Capitulo 1 2 Métodos de muestreo bacteriolégico y de cultivo urinario Cuando se sospecha de una infeccién del tracto urinario (ITU), se debe realizar un cultivo de orina, Pero: + Las muestras de orina deben recogerse en condiciones de «esterilidad» para no con- taminarlas, no deben afiadirse «conservantes» (excepto tal vez acido bérico), y la muestra se ha de mantener en refrigeracién si entre la recogida y el andlisis pasa un cierto perfodo de tiempo o se retrasa el envio. + Un tratamiento previo con antibisticos (por cualquier causa) que se exereten por via renal puede impedir el crecimiento de las bacterias (es decir, las bacterias no mueren, pero se inhibe su crecimiento en el medio de cultivo). Idealmente debe esperarse una semana tras la tiltima dosis del Farmaco y la recoleccién de la muestra de orina. (La presencia de antibisticos se detecta mediante Micur-BT (BCL}.) + Lamuestra no debe contaminarse introduciendo en ella tiras de pruebas, urinémetros, etc, antes de realizar el cultivo, e idealmente debe dividirse y reservar una porci6n para realizar el cultivo. Bacteriuria significativa Es importante establecer la concentracién de organismos bacterianos en la orina, ya que cada vez que el animal orina se arrastra parte de la poblacién bacteriana normal de Ja uretra; encontrar s6lo estos organismos, que estén en un bajo ntimero, conduce a conclusiones erréneas, porque no son los responsables de las infecciones del tracto urinario. 545546 Parte 3. Uriandlisis S6lo un ndéimero elevado de bacterias (bacteriuria significativa) es indicativo de ITU, y en el perro el ntimero significativo es de 10° o mAs bacterias por ml de orina. En el gato es de 10* o més/ml para muestras extrafdas por miccién y de 10° 0 mAs/ml para muestras conseguidas por cateterizacién (Lees y Rogers, 1986). Las pruebas que permiten estimar un nimero preciso estan marcadas con unasteris- co en la lista que sigue. Hay muchas pruebas en las que es dificil obtener un nimero preciso de bacterias. Nota Las pruebas siempre se deben realizar con orina no centrifugada; si se centrifuga se con- centran los organismos y dan una impresin falsa de su concentracién en la orina. Método de muestreo Las técnicas completas de siembra en placa (usando un minimo de dos cultivos con diferentes medios para permitir recuentos cuantitativos) son caras y por esta raz6n las pruebas de muestreo se realizan con frecuencia, porque son mas baratas y a menudo més répidas, Sin embargo, algunas de estas pruebas son mejores que otras, por ello, el listado que se proporciona a continuacién seré de ayuda para conocer Ia validez. de as pruebas usadas por los laboratorios comerciales y si se tiene intencién de realizar algunas de ellas en la clinica veterinaria, Pruebas indirectas Estas pruebas son poco fiables, por lo que no son recomendables. Examen de la proteinuria Es muy inespecifica. Recuento de leucocitos en orina no centrifugada Es también muy poco fiable. Examen de una tincién de Gram de una muestra de orina no centriftugada Necesita mucho tiempo (hace falta examinar 50 campos de inmersién). Pruebas quimicas para bacterias * Prueba del cloruro de trifeniltetrazolio (TTC). Requiere la incubacién de la orina con TTC 4-6 horas; si hay un mtimero significativo de bacterias, se produce un precipita- do rojo. + Prueba de la catalasa: la catalasa de las bacterias provoca la liberacién de oxfgeno a partir de peréxido de hidrégeno.12, Métodos de muestreo bacterioldgico y de cultivo urinario 547 + Prueba de la hipoglucosuria. Es muy sensible y detecta la pequefta cantidad (0,3 mmol/l) de glucosa presente en una orina normal. Es de esperar que esta glucosa no se observe en casos con bacteriuria significativa, porque habré sido utilizada por las bacterias, Sin embargo, la prueba no funciona con organismos como Pseudomonas 0 en los casos de diabetes mellitus. + Prueba del nitrito (prueba de Griess): se encuentra en muchas tiras quimicas comer- ciales y como parte del Microstix (véase pag. 547). Se basa en el principio de que un gran nlimero de bacterias convierte el nitrato (de la orina) en nitrito, lo que se detecta porque produce