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1. OBJETIVOS
2. FUNDAMENTO TEORICO
Cristal violeta
Los colorantes del grupo trifenilmetano presentan una marcada accin
bacteriosttica selectiva sobre las bacterias Gram positivas, en diluciones
que aparentemente no afectan a las Gram negativas. Esta propiedad se
aprovecha mediante la incorporacin de alguno de esos colorantes en
medios de cultivo con el fin de facilitar el aislamiento de bacterias Gram
negativas.
Entre los colorantes usados con estos propsitos estn: cristal violeta,
fucsina bsica, verde brillante y verde malaquita.
Las condiciones de salud en una nacin estn determinadas, en gran
parte, por la capacidad de sus habitantes para controlar eficazmente los
problemas microbianos. La costumbre diaria de purificar el agua,
pasteurizar la leche o la conservacin de alimentos, son mtodos para
controlar las poblaciones microbianas. Los microorganismos son tambin
capaces de destruir materiales valiosos como madera y fibras textiles,
causando prdidas que necesitan evitarse con medidas eficaces.
La tincin de Gram es una tcnica diferencial comnmente empleada en el
diagnostico microbiano, fue descubierta por Hans Christian Gram en 1884.
La mayor parte de las muestras sometidas a examen cuando se sospecha
infeccin bacteriana deben ser extendidas en frotis sobre laminillas de
vidrio, teidas examinadas en el microscopio.
Figura1
En la figura 1 se observa que las Gram(+) por tener varias capas
superpuestas en paralelo de peptidoglucano se tien violeta y las Gram()
por tener una sola capa de peptidoglucano y por su capa externa se tie
rojizo.
3. METODOLOGIA
Materiales
Equipo
1. Pipetas
2. Tubos de prueba
3. Picetas con agua
destilada
4. Vagueta
5. Algodn
6. Canastilla
7. Gradilla
8. Frascos de vidrio
9. Placas Petri
Foto1
Agar nutritivo:
Agar
:
15gr
Peptona:
5gr
Extracto de carne: 3gr
Preparacin del agar nutritivo
23 ------ 1000ml
X ------- 300ml
- - - - - - - X = 6.9gr
1.
2.
3.
4.
Balanza
Mechero bunsen
Gradilla y trpode
Autoclave
4 tubos con agar nutritivo estril, conteniendo 15ml cada tubo; para cada
grupo.
3 tubos con 9 ml de agua destilada.
Solucin cristal violeta de 1:1000
3 pipetas de 1ml para repartir el cristal violeta luego de la dilucin.
4 placas estril para cada grupo
1 inoculador para cada grupo
Colonias A y B para la muestra de bacterias.
Procedimiento
1. RESULTADOS
Grupo 1
Grupo 2
Grupo 3
Grupo 4
Grupo 5
1:10000
1:100000
1:1000000 +
Sin
colorante
Dilucin
Grupo
N1
Colonia A
Bacilos
G(-)
Bacilos
G(-)
Bacilos
G(-)
Estreptobacilo
G(-)
Bacilos
G(-)
N2
N3
N4
N5
Colonia B
Bacilos
G(-)
Estreptobacilo
G(-)
Bacilos
G(-)
Bacilos
G(+)
Estreptobacilo
G(-)
Crecimiento
Colorante
Concentracin
Escherichia
Coli
Bacillus
Subtilis
1/100000
1/1000000
Sin colorante
1/10000
Cristal
Violeta
Control
2. DISCUCIONES:
Los resultados de la coloracin Gram no fueron los esperados,
esto debido a muchos factores, por no hacer uso adecuado de
los materiales durante el experimento.
Notamos que en los 5 grupos dio +, esto quiere decir que hubo
crecimiento en los cinco grupos.
Notamos que la mayora de colonias fueron bacilos; esto es
porque la cloracin Gram (-) est relacionada con este, por eso
nos proporciona estos resultados.
3. CONCLUSIONES
5. BIBLIOGRAFIA
INFORME
http://www.forp.usp.br/restauradora/temas_endo/temas_cast/prin_bas_tr
at_endod.html
http://www.monografias.com/trabajos15/fenol/fenol.shtml
http://www.geocities.com/lorigardeweg/page11.html
CUESTIONARIO
http://coli.usal.es/Web/educativo/micro2/tema08.html#anchor136196
http://coli.usal.es/web/educativo/m_especial/15aprincipal.htm
PELCZAR. Microbiologa. Cuarta edicin (segunda edicin en espaol)
ANEXOS
CUESTIONARIO
1. Qu es un agente bacteriosttico y que quiere decir una accin
bacteriosttica selectiva? .Indique algunas aplicaciones
prcticas de este fenmeno.
Se observa cuando se inhibe la proliferacin pero no tiene lugar la muerte
celular.
Un agente bacteriosttico:
Inhibidores
Bacterias
Bactericidas
Bacterioestticos
Hongos
Fungicida
Fungistaticos
Virus
Virucida
Virustaticos
El NaOH se utiliza en la industria del vino para limpiar las cubas de madera.
El ozono es utilizado desde antes para tratamiento de agua, ahora se ha
extendido su utilizacin y se aplica para tratar ambientes e incluso podemos
tratar directamente sobre el organismo con fines teraputicos (concentraciones
de 0.01 ppm a menos).
Los antibiticos son usados para preservar los alimentos, as tenemos las
tetraciclinas.
