INTRODUCCION A QUIMICA SANGUINEA

Dr. Daniel Guardia

QUIMICA CLINICA FUNDAMENTOS Y APLICACIONES
Espectrofotometra. Principios bsicos
Reacciones colorimtricas. Midiendo la intensidad de color se podra conocer la
concentracin de la sustancia que lo produce. Para ello se aplican tcnicas fotomtricas,
empleando un aparato llamado colormetro (si mide slo un determinado color) o
espectrofotmetro (si realiza una medida de todo el espectro de colores).
La luz es parte de la radiacin electromagntica, que se propaga de forma ondulatoria. Las
distintas radiaciones luminosas (los distintos colores) se diferencian unas de otras por sus
longitudes de onda ( (distancia entre la cresta de una onda y la siguiente), que se mide en
nm. La luz visible engloba las radiaciones comprendidas entre 380-750 nm, que
corresponden a los colores del arco-iris, de tal forma que cada color corresponde a una
radiacin con una especfica. El espectrofotmetro dispone de una lmpara que emite luz
monocromtica, de una longitud de onda determinada, que incide y atraviesa la muestra
coloreada a medir, y de un detector, que medir la cantidad de luz que no es absorbida por
la muestra. Para cada sustancia determinada, se utilizar la radiacin de longitud de onda a
la que absorba ms cantidad de luz.
Su funcionamiento de basa en la ley de Beer-Lambert: la fraccin de luz incidente que es
absorbida por una solucin es proporcional a la concentracin de soluto y al espesor de la
sustancia atravesada por la luz. La relacin entre la luz incidente (I0) y la reflejada (I) dar
una idea de la cantidad de radiacin que ha sido absorbida por la muestra. Es lo que se
denomina Absorbancia (Abs) o Densidad ptica (DO)
La Ley de Beer-Lambert se formula como
Abs (DO) = e x C x l
Siendo e el coeficiente de extincin molar (especfico para cada sustancia a una l y en unas
condiciones determinadas) (M-1 cm-1), C la concentracin de la muestra a medir (M), y l el
espesor de la muestra. La mayora de los espectrofotmetros utilizan cubetas para la
muestra de 1 cm de espesor, por lo que l se puede ignorar. As, la concentracin
desconocida de la sustancia coloreada ser
C = Abs / e
Enzimologa clnica
Valor diagnstico de las enzimas en el plasma
La enzimologa clnica es la aplicacin del conocimiento de las enzimas (protenas
especializadas en la catlisis de reacciones orgnicas) al diagnstico, tratamiento y

pronstico de la enfermedad.
Aunque son raras las enzimas exclusivas de un tejido, la alteracin de la concentracin
srica de un enzima determinada orienta sobre los tejidos ms probablemente afectados.
Adems, muchas enzimas muestran distintas formas moleculares (isoenzimas)
caractersticas de distintos tejidos. El anlisis isoenzimtico de la enzima cuya
concentracin srica se encuentra alterada a menudo aporta informacin adicional sobre las
causas de dicha alteracin.
Muy frecuentemente la informacin deseada se obtiene examinando dos o ms enzimas
sricas ej. una elevacin en -glutamil-transferasa indicar, con gran probabilidad,
colestasis si aparece aumentada tambin la fosfatasa alcalina srica.
El tipo de alteracin observada tambin proporciona gran informacin:
Lo ms frecuente es encontrar elevaciones debidas a aumentos de permeabilidad celular
dao tisular.
Es posible detectar disminuciones debidas a enfermedades crnicas que originan
disfuncin celular.
El grado de alteracin de la concentracin cataltica puede ser orientativo de determinadas
alteraciones ej. las aminotransferasas sricas muestran aumentos ms importantes en
hepatitis agudas que en hepatitis crnicas.
Dependiendo del grado de permeabilidad y de la distancia entre clulas y capilares existir
un mayor o menor desfase entre el momento de deteccin del aumento de actividad
enzimtica y el momento de dao tisular.
Principios del anlisis de enzimas
La concentracin de enzimas en suero es muy baja, sin embargo, dada su eleva capacidad
cataltica, es posible determinar su actividad y presuponer que sta es proporcional a su
concentracin. Por tanto, el estudio de las enzimas en el laboratorio se basa en la
demostracin in vitro de la actividad cataltica.
Se puede determinar la actividad enzimtica analizando:
La aparicin de algn producto
La desaparicin del sustrato
La variacin de un cofactor o de algn componente de la reaccin En definitiva, la
actividad de una enzima se mide mediante la determinacin de la cantidad de sustrato
formado por unidad de tiempo, en condiciones exactamente definidas (pH, T) y
estrictamente controladas.
La actividad enzimtica se expresa Unidades Internacionales (UI) por unidad de volumen
(UI/ml, UI/L) siendo una UI la cantidad de enzima que transforma un micromol de
sustrato por minuto en condiciones estndar previamente establecidas.
En una reaccin enzimtica podemos diferenciar 3 fases: fase de retardo, fase lineal y fase
de agotamiento de sustrato.
La fase de retardo tiene lugar inmediatamente despus de mezclar los reactivos con la
muestra biolgica. Es una fase de encuentro y acoplamiento de sustrato y enzima. Su
duracin es muy variable (segundos a minutos). Al finalizar esta fase comienza la fase
lineal en la que la formacin de producto permanece constante, siendo la concentracin de
enzima de la muestra es el nico factor limitante. Por ltimo, a medida que va
transcurriendo la reaccin, llega un momento en que el sustrato u otro reactivo se van
agotando (fase de agotamiento de sustrato) y lavelocidad de reaccin disminuye hasta

anularse.
Para que una determinacin enzimtica sea vlida es necesario realizarla en la fase lineal
donde el nico factor limitante es la concentracin de la propia enzima y las condiciones de
reaccin son las ptimas (exceso de sustrato y otros reactivos). Para ello se suele trabajar
con una concentracin de sustrato superior a la Km. As, en un ensayo enzimtico, el lmite
de linealidad es la actividad enzimtica ms alta que se puede medir con exactitud. Por
encima de ese valor habr que diluir el suero con solucin salina y multiplicar el resultado
obtenido por el factor de dilucin.
Cmo se obtiene en el laboratorio clnico el valor numrico de actividad enzimtica?
Generalmente la actividad enzimtica se evala mediante ensayos espectrofotomtricos, por
tanto necesitamos seguir la evolucin de alguno de los elementos que participan en la
reaccin y que, por supuesto, deben absorber luz a una determinada longitud de onda as:
Si el producto absorbe luz a una longitud de onda determinada podemos evaluar la
aparicin del producto analizando el incremento de absorbancia a dicha longitud de onda.
Si el sustrato absorbe luz a una longitud de onda determinada podemos evaluar la
desaparicin del sustrato analizando la disminucin de absorbancia a dicha longitud de
onda.
De igual modo podemos analizar la variacin de un cofactor o de algn componente de la
reaccin. Ej. es muy frecuente utilizar la aparicin o desaparicin de NADH o NADPH, as
NAD+ NADH
NADP+ NADPH
Aumenta la absorbancia a 340nm
NADH NAD+
NADPH NADP+
Disminuye la absorbancia a 340nm
De cualquiera de estas maneras podremos:
analizar como evoluciona la absorbancia, es decir la reaccin, a lo largo del tiempo y
obtener un valor de A/min
En ocasiones ninguno de los elementos que participan directamente en la reaccin absorben
luz, en cuyo caso es necesario acoplar una segunda reaccin en la que alguno de los
reactivos o productos presenten un mximo de absorcin. Analizando esta segunda reaccin
podremos evaluar la actividad enzimtica de la primera.
Los mtodos analticos para determinar la actividad enzimtica y por tanto el A/min pueden
ser:
Mtodos a punto final
Mtodos cinticos
En definitiva, ya sabemos la fase en la que hemos de trabajar, que parmetro obtenemos
experimentalmente y como lo obtenemos pero cmo convertimos? A/min en UI/L?
Para obtener el valor definitivo de actividad enzimtica aplicamos la siguiente frmula:
Donde:
e es el coeficiente de extincin molar de aquel compuesto cuya absorbancia estamos
siguiendo en el espectrofotmetro.
b es el espesor de la cubeta
VF es el volumen total de reaccin
VI es el volumen de muestra en el ensayo
Para un determinado ensayo todos los parmetros mencionados anteriormente son
constantes por tanto podemos la frmula anterior queda como:

