Biocatalizadores: Los organismos vivos para mantenerse tienen que realizar un permanente intercambio de sustancia,

energa e informacin con el medio natural. Esto implica la transformacin de las sustancias qumicas que los organismos
incorporan desde el medio, as como la constante renovacin de sus componentes estructurales. A todo este conjunto de
transformaciones se le da el nombre de metabolismo.
Los agentes activos del metabolismo son los biocatalizadores o sistemas
biocatalticos, cuya funcin es acelerar las velocidades de las reacciones de forma tal que, no solo se produzcan
rpidamente, sino adems, en condiciones compatibles con la vida.
Los sistemas biocatalticos estn constituidos por una protena especializada en la funcin de catlisis llamada enzima y en
muchos casos por otro componente de naturaleza no proteica denominado cofactor.
El cofactor es qumicamente heterogneo y de poca complejidad estructural y contribuye de forma muy diversa a la catlisis.
Por su parte las enzimas comparten todas las propiedades del resto de las protenas, su diferencia esencial est dada por el
hecho de que estas realizan la transformacin de las sustancias que se les unen.
Reacciones qumicas y catalizadores
Cuando una o ms sustancias qumicas se ponen en contacto, colocadas en condiciones adecuadas que conducen a una
transformacin que da como resultado la aparicin de una nueva sustanciaDebemos recordar que para que se produzca una
reaccin qumica deben cumplirse ciertas condiciones, como son:
Que los reactivos se pongan en contacto.
Que por su naturaleza qumica sean capaces de reaccionar.
Que choquen sus molculas con la fuerza suficiente y en la direccin adecuada.
En las reacciones qumicas basado en el principio de conservacin de la materia slo se produce un reordenamiento o
reagrupamiento de los elementos que constituyen las sustancias reaccionantes (sustrato), que de esa forma dan origen a
una nueva sustancia (producto).
Las reacciones qumicas se efectan a una determinada velocidad, que depende de diversos factores.
Toda reaccin qumica, se acompaa de un cambio en el contenido energtico del sistema reaccionante; este cambio
determina tanto la direccin como la velocidad y el alcance de las reacciones.
Energa: es la capacidad de un sistema de realizar un trabajo til.Los tomos y las molculas que estn formando los
compuestos del organismo poseen energa potencial por lo cual pueden intervenir en reacciones que liberan esa energa,
manifestndose en su habilidad para formar o romper enlaces qumicos.
La variante de energa potencial que se presenta en los sistemas biolgicos y bioqumicos es la energa libre (G) que
depende de dos factores la entalpa (Variacin en el contenido calrico entre los reactantes y los productos) y la entropa(S)
(grado de desorden de un sistema)
La entalpa se relaciona con el nivel calrico si absorben o liberan calor las reacciones y pueden ser endotrmicas (H +) y
exotrmicas (H-)
Reaccin exotrmica se libera calor y AH es negativo, los productos tienen menor energa que los reactantes
Reaccin endotrmica se absorbe calor y AH es positivo.
A+BC
Como se muestra en la siguiente ecuacin el curso de una reaccin qumica, donde las sustancias reaccionantes son A y B,
que se transforman en el producto C. Cada una de estas sustancias tiene un nivel energtico Las sustancias reaccionantes
incrementan su energa en el transcurso de la reaccin para formar el complejo activado.
La energa que hay que suministrar a las sustancias reaccionantes para formar el complejo activado se denomina energa de
activacin, acta como una barrera energtica para el desarrollo de la reaccin, de ah que a mayor energa de activacin,
menor ser la velocidad de la reaccin y viceversa.
La diferencia de energa entre las sustancias reaccionantes y los productos es el valor de la energa de reaccin
Si el nivel energtico de los productos es inferior al de las sustancias reaccionantes, la reaccin es exergnica, donde parte
de la energa se ha cedido al entorno. Este tipo de reaccin se produce de forma espontnea.
Cuando el nivel energtico de los productos es superior al de las sustancias reaccionantes, la reaccin es endergnica, es
decir, es necesario suministrar energa para que se produzca la misma. Este tipo de reaccin no es espontnea.
Existen varios procedimientos para provocar el aumento de la velocidad de la reaccin, uno de ellos es la adicin de un
catalizador.
Todas las funciones que realizan los organismos vivos tienen su fundamento en un gran nmero de reacciones qumicas
que se agrupan de manera funcional y dan lugar a los procesos encargados de mantener, desarrollar y perpetuar en cada
organismo. Por lo que cada una de las reacciones qumicas que ocurren en el organismo es catalizadas

Catalizadores
Son sustancias que tienen en comn la propiedad de aumentar la velocidad de las reacciones qumicas, sin que su
estructura o concentracin se modifique como resultado de la reaccin.
Formas de actuacin de los catalizadores
Los catalizadores aceleran la velocidad de las reacciones realizando los siguientes efectos:
Fijan y concentran sobre su superficie las sustancias reaccionantes y las orientan en el espacio.
Interactan con las sustancias reaccionantes, creando tensiones en su interior, que debilitan sus enlaces de modo que
es ms fcil romperlos.
Los catalizadores son de dos tipos:
Catalizadores abiticos o no biolgicos, que son aquellos que su actividad generalmente no est relacionada con los
seres vivos, entre los que encontramos: platino, nquel, cido sulfrico e hidrxido de sodio entre otros y
Los catalizadores biticos o biocatalizadores, que son aquellos sintetizados por los seres vivos. Estos son protenas
especializadas denominadas enzimas, aunque debemos sealar que existen cidos ribonucleicos con actividad
enzimtica, que se denominan ribozimas.
Las enzimas son catalizadores generalmente de naturaleza proteica, especficos, verstiles, de gran eficiencia cataltica y
susceptible de ser regulados en su actividad.
