Professional Documents
Culture Documents
FACULTATEA DE INGINERIE
SPECIALIZAREA: INGINERIE BIOCHIMIC
PROIECT LA DISCIPLINA
" BIOREACTOARE"
Coordonator:
Student:
Semigrupa 1141B
BACU
2010
TEMA PROIECTULUI
" OBINEREA INDUSTRIAL A ACIDULUI
GLUTAMIC"
Coordonator:
Student:
Semigrupa 1141B
BACU
2010
2
Cuprins
CAPITOLUL 1 DESCRIEREA PRODUSULUI FINIT......................5
1.1. Acidul glutamic- Generaliti.............................................................................5
1.2. Rolul ndeplinit n organism..............................................................................6
1.3. Surse de acid glutamic......................................................................................11
1.4. Efectele secundare ale consumului acidului glutamic...................................13
fi
considerai
neurotransmitori.
Glutamatul
este
principalul
De asemenea, L-glutamina este aminoacidul liber care se afl n cea mai mare
cantitate n snge i n celulele musculare. n structura sa exist dou grupari aminice
(cu azot) dintre care una se elibereaz uor i astfel este principalul crus al
azotului n celule. Se cunoate faptul c 35 % din azotul care accede n celula
muscular este transportat de glutamin. Azotul, odat ajuns n celul, va fi utilizat n
procesele de sintez i cretere.
Concentraia
intramuscular
glutaminei
scade
accentuat
dup
2. Poteniator de arom
Acidul glutamic este un poteniator de arom (glutamatul monosodic MSG,
sarea acidului glutamic), obinut prin biosintez din materii prime vegetale sau
animale.
n ultimele decenii s-au desfurat la nivel mondial nenumrate discuii n
contradictoriu cu privire la efectele consumului de MSG , adugat ca aditiv in diverse
alimente. S-a afirmat c acest adaos, devenit aproape universal mai ales n conservele
de carne i pete, sosuri, dressinguri, n unele condimente complexe ( tip Vegeta,
Delikat etc.), are drept scop s atenueze i s mascheze gustul natural i adesea mai
puin savuros al unor preparate. Aceeiai acuzaie s-a adus patronilor de restaurante cu
profil asiatic care funcioneaz pretutindeni n lume, bnuii c exagereaz n folosirea
MSG.
10
11
12
13
Reactani
Produi de reacie
14
Enzime
Glutamina + H2O
Glu + NH3
GLS, GLS2
NAcGlu + H2O
Glu + Acetat
necunoscut
GLUD1, GLUD2
Glu + -oxo-acid
Transaminaza
Glu + 5-formimino-FH4
FTCD
UNDE:
NAcGlu acid N-acetil glutamic (C7N11NO5);
Acetat sarea acidului acetic ([CH3COO]);
Acid -cetoglutaric COOH-C-CH2-CH2-COOH;
Acid N-formimino-L-glutamic (C6H10N2O4);
FH4 acidul folic (C19H19N7O6);
GLS, GLS2 glutaminaze;
GLUD1, GLUD2 glutamat dehidrogenaze;
15
microorganismelor
productoarede
acidglutamic.
Denumirea
de
18
19
Astfel, biotina influeneaz raportul dintre acizii grai saturi i nesaturai din
membrana plasmatic, raport de care depinde permeabilitatea membranei i, deci,
posibilitatea eliminrii glutamatului n mediu. Dac acest raport este mai mare de 1
(cnd acizii grai saturi sunt n cantitate mai mare), are loc eliminarea gluatamatului
intarcelular concomitent cu acumularea acestuia n mediu. Aceast situaie are loc n
cazul unor cantiti suboptimale de biotin.
Rezultatele obinute explic i constatrile cu privire la acumularea
glutamatului independent de concentraia de biotin din mediu, n cazul folosirii
derivailor acizilor grai saturai. Acetia modific echilibrul dintre acizii grai saturai
i cei nesaturai i, respectiv a fosfolipidelordin membrana plasmatic, prin faptul c
inhib activitatea acetil CoA-carboxilazei. Ca urmarea raportul va fi mai mic dect 1.