UI/L= A/min cte

Aspectos prcticos
No utilizar muestras que hayan sido congeladas y descongeladas varias veces.
Separar lo antes posible el cogulo del suero y evitar trabajar con muestras bemolizadas
Evitar la estasis venosa prolongada durante la extraccin
Evitar el envejecimiento de las muestras
El transporte de las muestras debe realizarse en fro sin congelar, salvo que se vaya a
prolongar mucho tiempo.
Determinacin enzimtica de sustratos.
En el laboratorio no slo se puede determinar la actividad de enzimas de inters clnico,
tambin es muy frecuente utilizar enzimas en la determinacin de sustratos ej. mtodos
enzimticos (GOD/POD o de la hexoquinasa) para determinar la concentracin de glucosa
de una muestra.
QUIMICA SANGUINEA
PRUEBAS QUE SE REALIZAN EN LA SECCION DE QUIMICA SANGUINEA
Glicemia
DEFINICION
La glucosa es un hidrato de carbono que constituye la principal fuente de energa del
organismo. Su concentracin sangunea se mantiene dentro de estrechos mrgenes a lo
largo del da, a pesar de los cambios que se producen tras la alimentacin y el ayuno,
debido a efectos combinados de la insulina, glucagn, cortisol, epinefrina y hormona del
crecimiento.
IMPORTANCIA CLINICA
Niveles elevados de glucosa (hiperglicemia) pueden ocurrir en pacientes con neoplasma
pancretico, hipertiroidismo, hiperfuncin adenoneocortical entre otros desordenes. Niveles
disminuidos de glucosa (hipoglicemia) puede resultar de una terapia con insulina excesiva o
varias enfermedades del hgado.
La patologa asociada ms comn es la diabetes mellitus, sndrome caracterizado por una
secrecin anormal de insulina que se refleja en una tendencia a la hiperglicemia, a veces
glicosuria y otras manifestaciones vasculares y metablicas. Mediante un diagnstico
precoz se evita la cetoacidosis.
FUNDAMENTO
La glucosa oxidasa cataliza la oxidacin de la glucosa de acuerdo con la reaccin siguiente:
Glicose + O2 + H2O cido Glucnico + H2O2
el perxido de hidrgeno formado reacciona con el 4-aminoantipirina y el fenol, bajo
accin cataltica del peroxidase, con una reaccin del oxidativa del acoplamiento, formando
un antipirilquinonimina rojo cuya intensidad del color es proporcional a la concentracin de
la glucosa en la muestra.
2H2O2 + 4-Aminoantipirina + fenol Antipirilquinonimina + 4H2O
Urea
DEFINICIN
La urea es un compuesto que se forma en el hgado y es filtrado y absorbido por los
riones. Constituye la fraccin de nitrgeno no proteico en la mayora de los lquidos

biolgicos. Este es el principal producto final del metabolismo proteico, de donde se

deduce que su concentracin srica se relaciona con la dieta y el metabolismo.
IMPORTANCIA CLNICA
La urea es un evaluador de la funcin renal, ya que aumenta cuando hay insuficiencia renal
o necrosis y disminuye en la fibrosis qustica, eclampsia y sndrome nefrtico. Tambin es
indicador de enfermedad heptica pues su sntesis disminuye ante procesos necrticos del
hgado.
FUNDAMENTO
El ensayo es una evaluacin cintica en la cual el rango inicial de la reaccin es lineal para
un periodo limitado de tiempo. La urea presente en la muestra es hidrolizada por la enzima
ureasa a amonio y dixido de carbono. La segunda reaccin, catalizada por la glutamato
deshidrogenasa (GLD) convierte el amonio y el alfa-ketoglutarato a glutamato y agua con
la oxidacin subsiguiente de nicotinamida adenina dinuclesido reducida (NADH) a
nicotinamida adenina dinuclesido (NAD). Dos moles de NADH son oxidados por cada
mol de urea presente. El rango inicial de descenso en la absorbancia a 340 nm es
proporcional a la concentracin de urea en la muestra.
Creatinina
DEFINICION
La creatinina es un producto de degradacin catablica de la creatina, en el msculo
esqueltico. Es un compuesto soluble que se elimina nicamente a travs del rin por
filtracin, por tanto es un indicador directamente proporcional de la funcin renal, y si sta
es normal el nivel srico permanecer constante.
IMPORTANCIA CLINICA
Se encuentra elevada en insuficiencia renal aguda y crnica, glomerulonefritis,
pielonefritis, necrosis tubular, obstruccin urinaria, anuria e hipertiroidismo. Disminuye
durante el embarazo y cuando hay prdida de masa muscular.
FUNDAMENTO
A un pH alcalino, la creatinina presente en la muestra reacciona con el picrato para formar
un complejo de creatinina-picrato. La tasa de incremento en la absorbancia a 500 nm,
debida a la formacin del complejo, es directamente proporcional a la concentraron de
creatinina presente en la muestra.
Acido rico
DEFINICIN
El cido rico es un metabolito de las purinas, cidos nucleicos y nucleoprotenas.
IMPORTANCIA CLNICA
Niveles anormales pueden ser indicativos de un desorden en el metabolismo de purinas,
cidos nucleicos y nucleoprotenas. La hiperuricemia puede observarse en disfuncin renal,
gota, leucemia, policitemias, arterosclerosis, diabetes, hipotiroidismo o en algunas
enfermedades genticas. Niveles inferiores estn presentes en pacientes con la enfermedad
de Wilson
FUNDAMENTO
La prueba para cido rico esta basada en los mtodos de Trivedi y Kabasakalian. El cido
rico es oxidado por uricasas, con la produccin de peroxido de hidrogeno ( H2O2). El
H2O2 reacciona con 4-aminoantipirina (4-AAP) y 2, 4, 6-tribromo-3-hidrxido cido
benzoico (TBHB) en presencia de peroxidasa. Los resultados en absorbancias de 548 nm
son proporcionales a la concentracin de cido rico de la muestra.

El rico cido se determina de acuerdo con las reacciones siguientes:

Uricase
cido rico + O2 + H2O Alantona + CO2 + H2O2
Peroxidase
2H2O2 + TBHB + 4-aminoantipirina Antipirilquinomina + 4H2O
La intensidad del color rojo formado es directamente proporcional a la concentracin de
acido rico cido en la muestra.
Colesterol total
SIGNIFICADO CLINICO
El gran dilema de la aterosclerosis es que es un proceso silencioso. Es activa en todos los
individuos y permanece sin ninguna manifestacin por dcadas y se manifiesta
repentinamente dolor torcico, infarto agudo de miocrdio(IAM) o la muerte sbita.
Estudios poblacinales longitudinales como los de Tecumset, Albany, Framinghan, Evans,
Chicago, Oslo entre otros, y tambin datos epidemilogos experimentales en animales, han
demostrado una correlacin positiva entre los niveles del colesterol, ms necesariamente
del colesterol LDL y del riesgo de IAM. Al mismo tiempo fue evidenciado que los niveles
HDL del colesterol, son inversamente proporcionales al riesgo de IAM.
Los valores aumentados de colesterol se encuentran en nefrosis, hipotireoidismo, las
enfermedades colestticas del hgado y en los hiperlipoproteinemias de los tipos IIa, IIb y
III.
Los niveles diminudos se encuentran en el hipertireoidismo, la desnutricin crnica,
anemia sideroblstica y talasemia. Las enfermedades hepticas graves pueden reducir los
niveles de colesterol drsticamente.
El nvel de colesterol srico, juntamente con la hipertension arterial y el consumo de
cigarrillos, constituyen fatores de riesgo de aterosclerosis e IAM.
FUNDAMENTO
O colesterol total determinado de acuerdo con las siguientes reacciones:
Colesterol
steres de colesterol Colesterol + cidos graxos
Esterase
Colesterol
Colesterol + O2 Colest-4-en-ona + H2O2
Oxidase
Peroxidase
2H2O2 + Fenol + 4-Aminoantipirina Antipirilquinonimina + 4H2O
A intensidade da cor vermelha formada diretamente proporcional concentrao de
colesterol na amostra.
HDL colesterol
DEFINICIN
Es una pequea partcula constituida por un 50% de protenas (Apo-A, Apo C, y algo de
Apo-E), un 20% de colesterol y un 30% de fosfolipidos. Su funcin consiste en transportar
el colesterol desde los tejidos perifricos hasta el hgado para ser eliminado. Los niveles de
HDL se incrementan en quienes realizan ejercicio o consumen cantidades moderadas de

