Professional Documents
Culture Documents
RESISTENCIA BACTERIANA Y
NORMAS CLSI 2010
Deteccin de Resistencia en
Bacterias Gram negativas
Mara Victoria Ovalle
Bacteriloga
Bombas de Eflujo
Resistencia Natural
Germen
E. coli
Klebsiella spp
Proteus mirabilis
Proteus vulgaris
Enterobacter spp
Serratia spp
R. Natural
-Amp, Ti
Col, Te,
Col, C1G,
Te,CAmp,
CXM
Amp, FOX, AMC,C1G
Amp, AMS, C,CXM,
C1G
R. Inusual
Col, Imi, Me
Col, Imi, Me
Imi, Me
Imi, Me
Col, Imi, Me
Imi, Me
lactamasas
Las -lactamasas son enzimas catalticas
que rompen el enlace amdico del anillo
betalactmico haciendo que el
antibitico pierda su capacidad para
unirse a las protenas de unin a la
penicilina y su accin bactericida
Clasificacin de lactamasas
Clase Molecular
Bush-Jacoby -Medeiros
(2009)
2a
2b
2be
2br
A (serina
penicilinasa)
B (metalo lactamasas
C (cefalosporinasas)
D (oxacilinasas)
No clasificadas
2ber
2c
2ce
2e
2f
3a
3b
1
1e
2d
2de
2df
4
Substrato
Penicilina
Penicilina y cefalosporinas de corto
espectro
Penicilina y cefalosporinas de espectro
corto y espectro extendido
Penicilina
Cefalosporinas de espectro extendido,
monobactam
Carbecilina
Carbecilina, Cefepime
Cefalosporinas de espectro extendido
Carbapenemes
Carbapenemes
Carbapenemes
Cefalosporinas
Cefalosporinas
Cloxacilina
Cefalosporinas de espectro extendido
Carbapenemes
Inhibido
por
AC TZ
Si
Inhibido
por
EDTA
No
Si
No
Si
No
No
No
No
Si
Si
Si
Variable
No
No
No
No
Variable
Variable
Variable
No
No
No
No
No
Si
Si
No
No
No
No
No
Karen Bush* and George A. Jacoby.Antimicrob agents and chemotherapy.2010, 54 (3); 969976
Criterios de Interpretacin
CLSI 2009
Concentracin
Difusin en disco
Inhibitoria Mnima
(mm)
g/mL
S
I
R
S
I
R
23 15-22 14
8 16-32 64
21 14-20 13
8 16-32 64
16
18 15-17 14
8
32
20 15-19 14
8 16-32 64
16
22 16-21 15
8
32
Criterios Interpretacin
Diluciones Concentracin Inhibitoria Mnima
g/mL
Vitek
MicroScan
Phoenix
1,4,16,32
2,8,16,32
4,8,16,32
1,4,8,16
0,5, 1,2
1,2,8,32
Concentracin
Inhibitoria Mnima
g/mL
Concentracin Inhibitoria
Mnima g/mL
CLSI 2009
CLSI 2010
Antimicrobiano
S
Cefotaxima
16-32
64
Ceftazidima
16
32
16
Laboratorio
Universidad
Nacional de Colombia
Laboratorio Universidad
Nacional
de Colombia
Criterios Interpretacin
Diluciones Concentracin Inhibitoria Mnima
g/mL
Vitek
MicroScan
Phoenix
1,4,16,32
2,8,16,32
4,8,16,32
1,2,8,32
1,4,8,16
0,5, 1,2
Concentracin
Inhibitoria Mnima
g/mL
Concentracin Inhibitoria
Mnima g/mL
CLSI 2009
CLSI 2010
Antimicrobiano
S
Cefotaxima
16-32
64
Ceftazidima
16
32
16
Laboratorio
Universidad
Nacional de Colombia
Laboratorio Universidad
Nacional
de Colombia
Criterios Interpretacin
Diluciones Concentracin Inhibitoria Mnima
g/mL
Vitek
MicroScan
Phoenix
1,4,16,32
2,8,16,32
4,8,16,32
1,2,8,32
1,4,8,16
0,5, 1,2
2,4,8,16,32
Concentracin