Adugarea penicilinei n faza lag de cretere inhib sinteza peretelui celular, iar
membrana celular va fi supus variaiilor de presiune osmotic, ceea ce are drpt
rezultat
modificarea
permeabilitii
acesteia,
deci
posibilitatea
acumulrii
extracelulare a glutamatului.
dehidrogenaz. Prin aceasta, ns, are loc o inhibiie a ciclului TCA la nivelul cetoglutarat, succinat. Oxalacetatul necesar desfurrii biosintezei va fi procurat
printr-o reacie anaplerotic, care poate fi cel mai frecvent carboxilarea piruvatului
sau glioxilatului. Au fost evideniate i celelalte enzime implicate n ciclul TCA.
20
21
22
sulfat de Mg 0,05%;
ap 84,5-87,55%.
Timpul de fermentaie este de 30-36 h.
Ureea este o sare solubil n ap ce conine circa 46% azot din s.u., utiliznduse sub form de soluie, prin diluare cu ap n cantitate de 10-12 litri la 1 kg de
substan.
Sulfatul de magneziu (MgSO4 7H2O), se utilizeaz ca surs de magneziu
la multiplicarea drojdiei. Produsul pulbere trebuie s conin 16,3% MgO i s nu
conin arsen mai mult de 0,0005%.
Extractul de porumb obinut prin concentrarea apelor de nmuiere ale
porumbului i obinerea de amidon poate fi o surs de microelemente i vitamine din
grupul B. n extract se afl aminoacizi cu rol de biostimulatori i vitamine, dintre care
biotina este prezent n cantiti apreciabile (150200 mg/100 g).
MEDIU DE CULTUR
CAPTURAREA ACIDULUI
GLUTAMIC
STERILIZAREA MEDIULUI
DE CULTUR
23
SEPARAREA ACIDULUI
GLUTAMIC
BIOPROCES
PURIFICAREA ACIDULUI
GLUTAMIC
SELECIONAREA
MICROORGANISMELOR
CONDIIONAREA ACIDULUI
GLUTAMIC
AMBALAREA
24
Glucoz
Extract deporumb
Uree
Fosfai
Sulfai
Ap
Amestecare
Mdeiu de cultur
Sterilizarea mediului
de cultur
Rcirea mediului de
cultur
Aer
Inocul
Inocularea mediului
de cultur
H2SO4
Sterilizare aer
Aer steril
Multiplicarea bacteriilor
Filtrare biomas
Concentrare
Substan
tensioactiv
Cristalizare
Centrifugare primar
NaOH
Ap
Dizolvare
25
Crbune activ
Biomas celular
Ap
HCl
Soluie impur 1
Crbune activ
Filtrare
Reziduu
Cristalizare avansat
Centrifugare secundar
Ap
Soluie impur 2
Splare
Uscare
Ambalare
Acid glutamic,
pulbere pur
26
Ap evaporat
se
folosesc
pentru
izolarea,
multiplicarea
si
conservarea
27
28
29
30
Sterilizarea acestor filtre se face cu abur direct, iar condensul este ndeprtat
prin suflare cu aer steril. Experiena practic a confirmat durata mare de funcionare a
filtrelor-lumnare, care pot suferi 200 de sterilizri termice n timp de 3,5 - 4 ani.
Schema de principiu a liniei de purificare i sterilizare a aerului prin filtrare pe
material fibros este redat n figura 2.
Conform acestei scheme, aerul, separat de impuriti n filtrul (1), trece prin
compresorul (2), unde este comprimat adiabatic la 3 - 3,5 at, temperatura crescnd la
150 - 160C. Dup rcire n (3), aerul este introdus n separatoral de picturi (4),
filtrul principal cu material fibros (5) (prima treapt de sterilizare), filtrul individual
cu material fibros (a doua treapt de sterilizare), dup care ptrunde n fermentator.
31
33
glutamic
Ambalare
34
P16 = 0,02%
Ap evaporat
Uscare
(rel 1.)
Unde:
CAg pure,umede = Masa de cristale de acid glutamic, pure i umede;
CAg pure,uscate = Masa de cristale de acid glutamic, pure i uscate;
Apev = Masa de ap evaporat, Apev include i pierderile de uscare.
5.3.Faza de splare
.
Cristale de acid glutamic pure
nesplate
Ap rece1
Splare
35
Ap rece2
(rel 2.)
