FACULTAD DE MEDICINA HUMANA

DEPARTAMENTO ACADMICO
DE
CIENCIAS BSICAS

ASIGNATURA

BIOQUMICA
GUA DE PRCTICA

SEGUNDO AO
II Semestre

Lima - Per
2016

PRACTICAS DE LABORATORIO N1: INSTRUMENTACIN,

ESPECTROFOTOMETRIA

1.- COLORIMETRA
Es el anlisis de la concentracin de una muestra por el color que presenta.
Todos hemos tenido la experiencia de valorar la concentracin de sustancias
coloreadas en solucin, por observacin directa, una taza de caf o t, un vaso
de refresco, son apreciados de esa manera. El examen se funda en la
mayor o menor absorcin de luz de acuerdo al mayor nmero de molculas y
tonalidad depender de la capacidad de absorber una u otra longitud de
onda de luz, especficamente. La fotocolorimetra manipula las variables de
este fenmeno controlando la luz incidente proveniente de un foco luminoso y
su pureza, de modo tal que slo incida aquella luz que es especficamente
absorbida por la partcula que medimos.

Microondas:
25um a 1mm

Rayos X
1nm a 1pm

Rayos
< 1pm

Ultravioleta:
400nm a 1nm

Infrarrojo:
750nm a 25 um

Ondas de radio
> 1mm

Los cuerpos luminosos como el sol o las lmparas elctricas emiten un gran
espectro electromagntico que comprende amplias longitudes de onda, de las
cuales muy pocas corresponden al espectro visible. En el cuadro anterior se
aprecian todas las radiaciones electromagnticas conocidas.
Los cuerpos coloreados, absorben luz de determinada longitud de onda y
reflejan el resto del espectro luminoso visible e invisible (colores
complementarios) Esta luz reflejada es la que observamos como color propio
del cuerpo coloreado. No interesa particularmente los colores que absorbe la
solucin que queremos medir. La selectividad de absorcin que queremos
medir. La selectividad de absorcin de una partcula por una longitud de onda
se basa en el hecho de que cada longitud de onda de luz corresponde a un
distinto nivel de energa, y para excitar los electrones de cada partcula
necesitamos un particular nivel de energa.
Si consideramos que cada molcula absorbe luz de acuerdo a la
concentracin en que se encuentre dentro de la solucin, a mayor absorcin
de luz y menor luz trasmitida. Estos factores estn considerados en la ley de
Lambert y Beer.

Longitud de onda
400-435
435-480
480-490
490-500
500-560
560-580
580-595
595-610
610-750

Color
violeta
azul
verde-azul
azul-verde
verde
amarillo-verde
amarillo-verde
anaranjado
rojo

Colores complementarios
amarillo-verde
amarillo-verde
anaranjado
rojo
purpura
violeta
azul
verde-azul
azul-verde

Los cuerpos coloreados, absorben luz de determinada longitud de onda y

reflejan el resto del espectro luminoso visible e invisible (colores
complementarios). Esta luz reflejada es la que observamos como color propio
del cuerpo coloreado. Interesa particularmente los colores que absorben la
solucin que queremos medir. La selectividad de absorcin de una partcula por
una longitud de onda

se basa en que cada longitud de onda de luz corresponde a un distinto

nivel de energa y para excitar los electrones de cada partcula se necesita un
particular nivel de energa.
S consideramos que cada molcula absorbe luz de acuerdo a la
concentracin en que se encuentre dentro de la solucin, a mayor
concentracin de sustancia, mayor absorcin de luz y menor luz trasmitida.
Estos factores estn considerados en la Ley de Lambert y Beer, que es la
siguiente:
Log Io/It = e.l.c
Donde: Io = Luz incidente, It = Luz transmitida, C = concentracin, L = longitud
de paso, e = constante.
2.- FOTOCOLORIMETRIA ESPECTROFOTOMETRIA
La fotocolorimetra es la medida de la luz absorbida por una solucin mediante
un aparato que es un fotocolormetro. El equipo consta de una fuente de luz
artificial, un monocromador que separa exclusivamente luz de una sola longitud
de onda (la que sea preferente para la medida), un recipiente o tubo de vidrio
(que alberga la solucin a medir), una clula fotoelctrica que transforma la luz
trasmitida en corriente elctrica y una unidad de medida de la corriente elctrica
o galvanmetro.

Luz Incidente Io

Luz trasmitida It

La calificacin de colormetro o espectrofotmetro depende del

monocromador, s ste es un filtro tendremos un fotocolormetro, pero si es
un prisma, o cualquier aditamento que proporcione luz de diversas longitudes de
onda tendremos un espectrofotmetro.

Galvanmetro
Fuente de luz
blanca

Muestra: Absorcin

Monocromador

Celda

Los fotocolormetros y los espectrofotmetros reportan sus resultados bajo

dos formas: absorbancia o luz absorbida por las partcula de la solucin y
transmitancia a o luz transmitida luego de atravesar el tubo con la solucin.
La transmitancia se expresa en valores numricos entre 0 y 100%, es decir que
una solucin que no tiene particular trasmitir el 100% y una perfectamente
opaca el 0%. La absorbancia, tambin llamada densidad ptica DO, se expresa
en valores semilogartmicos entre 0 y 2 correspondiendo el 0 a aquella
solucin que no tiene partculas y por lo tanto no absorbe la luz.
Para encontrar la concentracin de una solucin problema, debemos
comparar su lectura frente a un blanco agua destilada o reactivos sin
modificarse con la lectura de un patrn o solucin estndar bajo las mismas
condiciones. Una solucin estndar es generalmente una que contiene el
problema con una concentracin perfectamente medida en el laboratorio.
CLCULO DE LA CONCENTRACIN DE UN PROBLEMA
Para hallar la concentracin de una muestra problema tenemos dos
procedimientos:

1.
2.