Inhibitoria Mnima
g/mL
Concentracin Inhibitoria
Mnima g/mL
CLSI 2009
CLSI 2010
Antimicrobiano
S
Cefotaxima
16-32
64
Ceftazidima
16
32
16
Laboratorio
Universidad
Nacional de Colombia
Laboratorio Universidad
Nacional
de Colombia
Resultados
25 mm
27 mm
22 mm
27 mm
Sospecha de BLEE
Test Confirmatorio
Ceftazidima 30g
Ceftazidima + AC 30/10g
Cefotaxima 30g
Cefotaxima + AC 30/10g
Resultado
5 mm BLEE
Resultados
2 g/mL
2 g/mL
2 g/mL
2 g/mL
8 g/mL
Sospecha de BLEE
Test Confirmatorio
Ceftazidima 0.25-64g/mL
Ceftazidima + AC 0.25/4-64/4g/mL
Cefotaxima 0.25-128g/mL
Cefotaxima + AC 0.25/4-128/4g/mL
Resultado
3 ms Dlnes
BLEE
Prueba E test
Laboratorio
Universidad
Nacional de Colombia
Laboratorio Universidad
Nacional
de Colombia
Test Tridimensional
Cultivo en caldo a partir
de 0.5 McFarland
Concentracin de clulas
E. coli ATCC 25922
Disco FOX
Hendidura en el agar
Coudron P, et al. J Clin Microbiol. 38:1791-1796.
CASO No.1
Paciente varn de 78 aos con litiasis biliar y colecistectoma, ha presentado varios
episodios de colangitis (Infeccin del conducto coldoco).
Acude a urgencias con fiebre de 3 das de evolucin. Se tom hemocultivo y lquido biliar
para cultivo, de los cuales se aisl E. coli.
El antibiograma por el laboratorio arrojo los siguientes resultados:
REPORTE DE LABORATORIO
Antibitico
Interpretacin
Cefazolina
R
Ceftazidima
R
Cefotaxima
I
Cefepime
S
Aztreonam
I
Piperacilina
I
Imipenem
S
Meropenem
S
CASO No.1
Respuesta No.1
El resultado del antibiograma sugiere una resistencia a
cefalosporinas de I y III generacin y resistencia a
monobactam, lo cual podra generar sospecha de la
presencia de betalactamasas de espectro extendido
AmpC.
Se realizara la prueba confirmatoria de BLEE
recomendada por CLSI.
CASO No.1
La prueba confirmatoria de BLEE dio el siguiente resultado:
CASO No.1
Respuesta No.2 y 3
RESPUESTA 2. Al realizar la prueba tamiz de BLEE y
observar que no amplia con acido clavulnico, podra
sugerir la presencia de AmpC.
RESPUESTA 3. Podra realizarse si el laboratorio lo desea la
prueba de disco AmpC, test tridimensional, disco con
acido bornico.
Probar la resistencia a cefoxitin, ya que es predictor de
AmpC.
E test
Tira con Imipenem e Imipenem/EDTA
Reduccin 3 diluciones en presencia de
EDTA es positivo para MBLs
Falsos positivos P.aeruginosa
y A. baumannii
Timothy R. Walsh,et al. J Clin Microb. 20025. 40(8): 2755-2759
de serina.
-lactamasas de espectro amplio: penicilinas y
cefalosporinas
-lactamasas con espectro de hidrlisis expandido:
cefalosporinas de espectro extendido y carbapenemes
No son inhibidas por el Ac. Clavulnico
Inhibidas por NaCl
Como reconozco?
BLEE
Neta R a cefalotina
Sensibilidad Imi, Mer
Amplia con acido clavulnico
Sensible a FOX
Afecta la CIM de penicilina, C1,2, 3 y 4G y Azt
Como reconozco?