alcohol.
SIGNIFICADO CLINICO
La determinacin de la concentracin srica del colesterol de la lipoprotena de alta
Densida (HDL-C) constituye parte integrante de la evaluacin laboratorial del metabolismo
lipdico que se estudia para estimar el riesgo de enfermedad cardiaca coronaria(ECC).
Se encuentra bien establedida la relacion inversa entre a concentracion de HDL-C y ECC.
El estudio clsico de Framingham, conducido entre 1969 e 1971, apunto evidncias de una
fuerte asociacion negativa entre los nveles do HDL-C y la incidncia de ECC en hombres
y mujeres (com edad superior a 50 anos). Los resultados de diversos estudos clnicos y
epidemiolgicos han demonstrado que el aumento de 1 mg/dL em la concentracion do
HDL-C reduce en 2 a 3% o riesgo de desencadenamiento de ECC.
Las concentraciones del colesterol total y del colesterol HDL dependen de metabolismos
distintos no tiene que hacerce ninguna tentativa de buscar la correlacin entre sus niveles de
la concentracin.
FUNDAMENTO
Las lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL) y las lipoprotenas de baja densidad (LDL)
son cuantitativamente precipitadas, despus de la centrifugacion, el colesterol ligado a las
lipoprotenas de la alta densidad (colesterol HDL) se determinan en el sobrenadante.
LDL colesterol
DEFINICIN
Colesterol ligado a lipoprotenas de baja densidad. El colesterol es un componente de las
membranas celulares y un estado inicial para las hormonas esteroides y el cido vesicular,
que es producido por celdas del cuerpo y recibido con el alimento. El colesterol va a
transportar en el plasma sobre protenas de lpidos, complejos de lpidos y apolipoporteinas
IMPORTANCIA CLNICA
El colesterol LDL (LDL-C) es conocido como un factor de riesgo independiente para las
enfermedades coronarias. Aunque la determinacin de colesterol total haya sido utilizada
para el seguimiento de hipercolesterolemia, estudios epidemiolgicos recientes
demostraron la importancia de determinar los niveles sericos de LDL-C para la
identificacin de pacientes de riesgo elevado.
FUNDAMENTO
La prueba permite medir de forma directa los niveles de LDL-C en suero, a travs de un
mtodo de eliminacin que consta de dos pasos. En el primer paso, quilomicrn, VLDL y
HDL se eliminan bajo condiciones especficas, de esta forma queda solo el colesterol que
proviene del LDL. De hecho estas fracciones sufren la oxidacin (por accin de las enzimas
colesterol esterasa y colesterol oxidasa) dando lugar a colestenona y H2O2, degradada
posteriormente por la catalasa. En el segundo paso, despus de varias reacciones
enzimaticas y en presencia de agentes tensoactivos, el LDL-C que ha quedado se puede
medir de forma especifica debido a la formacin de color (quinona coloreada). La
intensidad del color es directamente proporcional a la concentracin de LDL-C presente en
la muestra.
Triglicridos
DEFINICIN
Los triglicridos son un aforra de grasas presentes en el torrente sanguneo para almacenar
energa. Son transportados por lipoprotenas de muy baja densidad (VLDL) y de baja

densidad (LDL). El hgado produce triglicridos a partir del glicerol y los cidos grasos.
IMPORTANCIA CLNICA
Cuando su nivel es muy alto se depositan en el tejido graso. La determinacin de
triglicridos hace parte del perfil lpidico junto con el colesterol y las lipoprotenas, y por
tanto es til para evaluar el riesgo de enfermedad coronaria y vascular perifrica. Sus
niveles sricos estn influenciados por la dieta, el consumo de alcohol, el embarazo, uso de
anticonceptivos y algunos frmacos. Se encuentra aumentado en las hiperlipidemias,
hipotiroidismo, diabetes descontroladas, riesgo de enfermedad vascular o coronaria,
sndrome nefrtico, hipertensin, cirrosis, entre otras.
La determinacin de los triglicridos se lleva a cabo en el laboratorio clnico moderno,
porque es tan importante y necesario para la clasificacin y el fenotipificacion de
hiperlipoproteinaemias. Tambin es importante la estrecha correlacin que existe entre la
hipertrigliceridemia y aumento del riesgo coronario en las mujeres.Las causas de niveles
elevados de triglicridos son las distintas enfermedades de los lpidos llamado
hiperlipidemia o hiperlipoproteinemia. Estos, son de causa primaria o secundaria, la
elevacin de los triglicridos en los tipos I, IIb, III, IV y V.La hiperlipidemia puede estar
asociada con la enfermedad cardiovascular y ocurre comnmente en la diabetes,
alcoholismo, pancreatitis, enfermedades por almacenamiento de glucgeno, sndrome
nefrtico, hipotiroidismo, embarazo, uso de anticonceptivos y el mieloma mltiple y otras
enfermedades.Varias mujeres que estaban usando estrgenos o anticonceptivos orales se
han incrementado los niveles de triglicridos. Hipertrigliceremia tambin est asociado con
el uso de diurticos tiazidas y beta bloqueantes.
FUNDAMENTO
Los triglicridos son enzimaticamente hidrolizado por lipasa a cidos grasos libres y
glicerol. El glicerol es fosforilado por adenosin difosfato (ADP). Glicerol-3-fosfato es
oxidado a dihidrooxiacetona fosfato (DAP) por la fosfato oxidasa (GPO) produciendo
perxido de hidrgeno (H2O2). En una reaccin de color catalizada por la peroxidasa el
H2O2 reacciona con el 4-aminoantipirina (4-AAP) y el 4-clorofenol (4-CP) para producir
un producto de color rojo. La abosrbancia de este compuesto es proporcional a la
concentracin de triglicridos presente en la muestra.
Os Triglicrides so determinados de acordo com as seguintes reaes:
Lipase da
lipoprotena
Triglicrides Glicerol + cidos Graxos
Glicerolquinase
Glicerol + ATP Glicerol-3-Fosfato + ADP
Mg +2
Glicerol-3-fosfato
Glicerol-3-Fosfato + O2 Dihidroxiacetona + H2O2
Oxidase
Peroxidase
2 H2O2 + 4 Aminoantipirina + ESPAS Quinoneimina + 4 H2O
A intensidade da cor vermelha formada diretamente proporcional concentrao dos
Triglicrides na amostra.
Fosfolipidos
SIGNIFICADO CLINICO
Los fosfolpidos son molculas lipdicas que contienen fosfatos.