Factor de Calibracin
Curvas de calibracin

Factor de calibracin: es la concentracin de sustancia que corresponde a

una unidad de medida, generalmente 0,001 de absorbancia.

concentracin del patrn

Se obtiene Factor de calibracin:

Lectura del patrn (en absorbancia)

Esta frmula deriva de la densidad ptica o absorbancia del problema:

DOP= eP lP cP
Si el coeficiente de extincin (e) es el mismo en ambos casos y el dimetro
del tubo de lectura(l) es el mismo, la nica diferencia est en la concentracin.
Luego:

DOst

CS

=
DOp

CP

Despejando
la concentracin del problema cp, obtenemos la
siguiente formula:
cs

cp=Dp x -------Dost
Concentracin del problema = Densidad ptica del Problema X Factor de
calibracin
La curva de calibracin consiste en la obtencin de las lecturas de absorcin
0 de % de transmitancia que corresponde a una secuencia creciente de
concentraciones, estas son graficadas en un papel milimtrico si se trata de
absorbancia o densidad ptica y de papel semi logartmico si se trata de % de
transmitancia.

3.- ESPECTROFOTOMETRIA

EQUIPOS: Espectronic 20

EXPERIMENTO N1.- Preparacin de una curva de calibracin: el experimento consiste

en preparar tubos de concentracin creciente de un colorante y leerlos al fotocolormetro o
al espectrofotmetro, llevando a cero (0) el aparato con agua destilada. Construir una
grfica usando papel milimetrado para las lecturas hechas en DO (densidad ptica) o papel
semilogartmicos para las lecturas hechas en % transmitancia.
Para el efecto, preparar cinco tubos de acuerdo al esquema y leer las soluciones al
espectrofotmetro a 540 nm de longitud de onda. Practicar esta lectura tanto en DO como en
% de transmitancia.
Construir dos curvas de calibracin, una en papel milimetrado y otra en papel semilogartmico.

MATERIALES
Material
Azul de metileno
Agua destilada
Espectrofotometro
Bandejas

Unidades por
mesa
40ml
01 piceta
01
01

Unidades por
Fecha
1000ml
8 picetas
08
08

Unidades por
mesa
1
06
2
2

Unidades por
Fecha
24
150
40
20

REACTIVOS
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Propipetas

EXPERIMENTO
7

Contenido
mL Azul metileno al (5 mg/Ml)
mL Agua destilada

Concentracin (mg/mL)

1
2
8

2
4
6

Tubo N
3
6
4

%T

4
8
2

5
10
0

A (A=2-logT%)

Desconocido 1
Desconocido 2

COMENTARIO

...

% T (540 nm)

100
80
60
40
20
0
0

Concentracin (mg/mL)
COMENTARIO

Firma del alumno

Firma del profesor

Fecha Hora

PRACTICAS DE LABORATORIO N2: POTENCIOMETRA

EQUIPOS: Potenciometro
La potenciometra es el procedimiento de eleccin para la medida del pH. El
pH en una expresin numrica que corresponde al logaritmo de la inversa de
la concentracin de iones H+. La potenciometra se basa en la diferencia de
potencial (voltaje) entre dos electrodos, el de medida y el de referencia, ambos
sumergidos en la solucin y bajo condiciones de equilibrio.
El instrumento consta de un ELECTRODO DE REFERENCIA que se
mantiene constante durante la medida, un ELECTRODO DE MEDIDA que
varia de acuerdo a la concentracin de hidrgeno de la solucin y un
dispositivo o potencimetro que mide la diferencia de potencial. El electrodo
de referencia puede ser de dos clase: de calomel, mercurio metlico y cloruro
mercurioso y de plata plata y cloruro de plata. El potencial de ese electrodo
depende de la solucin de cloruro de potasio en que est sumergido
internamente.
El electrodo de medida, es tambin llamado electrodo de vidrio, est constituido
por un tubo de vidrio cuyo extremo es particularmente selectivo al paso de
iones hidrgeno. En su interior hay cido clorhdrico HCl 0,1 M y un alambre de
plata, cloruro de plata,

indicar que es igual al voltaje opuesto de la celda de medida. Conectando la

celda desconocida al circuito se produce un desnivel de voltaje que debe
corregirse hasta alcanzar el punto nulo. La magnitud de la correccin puede
leerse como fuerza electromotriz o como pH directamente.
En la prctica se ha usado los electrodos de pH para medir la concentracin
de otros iones. Los electrodos tienen una membrana adicional que slo es
selectiva al paso de determinado electrolito, sodio, potasio, calcio son medidos
bajo esta manera con facilidad. Tambin existe el electrodo de CO2 que deja
pasar molculas se este gas las que modifican el pH y por lo tanto son medidas
con el electrodo de vidrio de pH.
EXPERIMENTO: Titulacin de un cido dbil con una base fuerte.
Se trata de determinar el pH de un grupo de tubos con varios niveles de
titulacin de cido actico con hidrxido de sodio. Cuando se titula un cido
dbil con una base fuerte se produce un aumento de pH inicialmente rpido
para luego hacerse lento, dentro de ciertos mrgenes y al final se alcaliniza
rpidamente. La identificacin del cambio de pH en cierto perodo de la titulacin,
se debe a la formacin transitoria de una combinacin de cido dbil y la sal
correspondiente. En el caso del experimento ser la combinacin de cido
actico y acetato de sodio y son los componentes ordinarios de una solucin
amortiguadora o solucin buffer. Para la experiencia preparar 11 tubos de
acuerdo al siguiente esquema:
13

Tubo No
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11

mL A ctico 0,1 N mL NaOH 0,1 N mL

agua
destilada
5,0
0,0
5,0
5,0
0,5
4,5
5,0
1,0
4,0
5,0
1,5
3,5
5,0
2,0
3,0
5,0
2,5
2,5
5,0
3,0
2,0
5,0
3,5
1,5
5,0
4,0
1,0
5,0
4,5
0,5
5,0
5,0
0,0

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Potenciometro
Bandejas
Pipetas
Propipetas

Unidades por
mesa
01
06
01
01
02
01

Unidades por
Fecha
08
150
08
08
40
20

Unidades por
mesa
30mL

Unidades por
Fecha
800mL

60mL

1200mL

50mL

1000mL

REACTIVOS
Material
Hidrxido de
sodio 0.1N
cido Acetico
0.1N
Agua destilada

14

14
13

pH

12
11
10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
4

10

11

12

Volumen (mL)

Fecha Hora

15

PRACTICAS DE LABORATORIO N3
CINTICA ENZIMTICA: EFECTO DEL pH y LA TEMPERATURA
Las enzimas son protenas que aceleran las reacciones qumicas hasta su
punto de equilibrio.
La ecuacin general de las enzimas es:

