatro veces los títulos de anticuerpos neutralizantes. precisa y rápida. La suspensión de virus se mezcla con un suero y se incuba a 37°C por una hora. La PCR en Tiempo Real es la tecnología más actual.9 anticuerpos (con un ensayo cuantitativo).T. la detección de anticuerpos IgM específicos para ZIKAV es posible por ensayos de ELISA o inmunofluorescencia a partir del día 5-6 días tras el establecimiento del cuadro clínico (sintomatología). prescinde de la posterior electroforesis. La interpretación de los ensayos serológicos tiene una relevancia especial para el diagnóstico de ZIKAV. habitual en una PCR convencional y los resultados van apareciendo en un monitor a medida que se realiza la reacción.RNA del ZIKV ha sido detectado también en orina durante un periodo de tiempo prolongado de la fase aguda. se recomienda la toma de una segunda muestra entre una y dos semanas después de la primera muestra para demostrar seroconversión (negativo a positivo) ó incremento hasta cuatro veces el título de En la confirmación de los resultados positivos con el PRNT. Ya que un suero único en fase aguda es presuntivo. Sin embargo. ofrece una mayor especificidad para detección de anticuerpos neutralizantes (IgG) . evita la infección. la reacción cruzada también ha sido documentada. Si bien esta técnica. por lo que podría considerarse como una muestra alternativa. los procesos de amplificación y detección se producen de manera simultánea y la cantidad de ADN sintetizado se puede medir en 8 cualquier momento de la reacción.

que detectan RNA viral y otras pruebas para detectar anticuerpos específicos en el suero (ELISA para detectar la inmunoglobulina IgM). en una sola muestra. Con respecto a la vacuna contra ZIKV.T. La sensibilidad y la especificidad de este examen son cercanas al 99%. V. la mejor sensibilidad esta dada en aquellas plataformas que utilizan como antígeno el virus completo en comparación con aquellas que 15 utilizan proteínas (o péptidos) recombinantes. 3. En diagnóstico del virus Zika tiene más interés epidemiológico que para el tratamiento de un paciente concreto. Sin embargo. ahora están en proceso de 17 su aprobación". trombocitopenia y ligera elevación de enzimas como Gamma glutamil transferasa y de parámetros inflamatorios (Proteína C reactiva. hasta el momento no se cuenta con estuches comerciales validados para determinación serológica de ZIKAV. Lo aconsejable es realizar esta técnica durante los primeros 10 días de presentar los síntomas. Los resultados 14 se obtienen en unas 48 horas. . puesto que los 12 resultados tardan en obtenerse entre 4-14 días. “En su diagnóstico diferencial debe incluirse el dengue y virus Chikungunya” 4 DAVID GERMAN QUISPE ARANDA M. El prospecto más claro es el de un consorcio de la farmacéutica Inovio Pharmaceuticals Inc.” También se puede analizar la presencia del material genético del virus en saliva o en orina. Las pruebas diagnósticas deberían incluir una muestra de suero de fase aguda recogida tan pronto como sea posible después de la aparición de la enfermedad y una segunda muestra recogida de 2 a 3 semanas después de la primera. pensando en octubre como meta. incluso tras la resolución de los síntomas. IV. afirma que su centro de investigaciones "ya desarrolló el diagnóstico de zika. de agudizarse los síntomas se necesita consulta médica. 4. ACTUALIDAD del ZIKAV La Universidad de Stanford (EEUU). (EEUU). 13 fibrinógeno y ferritina). donde sí puede permanecer durante más días. Las pruebas diagnósticas incluyen RTPCR en muestras de suero de fase aguda. Científicos rusos tienen han previsto antes de marzo desarrollar el primer método práctico de diagnóstico rápido de la fiebre del Zika. que podría tener lista una vacuna para uso en caso de emergencia antes de fin 16 de año. pues el virus puede afectar el normal desarrollo del cerebro del feto y causar microcefalia La mejor profilaxis contra el zika consiste en evitar las picaduras de mosquitos. consumir mucho líquido y tomar fármacos contra el dolor y la fiebre. chikungunya y zika. CONCLUSIONES El mal provocado por el ZIKAV generalmente transcurre sin complicaciones serias ni desenlaces letales y no requiere ningún tratamiento específico. Según el científico Maléev del Instituto Central de Epidemiología del Servicio ruso. La población que corre el mayor riesgo son las mujeres embarazadas. En cualquier caso. El infectado debe descansar bastante tiempo. Se ha descrito reactividad cruzada con otras virosis por flavivirus como el dengue. EXAMENES COMPLEMENTARIOS Se han informado alteraciones típicas de laboratorio asociadas con la infección por ZIKV como leucopenia. 2. desarrollo un método diagnostico que permite detectar los virus del dengue. La determinación de IgM puede hacerse por diferentes técnicas (ELISA o IF).“Debido a esta reactividad cruzada entre flavivirus los resultados de la serología deben interpretarse con cuidado. “Es una técnica muy interesante porque permite diferenciar a pacientes que pueden tener una enfermedad u otra”. 1.