un color rosado. Las tres tiltimas pruebas no estén influidas por la contaminacién durante la recogida de Ta orina, que la muestra sea examinada antes de las 3 horas tras la recogida) aunque es importante que la orina haya estado suficientemente tiempo en la vejiga para que el metabolismo bacteriano haya producido un cambio que se pueda detectar. Se observa menos de un 50% de ITU con estas pruebas. Métodos de cultivo directo semicuantitativo usando menos orina y menos medios de cultivo Cultivo de un asa esténdar de orina sin centrifugar Es dificil de diferenciar la contaminacién de una ITU, “Medio de cultivo de transporte «dlp-inoculum», Se introduce un «portaobjetos» de pléstico, cubierto previamente en una o ambas caras con medio de cultivo, en la orina recogida en un recipiente Universal ¢ incubado. Originariamente este método estaba destinado a muestras que debfan ser enviadas, pues utilizdndolo se evita la répida multiplicaci6n de las bacterias contaminantes; ademés, permite la valoracisn de la bacteriuria significativa y la identificacién de los organismos. Pruebas con tiras de cultivo “Tira de papel de filtro Una tira que tiene un extremo doblado para suministrar un érea estandar se introduce en Ia orina y el extremo contacta con la superficie de una placa de cultivo. El area requerida es tan pequefia que se pueden analizar varias muestras de orina en la misma placa de cultivo (duplicados). Esta placa se incuba y se cuenta el ntimero de colonias resultante, Si hay més de un néimero predeterminado de colonias por drea, es evidente que existe una bacteriuria significativa. “Microstix (Ames) Al igual que la banda de nitrito, que es poco fiable pero se usa para obtener resultados inmediatos, cada tira tiene dos dreas de cultivo: una para que crezca todo tipo de bacte- rias y otra en Ia que pueden crecer s6lo los organismos Gram-negativos. Después de sumergir la tira en la orina, se coloca en una bolsa de polietileno y se incuba 12-18548 Parte 3. Uriandlisis horas. El niimero de colonias (rojas) en cada érea (estimadas a partir de una tabla) indica el nimero (y el tipo) de bacterias que hay presentes. Pseudomonas spp. pueden dar lugar a colores de fondo poco comunes, gris o verde. La presencia de una hematuria marcada puede interferir con el recuento de colonias.. Resultado de las pruebas En el 90% de los casos en los que existe una bacteriuria significativa s6lo se afsla un organismo, pero el porcentaje de infecciones mixtas crece hasta el 25% en los casos en que hay célculos urinarios. En la mayorfa de las infecciones, en un primer momento el organismo detectado es Escherichia coli, los otros (que provienen del intestino o de la piel) son Proteus spp., Klebsiella, Aerobacter, Staphylococcus (aureus, intermedius y epidermidis), Streptococcus (faecalis y otros) y Pseudomonas aeruginosa. Sensibilidad de la prueba Cuando se detecta una bacteriuria significativa hay que determinar 1a sensi los organismos a los antibisticos. A menudo en las pruebas comerciales se analizan fairmacos que son inadecuados (por ejemplo, que no se pueden administrar via oral y/o son t6xicos, como los farmacos del grupo de los aminoglicésidos, incluyendo estreptomicina y neomicina, 0 que no logran concentraciones efectivas en la orina, como el cloranfenicol). En general, los mejores farmacos para el tratamiento son la ampicilina, la amoxicilina, la amoxicilina con Acido clavuldmico, la cefalexina y el trimetoprim potenciado con sulfonamidas. A menudo hay bacterias sensibles a la nitrofurantoina (aunque este fér- ‘maco produce vémitos), al écido nalidixico y a la cinoxacina (éstas también causan vémitos y posiblemente signos nerviosos). La gentamicina, que se administra por in- yecci6n, se debe usar para infecciones resistentes y las tetraciclinas pueden ser ttiles, ‘aunque son bacteriostaticas y muchos organismos son resistentes a ellas. La enrofloxacina y la enoxacina (derivados de las quinolonas) actian sobre un amplio espectro de ‘microorganismos en la orina. Las Pseudomonas se deben tratar con farmacos especiales: polimixinas, penicilinas antipseudomonas, gentamicina o tobramicina.