PRACTICA 5.

DETERMINACION DE GLUCOSA EN SUERO

ESTUDIANTES
RAFAEL DE LA ASUNCIN
LIZMETH CALDERN
AMANDA CAMARGO

PROFESOR
DRA. CARMIA L. VARGAS Z.

UNIVERSIDAD DEL ATLNTICO

FACULTAD DE QUMICA Y FARMACIA
ASIGNATURA: BIOQUMICA-LABORATORIO- SEMESTRE III

OCTUBRE 2016

INTRODUCCION
La glucosa es la principal fuente de energa para el metabolismo celular. Se obtiene
fundamentalmente a travs de la alimentacin, y se almacena principalmente en el hgado,
el cual tiene un papel primordial en el mantenimiento de los niveles de glucosa en sangre.
La determinacin de glucosa en suero es til para el diagnstico de numerosas
enfermedades metablicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. Tambin es necesaria
esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se
debe administrar para tratarla.
El mantenimiento de la glucemia, o concentracin plasmtica de glucosa, en los organismos
superiores es fundamental para el funcionamiento de todos los rganos, al ser la glucosa un
metabolito energtico principal.
Mediante el presente informe, se ha establecido un posible diagnstico de glucosa en la
sangre para ser determinada en un paciente.

OBJETIVO GENERAL

Determinar la glucosa en suero a partir de la extraccin de la sangre de un paciente.

OBJETIVOS ESPECIFICOS

Capacitar al alumno para que conozca la importancia de la determinacin de la

glucosa en el suero.
Determinar el valor de la glucosa en sangre, utilizando las ecuaciones para la
deduccin de un resultado real.
Manejar los valores de referencia de la glucosa en un paciente

MARCO TERICO.
Qu son los carbohidratos?
Qu son los carbohidratos? Los carbohidratos, tambin llamados glcidos, carbohidratos,
hidratos de carbono o sacridos, son elementos principales en la alimentacin, que se
encuentran principalmente en azcares, almidones y fibra. La funcin principal de los
carbohidratos es el aporte energtico. Son una de las sustancias principales que necesita
nuestro organismo, junto a las grasas y las protenas.
Clasificacin
Los carbohidratos o hidratos de carbono se agrupan en dos categoras principales.
Los carbohidratos simples incluyen azcares, tales como el azcar de la fruta (fructosa), el
azcar del maz o el azcar de uva (dextrosa o glucosa), y el azcar de mesa (sacarosa).
Los carbohidratos complejos (carbohidratos complejos) incluyen todo lo hecho de tres o
ms azcares unidos.
Clasificacin de los carbohidratos alimenticios y ejemplos correspondientes
CLASE
Monosacridos
Disacridos
Polioles
Oligosacridos
Polisacridos tipo almidn
Polisacridos no semejantes al
almidn (fibra alimenticia)

EJEMPLOS
Glucosa, fructosa, galactosa
Sacarosa, lactosa, maltosa
Isomaltol, maltitol, sorbitol, xilitol,
eritritol
Fructooligosacridos,
maltooligosacridos
Amilosa, amilopectina,
maltodextrinas
Celulosa, pectinas, hemicelulosas,
gomas, inulina

Azcares
La glucosa y la fructosa son monosacridos y se pueden encontrar en las frutas, las bayas,
las verduras, la miel y los siropes de glucosa-fructosa. El azcar comn o de mesa, es decir,
la sacarosa, es un disacrido compuesto por glucosa y fructosa y est presente en la
naturaleza en alimentos tales como la remolacha azucarera, la caa de azcar y las frutas.
La lactosa, que es un disacrido compuesto de glucosa y galactosa, es el principal azcar de
la leche y de los productos lcteos; por su parte, la maltosa, que es un disacrido compuesto
slo de glucosa (dos molculas de glucosa), est presente en la malta y en los siropes
(extractos lquidos) derivados del almidn. Tanto el azcar de mesa (sacarosa) y los siropes
de glucosa-fructosa contienen glucosa y fructosa, bien en estado libre (siropes de glucosafructosa) o en forma de disacrido (sacarosa).
Los polioles se denominan alcoholes de azcar. Hay polioles naturales, pero la mayora se
fabrican mediante la transformacin de azcares. El poliol utilizado con mayor frecuencia
es el sorbitol; por su parte, el xilitol se usa frecuentemente en las gomas de mascar y en los
caramelos. El isomaltol es otro poliol, que se usa en repostera/confitera y se obtiene a
partir de la sacarosa. Los polioles son dulces y se pueden utilizar en los alimentos
(aadindolos a los mismos) de forma similar a lo que se hace con los azcares, aunque
dichos polioles pueden tener un efecto laxante si se ingieren en cantidades excesivas.
Oligosacridos