Agentes bacteriostticos se utilizan en la industria textil como proteccin de
materiales. En la industria del maquillaje para las cremas, lociones para
despus de afeitar, en perfumes.
Sustancia o Agente capaz de actuar sobre los microorganismos, ya sea
inhibiendo su crecimiento o causando su muerte.
RAZONES PARA CONTROLAR MICROORGANISMOS
Benficos que generan el control d microrganismos por estos agentes:
1. OBJETIVOS
Demostrar la accin oleodinmica de algunos metales.
Denotar las diferencias de cada grupo para ver las diferencias y
similitudes y as poder saber en qu se equivoc cada grupo.
2. FUNDAMENTO TEORICO
Accin oligodinamica de los metales pesados.
Figura1
Aunque pueda parecer un descubrimiento tecnolgico de lo ms innovador, lo
cierto es que la plata se ha venido usando con fines protectores contra las
infecciones desde
hace miles de aos. Las civilizaciones ms
antiguas como los egipcios o los fenicios ya
construan las cisternas de almacenamiento de
agua
con plata para reducir las enfermedades
causadas
por el consumo de aguas contaminadas o
para
mantenerla en buenas condiciones durante
sus
largas
travesas en barco. Los emperadores chinos
utilizaban cubiertos de plata, igual que ms tarde lo hicieron las familias
acomodadas europeas, como medida preventiva de las plagas. En el ao 1000
el Vaticano decret el uso de clices de plata para la comunin con el propsito
de reducir las frecuentes indisposiciones entre sus sacerdotes y feligreses.
Las referencias a la plata como protectora contra las infecciones son continuas
a lo largo de la historia, aunque no fue hasta 1893 cuando Karl Wilhelm von
Nageli, botnico suizo, hizo pblica la primera investigacin demostrando las
caractersticas antimicrobianas de la plata. Es el caso de la introduccin de
monedas de plata en los tanques de agua o leche para evitar su deterioro, as
como su temprana utilizacin en la medicina: limaduras de plata para curar
heridas, ungentos antibiticos y para quemaduras, gotitas en los ojos de los
recin nacidos, amalgama dental, incluso la NASA utiliz iones de plata para
proteger el agua durante los viajes espaciales.
3. METODOLOGIA
Materiales
Equipo
10. Pipetas
11. Tubos de prueba
12. Picetas con agua
destilada
13. Vagueta
14. Algodn
15. Canastilla
16. Gradilla
17. Frascos de vidrio
18. Placas Petri
5.
6.
7.
8.
Balanza
Mechero bunsen
Gradilla y trpode
Autoclave
- - - - - - - X = 6.9gr
Sacamos la moneda con una pinza. Lavar bien la moneda con agua
destilada para quitarle todo el cido.
Tomar un tubo con agar nutritivo fundido del bao Mara mantenido a
45C.
Rotar el tubo entre las palmas de las manos para obtener una
distribucin uniforme de los organismos.
3. RESULTADOS
Zona de estimulacin
Zona oligodinamica
Zona
desarrollo
Imagen1
de
4. DISCUCIONES
En las fotos se pude observar qu no presenciamos crecimiento cerca de
la moneda, pero si alrededor de la moneada, con esto podemos concluir
que mientras ms lejos estemos de la moneda se notara ms crecimiento
de colonias.
5. CONCLUSIONES
Se observa la accin oligodinmica de los metales pesados, ya que se nota
que el crecimiento de microorganismos en un cultivo, es afectado por la
presencia de metales pesados. Por lo que se logra diferenciar tres zonas:
la zona oligodinmica, zona de estimulacin y de crecimiento normal.
Se pudo notar un crecimiento de bacterias pero alejados de la moneda de
diez cntimos en las zonas de estimulacin y de crecimiento normal
Se diferencian tres zonas: la zona oligodinmica (que es una zona
despejada donde no aparecen colonias), zona de estimulacin (zona
angosta donde se presenta un crecimiento abundante) y la zona de
crecimiento normal (se presenta en todo el resto del agar).debido a eso las
cantidades diminutas de iones metlicos estimulan el crecimiento mientras
que concentraciones mayores producen inhibicin.
6. RECOMENDACIONES
Tener cuidado cuando desinfectamos la moneda, ya que la placa esta al
aire libre y se pude contaminar por agentes externos.
desinfectar nuestras manos, en este caso no estaban desinfectadas y
as agarramos la moneda de diez cntimos.
7. BIBLIOGRAFIA
Informe
MICROBIOLOGIA. Autor: Michael J Pelczar. 2da Edicin 1982.
http://www.elergonomista.com/microbiologia/esteri.htm
Cuestionario
http://bc.inter.edu/facultad/yserrano/factoresfisicosqui.htm
http://microral.wikispaces.com/7.+Control+de+los+microorganismos
8. ANEXOS
CUESTIONARIO
1. Explicar a qu se debe la accin oligodinamica y que aplicacin
prctica tiene.
Ciertos metales pesados o sus combinaciones qumicas ejercen efecto
antimicrobiano a concentraciones muy bajas (1 parte en 20 millones), esta
accin recibe el nombre de accin oligodinmica; los ms activos son el
mercurio, la plata y el cobre. Los mercuriales poseen propiedad antisptica y
desinfectante. Su actividad antibacteriana se reduce fuertemente en presencia