Su funcin como componente principal de las membranas celulares hace de los fosfolpidos
un elemento esencial para las clulas.
La determinacin de fosfolpidos en suero es un indicador clnico importante para el
diagnostico de alteraciones del hgado, fundamentalmente ictricas obstructivas.
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuente todos los datos clnicos y de
laboratorio.
FUNDAMENTO
Los fosfolpidos (combinaciones de lpidos con fosfatos) . Se puede determinar su
presencia en sangre por mtodos qumicos y enzimticos. Los primeros se basan en la
determinacin del contenido de fsforo de los fosfolpidos. Los segundos se basan en la
hidrlisis de los fosfolpidos y en la posterior determinacin de algn producto de la
reaccin (glicerol, fosfato, etc.)
Fructosamina
SIGNIFICADO CLINICO
Fructosamina es el nombre genrico dado a todas las protenas glucosilada, de los cuales la
mayor parte se debe a la albmina, que constituye la ms grande masa proteica del cuerpo
despus de la hemoglobina.
As como la formacin de hemoglobina glicosilada se debe a una modificacin no
enzimatica, dependiente del nivel de glucosa en la sangre, lo mismo sucede con la
glucosilacin de otras protenas plasmticas2. La vida media de las protenas vara entre 1 a
3 semanas, a diferencia de la hemoglobina, cuya vida media es de 120 das. Por lo tanto, se
espera que a medida que el valor de hemoglobina glicosilada refleja el control de glucmia
en los 2 meses anteriores a la prueba, la protena glicosilada refleja las concentraciones de
glucosa en plasma en los 20 das anteriores. Por lo tanto, la fructosamina esta elevada en
todos los casos de diabetes con control metablico inadecuado. Cuando se observa la
prdida de control de la glucemia, la respuesta de fructosamina, con un aumento de los
valores es casi simultnea a la hiperglucemia, retomando los valores de referencia 3
semanas despus de la respuesta al tratamiento. La prueba no sufren interferencias de los
medicamentos, la dieta, la glucosa en la sangre del momento y no se observ diferencia
significativa entre hombres y mujeres. La disminucin de los valores se han observado en
pacientes con altas prdidas de albmina o enfermedades que aumentan el catabolismo
proteico. La prueba no debe ser usado para rastrear la tolerancia a la glucosa, debido a su
sensibilidad a los pequeos a una tolerancia a la glucosa oral.
FUNDAMENTO
La glucosa se une a grupos amino de las protenas que forman una base de Schiff
(aldimina), que despus de un reordenamiento molecular, se convierte en un ketoamines
estable denominados genricamente frutosamina1. En el pH alcalino de la fructosamina se
convierte en la forma enol, lo que reduce el azul nitrotetrazol un "formazn morado. La
diferencia en la absorbancia despus de incubacin a 10 y 15 minutos, es proporcional a la
concentracin de fructosamina en amostra2. Calibracin el sistema se realiza con calibrador
de la matriz de la especie bovina, calibrado con polilisina glucosilada. Los resultados se
expresan en micromoles por litro (mmol / L).
Electrolitos
Los electrolitos con iones que existen en los lquidos corporales. Los principales cationes
en el lquido extracelular con sodio (Na+) y potasio (K+), mientras que los aniones
principales con Cl- y HCO3-. El metabolismo resulta afectado por las concentraciones de
stos electrolitos, los cuales determinan la osmolalidad, el estado de hidratacin y el pH

intra y extracelulares. Adems la diferencia de concentraciones intra y extracelular de

electrolitos regulan los potenciales de membrana y el funcionamiento normal del tejido
muscular y nervioso.
RECOMENDACIONES:Las muestras de fluidos biolgicos se deben obtener siguiendo los
mismos procedimientos que para cualquier otra prueba de laboratorio. Siempre que sea
posible, deben utilizarse muestras de suero, plasma, LCR recin extrados. No se
recomienda el uso de sangre total como muestra. El suero se debe separar inmediatamente
despus de coagulada la muestra.
Sodio
DEFINICIN
El sodio es el principal in del plasma; por lo que sus mximas concentraciones se hallan a
nivel extracelular, este in se encarga de mantener el equilibrio cido-base y la presin
osmtica, la hiperosmolaridad plasmtica induce un desplazamiento de agua del espacio
extravascular con la produccin de hiponatremia por dilucin. Por lo tanto se utiliza en la
evaluacin del balance cido-base, el balance hdrico, intoxicacin acuosa y deshidratacin.
IMPORTANCIA CLNICA
Se encuentra aumentado en la hipersecrecin de aldosterona y hormona
adrenocorticotrpica, insuficiencia renal. Disminuye cuando la secrecin de hormona
antidiurtica es inadecuada, ingesta exagerada de agua, vmito y diarrea.
Potacio
DEFINICIN
El potasio es el principal catin intracelular y slo el 2% corresponde al espacio
extravascular. Los riones excretan entre el 80 y 90% de la cantidad ingerida.
IMPORTANCIA CLNICA
Se utiliza en la evaluacin del balance electroltico, especialmente en pacientes con
alimentacin intravenosa, pacientes con tratamiento diurtico, pacientes con falla renal,
hemodilisis o con neuropatas. Tambin es til en pacientes hipertensos, con acidosis,
enfermedades gastrointestinales, debilidad muscular, deshidratacin, quemaduras o crisis
hemolticas.
Cloro
DEFINICIN
La determinacin de cloro en sangre, orina o LCR sirve para hacer una evaluacin de nivel
de electrolitos, del balance cido-base, del balance hdrico y cetosis.
IMPORTANCIA CLNICA
Generalmente aumenta o disminuye junto con el sodio. Se halla aumentado en
deshidratacin, diabetes inspida, intoxicacin por salicilatos, acidosis tubular renal e
insuficiencia renal aguda. Disminuye cuando la ingestin de sal es baja, vmito o diarrea,
sudoracin excesiva, secrecin gstrica persistente, intoxicacin hdrica. En LCR los
niveles de cloruro son similares a los del suero, pero disminuyen en la meningitis
bacteriana
Calcio
IMPORTANCIA CLINICA
El adulto tiene de 1000-1500 gramos de Calcio; de l un 99% se encuentra en el esqueleto.
Una parte del calcio plasmtico (40%), se encuentra unido a protenas, un 10% a
bicarbonato, citrato fosfatos y el 50% restante como Calcio libre inico, que es el nico
fisiolgicamente activo. La concentracin plasmtica del calcio total es de 8,5-10,5 mg/ml,

pero hay que corregirla en relacin a las protenas totales y ms concretamente con los
valores de albmina srica. Tambin los cambios del pH alteran la unin del calcio con las
protenas: as un HP alcalino aumenta dicha unin produciendo una disminucin de la
fraccin ionizada, mientras que el Calcio srico total permanece inalterable. Tambin la
natremia puede afectar la unin del Calcio con la albmina: as la hiponatremia menor de
120 mEq/l provoca un aumento del calcio unido a protenas y la hipernatremia mayor de
155 mEq/l. una disminucin.. El metabolismo del calcio est regulado por la hormona
paratiroidea (PTH), los metabolitos de la Vitamina D y la Calcitonina. La PTH aumenta el
calcio srico, ya que estimula la resorcin sea, aumenta la reabsorcin renal y fomenta la
conversin renal de la vitamina D hacia su metabolito activo el Calcitriol. La PTH aumenta
la eliminacin renal del fosfato. El calcio srico regula la secrecin de PTH a travs de un
mecanismo de retroalimentacin: la hipocalcemia estimula la liberacin de PTH mientras
que la hipercalcemia la suprime. La vitamina D se absorbe a travs de los alimentos y se
sintetiza en la piel tras la exposicin solar; su metabolito activo el Calcitriol aumenta el
calcio srico; adems aumenta la absorcin de fosfato por el intestino.
FUNDAMENTO
El calcio reacciona con arsenazo III en medio ligeramente cido formando el complejo de
calcio- arsenazo III de color azul, cuya intensidad es directamente proporcional a la
concentracin de calcio en la muestra. La absorbancia del producto de reaccin se mide en
longitudes de onda de 600 o 660 nm.
Fosforo
IMPORTANCIA CLINICA
El fsforo, es esencial para la formacin del hueso y el metabolismo energtico celular. Un
85% se encuentra en el hueso y la mayor parte del resto dentro de las celulas; solo un 1%
est en el liquido extracelular. Por ello los niveles de fsforo srico no reflejan las reservas
de fsforo inorgnico. Se encuentra dentro del organismo en forma de fosfato en una
cantidad de 700-800 gr. en el adulto, siendo el anin intracelular de mayor concentracin.
Es esencial en el metabolismo de los hidratos de carbono, grasas y protenas. Es substrato
necesario para la formacin de enlaces de alto nivel energtico, del ATP y fosfocreatina,
que mantiene la integridad celular, posibilitando la contraccin muscular, las funciones
neurolgicas, la secrecin hormonal y la divisin celular. su concentracin srica se expresa
como masa de fsforo, las cifras normales son entre 3 a 4,5 mg/ml, aprecindose cifras
mayores en nios y posmenopusicas, tendiendo a disminuir algo despus de la ingestin
de hidratos de carbono y grasas as como durante la alcalosis respiratoria, pudindose
elevar en los estados de deshidratacin, acidosis y tras ejercicio. Con una dieta media se
ingiere de 800- a 1200 mg/dia de los que la mayor parte se absorben en el intestino delgado,
tanto de forma pasiva como de forma activa dependiente de la vitamina D. La
hipofosfatemia aumenta la sntesis de esta vitamina en presencia de hormona de
crecimiento. A su vez la vitamina D moviliza fsforo del hueso. La PTH provoca
hipofosfatemia ya que, si bien estimula la actividad osteoclstica de los huesos, aumenta la
excrecin renal de fosfatos al disminuir su reabsorcin tubular. La calcitonina produce
hipofosfatemia al inhibir la actividad osteoclstica inducir una mayor eliminacin renal de
fsforo. La hipercalcemia hipermagnesemia aguda disminuyen la excrecin renal de
fosfatos por inhibicin de la secrecin de PTH. Se debe medir siempre en ayunas.
IMPORTANCIA
El fsforo inorgnico reacciona con el molibdato de amonio en presencia de cido
sulfrico, resultando en la formacin de un complejo de fosfomolibdato no reducido. La