+ S

E+P
C

La actividad enzimtica se manifiesta y mide por:

Desaparicin de sustrato Formacin de
producto Modificacin de cofactor
Muchos factores modifican la actividad enzimtica:
pH Temperatura
Concentracin de sustrato
Concentracin de enzima Tiempo de
incubacin
En nuestra prctica observamos el efecto de la pepsina sobre la albmina
del huevo. La actividad enzimtica se apreciar por la prdida de la turbidez
proteica.
MATERIALES
Material
Bandejas
Gradillas
pipetas
Propipetas
Tubos de prueba

Unidades por
mesa
01
01
05
1
10

Unidades por
Fecha
08
08
100
20
200

Unidades por
mesa
05mL

Unidades por
Fecha
100mL

05 mL

100mL

5mL
25mL
10mL

150mL
800mL
200mL

REACTIVOS
Material
cido clorhdrico
1N
Carbonato sdico
1N
Pepsina 1%
Albumina 2%
Agua destilada

16

EQUIPOS: Espectrofotometro, bao maria, estufas, termmetros.

EXPERIMENTO.- Efecto del pH
El pH acta sobre los grupos ionizados que pertenecen a los centros activos
de las enzimas. Los grupos que pierden la ionizacin pierden la capacidad
de interaccionar con el sustrato. Cada enzima tiene un pH ptimo de trabajo.

Preparar cinco tubos con:

17

TUBO N
Ph
mL albmina
mL HCL 1N
mL CO3Na2
mL agua destilada

1
1,0
5,0
2,0
0,0
0,0

2
1,5
5,0
0,5
0,0
1,5

3
6,0
5,0
0,0
0,0
2,0

4
9,5
5,0
0,0
0,5
1,5

5
11
5,0
0,0
2,0
0,0

Pre incubar los cinco tubos ms un tubo conteniendo 20 mL de pepsina al

1% a 37C por 5 minutos. Luego aadir rpidamente 3 mL de la pepsina 1%
pre incubada a cada uno de los tubos 15. Mezclar e incubar a 37C por 10
min. Observar la diferencia o leerla en fotocolormetro con filtro azul (420 nm).
EXPERIMENTO: Efecto de la temperatura.
Todo aumento de temperatura incrementa la actividad enzimtica por aumento
de la energa de activacin. Pero paralelamente se va produciendo una
desnaturalizacin parcial de la enzima que la inactiva.

Preparar cinco tubos con:

TUBO N
1
mL albmina
mL HCL 1N
mL agua destilada

5,0
0,5
3,5

5,0
0,5
3,5

5,0
0,5
3,5

5,0
0,5
3,5

10

1,0

1,0

1,0

1,0

5,0
0,5
3,5

Preparar otros cinco tubos con:

TUBO N
6
mL pepsina 1%

1,0

Incubar por 5 minutos de acuerdo al siguiente esquema de temperatura:

TUBO N
1 y6
2 y7
3 y8
4 y9
5
Temperatura

O C

Amb.

37 C

70 C

37 C

10
100 C

Agregar los respectivos tubo N 6 al N 10 a los que hay que incubar a las
temperaturas a que se pre-incuban los tubos 1 5.

18

Experimento: Efecto de
la temperatura

Experimento: Efecto del pH

% Formacin producto

% Formacin producto

100
80
60
40
20
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
pH

Comentario:

Firma del alumno

100

80
60
40
20
0
0

20

40

60

80

100

Temperatura (C)
Comentario:

Firma del profesor

Fecha Hora

19

PRACTICA DE LABORATORIO N4
CINETICA ENZIMTICA :EFECTO CONCENTRACIN,ENZIMA Y SUSTRATO
MATERIALES
Material
Bandejas
Gradillas
pipetas
Propipetas
Tubos de prueba

Unidades por
mesa
01
01
05
1
10

Unidades por
Fecha
08
08
100
20
200

Unidades por
mesa
05mL

Unidades por
Fecha
100mL

05 mL

100mL

10mL
25mL
10mL

300mL
800mL
200mL

REACTIVOS
Material
cido clorhdrico
1N
Carbonato sdico
1N
Pepsina 1%
Albumina 2%
Agua destilada

EQUIPOS: fotocolormetro, bao mara, estufas, termmetros.

EXPERIMENTO. -Efecto de la concentracin de la enzima
Aunque las enzimas no se destruyen ni con las reacciones, el aumento de
ellas en la cubeta de reaccin incrementa la velocidad.
Preparar 5 tubos con:
TUBO N

mL albmina

5,0

5,0

5.0

5,0

5,0

mL HCL 1N

0,5

0,5

0.5

0,5

0,5

mL agua destilada

1,5

2,5

3.5

4,0

4,5

mL pepsina

0,0

0,0

0.0

0,0

0,0

0.5

0,1

Incubar los 5 tubos a 37C por 5 minutos y enseguida aadir:

TUBO N
1
2
3
mL pepsina incubada

3,0

2,0

1,0

Incubar por cinco minutos a 37C. Observar al fotocolormetro a 420 nm

(filtro azul), contra una lectura de agua.
20

EXPERIMENTO.-Efecto de la concentracin del sustrato

Si es una reaccin enzimtica incrementamos progresivamente la

concentracin del sustrato, aumentar la velocidad enzimtica (velocidad
inicial) hasta un punto en que la velocidad llega a una meseta plana que no
modifica aunque sigamos aumentando el sustrato, habremos saturado la enzima

Preparar 6 tubos con:

TUBO N

21

mL albmina

2,0

3,0

4,0

5,0

6,0

7,0

mL HCL 1N

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

0,5

mL agua destilada

7,0

6,0

5,0

4,0

3,0

2,0

mL pepsina 1%

0,0

0,0

0,0

0,0

0,0

0,0

Leer a 420 nm (filtro azul). Anotar los resultados: incubar a 37C. Colocar 0,5
mL que pepsina pre-digerida. Incubar por otros 5 minutos a 37C. Leer al
fotocolormetro a 420 nm (filtro azul). Restar la segunda lectura de la primera.
Graficar y comentar los resultados.