Se define como eficiencia cataltica, la relacin entre la velocidad de la reaccin catalizada y la no catalizada.
Orientaremos a continuacin las caractersticas fundamentales de cada uno de los tipos. Observen la comparacin entre los
catalizadores abiticos y los biticos:

Catalizadores Abiticos

Los catalizadores abiticos, presentan menor complejidad estructural ya que generalmente son metales, sales,
cidos o bases.
Presenta menor especificidad, ya que solo tienen algn grado de especificidad en cuanto al tipo de reaccin que
catalizan, por ejemplo: el in permanganato se utiliza en reacciones de oxidacin.
Presenta una menor eficiencia cataltica.
Producen menores aumentos de las velocidades de las reacciones catalizadas.
Catalizadores Biticos.
Los catalizadores biticos, presentan mayor complejidad estructural al ser de naturaleza proteica con una
estructura tridimensional compleja.
Presenta mayor especificidad al ser especficos sobre el sustrato que acta y el tipo de reaccin que catalizan
incluso hasta la serie estrica.
Elevada eficiencia cataltica.
Las enzimas producen un aumento de la velocidad de la reaccin generalmente hasta un milln de veces.
Sistemas biocatalticos: Las protenas realizan mltiples funciones en los seres vivos, de contraccin, de transporte, de
regulacin, de sostn, de defensa, etc. En todos los casos el fundamento de su actividad es un mecanismo de
reconocimiento molecular. Lo que distingue a las enzimas de las dems protenas es que una vez producido el
reconocimiento molecular del sustrato, se realiza su transformacin, como consecuencia de diferentes interacciones entre la
enzima y su sustrato, este experimenta un reordenamiento de sus elementos constituyentes debido a la ruptura y formacin
de algunos enlaces qumicos. La sustancia que resulta de la accin de la enzima sobre el sustrato recibe el nombre de
producto.
Las reacciones qumicas que ocurren en los organismos vivos presentan generalmente una energa de activacin tan alta
que en condiciones compatibles con la vida ocurriran a velocidades casi nulas, con lo cual la vida sera prcticamente
imposible.
Para esas transformaciones en muchas ocasiones es suficiente con la participacin dela protena enzimtica, pero en otros
casos se requiere el concurso de otros elementos que reciben en general el nombre de cofactores.Estos compuestos
pueden ser iones inorgnicos o compuestos orgnicos de bajo peso molecular. En este ltimo caso reciben el nombre de
coenzimas. Si bien la protena enzimtica vuelve al estado inicial al final de la misma reaccin, las coenzimas requieren para
ello de una reaccin posterior. Las protenas enzimticas y sus cofactores correspondientes constituyen los sistemas
biocatalticos.
Las especificidades de accin y de sustrato estn determinadas fundamentalmente por la parte protenica del sistema
biocataltico. Tambin la sensibilidad a la temperatura, a los cambios de la concentracin de H+ (pH) y la solubilidad
corresponden a la parte protenica y no a los cofactores. Sin embargo los cofactores influyen de forma importante en la
eficiencia y las propiedades cinticas de los sistemas biocatalticos.
Mecanismo bsico de accin de las enzimas

Cada enzima al catalizar una reaccin lo hace de una forma particular pero existen algunos hechos que son de tipo general y
que se manifiestan en todas las enzimas.
Todas las reacciones enzimticas se realizan al menos en dos etapas. Una primera etapa en la cual se produce la unin
fsica entre la enzima (E) y el sustrato (S) y que da origen al complejo enzima-sustrato (ES). Este complejo se forma de
manera reversible, o sea, que puede descomponerse nuevamente dando origen al sustrato y a la enzima libre. No debe
confundirse el complejo enzima sustrato con el complejo activado que fue tratado anteriormente.
Una vez formado el complejo enzima-sustrato este puede realizar la transformacin del sustrato (segunda etapa) dando
origen al producto (P) y a la enzima libre que est en condiciones de volver a iniciar el proceso.
El punto crucial de este mecanismo bsico es la existencia del complejo enzima-sustrato. Su existencia fue propuesta por
primera vez por Henry en 1905 y a partir de ese momento se han reunido una importante serie de indicios de la existencia
del mismo.
Centro activo
La existencia del complejo enzima-sustrato y la caracterstica de que la mayora de los sustratos presentan un tamao varias
veces menor que la estructura de la enzima, lleva a la conclusin de que la enzima solo entra en contacto con el sustrato en
una pequea zona especfica de su voluminosa estructura. Esta pequea porcin de la enzima donde se produce la unin
con el sustrato recibe el nombre de centro activo.
Aunque las enzimas difieren grandemente en estructura, especificidad y modo de catlisis, se puede establecer un nmero
de generalizaciones con respectoa la estructura de los centros activos.
Caractersticas del centro activo de una enzima
1. Representa una porcin pequea del volumen total de la enzima. Muchos de los residuos de aminocidos de la
enzima no entran en contacto con el sustrato.
2. El centro activo de una enzima tiene un conjunto de grupos qumicos ordenados espacialmente de forma precisa.
Esto hace que el sustrato quede unido al mismo de forma tan ntima que prcticamente casi ninguna otra molcula
puede unirse.
3. Es una entidad tridimensional. Este se presenta generalmente como una cavidad constituida a expensas de los
repliegues que la cadena polipeptdica forma al establecer su estructura terciaria.
4. Los aminocidos del centro activo no necesariamente estn adyacentes unos a otros en la cadena polipeptdica
lineal. El acercamiento se produce como consecuencia del plegamiento de la cadena.
5. Est situado superficialmente en la enzima, debido a esto, permite el accesode las molculas del sustrato con
relativa facilidad.