La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) define a los oligosacridos como

carbohidratos formados por 3-9 unidades de azcares (monosacridos), aunque en otras
definiciones se habla de cadenas de azcares ligeramente ms largas. Los
fructooligosacridos contienen un total de hasta 9 unidades de fructosa y se producen con
fines comerciales mediante la hidrlisis (descomposicin enzimtica) parcial de la inulina.
La rafinosa y la estaquiosa estn presentes, si bien en cantidades pequeas, en determinadas
legumbres, cereales y verduras, as como en la miel.
Polisacridos
Se necesitan ms de 10 unidades de azcar y a veces hasta miles de unidades para formar
los polisacridos. El almidn es la principal reserva de energa de las hortalizas de raz y los
cereales. Est formado por largas cadenas de glucosa en forma de grnulos, cuyo tamao y
forma varan segn el vegetal del que forma parte. El equivalente de los almidones en los
animales y en los seres humanos es el llamado glucgeno.
Los polisacridos sin almidn son los principales componentes de la fibra alimenticia.
Comprenden: celulosa, hemicelulosa, inulina, pectinas y gomas. La celulosa es el
componente principal de las paredes celulares vegetales y est formada por miles de
unidades de glucosa. Los distintos componentes de la fibra alimenticia tienen diferentes
propiedades y estructuras fsicas. Una caracterstica distintiva de la fibra alimenticia es que
no puede ser digerida por los seres humanos. Sin embargo, algunos tipos de fibra pueden
ser metabolizados por las bacterias intestinales, dando lugar a compuestos que las clulas
intestinales humanas s que pueden utilizar para la produccin de energa. En cualquier
caso, por no poder ser digerida por los seres humanos, la fibra tiene un menor contenido
energtico medio que la mayora de los dems carbohidratos.
Qu es la glucosa?
Es un glcido o carbohidrato, ms precisamente un monosacrido, la estructura ms
sencilla dentro de los azcares simples, presente en forma libre en las frutas y la miel. Entre
los carbohidratos de absorcin rpida, la glucosa es la que se absorbe ms rpidamente.
La glucosa es una fuente importante de energa para la mayora de las clulas del cuerpo,
incluidas las del cerebro. Los carbohidratos que se encuentran en las frutas, los cereales, el
pan, la pasta y el arroz se transforman rpidamente en glucosa en el cuerpo, lo que eleva el
nivel de dicho azcar en la sangre.
Las hormonas producidas en el cuerpo llamadas insulina y glucagn ayudan a controlar los
niveles de azcar en la sangre.
Es un examen que mide la cantidad de un azcar llamado glucosa en una muestra de
sangre.
Estructura

Caractersticas fisicoqumicas
Apariencia
Polvo blanco
Densidad
1540 kg/m3; 1,54 g/cm3
Masa molar 180,063388 g/mol
Punto de fusin
150 C (423 K)
La glucosa, libre o combinada, es el compuesto orgnico ms abundante de la naturaleza.
Es la fuente primaria de sntesis de energa de las clulas, mediante su oxidacin catablica,
y es el componente principal de polmeros de importancia estructural como la celulosa y de
polmeros de almacenamiento energtico como el almidn y el glucgeno.
A partir de su estructura lineal, la D-glucosa sufre una ciclacin hacia su forma
hemiacetlica para dar sus formas furano y pirano (D-glucofuranosa y F-glucopiranosa) que
a su vez presentan anmeros alfa y beta. Estos anmeros no presentan diferencias de
composicin estructural, pero si diferentes caractersticas fsicas y qumicas.
La glucosa es uno de los tres monosacridos dietticos, junto con fructosa y galactosa, que
se absorben directamente al torrente sanguneo durante la digestin. Las clulas lo utilizan
como fuente primaria de energa y es un intermediario metablico. La glucosa es uno de los
principales productos de la fotosntesis y combustible para la respiracin celular.
Todas las frutas naturales tienen cierta cantidad de glucosa (a menudo con fructosa), que
puede extraerse y concentrarse para preparar un azcar alternativo. Sin embargo, a escala
industrial tanto el jarabe de glucosa (disolucin de glucosa) como la dextrosa (glucosa en
polvo) se obtienen a partir de la hidrlisis enzimtica de almidn de cereales (generalmente
trigo o maz).
Funciones
La principal funcin de la glucosa en nuestro organismo es producir energa, que utilizan
las clulas para llevar a cabo todos los procesos que ocurren en nuestro cuerpo, como la
digestin, la reparacin de los tejidos, la multiplicacin de nuestras clulas, etc. Cuando
consumimos un exceso de glucosa ella se guarda en nuestro hgado como glucgeno, el que
constituye una reserva de glucosa para nuestros procesos biolgicos.
Ahorro de protenas Cuando el cuerpo no dispone de suficientes hidratos de
carbono, ste utilizar las protenas con fines energticos, consumindolas e
impidindolas, por tanto, realizar otras funciones de construccin.
Regulacin del metabolismo de las grasas En caso de no cumplir con una
ingestin suficiente de carbohidratos, las grasas se metabolizan como cuerpos
cetnicos, que son productos intermedios que pueden provocar problemas: cetosis
La cetosis es una situacin metablica del organismo originada por un dficit en el
aporte de carbohidratos, lo que induce el catabolismo de las grasas a fin de obtener
energa, generando unos compuestos denominados cuerpos cetnicos..