absorbancia a 340 nm del complejo formado es proporcional a la concentracin de fsforo

en la muestra.
Fsforo + H2SO4 + Molibdato de amnio Complexo fosfomolibdato no reduzido
Magnesio
DEFINICIN
El magnesio es un nutriente esencial necesario en varias funciones bioqumicas. Tiene un
rol estructural en cidos nucleicos y partculas ribosomales, los cuales son requeridos como
activadores para muchas enzimas. Adems juega un papel importante en la produccin de
energa por fosforilacin oxidativa.
IMPORTANCIA CLNICA
El cuerpo generalmente contiene 21 a 28 g de magnesio, del cual ms del 50% es utilizado
junto con el calcio y fosfato en los huesos. Aproximadamente el 1% del total de magnesio
se encuentra extracelularmente tendiendo a entrar y salir de la clula como el potasio.
Aproximadamente el 35% del magnesio plasmtico esta en las protenas, principalmente en
la albmina, lo que genera que al cambiar las concentraciones de estas, se afecte el
magnesio.
La hipomagnesemia resulta en alteraciones de la funcin neuromuscular, en casos de
diarrea severa prolongada, sndromes de malabsorcion, hiperaldosteronismo y terapia
diurtica. La hipermagnesemia sucede en dao glomerular y coma diabtico.
FUNDAMENTO
Este mtodo utiliza un arsenazo que se une preferencialmente con el magnesio. La
absorbancia para el procesamiento del complejo arsenazo- magnesio es de 572 nm y es
proporcional a la concentracin de magnesio presente en la muestra. La interferencia del
calcio se previene con la incorporacin de agentes quelantes de calcio.
Litio
Tanto el litio como el carbonato de litio son utilizados como agentes psicoactivos en el
tratamiento de desordenes maniaco depresivos. La terapia con Litio demanda diariamente el
monitoreo de los niveles sricos hasta que el esquema de la dsis adecuado sea
determinado. Los rangos de la vida media en el suero son de 20-60 horas. Se han descrito
casos de insomnio en grupos con dosis bajas. Temblor, sntomas gastrointestinales,
frecuencia urinaria, aumento de peso, fueron menos frecuentes en los niveles bajos. La
intoxicacin nunca ocurre repentinamente. De varios das hasta una semana antes del
desarrollo de los sntomas, el paciente puede experimentar letargo, temblor, somnolencia,
calambres, disartria, anorexia, vmito o diarrea. Un caso de intoxicacin presenta coma o
semicoma, rigidz, reflejos hiperactivos y a veces alucinaciones. Existe una alta incidencia
de complicaciones pulmonares, por lo que se aconseja realizar periodicamente
determinaciones de sodio sricos. Niveles de sodio bajos estn asociados con retencin de
litio; niveles altos con eliminacin de litio. Varios grados de diabetes insipida nefrognica
han sido reportados en el 33% de los pacientes tratados con litio. El litio inhibe
significativamente la hormona anti-diurtica que induce el transporte de agua en el rin.
Los niveles de litio interfieren con la absorcin de solutos y agua del sistema
gastrointestinal, produciendo nuseas, vmito, diarrea y dolor abdominal. Estos sntomas
puede ocurrir en cualquier momento y con cualquier nivel srico. La mayor parte ocurre al
inicio del tratamiento y generalmente desaparece espontneamente o por el ajuste de la
dsis. La administracin crnica de litio tiene un efecto goitrognico sobre el 4% de los
pacientes tratados, con o sin hipotiroidismo. En general, con la administracin de litio, los
niveles de T4 est levemente disminudos y se encuentran trascendentalmente elevados los

niveles de TSH en aproximandamente 33% de esos pacientes. El litio afecta el sistema de

conduccin cardiaco por una sustitucin incompleta de otros cationes, especialmente sodio
y potasio. Estos cambios en los electrolitos son usualmente sin importancia y se observan
depresiones reversibles de las ondas T en el 10% al 20% de los pacientes bajo terapia con
litio.
Amonio
El amonio circulante en personas normales es relativamente bajo, a pesar del hecho de que
el amonio se produce continuamente a partir de la dieta y del metabolismo de los
aminocidos. Las determinaciones sricas de amonio se han utilizado en el diagnstico de
coma asociado con disfuncin heptica causada por cirrosis y neoplasmas.
La determinacin de amonio es muy til en el diagnstico y pronstico de Sndrome de
Reye.
Lactato
Numerosos estudios han demostrado la relacin entre el nivel de lactato srico y el
equilibrio entre la disponibilidad (DO2) y el consumo (VO2) de oxgeno tisular1, 2. El
Lactato srico se relaciona tambin con la capacidad de utilizacin de oxgeno por parte de
la mitocondria, tanto en procesos fisiolgicos (ejercicio), como en procesos patolgicos
(shock, sepsis, etc.)3, 4, 5.
La alteracin en el metabolismo del cido lctico es frecuentemente encontrada en
pacientes crticamente enfermos. En esta poblacin, la acidosis lctica es causada por la
hipoperfusin sistmica y la hipoxia tisular.
La concentracin normal de lactato srico en personas no enfermas es menor de 1,5
mmol/litro. En pacientes crticamente enfermos se ha propuesto como normal valores <2,2>
DEFINICION
Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares sintetizadas en el hgado y
distribuidas por todo el organismo. Las protenas plasmticas derivan principalmente de la
sntesis en el hgado, clulas plasmticas, ndulos linfoides, bazo, y mdula sea.
Las protenas actan como elementos estructurales y de transporte, aparecen bajo la forma
de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin y otros. Las protenas
contribuyen en la regulacin de la presin osmtica dentro del espacio vascular, la cual
mantiene el lquido dentro de dicho espacio y evita la extravasacin. Normalmente la
protena ms abundante en el suero es la albmina.
IMPORTANCIA CLINICA
La hiperproteinemia puede ser observada en casos de deshidratacin severa (vmito,
diarrea, cetoacidosis diabtica), en neoplasias o a un aumento en la concentracin de
protenas especficas con inmunoglobulinas como en el caso del mieloma mltiple. La
hipoproteinemia puede ser causada por hemodilucin (retencin de sales o infusin
intravenosa) por defectos en la sntesis proteica (malnutricin severa, malabsorcin
intestinal, enfermedad heptica crnica), sndromes nefrticos, hemorragias excesivas y
quemaduras severas.
Los cambios en la proporcin de las protenas plasmticas puede ocurrir en uno o varias
alteraciones de fracciones de protenas
FUNDAMENTO
Los polipptidos contienen como mnimo dos pptidos los cuales reaccionan con el reactivo
Biuret. En solucin alcalina, el cobre metlico forma un complejo con el nitrgeno de la
protena con muy poca diferencia entre albmina y globulina en bases proteicasnitrogenadas.