Experimento: Efecto de la
concentracin de sustrato
% Formacin producto

% Formacin producto

Experimento: Efecto de la
concentracin de enzima

100

80
60
40
20
1

Concentracin de sustrato

Comentario:

Comentario:

Firma del alumno

Firma del profesor

Fecha Hora

22

PRACTICA DE LABORATORIO N5
DIGESTIN DE CARBOHIDRATOS
El carbohidrato ms importante en la alimentacin es la glucosa, la cual
ingerimos bajo la forma de disacridos (maltosa, sacarosa y lactosa) o de
almidn, polisacridos formado por muchas molculas de glucosa. El almidn
es el constituyente esencial de cereales, leguminosa, tubrculos y races. La
digestin del almidn se produce en el intestino delgado gracias a la presencia
de enzimas digestivas producidas por las glndulas salivares, el pncreas y la
pared intestinal. Estas enzimas son:
La alfa amilasa salivar
La alfa amilasa pancretica
La amilo 1,6 glucosidasa de la pared intestinal
Las alfa amilasas son enzimas que actan a pH neutro y en presencia de iones
cloro. Rompen los enlaces amilo 1,4 dando como resultado oligosacridos y
glucosa.
Existe dos formas de evaluar la actividad enzimtica de la amilasa:
Por desaparicin de sustrato: forma como desaparece el almidn el que
se aprecia por la reaccin del lugol.
Por formacin de producto: forma como aparecen carbohidratos
reductores (glucosa) en el medio, los que se aprecian por reduccin del
cobre.
En nuestra prctica evaluaremos la actividad enzimtica de la amilasa sobre
el almidn mediante la reaccin del remanente de almidn frente al yodo a
mayor decoloracin, mayor actividad enzimtica.

EQUIPOS: fotocolormetro, bao maria, estufas, termmetros.

REACTIVOS

Material
Almidn 1%
Buffer pH 6.6
HCL 0.3N
Suero fisiolgico
Agua destilada
Saliva
HCl 0.05 N
Solucin yodada

Unidades por
mesa
10ml
5ml
5ml
10ml
10ml
5ml
20ml
3ml

Unidades por
Fecha
200ml
100ml
100ml
200ml
200ml
100ml
400ml
100ml

23

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Propipetas

Unidades por
mesa
1
10
6
6

Unidades por
Fecha
8
250
50
24

EXPERIMENTO.- Digestin del almidn por la amilasa salivar.

Para la experiencia preparar cuatro tubos de ensayo de acuerdo al siguiente
esquema.

24

TUBO

ml almidn 1%

ml Buffer fosfato pH 6,6

ml HCL 0,3N

3,4

ml Suero fisiolgico

2,4

ml Agua destilada

2,4

0,6

0,6

Colocar en bao de Mara a 37C por 5 minutos. Agregar:

ml solucin de saliva
0
0,6

Colocar en bao de mara a 37C por 20 minutos

Pasado este tiempo tomar 0,5ml de cada tubo y preparar cuatro tubos
ms de acuerdo al
esquema
TUBO

ml digestin tubo 1

0, 5

ml digestin tubo 2

0,5

ml digestin tubo 3

0,5

ml digestin tubo 4

0,5

ml HCL 0,05N

0,5

0,5

0,5

0,5

ml Solucin yodada

Dejar en reposo por 15 minutos. Leer al fotocolormetro con filtro rojo

(660nm)

25

INFORME DE LA PRCTICA
Nombre:
Grupo :

Fecha:

Experimento.- Digestin del almidn por la amilasa salivar

1.05
0.90

Abs

0.75
0.60
0.45
0.30
0.15
0.00
Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

Tubo 4

Tubo 5

COMENTARIO:

Firma del alumno

Firma del profesor

Fecha Hora:

26

PRACTICAS DE LABORATORIO N6:

ABSORCIN DE CARBOHIDRATOS
Despus de la digestin de los carbohidratos por efecto de amilasas salivar y
pancretica, amilo 1,6 glucosidasa, y disacarasas tenemos como resultado
monosacridos: glucosa, fructosa, galactosa, que debern ser absorbidos por
la mucosa intestinal para su ingreso a la circulacin sangunea. Los carbohidratos
se absorben en el yeyuno mediante dos mecanismos, la simple difusin
favorecida por la gradiente de concentracin y el transporte activo, an
contra la gradiente. El orden de facilidad en la absorcin es de galactosa
glucosa: ribosa.
El borde en cepillo de las clulas intestinales tiene varios sistemas
trasportadores. Un transportador de glucosa dependiente del sodio (SLGT1) se
enlaza tanto a la glucosa como al sodio en sitios separados aumentando el
tenor de sodio intracelular. La energa necesaria para este transporte se
obtiene de la hidrlisis del ATP vinculado a una bomba de sodio que intercambia
sodio con potasio

Tambin participa un transportador facilitador independiente del sodio llamado

GLUT 5. La hidrlisis de los polisacridos, oligosacridos y disacridos es muy
rpida por lo que usualmente los procedimientos de absorcin se saturan con
rapidez.

27

REACTIVOS
Material
Kit de glucosa
Muestra de suero

Unidades por
mesa
1
1

Unidades por
Fecha
1
12

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Propipetas
Beaker
micropipeta
punteras

EQUIPOS: fotocolormetro, bao mara, estufas, termmetros

EXPERIMENTO.-Anlisis de Glucosa en suero
Ver inserto

COMENTARIO:

Firma del alumno

Firma del profesor

Fecha Hora

28

PRACTICAS DE LABORATORIO N7:

Anlisis de Glucosa post-Prandial.
La va metablica ms importante para la glucosa es la va glicoltica o de
Embden Meyerhof. Esta presente, naturalmente, en todos los tejidos y es
responsable del aprovechamiento energtico de la glucosa y an de otros
carbohidratos. Tiene dos formas de manifestarse: la forma anaerbica cuando
la concentracin de oxgeno es baja, produce cido pirvico y cido lctico,
y genera escasamente dos molculas de ATP, tal como se aprecia en la
siguiente frmula global.
GLUCOSA + 2ADP + Pi

2 lactato + 2ATP + 2H2O

Cuando la gliclisis transcurre en presencia abundante de oxgeno, tiene

como producto final el cido pirvico, el cual se transforma en actil CoA
mediante el proceso de decarboxilacin oxidativa, en ingresa al Ciclo de Krebs
donde produce 38 molculas de ATP.