AmpC
Neta R a cefalotina
Sensibilidad Imi, Mer
Resistencia sensibilidad disminuda a FOX
CIM de Aztreonam y C3G (nivel bajo de R)
C4G sensible
CLSI
Enterobacterias resistentes a una ms
cefalosporinas de III generacin (CIM elevada
reducida zona inhibicin a carbapenemes)
puede ser un aislamiento productor de
carbapenemasa, a pesar de estar dentro del
rango de susceptible
Prueba tamiz
Difusin en disco
(mm)
Microdilucin en
caldo
(g/mL)
--
2-4
Meropenem
16-21
2-4
Ertapenem
19-21
Antibitico
Imipenem
CASO No.2
Mujer de 45 aos, VIH-positiva, fue ingresada por absceso del tubo ovrico. Durante el
procedimiento quirrgico se tom muestra del lquido peritoneal y se aislaron 2 fenotipos
de Klebsiella pneumoniae. Al realizar las pruebas de susceptibilidad por difusin en disco
se obtuvo el siguiente reporte para los dos fenotipos:
REPORTE DE LABORATORIO
Aislamiento No 1
Antibitico
(mm)/Interpretacin
Ceftazidima
15(R )
Cefotaxima
19 (R )
Cefepime
12( R)
Ceftriaxona
16(R)
Imipenem
21 (S)
Meropenem
18 (S)
Ertapenem
19 (S)
REPORTE DE LABORATORIO
Aislamiento No.2
Antibitico
Interpretacin
Ceftazidima
15 (R )
Cefotaxima
19 (R )
Cefepime
12( R)
Ceftriaxona
16(R)
Imipenem
6 (R )
Meropenem
8 (R )
Ertapenem
10 (R )
1. Que le sugieren a usted los resultados del antibiograma para los dos reportes?
2. Se requiere una prueba confirmatoria para el reporte No.1? En caso de ser una respuesta positiva
cual prueba realizara para confirmarlo?
3. Se requiere una prueba confirmatoria para el reporte No.2? En caso de ser una respuesta positiva
cual prueba realizara para confirmarlo?
CASO No.2
Respuesta No.1, 2 y 3
RESPUESTA 1. El reporte 1, se observa sensibilidad a carbapenemes, de acuerdo a los
rangos sugeridos por CLSI como sospechosos de carbapenemasa, debemos sospechar de la
presencia de una carbapenemasa
El reporte 2, de acuerdo a los halos de los carbapenemes se observa una franca resistencia.
Las carbapenemasas son enzimas capaces de hidrolizar todos los antibiticos betalactmicos incluyendo carbapenemas como imipenem, meropenem y ertapenem.
RESPUESTA 2. Si se requiere una prueba confirmatoria ya que los halos sugieren una
sospecha de carbapenemasa. Se realizara la prueba de Hodge.
RESPUESTA 3. No se requiere una prueba confirmatoria porque CLSI recomienda No es
necesario probar un aislamiento para carbapenemes realizando el test de Hodge, cuando
todos los carbapenemes reportados por el laboratorio son intermedios o resistentes.
CASO No.2
El laboratorio realizo la prueba de Hodge para el aislamiento 1(C)
obtenindose el siguiente resultado
1.Control Negativo
2.Control Positivo
3.Aislamiento estudiado
CASO No.2
Respuesta No.4
RESPUESTA 4. El reporte 1 da una prueba de Hodge positiva. Se
reportan los carbapenemes sin la interpretacin con el siguiente
comentario:
Este aislamiento demuestra produccin de carbapenemasas. La
eficacia clnica de los carbapenemes no ha sido establecida para el
tratamiento de infecciones causadas por Enterobacteriaceae donde
las pruebas para carbapenemes (ertapenem 2g/mL, meropenem
e imipenem 4g/mL) fueron sensibles, pero demostraron
produccin de carbapenemasa in vivo
Para el reporte 2 se debe informar las CIM de los carbapenemes con
la interpretacin de criterios de acuerdo a CLSI.
Resistencia a Quinolonas
Mecanismo de accin
Ingreso a la clula: Porinas
Sitio de accin: DNA girasa (Gram neg)
Topoisomerasa IV (Gram pos)
Efecto: Cambio en el enrollamiento DNA
Mecanismo de Resistencia
Alteracin sitio blanco del AB
Reduccin permeabilidad
Eflujo
Stenotrophomonas maltophilia
Patgeno oportunista
Brotes Hospitalarios
Uso de AB de amplio espectro