Albumina
IMPORTANCIA CLINICA
La albmina es la protena ms importante en el plasma humano, lo que representa 40 a
60% de protena total. Los niveles plasmticos de albmina, debido a su relacin con la
ingesta de protenas y la produccin en el hgado, se utilizan a menudo como un indicador
del estado nutricional y la funcin del hgado.La disminucin de la albmina srica se
presentan en la cirrosis y otras enfermedades del hgado, incluyendo el alcoholismo
crnico, el embarazo y se asocia con el uso de anticonceptivos orales en muchas
enfermedades crnicas, incluyendo cncer, sndrome nefrtico, enteropata perdedora de
protenas (la enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa) , enfermedades inflamatorias, como las
enfermedades autoinmunes, la inmovilizacin prolongada, la insuficiencia cardiaca crnica
y otros estados catablicos.La elevacin de la albmina srica se encuentra slo en la
deshidratacin.
FUNDAMENTO
Albmina interacta con verde de bromocresol tamponado y debido al error de protenas de
los indicadores, se forma una coloracion verde, proporcional a la concentracin de
albmina en la muestra. El verde de bromocresol tiene una especificidad para la albmina y
no est influida por los altos niveles de bilirrubina y hemoglobina, permitiendo tambin que
las interferencias de los niveles altos de triglicridos puedan ser corregidos con un blanco
de muestra.
Alanina transaminasa (ALT)
DEFINICION
La Alanino Amino Transferasa es una enzima que se encuentra a nivel citoplasmtico, en
los hepatocitos y en menor proporcin en msculo esqueltico, corazn, rin, pncreas y
eritrocitos, por lo tanto la destruccin o cambio de permeabilidad en la membrana de estos
tejidos provoca la liberacin de la enzima a la circulacin sangunea.
IMPORTANCIA CLINICA
Valores elevados de la enzima pueden ser encontrados en hepatitis, mononucleosis,
leucemias infantiles, dao extenso del msculo esqueltico, miocarditis, ictericia
obstructiva, infarto agudo del miocardio, sndrome de Reye, hepatitis viral, septicemia, por
frmacos hepatoxicos y cirrosis.
Disminuye ante ejercicio intenso.
Comparando los valores de la ALT con los de la AST es posible determinar el origen
heptico o cardiaco de una patologa, a dems la relacin AST/ALT es til ya que en las
hepatitis necroticas (alcohlicas) este ndice generalmente es mayor a uno, mientras que en
la hepatitis virales es menor a uno.
Por lo general la mayora de las elevaciones de ALT estn producidas por disfuncin
heptica.
FUNDAMENTO
ALT presente en la muestra cataliza la transferencia del grupo amino de la L-alanina a alfaketoglutarato formando piruvato y L-glutamato. El piruvato en la presencia de NADH y
deshidrogenasa lctica, y es reducido a L-Lactato. En esta reaccin el NADH es oxidado a
NAD. La reaccin es monitoreada por evaluacin del rango de decrecimiento en
absorbancia a 340 nm as como la oxidacin de NADH a NAD.
Aspartato transaminasa (AST)
DEFINICION
La Aspartato Amino Transferasa es una enzima bilocular (citoplasmtica y mitocondrial),

en tejidos como el msculo esqueltico, rin, cerebro y en mayor concentracin en hgado

y corazn. Cualquier alteracin en estos tejidos produce un aumento en los niveles de AST
circulante.
IMPORTANCIA CLINICA
En el infarto agudo de miocardio aumenta en forma inespecfica de 5 a 10 veces en un
lapso de 6 a 8 horas, alcanzando su mximo nivel a las 48 horas y retornando a la
normalidad entre el cuarto y sexto da.
Dado que las AST tambin existe en las cedulas hepticas; las enfermedades del hepatocito
pueden elevar los niveles de la enzima, afeccin en la que la AST aumenta en mayor
proporcin, en especial en procesos necrticos.
FUNDAMENTO
La AST presente en la muestra cataliza la transferencia de una grupo amino de L-aspartato
a
-ketoglutarato formando oxalacetato y L-glutamato. El oxalacetato en la presencia de
NADH y Malato Deshidrogenasa (MDH) es reducido a L-malato. En esta reaccin el
NADH es oxidado a NAD. La reaccin es monitoreada por evaluacin del rango de
decrecimiento en la absorbancia a 340 nm as como la oxidacin del NADH a NAD.
Gama glutamil transferasa (GGT)
IMPORTANCIA CLINICA
Los niveles de GGT se elevan en enfermedades hepticas o pancreticas que obstruyen el
coldoco pero son siempre normales en el embarazo y las osteopatas. En los procesos
colestsicos, sus niveles evolucionan paralelamente a los de la fosfatasa alcalina y la 5nucleotidasa. Dado que las elevaciones durante el embarazo o niez nunca sern
fisiolgicas, su determinacin ocupa un lugar destacado en la deteccin de la patologa
hepatobiliar. Los frmacos y el consumo de alcohol, que inducen las enzimas
microsomales, tambin elevan sus niveles. Sin embargo, si la elevacin es aislada, es un
marcador poco fiable de la hepatopata alcohlica. Su valor para detectar la hepatopatia
alcohlica aumenta si se le combina con las determinaciones de aminotransferasas
(transaminasas), la determinacin de esta enzima est reemplazando a la 5-nucleotidasa
para confirmar el origen hepatobiliar de una elevacin aislada de la fosfatasa alcalina.
FUNDAMENTO
A g-Glutamil Transferase catalisa a transferncia do grupamento Glutamil da L-g Glutamilp-nitroanilide para a glicilglicina, formando- g Glutamilglicilglicina e p-nitroanilina
segundo a reao seguinte:
GGT
L-g-Glutamil-p-nitroanilide + Glicilglicina Glutamilglicilglicina + p-nitroanilina.
A quantidade de p-nitroanilina liberada, que tem elevada absorbncia em 405 nm,
diretamente proporcional atividade da GGT na amostra.
Fosfatasa alcalina
DEFINICION
La fosfatasa alcalina es una hidrolasa con muy poca especificidad de sustrato, que se
localiza en la membrana celular. Se encuentra presente en casi todos los tejidos del cuerpo,
especialmente en epitelio intestinal, tbulos renales, hueso, hgado y placenta. La actividad
srica sea en condiciones normales alcanza su mayor actividad en los nios en edad de
crecimiento. Fisiolgicamente tambin se encuentra aumentada durante el primer trimestre

del embarazo.
IMPORTANCIA CLINICA
Su aplicacin clnica est en relacin con la enfermedad heptica obstructiva, tumores
hepticos, cirrosis y en enfermedades metablicas seas.
FUNDAMENTO
Varios sustratos han sido utilizados para determinar la actividad de la fosfatasa alcalina
como el glicerolfosfato, el fenil fosfato y el p-nitrofenil fosfato, tambin se han incluido
determinaciones cinticas que optimizan el mtodo donde se incluye buffer con iones
metlicos como Zinc, Magnesio y EDTA.
La fosfatasa alcalina de la muestra cataliza la hidrlisis de sustrato p-nitrofenil fosfato (pNPP) para dar p-nitrofenil y fosfato inorgnico. A pH alcalino el p-nitrofenil se convierte en
una forma de fenxido amarillo. El rango de absorbancia incrementa a 404 nm y es
directamente proporcional a la actividad de la fosfatasa alcalina en la muestra.
Bilirrubina total
DEFINICION
Los glbulos rojos hacia el fin de su perodo de circulacin son destruidos en el sistema
reticuloendotelial y en el baso. El resultado es la formacin de las molculas heme y
globina, pues el hierro es removido, y el heme se convierte en bilirrubina. Este proceso
aporta un 80% de 500 umol (300 mg) de bilirrubina que son formados durante el da. Otro
origen de la bilirrubina incluye el rompimiento de mioglobina y citocromos y el
catabolismo de glbulos rojos inmaduros en la mdula sea.
Una vez formada la bilirrubina es transportada al hgado y en unida a la albmina y es
insoluble en agua, esta fraccin de bilirrubina es conocida como indirecta o no conjugada.
El hgado, la bilirrubina es conjugada a cido glucornico (mono y di glucoronidos) para
as formar la bilirrubina conjugada gracias a la accin de la enzima uridil fosfato glucoronil
transferasa. La bilirrubina conjugada o bilirrubina directa es excretada por la va biliar al
intestino, donde es metabolizada por las bacterias a un grupo de productos conocidos como
estercobilinogeno. La eliminacin es casi completa y los niveles sricos son normalmente
no detectables.
IMPORTANCIA CLINICA
La bilirrubina total es elevada en condiciones que causan obstruccin heptica, hepatitis,
cirrosis, desordenes hemolticos y deficiencias enzimticas.
FUNDAMENTO
El mtodo tradicional de deteccin de bilirrubina esta basada en la reaccin de sta con un
diazo compuesto, para formar el componente coloreado conocido como azobilirrubina. La
reaccin, puede ser acelerada con la adiccin de varios qumicos, por ejemplo, metanol,
cafena y dimetil sulfoxido (DMSO). Las modificaciones de estos mtodos incluyen la
adiccin de surfactantes como agentes solubilizantes.
La bilirrubina total (conjugada y no conjugada) se une al diazo compuesto en la presencia
en presencia de un surfactante para formar azobilirubina. El incremento en la absorbancia
es directamente proporcional a la concentracin de bilirrubina total.
Bilirrubina directa
DEFINICION
Los glbulos rojos hacia el fin de su perodo de circulacin son destruidos en el sistema
reticuloendotelial y en el bazo. El resultado es la formacin de las molculas heme y
globina, pues el hierro es removido, y el heme se convierte en bilirrubina. Este proceso
aporta un 80% de 500 umol (300 mg) de bilirrubina que son formados durante el da. Otro