6. Los grupos que intervienen en la formacin del centro activo realizan diferentes funciones.
En la estructura del centro activo se pueden distinguir varios componentes cada uno de los cuales contribuye a la funcin
general pero de forma diferente.
a) Eje peptdico: Formado por la parte montona de la estructura polipeptdica cuyos pliegues y repliegues
contribuyen de manera importante a dar la forma tridimensional del centro activo.
b) Grupos de ambientacin: Son cadenas laterales de aminocidos apolares que se encuentran en el centro activo y
contribuyen a que el mismo no permita la entrada del agua. Esto provoca cambios en las propiedades catalticas de
otros grupos y adems refuerza las interacciones dbiles entre la enzima y el sustrato.
c) Grupos de fijacin o unin: Son cadenas laterales de aminocidos que presentan grupos funcionales capaces de
establecer interacciones especficas con el sustrato.
Estas interacciones suelen ser de tres tipos fundamentales:
- Puentes de hidrgeno que se establecen entre grupos polares de las cadenas lateralesde los aminocidos como la
serina, treonina, tirosina, etc. con grupos polares del sustrato. Los puentes de hidrgeno son adems un factor importante en
la orientacin del sustrato en su entrada al centro activo pues ellos tienen carcter direccional que no poseen las otras
interacciones.
- Enlaces salinos o inicos que se pueden formar entre grupos que presentan cargas elctricas de la cadena lateral de
aminocidos como el asprtico, glutmico, histidina, arginina, lisina, con grupos de carga opuesta en el sustrato.
- Fuerzas de Van der Waals o fuerzas residuales que se establecen entre grupos del centro activo y del sustrato que se
localizan muy cerca unos de otros y no tienen caractersticas que les permitan otro tipo de interaccin.
Estos tres componentes, el eje peptdico, los grupos de ambientacin y los grupos de unin o fijacin, son determinantes en
la etapa de unin de la enzima con el sustrato. Esta unin est determinada por dos factores principales; la
complementariedad espacial o estrica que se establece entre la conformacin del centro activo y la estructura del sustrato y
la complementariedad qumica entre los grupos del centro activo y los del sustrato.

d) Grupos catalticos: Al igual que los anteriores son cadenas laterales de aminocidos que participan en la estructura
del centro activo pero que son los que estn implicados directamente en la transformacin del sustrato. Los que ms
frecuentemente cumplen esta funcin son el imidazol de la histidina, hidroxilo de la serina, el grupo sulfihidrilo de la
cistena, el grupo carboxilo del asprtico y el glutmico. Estos son los grupos que intervienen en la segunda etapa de
la reaccin o etapa de transformacin. Sin embargo, no se puede olvidar que si la primera etapa no ha sido llevada a
cabo satisfactoriamente, la segunda etapa se ver igualmente alterada, pues no puede haber una adecuada
transformacin si la unin ha sido deficiente.
El centro activo es una estructura dinmica. Teniendo en cuenta que las fuerzas que mantienen la estructura del centro
activo son fundamentalmente interacciones dbiles, en un conjunto de molculas de una misma enzima pueden existir
centros activos que presenten diferentes estados conformacionales interconvertibles, desde aquellos que facilitan
grandemente la unin al sustrato hasta los que prcticamente no permiten la entrada del sustrato pasando por todos los
estados intermedios imaginables.
Especificidad enzimtica: Teniendo en cuenta las caractersticas estructurales y funcionales del centro activo se infiere que
a un centro activo determinado solo podr unirse un sustrato (o un nmero muy limitado de ellos que presenten una
estructura muy similar), denominndose a esta propiedad del centro activo, y por lo tanto de las enzimas, especificidad de
sustrato. Laespecificidad de sustrato puede ser absoluta, cuando solamente existe un sustrato capazde ocupar el centro
activo de la enzima; o relativa si se trata de un grupo de sustratos.
Una vez que se ha producido la unin del sustrato al centro activo solamente alguno de los enlaces del sustrato quedar al
alcance de los grupos catalticos de la enzima. De esta forma la enzima solo podr realizar una transformacin de ese
sustrato, aunque este sea susceptible de varias transformaciones. A esta propiedad del centro activo y por lo tanto de la
enzima se le da el nombre de especificidad de accin. Generalmente las enzimas que tienen una alta especificidad de
accin y de sustrato resultan ser enzimas claves en el metabolismo celular.
Modificaciones del centro activo: Debido a las caractersticas estructurales del centro activo existen numerosos factores
quepueden provocar alteraciones de este, y por lo tanto, afectarn la funcin de la enzima. Todoslos agentes capaces de
modificar la estructura tridimensional de las protenas al actuar sobrelas enzimas provocarn la distorsin del centro activo
que depende de la estructura terciaria delas enzimas. Es por esto que todos los agentes desnaturalizantes disminuyen la
actividadenzimtica. Por otra parte los agentes que, como la concentracin de iones hidrgeno (medidacomo pH), afectan el
grado de disociacin de los grupos ionizables de las cadenas laterales delos aminocidos, pueden alterar la distribucin de
cargas elctricas del centro activo y portanto modificar la actividad de las enzimas; la presencia en la solucin de anlogos
del sustrato(sustancias relacionadas estructuralmente con el sustrato de la enzima, pero que no son susceptiblesde ser
transformados por esta) pueden ocasionar una prdida de la actividad enzimtica, si estas sustancias llegan a unirse al
centro activo y lo mantienen ocupado.
Clasificacin y nomenclatura de las enzimas: Existen dos propiedades fundamentales de las enzimas y que se derivan de
las caractersticasdel centro activo: la gran eficiencia cataltica y la alta especificidad. Esta ltima es en susdos aspectos la
que sirve de fundamento a la clasificacin y nomenclatura de las enzimas.