Unde:
CAg pure,nesplate = Masa de cristale de acid glutamic, pure, nesplate;
CAg pure,umede = Masa de cristale de acid glutamic, pure i umede;
Ar1 = Masa de ap rece utilizat la splarea cristalelor;
Ar2 = Masa de ap rece rmas dup splare;
Cantitatea de ap de splare reprezint jumtate din cantitatea cristalelor
introduse n proces. Apa absorbit de cristalele de acid este de 12,5% din apa utilizat
la splare (Ar1) i este egal cu cantitatea de ap evaporat n procesul de uscare.
Ar1 =
36
Centrifugare
secundar
Soluie impur 2
C Ag pure, nespalate
0,895
37
Cristalizare
avnsat
P12 = 0,7%
Sp
C Ag pure, in solutie
0,993
Sp = 562,7097 kg/arj
Filtrare
38
Reziduu = 3%
Soluie purificat
Scd = Sp +R
Unde:
Scd = Masa de soluiecristalin dizolvat;
Sp = Masa soluiei purificate, ce va fi supus cristalizrii avansate;
R = Masa de reziduu eliminat la filtrare;
Pierderile sunt incluse n masa reziduului,fiind eliminate odat cu acesta.
Scd (1 0,03) Sp
0,97 Scd Sp
Sp
Scd
0,97
Ap
Dizolvare
39
P10 = 0,02%
Centrifugare primar
Soluie impur 1
Cristalizare
P8 = 0,7%
Sc
C Ag nepure, in solutie
0,993
Sc = 587,5838 kg/arj
Concentrare
Soluie concentrat
41
Ap evaporat
Sf = Sc + Apev
Unde:
Sf = Masa soluiei filtrate, ce va fi supus concentrrii;
Sc = Masa soluiei concentrate, ce va fi supus cristalizrii;
Apev = Masa de ap eliminat prin concentrarea soluiei;
Apev reprezint 15,5% din Sf Apev = 0,155 Sf
0,845 Sf = Sc
Sf
Sc
0,845 Sf = 695,3654 kg/arj
5.11. Faza de filtrare
Mediu de cultur multiplicat
Biomas celular
Filtrare biomas
Soluie filtrat
Mcm = Bmc + Sf
Unde:
Mcm = Masa mediului de cultur multiplicat;
Bmc = Masa de biomas eliminat, Bmc reprezint 10% din Mcm;
Sf = Masa soluiei filtrate, ce va fi supus concentrrii;
0,9Mcm = Sf
Mcm
Sf
0,9 Mcm = 772,6282 kg/arj
42
Multiplicare
Mci = Mcm
Unde:
Mci = Masa mediului de cultur inoculat;
Mcm = Masa mediului de cultur multiplicat;
Inocul
Inoculare
Mcr +I = Mci
Unde:
Mcr = Masa mediului de cultur rcit;
I = Masa de inocul, I = 5% din Mcr;
43
P3 = 0,01%
Rcire
Mcs =Mcr + P3
Unde:
Mcs = Masa mediului de cultur steril;
Mcr = Masa mediului de cultur rcit;
P3 = Pierderile rezultate la rcire, P3 = 0,01%;
Mcs
Mcr
0,9999 Mcs = 735,9099 kg/arj
Sterilizare
Mc =Mcs + P2
44
P2 = 0,02%
Unde:
Mc = Masa mediului de cultur proaspt preparat;
Mcs = Masa mediului de cultur steril;
P2 = Pierderile rezultate la sterilizare, P2 = 0,02%;
0,9998 Mc = Mcs
Mc
Mcs
0,9998 Mc = 736,0571 kg/arj
Glucoz
Extract de porumb
Uree
Fosfai
Sulfai
Amestecare
Mediu de cultur
45
Ap
Materiale ieite
Nr.
Crt.
Denumire material
U.M.
Cantitat
e
Nr.
Crt.
Denumire material
U.M.