29

EQUIPOS: fotocolormetro, equipo de vidrio diseado para la prctica,

bao mara, estufas, termmetros

EXPERIMENTO.- Anlisis de Glucosa Post-Prandial.

.
REACTIVOS
Material
Kit de glucosa
Muestra de suero

Unidades por
mesa
1
1

Unidades por
Fecha
1
12

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Propipetas
Beaker
micropipeta
punteras

.
Firma del alumno
Firma del profesor

Fecha Hora

30

PRACTICAS DE LABORATORIO N8:

RESPIRACIN TISULAR
La respiracin tisular es el proceso por el
cual se aprovecha la energa almacenada en
los nutrientes (glucosa,
cidos grasos,
aminocidos) a travs del Actil CoA, mediante
procesos de oxidacin.
Durante el proceso de oxidacin del Acil Coa
se forman equivalentes reductores en forma de
hidrgeno o electrones que ingresan a la cadena
respiratoria, localizada en las mitocondrias y
genera muchas molculas de ATP. Como puede
apreciarse en el esquema adjunto hay tres
fuentes de generacin de electrones que
producen 3 molculas de ATP, el isocitrato, el
cetoglutarato y el malato y una que slo
proporciona dos ATP que es el succinato,
debido a que ingresa al ciclo de Krebs a nivel de
la Coenzima Q y no del NAD como las otras.
El punto final del transporte de los electrones por la cadena respiratoria
es el oxgeno. Dos tomos de hidrgeno se unen a molcula de oxgeno
para forma una molcula de agua. El proceso oxidativo de los nutrientes se
puede seguir por el consumo de oxgeno.

EXPERIMENTO: Respiracin Tisular

El experimento estudia la respiracin tisular mediante la manometra. Un
manmetro es un instrumento que mide los cambios en la presin de los
gases. Esta basado en el principio de vasos comunicantes, si colocamos
un lquido en dos recipientes que se comunican entre s, ambas ramas
sern iguales siempre que sobre ellas exista la misma presin sobre una
de ellas disminuye los niveles de lquido se desigualan. Los equipos que
usaremos sern iguales o semejantes a los que se observan en el grfico,
es decir constan de un ambiente cerrado

31

para la reaccin, un medio de absorcin de CO2 que puede

combinar.
MATERIALES
Material
Higado de pollo
Buffer pH 7.4
Succinato de K
0.05M
Agua destilada
Silicona
Aceite de
inmersin

Unidades por
mesa
0.5
3
0.3

Unidades por
Fecha
10
60
6

0.7
1
3

14
8
60

Unidades por
mesa
5
4
2
1
1
10
1
4
1

Unidades por
Fecha
100
80
16
8
8
200
8
8
8

REACTIVOS
Material
Tubos
Pipetas
Propipetas
Gradillas
Micropipeta
Tips
pavilo
regla
Tijeras

EQUIPOS: fotocolormetro, Manometro de vidrio diseado para la practica,

bao maria, estufas, termmetros

Preparar dos frascos de acuerdo al siguiente esquema:

FRASCO N

ml Solucin de Potter pH 7,4

ml Succinato de potasio 0,5M

0,3

ml Agua destilada

0,7

ml Homogenizado

0,5

32

Cerrar bien los frascos. Incubar a temperatura ambiente. Medir cada 2 minutos
la modificacin del nivel del manmetro. Prepara un grfico de consumo de
oxgeno vs tiempo.
Consumo de oxgeno en el tiempo

0.4
(cm3)

Volumen O2 consumido

0.5

0.3
0.2
0.1
0
0

20
Tiempo (Minutos)

Comentario

33

Firma del alumno

Firma del profesor

Fecha Hora

34

PRACTICAS DE LABORATORIO N9:

COLESTEROL DE LAS FRACCIONES LIPOPROTECAS
Las protenas son lpidos complejos resultado de unir la grasa con protenas.
Los lpidos sanguneos se encuentran bajo esta forma y divididos en cuatro
tipos de lipoprotena:
Alfa lipoprotena (HDL) ricas en protenas y fosfolpidos Pre
beta lipoprotenas (VLDL): ricas en triglicrido Beta lipoprotenas
(LDL): ricas en colesterol Quilomicrones (Q): ricos en
triglicridos dietticos

Toda las lipoprotenas tienen colesterol, triglicridos, fosfolpidos y protenas,

pero en distinta concentracin relativa.
El colesterol es la grasa que genera la arterioescleroris al depositarse en
las paredes de los vasos sanguneos. El colesterol de las betalipoprotenas
est en actitud de depositarse en los vasos constituye la mayor parte del
colesterol sanguneo. El colesterol de las alfa lipoprotenas (HDL) es aquel que
est siendo retirado de los vasos, por lo que su presencia es beneficiosa.
Para investigar el colesterol de las alfa lipoprotenas usamos un reactivo
precipitante (fosfotngstico-cloruro de calcio) que precipita a las betas y
prebetalipoprotenas dejando en solucin a las alfa, sobre las que se realiza la
reaccin de color tpica del colesterol.

35

EQUIPOS:

fotocolormetro,

bao

maria,

estufas,

termmetros

EXPERIMENTO: Dosaje colesterol total y colesterol HDL en sangre.

REACTIVOS
Material
Kit de glucosa
Muestra de orina

Unidades por
mesa
1
1

Unidades por
Fecha
1
12

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Propipetas
Beaker
micropipeta
punteras

Se toma una muestra de sangre del paciente en ayuno de por lo menos 24

horas. La sangre se coloca en tubo limpio sin anticoagulante.
Preparar un tubo al que se le coloca:

1ml de suero lmpido

0.1 ml de reactivo precipitante HDL o segn inserto de reactivo.
Agitar y dejar en reposo por minutos al ambiente y Centrifugar a 3000 por
10 minutos separar el sobrenadante que es el que trabajaremos en adelante.
Preparar cuatro tubos lmpidos y colocar:
36

TUBO N
ml Suero lmpido
ml Sobrenadente anterior
ml Patrn de colesterol
ml Agua destilada
ml Reactivo de color

0,02

0,02

0,02

0,02

Agitar: Incubar por 15 minutos a 37C.