Clasificacin: Se toma como fundamento la especificidad de accin, con lo cual se establecen seisgrupos fundamentales
teniendo en cuenta la reaccin global que ellas catalizan. Estosgrupos o clases principales se dividen en subclases y
subsubclases teniendo en cuentaotras caractersticas del tipo de reaccin como son los grupos involucrados, los
cofactoresnecesarios, etc.
Los grupos principales y su definicin son:
1. Oxidoreductasas: Son aquellas enzimas que catalizan las reacciones de oxidorreduccin,es decir, la transferencia
de electrones o sus equivalentes entre un donante y un aceptor.
2. Transferasas: Catalizan la transferencia de un grupo qumico entre un donante y unaceptor. Se excluyen aquellas
que transfieren electrones o sus equivalentes pues pertenecena la clase anterior, y aquellas en que el aceptor del
grupo es el agua pues pertenecena la clase siguiente.
3. Hidrolasas: Catalizan la ruptura de enlaces qumicos con la participacin de las molculas del agua.
4. Liasas: Catalizan reacciones en las cuales se produce la adicin o sustraccin degrupos qumicos a dobles enlaces.
5. Isomerasas: Catalizan la interconversin de dos ismeros.
6. Ligasas: Catalizan la unin covalente de dos sustratos utilizando para ello la energade hidrlisis de
nuclesidostrifosfatados, generalmente el ATP.
Nomenclatura
Existen dos tipos de nomenclatura: la sistemtica y la recomendada. La recomendadaes una forma abreviada de la
sistemtica, se utiliza comnmente y sobre todo en textospara estudiantes. En ambos casos se tiene en cuenta tanto la
especificidad de accin comola de sustrato y el nombre de la enzima termina en el sufijo asa.

Para utilizar la nomenclatura recomendada, que es la que se utiliza en este libro, es necesarioconocer algunos subgrupos de
enzimas por lo cual se describirn ahora los ms utilizados.
1. Oxidoreductasas:
a) Deshidrogenasas: Sustraen tomos de hidrgeno (generalmente dos) de los sustratosy los transfieren a una
molculaaceptora que no es el oxgeno.
b) Oxidasas: Oxidan los sustratos utilizando el oxgeno como aceptor de electrones.
c) Hidroxilasas: Catalizan la introduccin de funciones hidroxilo en sus sustratos utilizandooxgeno molecular como
donante.
2. Transferasas:
a) Quinasas: Catalizan reacciones de transferencia de grupos fosfatos en las cualesintervienen nuclesidos di y
trifosfatados.El resto de las transferasas reciben nombres derivados del grupo que transfieren:transaminasas de grupos
amino; transmetilasas de metilos; transcarboxilasas decarboxilos, etc.
3. Hidrolasas: Es el ms simple para nombrar pues basta con hacer terminar el nombredel sustrato en el sufijo asa.
4. Liasas: Pueden ser las ms difciles de nombrar. Tenemos el caso de las hidratasas,que adicionan agua a dobles
enlaces. Esta enzima se nombra fumricohidratasa quees el nombre correcto o simplemente fumarasa.
Cuando actan en reacciones biosintticas reciben el nombre de sintasas.
5. Isomerasas: Reciben diferentes nombres segn los tipos de ismeros que intervienen en la reaccin.
Como regla se reserva el nombre de isomerasas para las enzimas que interconviertenismeros de funcin. Las que
interconvierten ismeros de posicin se designan mutasas.
6.Ligasas: Se le conoce en general como sintetasas y para nombrarlas generalmente se utiliza el nombre del producto en
vez del sustrato.
Es importante recordar siempre que las enzimas son protenas cuya funcin es la de catalizar reacciones por lo que debe
existir una correspondencia entre el nombre de la enzima y la reaccin que ellas catalizan. Por tanto conociendo la reaccin
se puede deducir el nombre y a partir del nombre puede inferirse la reaccin.
Cintica de las reacciones enzimticas
El estudio de la velocidad de las reacciones catalizadas por una enzima requiere de algunas condiciones para llevarse a
cabo y poder interpretar sus resultados adecuadamente.
Son varios los factores que pueden modificar la velocidad de la reaccin y solo puede estudiarse un factor a la vez; se debe
cuidar que todos los dems factores permanezcan constantes. Sin embargo ni la concentracin del sustrato ni la del
producto se puede mantener constante pues su variacin es precisamente el ndice que asegura que la reaccin est
ocurriendo. Para salvar esa dificultad se introdujo el concepto de velocidad inicial (Vo) que es la velocidad de la reaccin
cuando an no se ha consumido 10% del sustrato inicial. Esto obliga a realizar primero algunos ensayos a diferentes
tiempos de incubacin para que pueda fijarse el intervalo necesario que asegure que en el estudio se miden velocidades
iniciales.
La velocidad inicial debe medirse por la variacin de la concentracin del producto por unidad de tiempo, siempre que esto
sea posible, pero en ocasiones no se dispone de los procedimientos exactos y se hace midiendo la variacin de la
concentracin del sustrato
.
Los factores que pueden modificar la velocidad de la reaccin son: la concentracin de la enzima, del sustrato, de los
cofactores y de iones H+ (expresada como unidades de pH), as como la temperatura y la presencia de inhibidores y
activadores.
Efecto de la concentracin de la enzima
La obtencin de una lnea recta que pasa por el origen de coordenadas indica que existe una proporcin directa entre la
velocidad de la reaccin y la concentracin de la enzima. Esta relacin constituye todo el fundamento de los estudios
cinticos.