origen de la bilirrubina incluye el rompimiento de mioglobina y citocromos y el

catabolismo de glbulos rojos inmaduros en la mdula sea.
Una vez formada la bilirrubina es transportada al hgado y en unida a la albmina y es
insoluble en agua, esta fraccin de bilirrubina es conocida como indirecta o no conjugada.
El hgado, la bilirrubina es conjugada a cido glucornico (mono y di glucoronidos) para
as formar la bilirrubina conjugada gracias a la accin de la enzima uridil fosfato glucoronil
transferasa. La bilirrubina conjugada o bilirrubina directa es excretada por la va biliar al
intestino, donde es metabolizada por las bacterias a un grupo de productos conocidos como
estercobilinogeno. La eliminacin es casi completa y los niveles sricos son normalmente
no detectables.
IMPORTANCIA CLINICA
La bilirrubina directa se encuentra aumentada cuando existe obstruccin del rbol biliar en
entidades como colangitis, colelitiasis, colecistitis, tumores hepticos y tumores
pancreticos. Tambin se ve aumentada en dao hepatocelular (hepatitis viral), colestasis.
Sndromes de Dubin Johnson y sndrome de Roto, y en procesos de insuficiencia heptica
(hepatitis txica, cirrosis y necrosis heptica.
FUNDAMENTO
La determinacin de la bilirrubina esta generalmente basada en la reaccin de bilirrubina
con cido sulfanlico diazotado. En este mtodo, la bilirrubina directa (fraccin conjugada)
se une a la sal diazonica presente en el cido sulfamico para formar un compuesto
coloreado conocido como azobilirrubina. El incremento en la absorbancia a 548 nm as
como la azobilirrubina es proporcional a la concentracin de la bilirrubina directa.
Fosfatasa acida
IMPORTANCIA CLINICA
Los niveles sricos elevados de fosfatasa cida prosttica se encuentran en los pacientes
con cncer de prstata. Los datos publicados muestran que alrededor de 5 a 10% de los
pacientes con cncer de prstata en estadio B tienen niveles sricos elevados de la fraccin
de la prstata. Este porcentaje aumenta a 20 a 25% en la etapa C hasta alcanzar el 75 al
90% en estadio D. Exacerbaciones y remisiones de adenocarcinoma de prstata no se
correlaciona necesariamente con los niveles de fosfatasa cida. Ocasionalmente, se
observan los niveles de fosfatasa cida en los lmites de referencia en los pacientes con
carcinoma de prstata extenso. La determinacin de fosfatasa cida prosttica es tambin
til para evaluar la respuesta a Estrogenoterapia y el seguimiento postoperatorio. Los
pacientes con hipertrofia benigna de prstata (2 a 10%) o con infarto de la prstata pueden
tener un poco de isoenzimas sricas elevadas de prstata.
Se han registrado aumentos de hasta 48 horas despus de un masaje de la prstata y en
pacientes que sufren de estreimiento debido al masaje de la prstata realizado por la
materia fecal. Los individuos con metstasis seas extensas de cncer no prstatico con la
enfermedad de Gaucher, de Paget, el hgado y la trombocitosis pueden presentar niveles
elevados de fosfatasa cida utilizando timolftaleina sustrato.
FUNDAMENTO
La fosfatasa cida en sueroactua sobre el sustrarto monofosfato timolftaleina . La adicin
de lcali inhibe la actividad enzimtica y convierte la timolftaleina liberada en su forma
azul, que se mide colorimtricamente. El producto final de esta reaccin es una mezcla de
azul y el color del sustrato.
Creatinfosfokinasa (CPK)
DEFINICIN

La creatinkinasa es una enzima intracelular. Se encuentra en el msculo esqueltico,

msculo cardiaco y cerebro. Un aumento de su actividad es ndice de lesin celular, la
extensin y gravedad determinar la magnitud de su elevacin, por lo cual es muy til en la
elevacin de daos musculares. La CK total tiene tres isoenzimas: CK MM (muscular), CK
bb (cerebral) y CK MB (miocardio).
IMPORTANCIA CLNICA
La CK total aumenta con actividad fsica vigorosa, traumas esquelticos o distrofia
muscular. En infarto agudo del miocardio aumenta entre las 2 y 6 horas del episodio,
alcanza su mximo nivel despus de 18 a 24 horas y se normaliza a las 48 horas. Su
concentracin aumenta en infarto agudo del miocardio, accidentes cerebro-vasculares,
descarga elctrica, convulsiones, distrofia muscular, alcoholismo crnico e infarto
pulmonar.
FUNDAMENTO
A creatina quinase total determinada de acordo com as seguintes reaes:
CK
Creatina Fosfato + ADP Creatina + ATP
HK
ATP + Glicose ADP + Glicose-6-Fosfato
G-6-PDH
Glicose-6-Fosfato + NAD 6-PG + NADH
A CK catalisa a reao entre creatina fosfato e adenosina difosfato (ADP), formando
creatina e adenosina trifosfato (ATP). O ATP fosforila a glicose sob a ao da hexoquinase
(HK), formando glicose-6-fosfato, que oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) na presena de
NAD, por ao cataltica da glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH). Uma quantidade
equimolar de NAD reduzida a NADH, aumentando a absorbncia em 340 nm,
proporcionalmente atividade da CK na amostra.
Creatinfosfokinasa MB (CPK-MB)
IMPORTANCIA CLINICA
Es importante discriminar entre CK-MB y CK-MM, af in de realizar un buen diagnstico
diferencial entre dao del msculo esqueltico o del miocardio. La determinacin de CKMB elevada es ms de un 20% del valor de CK total corresponde a un marcador de infarto
agudo de miocardio. La cifras de CK-MB no suelen aumentar cuando el dolor torxico se
debe a angina, embolismo pulmonar o insuficiencia cardaca congestiva. Dado que esta
izoenzima se encuentra predominantemente en cerebro y pulmn, la lesin de uno de ellos
(accidentes cerebro vascular o infarto pulmonar) se asocia con niveles elevados de la
misma.
El nivel de CK-MB es til para cuantificar el grado de infarto de miocardio y para
establecer su comienzo, es decir, que altos niveles de esta sugieren un infarto grande y por
tanto el tratamiento trombolitico apenas ser til.
FUNDAMENTO
A amostra de soro incubada com o reagente de trabalho da CK-MB que contm um
anticorpo especfico para a subunidade CK-M e que inibe completamente a atividade
enzimtica do monmero CK-M. A atividade do monmero CK-B, que no inibida pelo
anticorpo, medida pela seguinte sequncia de reaes:
CK-B
Creatina Fosfato + ADP Creatina + ATP
HK