Cantitate
Cristale de acid
glutamic pure i
uscate
kg/arj
500,1
Acid glutamic
ambalat
Pierderi 16
kg/arj
500
kg/arj
0.1
kg/arj
kg/arj
500,1
500,1
kg/arj
kg/arj
31,2562
531,3563
kg/arj
531,3563
kg/arj
kg/arj
kg/arj
218,7938
750,15
500,1
kg/arj
kg/arj
58,6709
558,7709
kg/arj
558,7709
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
3,9388
562,7097
kg/arj
580,1131
Total
2
Cristale de acid
glutamic pure i
umede
Total
3
Cristale de acid
glutamic pure
nesplate
Ap rece 1
Total
Cristale de acid
glutamic pure n
soluie
Total
5
Total
6
Total
Soluie purificat
Soluie cristalin
dizolvat
kg/arj
kg/arj
500,1
531,3563
Total
2
kg/arj
531,3563
Total
kg/arj
500,1
kg/arj
kg/arj
kg/arj
250,05
750,15
558,7709
Total
4
kg/arj
558,7709
Total
kg/arj
562,7097
kg/arj
kg/arj
562,7097
580,1131
Total
6
kg/arj
580,1131
Total
46
Cristale de acid
glutamic pure i
uscate
Ap evaporat
Cristale de acid
glutamic pure i
umede
Ap rece 2
Cristale de acid
glutamic pure
nesplate
Soluie impur 2
Cristale de acid
glutamic pure n
soluie
Pierderi 12
Soluie purificat
Reziduu
Soluie cristalin
filtrat
Ap
Total
Cristale de acid
glutamic nepure n
soluie
Total
Soluie concentrat
Total
10
Total
11
Soluie filtrat
Mediu de cultur
multiplicat
Total
12
Mediu de cultur
inoculat
Total
Mediu de cultur
rcit
Inocul
Total
Mediu de cultur
steril
Total
Mediu de cultur
kg/arj
522,2063
kg/arj
58,0229
kg/arj
kg/arj
580,2292
583,4707
kg/arj
kg/arj
Total
Total
Total
8
Total
9
kg/arj
kg/arj
587,5838
695,3654
Total
10
kg/arj
kg/arj
695,3654
772,6282
Total
11
kg/arj
772,6282
Total
kg/arj
772,6282
12
kg/arj
kg/arj
772,6282
735,8364
Total
13
kg/arj
kg/arj
kg/arj
36,7918
772,6282
735,9099
Total
14
kg/arj
kg/arj
Total
Glucoz
Extract de porumb
Uree
Fosfai
Sulfai
Ap
583,4707
587,5838
735,9099
736,0571
Total
15
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
736,0571
88,3268
2,2082
22,0817
1,1041
0,3680
621,9683
Total
16
kg/arj
kg/arj
736,0571
10455,76
Total
Total
47
Soluie cristalin
dizolvat
Pierderi 10
Soluie cristalin
filtrat
Soluie impur 1
Cristale de acid
glutamic nepure n
soluie
Pierderi 8
Soluie concentrat
Ap evaporat
Soluie filtrat
Biomas celular
Mediu de cultur
multiplicat
Mediu de cultur
inoculat
Mediu de cultur
rcit
Pierderi 3
Mediu de cultur
steril
Pierderi 3
Mediu de cultur
kg/arj
580,1131
kg/arj
0,1161
kg/arj
kg/arj
580,2292
522,2063
kg/arj
61,2644
kg/arj
kg/arj
583,4707
583,4707
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
kg/arj
4,1131
587,5838
587,5838
107,7816
695,3654
695,3654
77,2628
kg/arj
772,6282
kg/arj
772,6282
kg/arj
kg/arj
772,6282
772,6282
kg/arj
kg/arj
772,6282
735,8364
kg/arj
kg/arj
kg/arj
0,0735
735,9099
735,9099
kg/arj
kg/arj
kg/arj
0,1472
736,0571
736,0571
kg/arj
kg/arj
736,0571
10455,76
900C
800C
Rcirea
mediului de
cultur
200C
300C
80 - 20
30 0 C 303,15K
2
Cp ag 4179 J/kg K
T ag
m ag
566,566 kg/arj
Cp ag T ag
4179 303,15
300C
850C
Multiplicare
400C
750C
48
m ag
1321,7149 kg/arj
Cp ag T ag
1880,75 295,65
750C
450C
Multiplicare
550C
65 C
65 - 45
10 0 C 283,15K
2
Cp ag 1868 J/kg K
T ag