Efecto de la concentracin de sustrato
Este resultado se puede explicar si se supone que la reaccin se produce en dos etapas:
1. La unin de la enzima (E) con el sustrato (S) con la formacin de un complejo

2. La transformacin del sustrato en producto (P) con la liberacin de la enzima y que resulta la etapa ms lenta.
No siempre es posible medir la concentracin de ES en cada momento de la reaccin, debido a esto es necesario deducir
una ecuacin que permita calcular la velocidad en funcin de variables que puedan ser medidas. Como la formacin de ES
es reversible y se descompone lentamente en producto, se establecer un equilibrio entre E, S y ES. Este equilibrio se
caracteriza cuantitativamente por una constante de disociacin del complejo enzima sustrato, que recibe el nombre de
constante de Michaellis (Km).La enzima libre (E) ser igual a la enzima total (Et) menos la que se encuentra en forma de
ES.Combinando todas estas ecuaciones se llega a la ecuacin de velocidad, tambin conocida como ecuacin de Michaellis.
Se puede observar que si la curva tiene siempre la misma forma la diferencia entre ellas estar dada por los valores de Vm y
Km de ah que ellos se conozcan como los parmetros cinticos de la ecuacin de Michaellis.
Podemos analizar brevemente el significado de cada uno de ellos. La Vm se alcanzacuando las molculas de sustrato han
ocupado todos los sitios activos de todas las molculasde la enzima, por lo que la velocidad de la reaccin en ese momento
solo depende de la capacidad que tenga la enzima para transformar el sustrato.
La Km, tal y como la hemos definido en este libro (otras definiciones pueden originar otros significados) es igual a la
constante de disociacin del complejo ES y por ello representa una medida de la afinidad de la enzima por el sustrato de
forma que mientras mayor sea la afinidad menor ser el valor de la Km.
Como es muy difcil trabajar con la expresin grfica de la ecuacin de Michaellis sehan hecho varias transformaciones de la
misma. La ms empleada es la de Lineweaver yBurkque consiste en tomar los valores inversos de la ecuacin hasta
obtener:
Efecto de la concentracin de cofactores: La concentracin de cofactores suele tener un efecto similar a la de la
concentracin de sustrato.
Efecto del pH: A valores extremosde pH (cerca de 0 o de 14) puede producirse desnaturalizacin de la protena
enzimticalo que contribuye a la poca actividad que se observa en esta zona.
Efecto de la temperatura: El aumento de la temperatura refleja un aumento de la energa cintica de lasmolculas lo cual
favorece la colisin entre las molculas de enzima y sustrato.Mientras mayor sea la temperatura mayor es el nmero de
choques y mayor lavelocidad de la reaccin. Pero a partir de un valor determinado de temperaturacomienza la
desnaturalizacin de la protena enzimtica y de este modo la prdidade la actividad.
Inhibicin enzimtica
Efecto de los inhibidores: Los inhibidores enzimticos son sustancias que tienen en comn la propiedad dedisminuir la
velocidad de las reacciones catalizadas por las enzimas. Se distinguendos tipos generales de inhibicin, la reversible y la
irreversible. En la forma reversibleel inhibidor forma con la enzima un complejo enzima-inhibidor (EI) unido por fuerzasno
covalentes y que por lo tanto puede disociarse. En la forma irreversible se producenmodificaciones covalentes de la enzima
que no pueden eliminarse fcilmente.
Inhibicin competitiva: Si la Km aumenta y la Vm no sufre modificacin se dice que el inhibidor esde tipo competitivo. El
hecho de que la Vm no se altere significa que la capacidadcataltica de la enzima es la misma con o sin el inhibidor. El
aumento de Kmindica que existe una disminucin de la afinidad de la enzima por el sustrato.
Estos hechos son compatibles si se supone que el inhibidor es capaz de unirse alcentro activo y se impide as la entrada del
sustrato. Si el sustrato no entra alcentro activo no puede ser transformado por la enzima y esto explica la disminucin de la
velocidad. En este caso se establece una competencia entre el sustratoy el inhibidor por ocupar el centro activo de la
enzima. Cuando las concentracionesde sustrato son elevadsimas la probabilidad de unin enzima sustratoes muy alta y por
ello se alcanza la velocidad mxima de la reaccin.
Inhibicin no competitiva: Nisiquiera a concentraciones muy elevadas de sustrato se logra eliminar la inhibicin.Si la Km
no se ha modificado quiere decir que no existe impedimento para launin de la enzima con el sustrato, pero la disminucin
de la Vm indica que el inhibidordisminuye de alguna forma la capacidad cataltica de la enzima.Generalmente seacepta que
la unin enzima inhibidor se produce en un sitio diferente del centro activoy que esa unin modifica las propiedades
catalticas de la enzima posiblemente modificandola conformacin del centro activo de forma tal que no impide la unin
delsustrato pero dificulta grandemente su transformacin.
Regulacin enzimtica: Cuando un sistema o proceso es capaz de variar su comportamiento como respuestaa cambios
que se produzcan en su entorno, de forma tal que la respuestadirecta o indirecta, tiende a modificar el estmulo volviendo a
la situacin inicial, sedice que este sistema o proceso est regulado. En la regulacin tanto el estmulocomo la respuesta

tienen carcter especfico. Estos cambios de comportamiento generalmentese manifiestan por un aumento o disminucin de
la velocidad de algunasetapas que componen el proceso, aunque puede manifestarse de otras formas.
La regulacin enzimtica se refiere precisamente a la posibilidad que tienen lasenzimas de variar la velocidad de las
reacciones que ellas catalizan si se producendeterminados cambios en el medio. Esa posibilidad viene dada por
caractersticasestructurales de las enzimas y que son manifestaciones una vez ms de la estrechavinculacin existente entre
la estructura y la funcin de las biomolculas.
Los cambios de velocidad observados durante el proceso de adaptacin se debena cambios cuantitativos o cualitativos de
los centros activos y atendiendo a esto lasformas bsicas de la regulacin enzimtica se manifiestan por variacin en la
cantidado la actividad de las enzimas.
