CUES

TIONA

1).
SEALE LAS DIFERENCIAS ENTRE
CELULAR DE LAS BACTERIAS GRAM POSITIVAS Y NEGATIVAS

LA

PARED

La pared celular de las bacterias Gram positivas est conformada por dos componentes,
cidos: teicoico y teicurnico y polisacridos, mientras que las bacterias Gram negativas
poseen una membrana externa constituida por una bicapa cuya hoja externa est
compuesta de lipopolisacridos y una hoja interna con composicin similar a la de la
membrana celular.
2). SEALE 5 DETERMINANTES DE PATOGENICIDAD DE LAS BACTERIAS GRAM
POSITIVAS Y 5 DE LAS BACTERIAS GRAM NEGATIVAS
Bacterias Gram positivas (+)

Gnero estafilococos:
Coagulasa: localiza los procesos infecciosos, contribuye a caracterizar los
cuadros clnicos y ayuda en el laboratorio a la identificacin.
Hidrolasas (factor de diseminacin): nucleasas, lipasas, hialuronidasas,
proteasas.
Exotoxinas: enterotoxinas A, B, C, E (producen intoxicacin alimentaria)
Gnero estreptococos:
Capsula: resiste la fagositosis (la capsula le da aspecto liso a la bacteria y el
fagosito no es capaz de adherirse). El streptococcus neumoniae tiene como
principal factor de patogenicidad la presencia de capsula. Dentro de la
poblacin hay portadores, casos en que este mricoorganismo se encuentra
encapsulado.
Protena M: presente en streptococcus pyogenes.
Carbohidrato C: estructuras que se proyectan a exterior de la pared de estos
microorganismos. Esta estructura permite clasificarlos (clasificacin de
Lancefiel) en grupos de la A a la O. el habitad normal de grupo A es el humano
y el ganado bovino (producen cuadros genitourinario y postparto).
cido lipoteicoico: caracterstico de la pared de las bacterias gram positivas.
Hemolisinas:
S: polipptido estable al oxgeno, no antignico.
O: protena lbil al oxgeno, antignica, se utiliza para determinar si
una persona tuvo o no infeccin por streptococcus pyogenes.
Enzimas: fibrinolisisna, hialuronidasa.
En bacilos Gram positivos:
Productos solubles excretados: listerolisina O (LLO), es una hemolisina. Su
prototipo es la estreptolisina O y la pneumolisina de los estreptococos. Rompe
la membrana del fagosoma y permite la reproduccin de la bacteria en un
medio menos hostil, el citoplasma de la pared husped.
Adems, inhibe el procesamiento del antgeno mediado por macrfagos.
Recientemente se ha demostrado que genera un influjo de calcio extracelular
que estimula el ingreso de la bacteria en las clulas epiteliales. Codificada por
el gen hly.

Internalinas: se conocen dos protenas A y B, que estn involucradas en el

ingreso a las clulas.
Siderforos: componentes bacterianos que captan hierro, mineral
indispensable para la supervivencia bacteriana.

Bacterias Gram negativas (-)

Endotoxinas
Lipolisacridos de la pared celular
Cpsula
Pptidoglicano

3). FUNDAMENTOS DE LA COLORACION GRAM

Los fundamentos de la tcnica se basan en las diferencias entre las paredes celulares de
las
bacterias
gram
positivas
y
gram
negativas.
Ambos tipos de bacterias se tien diferencialmente debido a estas diferencias
constitutivas de su pared. La clave es el pptidoglucano, ya que es el material que
confiere su rigidez a la pared celular bacteriana, y las gram positivas lo poseen en mucha
mayor
proporcin
que
las
gram
negativas.
La diferencia que se observa en la resistencia a la decoloracin se debe a que la
membrana externa de las gram negativas es soluble en solventes orgnicos, como por
ejemplo
la
mezcla
de
alcohol/acetona.
La capa de pptidoglicano que posee es demasiado delgada como para poder retener el
complejo de cristal violeta/yodo que se form previamente, y por lo tanto este complejo
se escapa, perdindose la coloracin azul violcea. Pero por el contrario, las gram
positivas, al poseer una pared celular ms resistente y con mayor proporcin de
pptidoglicanos, no son susceptibles a la accin del solvente orgnico, sino que ste
acta deshidratando los poros, cerrndolos, lo que impide que pueda escaparse el
complejo cristal violeta/yodo, y manteniendo la coloracin azul violeta.
4). CUL ES LA PREPARACIN DE LOS COMPONENTES DE LA COLORACIN GRAM?

Violeta de Genciana: El violeta de metilo se obtiene por reaccin de condensacin

de la cetona de Michler (4,4-Bis-dimetilaminobenzofenona) con N,N-dimentilanilina
en presencia de clorato de fosforilo.
Lugol: Consiste en 20 gramos de yodo metlico y 40 gramos de yoduro potsico,
disueltos en 1 litro de agua destilada. El yoduro potsico facilita la disolucin del
yodo diatmico, debido a la formacin de iones triyoduro I 3-. El lugol se utiliza en la
tincin de gram como mordiente.
Acetona: Se utiliza para disolver la pared celular de las bacterias.
Safranina: Es un colorante biolgico de contraste que se utiliza en la tincin de gram
para proporcionar un color violeta ms intenso a las bacterias gram+ y tie de rosa
a las bacterias gram-. Su frmula qumica es C20H19ClN4.