37

Leer al fotocolormetro a 520 mu los tubos 1,2 y 3, llevando a cero con el

blanco (tubo4)
Clculos
200

Colesterol mg/dl= -------- X D.O.(1 2)

D.O (3)

38

PRACTICAS DE LABORATORIO N10:

LIPIDOS: Anlisis de Triglicridos.
EXPERIMENTO: Dosaje colesterol total y colesterol HDL en sangre.
REACTIVOS
Material
Kit de
Trigliceridos
Muestra de suero

Unidades por
mesa
1

Unidades por
Fecha
1

12

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Propipetas
Beaker
micropipeta
punteras

EXPERIMENTO : Dosaje de triglicridos

Preparar tres tubos con:
TUBO N
ml Suero

0,02

39

ml Patrn de triglicridos
ml Reactivo de color

0,02

Agitar, incubar a 37C por 15 minutos

Leer al fotocolormetro a 520 nm los tubos 2 y 3 llevando a O con el tubo 1

Conc. Patrn

Triglicridos mg/dl = ------- x D.O.(2)

D.O (3)

Firma del alumno

Firma del profesor

Fecha Hora

40

PRACTICAS DE LABORATORIO N11:

Anlisis de TGP.
Una de las reacciones generales de los aminocidos es la transaminacin
o trasporte de un grupo amino de un aminocido a un cetocido, trasformado
al primero en cetocido y al segundo en aminocido.
Esta transformacin posibilita la formacin de carbohidratos a partir de
aminocidos, esto es el fenmeno de la neoglucognesis.
LA ecuacin general de estas reacciones es:
R=CH-COOH + R-C-COOG

R-C-COOH+R-CH-COOH
O

Nh2

NH2

En el caso de nuestro experimento la transaminasa que estudiaremos es la

transaminasa glutmico pirvica que transforma el alfa cetoglutrico (cetocido)
en glutmico (aminocido) y a la alanina (animocido) en pirvico (cetocido).
Esa enzima que es particularmente rica en el tejido heptico es un excelente
herramienta de estudio clnico de ese rgano, en problemas como la hepatitis
o la cirrosis heptica.
El procedimiento de anlisis se llevar a cabo mediante el anlisis
espectrofotomtrico.
EXPERIMENTO: Dosaje colesterol total y colesterol HDL en sangre.
REACTIVOS
Material
Kit de TGP
Muestra de suero

Unidades por
mesa
1
1

Unidades por
Fecha
1
12

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Pro pipetas
Beaker
Micro pipeta
punteras

Fecha Hora

41

PRACTICAS DE LABORATORIO N12:

LABORATORIO DE LIQUIDOS CORPORALES. Examen de
orina. Examen Fsico-Qumico.
EXAMEN FISICO- QUMICO
El anlisis de orina de rutina incluye pruebas qumicas para pH, protenas,
glucosa, cetonas y sangre oculta. Algunos laboratorios tambin incluyen
pruebas de bilirrubina, urobilingeno y nitrito, segn el tipo de tira reactiva que
utilice.
Desde la introduccin de tiras reactivas simples y mltiples, cintas de prueba
y tabletas, el examen qumico de la orina se ha convertido en un
procedimiento sensible y rpido. Actualmente es posible analizar hasta nueve
pruebas diferentes en menos de 60 segundos. Existen dos marcas bsicas de
tiras reactivas y cada una posee tiras reactivas con posibilidad de medir
desde una hasta nueve reacciones diferentes.
Qu es una tira reactiva? Esencialmente, es una banda angosta de plstico
con pequeos tacos adheridos. Cada taco contiene reactivos para una reaccin
diferente, lo que permite la determinacin simultnea de varias pruebas. Un
requerimiento crtico es que las reacciones de las tiras sean ledas en el momento
prescrito despus de haber sido sumergidas en la muestra, luego deben ser
comparadas cuidadosamente con la carta de colores proporcionada por el
fabricante. Con el objeto de obtener resultados exactos y confiables con las tiras
reactivas, deben tomarse ciertas precauciones para ayudar a mantener la
reactividad de los reactivos. Las tiras no deben estar expuestas en medios
hmedos, a la luz directa del sol, al calor ni a sustancias voltiles, debiendo
ser almacenadas en su envase original. Dicho envase no debe ser guardado
en el refrigerador no ser expuestos a temperaturas superiores a 30C. Estos
envases contienen un desecante, pero aun as las tiras no deben quedar
expuestas a la humedad. Sacar slo la cantidad de tiras necesarias por vez
y luego cerrar hermticamente el envase. Si los bloques de color de la tira no
se parecen a los bloques "negativos" de la carta de colores, si ha pasado
la fecha de vencimiento impresa en el envase, las tiras deben ser
descartadas. Si la muestra de orina fue refrigerada debe dejarse que alcance
la temperatura ambiente antes de efectuar las pruebas.
El procedimiento para usar las tiras reactivas es el siguiente:
Sumergir completamente las reas de prueba de la tira en orina
fresca, bien mezclada y sin centrifugar y retirar la tira en

42

forma inmediata. Debe tenerse cuidado de no tocar las reas reactivas.