m ag
1330,7363 kg/arj
Cp ag T ag
1868 283,15
550C
20C
Cristalizare
45 C
120C
49
Sc Cp Sc T Sc mag Cp ag T ag
55 - 12
T Sc
21,5 0 C 294,65K
2
Cp Sc 4082,5 J/kg K
45 - 2
21,5 0 C 294,65K
2
Cp ag 4181,55 J/kg K
T ag
m ag
573,66 kg/arj
Cp ag T ag
4181,55 294,65
120C
800C
Dizolvare
220C
700C
80 - 22
29 0 C 302,15K
2
Cp ag 4179,3 J/kg K
T ag
m ag
484,27 kg/arj
Cp ag T ag
4179,3 302,15
50
700C
600C
20C
Cristalizare
avansat
120C
Sp Cp Sp T Sp mag Cp ag T ag
70 - 12
T Sp
29 0 C 302,15K
2
Cp Sp 3986,3 J/kg K
60 - 2
29 0 C 302,15K
2
Cp ag 4179,3 J/kg K
T ag
m ag
536,72 kg/arj
Cp ag T ag
4179,3 302,15
51
1Vasul
reactorului; 2- Manta; 3- Izolaie termic exterioar; 4- Plac protectoare; 5- Duz
pentru introducerea inoculului; 6- Senzori de temperatur, de pH, pentru msurarea
nivelului de oxigen; 7- Agitator; 8- Sistem de dispersare aer n mediu; 9- ; 10Reductor de turaie; 11- Motor; 12- Duz de recoltare; 13- conectare manta; 14Supap cu racord de abur; 15- Geam pentru observare; 16- Racord pentru agent
antispumant i corector de pH; 17- Alimentare aer steril; 18- Capac detaabil; 19Duz alimentare mediu de cultur; 20- Evacuare aer; 21-Senzor pentru spum ; 22Palet pentru spargerea spumei ; 23- Geam pentru observare luminat;
CALCUL
Mci 30 o C
1528,8 kg/m 3
52
V Mci = 0,505 m3
Unde:
Mci 30 o C
Vt =
Vt =V Mci/
Vt = 0,5941 m3
Raport ntre dimensiuni :
H
2
D
Vt =
3,14 D D 2 D 3
m
4
D = 0,72 m
H = 1.5 m
CONCLUZII
n mod simplificat, am putea conceptualiza funcionarea creierului ca
reflectnd o balan ntre aminoacizii excitatori i cei inhibitori. Exist peste o sut de
53
glicina
ntrunesc
criteriile
necesare
pentru
fi
considerai
neurotransmitori.
Glutamatul, cel despre care vorbim in aceasta lucrare, este principalul
neurotransmitor excitator, prevalent la mamifere, n timp ce GABA i glicina sunt
neurotransmitorii inhibitori. Neurotransmisia glutamatergic afecteaz fiecare
neuron. Acest aminoacid este implicat n transmisia sinaptic rapid dar induce i
schimbri neuronale pe termen lung intervenind n plasticitate i alte funcii cognitive
superioare, d mari tulburri psihopatologice n cantitati mai mici dect normalul i
este neurotoxic n cantiti excesive.
Aminoacizii se pot sintetiza pe mai multe ci:
sintez chimic: procedeul este unul nu prea de dorit, deoarece n urma
acestuia rezult un amestec racemic de L- i D-aminoacizi, iar separarea
izomerilor
ridic
multe
probleme
tehnologice,
ce
au
ca
efect
scumpireaprodusului sintetizat;
extracie din preparatele enzimatice;
biosintez: cel mai economic procedeu de obinere i tototdat cel mai bine
dezvoltat din punct de vedere tehnologic
n acest proiect am prezentat ntreg procesul de obinere al acidului Lglutamic: schema tehnologic i dezvoltarea ei. Produsul finit obinut: pulbere
cristalin, alb de aminoacid ce servete ulterior altor procese din industria
famaceutic sau alimentar.
BIBLIOGRAFIE
Banu, C. Manualul inginerului de industrie alimentar, vol I, Ed Tehnic,
Bucureti, 1998
Banu, C., Moraru C. Biochimia produselor alimentare, Ed.Tehnic, Bucureti, 1972
54
55