Si la cantidad de enzima no vara, solo es posible modificar su actividad aumentandoo disminuyendo la fraccin de centros
activos tiles, pues el nmero total nocambia. Esto se logra fundamentalmente por dos mecanismos conocidos
comomodificacin alostrica y modificacin covalente, que sern objeto de estudio a continuacin.
Es bueno sealar que existen enzimas que estn sometidas a varios mecanismosde regulacin simultneamente, lo cual
puede ser un ndice de su significacin parael metabolismo celular.
Regulacin alostrica: Se conoce un nmero cada vez ms numeroso de enzimas que al estudia el comportamientode la
velocidad de las reacciones por ellas catalizadas en funcin de laconcentracin de sustrato se obtienen curvas sigmoidales
(en forma de S alargada). Se observa que para la misma concentracin de sustrato(So) pueden obtenerse diferentes
velocidades de reaccin al variar la concentracinde las sustancias aadidas, una caracterstica esencial de estas enzimas
es la depresentar una actividad variable. Las enzimas que as se comportan reciben el nombrede enzimas alostricas.
El modelo simtrico o concertado postula que las enzimas alostricas existenen al menos dos estados conformacionales (R
y T) que se encuentran en equilibrioen ausencia de cualquier ligando. Las dos conformaciones presentan
afinidadesdiferentes por cada uno de los ligandos. El estado R es el de mayor afinidad por elsustrato.La unin de un ligando
a uno de los estados de la enzima, desplaza el equilibrioen ese sentido, con lo cual se disminuye la concentracin de la otra
forma. Losligandos se unen a esos sitios por fuerzas no covalentes y de forma ampliamentereversible. Cuando la
concentracin de un ligando aumenta en el medio, se favorecesu asociacin y al disminuir, su disociacin.
Un caso bien sencillo permite analizar ahora el funcionamiento del modelo: unaenzima con tres ligandos, uno de los cuales
es el sustrato (S). Los otros dos son elligando A que solo puede unirse al estado R y el I que solo lo hace al estado T.
Enausencia de los tres ligandos la enzima existe en un equilibrio entre los dos estadosconformacionales.
Al aadir el sustrato, este se une a la forma R y forma el complejo RS, equivalenteal complejo ES ya estudiado. En este
momento el equilibrio se desplazahacia R, aumenta la concentracin de R y disminuye la de T. Mientras ms aumentaS, ms
aumenta R y con ello la velocidad de la reaccin.
Si se aade al sistema la sustancia A esta se une a la forma R y forma el complejoRA, que aumenta el desplazamiento del
equilibrio hacia la conformacin activa.
Como A y S se unen por sitios diferentes la unin de uno favorece la unin del otro.
A las sustancias que como A se unen al estado activo y con ello favorecen unincremento de la velocidad de reaccin se les
llama efectores positivos o activadoresalostricos.
Si al sistema en equilibrio se le aade el ligando I este se une al estado T, formael complejo TI y provoca un desplazamiento
del equilibrio hacia la forma T, con locual la concentracin del estado T aumenta y la del R disminuye, y se provoca
undecremento en la velocidad de reaccin pues es menor el nmero de centros activoscon la conformacin favorable para la
unin con el sustrato.
A las sustancias que como I se unen al estado inactivo y con ello provocan unadisminucin de la velocidad de la reaccin se
les conoce como efectores negativoso inhibidores alostricos.
Aunque cada enzima presenta sus caractersticas particulares pueden formularsealgunos aspectos generales sobre ellas:
1. Con pocas excepciones se trata de protenas oligomricas de peso molecularelevado y estructura compleja.
2. Las enzimas existen en varios estados conformacionales interconvertibles ycon un grado de afinidad diferente para cada
uno de sus ligandos.
3. Los ligandos se unen a la enzima en sitios especficos (denominados sitiosalostricos) por fuerzas no covalentes y de
forma reversible afectando el estadoconformacional de las enzimas.
4. Los cambios conformacionales en una subunidad se comunican en mayor omenor grado al resto de las subunidades.

5. La curva de velocidad en funcin de la concentracin de sustrato siempre presentauna forma diferente a la clsica curva
hiperblica de MichaelisMenten.
Lo importante de este tipo de modificacin es que los activadores e inhibidores,son sustancias propias de la clula y cuya
concentracin vara como consecuenciade la propia actividad celular.
Es importante sealar que el alosterismo no es privativo de las protenas enzimticasy aparece tambin en protenas que
realizan otro tipo de funciones. De hecho, la primeraprotena alostrica estudiada fue la hemoglobina que no es una enzima
sino un transportadorde oxgeno en la sangre. El alosterismo constituye un fenmeno muy difundido en elcomportamiento de
numerosas protenas que realizan funciones diversas y que constituyeun mecanismo bsico por el cual la accin de esas
protenas es modulada.
Modificacin covalente: Existe otro grupo de enzimas que se regula de una forma diferente a lasanteriores. Estas enzimas
existen en las clulas en dos formas que difieren en sucomposicin, lo cual las distingue de las alostricas. Esta situacin da
origen aestados conformacionales alternativos en dependencia de la composicin.
La diferencia en la composicin se debe a la existencia de grupos qumicos denaturaleza no protenica que se unen a la
enzima. Lo que distingue a estas enzimasde las alostricas es que estos grupos estn unidos a la enzima de forma
covalentey de ah el nombre del mecanismo. Existe entonces una forma de la enzima modificaday una no modificada. Estas
formas son interconvertibles pero como se tratade la formacin o ruptura de enlaces covalentes se requiere de una pareja de
enzimaspara catalizar el paso de una forma a la otra. Lo ms importante para el mecanismoes que las dos formas difieren
en su grado de actividad siendo siempre unade ellas mucho ms activa que la otra.