Eliminar el exceso de orina de la tira tocando con el borde de ste el
frasco que contiene la muestra. Las tiras deben sostenerse en posicin
horizontal.
En el tiempo determinado comparar las reas reactivas con la
correspondiente carta de colores del envase, la lectura deben hacerse
con buena iluminacin para lograr una comparacin exacta del color.
Al mismo tiempo que se introducen mejoras en las caractersticas de las tiras
reactivas pueden modificarse las indicaciones para su uso. Esto puede
significar una diferencia en los tiempos o en los reactivos utilizados; por eso
es importante seguir siempre las ltimas indicaciones del fabricante.
An con el amplio uso de estos rpidos y convenientes procedimientos de
anlisis, sigue siendo necesario comprender los principios bsicos de las
pruebas, as como la tcnica correcta en que deben de usarse. A continuacin
se mencionarn brevemente los principios en que se basan dichos estudios,
con las tiras reactivas.
PH
En las tiras reactivas utilizan dos indicadores, el rojo de metilo y el azul de
bromotimol, que cubren la escala de pH entre 5 y 8,5 o 9. Los colores van del
anaranjado al amarillo y del verde al azul. Los resultados pueden informarse
en unidades enteras o bien valores intermedios (media unidad). Si se necesita
una lectura ms precisa, pueden hacerse las mediciones utilizando un
potencimetro con electrodo de vidrio. El momento de lectura del pH no es
un elemento crtico; sin embargo, es recomendable que el pH sea ledo en forma
inmediata ya que de este modo se evitarn lecturas errneas por rebosamiento
(run-over).
PROTENAS
Este mtodo colorimtrico se basa en el concepto conocido como "error
proteico de los indicadores", un fenmeno que se caracteriza por que el punto
de cambio de color de algunos indicadores de pH es diferente en presencia de
protenas. Por lo general el indicador cambia del amarillo al azul (o verde)
entre pH 3 y pH 4, pero en presencia de protena el cambio de color se produce
entre el pH 2 y el pH 3. en consecuencia, en presencia de protena se produce
un "error" en el comportamiento del indicador.

43

GLUCOSA
Con tiras reactivas impregnadas con la enzima glucosa oxidasa puede
detectarse slo glucosa. Estas tiras utilizan las dos reacciones enzimticas
secuenciales siguientes:
Glucosa + O2 GLUCOSA OXIDASA cido glucnico
H2O2 + cromgeno PEROXODASA cromgeno oxidado + H2O
El cromgeno que se utiliza vara con las diferentes tiras reactivas. CETONAS
Las tiras reactivas contiene reactivos el nitroprusiato de sodio y un amortiguador
alcalino. La reaccin con el cido diactico de la orina forma un color castao.
Esta tira no reacciona con acetona ni con el b -hidroxibutrico. Pueden ocurrir
resultados positivos falsos (trazas o menos) en los casos en que la muestra de
orina sea muy pigmentada o cuando posee grandes cantidades de metabolitos
de la levodopa. Algunas muestras con elevada densidad y pH pueden dar
reacciones positivas falsas (trazas, 5 mg/dL).
SANGRE OCULTA
El procedimiento de deteccin de sangre oculta con tiras se basa en la actividad
tipo peroxidasa de la hemoglobina y de la mioglobina, que catalizan la
oxidacin de un indicador por la accin de un perxido orgnico. las tiras
reactivas permiten la deteccin de eritrocitos intactos, as como la hemoglobina
libre y mioglobina. Los hemates intactos de la orina se hemolizan al contactar
con el taco reactivo. La hemoglobina liberada reacciona con el reactivo dando
puntos verdes sobre un fondo amarillo o anaranjado. Entonces, la presencia
de hemates intactos da una reaccin de color verde punteado, mientras que
la de hemoglobina libre y la mioglobina dan una coloracin uniforma de color
verde o del verde al azul oscuro.
BILIRRUBINA Y UROBILINGENO
Las tiras reactivas se basan en la reaccin de acoplamiento de una sal de
diazonio con la bilirrubina en un medio cido. Difieren, sin embargo, en la sal
de diazonio utilizada y en el color que aparece.
Para obtener resultados exactos el color de la tira debe ser comparado
cuidadosamente con el de la carta de colores.
NITRITO
En el medio cido del rea reactiva el nitrito reacciona con el cido p-arsanlico
formando un compuesto de diazonio. Este compuesto se une luego con la
1, 2, 3, 4-tetrahidro-benzo (h) quinolina-3-ol produciendo un color rosado.
La tira se lee a los 40 segundos. Cualquier grado de color rosa uniforme
5
debe interpretarse como prueba de nitrito positiva y sugiere la presencia de 10
o mas organismos por mL. De orina. El desarrollo de color rosa no debe

44

considerarse como prueba positiva. Si el color rosado uniforme es dbil es

mejor verlo colocando la tira sobre el fondo blanco.

45

Practica N 12 INFORME DE LA PRACTICA URIANALISIS

Objetivo
Realizar los procedimientos generales del urianalisis
- MATERIALES

Material

Unidades por
mesa
4
1
5
1

Beaker
Gradilla
Tubos
Guantes

Unidades por
Fecha
80
20
100
20

- REACTIVOS
Material
Muestra de orina
Tiras reactivas de orina

Unidades
por mesa
1
5
2

Unidades por
Fecha
20
100
40

Procedimientos
1. Colquese los guantes

2. Observe los aspectos fsicos de las muestras seleccionadas por el

profesor: Color, Aspecto; anote los resultados en la tabla adjunta

3. Tome una tira reactiva y sumerja la zona de anlisis dentro de cada

muestra por un lapso de 10 a 15 segundos

4. Retire la tira reactiva con cuidado, elimine el exceso y compare el

color de cada uno de los parmetros contra el cuadro de valores
correspondiente. Anote los resultados en la tabla adjunta

5. Elimine la tira en la bolsa de bioseguridad correspondiente

46

URIANALISIS
Aspecto fsico
Color
Aspecto
Densidad
Evaluacin Qumica

47

PRACTICAS DE LABORATORIO N13:

ALIMENTOS Y HEMOGLOBINA
Experimento .- Manejo de Tablas de Composicin de Alimentos
La forma ms exacta de evaluar la ingesta de nutrientes por un sujeto es
a travs del clculo de la ingesta alimentaria, bien documentada y exacta y
mediante las Tablas de Composicin de Alimentos. En la presente prctica
analizaremos:

1. Las necesidades calricas de un sujeto: tomando en cuenta, peso y

trabajo. As conocemos que una persona gasta como Metabolismo Basal
1 kcalora /kg. Peso/hora. A ello aadimos aproximadamente un 50% por
trabajo de mediana intensidad.
2. Las necesidades protecas de un sujeto: tomado su peso, aceptamos
una necesidad de 1g/kg de peso/da( en condiciones mnimas 0,5/kg
peso/da).

3. Las necesidades de nutrientes (protena, carbohidratos y grasa) de un

da al azar. Con ello podemos establecer su ingesta calrica y
proteca y por lo tanto su dficit o adecuacin.