Estructura los carbohidratos constituyen una porcin pequea del peso y

estructura del organismo, pero igualmente importante.
Reacciones metablicas implicadas
Los organismos fotoauttrofos, como las plantas, sintetizan la glucosa en la fotosntesis a
partir de compuestos inorgnicos como agua y dixido de carbono, segn la reaccin:
Los seres hetertrofos, como los animales, son incapaces de realizar este proceso y toman
la glucosa de otros seres vivos o la sintetizan a partir de otros compuestos orgnicos. Puede
obtenerse glucosa a partir de otros azcares, como fructosa o galactosa. Otra posibilidad es
la sntesis de glucosa a partir de molculas no glucdicas, proceso conocido como
gluconeognesis. Hay diversas molculas precursoras, como el lactato, el oxalacetato y el
glicerol.
Tambin existen ciertas bacterias anaerobias que utilizan la glucosa para generar dixido de
carbono y metano segn esta reaccin:

Importancia de la determinacin de glucosa en sangre.

la determinacin de glucosa en sangre (glucemia) es til para el diagnstico de numerosas
enfermedades metablicas, fundamentalmente de la diabetes mellitus. Tambin es necesaria
esta prueba, una vez diagnosticada la diabetes, para controlar la dosis de insulina que se
debe administrar para tratarla.
Mtodos utilizados para la determinacin cualitativa y cuantitativa de glucosa en
materiales biolgicos,
Mtodo cualitativo:
Tiras colorimtricas.
La glucosa puede ensayarse cualitativamente con el uso de tiras colorimtricas. Este test
usa glucosa oxidasa que cataliza la oxidacin de D-glucosa a cido glucnico con
formacin de H2O2. En presencia de loa enzima peroxidasa, el H2O2 generado oxida un
cromgeno (orto-dianicidina), produciendo un cambio de color, que indica la presencia de
glucosa. Este mtodo es especfico para la glucosa y la detecta cuando su concentracin
est sobre el rango normal.
Mtodos cuantitativos.
Mtodo qumico:
o-toluidina
La o-toluidina se condensa inicialmente con el grupo aldehdo de la glucosa para formar
una mezcla en equilibrio de la glucosilamina y la base de Schiff correspondiente. Las
reacciones que tienen lugar despus de la condensacin original producen una mezcla de
cromgenos verdes con una longitud de onda analtica a 630 nm.

 Mtodo enzimtico: Trinder 100 (Sigma).

El mtodo enzimtico se basa en la especificidad de la enzima glucosa oxidasa (GOD) por
la -D-glucosa. La enzima cataliza la oxidacin de la glucosa por oxgeno molecular dando
el D-gluconato y perxido de hidrgeno (H2O2, agua oxigenada) (Rxn. 3.1). Para detectar
y cuantificar esta oxidacin se ocupa una reaccin acoplada (Rxn. 3.2). En forma
cuantitativa el H2O2 es oxidado por un reactivo comercial (4-aminofenazona (4-AF) y 4hidroxibenzoato), reaccin catalizada por la enzima peroxidasa, para dar como producto un
compuesto coloreado rojo (quinonimina) que se cuantifica midiendo la absorbancia a 505
nm.