El mecanismo de modificacin covalente ms difundido en la naturaleza es elde fosforilacin y desfosforilacin de enzimas.
La diferencia entre las dos formasde la enzima consiste en que una de ellas presenta uno o varios grupos fosfatosunidos
covalentemente a residuos de aminocidos de la enzima
.
Todos los sistemas de fosforilacindesfosforilacin presentan al menos doscomponentes esenciales: una protena quinasa
que fosforila las enzimas y unafosfoprotena fosfatasa que cataliza la hidrlisis del enlace ster fosfrico. Lafigura 6.17
representa esquemticamente estas transformaciones. La forma activay la inactiva pueden ser la modificada o la no
modificada lo que depende de laenzima.
En algunos casos entre la protena quinasa y la enzima que realiza el efectometablico existen otras protenas quinasas con
un mayor grado de especificidad.
Esto hace que se produzca una considerable amplificacin de la seal inicial, puescomo todos los intermediarios del
mecanismo son enzimas, cada una de ellas puedecatatalizar la transformacin de un nmero considerable de molculas de
sussustratos que tambin son enzimas.
Isoenzimas: Las isoenzimas son protenas que catalizan la misma reaccin ; con los mismosrequerimientos pero con
propiedades cinticas y fsicoqumicas diferentes, locual permiti su descubrimiento y estudio. El primer caso conocido y por
ello elms estudiado es el de la lactato deshidrogenasa (LDH).
Esta enzima existe en todos los tejidos y en todos ellos cataliza la mismareaccin:
En este caso el NAD+ es un cofactor que acepta los tomos de hidrgeno separadosdel lactato por la enzima.
La isoenzima presente en el corazn tiene mayor afinidad por el lactato y est favorecidala reaccin de izquierda a derecha,
mientras que la isoenzima del msculo esquelticotiene mayor afinidad por el piruvato y favorece la reaccin contraria.
Se descubri que la LDH est formada por dos tipos de cadenas polipeptdicas y quela molcula contiene en total cuatro
cadenas. Como la del corazn contiene un solo tipo decadena a esta se le denomin H (de heart = corazn) y al darse la
misma situacin en elmsculo sus cadenas se designa M (de muscle = msculo). La formulasubunitaria deestas dos
isoenzimas ser por tanto H4 y M4 respectivamente. Las procedentes de otrostejidos son hbridos que contienen los dos
tipos de cadenas y sus propiedades cinticas yfsicoqumicas son intermedias entre las dos primeras.
Organizacin de las enzimas
El metabolismo celular est compuesto de numerosas reacciones qumicasenzimticamente catalizadas y que se
encuentran organizadas en vas o rutas relacionadascon la transformacin de una sustancia, donde el producto de una
reaccin es el sustratode la siguiente. El conjunto de enzimas que participa en una va metablica se encuentraorganizado
de una forma caracterstica.

Existen formas bsicas de organizacin de las enzimas en la clula: las enzimas libres,solubles o simples como se llamarn
aqu; los sistemas o complejos multienzimticosy las enzimas multifuncionales.
a) Una enzima simple es aquella que cataliza una reaccin nica como las descritasa propsito de la clasificacin. Estas
enzimas pueden estar formadas por una solacadena polipeptdica como la hexoquinasa animal, o estar compuestas por
variassubunidades, que pueden ser iguales o diferentes. En todos los casos se trata deuna sola reaccin.
b) El trmino sistema o complejo multienzimtico se refiere a las agrupaciones deenzimas que se pueden obtener con
los mtodos tradicionales y que catalizan variasreacciones relacionadas con una va metablica. En estos casos siempre se
presentauna estructura compleja compuesta de varias subunidades y en ocasiones se caracterizan,porque al disociarse el
complejo, ninguno de los componentes por separadopresenta actividad cataltica lo que sugiere la necesidad de las
interaccionesprotena-protena para la realizacin de la catlisis. En estos complejos los intermediariosmetablicos entre el
sustrato y el producto son transferidos prcticamentedel centro activo de una enzima al de la siguiente sin que exista la
posibilidad de suseparacin de la superficie al complejo.
c) Enzimas multifuncionales estn formadas por una sola cadena polipeptdica degran tamao que es capaz de realizar
varias actividades enzimticas relacionadasfuncionalmente. Estas enzimas presentan dos propiedades caractersticas: su
estructuraconsta de una sola cadena polipeptdica, funcionalmente tienen actividadescatalticas mltiples. Esto implica que
los centros activos de las protenas se generancomo consecuencia de los plegamientos de sectores contiguos de la
cadenapolipeptdica que producen estructuras globulares autnomas, dominios, teniendocada uno una actividad
especfica.Como en el caso de los complejos multienzimticos estas enzimas no permiten la fuga de losintermediarios y se
incrementa la eficiencia del sistema, pero al estar formadas por una cadenapolipeptdica nica la sntesis de todas las
actividades enzimticas puede ser regulada coordinadamentepues se trata de controlar solamente la sntesis de una
protena.
Cofactores enzimticos: En ocasiones para una reaccin adems de la enzima se requiere de otra molcula debajo peso
molecular. Son los llamados cofactores enzimticos. An cuando el papel determinantelo lleva a cabo la enzima y de ella
depende tanto la especificidad de accin comola del sustrato, la participacin de los cofactores es imprescindible pues sin
ellos hayreacciones que no son posibles.