Para el efecto usaremos la

resumida.

siguiente Tabla de Composicin de Alimentos

TABLA DE COMPOSICIN DE ALIMENTOS

g/100g de alimento
Alimento
Atn (conserva)
Bacalao (seco)
Calamar
Camarn
Carne (cerdo)
Carne (Pavo)
Carne (pollo)
Carne (pulpa)
Carne Seca
Chicharrones
Cojinova
Corvina
Hgado
Huevo (total)
Jamn del Pas
Jamn Ingls

Protena
29,0
81,8
16,4
17,3
15,0
20,1
18,2
21,3
48,1
11,3
20,2
19,9
19,5
12,8
15,9
25,8

Lpido
4,8
2,8
0,9
0,2
15,1
20,2
10,2
1,6
9,4
61,4
0,7
0,9
6,6
11,8
26,6
20,5

Carbohidratos
0,0
0,0
0,0
2,5
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
0,0
3,6
1,0
0,0
0,0

48

Leche fresca
Lenguado
Merluza
Pejerrey
Queso Fresco
Queso mantecoso
Tocino
Trucha

Arroz (seco)
Alimento
Arveja (verde)
Avena
Bizcocho
Camote
Fideos
Frejol negro
Frejol soya
Frejol tarhui
Galletas (soda)
Galletas (Vainilla)
Garbanzo

Alimento

Lentejas
Maz (cancha)
Maz (choclo)
Man
Nuez
Olluco
Pallares
Pan (frances)
Papa blanca
Papa Seca
Quinua
Yuca
Aceitunas
Blanquillo
Cebolla
Coco
Col

2,9
19.0
19,3
18,7
16,0
25,8
9,1
18,2

3,3
0,5
0,8
1,2
10,3
20,2
65,0
1,0

7,0
0,0
0,0
0,0
3,7
7,4
1,6
0,0

6,5
Protena
8,3
10,6
8,8
1,2
8,7
21,2
33,4
40,9
9,4
6,0
19,1

0,7
0,7
0,9
6,9
0,2
0,3
1,7
16,4
13,4
14,7
12,7
5,1

78,1
Carbohidratos
24,2
68,5
64,4
27,1
78,3
53,3
35,5
27,3
67,9
75,0
61,4

Protena

Lpido

22,8
6,7
3,3
28.8
13,7
0,8
19,9
9,2
2,1
8,3
11,9
0,8
1,2
0,6
0,9
3,8
1,4

1,2
2,7
0,8
46,9
67,2
0,1
1,1
0,3
0,3
0,5
4,7
0,2
33,2
0,1
0,1
18,9
0,0

Carbohidratos

59,4
79,8
27,8
18,1
13,2
14,2
61,8
68,2
22,4
73,2
67,6
39.3
6,8
17,1
7,4
19,7
5.2

49

Alimento
Aceite
Azucar
Chocolate
Cocoa
Gelatina(seca)*
Limn
Maizena
Margarina
Naranja
Palta
Papaya
Platano isla
Uva negra

Protena
0,0
0,0
2.0
9,0
85,6
0.5
8,0
0,6
1.2
1,7
0,4
0,8
0,3

Carbohidratos
100
0,0
30,0
19,0
0,1
0,0
3,0
81
0,0
12,6
0,1
0,2
0,1

0,0
99,5
60,0
31,0
0,0
11,2
74,0
0,4
11,2
6,5
8,3
23,8
17,9

* Se usan al 3-4g%

GASTOS DE ENERGIA DE ACUERDO A ACTIVIDAD Y SEXO

ACTIVIDAD
Durmiendo
Muy Ligera: manejo de auto,
laboratorio, mecanografa, coser
y planchar
Ligera:
caminar,
carpintera, mecanica,
Moderada:
fregar pisos,
lavado de ropa
ciclismo, tenis, baile
Pesada: albail, natacin,
ftbol, bsquetbol.

MUJER :
HOMBRE :
Kcal /kg/hora
Kcal /k Kg/hora
1,1
1,0 1,2
,92,0
1,2 2.5
1,13,9

2,5-4,9

2,0-

5,9

5,0-7,4

4,0-

10,0

7,5-12,0

6,0-

PRACTICA:
ANALISIS DE HEMOGLOBINA
MATERIALES
REACTIVOS
Material
Kit de
Hemoglobina
Muestra de suero
sanguneo

Unidades por
mesa
1

Unidades por
Fecha
1

12

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Pro pipetas
Beaker
Micro pipeta
punteras

PRCTICA N 14
CREATININA.
La creatinina es un compuesto orgnico generado a partir de la degradacin de
la creatina (que es un nutriente til para los msculos). Se trata de un producto de
desecho del metabolismo normal de los msculos que habitualmente produce el
cuerpo en una tasa muy constante (dependiendo de la masa de los msculos), y que
normalmente filtran los riones excretndola en la orina. La medicin de la creatinina
es el modo ms simple de monitorizar la correcta funcin de los riones.
ndice
[ocultar]

1Uso en diagnstico
2Interpretacin
3Vase tambin
4Enlaces externos
Uso en diagnstico[editar]
Medir la creatinina del suero es una prueba simple y es el indicador ms comn de la
funcin renal. Un aumento en los niveles de creatinina de la sangre solamente es
observada cuando hay un marcado dao en las nefronas (RC). Por lo tanto, esta
prueba no es conveniente para detectar estados tempranos de enfermedad del rin.
Una mejor valoracin de la funcin del rin la da la prueba de aclaramiento de
creatinina. La separacin de creatinina puede ser calculada con precisin usando la
concentracin de la creatinina del suero y alguna o todas las variables siguientes:
sexo, edad, peso, y raza segn lo sugerido por la National Diabetes Association con
una recoleccin de orina de menos de 24 horas. Algunos laboratorios calcularn el
ClCr si est escrito en la forma de solicitud de la patologa; y, la edad, el sexo, y el
peso necesarios son incluidas en la informacin del paciente.
ANALISIS DE CREATININA

REACTIVOS
Material
Kit de creatinina
Muestra de orina

Unidades por
mesa
1
1

Unidades por
Fecha
1
12

MATERIALES
Material
Gradilla
Tubos
Pipetas
Pro pipetas
Beaker
Micro pipeta
punteras

Unidades por
mesa
1
06
2
2
1
2
8

Unidades por
Fecha
24
150
40
20
12
8
160

50