D glu cos a enzima FAD D gluconolactona enzima FADH 2

enzima FADH 2 O 2 enzima FAD H 2 O 2
D gluconolactona H 2 O D gluconato H
D glu cos a O 2 H 2 O

GOD
D gluconato H H 2 O 2

Rea
ccin 3.1

H 2 O 2 4 - AF 4 - hidroxibenzoato

peroxidasa

quinonimina (roja)
Reaccin 3.2

Valores normales de referencia en hombres, mujeres y nios.

Qu es la curva de tolerancia a la glucosa? que se puede diagnosticar con esta prueba
importancia que tiene.
Implicaciones metablicas relacionadas con concentraciones altas y baja de la
glicemia.
Hablar de esas alteraciones o enfermedades.
Diabetes Mellitus: Definicin, clasificacin, causa, diagnostico, sntomas, tratamiento,
consecuencias

MATERIALES Y MTODOS.
(Ver informacin en la Gua de la prctica #3)
RESULTADOS

Fig.1. Tubo tapa morada

Anticoagulante obtencin de plasma
Al separar se obtuvo lo siguiente

fig. 2. Tubo tapa roja

obtencin de suero

Fig. 3. Plasma sanguneo.

Fig.4. Suero sanguneo.

ANLISIS DE RESULTADOS
En el proceso de centrifugado se introdujeron los dos tubos con sangre en una
centrifugadora, que es un instrumento, que hace girar a gran velocidad los tubos que
contiene. Esto hace que la fuerza del giro (fuerza centrfuga) empuje a los componentes de
la sangre hacia el fondo, de forma que los ms pesados se depositarn en el fondo. As, la
parte ms pesada de la sangre (las clulas) quedar en el fondo y, sobre ella, se situar el
lquido, mucho ms ligero. El tubo tapa roja sin anticoagulante, al que fue transferida 2.5ml
de la muestra de sangre, se dej 5min en reposo, para que coagule, luego se centrifug
durante 5 minutos para separar las clulas del suero. El tubo tapa morada que contiene
anticoagulante se le aadi el resto de la muestra de sangre el cual se centrifug de igual
manera para obtener la separacin del plasma. Se pudo observar en la separacin de los
tubos, despus de centrifugar que el suero, es un lquido que mostro un color amarillento, es
idntico en apariencia y composicin a la del plasma, y se dice que contiene los mismos
niveles de minerales y agua. La diferencia del suero del plasma es un factor de coagulacin
llamado fibringeno, que carece en una muestra de suero. Por consiguiente se observ
tambin el plasma la cual es un lquido amarillo translcido.
La sangre humana est compuesta de aproximadamente el 55% de plasma, y el plasma se
compone de 90% de agua. El 10% restante contiene minerales, hormonas, electrolitos,
residuos y nutrientes para proporcionar energa para el cuerpo. Tambin, transporta los
gases esenciales en todo el cuerpo, incluyendo oxgeno, dixido de carbono, y nitrgeno.
AL analizar los resultados obtenidos durante la practica pudimos observar que ambos eran
similares en color del uno al otro y que a simple vista no se puede observar sus diferencias.

CONCLUSIONES
En esta prctica experimental se cumpli con los objetivos planteados, se logr extraer de
manera adecuada la sangre y separarla para determinar la diferencia entre el suero y
plasma. Se utiliz para ello la centrifugadora la cual es un instrumento que facilita la
separacin de sustancias, en este caso de la sangre. La separacin del suero del cogulo es
generalmente mucho ms sencilla, cuando se emplean recipientes de vidrio, o de
poliestireno especialmente tratados, puesto que el coagulo se retrae con suavidad de las
paredes del frasco o del tubo y eventualmente queda como una pequea protuberancia en la
base, entonces el suero se puede verter o aspirar fcilmente con pipeta y transferir a un tubo
para almacenamiento. Tambin se recomienda como en el caso del plasma, centrifugar
nuevamente el suero y obtenerlo libre de clulas que pueden interferir en las
determinaciones.

BIBLIOGRAFIA
1. Laboratorios Albeitar. (1992). Recuperado de http://www.albeitar.com/content.php?
section=3&element=14
2. Bioqumica Harper edicin 28. http://es.slideshare.net/carmenpalomino/bioqumicailustrada-harper