ATP + Glicose ADP + Glicose-6-Fosfato

G-6-PDH
Glicose-6-Fosfato + NAD 6-PG + NADH
A CK-B catalisa a reao entre creatina fosfato e adenosina difosfato (ADP), formando
creatina e adenosina trifosfato (ATP). O ATP fosforila a glicose sob a ao da hexoquinase
(HK), formando glicose-6-fosfato, que oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) na presena de
NAD, por ao cataltica da glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH). Uma quantidade
equimolar de NAD reduzida a NADH, aumentando a absorbncia em 340 nm,
proporcionalmente atividade da CK-B na amostra.
Lactato deshidrogenasa (LDH)
DEFINICION
La Lactato Deshidrogenasa es una enzima intracelular que se encuentra en la mayoria de
los tejidos corporales, pero en mayor proporcin en corazn, hgado, riones, msculo
esqueltico, cerebro, hemates y pulmones.
La LDH en una enzima tetramerita que consiste en dos subunidades. Al realizar
electroforesis de la enzima se observan cinco isoenzimas, los radios relativos de dichas
isoenzimas varan con el tejido en el cual se encuentren.
LDH-1 procede de corazn y vasos sanguneos
LDH-2 del sistema reticuloendotelial
LDH-3 de los pulmones
LDH-4 del rin, placenta y pncreas
LDH-5 del hgado y el msculo estriado.
IMPORTANCIA CLINICA
Los niveles sricos de esta enzima estn elevados en un amplia variedad de condiciones
patolgicas, dentro de las ms importantes estn la enfermedad cardiaca y la heptica.
Cuando la LDH-1 es mayor que la LDH-2 se evidencia infarto agudo de miocardio. La
LDH se empieza a elevar entre 12 y 24 horas, alcanza su pico entre 48 y 72 horas y
permanece elevada hsta el dcimo da.
Se halla adems elevada en mononucleosis infecciosa, tumores malignos, linfomas,
anemias, distrofias musculares y pancreatitis.
FUNDAMENTO
A atividade da LDH determinada de acordo com a seguinte reao:
LDH
Piruvato + NADH + H Lactato + NAD
A LDH catalisa a converso do piruvato a lactato na presena de NADH. O decrscimo da
absorbncia em 340 nm, devido a oxidao do NADH, proporcional atividade da LDH
na amostra.
Amilasa
DEFINICIN
La mayor cantidad de la amilasa se encuentra en las glndulas partidas y en el pncreas.
La amilasa es segregada normalmente por la clula acinar pancretica en el conducto
pancretico y despus del duodeno, una vez en el intestino contribuye en la digestin de
carbohidratos.
IMPORTANCIA CLNICA

El dao a las clulas acinares (pancreatitis o la obstruccin del flujo del conducto
pancretico (cncer pancretico) causarn la extravasacin de la enzima al sistema linftico
y la cavidad peritoneal. La amilasa pancretica diferencia entre pancreatitis aguda y
crnica, ya que en la primera se aumenta en las primeras 24 horas y se normaliza entre dos
y seis das. Debido al aumento srico la amilasuria tambin aumenta y persiste hasta cinco
das despus de que la actividad en suero se normaliza: los valores aumentados que
persisten por ms tiempo sugieren una necrosis o la formacin de pseudoquistes. Se Eleva
tambin en las parotiditis; obstruccin intestinal; embarazo ectpico, peritonitis, lcera
gstrica.
Aunque la amilasa srica es una prueba sensible para trastornos pancreticos no es
especfica. Otras enfermedades no pancreticas pueden aumentar la amilasemia, por
ejemplo en una perforacin intestinal o una lcera pptica.
FUNDAMENTO
La muestra es incubada con um sustrato de almidn y la reduccin del color azul, despus
de la adicin del yodo, se compara con un control, siendo proporcional a la actividad de la
amilasa en la muestra.
Lipasa
IMPORTANCIA CLINICA
El pncreas constituye el origen principal y primario de la lipasa srica. La lipasa
pancretica humana es una glucoprotena, con un peso molecular de 45.000 daltons. Al
contrario que la amilasa, que se encuentra tanto en el pncreas como en las glndulas
salivales, la lipasa no se encuentra en las glndulas salivales. La lipasa tambin se
encuentra en el hgado, estmago, intestino, leucocitos, clulas adiposas y leche.
La actividad lipasa srica tiende a encontrarse elevada aproximadamente en el mismo
momento, si no antes, que la elevacin de la arnilasa srica en la pancreatitis aguda y
permanece elevada durante un perodo mucho ms prolongado, de alrededor de 7 a 10 das.
Ventrucci mencion una sensibilidad diagnstica del 100 % y una especificidad del 97 %
para la lipasa srica en la pancreatitis aguda. En la pancreatitis, la lipasa srica tiende a
mostrar mayores incrementos de actividad que la amilasa. Los pacientes con traumatismos
del abdomen presentan paralelamente un aumento de la amilasa y de la lipasa sricas,
mientras que los pacientes con un traumatismo craneal o manipulacin de la glndula
partida durante la ciruga presentan un aumento significativo slo de la amilasa srica. La
elevacin de la actividad lipasa srica en pacientes con parotiditis sugiere firmemente un
compromiso significativo tanto pancretico como de la glndula salival por la infeccin.
En muchos pacientes con inflamacin u otras alteraciones de rganos de la cavidad
abdominal, pero sin pruebas de pancreatitis, la amilasa y la lipasa srica se elevan. Se ha
concluido que el pncreas debe ser muy sensible a las alteraciones inflamatorias o
metablicas de los rganos vecinos.
FUNDAMENTO
La lipasa acta hidrolizando esteres de glicerol de cidos grasos de cadenas largas
(triglicridos) en diglicerios, monogliceridos y cidos grasos libres. Durante la reaccin el
sustrato en medio tamponado y estabilizado, adquiere una fase emulsificada formando
interfases necesarias a la accin de lipasa que en presencia de acido ditionitrobenzoico
(DTNB) forma una cromgeno de color amarillo proporcional a la actividad de lipasa en
suero.
Mucoproteinas
IMPORTANCIA CLINICA.

El mucoprotenas son una fraccin heterognea de glicoprotenas solubles que pueden ser
separados por electroforesis en 5 fracciones, conocido genricamente como protenas de
fase aguda. Por definicin protenas de fase aguda es aquella cuya concentracin aumenta o
disminuye en respuesta a estmulos inflamatorios. La mayora realiza funciones especficas
o que los hace muy importante durante el proceso inflamatorio.El aumento de la
mucoprotenas ocurre en muchos procesos inflamatorios spticos o aspticos, agudos o
crnicos, localizados o sistmicos como neoplasias, enfermedad vascular del colgeno, la
tuberculosis y otras enfermedades infecciosas, la diabetes mellitus, la cirrosis heptica, la
psoriasis, gota, etc. La falta de especificida limita en gran medida su uso en el diagnstico.
Las medidas seriadas de mucoprotenas se han utilizado con cierto xito para monitorizar la
respuesta al tratamiento. Recuerde que no hay correlacin entre mucoprotenas suero, la
protena C-reactiva y antiestreptolisina.
FUNDAMENTO
Las mucoprotenas son separadas de las protenas coagulables por precipitacin selectiva
con solucin de cido perclrico. A continuacin, la precipitacin de mucoprotenas del
filtrado con cido fosfotngstico y la determinacin con el reactivo Folin-Ciocalteau a
travs del contenido en tirosina.
Alcoholemia
IMPORTANCIA CLINICA
El alcohol etlico es uno de los parmetros ms analizados en los laboratorios forenses y de
toxicologa clnica. La determinacin del alcohol etlico se emplea en el diagnostico y
tratamiento de la intoxicacin por alcohol.
FUNDAMENTO
Las primeras tcnicas de determinacin del alcohol en sangre empleaban la destilacin,
aeracin o difusin para separar el alcohol de la matriz plasmtica. El alcohol destilado se
determinaba entonces oxidndolo mediante oxidantes muy potentes. Sin embargo, la
especificidad de estos mtodos era escasa, ya que en la destilacin se poda se podan
introducir otros componentes oxidables que reaccionaran entonces en la mezcla reactiva.
Existen diferentes procedimientos aceptables, tales como la cromatografa de gases y los
mtodos osmometricos. La tcnica enzimtica empleada en el laboratorio, basada en una
informacin publicada por Bucher y Redetski, es a la vez especfica y fcil de realizar.
Pruebas serolgicas:
1. Hemaglutinacion indirecta para Chagas (HAI Chagas)
2. Hemaglutinacion indirecta para toxoplasmosis (HAI Toxo)
3. Proteina C reactiva (PCR)
4. Factor reumatoideo (RA)
5. Antiestreptolisina (ASTO)
6. Hormona corionica Gonadotrifina subunidad beta (HCG-)
7. Laboratorio de referencia de enfermedades venreas (VDRL)
8. Reagina plasmtica (RPR)
9. Reaccion de Widal
10. Reaccion de Hudlleson
11. Reacion de Weil felix
12. Monotes