Por su estructura qumica se distinguen dos tipos de cofactores: los iones inorgnicos ylos compuestos orgnicos. A estos
ltimos se les denomina coenzimas.Los cofactores inorgnicos son generalmente cationes divalentes como el Mg2+,
Ca2+,Mn2+, Zn2+, Fe2+, etc., aunque tambin pueden ser monovalentes como el K+ e incluso anionescomo el Cl-. Algunos
de estos iones se encuentran tan firmemente unidos a la enzima quepueden obtenerse junto con ella en el proceso de su
purificacin. Otros lo hacen tan dbilmenteque una vez purificada la enzima deben ser aadidos para que esta recobre su
actividad.Las coenzimas se definen como molculas orgnicas que poseen propiedadesfsico-qumicas especficas y que no
forman parte de la cadena polipeptdica de las enzimasy actan junto con estas en la catlisis de las reacciones bioqumicas.
En la mayora de las reacciones las coenzimas actan transportando una pequeaparte del sustrato como electrones,
tomos o grupos funcionales.
Coenzimas y vitaminas
Las vitaminas son sustancias qumicas que deben ser ingeridas por el organismo para sunormal crecimiento y desarrollo.
Muchas vitaminas, especialmente las hidrosolubles, tienenimportancia funcional por ser componentes de la estructura de las
coenzimas. Es por elloque muchas veces se habla de formas coenzimticas de determinada vitamina. En estoscasos
generalmente es en la porcin vitamnica de la coenzima donde radica el grupo funcionalespecfico de la misma, es decir,
aquel que es transformado por la accin de la enzima.
Pero es necesario tener presente que no todas las vitaminas forman parte de coenzimas, nitodas las coenzimas contienen
una vitamina en su estructurams frecuencia aparecen en el metabolismo celular. El resto de las coenzimas se estudiarn
cuando tengan participacin en un proceso determinado.
Piridn nucletidos
Estas coenzimas presentan la nicotinamida, integrante del complejo vitamnico Bcomo parte de su estructura, que est
compuesta por un nucletido de nicotinamida y otro deadenina unidos por un enlace anhdrido fosfrico 5-5.
Existen dos formas coenzimticas: elnicotinadenindinucletido (NAD+) y el nicotinadenindinucletido fosfatado (NADP+).
Tanto el NAD+ como el NADP+ participan en reacciones de oxidacin reduccincatalizadas por deshidrogenasas. Una
reaccin tpica es la catalizada por la alcoholdeshidrogenasa:

Los piridn nucletidos funcionan con enzimas que sustraen (o incorporan) al sustratodos tomos de hidrgenos unidos
(directa o indirectamente) al mismo tomo de carbono;Transfieren equivalentes de reduccin entre dos sustratos o entre un
sustrato y otra coenzimapor lo cual su funcionamiento representa un ciclo de oxidacin reduccin alternante.
En el metabolismo, el NAD+ funciona generalmente en reacciones de oxidacinde sustratos, y el NADP+ en las de
reduccin, por lo cual el primero es eminentemente
Flavn nucletidos
Las flavinas constituyen un grupo numeroso de sustancias en la naturaleza. De ellasla riboflavina, o vitamina B2, es la que
forma parte de estas coenzimas. Existen dos formascoenzimticas: el flavinmononucletido (FMN) y el
flavinadenindinucletido (FAD)
Las dos formas participan en reacciones de oxidacin reduccin catalizadas pordeshidrogenasas y oxidasas. Un ejemplo de
las primeras es la reaccin catalizada por lasuccinato deshidrogenasa:y de las segundas la reaccin catalizada por la glicina
oxidasaEl grupo funcional de estas coenzimas es el anillo de isoaloxacina que puede pasar desu forma oxidada, a
semireducida y reducida al captar uno o dos tomos de hidrgeno, sinliberar protones al medio.
Los flavn nucletidos funcionan con enzimas (flavoprotenas) que sustraen dos tomosde hidrgeno de carbonos
adyacentes originando compuestos insaturados como en elcaso de la succinato deshidrogenasa; Se encuentran
generalmente como grupos prostticosy actan entre un sustrato y una coenzima o entre dos coenzimas.
Coenzima A: La coenzima A es la coenzima fundamental que en los sistemas vivientes transfieren grupos acilos. Su
existencia universal y la gran variedad de reacciones en que intervienensus derivados enfatizan su importancia.La estructura
de la molcula es muy compleja y presenta numerosos grupos funcionales
Entre estos grupos se destacan, el cido pantotnico (componente del complejo vitamnico B) y la -mercaptoetilamina, que
juntos forman la 4-fosfopantetena, y un nucletidode adenina.
Mltiples experiencias han demostrado que la parte reactiva de la molcula es el grupo tiol (SH) final. Comnmente se utiliza
la abreviatura CoASH para denotar esta coenzima.
La formacin de los derivados aclicos es catalizada por enzimas sintetasa y requieren ATP como fuente de energa.
Una vez formado el grupo acilo puede experimentar numerosas reacciones entre ellas su transferencia a un aceptor como
en la reaccin de la citrato sintasa donde el grupo acetilo de la acetil-CoA se transfiere al oxalacetato con formacin de
citrato.
Cuando los grupos acilos son grandes su unin con la CoASH proporciona una ventaja adicional pues contribuye a la
solubilidad de estos compuestos en el seno celular acuoso.
Adenosintrifosfato (ATP): El ATP participa en numerosas reacciones sirviendo como fuente de energa, de elementos
estructurales o ambas. Al primer grupo pertenecen aquellas reacciones en la que los productos no contienen ninguno de los
grupos de la coenzima como la formacin de derivados aclicos de la CoASH ya estudiados. Al segundo y tercer grupo
pertenecen varios tipos de reacciones.
a) Transferencia de fosfato.
b) Transferencia de pirofosfato.
c) Transferencia de grupos adenilatos.
d) Transferencia de adenosilo.
Estos cofactores enzimticos son de amplio uso en el metabolismo y pueden actuar con numerosas enzimas, lo cual
demuestra que la especificidad de la reaccin depende de la enzima y no del cofactor.